Name: assembly of cell mimicking supported and suspended lipid bilayer models for the study of molecular interactions
Uploaded: 2021-08-03T13:00:00
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本材料基于美国国家科学基金会根据授予A.S.的第1942418号赠款以及授予C.M.B.H.的国家科学基金会研究生研究奖学金（第1644760号赠款）支持的工作。本材料中表达的任何意见，发现和结论或建议均为作者的观点，并不一定反映美国国家科学基金会的观点。作者感谢Noel Vera-González博士的脂质囊泡表征数据采集。作者感谢罗伯特·赫特教授（布朗大学）使用他的Zetasizer。作者感谢布朗大学质谱设施，特别是沈敦立博士在量化脂质组成方面的帮助。

1. 发展单脂囊泡
<ol><li>薄膜水合法<ol>
<li>脂质储备溶液的制备和储存 注：使用氯仿的所有步骤都需要在化学通风橱中执行。氯仿应始终使用溶剂安全的碳纤维移液器吸头进行移液。含有氯仿的溶液应始终储存在玻璃瓶中。<ol>
<li>通过将适当体积的氯仿加入含有脂质粉末的小瓶中并充分混合，制备10mg / mL脂质储备溶液。例如，将20毫升氯仿加入200毫克L-α磷脂酰胆碱（鸡蛋，鸡肉）（鸡蛋PC）。?...

该协议允许形成脂质囊泡，支持的脂质双层和悬浮脂质双层。在这里，提出了形成这些结构的关键步骤。当形成脂质囊泡时，重要的是挤出高于脂质39的转变温度 。当低于转变温度时，脂质物理上存在于其有序的凝胶相39中。在这个有序阶段，碳氢化合物脂质尾部完全伸展，允许紧密包装，使挤出具有挑战性39。当加热到转变温度以上时，脂质...

细胞膜主要由磷脂，胆固醇和蛋白质组成，是所有活细胞1的重要组成部分。在脂质两亲性的驱动下，细胞膜起到保护屏障的作用，并调节细胞如何与其周围环境相互作用2。一些细胞过程依赖于膜1、2的脂质和蛋白质组成。例如，细胞膜相互作用对于有效的药物递送很重要3。药品、生物制剂、纳米材料、生物毒素和环境毒物都会影响细胞膜的完整性，从而影响细胞功能4。基于细胞膜脂质组成的体外细胞模拟膜模型的构建有可能提供简单的工具，以大大增强对这些材料对细胞的潜在影响的研究。
模型脂质双层包括脂质囊泡、支持脂质双层和悬浮脂质双层。负载脂质双分子层是磷脂细胞膜的模型，通常用于生物技术应用，其中脂质囊泡在支撑的底物材料5，6，7，8，9上破裂。用于监测双层形成的一种常用技术是具有耗散监测功能的石英晶体微量天平（QCM-D），它检查囊泡的吸附与原位8，10，11，12，13，14的体积液体性质的比较.以前，QCM-D已被用于证明在流动条件下，一旦在表面上实现磷脂酰胆碱（PC）脂质囊泡的关键囊泡覆盖，它们就会自发破裂成刚性脂质双层15。先前的工作还研究了具有不同脂质组成的支持脂质双层形成16，脂质蛋白17，18，19的掺入，并利用聚合物垫20，产生能够模仿细胞膜功能各个方面的负载脂质双层。
脂质双分子层已被用于通过改变磷脂，胆固醇和糖脂成分来模仿从亚细胞到器官水平（包括线粒体，红细胞和肝细胞膜）的各种生物屏障21。这些更复杂的多脂质囊泡可能需要额外的方法来实现囊泡破裂，这取决于脂质组成。例如，以前的研究已经利用来自丙型肝炎病毒的非结构蛋白5A的α螺旋（AH）肽，通过破坏吸附的脂质囊泡22，23来诱导双层的形成。使用这种AH肽，支持脂质双层模仿胎盘细胞先前已经形成24。支持脂质双分子层在生物医学应用中的巨大潜力已经通过分子和纳米颗粒运输25、26、环境毒物相互作用27、蛋白质组装和功能17、18、19、肽排列和插入28、29、药物筛选30和微流体平台31的研究得到了证明。
悬浮脂质双分子层已通过平行人工膜渗透率测定法（PAMPA）用于药物筛选研究，其中脂质双分子层悬浮在多孔疏水插入物32，33，34，35上。PAMPA脂质模型已经开发用于不同的生物界面，包括血脑，颊，肠和透皮界面36。通过结合支持的脂质双分子层和PAMPA技术，可以彻底研究化合物在所需组织或细胞类型的脂质成分中的吸附，渗透性和包埋。
该协议描述了 体外 细胞膜脂质双层模型的制备和应用，以研究几种分子相互作用。详细介绍了单脂和多脂支持和悬浮脂质双分子层的制备。为了形成支持的脂质双层，首先使用薄膜水合和挤出方法开发脂质囊泡，然后进行物理化学表征。讨论了使用QCM-D监测形成支持的脂质双层和制造用于PAPA的悬浮脂质膜。最后，检查用于开发更复杂的细胞模拟膜的多脂囊泡。使用两种类型的制造脂质膜，该协议演示了如何使用该工具来研究分子相互作用。总体而言，该技术构建了具有高可重复性和多功能性的模拟脂质双分子层的细胞。

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>1-palmitoyl-2-oleoyl-glycero-3-phosphocholine&#160; (POPC, 16:0-18:1 PC)</td>
			<td>Avanti Polar Lipids</td>
			<td>850457</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1-palmitoyl-2-oleoyl-sn-glycero-3-phospho-L-serine (sodium salt) (POPS, 16:0-18:1 PS)</td>
			<td>Avanti Polar Lipids</td>
			<td>840034</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1-palmitoyl-2-oleoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine (16:0-18:1 PE)</td>
			<td>Avanti Polar Lipids</td>
			<td>850757</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1,2-dioleoyl-sn-glycero-2-phospho-L-serine (DOPS, 18:1 PS)</td>
			<td>Avanti Polar Lipids</td>
			<td>840035</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1,2-dioleoyl-sn-glycero-3-phosphocholine (DOPC, 18:1 (&#916;9-Cis) PC)</td>
			<td>Avanti Polar Lipids</td>
			<td>850375</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1,2-dioleoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine (DOPE, 18:1 (&#916;9-Cis) PE)</td>
			<td>Avanti Polar Lipids</td>
			<td>850725</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1,2-distearoyl-sn-glycero-3-ethylphosphocholine (chloride salt) (18:0 EPC (Cl Salt))</td>
			<td>Avanti Polar Lipids</td>
			<td>890703</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3 mL Luer-Loc syringes</td>
			<td>BD</td>
			<td>309657</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>40 mL sample vial, amber with polytetrafluoroethylene (PTFE)/rubber liner</td>
			<td>Duran Wheaton Kimble</td>
			<td>W224605</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acetonitrile</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>271004</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alconox</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>50-821-781</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ammonium formate</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>LSAC70221</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>C18, 3.5 um x 50 mm column, SunFire</td>
			<td>Waters</td>
			<td>&#160;186002551</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chloroform</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>LSAC288306</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cuvette UV Micro LCH 8.5 mm, 50 um, RPK</td>
			<td>Sarstedt</td>
			<td>67.758.001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Di(2-ethylhexyl) phthalate (DEHP)</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>36735</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dimethyl sulfoxide (DMSO)</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>LSAC472301</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol</td>
			<td>Pharmco</td>
			<td>111000200</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Filter supports, 10 mm</td>
			<td>Avanti Polar Lipids</td>
			<td>610014</td>
			<td>Size for mini extruder</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Folded capillary zeta cell</td>
			<td>Malvern Panalytical</td>
			<td>DTS1070</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isopropanol</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>190764-4L</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Kimwipes</td>
			<td>Kimberly Clark</td>
			<td>34256</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L-&#945;-phosphatidylinositol (soy) (Soy PI)</td>
			<td>Avanti Polar Lipids</td>
			<td>840044</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L-&#945;-phosphitidylcholine (Egg, Chicken)</td>
			<td>Avanti Polar Lipids</td>
			<td>840051</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LiposoFast &#174; LF-50</td>
			<td>Avestin, Inc.</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Methanol</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>179337 - 4L</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mini-extruder set with holder/heating block</td>
			<td>Avanti Polar Lipids</td>
			<td>610000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MultiScreen-IP Filter Plate, 0.45&#160;&#181;m, clear, sterile</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>MAIPS4510</td>
			<td>for PAMPA studies</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nitrogen gas, ultrapure</td>
			<td>TechAir</td>
			<td>NI T5.0</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nuclepore hydrophilic membranes, polycarbonate, 19 mm, 0.1 um</td>
			<td>Whatman</td>
			<td>800309</td>
			<td>Size for mini extruder</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nuclepore hydrophilic membranes, polycarbonate, 25 mm, 0.1 um</td>
			<td>Whatman</td>
			<td>110605</td>
			<td>Size for large extruder</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Parafilm</td>
			<td>Bemis</td>
			<td>PM999</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphate buffer saline (PBS), 10x</td>
			<td>Genesee Scienfitic</td>
			<td>25-507X</td>
			<td>Dilute to 1x</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Qsoft 401 software</td>
			<td>Biolin Scientific</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Quartz Crystal Microbalance with Dissipation Q-Sense Analyzer</td>
			<td>Biolin Scientific</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scintillation vials, borosilicate glass vials, 20 mL</td>
			<td>Duran Wheaton Kimble</td>
			<td>986561</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Silicon Dioxide, thin QSensors</td>
			<td>Biolin Scientific</td>
			<td>QSX 303</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium chloride (NaCl)</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>LSACS5886</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium dodecyl sulfate (SDS)</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>BP166-100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Solvent Safe pipette tips</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>S8064</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sphingomyelin (Egg, Chicken)</td>
			<td>Avanti Polar Lipids</td>
			<td>860061</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trizma base</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>LSACT1503</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypsin-ethylenediaminetretaacetic acid</td>
			<td>Caisson Labs</td>
			<td>TRL01-6X100ML</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Whatman drain disc, 25 mm</td>
			<td>Whatman</td>
			<td>230600</td>
			<td>Size for large extruder</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Zetasizer ZS90</td>
			<td>Malvern Panalytical</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Zetasizer 7.01 software</td>
			<td>Malvern Panalytical</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

assembly of cell mimicking supported and suspended lipid bilayer models for the study of molecular interactions

模型细胞膜是一种有用的筛选工具，其应用范围从早期药物发现到毒性研究。细胞膜是所有细胞类型的重要保护屏障，将内部细胞成分与细胞外环境分开。这些膜主要由脂质双层组成，其包含外部亲水性头基团和内疏水尾基团，以及各种蛋白质和胆固醇。脂质本身的组成和结构在调节生物功能方面起着至关重要的作用，包括细胞与细胞微环境之间的相互作用，其中可能含有药物，生物毒素和环境毒物。在这项研究中，描述了配制单脂质和多脂支持和悬浮细胞模仿脂质双分子层的方法。以前，开发了单脂磷脂酰胆碱（PC）脂质双分子层以及多脂胎盘滋养层启发的脂质双分子层，用于理解分子相互作用。在这里，将介绍实现这两种类型的双层模型的方法。对于模拟多脂双分子层的细胞，首先通过从原代细胞或细胞系中提取脂质，然后通过液相色谱-质谱（LC-MS）确定所需的脂质组成。使用该组合物，使用薄膜水合和挤出方法制备脂质囊泡，并表征其流体动力学直径和zeta电位。然后，可以使用具有耗散监测功能的石英晶体微量天平（QCM-D）和多孔膜分别用于平行人工膜渗透率测定（PAMPA）形成支撑和悬浮的脂质双分子层。代表性结果突出了 体外 细胞膜脂质双层模型的再现性和多功能性。所提出的方法可以帮助快速，方便地评估各种分子和大分子与细胞膜的相互作用机制，例如渗透，吸附和嵌入，有助于筛选候选药物和预测潜在的细胞毒性。

该协议详细介绍了形成支持和悬浮脂质双层的方法（图1）。形成支持脂质双层的第一步是发育脂质囊泡。小型挤出机允许制备小体积的脂质囊泡（1 mL或更少），而大型挤出机允许在一批中制备5-50 mL脂质囊泡。由小型或大型挤出机形成的单脂质囊泡的尺寸分布如图 2A所示。由于大型挤出机使用高压N2 气体将囊泡溶液推过聚碳酸酯膜，脂质囊泡?...

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Assembly of Cell Mimicking Supported and Suspended Lipid Bilayer Models for the Study of Molecular Interactions

该协议描述了模拟单脂质和多脂质囊泡，支持脂质双分子层和悬浮脂质双分子层的细胞的形成。这些 体外 模型可以适应于结合各种脂质类型，并可用于研究各种分子和大分子相互作用。

细胞模拟支持和悬浮脂质双分子层模型的组装用于分子相互作用研究

Model cell membranes are a useful screening tool with applications ranging from early drug discovery to toxicity studies. The cell membrane is a crucial ...

该协议中描述的脂质双层膜的构建可用于获取有关膜与药物，环境毒物甚至生物化合物相互作用的关键信息。这些技术可用于制造具有不同液体复杂性的膜，并评估膜内的化合物渗透性，吸收和嵌入。首先，将适当体积的脂质储备溶液加入干净的玻璃瓶中，以在补液后达到每毫升2.5毫克的最终囊泡浓度。使用氮气流从脂质溶液中除去氯仿。为确保完全去除氯仿，将干燥的脂质膜连接到真空中至少四个小时。用所需体积的Tris氯化钠缓冲液重新水合干燥的脂质膜，以产生每毫升2.5毫克的最终囊泡浓度，并涡旋约15至30秒。将囊泡悬浮液转移到装有干冰的容器中，直到冷冻约30分钟。样品完全冷冻后，在30至40摄氏度的水浴中解冻悬浮液。涡旋解冻的囊泡悬浮液。要制造一毫升或更少的囊泡，请获得一台小型挤出机。用超纯水预湿过滤器支架，然后将其放置在O形圈内的膜支撑表面上。对第二个内部膜支撑重复上述步骤。将一个内部膜支架定位到挤出机外壳中。将一个100纳米聚碳酸酯膜直接放在过滤器支撑上方的内部膜支架上。将第二个内部膜支架定位到挤出机外壳中，O形圈和过滤器支撑侧面向聚碳酸酯膜。将聚四氟乙烯轴承连接到保持架结中，并用挤出机外壳将其拧紧。将挤出机夹入加热块中。将脂质囊泡悬浮液装入其中一个注射器中，并将注射器放入挤出机加热块中，将针头完全插入挤出机的一端。将第二个空注射器插入另一侧，并使用加热块上的臂夹锁定两个注射器。慢慢地将囊泡悬浮液推入空注射器中，然后推回原始注射器中。重复20次，总共21次通过聚碳酸酯膜。将脂质囊泡转移到干净的玻璃瓶中储存。要挤出5至50毫升的囊泡，通过将大孔筛支撑，中心盘，排水盘和聚碳酸酯膜放入挤出机下部支撑物中的空间中来组装大型挤出机。使用四个螺钉连接挤出机的上部和下部支撑并拧紧。将挤出机单元连接到样品筒上，方法是将其擦洗到底部并用扳手拧紧以固定。在将样品加入样品筒中之前，用超纯水填充样品筒并通过挤出机单元挤出水。将脂质囊泡悬浮液加入样品筒中，并将顶部拧紧。缓慢增加压力，直到样品开始以每秒约两到三滴的速度从挤出机单元滴入干净的玻璃中。一旦所有样品都被挤出，关闭氮气供应，并通过缓慢打开泄压阀释放样品筒中的压力。将脂质囊泡倒回样品筒中，并重复上一步9次，共10次挤出。将囊泡悬浮液装入适当的比色皿中，然后插入动态光散射仪，输入样品详细信息，并使用相关软件进行测量。将zeta细胞放入样品室中，确保电极接触，并合上样品盒盖。在相关软件中，输入样品详细信息并收集测量值。将二氧化硅编码的石英晶体传感器插入流动模块，确保晶体上的T形与模块上的T形对齐，并将流动模块拧紧。在具有多个腔室的仪器中，可以平行形成额外的双层。将入口和出口管连接到流量模块和泵。将管道放入保温罩中，然后关闭分析仪系统的盖子。在泵的出口处放置一个废物容器，以收集废液。要进行清洁，请首先打开泵并将流速设置为每分钟400微升。将进气管插入超纯水中，流经模块5至10毫升。将管道切换到 SDS，并通过模块流动 5 至 10 毫升。将管道切换回超纯水，并通过模块流动10至20毫升。最后，将空气流过模块，直到没有剩余的溶液被收集。从流量模块中取出传感器，然后用超纯水冲洗传感器。用氮气流驱动传感器和流量模块，确保电极始终没有任何液体。在化学通风橱中，将二氧化硅涂层的石英晶体传感器插入紫外线或臭氧清洁仪器中。打开仪器，让治疗至少两分钟。小心地卸下传感器，然后将其放回流量模块中。打开分析仪以连接相关软件，并将温度设置为所需值以形成支撑脂质双层。允许温度稳定到所需的输入。在开始测量之前，配置测量并查找所有传感器共振频率以及泛音3、5、7、9、11和13的耗散。让Tris氯化钠流经模块5至10分钟，确保液体中的基线频率变化或ΔF和耗散变化或Delta D值保持稳定。停止泵，从Tris氯化钠溶液中取出入口管，并小心地将其插入脂质囊泡溶液中。回流五秒钟以除去进气管中的任何气泡，然后继续向前流动。在软件中重新启动测量以将基线归零。流动脂质囊泡，直到在数据采集软件中实时观察到双层形成。然后重复此步骤，将入口管从脂质囊泡更换回Tris氯化钠缓冲液。将五微升脂质溶液加入供体室中，这是一个多孔聚偏二氟乙烯96孔多屏过滤板，孔径为0.45微米。立即将滤板浸入受体室，该受体室是含有300微升磷酸盐缓冲盐水的运输接收器板。将200微升磷酸盐缓冲盐水加入转运供体室。按照前面的步骤停止泵并将入口管更换为脂质囊泡溶液并观察双层形成，然后将入口管更换为α螺旋或AH肽溶液。将溶液引入流量模块，直到从新的解决方案添加中观察到频率变化和耗散变化。停止泵，让AH肽与囊泡一起孵育10分钟。将入口管切换到Tris氯化钠，并开始流动以从破裂的囊泡中除去AH肽，从而成功形成脂质双层。首先，流动分子溶剂，然后将入口管切换到含有目标分子的溶液中并流动至少五分钟。如果需要，停止流动，让含有所需分子的液体与双层一起孵育。将进气管更换回分子溶剂。流动至少五分钟，然后将入口管切换到Tris氯化钠，并流动至少五分钟。在软件中，停止测量，保存文件，然后停止泵。对于单脂悬浮双分子层或多脂悬浮双分子层，立即从供体滤板室中取出PBS，并用200微升的测试溶液替换。立即浸没在装有300微升PBS的新型传输接收器板中。在25摄氏度下温和摇动孵育两小时后，从供体和受体室收集150微升溶液。根据该分子的性质，使用适当的方法测量两个样品中的分子浓度。比较了单脂卵PC囊泡的大小，多分散性和Zeta电位，以及两种多脂质囊泡组合物。卵PC囊泡和多脂一囊泡的大小分布几乎相同。卵子和PC多脂一囊泡均带负电荷，而多脂两囊泡带正电荷。单脂卵PC囊泡容易被表面吸收，如频率变化减小，消散变化增加，随后自发破裂。多脂囊泡被表面吸收，但需要加入AH肽才能使囊泡破裂，导致脂质双层形成。使用支持的脂质双分子层，可以在引入目的化合物之前和之后分析频率变化和耗散变化。例如，研究了DEHP和环境毒物与单层和多层的相互作用。两种脂质双层类型的DEHP吸收水平相似。然而，在双分子层之间观察到耗散变化的差异，与多脂一双层相比，蛋PC双层的耗散变化更大。单脂和多脂一双层的渗透很少。按照这一过程，可以开发各种细胞模拟脂质双分子层，以实现与从药物到环境毒物等化合物的分子相互作用的无细胞筛选。

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Synthesis, Assembly, and Characterization of Monolayer Protected Gold Nanoparticle Films for Protein Monolayer Electrochemistry

单层的合成，装配和表征蛋白质单分子膜的电化学保护的金纳米粒子薄膜

Colloidal gold nanoparticles protected with alkanethiolate ligands called monolayer protected gold clusters (MPCs) are synthesized and subsequently ...

科研

生物工程

Adhesion Frequency Assay for In Situ Kinetics Analysis of Cross-Junctional Molecular Interactions at the Cell-Cell Interface

Adhesion Frequency Assay for In Situ Kinetics Analysis of Cross-Junctional Molecular Interactions at the Cell-Cell Interface

粘附频率含量为原位跨交界的分子相互作用，在细胞与细胞界面的动力学分析

The micropipette adhesion assay was developed in 1998 to measure two-dimensional (2D) receptor-ligand binding kinetics1. The assay uses a human red blood ...

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凝血因子VIII的脂质纳米管螺旋组织

Cryo-electron microscopy (Cryo-EM)1 is a powerful approach to investigate the functional structure of proteins and complexes in a hydrated state and ...

Lipid Bilayer Vesicle Generation Using Microfluidic Jetting

脂质双层囊泡代使用微流控喷射

Bottom-up synthetic biology presents a novel approach for investigating and reconstituting biochemical systems and, potentially, minimal organisms. This ...

Preparation of Mica Supported Lipid Bilayers for High Resolution Optical Microscopy Imaging

支持的脂双层云母制备的高分辨率光学显微成像

Supported lipid bilayers (SLBs) are widely used as a model for studying membrane properties (phase separation, clustering, dynamics) and its interaction ...

Atomic Force Microscopy Imaging and Force Spectroscopy of Supported Lipid Bilayers

原子力显微镜成像和支持的脂质双层力谱

Atomic force microscopy (AFM) is a versatile, high-resolution imaging technique that allows visualization of biological membranes. It has sufficient ...

Biomembrane Fabrication by the Solvent-assisted Lipid Bilayer (SALB) Method

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生物膜制作的溶剂辅助脂质双分子层（SALB）方法

In order to mimic cell membranes, the supported lipid bilayer (SLB) is an attractive platform which enables in vitro investigation of membrane-related ...

Preparation of 3D Collagen Gels and Microchannels for the Study of 3D Interactions In Vivo

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3D胶原凝胶和微通道3D相互作用的研究准备<em&gt;在体内</em

Historically, most cellular processes have been studied in only 2 dimensions.  While these studies have been informative about general cell signaling ...

Automated Lipid Bilayer Membrane Formation Using a Polydimethylsiloxane Thin Film

自动化脂双层膜的形成使用聚二甲基硅氧烷薄膜

An artificial lipid bilayer, or black lipid membrane (BLM), is a powerful tool for studying ion channels and protein interactions, as well as for ...

Micropatterning and Assembly of 3D Microvessels

缩微和3D微血管大会

In vitro platforms to study endothelial cells and vascular biology are largely limited to 2D endothelial cell culture, flow chambers with polymer or glass ...