Name: partial heterotopic hindlimb transplantation model in rats
Uploaded: 2021-06-09T14:45:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Partial Heterotopic Hindlimb Transplantation Model in Rats at JoVE.com

Bu çalışma, Savunma Bakanlığı Sağlık İşleri Müsteşar Yardımcılığı tarafından Kongre Tarafından Yönlendirilen Tıbbi Araştırma Programı aracılığıyla Ödül No. W81XWH-17-1-0680. Görüşler, yorumlar, sonuçlar ve öneriler yazarların görüşleridir ve Savunma Bakanlığı tarafından onaylanmamıştır.

Tüm hayvanlar, Laboratuvar Hayvanlarının Bakımı ve Kullanımı için NIH Kılavuzu'na uygun olarak insancıl bakım aldı. Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Komitesi (IACUC-protokol 2017N000184) ve Hayvan Bakım ve Kullanım İnceleme Ofisi (ACURO) tüm hayvan protokollerini onayladı. Tüm deneyler için doğuştan erkek Lewis sıçanları (250-400 g) kullanılmıştır.
1. Cerrahi
<ol><li>Lewis farelerini izofluran soluma kullanarak uyuşturun. İndüksiyon odasında % 5 izofluran i...

<ol>
	<li>Lanteiri, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Feasibility,+reproducibility,+risks+and+benefits+of+face+transplantation:+a+prospective+study+of+outcomes.">Feasibility, reproducibility, risks and benefits of face transplantation: a prospective study of outcomes.</a> American Journal of Transplantation. 11 (2), 367-378 (2011).</li><li>Park, S. H., Eun, S. C., Kwon, S. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hand+transplantation:+current+status+and+immunologic+obstacles.">Hand transplantation: current status and immunologic obstacles.</a> Experimental and Clinical Transplantation. 17 (1), 97-104 (2019).</li><li>Cetrulo, C. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Penis+transplantation:+first+US+experience.">Penis transplantation: first US experience.</a> Annals of Surgery. 267 (5), 983-988 (2018).</li><li>Grajek, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=First+complex+allotransplantation+of+neck+organs:+larynx,+trachea,+pharynx,+esophagus,+thyroid,+parathyroid+glands,+and+anterior+cervical+wall:+a+case+report.">First complex allotransplantation of neck organs: larynx, trachea, pharynx, esophagus, thyroid, parathyroid glands, and anterior cervical wall: a case report.</a> Annals of Surgery. 266 (2), 19-24 (2017).</li><li>Pribaz, J. J., Caterson, E. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evolution+and+limitations+of+conventional+autologous+reconstruction+of+the+head+and+neck.">Evolution and limitations of conventional autologous reconstruction of the head and neck.</a> Journal of Craniofacial Surgery. 24 (1), 99-107 (2013).</li><li>Lipson, R. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vascularized+limb+transplantation+in+the+rat.+I.+Results+with+syngeneic+grafts.">Vascularized limb transplantation in the rat. I. Results with syngeneic grafts.</a> Transplantation. 35 (4), 293-299 (1983).</li><li>Lipson, R. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vascularized+limb+transplantation+in+the+rat.+II.+Results+with+allogeneic+grafts.">Vascularized limb transplantation in the rat. II. Results with allogeneic grafts.</a> Transplantation. 35 (4), 300-304 (1983).</li><li>Adamson, L. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+modified+model+of+hindlimb+osteomyocutaneous+flap+for+the+study+of+tolerance+to+composite+tissue+allografts.">A modified model of hindlimb osteomyocutaneous flap for the study of tolerance to composite tissue allografts.</a> Microsurgery. 27 (7), 630-636 (2007).</li><li>Arav, A., Friedman, O., Natan, Y., Gur, E., Shani, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rat+hindlimb+cryopreservation+and+transplantation:+a+step+toward+"organ+banking".">Rat hindlimb cryopreservation and transplantation: a step toward "organ banking".</a> American Journal of Transplantation. 17 (11), 2820-2828 (2017).</li><li>Gok, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+an+ex-situ+limb+perfusion+system+for+a+rodent+model.">Development of an ex-situ limb perfusion system for a rodent model.</a> ASAIO Journal. 65 (2), 167-172 (2019).</li><li>Gok, E., Rojas-Pena, A., Bartlett, R. H., Ozer, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rodent+skeletal+muscle+metabolomic+changes+associated+with+static+cold+storage.">Rodent skeletal muscle metabolomic changes associated with static cold storage.</a> Transplantation Proceedings. 51 (3), 979-986 (2019).</li><li>Brandacher, G., Grahammer, J., Sucher, R., Lee, W. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+for+basic+and+translational+research+in+reconstructive+transplantation.">Animal models for basic and translational research in reconstructive transplantation.</a> Birth Defects Research. Part C, Embryo Today. 96 (1), 39-50 (2012).</li><li>Fleissig, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modified+heterotopic+hindlimb+osteomyocutaneous+flap+model+in+the+rat+for+translational+vascularized+composite+allotransplantation+research.">Modified heterotopic hindlimb osteomyocutaneous flap model in the rat for translational vascularized composite allotransplantation research.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (146), e59458 (2019).</li><li>Ulusal, A. E., Ulusal, B. G., Hung, L. M., Wei, F. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heterotopic+hindlimb+allotransplantation+in+rats:+an+alternative+model+for+immunological+research+in+composite-tissue+allotransplantation.">Heterotopic hindlimb allotransplantation in rats: an alternative model for immunological research in composite-tissue allotransplantation.</a> Microsurgery. 25 (5), 410-414 (2005).</li><li>Jang, Y., Park, Y. E., Yun, C. W., Kim, D. H., Chung, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+vest-collar+as+a+rodent+collar+to+prevent+licking+and+scratching+during+experiments.">The vest-collar as a rodent collar to prevent licking and scratching during experiments.</a> Lab Anim. 50 (4), 296-304 (2016).</li><li>Kern, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+rodent+orthotopic+forelimb+transplantation+model+that+allows+for+reliable+assessment+of+functional+recovery+resulting+from+nerve+regeneration.">A novel rodent orthotopic forelimb transplantation model that allows for reliable assessment of functional recovery resulting from nerve regeneration.</a> American Journal of Transplantation. 17 (3), 622-634 (2017).</li><li>Perez-Abadia, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Low-dose+immunosuppression+in+a+rat+hind-limb+transplantation+model.">Low-dose immunosuppression in a rat hind-limb transplantation model.</a> Transplant International. 16 (12), 835-842 (2003).</li><li>Sucher, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Orthotopic+hind-limb+transplantation+in+rats.">Orthotopic hind-limb transplantation in rats.</a> Journal of Visualized Experiments. (41), e2022 (2010).</li><li>Fleissig, Y. Y., Beare, J. E., LeBlanc, A. J., Kaufman, C. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evolution+of+the+rat+hind+limb+transplant+as+an+experimental+model+of+vascularized+composite+allotransplantation:+Approaches+and+advantages.">Evolution of the rat hind limb transplant as an experimental model of vascularized composite allotransplantation: Approaches and advantages.</a> SAGE Open Medicine. 8, 2050312120968721 (2020).</li><li>Lindboe, C. F., Presthus, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+denervation,+immobilization+and+cachexia+on+fibre+size+in+the+anterior+tibial+muscle+of+the+rat.">Effects of denervation, immobilization and cachexia on fibre size in the anterior tibial muscle of the rat.</a> Acta Neuropathologica. 66 (1), 42-51 (1985).</li><li>Nazzal, J. A., Johnson, T. S., Gordon, C. R., Randolph, M. A., Lee, W. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heterotopic+limb+allotransplantation+model+to+study+skin+rejection+in+the+rat.">Heterotopic limb allotransplantation model to study skin rejection in the rat.</a> Microsurgery. 24 (6), 448-453 (2004).</li></ol>

Kemirgenlerde ortotopik uzuv transplantasyon modelleri literatürde tanımlanmıştır15,16,17; bununla birlikte, sinir onarımı, kas yeniden takma ve femurun mükemmel bir osteosynthesis'ine ihtiyaç duyarlar, bu da çok zor bir adım olabilir. Bu modeller ayrıca kemirgenlerde daha yüksek morbidite ve mortalite oranı ile ilişkilidir14Özellikle nakledilen bir hindlimb'in normal bir işlevinin iyile?...

Son yirmi yılda, VCA yüz 1 , üst ektremite amputasyonları2, penis 3 ve diğer karmaşık doku kusurları4,5dahil olmak üzere ciddi şekil bozukluğu yaşayan hastalar için devrimci bir tedavi olarak gelişti. Bununla birlikte, yaşam boyu süren immünosupresyonun sonuçları hala bu karmaşık rekonstrüktif ameliyatların daha geniş bir uygulamasını engellememektedir. Temel araştırmalar, anti-ret stratejilerini geliştirmek için çok önemlidir. Transplantasyon lojistiğini iyileştirmek ve donör havuzunu artırmak için VCA koruma süresinin artırılması da önemlidir (VCA donörlerinin cilt tonu, anatomik boyut, cinsiyet dahil olmak üzere katı organ bağışçılarına göre daha fazla kriteri yerine getirmeleri gerektiğinden). Bu bağlamda, sıçan uzuv transplantasyonları allograftların immün reddi6,7,yeni tolerans indüksiyon protokolleri8ve koruma çalışmaları 9 ,10,11üzerinde yapılan çalışmalarda yaygın olarak kullanılmaktadır. Bu nedenle, bu VCA modelleri VCA çeviri araştırmaları için ustalaşmak için önemli bir unsurdur.
Osteomiyokutan kapaklar literatürde 8,12 ,13,14sıçanlarda VCA'yı incelemek için güvenilir modeller olarak tanımlanmıştır. Ortotopik tam ektremite transplantasyonları greft fonksiyonunun uzun süreli değerlendirilmesine izin verse de, daha yüksek postoperatif morbidite ve mortalite oranları ile ilişkili zaman alıcı bir işlemdir14. Buna karşılık, heterotopik uzuv transplantasyon modelleri işlevsel değildir, ancak VCA üzerinde tekrarlanabilir çalışmalara olanak sağlar. Postoperatif sonuçlar, sıçan VCA transplantasyon çalışması başlamadan önce güvenilir bir şekilde beklenebilir. Bu çalışmada sıçanda, üç haftalık bir takip süresi boyunca ameliyat içi ve postoperatif olarak ortaya çıkabilecek sık olası sonuçları ve komplikasyonları içeren kısmi heterototopik osteomiyokutanöz flap transplantasyon modeli raporlanmaktadır.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>24 GA angiocatheter</td>
			<td>BD Insyte Autoguard</td>
			<td>381412</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4-0 suture Black monofilament non absorbable suture</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td>1667</td>
			<td>Used to suture the E-collar to the back of the neck</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4-0 suture Coated Vicryl Plus Antibacterial</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td>VCP496</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Adson Tissue Forceps, 11 cm, 1 x 2 Teeth with Tying Platform</td>
			<td>ASSI</td>
			<td>ASSI.ATK26426</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bipolar cords</td>
			<td>ASSI</td>
			<td>228000C</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Black Polyamide Monofilament USP 10-0, 4 mm 3/8c</td>
			<td>AROSurgical</td>
			<td>T04A10N07-13</td>
			<td>Used to perform the microvascular anastomoses</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Buprenorphine HCl</td>
			<td>Pharmaceutical, Inc</td>
			<td>42023-179-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dilating Forceps</td>
			<td>Fine science tools (FST)</td>
			<td>18131-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dissecting Scissors 15 cm, Round Handle 8 mm diameter, Straight Slender Tapered Blade 7 mm, Lipshultz Pattern</td>
			<td>ASSI</td>
			<td>ASSI.SAS15RVL</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Double Micro Clamps 5.5 x 1.5 mm</td>
			<td>Fine science tools (FST)</td>
			<td>18040-22</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Elizabethan collar</td>
			<td>Braintree Scientific</td>
			<td>EC-R1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forceps 13.5 cm long, Flat Handle, 9 mm wide Straight Tips 0.1 mm diameter (x2)</td>
			<td>ASSI</td>
			<td>ASSI.JFL31</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Halsey Micro Needle Holder</td>
			<td>Fine science tools (FST)</td>
			<td>12500-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heparin Lock Flush Solution, USP, 100 units/mL</td>
			<td>BD PosiFlush</td>
			<td>306424</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>Patterson Veterinary</td>
			<td>14043-704-06</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Jewelers Bipolar Forceps Non Stick 11 cm, straight pointed tip, 0.25 mm tip diameter</td>
			<td>ASSI</td>
			<td>ASSI.BPNS11223</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lone Star Elastic Stays</td>
			<td>CooperSurgical</td>
			<td>3314-8G</td>
			<td>Used to retract the inguinal ligament for femoral vessels dissection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lone Star Self-Retaining Retractors</td>
			<td>CooperSurgical</td>
			<td>3301G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro-Mosquito Hemostats</td>
			<td>Fine science tools (FST)</td>
			<td>13010-12</td>
			<td>Used to retract the inguinal fat pad distally</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needle Holder, 15 cm Round Handle, 8 mm diameter, Superfine Curved Jaw 0.2 mm tip diameter, without lock</td>
			<td>ASSI</td>
			<td>ASSI.B1582</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nylon Suture Black Monolfilament 8-0, 6.5 mm 3/8c</td>
			<td>Ethilon</td>
			<td>2808G</td>
			<td>Used to ligate collateral branches on the femoral vessels</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Offset Bone Nippers</td>
			<td>Fine science tools (FST)</td>
			<td>16101-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>S&#38;T Vascular Clamps 5.5 x 1.5 mm</td>
			<td>Fine science tools (FST)</td>
			<td>00398-02</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Walton scissors</td>
			<td>Fine science tools (FST)</td>
			<td>14077-09</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

partial heterotopic hindlimb transplantation model in rats

Vaskülarize kompozit allotransplantasyonlar (VCA), karmaşık bir doku defektinden sonra otolog cerrahi olanakları olmayan hastalar için en gelişmiş rekonstrüksiyon seçeneğini temsil eder. Yüz ve el nakilleri şekilsiz hastaların hayatlarını değiştirerek onlara yeni bir estetik ve fonksiyonel sosyal organ kazandırmıştır. Umut verici sonuçlara rağmen, VCA yaşam boyu immünsüpresyon komorbidititeleri ve enfeksiyöz komplikasyonlar nedeniyle hala düşük performans gösteriyor. Sıçan, immünolojik yolları ve greft reddetme mekanizmalarını araştıran in vivo çalışmalar için ideal bir hayvan modelidir. Sıçanlar ayrıca perfüzyon ve kriyoprezervasyon çalışmaları da dahil olmak üzere yeni kompozit doku grefti koruma tekniklerinde yaygın olarak kullanılmaktadır. Sıçanlarda VCA için kullanılan modeller düşük postoperatif morbidite ve mortalite ile tekrarlanabilir, güvenilir ve verimli olmalıdır. Heterotopik uzuv nakli işlemleri bu kriterleri karşılar ve ortotopik uzuv nakillerine göre daha kolaydır. Kemirgen mikrocerrahi modellerinde ustalaşmak, mikrocerrahi ve hayvan bakımında sağlam bir deneyim gerektirir. Burada sıçanlarda kısmi heterotopik osteomiyokutanöz kapak naklinin güvenilir ve tekrarlanabilir bir modeli, ameliyat sonrası sonuçları ve potansiyel komplikasyonların önlenmesinin yolu bildirilmektedir.

Bu tek operatörlü çalışmada 30 adet singeneik heterotopik kısmi uzuv nakli yapıldı. Başarı, ameliyat sonrası 21. günde VCA yetmezliği veya ötanazi gerektiren komplikasyonların olmaması olarak tanımlandı. Greftin normal evrimi Şekil 3'tetemsil edilir. Alıcıda kısmi uzuv temini ve greft inset için ortalama süre sırasıyla 35 ve 105 dk'ydı; ortalama iskemi süresi 105 dk idi. Takip sırasında iki tip komplikasyon meydana geldi (Tablo 1)-erken veya ge?...

Watch this Scientific Journal Video about Partial Heterotopic Hindlimb Transplantation Model in Rats at JoVE.com

Partial Heterotopic Hindlimb Transplantation Model in Rats

Bu makale sıçanlarda kısmi heterototopik osteomiyokutanöz flap transplantasyon protokolünü ve orta vadeli takipte potansiyel sonuçlarını sürmektedir.

Sıçanlarda Kısmi Heterotopik Hindlimb Transplantasyon Modeli

Vascularized composite allotransplantations (VCA) represent the most advanced reconstruction option for patients without autologous surgical possibilities ...

Sıçanlarda heterotopik hindlimb transplantasyonunun güvenilir ve tekrarlanabilir cerrahi modelini sunuyoruz. Bu teknik, VCA'da koruma veya immün ret üzerine kısa süreli çalışmalar için idealdir. Adım adım açıklama, kursiyerlerin ameliyata hızlı bir şekilde hakim olmasını sağlayacaktır.Başlamak için, bacağın distal üçte biri olan ayak bileğinin üzerindeki deride çevresel bir kesi yapın. Bipolar kümeser kullanarak saphenöz arteri ve popliteal arterin terminal dalını iskeletleştirin ve dağlayın. Tibial kemik açığa olana kadar gastrocnemius, soleus, tibialis ön ve pazı femoris kaslarını dağlayıp kesin.Sağ kasık kırışıklığında 2,5 santimetrelik bir kesi yapın ve kasık yağ yastığını parçalara ayrıştırın. Kasık bağını kavramak için bir balık kancası retraktörü kullanın. Kasık yağ yastığını sıkma tokaları ile distally tutun ve femoral damarları açığa çıkarmak için yağ yastığını geri alın.Femoral damarları parçalara ayırın, Murphy dallarını kişiselleştirin ve 8/0 naylon bağlarla ligat edin. 27.5'lik bir iğne kullanarak penis dorsal damarındaki heparini enjekte ederek donör sıçanı heparinize edin. Kalça çevresindeki deri kesisini tamamlayın.Biceps femoris ve gluteus superficialis kaslarını dağlamak için bipolar tokmakları kullanın, sonra orta uyluk kemiği uzunluğunda siyatik siniri dağlayın ve kesin. Femur proksimal olarak arka femoral kret seviyesinde ortaya çıkın ve femoral damarları kasık bağı seviyesinde naylon bağlarla lige edin. Femoral arterde ligatürün hemen altında bir arteriotomi gerçekleştirin ve 24 gauge anjiyokatteri yerleştirmek için genişle.Uyluk kemiğinin ön tarafını ortaya çıkarmak için pedilenin altındaki kalan kası dağlatın ve kesin. Kaval kemiğini proksimal olarak kesmek ve uyluk kemiğini mümkün olduğunca distal olarak kesmek için kemik kesiciyi kullanın. Net bir venöz çıkış elde etmek için kısmi arkaliği iki mililitre heparin salin ile yıkayın.Mikrovasküler transfere kadar arkalığı steril bir gazlı bezle buza yerleştirin. Kasık yağ yastığını parçalara ayrıştırın ve femoral damarları açığa çıkarmak için kasık yağ yastığını distal olarak yaslayın. Kasık bağını geri çekmek için bir kanca kullanın ve kasık yağ yastığını distal olarak tutmak için sıkma tokaları kullanın.Femoral damarları parçalara ayırın, Murphy dallarını kişiselleştirin ve gösterildiği gibi naylon bağlarla ligat. Her iki damarı da naylon bağlar kullanarak epigastrik damarların üzerinde ligat edin. Yaklaşık kelepçeleri proksimally yerleştirin, damar lensini genişletin ve heparin salin ile durulayın.Sol kanatta kalçanın üzerinde bir kesi yapın ve kasık kırışıklığına deri altı bir tünel ile deri altı bir cep oluşturun. Kısmi uzuv ve kasık yağ yastığının proksimal kısmını mikrovasküler transfer için deri altı tünelinden geçirin. Naylon dikişler kullanarak venöz ve arteriyel anastomozları gerçekleştirin.Her iki yaklaşık kelepçeyi de çıkarın ve uzuvların yeniden uzasını gözlemleyin. Her anastomozun açıklığını değerlendirmek için her iki damarda bir sağım testi gerçekleştirin. Nakledilen uzvun medial tarafında boyuna bir cilt kesisi yapın ve grefti yerleştirin.Greftin fazla derisini çıkarın ve emilebilir 4/0 dikişler kullanarak yarayı ayrı dikişler ve çalışan bir dikişle kapatın. Nakledilen uzuv ve alıcının kasık yağ pedlerini iki ayrı emilebilir dikiş kullanarak birlikte dikin ve mikrovasküler anastomozun son kontrolünden sonra kasık kırışıklığını kapatın. Heterotopik hindlimb modelinin evrimi çalışmanın sonuna kadar izlendi.Saç büyümesi ameliyat sonrası ilk hafta gözlendi ve iki hafta sonra büken geri çekilme ortaya çıktı. Vasküler kompozit allotransplantasyon yetmezliği mikrovasküler tromboz nedeniyle ameliyat sonrası ilk haftada ortaya çıkabilir. Venöz tromboz, vakaların% 20'sinde erken ötanazinin nedeniydi ve bunların hepsi ameliyat sonrası beşinci günden önce meydana geldi.Cilt mavi görünüyordu ve her geçen gün daha da koyulaştı. Kendi kendine sakatlama, anlamsız greftlerde ciddi bir endişe kaynağıdır ve genellikle ameliyat sonrası ikinci ve yedinci gün arasında ortaya çıkar. Greft yüzeyinin üçte birinden daha azıyla sınırlıysa ve sadece ciltle ilgiliyse, emilemez dikişler kullanılarak cerrahi debridman ve dikiş personel veteriner hekimle tartışılabilir.Kendi kendini sakatlamanın önlenmesi, ameliyat sonrası yedinci güne kadar boyuna dikilmiş bir e-yaka kullanılmasına ve hayvanın cerrahi yaralarındaki herhangi bir kan veya kabuğun temizlenmesine dayanır. Greftin birden fazla katmanının şiddetli otofajisi, hayvanın ötanazisine yol açar. Dermal kistler ameliyat sonrası 14 gün sonra, bazen fistülden önce bir kese nekrotik merkezle ortaya çıktı.Greft yerleşiminin hayvanın ambülatör olmasını engellememesini ve pedilenin greft inset sırasında bükülmemesini veya sıkı olmamasını sağlamak çok önemlidir. Ekibimiz nakil öncesi temin edilen uzuvlarda koruma çalışmaları yaptı. Farklı sürelerde statik soğuk hava deposunun etkileri ve farklı uzuv perfüzyon protokolleri değerlendirilmiştir.

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Murine Model of CD40-activation of B cells

Murin Model B hücreleri CD40 aktivasyonu

Research on B cells has shown that CD40 activation improves their antigen presentation capacity. When stimulated with interleukin-4 and CD40 ligand ...

Orthotopic Hind-Limb Transplantation in Rats

Sıçanlarda Ortotopik Hind-Ekstremite Nakli

Composite tissue allotransplantation (CTA) now represents a valid therapeutic option after the loss of a hand, forearm or digits and has become a novel ...

In vivo Imaging Method to Distinguish Acute and Chronic Inflammation

In vivo Imaging Method to Distinguish Acute and Chronic Inflammation

In vivo Görüntüleme Yöntemi Akut ve Kronik İltihap ayırt

Inflammation is a fundamental aspect of many human diseases. In this video report, we demonstrate non-invasive bioluminescence imaging techniques that ...

Long Term Chronic Pseudomonas aeruginosa Airway Infection in Mice

Long Term Chronic Pseudomonas aeruginosa Airway Infection in Mice

Uzun Vadeli Kronik<em&gt; Pseudomonas aeruginosa</emFarelerde&gt; Havayolu Enfeksiyon

A mouse model of chronic airway infection is a key asset in cystic fibrosis (CF) research, although there are a number of concerns regarding the model ...

In Vitro and In Vivo Assessment of T, B and Myeloid Cells Suppressive Activity and Humoral Responses from Transplant Recipients

In Vitro and In Vivo Assessment of T, B and Myeloid Cells Suppressive Activity and Humoral Responses from Transplant Recipients

Vitro ve In Vivo değerlendirme T, B ve Myeloid hücrelerin süpresif etkinlik ve nakli alıcılardan gelen Humoral yanıt

The main concern in transplantation is to achieve specific tolerance through induction of regulatory cells. The understanding of tolerance mechanisms ...

A Recovery Cardiopulmonary Bypass Model Without Transfusion or Inotropic Agents in Rats

Kan nakli veya Sıçanlarda Inotropic ajanlar olmadan kurtarma Kardiyopulmoner Bypass modeli

Cardiopulmonary bypass (CPB) is indispensable in cardiovascular surgery. Despite the dramatic refinement of CPB technique and devices, multi-organ ...

An Immunological Model for Heterotopic Heart and Cardiac Muscle Cell Transplantation in Rats

Sıçanlarda Heterotopik Kalp ve Kardiyak Kas Hücre Nakli için İmmünolojik Model

Heterotopic heart transplantation in rats has been a commonly used model for diverse immunological studies for more than 50 years. Several modifications ...

Optimization of the Cuff Technique for Murine Heart Transplantation

Murin Kalp Nakli için Manşet Tekniğinin Optimizasyonu

Murine cardiac transplantation has been performed for more than 40 years. With advancements in microsurgery, certain new techniques have been used to ...

Bone Marrow Transplantation Procedures in Mice to Study Clonal Hematopoiesis

Klonal Hematopoez Çalışması İçin Farelerde Kemik İliği Nakli İşlemleri

Clonal hematopoiesis is a prevalent age-associated condition that results from the accumulation of somatic mutations in hematopoietic stem and progenitor ...

Purification and Expansion of Mouse Invariant Natural Killer T Cells for in vitro and in vivo Studies

In vitro ve in vivo Çalışmalar için Fare Değişmez Doğal Öldürücü T Hücrelerinin Saflaştırılması ve Genişlemesi

Invariant Natural Killer T (iNKT) cells are innate-like T Lymphocytes expressing a conserved semi-invariant T cell receptor (TCR) specific for self or ...