Name: an ex vivo brain slice model to study and target breast cancer brain metastatic tumor growth
Uploaded: 2021-09-22T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about An Ex Vivo Brain Slice Model to Study and Target Breast Cancer Brain Metastatic Tumor Growth at JoVE.com

हम जूलिया Farnan, Kayla ग्रीन, और Tiziana DeAngelis को उनकी तकनीकी सहायता के लिए धन्यवाद देना चाहते हैं। इस काम को पेंसिल्वेनिया कॉमनवेल्थ रिसर्च एन्हांसमेंट ग्रांट प्रोग्राम (MJR, JGJ), UO1CA244303 (MJR), R01CA227479 (NLS), R00CA207855 (EJH), और W.W. Smith Charitable Trusts (EjH) द्वारा भाग में समर्थित किया गया था।

इस प्रोटोकॉल को अनुमोदित किया गया था और Drexel University College of Medicine Institutional Animal Care and Use Committee (IACUC) द्वारा पशु देखभाल दिशानिर्देशों का पालन किया गया था। Nu / Nu एथाइमिक मादा चूहों (6-8 सप्ताह पुराने) का उपयोग इस अध्ययन में किया गया था...

<ol>
	<li>Watase, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Breast+cancer+brain+metastasis-overview+of+disease+state,+treatment+options+and+future+perspectives.">Breast cancer brain metastasis-overview of disease state, treatment options and future perspectives.</a> Cancers. 13 (5), (2021).</li><li>Niikura, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Treatment+outcomes+and+prognostic+factors+for+patients+with+brain+metastases+from+breast+cancer+of+each+subtype:+a+multicenter+retrospective+analysis.">Treatment outcomes and prognostic factors for patients with brain metastases from breast cancer of each subtype: a multicenter retrospective analysis.</a> Breast Cancer Research and Treatment. 147 (1), 103-112 (2014).</li><li>Fong, E. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heralding+a+new+paradigm+in+3D+tumor+modeling.">Heralding a new paradigm in 3D tumor modeling.</a> Biomaterials. 108, 197-213 (2016).</li><li>Parker, J. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+human+glioblastoma+organotypic+slice+culture+model+for+study+of+tumor+cell+migration+and+patient-specific+effects+of+anti-invasive+drugs.">A human glioblastoma organotypic slice culture model for study of tumor cell migration and patient-specific effects of anti-invasive drugs.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (125), e53557 (2017).</li><li>Chuang, H. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Coculture+system+with+an+organotypic+brain+slice+and+3D+spheroid+of+carcinoma+cells.">Coculture system with an organotypic brain slice and 3D spheroid of carcinoma cells.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (80), e50881 (2013).</li><li>Hohensee, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=PTEN+mediates+the+cross+talk+between+breast+and+glial+cells+in+brain+metastases+leading+to+rapid+disease+progression.">PTEN mediates the cross talk between breast and glial cells in brain metastases leading to rapid disease progression.</a> Oncotarget. 8 (4), 6155-6168 (2017).</li><li>van de Merbel, A. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+ex+vivo+Tissue+culture+model+for+the+assessment+of+individualized+drug+responses+in+prostate+and+bladder+cancer.">An ex vivo Tissue culture model for the assessment of individualized drug responses in prostate and bladder cancer.</a> Frontiers in Oncology. 8, 400 (2018).</li><li>Martin, S. Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ex+vivo+tissue+slice+culture+system+to+measure+drug-response+rates+of+hepatic+metastatic+colorectal+cancer.">Ex vivo tissue slice culture system to measure drug-response rates of hepatic metastatic colorectal cancer.</a> BMC Cancer. 19 (1), 1030 (2019).</li><li>Orimo, A., Weinberg, R. 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M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Slice+cultures+from+head+and+neck+squamous+cell+carcinoma:+a+novel+test+system+for+drug+susceptibility+and+mechanisms+of+resistance.">Slice cultures from head and neck squamous cell carcinoma: a novel test system for drug susceptibility and mechanisms of resistance.</a> British Journal of Cancer. 110 (2), 479-488 (2014).</li><li>Koerfer, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Organotypic+slice+cultures+of+human+gastric+and+esophagogastric+junction+cancer.">Organotypic slice cultures of human gastric and esophagogastric junction cancer.</a> Cancer Medicine. 5 (7), 1444-1453 (2016).</li><li>Palmieri, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Her-2+overexpression+increases+the+metastatic+outgrowth+of+breast+cancer+cells+in+the+brain.">Her-2 overexpression increases the metastatic outgrowth of breast cancer cells in the brain.</a> Cancer Research. 67 (9), 4190-4198 (2007).</li><li>Kyeong, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Subtypes+of+breast+cancer+show+different+spatial+distributions+of+brain+metastases.">Subtypes of breast cancer show different spatial distributions of brain metastases.</a> PLoS One. 12 (11), 0188542 (2017).</li><li>Hengel, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Attributes+of+brain+metastases+from+breast+and+lung+cancer.">Attributes of brain metastases from breast and lung cancer.</a> International Journal of Clinical Oncology. 18 (3), 396-401 (2013).</li><li>Jackson, J. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neuronal+activity+and+glutamate+uptake+decrease+mitochondrial+mobility+in+astrocytes+and+position+mitochondria+near+glutamate+transporters.">Neuronal activity and glutamate uptake decrease mitochondrial mobility in astrocytes and position mitochondria near glutamate transporters.</a> Journal of Neuroscience. 34 (5), 1613-1624 (2014).</li><li>Farnan, J. K., Green, K. K., Jackson, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ex+vivo+imaging+of+mitochondrial+dynamics+and+trafficking+in+astrocytes.">Ex vivo imaging of mitochondrial dynamics and trafficking in astrocytes.</a> Current Protocols in Neuroscience. 92 (1), 94 (2020).</li><li>Simone, N. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ionizing+radiation-induced+oxidative+stress+alters+miRNA+expression.">Ionizing radiation-induced oxidative stress alters miRNA expression.</a> PLoS One. 4 (7), 6377 (2009).</li><li>Couturier, C. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Single-cell+RNA-seq+reveals+that+glioblastoma+recapitulates+a+normal+neurodevelopmental+hierarchy.">Single-cell RNA-seq reveals that glioblastoma recapitulates a normal neurodevelopmental hierarchy.</a> Nature Communications. 11 (1), 3406 (2020).</li><li>Candolfi, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intracranial+glioblastoma+models+in+preclinical+neuro-oncology:+neuropathological+characterization+and+tumor+progression.">Intracranial glioblastoma models in preclinical neuro-oncology: neuropathological characterization and tumor progression.</a> Journal of Neuro-Oncology. 85 (2), 133-148 (2007).</li><li>Fitzgerald, D. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reactive+glia+are+recruited+by+highly+proliferative+brain+metastases+of+breast+cancer+and+promote+tumor+cell+colonization.">Reactive glia are recruited by highly proliferative brain metastases of breast cancer and promote tumor cell colonization.</a> Clinical &amp; Experimental Metastasis. 25 (7), 799-810 (2008).</li><li>Kondru, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+Ex+Vivo+Brain+Slice+Culture+Model+of+Chronic+Wasting+Disease:+Implications+for+Disease+Pathogenesis+and+Therapeutic+Development.">An Ex Vivo Brain Slice Culture Model of Chronic Wasting Disease: Implications for Disease Pathogenesis and Therapeutic Development.</a> Scientific Reports. 10 (1), (2020).</li><li>Abu Samaan, T. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Paclitaxel's+mechanistic+and+clinical+effects+on+breast+cancer.">Paclitaxel's mechanistic and clinical effects on breast cancer.</a> Biomolecules. 9 (12), (2019).</li><li>Mewes, A., Franke, H., Singer, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Organotypic+brain+slice+cultures+of+adult+transgenic+P301S+mice--a+model+for+tauopathy+studies.">Organotypic brain slice cultures of adult transgenic P301S mice--a model for tauopathy studies.</a> PLoS One. 7 (9), 45017 (2012).</li><li>Valiente, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Brain+metastasis+cell+lines+panel:+A+public+resource+of+organotropic+cell+lines.">Brain metastasis cell lines panel: A public resource of organotropic cell lines.</a> Cancer Research. 80 (20), 4314-4323 (2020).</li></ol>

यह अध्ययन मस्तिष्क ट्यूमर के लिए एक उपन्यास पूर्व विवो मस्तिष्क संस्कृति विधि स्थापित करता है। हम दिखाते हैं कि बीसीबीएम कोशिकाएं एमडीए-एमबी -231बीआर कोशिकाएं इंट्राक्रैनियल रूप से चूहों के मस्ति?...

स्तन कैंसर मस्तिष्क मेटास्टेसिस (बीसीबीएम) तब विकसित होता है जब कोशिकाएं प्राथमिक स्तन ट्यूमर से मस्तिष्क तक फैलती हैं। स्तन कैंसर फेफड़ों के कैंसर के बाद मस्तिष्क मेटास्टेसिस का दूसरा सबसे आम कारण है, जिसमें मेटास्टेसिस 10-16% रोगियों में होताहै। दुर्भाग्य से, मस्तिष्क मेटास्टेसिस लाइलाज रहते हैं क्योंकि >80% रोगी अपने मस्तिष्क-मेटास्टेसिस निदान के बाद एक वर्ष के भीतर मर जाते हैं, और न्यूरोलॉजिकल डिसफंक्शन2 के कारण उनके जीवन की गुणवत्ता बिगड़ा हुआ है। अधिक प्रभावी उपचार विकल्पों की पहचान करने की तत्काल आवश्यकता है। मोनोलेयर दो आयामी या तीन आयामी संस्कृति मॉडल प्रयोगशाला में चिकित्सीय एजेंटों के परीक्षण में सबसे अधिक उपयोग किए जाने वाले तरीके हैं। हालांकि, वे जटिल बीसीबीएम माइक्रोएन्वायरमेंट की नकल नहीं करते हैं, जो ट्यूमर फेनोटाइप और विकास का एक प्रमुख चालक है। यद्यपि ये मॉडल उपयोगी हैं, वे जटिल ट्यूमर-स्ट्रोमल इंटरैक्शन, अद्वितीय चयापचय आवश्यकताओं और ट्यूमर 3 की विषमता पर कब्जा नहीं करतेहैं। ट्यूमर-स्ट्रोमल इंटरैक्शन और माइक्रोएन्वायरमेंट विषमता को और अधिक ईमानदारी से दोहराने के लिए, हमारे समूह और अन्य लोगों ने रोगी-व्युत्पन्न ट्यूमर कोशिकाओं (प्राथमिक या मेटास्टैटिक) या कैंसर सेल लाइनों 4,5,6 के साथ ऑर्गेनोटाइपिक मस्तिष्क मेटास्टेसिस "स्लाइस" संस्कृतियों को उत्पन्न करना शुरू कर दिया है। इन विट्रो सिस्टम में शास्त्रीय की तुलना में, यह अल्पकालिक पूर्व वीवो मॉडल बड़े पशु समूहों में प्रीक्लिनिकल मूल्यांकन से पहले नए चिकित्सीय की स्क्रीनिंग के लिए अधिक प्रासंगिक स्थितियां प्रदान कर सकता है।
पूर्व विवो मॉडल का निर्माण किया गया है और मुख्य रूप से विभिन्न कैंसर के सफल उपचार की पहचान के लिए सफलतापूर्वक उपयोग किया गया है। उन्हें कुछ दिनों के मूल्यांकन की आवश्यकता होती है और इसके अतिरिक्त रोगी-विशिष्ट दवा स्क्रीनिंग के अनुरूप बनाया जा सकता है। उदाहरण के लिए, मानव मूत्राशय और प्रोस्टेट कैंसर पूर्व विवो ऊतकों ने डोसेटाक्सेल और गेमिसिटाबाईन 7 की खुराक-निर्भर एंटी-ट्यूमर प्रतिक्रिया दिखाईहै। इसी तरह के कोलोरेक्टल कार्सिनोमा पूर्व विवो ऊतकों को कीमोथेरेपी दवाओं Oxaliplatin, Cetuximab, और Pembrolizumab 8 स्क्रीन करने के लिए विकसितकिया गया था। इस आवेदन को व्यापक रूप से अग्नाशय के कैंसर में इस्तेमाल किया गया है, स्ट्रोमल पर्यावरण और अग्नाशय डक्टल एडेनोकार्सिनोमा 9,10 के जीनोटाइपिक और फेनोटाइपिक विशेषताओं के बीच आवश्यक बातचीत पर विचार करते हुए। इसके अलावा, इस तरह के ऑर्गेनोटाइपिक मॉडल को सिर, गर्दन, गैस्ट्रिक और स्तन ट्यूमर11,12 में समान स्क्रीनिंग के लिए विकसित किया गया है।
यहां, उनके माइक्रोएन्वायरमेंट में स्तन कैंसर मस्तिष्क मेटास्टैटिक ट्यूमर कोशिकाओं का एक पूर्व विवो मस्तिष्क स्लाइस मॉडल उत्पन्न किया जा रहा है। चूहों को इंट्राक्रैनियल रूप से स्तन कैंसर मस्तिष्क मेटास्टेटिक मस्तिष्क ट्रॉफिक एमडीए-एमबी -231 बीआर कोशिकाओं के साथ इंजेक्ट किया गया था13 सेरेब्रल कॉर्टेक्स पार्श्विका लोब में- टीएनबीसी मेटास्टेसिस14,15 की एक आम साइट और ट्यूमर विकसित करने की अनुमति दी गई थी। मस्तिष्क के स्लाइस इन जानवरों से उत्पन्न किए गए थे और16,17 वर्णित के रूप में ऑर्गेनोटाइपिक संस्कृतियों के रूप में पूर्व विवो को बनाए रखा गया था। यह उपन्यास पूर्व विवो मॉडल मस्तिष्क पैरेन्काइमा के भीतर बीसीबीएम सेल के विकास के विश्लेषण के लिए अनुमति देता है और इसका उपयोग मस्तिष्क माइक्रोएन्वायरमेंट के भीतर ट्यूमर कोशिकाओं पर चिकित्सीय एजेंटों और विकिरण प्रभावों का परीक्षण करने के लिए किया जा सकता है।

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>1 mL syringe, slip tip</td>
			<td>BD</td>
			<td>309659</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>30 G1/2 Needles</td>
			<td>BD</td>
			<td>305106</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>6-well plates</td>
			<td>Genessee</td>
			<td>25-105</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Automated microscope and LUMAVIEW software</td>
			<td>Etaluma</td>
			<td>LS720</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>B27 (GEM21)</td>
			<td>Gemini Bio-Products</td>
			<td>400-160</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Beaker 50 mL</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>10-210-685</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Blunt sable paintbrush, Size #5/0</td>
			<td>Electron Microscopy Sciences</td>
			<td>66100-50</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bone Wax</td>
			<td>ModoMed</td>
			<td>DYNJBW25</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Brain injection Syringe</td>
			<td>Hamilton Company</td>
			<td>80430</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CaCl2</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>BP510-250</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cleaved caspase 3 Antibody</td>
			<td>Cell Signaling</td>
			<td>14220S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DAPI</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>P36935</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>D-Luciferin Potassium Salt</td>
			<td>Perkin Elmer</td>
			<td>122799</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Double edge razor blade</td>
			<td>VWR</td>
			<td>55411-060(95-0043)</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Filter Paper (#1), quantitative circles, 4.25 cm</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>09-805a (1001-042)</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fine sable paintbrush #2/0</td>
			<td>Electron Microscopy Sciences</td>
			<td>66100-20</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forceps</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>11251-20</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gamma-H2AX antibody</td>
			<td>Millipore</td>
			<td>05-636</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>GFAP antibody</td>
			<td>Thermo Fisher</td>
			<td>13-0300</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>GFP antibody</td>
			<td>Santa Cruz</td>
			<td>SC-9996</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glucose</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>G8270</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glutamine (200 mM)</td>
			<td>Corning cellgrow</td>
			<td>25-005-Cl</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>H&#38;E and KI-67</td>
			<td>Jefferson Core Facility Pathology staining</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hand Drill Set with Micro Mini Twist Drill Bits</td>
			<td>Amazon</td>
			<td>YCQ2851920086082DJ</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HEPES, free acid</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>BP299-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Just for mice Stereotaxic Frame</td>
			<td>Harvard Apparatus (Holliston, MA, USA).</td>
			<td>72-6049, 72-6044</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>KCl</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>S271-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Large surgical scissors</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>14001-18</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MDA-MB-231BR cells</td>
			<td>Kindly provided by Dr. Patricia Steeg</td>
			<td>Ref 14</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MgCl2&#183;6H2O</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>M33-500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mice imaging device</td>
			<td>Perkin Elmer</td>
			<td>IVIS 200 system</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mice imaging software</td>
			<td>Caliper Life Sciences (Waltham, MA, USA).</td>
			<td>Living Image Software</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microplate Reader</td>
			<td>Tecan Spark</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mounting solution</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>P36935</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MTS reagent</td>
			<td>Promega CellTiter 96 Aqueous One Solution</td>
			<td>(Cat:G3582)</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>N2 supplement</td>
			<td>Life Technologies</td>
			<td>17502-048</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Neurobasal medium</td>
			<td>Life Technologies</td>
			<td>21103049</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nu/Nu athymic mice</td>
			<td>Charles Rivers Labs (Wilmington, MA, USA)</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Paraformaldehyde</td>
			<td>Affymetrix</td>
			<td>19943</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pen/Strep</td>
			<td>Life Technologies</td>
			<td>145140-122</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Polypropylene Suture</td>
			<td>Medex supply</td>
			<td>ETH-8556H</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Povidone Iodine Swab sticks</td>
			<td>DME Supply USA</td>
			<td>Cat: 689286X</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scalpel blade #11 (pk of 100)</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>10011-00</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scalpel handle #3</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>10003-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium Pyruvate</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>S8636</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Spatula/probe</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>10090-13</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SS Double edge uncoated razor blades (American safety razor co (95-0043))</td>
			<td>VWR</td>
			<td>55411-060</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sucrose</td>
			<td>Amresco</td>
			<td>57-50-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical Scalpel</td>
			<td>Exelint International</td>
			<td>D29702</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue Chopper</td>
			<td>Brinkman</td>
			<td>(McIlwain type)</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue culture inserts</td>
			<td>Millipore</td>
			<td>PICMORG50 or PICM03050</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>X-ray machine</td>
			<td>Precision 250 kVp</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
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an ex vivo brain slice model to study and target breast cancer brain metastatic tumor growth

मस्तिष्क मेटास्टेसिस महिलाओं के लिए स्तन कैंसर का एक गंभीर परिणाम है क्योंकि इन ट्यूमर का इलाज करना मुश्किल है और खराब नैदानिक परिणामों से जुड़ा हुआ है। स्तन कैंसर मस्तिष्क मेटास्टैटिक (बीसीबीएम) विकास के प्रीक्लिनिकल माउस मॉडल उपयोगी हैं, लेकिन महंगे हैं, और मस्तिष्क पैरेन्काइमा के भीतर जीवित कोशिकाओं और ट्यूमर सेल आक्रमण को ट्रैक करना मुश्किल है। यहां प्रस्तुत पूर्व विवो मस्तिष्क स्लाइस संस्कृतियों के लिए एक प्रोटोकॉल है, जिसमें इंट्राक्रैनियल रूप से इंजेक्ट किए गए स्तन कैंसर मस्तिष्क की मांग करने वाले क्लोनल सबलाइन शामिल हैं। एमडीए-एमबी -231बीआर लूसिफेरस टैग की गई कोशिकाओं को न्यू / नू मादा चूहों के दिमाग में इंट्राक्रैनियल रूप से इंजेक्ट किया गया था, और ट्यूमर गठन के बाद, मस्तिष्क को अलग, कटा हुआ और सुसंस्कृत पूर्व विवो किया गया था। ट्यूमर स्लाइस को लूसिफेरस को व्यक्त करने वाली ट्यूमर कोशिकाओं की पहचान करने और 10 दिनों तक मस्तिष्क पैरेन्काइमा में उनके प्रसार और आक्रमण की निगरानी करने के लिए चित्रित किया गया था। इसके अलावा, प्रोटोकॉल आयनीकरण विकिरण या कीमोथेरेपी के साथ उपचार के बाद ट्यूमर कोशिकाओं के विकास और आक्रामक व्यवहार की छवि के लिए समय-अंतराल माइक्रोस्कोपी के उपयोग का वर्णन करता है। उपचार के लिए ट्यूमर कोशिकाओं की प्रतिक्रिया को लाइव-इमेजिंग माइक्रोस्कोपी द्वारा कल्पना की जा सकती है, बायोल्यूमिनेसेंस तीव्रता को मापने और बीसीबीएम कोशिकाओं वाले मस्तिष्क के टुकड़े पर हिस्टोलॉजी का प्रदर्शन किया जा सकता है। इस प्रकार, यह पूर्व विवो स्लाइस मॉडल अकेले उपन्यास चिकित्सीय एजेंटों के तेजी से परीक्षण के लिए एक उपयोगी मंच हो सकता है या विकिरण के साथ संयोजन में मस्तिष्क माइक्रोएन्वायरमेंट के भीतर एक व्यक्तिगत रोगी के स्तन कैंसर मस्तिष्क मेटास्टेटिक विकास को लक्षित करने के लिए व्यक्तिगत दवाओं की पहचान करने के लिए।

एमडीए-एमबी-231बीआर-जीएफपी-लूसिफेरस कोशिकाओं को इंट्राक्रैनियल रूप से 4-6 सप्ताह पुराने एनयू / एनयू चूहों के दाहिने गोलार्ध में इंजेक्ट किया गया था जैसा कि ऊपर बताया गया है (चित्रा 1 ए) और 12-14 दिनों ...

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An Ex Vivo Brain Slice Model to Study and Target Breast Cancer Brain Metastatic Tumor Growth

हम एक organotypic मस्तिष्क टुकड़ा मॉडल में स्तन कैंसर मस्तिष्क मेटास्टैटिक कोशिकाओं की वास्तविक समय की दवा और विकिरण प्रतिक्रिया को मापने के लिए एक प्रोटोकॉल पेश करते हैं। विधियाँ एक मात्रात्मक परख प्रदान करने के लिए मस्तिष्क माइक्रोएन्वायरमेंट इंटरफ़ेस के भीतर एक पूर्व vivo तरीके से स्तन कैंसर से मस्तिष्क मेटास्टेसिस पर विभिन्न उपचारों के चिकित्सीय प्रभावों की जांच करने के लिए।

स्तन कैंसर मस्तिष्क मेटास्टैटिक ट्यूमर विकास का अध्ययन और लक्ष्य करने के लिए एक पूर्व वीवो मस्तिष्क स्लाइस मॉडल

Brain metastasis is a serious consequence of breast cancer for women as these tumors are difficult to treat and are associated with poor clinical ...

Research

JoVE Journal

Cancer Research

An Ex Vivo Brain Slice Model to Study and Target Breast Cancer Brain Metastatic Tumor Growth

A Portal Vein Injection Model to Study Liver Metastasis of Breast Cancer

एक पोर्टल नस इंजेक्शन मॉडल का अध्ययन करने के लिए स्तन कैंसर का लिवर मेटास्टेसिस

Breast cancer is the leading cause of cancer-related mortality in women worldwide. Liver metastasis is involved in upwards of 30% of cases with breast ...

Acellular and Cellular Lung Model to Study Tumor Metastasis

Acellular और सेलुलर फेफड़े मॉडल ट्यूमर मेटास्टेसिस का अध्ययन करने के लिए

It is difficult to isolate tumor cells at different points of tumor progression. We created an ex vivo lung model that can show the interaction of tumor ...

Live-Cell Imaging Assays to Study Glioblastoma Brain Tumor Stem Cell Migration and Invasion

लाइव सेल इमेजिंग परख ग्लियोब्लास्टोमा ब्रेन ट्यूमर स्टेम सेल प्रवासन और आक्रमण का अध्ययन करने के लिए

Glioblastoma (GBM) is an aggressive brain tumor that is poorly controlled with the currently available treatment options. Key features of GBMs include ...

Paramyxoviruses for Tumor-targeted Immunomodulation: Design and Evaluation Ex Vivo

ट्यूमर के लिए Paramyxoviruses-लक्षित चुहियों: डिजाइन और मूल्यांकन पूर्व Vivo

Successful cancer immunotherapy has the potential to achieve long-term tumor control. Despite recent clinical successes, there remains an urgent need for ...

The Clinical Application of Tumor Treating Fields Therapy in Glioblastoma

ट्यूमर के नैदानिक आवेदन ग्लियोब्लास्टोमा में खेतों चिकित्सा उपचार

Glioblastoma is the most common and lethal form of brain cancer, with a median survival of 15 months after diagnosis and a 5 year survival rate of only 5% ...

Longitudinal Intravital Imaging of Brain Tumor Cell Behavior in Response to an Invasive Surgical Biopsy

एक इनवेसिव सर्जिकल बायोप्सी के जवाब में मस्तिष्क ट्यूमर सेल व्यवहार के दीर्घकालिक Intravital इमेजिंग

Biopsies are standard of care for cancer treatment and are clinically beneficial as they allow solid tumor diagnosis, prognosis, and personalized ...

In Vivo Inhibition of MicroRNA to Decrease Tumor Growth in Mice

चूहे में ट्यूमर की वृद्धि को कम करने के लिए MicroRNA के Vivo निषेध में

MicroRNAs (miRNAs) are important regulators of gene expression through their ability to destabilize mRNA and inhibit translation of target mRNAs. An ...

In Vitro Assay to Study Tumor-macrophage Interaction

इन विट्रो परख से अध्ययन ट्यूमर-मैक्रोफेज इंटरेक्शन

Tumor associated macrophages (TAMs) account for a large percentage of cells in the tumor mass for different types of cancers. Glioblastoma (GBM), a ...

Generation of Orthotopic Pancreatic Tumors and Ex vivo Characterization of Tumor-Infiltrating T Cell Cytotoxicity

Generation of Orthotopic Pancreatic Tumors and Ex vivo Characterization of Tumor-Infiltrating T Cell Cytotoxicity

ऑर्थोटोपिक अग्नाशय ट्यूमर की पीढ़ी और ट्यूमर के पूर्व वीवो लक्षण वर्णन-घुसपैठ टी सेल साइटोटॉक्सिकिटी

In vivo models of pancreatic cancer provide invaluable tools for studying disease dynamics, immune infiltration and new therapeutic strategies. The ...