Name: pre-chiasmatic, single injection of autologous blood to induce experimental subarachnoid hemorrhage in a rat model
Uploaded: 2021-06-18T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Pre-Chiasmatic, Single Injection of Autologous Blood to Induce Experimental Subarachnoid Hemorrhage in a Rat Model at JoVE.com

Arbetet stöddes av Lundbeck Foundation och Lundbeck Grant of Excellence (nr. R59-A5404). Finansiärer hade ingen roll i någon del av manuskriptet.

Detta förfarande görs i enlighet med Europeiska unionens direktiv 2010/63 / EU om skydd av djur som används för vetenskapliga ändamål och godkänt av den danska djurförsöksinspektionen (licensnummer 2016-15-0201-00940). Kirurgi utförs med aseptisk teknik i största möjliga utsträckning, inklusive sterila instrument, handskar, katetrar och suturer. Studien använde manliga och kvinnliga Sprague-Dawley-råttor som väger 230-350 g, grupp inrymda i 12-timmars ljus / mörk cykel, med konstant temperatur på 22 ° ...

<ol>
	<li>van Gijn, J., Kerr, R. S., Rinkel, G. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Subarachnoid+haemorrhage.">Subarachnoid haemorrhage.</a> Lancet. 369 (9558), 306-318 (2007).</li><li>de Rooij, N. K., Linn, F. H. H., vander Plas, J. A., Algra, A., Rinkel, G. J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Incidence+of+subarachnoid+haemorrhage:+a+systematic+review+with+emphasis+on+region,+age,+gender+and+time+trends.">Incidence of subarachnoid haemorrhage: a systematic review with emphasis on region, age, gender and time trends.</a> Journal of Neurology, Neurosurgery, and Psychiatry. 78 (12), 1365-1372 (2007).</li><li>Feigin, V. L., Lawes, C. M., Bennett, D. A., Barker-Collo, S. L., Parag, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Worldwide+stroke+incidence+and+early+case+fatality+reported+in+56+population-based+studies:+a+systematic+review.">Worldwide stroke incidence and early case fatality reported in 56 population-based studies: a systematic review.</a> The Lancet, Neurology. 8 (4), 355-369 (2009).</li><li>Maher, M., Schweizer, T. A., Macdonald, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Treatment+of+spontaneous+subarachnoid+hemorrhage:+guidelines+and+gaps.">Treatment of spontaneous subarachnoid hemorrhage: guidelines and gaps.</a> Stroke. 51 (4), 1326-1332 (2020).</li><li>Pickard, J. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+oral+nimodipine+on+cerebral+infarction+and+outcome+after+subarachnoid+haemorrhage:+British+aneurysm+nimodipine+trial.">Effect of oral nimodipine on cerebral infarction and outcome after subarachnoid haemorrhage: British aneurysm nimodipine trial.</a> British Medical Journal (Clinical Research ed.). 298 (6674), 636-642 (1989).</li><li>Daou, B. J., Koduri, S., Thompson, B. G., Chaudhary, N., Pandey, A. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Clinical+and+experimental+aspects+of+aneurysmal+subarachnoid+hemorrhage.">Clinical and experimental aspects of aneurysmal subarachnoid hemorrhage.</a> CNS Neuroscience and Therapeutics. 25 (10), 1096-1112 (2019).</li><li>Fujii, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Early+brain+injury,+an+evolving+frontier+in+subarachnoid+hemorrhage+research.">Early brain injury, an evolving frontier in subarachnoid hemorrhage research.</a> Translational Stroke Research. 4 (4), 432-446 (2013).</li><li>Roos, Y. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Complications+and+outcome+in+patients+with+aneurysmal+subarachnoid+haemorrhage:+A+prospective+hospital+based+cohort+study+in+the+Netherlands.">Complications and outcome in patients with aneurysmal subarachnoid haemorrhage: A prospective hospital based cohort study in the Netherlands.</a> Journal of Neurology, Neurosurgery, and Psychiatry. 68 (3), 337-341 (2000).</li><li>Vergouwen, M. D. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Definition+of+delayed+cerebral+ischemia+after+aneurysmal+subarachnoid+hemorrhage+as+an+outcome+event+in+clinical+trials+and+observational+studies:+proposal+of+a+multidisciplinary+research+group.">Definition of delayed cerebral ischemia after aneurysmal subarachnoid hemorrhage as an outcome event in clinical trials and observational studies: proposal of a multidisciplinary research group.</a> Stroke. 41 (10), 2391-2395 (2010).</li><li>Brown, R. J., Kumar, A., Dhar, R., Sampson, T. R., Diringer, M. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+relationship+between+delayed+infarcts+and+angiographic+vasospasm+after+aneurysmal+subarachnoid+hemorrhage.">The relationship between delayed infarcts and angiographic vasospasm after aneurysmal subarachnoid hemorrhage.</a> Neurosurgery. 72 (5), 702-707 (2013).</li><li>Dhar, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Relationship+between+angiographic+vasospasm+and+regional+hypoperfusion+in+aneurysmal+subarachnoid+hemorrhage.">Relationship between angiographic vasospasm and regional hypoperfusion in aneurysmal subarachnoid hemorrhage.</a> Stroke. 43 (7), 1788-1794 (2012).</li><li>Macdonald, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Delayed+neurological+deterioration+after+subarachnoid+haemorrhage.">Delayed neurological deterioration after subarachnoid haemorrhage.</a> Nature Reviews. Neurology. 10 (1), 44-58 (2014).</li><li>Marbacher, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Systematic+review+of+in+vivo+animal+models+of+subarachnoid+hemorrhage:+species,+standard+parameters,+and+outcomes.">Systematic review of in vivo animal models of subarachnoid hemorrhage: species, standard parameters, and outcomes.</a> Translational Stroke Research. 10 (3), 250-258 (2019).</li><li>Prunell, G. F., Mathiesen, T., Svendgaard, N. -. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+experimental+model+in+rats+for+study+of+the+pathophysiology+of+subarachnoid+hemorrhage.">A new experimental model in rats for study of the pathophysiology of subarachnoid hemorrhage.</a> Neuroreport. 13 (18), 2553-2556 (2002).</li><li>Prunell, G. F., Mathiesen, T., Diemer, N. H., Svendgaard, N. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+subarachnoid+hemorrhage:+subarachnoid+blood+volume,+mortality+rate,+neuronal+death,+cerebral+blood+flow,+and+perfusion+pressure+in+three+different+rat+models.">Experimental subarachnoid hemorrhage: subarachnoid blood volume, mortality rate, neuronal death, cerebral blood flow, and perfusion pressure in three different rat models.</a> Neurosurgery. 52 (1), 165-176 (2003).</li><li>Prunell, G. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+Subarachnoid+Hemorrhage:+Cerebral+blood+flow+and+brain+metabolism+during+the+acute+phase+in+three+different+models+in+the+rat.">Experimental Subarachnoid Hemorrhage: Cerebral blood flow and brain metabolism during the acute phase in three different models in the rat.</a> Neurosurgery. 54 (2), 426-437 (2004).</li><li>Velthuis, B. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Subarachnoid+hemorrhage:+Aneurysm+detection+and+preoperative+evaluation+with+CT+angiography.">Subarachnoid hemorrhage: Aneurysm detection and preoperative evaluation with CT angiography.</a> Radiology. 208 (2), 423-430 (1998).</li><li>Leclerc, J. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+comparison+of+pathophysiology+in+humans+and+rodent+models+of+subarachnoid+hemorrhage.">A comparison of pathophysiology in humans and rodent models of subarachnoid hemorrhage.</a> Frontiers in Molecular Neuroscience. 11, 71 (2018).</li><li>Prunell, G. F., Svendgaard, N. A., Alkass, K., Mathiesen, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inflammation+in+the+brain+after+experimental+subarachnoid+hemorrhage.">Inflammation in the brain after experimental subarachnoid hemorrhage.</a> Neurosurgery. 56 (5), 1082-1091 (2005).</li><li>Prunell, G. F., Svendgaard, N. A., Alkass, K., Mathiesen, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Delayed+cell+death+related+to+acute+cerebral+blood+flow+changes+following+subarachnoid+hemorrhage+in+the+rat+brain.">Delayed cell death related to acute cerebral blood flow changes following subarachnoid hemorrhage in the rat brain.</a> Journal of Neurosurgery. 102 (6), 1046-1054 (2005).</li><li>Spray, S., Haanes, K. A., Edvinsson, L., Johansson, S. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Subacute+phase+of+subarachnoid+haemorrhage+in+female+rats:+increased+intracranial+pressure,+vascular+changes+and+impaired+sensorimotor+function.">Subacute phase of subarachnoid haemorrhage in female rats: increased intracranial pressure, vascular changes and impaired sensorimotor function.</a> Microvascular Research. 135, 104127 (2020).</li><li>Ansar, S., Vikman, P., Nielsen, M., Edvinsson, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cerebrovascular+ETB,+5-HT1B,+and+AT1+receptor+upregulation+correlates+with+reduction+in+regional+CBF+after+subarachnoid+hemorrhage.">Cerebrovascular ETB, 5-HT1B, and AT1 receptor upregulation correlates with reduction in regional CBF after subarachnoid hemorrhage.</a> American Journal of Physiology - Heart and Circulatory Physiology. 293 (6), 3750-3758 (2007).</li><li>Hansen-Schwartz, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Subarachnoid+hemorrhage+enhances+endothelin+receptor+expression+and+function+in+rat+cerebral+arteries.">Subarachnoid hemorrhage enhances endothelin receptor expression and function in rat cerebral arteries.</a> Neurosurgery. 52 (5), 1188-1194 (2003).</li><li>Hayman, E. G., Wessell, A., Gerzanich, V., Sheth, K. N., Simard, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanisms+of+global+cerebral+edema+formation+in+aneurysmal+subarachnoid+hemorrhage.">Mechanisms of global cerebral edema formation in aneurysmal subarachnoid hemorrhage.</a> Neurocritical Care. 26 (2), 301-310 (2017).</li><li>Miyata, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vasa+vasorum+formation+is+associated+with+rupture+of+intracranial+aneurysms.">Vasa vasorum formation is associated with rupture of intracranial aneurysms.</a> Journal of Neurosurgery. , 1-11 (2019).</li><li>Tada, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Roles+of+hypertension+in+the+rupture+of+intracranial+aneurysms.">Roles of hypertension in the rupture of intracranial aneurysms.</a> Stroke. 45 (2), 579-586 (2014).</li><li>Nuki, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Elastase-induced+intracranial+aneurysms+in+hypertensive+mice.">Elastase-induced intracranial aneurysms in hypertensive mice.</a> Hypertension. 54 (6), 1337-1344 (1979).</li><li>Marbacher, S., Wanderer, S., Strange, F., Gr&#252;ter, B. E., Fandino, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Saccular+aneurysm+models+featuring+growth+and+rupture:+A+systematic+review.">Saccular aneurysm models featuring growth and rupture: A systematic review.</a> Brain Sciences. 10 (2), 101 (2020).</li><li>Altay, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isoflurane+on+brain+inflammation.">Isoflurane on brain inflammation.</a> Neurobiology of Disease. 62, 365-371 (2014).</li><li>Hockel, K., Trabold, R., Sch&#246;ller, K., T&#246;r&#246;k, E., Plesnila, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Impact+of+anesthesia+on+pathophysiology+and+mortality+following+subarachnoid+hemorrhage+in+rats.">Impact of anesthesia on pathophysiology and mortality following subarachnoid hemorrhage in rats.</a> Experimental and Translational Stroke Medicine. 4 (1), 5 (2012).</li><li>Kamp, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Systematic+and+meta-analysis+of+mortality+in+experimental+mouse+models+analyzing+delayed+cerebral+ischemia+after+subarachnoid+hemorrhage.">A Systematic and meta-analysis of mortality in experimental mouse models analyzing delayed cerebral ischemia after subarachnoid hemorrhage.</a> Translational Stroke Research. 8 (3), 206-219 (2017).</li><li>Povlsen, G. K., Johansson, S. E., Larsen, C. C., Samraj, A. K., Edvinsson, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Early+events+triggering+delayed+vasoconstrictor+receptor+upregulation+and+cerebral+ischemia+after+subarachnoid+hemorrhage.">Early events triggering delayed vasoconstrictor receptor upregulation and cerebral ischemia after subarachnoid hemorrhage.</a> BMC Neuroscience. 14, 34 (2013).</li></ol>

Den pre-chiasmatiska enda injektionsmodellen av SAH efterliknar flera viktiga delar av human SAH, inklusive spiken i ICP, minskning av CBF, övergående global ischemi, uppreglering av neuroinflammatoriska markörer och CVS 14,15,16,18,19,20. ICP-sonden användes också som en port för intratekal administrering (<strong clas...

Icke-traumatisk subaraknoidalblödning (SAH) är en form av stroke, som representerar cirka 5% av alla fall. Den vanligaste orsaken till icke-traumatisk SAH är den plötsliga bristningen av en aneurysm (aSAH), som står för 85% av SAH. Andra orsaker inkluderar bristning av en arterio-venös missbildning, koagulopatier och bristning av vener i perimesencefalisk blödning1. Incidensen är 9 per 100 000 årsverken med dödlighet omkring en av tre och ytterligare en tredjedel som kräver stöd i det dagliga livet efter SAH 2,3.
Efter initial stabilisering och diagnosbekräftelse beror behandlingen på blödningens svårighetsgrad. De svårast drabbade patienterna kommer att ha en extraventrikulär dränering insatt i ventriklerna för att minska det intracerebrala trycket (ICP) och läggas in på neurointensivvårdsavdelningen, där de övervakas noggrant. Patienterna kommer att genomgå en angiografi för att identifiera den (troliga) aneurysmen och därefter få aneurysmen lindad eller klippt för att förhindra återblödning4. Trots många studier av farmakologiska terapier har endast nimodipin, en kalciumkanalantagonist, visat sig förbättra resultaten5. Flera kliniska prövningar pågår för närvarande. Se recensionen av Daou och kollegor för en omfattande lista6.
Bristningen av en aneurysm har beskrivits som den plötsliga uppkomsten av den värsta huvudvärk som någonsin upplevts eller en åskklapphuvudvärk. Brottet resulterar i en brant ökning av ICP följt av en minskning av cerebralt blodflöde (CBF). Denna minskning resulterar i global ischemi i hjärnan, vilket kan leda till förlust av medvetande. Denna mer mekanistiska väg, tillsammans med den initierade nedbrytningen av de extravaserade elementen i blod, ger upphov till cytokinfrisättning och aktivering av det medfödda immunsystemet vilket resulterar i steril neuroinflammation. Vidare observeras ofta nedbrytning av blod-hjärnbarriären, vilket resulterar i hjärnödem och störningar i jonhomeostasen. Alla dessa förändringar och mer, myntade tidig hjärnskada (EBI), inträffar inom de första dagarna och resulterar i neuronal förlust och apoptos7.
Cirka 1/3 av patienterna som lider av aSAH kommer att utveckla fördröjd cerebral ischemi (DCI) mellan dag 4-148. DCI definieras som antingen debuten av en fokusal, neurologisk funktionsnedsättning eller en droppe på minst två poäng på Glasgows komaskala som varar i minst 1 timme, när andra orsaker, inklusive anfall och återblödning är uteslutna. DCI är förknippat med en ökad risk för död och minskat funktionellt utfall efter aSAH9. Cerebral vasospasm (CVS), förträngningen av hjärnartärerna, har varit känd för att vara associerad med DCI i årtionden och ansågs tidigare vara den enda orsaken till DCI. Det har sedan dess visats att CVS kan uppstå utan utveckling av DCI och fler faktorer, inklusive mikrovaskulär trombos och förträngning, kortikal spridningsdepression och ett inflammatoriskt svar på EBI har sedan identifierats10,11,12.
På grund av EBI:s och DCI:s stora inflytande på sjukdomsförloppet och utfallet hos de patienter som drabbats, måste djurmodeller efterlikna dessa i största möjliga utsträckning, samtidigt som de är reproducerbara. Forskare har använt ett brett spektrum av olika modeller i en mängd olika djur från möss till icke-mänskliga primater för att försöka simulera aSAH. Sprague-Dawley och Wistar vildtypsråttor är för närvarande de vanligaste laboratoriedjuren, och de vanligaste modellerna är den endovaskulära perforeringsmodellen, cisterna-magna dubbelinjektionsmodellen och slutligen den pre-chiasmatiska enkelinjektionsmodellen, som kommer att beskrivas i denna artikel13.
Den pre-chiasmatiska modellen med enkel injektion utvecklades ursprungligen av Prunell och kollegor för att motverka några av bristerna i de andra experimentella modellerna14. Operationen, när den behärskas, är mycket reproducerbar och minimerar variationen mellan djur. Modellen efterliknar SAH hos människor på flera punkter, inklusive den plötsliga ökningen av ICP efter injektion av blod, vilket resulterar i övergående global ischemi på grund av en minskning av CBF15,16. Det påverkar den främre cirkulationen, vilket är där de flesta aSAH hos människor förekommer17. Dödligheten varierar från 10% -33% beroende på studien och mängden blod injicerat14,18. Fördröjd celldöd och neuroinflammation kan detekteras på dag 2 och 7, vilket ger variabler för att studera konsekvenserna av EBI och DCI19,20.
Studien presenterar en uppdaterad beskrivning av den pre-chiasmatiska single injection-modellen i råtta tillsammans med en beskrivning av hur ICP-proben kan användas som port för intratekal administrering av farmaci.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>16 G peripheral vein catheter</td>
			<td>BD Venflon</td>
			<td>393229</td>
			<td>Needle shortened, distal 1 cm curved. Wings removed</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anesthesia bell/ chamber</td>
			<td>Unknown</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Blood gas analyzer</td>
			<td>Radiometer</td>
			<td>ABL80</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Blood pressure (BP) monitor</td>
			<td>Adinstruments</td>
			<td>ML117</td>
			<td>Connects to Powerlab</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Curved forceps, 12 cm x 3</td>
			<td>F.S.T</td>
			<td>11001-12</td>
			<td>For anesthesia</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cylindrical pillow, 28 cm x 4 cm</td>
			<td>Homemade</td>
			<td></td>
			<td>Made from surgical towels</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Data acquisition hardware</td>
			<td>Adinstruments</td>
			<td>ML870 Powerlab</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Data acquistion software</td>
			<td>Adinstruments</td>
			<td>LabChart 6.0</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Drill</td>
			<td>KMD</td>
			<td>1189</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Drill controller</td>
			<td>Silfradent</td>
			<td>300 IN</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Flexible light</td>
			<td>Schott</td>
			<td>KL200</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heating pad</td>
			<td>Minco</td>
			<td>1135</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hypodermic needle, 20 G</td>
			<td>KD Medical</td>
			<td>301300</td>
			<td>Connects to stereotaxic frame</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ICP monitor</td>
			<td>Adinstruments</td>
			<td>ML117</td>
			<td>Connects to Powerlab</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane vaporizer</td>
			<td>Ohmeda</td>
			<td>TEC3</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Laptop</td>
			<td>Lenovo</td>
			<td>T410</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Laser doppler monitor</td>
			<td>Adinstruments</td>
			<td>ML191</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Laser doppler probe</td>
			<td>Oxford Optronics</td>
			<td>MSF100XP</td>
			<td>Connects to laser doppler monitor</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needle holder, 13 cm</td>
			<td>F.S.T</td>
			<td>12001-13</td>
			<td>For anesthesia</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Precision syringe, 0.025 mL</td>
			<td>Hamilton</td>
			<td>547407</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stereotaxic frame</td>
			<td>Kopf Instruments</td>
			<td>M900</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical microscope</td>
			<td>Carl Zeiss</td>
			<td>F170</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Suture needle</td>
			<td>Allgaier</td>
			<td>1245</td>
			<td>For anesthesia</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Temperaure controller</td>
			<td>CWE,INC.</td>
			<td>TC-1000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Transducer x 2</td>
			<td>Adinstruments</td>
			<td>MLT0699</td>
			<td>Connects to BP and ICP monitor</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ventilator</td>
			<td>Ugo Basile</td>
			<td>7025</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Veterinary clipper</td>
			<td>Aesculap</td>
			<td>GT421</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3-pronged Blair retractor, 13.5 cm</td>
			<td>Agnthos</td>
			<td>17022--13</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Blunt Alm retractor</td>
			<td>F.S.T</td>
			<td>17008-07</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Curved forceps, 12 cm x 2</td>
			<td>F.S.T</td>
			<td>11001-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needle holder, 13 cm</td>
			<td>F.S.T</td>
			<td>12001-13</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Straight Dumont forceps, 11 cm</td>
			<td>F.S.T</td>
			<td>11252-00</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Straight Halsted-Mosquito hemostat x 2</td>
			<td>F.S.T</td>
			<td>13008-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Straight Iris scissor, 9 cm</td>
			<td>F.S.T</td>
			<td>14090-09</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Straight Vannas scissor, 10.5 cm</td>
			<td>F.S.T</td>
			<td>15018-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Absorpable swabs</td>
			<td>Kettenbach</td>
			<td>31603</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Black silk thread, 4-0, 5 x 15 cm</td>
			<td>V&#246;mel</td>
			<td>14757</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bone wax</td>
			<td>Aesculap</td>
			<td>1029754</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Carbomer eye gel 2 mg/g</td>
			<td>Paranova</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cotton swab</td>
			<td>Heinz Herenz</td>
			<td>WA-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cotton tipped applicator x 4</td>
			<td>Selefa</td>
			<td>120788</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hypodermic needle, 23 G x2</td>
			<td>KD Medical</td>
			<td>900284</td>
			<td>Connects to stopcock. Remove distal end</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hypodermic needle, 23 G x3</td>
			<td>KD Medical</td>
			<td>900284</td>
			<td>Remove distal end. 2 connects to stopcock, 1 to syringe</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ICP probe:</td>
			<td>Homemade</td>
			<td></td>
			<td>Made of the following:</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Polythene tubing, 20 mm</td>
			<td>Smiths medical</td>
			<td>800/100/200</td>
			<td>Inner diameter (ID): 0.58 mm, Outer diameter (OD): 0.96 mm.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Silicone tubing, 10 mm</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>15202710</td>
			<td>ID: 0.76 mm, OD: 2.4 mm.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Silicone tubing, 2 mm</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>11716513</td>
			<td>ID: 1.0 mm, OD: 3.0 mm.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro hematocrit tubes</td>
			<td>Brand</td>
			<td>7493 11</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>OP-towel, 45 cm x75 cm</td>
			<td>M&#246;lnlycke</td>
			<td>800430</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PinPort adapter, 22 G</td>
			<td>Instech</td>
			<td>PNP3F22</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PinPort injector</td>
			<td>Instech</td>
			<td>PNP3M</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Polythene tubing, 2 x 20 cm</td>
			<td>Smiths medical</td>
			<td>800/100/200</td>
			<td>Connects to syringe. ID: 0.58 mm, OD: 0.96 mm.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rubberband</td>
			<td>Unknown</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scalpel, 10 blade</td>
			<td>Kiato</td>
			<td>23110</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Spinalneedle, 25 G x 3.5&#39;&#39;</td>
			<td>Braun</td>
			<td>5405905-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stopcock system, Discofix x 2</td>
			<td>Braun</td>
			<td>16494C</td>
			<td>Connects to transducer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Suture, 4-0, monofil, non-resorbable x 3</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td>EH7145H</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe, 1 mL</td>
			<td>BD Plastipak</td>
			<td>1710023</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe, luer-lock, 10 mL x 4</td>
			<td>BD Plastipak</td>
			<td>305959</td>
			<td>Connects to transducer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue adhesive glue</td>
			<td>3M</td>
			<td>1469SB</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>0.5% Chlorhexidine spirit</td>
			<td>Faaborg Pharma</td>
			<td>210918</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Carprofen 50 mg/mL</td>
			<td>ScanVet</td>
			<td>43715</td>
			<td>Diluted 1:10</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>Baxter</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isotonic saline</td>
			<td>Amgros</td>
			<td>16404</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lidocaine-Adrenaline 10 mg/5 &#181;g/mL</td>
			<td>Amgros</td>
			<td>16318</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

pre-chiasmatic, single injection of autologous blood to induce experimental subarachnoid hemorrhage in a rat model

Trots framsteg inom behandling under de senaste decennierna fortsätter subaraknoidalblödning (SAH) att bära en hög börda av sjuklighet och dödlighet, vilket till stor del drabbar en ganska ung befolkning. Flera djurmodeller av SAH har utvecklats för att undersöka de patofysiologiska mekanismerna bakom SAH och för att testa farmakologiska interventioner. Den pre-chiasmatiska modellen med en injektion hos råtta som presenteras i denna artikel är en experimentell modell av SAH med en förutbestämd blodvolym. Kortfattat bedövas djuret, intuberas och hålls under mekanisk ventilation. Temperaturen regleras med en värmepanna. En kateter placeras i svansartären, vilket möjliggör kontinuerlig blodtrycksmätning samt blodprovstagning. Atlantooccipitalmembranet skärs och en kateter för tryckregistrering placeras i cisterna magna för att möjliggöra intracerebral tryckmätning. Denna kateter kan också användas för intratekala terapeutiska ingrepp. Råttan placeras i en stereotaxisk ram, ett borrhål borras framåt mot bregma och en kateter sätts in genom borrhålet och placeras precis framför den optiska chiasmen. Autologt blod (0,3 ml) dras ut från svanskatetern och injiceras manuellt. Detta resulterar i en ökning av intracerebralt tryck och en minskning av cerebralt blodflöde. Djuret hålls nedsövt i 30 minuter och ges subkutan saltlösning och smärtstillande medel. Djuren extuberas och återförs till sin bur. Den pre-chiasmatiska modellen har en hög reproducerbarhet och begränsad variation mellan djur på grund av den förutbestämda blodvolymen. Det efterliknar SAH hos människor vilket gör det till en relevant modell för SAH-forskning.

Kvinnor har en ökad risk för aSAH jämfört med män. Trots detta används manliga gnagare främst i experiment på grund av möjlig bias från heterogenitet av estruscykeln hos kvinnor. De representativa resultaten som presenteras här är från en nyligen publicerad publikation som jämför hon- och hanråttor, vilket bekräftar att modellen ger liknande resultat hos hondjur jämfört med hanråttor21. Studien omfattade 34 kvinnliga Sprague-Dawley-råttor (18 SAH och 16 shams). Shams hade inte...

Watch this Scientific Journal Video about Pre-Chiasmatic, Single Injection of Autologous Blood to Induce Experimental Subarachnoid Hemorrhage in a Rat Model at JoVE.com

Pre-Chiasmatic, Single Injection of Autologous Blood to Induce Experimental Subarachnoid Hemorrhage in a Rat Model

Subaraknoidalblödning fortsätter att bära en hög börda av dödlighet och sjuklighet hos människa. För att underlätta vidare forskning om tillståndet och dess patofysiologi presenteras en pre-chiasmatisk modell med en injektion.

Pre-chiasmatisk, enstaka injektion av autologt blod för att inducera experimentell subaraknoidalblödning i en råttmodell

Despite advances in treatment over the last decades, subarachnoid hemorrhage (SAH) continues to carry a high burden of morbidity and mortality, largely ...

Denna modell av subaraknoidalblödning hjälper oss att bättre förstå de patofysiologiska mekanismerna och konsekvenserna. Detta kommer förhoppningsvis att resultera i att generera terapier, vilket minskar sjukdomsbördan hos drabbade patienter. Den största fördelen med denna teknik är dess mycket reproducerbara, eftersom en fast mängd blod injiceras.Dessutom liknar det en human subaraknoidalblödning i nyckelparametrar. För att göra ICP-sonden, bränn ena änden av en 20 millimeter bit polyetenrör, gör en cirkulär platta och håll lumen öppen. För sedan en en millimeter silikonslangring över polyetenslangen innan du ansluter en 10 millimeter bit silikonslang till änden av polyetenslangen.Därefter bedöva, intubera och kateterisera en Sprague Dawley-råtta innan du placerar den i en stereotaxisk ram. Efter administrering av lokalbedövning, gör ett åtta millimeter hudsnitt kaudalt från nålpunkteringen i mittlinjen. Under ett dissekerande mikroskop, dissekera alla muskler trubbigt i lager för att identifiera atlantooccipitalmembranet.Använd sedan armupprullaren för att hålla fast nackmuskulaturen och placera upprullaren kaudalt om det behövs. Efter att ha kontrollerat att den sterila ICP-sonden är ansluten till ICP-givaren, spola ICP-sonden med saltlösning och se till att det inte finns några luftbubblor i sonden. Använd en 23 gauge nål, skära atlantooccipitalmembranet, gör ett hål för att försiktigt locka ICP-sonden genom membranet.Dra sonden lätt och se till att den visar en pulserande kurva som sträcker sig mellan noll och fem millimeter kvicksilver. Om inte, ta bort sonden, kontrollera anslutningen till givaren igen och bekräfta flödet genom lumen. I det område där atlantooccipitalmembranet sveper runt sonden, applicera två droppar vävnadslim.Flytta sedan silikonröret på en millimeter framåt mot membranet innan du applicerar ytterligare lim för att minimera risken för ICP-sondförskjutning. När ICP-sonden är limmad, ta bort upprullningsdonet. Använd sedan en icke-resorberbar monofilament 4-0 sutur, placera en horisontell madrasssutur vid snittets kaudala ände och en enkel avbruten sutur vid den cefaliska änden.För att placera laserdopplersonden, gör ett 15 millimeter snitt kaudalt i mittlinjen, med början precis framför ögonen. Efter att ha tagit bort bindväven och musklerna med pincett, använd änden av en steril bomullspinne som en rougine för att identifiera bregma och koronala suturer. Efter att ha placerat den beväpnade upprullaren, placera en 25 gauge ryggnål i den stereotaxiska ramen exakt på bregma och notera positionen.Ta sedan bort nålen från bregma. Flytta ramen framåt med 6,5 millimeter. Sätt sedan tillbaka nålen i mittlinjen för att markera sidan av borrningen.Borra tills dura mater identifieras under benet. Ta försiktigt bort benfragmenten med raka pincett. Fyll sedan hålrummet med benvax.Därefter, tre till fyra millimeter lateralt till höger om bregma och precis framför koronalsuturen för laserdopplern, borra ett annat hål. Var försiktig så att du inte tränger in i dura materen. Leta efter kärlen där laserdopplern kan mäta blodflödet.Placera laserdopplern och kontrollera värdena. Ett minimivärde på 100 flödesenheter krävs. Om värdena förblir acceptabla efter att mikroskopet har tagits bort, tillsätt en droppe lim för att fixera sonden.Kontrollera igen om värdet är över 80 flödesenheter. För att inducera subaraknoidalblödning, sätt in nålen försiktigt genom skallen i mittlinjen mellan halvklotet tills motstånd känns på grund av skallbasen. Dra tillbaka nålen med en millimeter för att säkerställa korrekt placering precis framför den optiska chiasmen.För att säkerställa det mest homogena resultatet vid injektion av blodet, vrid nålen 90 grader medurs så att nålspetsen pekar åt höger. Ta sedan bort stiletten. Efter en 15 minuters jämvikt, justera anestesinivån för att erhålla ett genomsnittligt arteriellt blodtryck i intervallet 80 till 100 millimeter kvicksilver.Utför sedan en blodgasanalys för att bekräfta att pH, partialtryck av koldioxid och partialtryck av syre ligger inom fysiologiska parametrar. Använd sedan en milliliter spruta med en trubbig 23 gauge nål, dra ut 500 mikroliter blod från svanskatetern. För att undvika injektion av luft, fyll det döda utrymmet i ryggmärgsnålkammaren med blod.Efter justering av blodvolymen i sprutan till 300 mikroliter, anslut sprutan till ryggradsnålen. Ta sedan tag i sprutan och injicera blodet manuellt för att överträffa det genomsnittliga artärtrycket. Observera en brant ökning av det intracerebrala trycket och ett samtidigt brant fall i cerebralt blodflöde.30 minuter efter induktionen av subaraknoidalblödning, ta bort nålen och laserdopplersonden. Och fyll hålrummen med benvax. Använd icke-resorberbar monofilament 4-0 sutur och stäng snittet med två horisontella madrasssuturer.För att använda ICP-sonden för injektioner i cisterna magna, ta bort silikonslangen och sätt in en stiftportadapter i polyetenslangen. För att utföra en intratekal administrering medan djuret är vaket, placera en stiftportinjektor på en precisionsspruta. Administrera sedan behandlingen via stiftportadaptern.Om intratekala administreringar inte behöver utföras, skär den enkla avbrutna suturen. Använd sedan sax, förkorta ICP-sonden så mycket som möjligt och lim änden för att förhindra läckage av cerebrospinalvätska. Stäng snittet med en icke-absorberbar monofilament 4-0 sutur.Vid utvärderingen av grov sensorisk motorisk funktion med hjälp av det roterande poltestet presterade råttor med experimentellt inducerad subaraknoidalblödning signifikant sämre 24 och 48 timmar efter operationen jämfört med skendjur. Känsligheten för endotelin-1, en agonist för endotelin-1-receptorfamiljen, ökade signifikant två dagar efter subaraknoidalblödning i basilär- och de mellersta cerebrala artärerna hos de experimentella råttorna jämfört med skenkontrollernas. Båda artärerna hos de experimentella råttorna uppvisade också en liknande ökning av känsligheten för 5-karboxamidotryptamin, en agonist för 5-hydroxytryptaminreceptorfamiljen.Efter proceduren kan neurobehavioral tester samt vävnadsanalys inklusive immunohistokemi, PCR, western blotting analysator utföras för att analysera konsekvenser och mekanismer.

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Autologous Blood Injection to Model Spontaneous Intracerebral Hemorrhage in Mice

Autologt blod Injection till Model Spontan intracerebralt blödning i Möss

Investigation of the pathophysiology of injury after intracerebral
hemorrhage (ICH) requires a reproducible animal model.  While ICH
accounts for 10-15% ...

Visual Evoked Potential Recording in a Rat Model of Experimental Optic Nerve Demyelination

Visual evoked potential inspelning i en råttmodell av experimentell Optic Nerve Demyelinisering

The visual evoked potential (VEP) recording is widely used in clinical practice to assess the severity of optic neuritis in its acute phase, and to ...

Rat Model of Widespread Cerebral Cortical Demyelination Induced by an Intracerebral Injection of Pro-Inflammatory Cytokines

Råtta modell av utbredd cerebrala när demyelination framkallas av en intrakraniell injektion av proinflammatoriska cytokiner

Multiple sclerosis (MS) is the most common immune-mediated disease of the central nervous system (CNS) and progressively leads to physical disability and ...

A Volumetric Method for Quantification of Cerebral Vasospasm in a Murine Model of Subarachnoid Hemorrhage

En volymetrisk metod för kvantifiering av Cerebral Vasospasm i en murin modell av subarachnoidalblödning

Subarachnoid hemorrhage (SAH) is a subtype of hemorrhagic stroke. Cerebral vasospasm that occurs in the aftermath of the bleeding is an important factor ...

A Benchtop Approach to the Location Specific Blood Brain Barrier Opening using Focused Ultrasound in a Rat Model

En bänktop till den platsspecifika blodhjärnbarriäröppningen med fokuserat ultraljud i en råttmodell

Stereotaxic surgery is the gold standard for localized drug and gene delivery to the rodent brain. This technique has many advantages over systemic ...

Double Direct Injection of Blood into the Cisterna Magna as a Model of Subarachnoid Hemorrhage

Dubbel direktinsprutning av blod i Cisterna Magna som en modell av Subarachnoid Hemorrhage

Among strokes, subarachnoid hemorrhage (SAH) consecutive to the rupture of a cerebral arterial aneurysm represents 5-9% but is responsible for about 30% ...

Massive Pontine Hemorrhage by Dual Injection of Autologous Blood

Massiv pontinsk blödning genom dubbel injektion av autologt blod

We provide a protocol to establish a massive pontine hemorrhage model in a rat. Rats weighing about 250 grams were used in this study. One hundred ...

A Rat Model of EcoHIV Brain Infection

En råttmodell av EcoHIV hjärninfektion

It has been well studied that the EcoHIV infected mouse model is of significant utility in investigating HIV associated neurological complications. ...

Analysis of Cerebral Vasospasm in a Murine Model of Subarachnoid Hemorrhage with High Frequency Transcranial Duplex Ultrasound

Analys av cerebral vasospasm i en murin modell av subarachnoid blödning med hög frekvens transkraniell duplex ultraljud

Cerebral vasospasm that occurs in the weeks after subarachnoid hemorrhage, a type of hemorrhagic stroke, contributes to delayed cerebral ischemia. A ...

Endovascular Perforation Model for Subarachnoid Hemorrhage Combined with Magnetic Resonance Imaging (MRI)

Endovascular Perforation Model for Subarachnoid Hemorrhage Combined with Magnetic Resonance Imaging MRI

Endovaskulär perforeringsmodell för subaraknoidalblödning i kombination med magnetisk resonanstomografi (MRI)

The endovascular filament perforation model to mimic subarachnoid hemorrhage (SAH) is a commonly used model - however, the technique can cause a high ...