Name: a protocol for roux-en-y gastric bypass in rats using linear staplers
Uploaded: 2021-08-21T15:00:00
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この研究は、米国代謝・肥満外科学会研究賞によって資金提供されました。エチコンは優雅に縫合糸、ホッチキス、クリップを供給しました。主著者の博士研究は、アルバータ大学臨床医研究者プログラムとアルバータイノベートクリニアンフェローシップによって資金提供されました。また、RYGB解剖学の彼女の医学的イラストのためにミシェル・トランに感謝したいと思います。

動物使用プロトコルは、アルバータ大学の健康科学動物のケアと使用委員会(AUP00003000)によって承認されました。RYGB 解剖学を示す図については 、図 1 を参照してください。
1. ルー・アン・Y胃バイパス
<ol><li>動物の準備と手術のセットアップ<ol>
<li>手術の1週間前に、ラットに固形食と水に加えて経口補水療法と流動食を提供し、この新しい食事に...

<ol>
	<li>Courcoulas, A. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Three-year+outcomes+of+bariatric+surgery+vs+lifestyle+intervention+for+type+2+diabetes+mellitus+treatment.">Three-year outcomes of bariatric surgery vs lifestyle intervention for type 2 diabetes mellitus treatment.</a> JAMA Surgery. 15213 (10), 1-9 (2015).</li><li>Ardestani, A., Rhoads, D., Tavakkoli, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Insulin+cessation+and+diabetes+remission+after+bariatric+surgery+in+adults+with+insulin-treated+type+2+diabetes.">Insulin cessation and diabetes remission after bariatric surgery in adults with insulin-treated type 2 diabetes.</a> Diabetes Care. 38 (4), 659-664 (2015).</li><li>Casella, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ten-year+duration+of+type+2+diabetes+as+prognostic+factor+for+remission+after+sleeve+gastrectomy.">Ten-year duration of type 2 diabetes as prognostic factor for remission after sleeve gastrectomy.</a> Surgery for Obesity and Related Diseases. 7 (6), 697-702 (2011).</li><li>Panunzi, S., De Gaetano, A., Carnicelli, A., Mingrone, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Predictors+of+remission+of+diabetes+mellitus+in+severely+obese+individuals+undergoing+bariatric+surgery.">Predictors of remission of diabetes mellitus in severely obese individuals undergoing bariatric surgery.</a> Annals of Surgery. 261 (3), 459-467 (2015).</li><li>Edelman, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Control+of+type+2+diabetes+after+1+year+of+laparoscopic+adjustable+gastric+banding+in+the+helping+evaluate+reduction+in+obesity+(HERO)+study.">Control of type 2 diabetes after 1 year of laparoscopic adjustable gastric banding in the helping evaluate reduction in obesity (HERO) study.</a> Diabetes, Obesity and Metabolism. 16 (10), 1009-1015 (2014).</li><li>Mingrone, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Metabolic+surgery+versus+conventional+medical+therapy+in+patients+with+type+2+diabetes:+10-year+follow-up+of+an+open-label,+single-centre,+randomised+controlled+trial.">Metabolic surgery versus conventional medical therapy in patients with type 2 diabetes: 10-year follow-up of an open-label, single-centre, randomised controlled trial.</a> The Lancet. 397 (10271), 293-304 (2021).</li><li>Thaler, J. P., Cummings, D. 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G., Uygun, K., Yarmush, M. L., Saeidi, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Surgical+models+of+Roux-en-Y+gastric+bypass+surgery+and+sleeve+gastrectomy+in+rats+and+mice.">Surgical models of Roux-en-Y gastric bypass surgery and sleeve gastrectomy in rats and mice.</a> Nature Protocols. 10 (3), 495-507 (2015).</li><li>Bueter, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Roux-en-Y+gastric+bypass+operation+in+rats+protocol.">Roux-en-Y gastric bypass operation in rats protocol.</a> Journal of visualized experiments : JoVE. (64), (2012).</li><li>Stevenson, M., Lee, J., Lau, R. G., Brathwaite, C. E. M., Ragolia, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Surgical+mouse+models+of+vertical+sleeve+gastrectomy+and+Roux-en+Y+gastric+bypass:+a+Review.">Surgical mouse models of vertical sleeve gastrectomy and Roux-en Y gastric bypass: a Review.</a> Obesity Surgery. , (2019).</li><li>Hao, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reprogramming+of+defended+body+weight+after+Roux-En-Y+gastric+bypass+surgery+in+diet-induced+obese+mice.">Reprogramming of defended body weight after Roux-En-Y gastric bypass surgery in diet-induced obese mice.</a> Obesity. 24 (3), 654-660 (2016).</li><li>Adult rodent anesthesia SOP. 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RYGBは小さな胃袋(30mL未満)の作成と、ビリオ膵肢とルー四肢の作成を含む(図1)。ヒトでは、ビリオ膵肢は典型的には30〜50cmであり、胃残骸、肝臓および膵臓からの分泌物を輸送する。ルー四肢は通常、75〜150cmの長さであり、摂取した食品の主要なチャネルです。共通チャネルは、2つの肢が結合する場所に残っている小腸遠位であり、消化吸収の大部分が発生する場所で?...

肥満と2型糖尿病は世界的に流行している1.医療減量は患者の糖尿病を改善することができますが、重度の糖尿病を持つ人はバリヤード手術から最も恩恵を受けます。肥満手術は、体重減少と2型糖尿病2、3を改善または治癒する際に安全かつ有効であることが証明されている4.現在の金標準のルー・アン・Y胃バイパス(RYGB)手術のような代謝肥満の処置は、糖尿病薬5、6、7の必要性を減らしながら、グルコース恒常性の急速かつ持続的な改善を誘発する。
RYGBの後、グルコース恒常性の改善が急速に起こり、体重減少8とは独立している。代謝手術後に起こる糖尿病寛解に伴う代謝変化を説明するために、2つの主要な理論が提案されている。まず、後腸仮説は、バイパス後、未消化栄養素のより高い濃度が、GLP-1などのホルモンの放出を増強する遠位腸に達すると仮定する。一方、前腸仮説は、近位腸をバイパスすると抗インクレチンホルモンの分泌を減少させることを示唆している。これらの効果の両方が早期にグルコース代謝の改善につながる可能性9.
動物モデルは、これらのメカニズムを研究するための強力なツールになる可能性を秘めています。しかし、マウスやラットモデルを利用する際の大きな障壁は、これらの手順を実行する際の技術的な難しさです。ほとんどの研究は、マウスまたはラットモデル10、11、12に依存しています。マウスの胃が小さすぎてホッチキス装置11を使用できないのでマウスモデルは困難であり、死亡率は17から52%の範囲で許容できないほど高い。ラットでは、胃12,14を分割する前に胃血管の複雑な結紮のために、技術的に実施が困難なプロトコルもある。他のモデルは、ホッチキスを使用して胃を分割しますが、ポストRYGB人体解剖学11と一致しない大きなポーチを残します。本モデルでは、ラットモデルでリニアホッチを使用してRYGBを実行する方法について詳しく説明し、ヒト解剖学に合わせて胃袋を増やします。全体的に、この手順は、優れた生存率および代謝結果と関連していた。

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>2-0 Silk Sutures</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td>K533</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3-0 Vicryl Sutures</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td>J219H</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4% Isoflurane</td>
			<td>N/A</td>
			<td>N/A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>5% Dextrose and 0.9% Sodium Chloride Solution - 1000 mL</td>
			<td>Baxter</td>
			<td>2B1064</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>50 mL Conical Centrifuge Tubes</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>14-432-22</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>6-0 Prolene Sutures</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td>8805H</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anesthetic Machine</td>
			<td>N/A</td>
			<td>N/A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Animal Hair Shaver</td>
			<td>N/A</td>
			<td>N/A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Betadine Solution</td>
			<td>N/A</td>
			<td>N/A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Castrojievo Needle Holder with lock 14 cm (smooth curved)</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>503258</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ECHELON FLEX Articulating Endoscopic Linear Cutter</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td>EC45A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Economy Tweezers #4</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>501978</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ENDOPATH ETS Articulating Linear Cutter 45mm Reloads</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td>6R45B</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Far Infrared Warming Pad Controller with warming pad (15.2 cm W x 20.3 cm L), pad temperature probe, and 10 disposable, non-sterile sleeve protectors</td>
			<td>Kent Scientific</td>
			<td>RT-0515</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Large Rat Elizabethan Collar</td>
			<td>Kent Scientific</td>
			<td>EC404VL-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Liquid Diet Feeding Tube (150 mL)</td>
			<td>Bio-Serv</td>
			<td>9007</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Liquid Diet Feeding Tube Holder (short adjustable)</td>
			<td>Bio-Serv</td>
			<td>9015</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro Mosquito Forceps</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>500452</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro Scissors</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>503365</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mouse Diet, High Fat Fat Calories (60%), Soft Pellets</td>
			<td>Bio-Serv</td>
			<td>S3282</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>No. 11 Blade and Scalpel Handle</td>
			<td>N/A</td>
			<td>N/A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>OPMI Vario Surgical Microscope</td>
			<td>ZEISS</td>
			<td>S88</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Raised Floor Grid</td>
			<td>Tecniplast</td>
			<td>GM500150 Raised Floor Grid</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rodent Liquid Diet, Lieber-DeCarli &#39;82, Control, 4 Liters/Bag</td>
			<td>Bio-Serv</td>
			<td>F1259</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium Chloride Irrigation 0.9% Solution - 500 mL</td>
			<td>Baxter</td>
			<td>JF7633</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile Cotton Swabs</td>
			<td>N/A</td>
			<td>N/A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile Drape</td>
			<td>N/A</td>
			<td>N/A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile Towel</td>
			<td>N/A</td>
			<td>N/A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Thermal Cautery Unit</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>501293</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a protocol for roux-en-y gastric bypass in rats using linear staplers

ルー・アン・Y胃バイパス(RYGB)は、重度の肥満および2型糖尿病の治療のために一般的に行われる。しかし、体重減少や代謝変化のメカニズムはよく理解されていません。カロリー摂取量の減少、栄養吸収の減少、満腹性の増加、満腹増進ホルモンの放出、胆汁酸代謝の変化、腸内微生物叢の変化など、複数の要因が役割を果たすと考えられている。
ラットRYGBモデルは、これらのメカニズムを研究するための理想的なフレームワークを提示します。マウスモデルの以前の作業は、17から52%の範囲で高い死亡率を有し、採用を制限している。ラットモデルは、外科的刺激に対してより多くの生理学的予備を示し、外科的ステープラーの使用を可能にするので、技術的に採用が容易である。しかし、外科用ホッチキスの1つの課題は、人間のRYGBを代表しない大きな胃袋を残すことが多いということです。 
このプロトコルでは、外科用ステープラーを使用して小さな胃袋をもたらすラットにRYGBプロトコルを提示する。ラットの前胃を取り除く2つのホッチキス火災を利用して、典型的なヒトRYGBに続くような小さな胃袋を得る。外科的ホチキス止めはまた鋭い分裂よりよりよい止止めを生じる。さらに、ラットの前胃には腺が含まれておらず、その除去はRYGBの生理を変えてはならない。
RYGBコホートの減量および代謝変化は、シャムコホートと比較して有意であり、14週で有意に低い耐糖能を有する。さらに、このプロトコルはRYGB後に88.9%の優れた生存率を有する。このプロトコルに記載されているスキルは、以前の微小外科的経験なしに習得することができます。この手順を習得すると、RYGBのメカニズムと効果を研究するための再現可能なツールが提供されます。

動物と住宅 36匹の雌雄のウィスターラットを対に収容し、6週齢から60%無菌げっ歯類高脂肪食を摂取した(図2)。16週齢で、彼らはRYGBまたは偽の手術を受けた。術後の最初の週の後、ラットは高脂肪食で再開された。ラットの半数は術後2週間で安楽死させ、残りの半分は術後14週で安楽死させた。
死亡率 全体として、33(91...

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A Protocol for Roux-en-Y Gastric Bypass in Rats using Linear Staplers

ルーアンY胃バイパス(RYGB)は、肥満および糖尿病を治療するために行われる。しかしRYGBの有効性の根底にあるメカニズムは十分に理解されておらず、動物モデルにおける高い死亡率を引き起こす技術的困難によって研究が制限されている。この記事では、成功率の高いラットで RYGB を実行する方法について説明します。

リニア・ステープラーを用いたラットにおけるルー・アン・Y胃バイパスのプロトコル

Roux-en-Y gastric bypass (RYGB) is commonly performed for the treatment of severe obesity and type 2 diabetes. However, the mechanism of weight loss and ...

Roux-en-Y胃バイパスは、重度の肥満および2型糖尿病の治療のために一般的に行われる手順である。しかし, 減量と代謝の改善に寄与する正確なメカニズムはよく理解されていないと複数の要因が役割を果たすと考えられています。.ラットルー-en-Y胃バイパスモデルは、これらのメカニズムを研究するための優れたフレームワークを提示します。議定書。動物の準備と手術のセットアップ。ポビドネ-ヨウ素溶液で腹部をきれいにします。溶液を乾燥させ、滅菌手袋に変えます。ラットをドレープの開口部でドレープし、腹部を露出する。器具、縫合糸、綿棒、および10ミリリットルのシリンジはプロシージャの間に容易なアクセスを可能にする場所に置かれる。中足腔内術.目印としてxiphoidプロセスのすぐ下のメスを使用して、腹部の上部正中線に3センチメートルの切開を行います。はさみを使用して、筋膜と腹膜を分割し、直腸腹部からの出血を減らすためにリネアアルバの中線にとどまるよう注意してください。出血がある場合は、熱または電気焼灼でそれを制御します。胃を動員する。2つの湿った綿棒を使用して、ぶっきらぼうに胃の付属品を解剖する。密な付着に遭遇した場合は、胃の焼灼を避けるために注意して、胃の付属品を分割するために熱焼灼剤を使用してください。胃と付属の肝臓葉の間の靭帯を鋭く分け、胃の動員で肝臓が引き裂かれるリスクを減らす。より大きな血管、特に短い胃動脈では、6-0ポリプロピレンを使用してリゲート。食道の右側に窓を作成しますが、左胃動脈に近位.綿棒がこのエリアに後から届くよう。腹部の外側に外装できる場合、胃は十分に動員されます。jejunem を識別して分割します。横の中等コロンへの付着を観察するまで、近位に自通に従ってTreitzの靭帯を特定する。遠位7センチメートルを測定し、腸間容器間の位置を特定し、マイクロハサミで腸を分割する。腸を分割する際にペイヤーのパッチを避けてください。腸を分けるだけで、腸間腸ではなく注意してください。汚染を最小限に抑えるために腸を分割する前に、清潔な生理生理的なスポンジを置きます。小さな交差容器は、通常、小腸の境界で腸間腸に存在し、これは出血を避けるために焼灼で分割されています。腸間膜の基部に向かって1センチメートルを分割し続けます。近位および遠位のjejunemを特定します。近位性の天体をネズミの右に濡れたガーゼの下に置き、ラットの左に遠位の天体を置きます。お腹をホチキス止めする。前胃の白い線を横切って3.5ミリメートルのステープル高さの45ミリメートルの線形切断ホッチを挿入して、より小さなポーチを作成します。ホッチキスを発射する前に10秒待ちます。止止めを確実にするために、主に1分間ガーゼを使用して圧力を入れる。圧が単独で達成されない場合、ステープルラインに沿った出血は6-0ポリプロピレンの8つの縫合糸を使用して覆い尽くされる。その後、2番目の主食火災は、以前に作成された窓に胃を横切って行われます。ホッチキスを発射する前に10秒待ちます。止まり止めとオーバー縫製が必要であることを確認するために、ステープルラインに沿って圧力が保持されます。胃腸管内術.胃をホチキス止めした直後に胃の胃管病が行われます。この遅延は、胃が2番目の胃ステープルの後に不連続であるため、胃の崩壊と吸引を引き起こす可能性があります。11枚の刃のメスを使用して、遠位ポーチに胃道を作ります。胃切り出しを通して胃の内容物を表現する。これは、胃の不血圧や吸引を防ぐために重要です。マイクロハサミを使ってこの胃道を約5ミリメートルに延長します。胃切り出しを通して胃の内容物を表現する。胃道に隣接する、心間膜の遠位の端を動員し、腸間膜がねじれないように配置します。吻合を縫合しながら、生理的なガーゼで覆い、生理的な生理を定期的に再適用することによって、腸を湿らせておくようにしてください。6-0ポリジオキサノまたはポリプロピレン縫合を使用して、吻合の下マージンに縫合を置き、スナップを使用して穏やかに引き込みます。3つの結び目で結びます。吻合の上部マージンに滞在縫合糸を置き、スナップを使用してそっと引き込みます。6つの結び目で結びます。連続的な方法で吻合の前側を縫合し、裏側を取らないように注意して1ミリメートル幅と1ミリメートル離れて噛みます。縫合糸が下の滞在縫合糸に達したら、これらを追加の6ノットと結びます。前側が完了したら、腸と胃をひっくり返し、腸間膜欠損を通して下の縫合糸を渡します。スナップを再適用し、引き込み下ろします。吻合の後部側では、完全な厚さを配置し、幅1ミリメートルの6-0縫合糸を中断し、裏側を取らないように注意して1ミリメートル離れた間隔を置きます。これらはそれぞれ6つの結び目で結ばれています。吻合の前側は連続的に縫合され、後部側は中断された方法で行われます。これにより、周回連続閉鎖に関連する潜在的な厳格さまたは狭窄を防ぐことができます。肛門に光の内容物をそっと押し込み、漏れを確認します。漏れのある領域がある場合は、縫合糸を中断して慎重に補強してください。余分な縫合糸で補強するとき背壁を取らないように注意してください。ジェジュノジュノスノストミー。胃二腸管術から、遠位20センチメートルを測定する。11の刃のメスを使用して、時腸側にジェジュノトミーを作成します。ペイヤーのパッチの上にジェジュノトミーを作ることを避けてください。ビリオ膵肢と同じ大きさになるようにマイクロハサミを使用して、このジェジュノトミーを拡張します。綿棒がちょうど中に収まることを確認してください。腸間神経のねじれが生じなさそうに、ビリオ膵肢を置く。上側と下側に6-0の滞在縫合糸を伴う胃二分化術と同様に吻合を行う。前部側は連続的な縫合糸で行われ、後部側は中断された縫合糸で行われる。この吻合の間、腸が生理的に湿っていることを確認してください。吻当を通して、発光内容物を軽く押して漏れを確認します。漏れのある領域がある場合は、縫合糸を中断して補強します。腸と胃の位置を変更します。ポーチ、残りの胃、肝臓のねじれがないことを確認してください。肝臓の左葉が胃の前部であり、圧迫性肝虚血を引き起こす可能性がありますので、ポーチの後ろに閉じ込められていないことを確認してください。腹部閉鎖。連続的な方法で3-0ポリグラクチンと筋膜を閉じます。3-0ポリジオキサンロンも使用することができる。連続的な方法で2-0シルクで肌を閉じます。業績。すべてのコホートは術前に有意な体重増加を有していた。Roux-en-Y胃バイパスを受けているラットは、偽の手術を受けているラットと比較して、高脂肪食で術後体重が低かった。高脂肪食の術後体重変化は、術後のすべての時点で統計的に有意であった。偽の手術と比較して腹腔内グルコース耐性試験中に曲線下の低い領域を有するRoux-en-Y胃バイパス後のグルコース耐性が改善された。結論。この手順は、ラットモデルのリニアホッチキスを利用して、ルー・アン・Y胃バイパスを行い、人間の解剖学のそれに合わせて胃袋をより多く生じる。全体的に, この手順は、優れた生存率と有意な体重減少と代謝効果に関連付けられていた.

Research

JoVE Journal

Medicine

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