Name: multifactorial assessment of motor behavior in rats after unilateral sciatic nerve crush injury
Uploaded: 2021-07-31T14:30:00
Duration: 14 min 50 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Multifactorial Assessment of Motor Behavior in Rats after Unilateral Sciatic Nerve Crush Injury at JoVE.com

وقد دعم هذا العمل وزارة التعليم والبحوث الاتحادية الألمانية (BMBF DysTract to C.W.I.) والمركز متعدد التخصصات للبحوث السريرية (IZKF) في جامعة فورتسبورغ (N-362 إلى C.W.I.; Z2-CSP3 إلى L.R.). وبالإضافة إلى ذلك، تلقى هذا المشروع تمويلا من برنامج الاتحاد الأوروبي للأبحاث والابتكار في أفق 2020 في إطار برنامج EJP RD COFUND-EJP N° 825575 (EurDyscover to J.V.)، ومن مؤسسة VERUM. وعلاوة على ذلك، يتم تمويل C.W.I. من قبل دويتشه فورتشونجسجيمينشافت (DFG، مؤسسة ريسيتش الألمانية) مشروع معرف 424778381-TRR 295، من قبل دويتشه ستيفتونغ Neurologie وباركنسونفوندس. L.R. بالإضافة إلى ذلك بدعم من مؤسسة Dystonia الطبية Reseach.
يشكر المؤلفون كيالي روم وفيرونيكا سينغر وهيكي مينزيل ولويزا فريس على مساعدتهم التقنية وكذلك هيلغا برونر على رعاية الحيوانات.

<ol>
	<li>Iannaccone, P. M., Jacob, H. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rats.">Rats.</a> Disease Models &amp; Mechanisms. 2 (5-6), 206-210 (2009).</li><li>Phifer-Rixey, M., Nachman, M. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Insights+into+mammalian+biology+from+the+wild+house+mouse+Mus+musculus.">Insights into mammalian biology from the wild house mouse Mus musculus.</a> Elife. 4, (2015).</li><li>Musacchio, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Subthalamic+nucleus+deep+brain+stimulation+is+neuroprotective+in+the+A53T+alpha-synuclein+Parkinson's+disease+rat+model.">Subthalamic nucleus deep brain stimulation is neuroprotective in the A53T alpha-synuclein Parkinson's disease rat model.</a> Annals of Neurology. 81 (6), 825-836 (2017).</li><li>Ip, C. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tor1a+/-+mice+develop+dystonia-like+movements+via+a+striatal+dopaminergic+dysregulation+triggered+by+peripheral+nerve+injury.">Tor1a+/- mice develop dystonia-like movements via a striatal dopaminergic dysregulation triggered by peripheral nerve injury.</a> Acta Neuropathologica Communications. 4 (1), 108 (2016).</li><li>Rauschenberger, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Striatal+dopaminergic+dysregulation+and+dystonia-like+movements+induced+by+sensorimotor+stress+in+a+pharmacological+mouse+model+of+rapid-onset+dystonia-parkinsonism.">Striatal dopaminergic dysregulation and dystonia-like movements induced by sensorimotor stress in a pharmacological mouse model of rapid-onset dystonia-parkinsonism.</a> Experimental Neurology. 323, 113109 (2020).</li><li>Klein, A., Wessolleck, J., Papazoglou, A., Metz, G. A., Nikkhah, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Walking+pattern+analysis+after+unilateral+6-OHDA+lesion+and+transplantation+of+foetal+dopaminergic+progenitor+cells+in+rats.">Walking pattern analysis after unilateral 6-OHDA lesion and transplantation of foetal dopaminergic progenitor cells in rats.</a> Behavioural Brain Research. 199 (2), 317-325 (2009).</li><li>Kim, D. H., Murovic, J. A., Tiel, R., Kline, D. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Management+and+outcomes+in+353+surgically+treated+sciatic+nerve+lesions.">Management and outcomes in 353 surgically treated sciatic nerve lesions.</a> Journal of Neurosurgery. 101 (1), 8-17 (2004).</li><li>Kline, D. G., Kim, D., Midha, R., Harsh, C., Tiel, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Management+and+results+of+sciatic+nerve+injuries:+a+24-year+experience.">Management and results of sciatic nerve injuries: a 24-year experience.</a> Journal of Neurosurgery. 89 (1), 13-23 (1998).</li><li>Kaplan, H. M., Mishra, P., Kohn, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+overwhelming+use+of+rat+models+in+nerve+regeneration+research+may+compromise+designs+of+nerve+guidance+conduits+for+humans.">The overwhelming use of rat models in nerve regeneration research may compromise designs of nerve guidance conduits for humans.</a> Journal of Materials Science: Materials in Medicine. 26 (8), 226 (2015).</li><li>Bauder, A. R., Ferguson, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reproducible+mouse+sciatic+nerve+crush+and+subsequent+assessment+of+regeneration+by+whole+mount+muscle+analysis.">Reproducible mouse sciatic nerve crush and subsequent assessment of regeneration by whole mount muscle analysis.</a> Journal of Visualized Experiments. (60), e3606 (2012).</li><li>Savastano, L. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sciatic+nerve+injury:+a+simple+and+subtle+model+for+investigating+many+aspects+of+nervous+system+damage+and+recovery.">Sciatic nerve injury: a simple and subtle model for investigating many aspects of nervous system damage and recovery.</a> Journal of Neuroscience Methods. 227, 166-180 (2014).</li><li>Menorca, R. M., Fussell, T. S., Elfar, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nerve+physiology:+mechanisms+of+injury+and+recovery.">Nerve physiology: mechanisms of injury and recovery.</a> Hand Clinics. 29 (3), 317-330 (2013).</li><li>Luis, A. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neural+cell+transplantation+effects+on+sciatic+nerve+regeneration+after+a+standardized+crush+injury+in+the+rat.">Neural cell transplantation effects on sciatic nerve regeneration after a standardized crush injury in the rat.</a> Microsurgery. 28 (6), 458-470 (2008).</li><li>Knorr, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+evolution+of+dystonia-like+movements+in+TOR1A+rats+after+transient+nerve+injury+is+accompanied+by+dopaminergic+dysregulation+and+abnormal+oscillatory+activity+of+a+central+motor+network.">The evolution of dystonia-like movements in TOR1A rats after transient nerve injury is accompanied by dopaminergic dysregulation and abnormal oscillatory activity of a central motor network.</a> Neurobiology of Disease. , 105337 (2021).</li><li>Quartarone, A., Hallett, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Emerging+concepts+in+the+physiological+basis+of+dystonia.">Emerging concepts in the physiological basis of dystonia.</a> Movement Disorders. 28 (7), 958-967 (2013).</li><li>Metz, G. A., Whishaw, I. Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+ladder+rung+walking+task:+a+scoring+system+and+its+practical+application.">The ladder rung walking task: a scoring system and its practical application.</a> Journal of Visualized Experiments. (28), e1204 (2009).</li><li>Metz, G. A., Whishaw, I. Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cortical+and+subcortical+lesions+impair+skilled+walking+in+the+ladder+rung+walking+test:+a+new+task+to+evaluate+fore-+and+hindlimb+stepping,+placing,+and+co-ordination.">Cortical and subcortical lesions impair skilled walking in the ladder rung walking test: a new task to evaluate fore- and hindlimb stepping, placing, and co-ordination.</a> Journal of Neuroscience Methods. 115 (2), 169-179 (2002).</li><li>Johansson, B. B., Ohlsson, A. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Environment,+social+interaction,+and+physical+activity+as+determinants+of+functional+outcome+after+cerebral+infarction+in+the+rat.">Environment, social interaction, and physical activity as determinants of functional outcome after cerebral infarction in the rat.</a> Experimental Neurology. 139 (2), 322-327 (1996).</li><li>Ohwatashi, A., Ikeda, S., Harada, K., Kamikawa, Y., Yoshida, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Exercise+enhanced+functional+recovery+and+expression+of+GDNF+after+photochemically+induced+cerebral+infarction+in+the+rat.">Exercise enhanced functional recovery and expression of GDNF after photochemically induced cerebral infarction in the rat.</a> EXCLI Journal. 12, 693-700 (2013).</li></ol>

وليس لدى صاحبي البلاغ ما يكشفان عنه.

يوفر بروتوكول التقييم السلوكي هذا نظرة عامة على المزايا والعيوب بالإضافة إلى قراءات محتملة لبطارية الاختبار السلوكي المختارة في نموذج القوارض بعد إصابة سحق العصب الوركي. 
للحصول على نتيجة مقارنة لإصابة سحق العصب الوركي ، فإن تقنية السحق الثابتة إلزامية. استخدام المشبك غير مسننة (الترا غرامة Hemostat) بدلا من ملقط يمكن تحسين اتساق سحق. استخدام المشبك نفسه وكذلك نفس الموقف سحق لضمان ضغط العصب على قدم المساواة. الاستخدام الحصري للمشبك لإصابة سحق والتعامل مع المشبك بعناية يحسن الاتساق. أيضا، إجراء إصابة سحق بعناية. يمكن أن يؤدي تلف إضافي للعصب أثناء الجراحة مثل الجر غير المرغوب فيه للعصب إلى آثار جانبية غير مرغوب فيها مثل التبدل التلقائي. لذلك ، يوصى بإعداد العصب بعناية بالإضافة إلى إدارة مسكن للألم لمدة يومين على الأقل. 
تقييم متعدد العوامل للسلوك الحركي يمكن أن تميز النمط الظاهري بعد إصابة سحق الأعصاب في الفئران على مختلف المستويات. استخدمنا OFT، CatWalk XT تحليل مشية، شعاع المشي مهمة وسلم درجة المشي المهمة. إجراء تجريبي أعمى وتحليل البيانات للمجموعات التجريبية أمر ضروري لهذه التجارب. قبل تقييم السلوك، تم تأقلم الحيوانات في غرفة الاختبار تحت ظروف الاختبار لمدة 30 دقيقة على الأقل. جميع الاختبارات السلوكية المطبقة هنا لها ميزة أن الحرمان من الطعام أو الماء غير مطلوب. تم استخدام نفس المجموعة من الحيوانات في جميع الاختبارات السلوكية الموصوفة. تم إجراء اختبارين سلوكيين مختلفين كحد أقصى لكل في اليوم. إذا تم إجراء الاختبارات السلوكية على فترات منتظمة، انتبه إلى إجراء مماثل، مثل إجراء الاختبار بنفس الترتيب الحيواني وفي نفس الوقت من اليوم. وثمة جانب آخر مهم للتحليل السلوكي هو دورة ليلا نهارا من الفئران. النظر في عكس دورة ليلا نهارا للحصول على مستويات أكثر طبيعية وأعلى من النشاط في دورة النهار (دورة الظلام). هذا يجب أن ينظر خصوصا لقياس السلوك العفوي، مثل OFT. وفي هذه التجربة، لم يكن من الممكن تنفيذ دورة نهارية معكوسة، ولكن تم ضمان التأقلم الكافي مع ظروف الاختبار. الإضاءة المثالية ضرورية لمقاطع الفيديو عالية الدقة لمهمة المشي الحزمة ومهمة المشي الدرجة السلم. لا يمكن الوصول إلى جودة الفيديو العالية هذه عند إجراء التجارب في الظلام. 
يتطلب تقييم المشية أداء مهمة مستمرة. الجانب المهم الأول من أداء المهمة المستمر هو إقناع الحيوانات لعبور الإعداد. لزيادة الحافز، ضع حبيبات الطعام الصغيرة (45 ملغ) في نهاية الإعداد. من أجل الحصول على الحيوانات على دراية الكريات الغذائية، وينبغي تغذية الكريات لهم قبل الاختبار. أيضا، يمكن أن يكون مربع الهدف في نهاية الإعداد مفيدا. يتضمن إعداد CatWalk بالفعل مربع هدف ، ولكن الفئران تتردد أحيانا في دخول مربع الهدف. بدلا من ذلك، يمكنك إضافة قفص صغير في مربع الهدف، ولكن القفص المنزلي من الفئران لا يصلح في مربع الهدف. دع الفئران تعود في القفص لبضع دقائق قبل الاستحواذ. بالإضافة إلى ذلك، قد يتم وضع فأر آخر من نفس القفص المنزلي في مربع المرمى أو في القفص داخل مربع المرمى. تأكد من أن الجرذ الثاني يبقى في منطقة الجزاء ولا يمنع مدخل مربع الهدف. وعلاوة على ذلك، فمن الممكن أيضا لإزالة مربع الهدف من نظام CatWalk ووضع قفص الفئران المنزل في نهاية الممشى، والذي يسمح للجرذ لدخول "أراضي الوطن" بعد كل شوط. لإعداد مهمة المشي شعاع وسلم درجة المشي المهمة، نوصي بإضافة مربع الهدف أو القفص المنزل في نهاية الإعداد. لضمان الاتساق ، يجب تنفيذ CatWalk ، ومهمة المشي الحزمة ، ومهمة المشي الدرجة السلم مرة واحدة على الأقل في الأسبوع مع ستة إلى عشرة أشواط.
على الرغم من أن ليس كل تحليل أسفر عن اختلافات كبيرة في هذه الدراسة، والنظر في أن إدراج الحيوانات المعدلة وراثيا أو مجموعات العلاج يمكن أن تنتج بيانات قيمة التي يمكن أن تميز بين مجموعات من نفس الاختبارات السلوكية. 
لم يكن لإصابة سحق العصب أي تأثير على النشاط الحركي للجرذ ، والذي تم قياسه في خمس دقائق من OFT. Catwalk XT gait analysis هو أداة أكثر موضوعية وحساسية لتحليل المشية ومخلب وإيداع القدم. بعد تدريب مكثف ، تتعلم الفئران عبور ممشى جهاز CatWalk XT إلى الإعدادات الافتراضية. لا تقلل إصابة العصب من قدرة الفئران على عبور الممشى. الحساب التلقائي لمختلف المعلمات يعرض البيانات موضوعيا. ويمكن الحصول على معلومات إضافية باستخدام وحدة "قياسات البصمة التفاعلية" وبالفعل، أسفرت هذه التحليلات عن اختلافات كبيرة في مختلف المعلمات لانتشار إصبع القدم وطول الطباعة وزاوية مخلب لمحور الجسم مقارنة الفئران مع وبدون إصابة الأعصاب.
يمكن تدريب الفئران بسهولة لمهمة المشي شعاع. تم الكشف عن اختلافات في وقت الكمون لعبور الشعاع وفي عدد زلات القدم في كل خطوة من الأطراف الخلفية المصابة بالأعصاب من خلال مقارنة السذاجة مع الفئران المصابة بالسحق. عيب تحليل الفئران المصابة بالأعصاب مع مهمة المشي شعاع هو حجم شعاع. في غضون الأسبوعين الأولين بعد إصابة سحق العصب الوركي ، تحتاج الفئران إلى المساعدة لعبور الشعاع حيث يضعف توازنها. على الرغم من أن بعض الفئران قد تكون قادرة على عبور شعاع، وخطر الإصابات الناجمة عن السقوط مرتفعة. لذلك ينبغي مساعدة الحيوانات المسحوقة بالأعصاب على عبور الشعاع لأول أسبوعين بعد إصابة سحق العصب الوركي أو لفترة أطول ، إذا لزم الأمر. ومع ذلك، من الصعب مقارنة الركض مع وبدون مساعدة. أيضا، التوازن الحركي هو معلمة هامة تقييمها من قبل مهمة المشي شعاع. اعتبرنا هذه المعلمة لا تكون ذات صلة لنموذجنا الفئران سحق العصب. لذلك، تم استبعاد الدرجات التي وصفها Ohwatashi وآخرون ويوهانسون &amp؛ Ohlsson ويمكن استخدامها مع اجتياز شعاع غير مكتملة لتحليل البيانات18،19.
مقياس 7 فئات من ميتز وآخرون يمكن تحليل كل من الأمامية و hindlimbs والتمييز بين مستويات شدة مختلفة من الأخطاء من جميع الأطراف خلال سلم درجة المشي المهمة16،17. من خلال تحليل أبرز الأخطاء ، والتي تشمل الفئات من 0 إلى 2 ، لا يمكن اكتشاف أي اختلافات في الأخطاء في الخطوة الواحدة في الأطراف الخلفية عند مقارنة فئران wt المصابة بالأعصاب مع فئران wt السذاجة. وعلاوة على ذلك، فإن زمن الكمون من عبور جهاز درجة سلم لا تختلف بين الفئران WT المصابة بالأعصاب والجرذان السذاجة wt. يمكن لنماذج التعلم العميق تحسين وتسريع تحليل البيانات لمهمة المشي الدرجة سلم من خلال نهج الآلي. 
من المهم أن نذكر أن إصابة سحق العصب وكذلك جميع الاختبارات السلوكية الموصوفة يمكن ترجمتها بسهولة إلى الفئران ، من خلال تكييف إعدادات وأحجام الاجهزة. استخدام الفئران ككائن حي نموذجي له تأثير مفيد أن النماذج المعدلة وراثيا لكثير من الأمراض البشرية موجودة.

القوارض هي كائنات نموذجية ممتازة لتعميق فهم الأمراض البشرية1،2 عن طريق اختبار الفرضيات على مستويات بيولوجية متعددة. أحد المستويات البيولوجية الأساسية لتوصيف نماذج القوارض هو مستوى النمط الظاهري ، الذي تقاس به التقييمات السلوكية. اعتمادا على نموذج الحيوان ومسألة البحث العلمي ، واختيار بطارية اختبار سلوكية قوية وموثوق بها أمر ضروري لتغطية مجموعة واسعة من الجوانب السلوكية مثل النماذج الحيوانية لمرض باركنسون وخلل التوتر3،4،5،6.
العصب الوركي هو أكبر عصب في جسم الإنسان مع الألياف الحركية وكذلك الحسية. إصابات العصب الوركي يمكن أن تنتج بسهولة من مجموعة متنوعة من الأحداث مثل حوادث المرور والعمليات الجراحية7،8. لذلك ، فإن الأنشطة البحثية باستخدام نماذج القوارض مع إصابات العصب الوركي ، ذات قيمة ذات صلة ترجمة. على الرغم من أن الجانب الترجمي لتجديد العصب من الفئران إلى الإنسان يجب أن ينظر إليه بشكل نقدي9، فإن إصابة سحق العصب الوركي (axonotmesis) في نماذج القوارض هي طريقة شائعة الاستخدام لتحليل عمليات الانحطاط والتجديد للأعصاب الطرفية10،11. في حالة إصابة سحق العصب لا يتم تحويلها تماما. فإنه يضر المحور، مما أدى إلى كتلة التوصيل مباشرة بعد سحق الإصابة تليها العمليات التجديدية 4،12،13.
وعلاوة على ذلك، في البحوث خلل التوتر، وإصابات سحق العصب الوركي من جانب واحد هو وسيلة راسخة لتحريك حركات تشبه خلل التوتر (DLM) في نماذج القوارض خلل التوتر الوراثي، والتي لا تظهر DLM في حد ذاتها4،14. ومن المفترض أن الصدمة العصبية الطرفية يزعج التكامل الحسي الحركي عن طريق التأثير على الألياف العصبية الوركية، والتي هي المسؤولة عن الوظائف الحركية والحسية15.
نحن هنا نقدم وصفا مفصلا لإصابة سحق موحدة للعصب الوركي وبطارية من تقييمات السلوك الحركي التي تتكون من اختبار المجال المفتوح (OFT) ، وتحليل مشية CatWalk XT ، ومهمة المشي شعاع وسلم درجة المشي المهمة في نوع البرية السذاجة (wt) الفئران (ن = 8-9) والجرذان wt بعد خمسة أسابيع من إصابة سحق العصب الوركي من جانب واحد (ن = 10). يوفر مكتب مراقبة الطبيعة معلومات حول النشاط الحركي العام، في حين يتم تحقيق تحليل مشية مفصل من خلال نظام تحليل المشي الآلي CatWalk XT. يتم استخدام مهمة المشي شعاع لتقييم التنسيق الحركي من خلال تقييم الوقت لعبور شعاع وعدد من الأخطاء موضع القدم. لتحليل أداء مشية سلم درجة المشي المهمة يعطي معلومات حول وضع القدم أو مخلب والأخطاء على جهاز درجة سلم أفقي مع نمط درجة ثابتة ولكن غير النظامية.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Acetic acid, &#8805;99.8%</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>33209-1L</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Appose ULC skin stapler 35W</td>
			<td>Covidien</td>
			<td>8886803712</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Beam</td>
			<td>self made</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bepanthen eye cream</td>
			<td>Bayer Vital GmbH</td>
			<td>81552983</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Box for OFT</td>
			<td>self made</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Camcorder GC-PX100</td>
			<td>JVC</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Catwalk XT</td>
			<td>Noldus</td>
			<td></td>
			<td>&#160;setup and software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chamber for isofluran</td>
			<td>GT-Labortechnik</td>
			<td></td>
			<td>custom made</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Disposable scalpel No. 11</td>
			<td>Feather</td>
			<td>20.001.30.011</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dr&#228;ger Vapor 19.3 isoflurane system</td>
			<td>Dr. Wilfried M&#252;ller GmbH</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dumont #2 - laminectomy forceps</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>11223-20</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dumont #5 forceps</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>11251-30</td>
			<td>super-fine</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dustless precision pellets 45 mg</td>
			<td>Bio-Serv</td>
			<td>F0021</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EthoVision XT</td>
			<td>Noldus</td>
			<td></td>
			<td>&#160;setup and software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forceps 160 mm</td>
			<td>Hartenstein</td>
			<td>PZ09</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gas anesthesia mask, rat</td>
			<td>Dr. Wilfried M&#252;ller GmbH</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Goal box for ladder rung walking task apparatus</td>
			<td>self made</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hair clipper Magnum 5000</td>
			<td>Wahl GmbH</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hardened fine scissors</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>14090-11</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heating table</td>
			<td>MEDAX</td>
			<td>13801</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isofluran CP 1ml/ml, 250 ml</td>
			<td>cp-pharma</td>
			<td>1214</td>
			<td>prescription needed</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Kinovea</td>
			<td>www.kinovea.org</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ladder rung walking task apparatus</td>
			<td>self made</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needleholder</td>
			<td>KLS Martin</td>
			<td>20-526-14-07</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Octeniderm</td>
			<td>Sch&#252;lke</td>
			<td>118211</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rimadyl 50 mg/ml, injectable</td>
			<td>Zoetis</td>
			<td></td>
			<td>Carprofen, prescription needed</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rubber band retractors</td>
			<td>self made</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Spacer for beam</td>
			<td>self made</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Spacer for ladder rung walking task apparatus</td>
			<td>self made</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Suture Silkam 4/0 DS 19</td>
			<td>B. Braun</td>
			<td>C0762202</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ultra fine hemostats (non-serrated clamp)</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>13020-12</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

multifactorial assessment of motor behavior in rats after unilateral sciatic nerve crush injury

تحريض إصابة العصب المحيطي هو طريقة تستخدم على نطاق واسع في علم الأعصاب لتقييم آليات الإصلاح والألم من بين أمور أخرى. بالإضافة إلى ذلك ، في مجال أبحاث اضطرابات الحركة ، تم استخدام إصابة سحق الوركي لإثارة النمط الظاهري الشبيه بخلل التوتر في نماذج القوارض DYT-TOR1A المهيأة وراثيا من خلل التوتر. لتحقيق نتائج متسقة وقابلة للاستنساخ وقابلة للمقارنة بعد إصابة سحق العصب الوركي ، من الضروري استخدام طريقة موحدة لتحفيز سحق العصب ، بالإضافة إلى توصيف شكلي موحد. يجب إيلاء الاهتمام ليس فقط لل تشكيلة محددة من الاختبارات السلوكية، ولكن أيضا إلى المتطلبات التقنية والتنفيذ الصحيح وتحليل البيانات المتتالية. يصف هذا البروتوكول بالتفصيل كيفية إجراء إصابة سحق العصب الوركي ويوفر بطارية اختبار سلوكية لتقييم العجز الحركي في الفئران التي تشمل اختبار الحقل المفتوح ، وتحليل مشية CatWalk XT ، ومهمة المشي شعاع ، ومهمة المشي درجة السلم.

تظهر النتائج التمثيلية ل OFT خمس دقائق أن إصابة سحق العصب بعد خمسة أسابيع من الجراحة ليس لها أي تأثير على النشاط الحركي(الشكل 1).
تحليل مشية مع نظام XT كات ووك (الشكل 2) يولد العديد من المعلمات المختلفة. تم تحليل المعلمات الانتقائية إحصائيا من خلال مقارنة الفئران السذاجة wt مع الفئران wt المصابة بالأعصاب بعد خمسة أسابيع من سحق العصب(الشكل 2D). يمكن الكشف عن تعديلات كبيرة لمتوسط سرعة التشغيل وطول الخطوة ومنطقة الطباعة للمخلب الخلفي المصاب بالأعصاب (يمين). تم إجراء تحليل أكثر تفصيلا للمخلب الخلفي المصاب بالأعصاب باستخدام وحدة "قياسات البصمة التفاعلية". ولوحظ انخفاض كبير في انتشار البارامترات، وانتشار إصبع القدم المتوسط وطول الطباعة في فئران wt المصابة بالأعصاب مقارنة بالجرذان الساذجة. وبالإضافة إلى ذلك، فإن محور الجسم زاوية مخلب وزاوية مخلب حركة ناقلات تختلف اختلافا كبيرا عند مقارنة الفئران wt المصابة بالأعصاب مع الفئران ساذجة wt (الشكل 2E).
ويعرض الشكل 3 بيانات التنسيق الحركي التي تم الحصول عليها من خلال تقييم مهمة المشي بالشعاع. وأظهرت الفئران WT المصابين بالأعصاب وقت الكمون زيادة كبيرة لعبور شعاع مقارنة مع الفئران ساذجة wt خمسة أسابيع بعد الاصابة (الشكل 3B). كما قراءة إضافية من مهمة المشي شعاع، تم احتساب زلات كاملة ونصف زلات من الأطراف الخلفية المصابة بالأعصاب واعتبر خطأ للتحليل الإحصائي. زيادة كبيرة في نسبة الأخطاء في خطوة واحدة من الأعصاب المصابة (يمين) الخلفية في الفئران WT المصابة بالأعصاب مقارنة مع الفئران السذاجة wt.
البيانات التمثيلية لمهمة المشي درجة سلم (الشكل 4) لا تظهر تغييرات كبيرة في زمن الوصول لعبور ممشى جهاز درجة سلم (الشكل 4C) أو في النسبة المئوية للأخطاء في كل خطوة من الأعصاب المصابين (يمين) الخلفية(الشكل 4D). تحليل نسبة الخطأ في كل خطوة من الإصابة العصبية الخلفية النظر فقط في النتيجة من 0 إلى 2 من مقياس 7 فئات من ميتز وآخرون. يتم توضيح توزيع جميع فئات النقاط لكل خطوة من مقياس الفئات السبع للأطراف الخلفية المصابة بالأعصاب والأطراف الخلفية غير المصابة بالأعصاب (يسار) في الشكل 4E.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/62606/62606fig01.jpg"> الشكل 1:تقييم النشاط الحركي أثناء الاختبار الميداني المفتوح. (أ) صورة لإعداد اختبار الحقل المفتوح. صورة مختارة مطروحة من فيديو مسجل أثناء اختبار الحقل المفتوح تظهر فأرا في ساحة الحقل المفتوح بدون (B) ومع تتبع (C). (د) تم التحقيق في السرعة خلال تسجيل اختبار ميداني مفتوح لمدة خمس دقائق في الفئران الساذجة والفئران wt بعد خمسة أسابيع من إصابة سحق العصب. وتظهر البيانات على أنها متوسط ± SEM. تم إجراء التحليل الإحصائي باستخدام اختبار t غير المدفوع للبيانات الموزعة عادة. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62606/62606fig01large.jpg" target="_blank">يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/62606/62606fig02.jpg"> الشكل 2:تحليل المشي مع نظام CatWalk XT. (أ) صورة لجهاز CatWalk XT. (ب) أمثلة على طريقة عرض الطباعة التي تظهر بصمات مخلب المسمى في وضع اللون كاذبة وأمثلة على عرض توقيت تظهر الرسم البياني مشية على أساس الوقت من الفئران والسذاجة wt الفئران wt بعد خمسة أسابيع من إصابة سحق العصب. (ج) أمثلة لتصنيف إصبع القدم تبين انتشار إصبع القدم (TS) وانتشار إصبع القدم المتوسط (ITS) وطول الطباعة (PL) وكذلك أمثلة على عرض محور الجسم الذي يظهر محور الجسم (الخط الأبيض) وناقل الحركة (الخط الأحمر) للفئران الساذجة والفئران wt بعد خمسة أسابيع من إصابة سحق العصب. (د) بيانات المعلمات المختارة من التصنيف "القياسي" الذي يقارن الفئران الساذجة والفئران الساذجة بعد خمسة أسابيع من إصابة سحق الأعصاب. (ه) بيانات المعلمات المختارة من "وحدة قياس البصمة التفاعلية" التي تقارن الفئران والسذاجة wt والجرذان wt بعد خمسة أسابيع من إصابة سحق العصب. وتظهر البيانات على أنها متوسط ± SEM. تم إجراء التحليل الإحصائي باستخدام اختبار t غير المدفوع للبيانات الموزعة عادة ، واختبار t غير المدفوع مع تصحيح Welch للبيانات الموزعة عادة مع تباين غير متكافئ واختبار Mann-Whitney U للبيانات الموزعة غير العادية. تم تعريف < P-value 0.05 على أنه ذو دلالة إحصائية تم تصنيفه على أنه *p < 0.05، **p < 0.01، ***p < 0.001، ****p < 0.0001. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62606/62606fig02large.jpg" target="_blank">يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/62606/62606fig03.jpg"> الشكل 3: تحليل مشية مع مهمة المشي شعاع. (أ) صورة ورسومات تخطيطية لإعداد مهمة المشي الحزمة. تم تحليل وقت الكمون لعبور الحزمة (B) ونسبة أخطاء زلة القدم لكل خطوة من الإصابة بالأعصاب الخلفية أثناء مهمة المشي الحزمة (C) في الفئران والسذاجة wt والجرذان wt بعد خمسة أسابيع من إصابة سحق العصب. صورة تمثيلية لموضع وقت البدء (D) وموضع وقت النهاية (E) لمهمة المشي بالشعاع. تسلسل صورة تمثيلية لخطأ في الانزلاق الكامل (F) وخطأ نصف زلة (G) لمهمة المشي الحزمة. وتظهر البيانات على أنها متوسط ± SEM. تم إجراء التحليل الإحصائي باستخدام اختبار مان ويتني يو للبيانات الموزعة غير العادية. تم تعريف < القيمة P 0.05 على أنها ذات دلالة إحصائية وصفت بأنها *p < 0.05 و ** p < 0.01. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62606/62606fig03large.jpg" target="_blank">يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/62606/62606fig04.jpg"> الشكل 4: تحليل مشية باستخدام سلم درجة المشي المهمة. صورة (A) ورسومات تخطيطية (B) لإعداد مهمة المشي الدرج السلم. تم تقييم وقت الكمون لعبور جهاز درجة السلم (C) ونسبة أخطاء زلة القدم لكل خطوة من الحافة الخلفية المصابة بالأعصاب أثناء مهمة المشي الدرجة سلم (D) في الفئران ساذجة wt والجرذان wt بعد خمسة أسابيع من إصابة سحق العصب. (ه) توزيع نسبة فئة النقاط لكل خطوة وفقا لمقياس الفئات السبع من ميتز وآخرين. لليسار واليمين hindlimb من الفئران سذاجة wt والجرذان wt بعد خمسة أسابيع من إصابة سحق العصب. وتظهر البيانات على أنها متوسط ± SEM. تم إجراء التحليل الإحصائي باستخدام اختبار t غير المدفوع للبيانات الموزعة عادة واختبار Mann-Whitney U للبيانات الموزعة غير العادية. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62606/62606fig04large.jpg" target="_blank">يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.</a>
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/62606/62606fig05.jpg"> الشكل 5:تمثيل مثالي لكل فئة وفقا لمقياس الفئات السبع من ميتز وآخرين. خلال سلم درجة المشي المهمة. تسلسل صورة تمثيلية من الخلفية اليمنى من الفئة 0 - إجمالي ملكة جمال، الفئة 1 - زلة عميقة، الفئة 2 - زلة طفيفة، الفئة 3 - استبدال، الفئة 4 - تصحيح، خلال مهمة المشي درجة سلم. صور تمثيلية للفئة 5 - الموضع الجزئي والفئة 6 - الموضع الصحيح. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62606/62606fig05large.jpg" target="_blank">يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.</a>

Watch this Scientific Journal Video about Multifactorial Assessment of Motor Behavior in Rats after Unilateral Sciatic Nerve Crush Injury at JoVE.com

Multifactorial Assessment of Motor Behavior in Rats after Unilateral Sciatic Nerve Crush Injury

نحن نقدم بروتوكولا لتقييم السلوك الحركي عن طريق بطارية اختبار سلوكية في الفئران بعد إصابة سحق العصب الوركي.

تقييم متعدد العوامل للسلوك الحركي في الفئران بعد إصابة سحق العصب الوركي من جانب واحد

The induction of a peripheral nerve injury is a widely used method in neuroscience for the assessment of repair and pain mechanisms among others. In ...

الهدف العام لهذا البروتوكول هو وصف الإجراءات التي ينطوي عليها إجراء سحق العصب الوركي غير القابل للتدمير ، وتوفير بروتوكول لتقييم السلوك الحركي بعد الصدمة الطرفية. اختيار بطارية اختبار سلوكية قوية وموثوق بها أمر ضروري لتغطية مجموعة واسعة من الجوانب السلوكية، ويعتمد على النموذج الحيواني المستخدم والسؤال البحثي العلمي. يصف هذا البروتوكول بالتفصيل كيفية إجراء إصابة سحق العصب الوركي ويوفر بطارية اختبار سلوكية لتقييم العجز الحركي في الفئران ، والتي تشمل اختبار الحقل المفتوح ، وتحليل مشية CatWalk ، ومهمة المشي شعاع ، ومهمة المشي درجة السلم.وأجريت التجارب على الحيوانات وفقا للمبادئ التوجيهية الوطنية والمؤسسية المعمول بها لرعاية الحيوانات واستخدامها. الحفاظ على بيئة معقمة أثناء العملية الجراحية بأكملها. إعداد طاولة الجراحة مع المعدات اللازمة.تخدير عميق الجرذ في خزانة مغلقة مع isoflurane وحلق منطقة واسعة من الطرف الخلفي الأيمن. بعد ذلك ، ضع الجرذ في قناع التخدير ومواصلة التخدير العميق مع isoflurane. إصلاح الجذع والأطراف الخلفية على حد سواء من الفئران مع الشريط.ضع كلا الطرفين الخلفيين في وضع متناظر وممدود وحول كل مخلب مسطح إلى طاولة الجراحة. تطهير الجلد من منطقة حلق مع مطهر المناسبة. البحث عن الشق الوركي من الايليوم.إجراء شق الجلد من الشق الوركي في اتجاه مخلب مع مشرط. إذا تم إصلاح الأطراف الخلفية ويتم إجراء شق الجلد بشكل صحيح ، يمكن رؤية تجويف في المستوى اللفافة بين عضلة الغلوتيوس مكسيموس وعضلات العضلة ذات الرأسين femoris التي تشبه الخط الأبيض. إدراج ملقط الهيموستاتيكية فائقة الغرامة مغلقة في تجويف ونشر ملقط.يجب أن تفتح الطائرة اللفافة دون إصابة أي أنسجة عضلية. ضع مسحبات الشريط المطاطي تحت العضلات للحفاظ على شق الجلد مفتوحا. قم بإزالة أي أنسجة وأوعية دموية محيطة بلطف من العصب الوركي حتى يتعرض العصب تماما.من المهم عدم التمدد أو سحب العصب أثناء العملية بأكملها. سحق العصب الوركي مع المشبك غير مسننة مع ضغط مستمر وسريع للاستخدام. لهذا، افتح المشبك، وضع العصب على الفك السفلي للمشبك، وإغلاق المشبك عن طريق قفله في المركز الأول لمدة 3 × 10 ثوان.بعد إصابة سحق، إعادة فتح المشبك بعناية. يبدو موقع سحق العصب الوركي شفافا. إزالة المطاط الشريط الواجهات.أغلق شق الطائرة اللفافة بخياطة قابلة للتكلس. أغلق شق الجلد مع تدبيسات جلد الجسم. يمكن تحليل النشاط الحركي ، وكذلك النشاط السلوكي للفئران من خلال اختبار ميداني مفتوح.يتكون إعداد الحقل المفتوح ، الذي يجب أن يكون موجودا في بيئة مظلمة وهادئة ، من نظام تتبع الفيديو الآلي ، EthoVision XT ، وساحة ذات سطح أسود مقاوم للخدش وقابل للتنظيف. ضع الحلبة والكاميرا في الموضع الصحيح و قم بإعداد برنامج EthoVision XT. ضع الجرذ برفق في منتصف ساحة الاختبار.أثناء التسجيل ، يجب على المجرب الابتعاد عن الحقل المفتوح الذي تم إعداده ، من أجل تجنب تشتيت انتباه الجرذ. لتحليل البيانات لاختبار الحقل المفتوح، انتقل إلى قسم التحليل في الشريط الجانبي الأيمن واختر تتبع المرئيات "ضمن علامة التبويب النتائج". بعد ذلك، تصدير المعلمات اللازمة إلى XL.Within البرنامج، واختيار عدد من المتغيرات من فئات مختلفة لتحليل البيانات.يمكن أن يساعد تحليل المشية من قبل نظام CatWalk XT في تقييم العديد من المعلمات المختلفة المتعلقة بآثار أقدام النماذج الحيوانية وموقفها ومشيتها. ممشى زجاجي مضاء بالضوء الأخضر ويتم التقاط الضوء المتناثر ببصمات أقدام الحيوانات بكاميرا فيديو عالية السرعة ، والتي تقع تحت الممشى. يمكن تحليل الإشارات باستخدام برنامج CatWalk XT.يجب أن تتم التجربة في ظل ظروف مظلمة. ابدأ بإعداد نظام CatWalk XT. اختر الإعدادات التجريبية.ضع الكاميرا في موضعها وضبط التركيز. إعداد إعدادات الكشف. قم بإعداد جدران الممر لنظام CatWalk وتأكد من أن الجدران لا تزال موازية للممشى.تحديد طول الممشى ومعايرة الممشى. بعد ذلك، التقط صورة خلفية. هناك حاجة إلى ممشى نظيف وفارغ لصورة الخلفية.يجب على الجرذ عبور الممشى دون أي انقطاع. وفقا لمعايير التشغيل المحددة، هناك حاجة إلى ثلاثة أشواط متوافقة لكل فأر لتحليل البيانات. تدريب الحيوانات لمدة ثمانية أيام على الأقل قبل أن تبدأ مع التجربة الفعلية.يجب إجراء CatWalk مرة واحدة على الأقل في الأسبوع ، مع 6 إلى 10 أشواط لضمان أداء المهام المستمر. لتحليل البيانات، فقط تقييم تشغيل متوافقة. تصنيف مطبوعات مخلب تلقائيا مع برنامج XT CatWalk.راجع بطاقات العنونة المطبوعة يدويا. تصحيح تسميات الطباعة مخلب خاطئ، إضافة تسميات من بصمات مخلب غير المكتشفة، وحذف أي ضجيج والتسميات خاطئ. النتائج الرقمية المعروضة في ورقة XL، والتي تعرض عددا من المعلمات الأساسية.للحصول على معلومات أكثر تفصيلا حول كل بصمة، قم بتصنيف أصابع القدم من الكفوف الخلفية. يتطلب هذا التحليل وحدة قياس البصمة التفاعلية. قم بتعيين علامات تحليل البصمة يدويا.تحليل كل بصمة مخلب الخلفي في جميع أشواط متوافقة الثلاثة. رسم خط من وسط إصبع القدم الأول إلى مركز إصبع القدم الخامس لقياس انتشار إصبع القدم. رسم خط من وسط إصبع القدم الثاني إلى مركز إصبع القدم الرابع لقياس انتشار إصبع القدم المتوسط.رسم خط من وسط إصبع القدم الثالث إلى كعب مخلب الخلفي لقياس طول الطباعة اليدوية. راجع النتائج العددية لقياسات البصمة التفاعلية المعروضة في ورقة منفصلة. يمكن تحديد العجز مشية من قبل مهمة المشي شعاع.سيكون تركيز مهمة المشي الحزمة في هذا الموضوع البحثي المحدد هو تحليل التنسيق الحركي وليس تقييم التوازن الحركي. لمهمة المشي شعاع، وهناك حاجة إلى شعاع، فاصل، الجدول، خلفية موحدة، وكاميرا فيديو. استخدم شعاع خشبي بطول 90 سنتيمترا وعرض 1.7 سنتيمتر وارتفاع سنتيمترين.تدريب الحيوانات لمدة سبعة أيام. ضع الجرذ على منصة بدء الشعاع. يجب على الجرذ عبور الشعاع ثلاث مرات دون أي انقطاع.حتى لو وصل الجرذ إلى ثلاثة أشواط متوافقة خلال الأشواط الثلاثة الأولى ، فيجب تنفيذ ما لا يقل عن 6 إلى 10 أشواط لأداء المهمة المستمر. حدد تسلسلات الفيديو لثلاثة أشواط متوافقة من التسجيل. حدد نقطة وقت البدء ونقطة وقت النهاية لأشواط الثلاثة المتوافقة المحددة.هنا، يتم تسمية نقطة وقت البدء بواسطة خط أسود على الحزمة، ويتم تعريف موضع الطرف الخلفي الأول خلف الخط الأسود كنقطة وقت البدء للتشغيل. يحدد وضع الطرف الخلفي الأول على المنصة في نهاية الشعاع نقطة وقت النهاية. بعد ذلك، حساب الوقت اللازم للفأر لعبور شعاع.تسجيل عدد الخطوات والأخطاء من ثلاثة أشواط متوافقة لكلا الطرفين الخلفيين بشكل منفصل، وذلك باستخدام وظيفة التكبير والحركة البطيئة للبرنامج. تتضمن الأخطاء إجمالي زلات القدم وزلات نصف القدم. يتم تعريف زلة القدم الإجمالية على أنها موضع القدم الذي يتبعه زلة عميقة ، مما يسبب فقدان الاتصال بالمخلب المصاب مع الحزمة.يتم تعريف نصف زلة كما مخلب الانزلاق من الجدار الجانبي للشعاع دون أن تفقد الاتصال الكامل. حساب النسبة المئوية لزلات القدم فيما يتعلق بعدد الخطوات لعبور الحزمة. يمكن لمهمة المشي الدرجة سلم تقييم وظيفة المحرك، ووضع كل من الأطراف الأمامية والأطراف الخلفية، والتنسيق بين الأطراف.وهناك حاجة إلى جهاز درجة سلم، فاصل، الجدول، خلفية موحدة، وكاميرا فيديو لهذا الاختبار السلوكي. يتكون جهاز الدرجات الأفقي من الدرجات المعدنية والجدران الجانبية الواضحة للبولي كربونات. تدريب الحيوانات لمدة ثمانية أيام.ضع الجرذ على منطقة بداية مشغلي الدرجة سلم. يجب على الجرذ عبور الممشى الذي يبلغ طوله 100 سنتيمتر لجهاز الدرجة السلم ثلاث مرات دون انقطاع ، من أجل أن يتأهل كركض متوافق. حدد تسلسلات الفيديو لثلاثة أشواط متوافقة من التسجيل.حدد نقطة وقت البدء ونقطة وقت النهاية لأشواط الثلاثة المتوافقة المحددة. وضع الطرف الخلفي وراء الخط الأسود الأول على الجدار الجانبي للجهاز يحدد نقطة وقت البدء من المدى. وضع الطرف الأمامي الأول خلف الخط الأسود الثاني على الجدار الجانبي للجهاز يحدد نقطة وقت النهاية من المدى.بعد ذلك، حساب مدة تشغيل عبر الممشى. تسجيل ثلاثة أشواط متوافقة مع مقياس الفئة 7 من ميتس والزملاء باستخدام الحركة البطيئة أو وظيفة الإطار تلو الإطار للبرنامج. تحديد عدد الخطوات وعدد الأخطاء وفقا لفئات المقياس لكل طرف على حدة.ويميز المقياس بين الفئات التالية. مجموع ملكة جمال. زلة عميقة.زلة طفيفة. الاستبدال.تصحيح. الموضع الجزئي. وتصحيح الموضع.بعد ذلك، حساب الأخطاء في الخطوة. تظهر النتائج التمثيلية للاختبار الميداني المفتوح لمدة خمس دقائق أن إصابة سحق العصب ، بعد خمسة أسابيع من الجراحة ، ليس لها أي تأثير على النشاط الحركي. تحليل المشي مع نظام CatWalk XT يولد العديد من المعلمات المختلفة.يمكن الكشف عن تعديلات كبيرة لمتوسط سرعة التشغيل وطول الخطوة ومنطقة الطباعة في مخلب الخلفي الأيمن المصاب بالأعصاب. وأظهرت الفئران البرية المصابة بالأعصاب زيادة كبيرة في وقت الكمون لعبور الشعاع ، مقارنة بالجرذان الساذجة البرية بعد خمسة أسابيع من الإصابة. وكقراءة إضافية لمهمة المشي بالشعاع، تم احتساب زلات كاملة ونصف زلات من الطرف الخلفي المصاب بالأعصاب واعتبرت خطأ في التحليل الإحصائي.وارتفعت النسبة المئوية للأخطاء في كل خطوة من الطرف الخلفي الأيمن المصاب بالأعصاب بشكل كبير في فئران النوع البري المصابة بالأعصاب، مقارنة بالجرذان الساذجة البرية. لا تظهر البيانات التمثيلية لمهمة المشي الدرجة سلم تغييرات كبيرة في وقت الكمون لعبور ممشى جهاز درجة السلم، أو في النسبة المئوية للأخطاء في كل خطوة من الطرف الخلفي الأيمن المصاب بالأعصاب. تحليل نسبة الخطأ في كل خطوة من الطرف الخلفي المصاب بالأعصاب النظر فقط في النتيجة من 0 إلى 2 من مقياس الفئة 7 من ميتس والزملاء.بعد مشاهدة هذا الفيديو، يجب أن يكون لديك فهم جيد لكيفية تنفيذ إصابة سحق العصب الوركي، وكيفية تنفيذ تقييم متعدد العوامل للسلوك الحركي في الفئران بعد سحق العصب الوركي من جانب واحد. لتحقيق نتائج متسقة وقابلة للاستنساخ وقابلة للمقارنة بعد إصابة سحق العصب الوركي ، من الضروري استخدام طريقة موحدة لتحفيز سحق العصب ، بالإضافة إلى توصيف قياسي بشكل حيوي. التدريب المناسب لاختبار سلوك محدد يوفر مزايا توفير الوقت أثناء تقييم التجربة والحصول على نتائج أفضل.

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Axoplasm Isolation from Rat Sciatic Nerve

جبلة المحوار من عزل العصب الوركي الجرذ

Isolation of pure axonal cytoplasm (axoplasm) from peripheral nerve is crucial for biochemical studies of many biological processes. In this article, we ...

An Optic Nerve Crush Injury Murine Model to Study Retinal Ganglion Cell Survival

وسحق العصب البصري النموذجي إصابة الفئران لدراسة الخلايا الشبكية بقاء العقدة

Injury to the optic nerve can lead to axonal degeneration, followed by a gradual death of retinal ganglion cells (RGCs), which results in irreversible ...

Nerve Excitability Assessment in Chemotherapy-induced Neurotoxicity

العصب تقييم الإثارة في العلاج الكيميائي الناجم عن العصبية

Chemotherapy-induced neurotoxicity is a serious consequence of cancer treatment, which occurs with some of the most commonly used chemotherapies1,2. ...

Reproducible Mouse Sciatic Nerve Crush and Subsequent Assessment of Regeneration by Whole Mount Muscle Analysis

استنساخه سحق الفأر العصب الوركي وتقييم لاحق للتجديد من قبل الجامعة جبل تحليل العضلات

Regeneration in the peripheral nervous system (PNS) is widely studied both for its relevance to human disease and to understand the robust regenerative ...

Selective Tracing of Auditory Fibers in the Avian Embryonic Vestibulocochlear Nerve

انتقائية للبحث عن المفقودين من ألياف العصب السمعي في الطيور الدهليزي القوقعي الجنينية

The embryonic chick is a widely used model for the study of peripheral and central ganglion cell projections. In the auditory system, selective labeling ...

Transplantation of Olfactory Ensheathing Cells to Evaluate Functional Recovery after Peripheral Nerve Injury

زرع الخلايا الشمية مغمد لتقييم الانتعاش وظيفية بعد إصابة العصب المحيطي

Olfactory ensheathing cells (OECs) are neural crest cells which allow growth and regrowth of the primary olfactory neurons. Indeed, the primary olfactory ...

Unilateral Pyramidotomy of the Corticospinal Tract in Rats for Assessment of Neuroplasticity-inducing Therapies

من جانب واحد قطع السبيل الهرمي للالقشري المسالك في الجرذان لتقييم العلاج الذي يحفز المرونة العصبية

The corticospinal tract (CST) can be completely severed unilaterally in the medullary pyramids of the rodent brainstem. The CST is a motor tract that has ...

In Vivo Gene Transfer to Schwann Cells in the Rodent Sciatic Nerve by Electroporation

In Vivo Gene Transfer to Schwann Cells in the Rodent Sciatic Nerve by Electroporation

في نقل فيفو جين لخلايا شوان في العصب القوارض وركي من Electroporation لل

The formation of the myelin sheath by Schwann cells (SCs) is essential for rapid conduction of nerve impulses along axons in the peripheral nervous ...

3D Kinematic Analysis for the Functional Evaluation in the Rat Model of Sciatic Nerve Crush Injury

3D تحليل الحركية للتقييم الوظيفي في نموذج الفئران من عرق النسا الأعصاب سحق الإصابة

Compared to the Sciatic Functional Index (SFI), kinematic analysis is a more reliable and sensitive method for performing functional evaluations of ...

Measuring and Manipulating Functionally Specific Neural Pathways in the Human Motor System with Transcranial Magnetic Stimulation

قياس ومعالجة المسارات العصبية المحددة وظيفيا في نظام المحرك البشري مع التحفيز المغناطيسي عبر الجمجمة

Understanding interactions between brain areas is important for the study of goal-directed behavior. Functional neuroimaging of brain connectivity has ...