Name: direct cannula implantation in the cisterna magna of pigs
Uploaded: 2021-06-09T15:00:00
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इस काम को Knut और Alice Wallenberg Foundation, Hjärnfonden, Wenner Gren Foundations और Crafoord Foundation द्वारा समर्थित किया गया था।

सभी प्रक्रियाओं को यूरोपीय निर्देश 2010/63/EU के अनुसार किया गया था और पशु अनुसंधान पर माल्मो-लुंड नैतिक समिति (Dnr 5.8.18-05527/2019) द्वारा अनुमोदित किया गया था और स्वीडिश अनुसंधान परिषद के कोडेक्स दिशानिर्देशों के अन?...

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	<li>Redzic, Z. B., Segal, M. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+structure+of+the+choroid+plexus+and+the+physiology+of+the+choroid+plexus+epithelium.">The structure of the choroid plexus and the physiology of the choroid plexus epithelium.</a> Advanced Drug Delivery Reviews. 56 (12), 1695-1716 (2004).</li><li>Sakka, L., Coll, G., Chazal, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anatomy+and+physiology+of+cerebrospinal+fluid.">Anatomy and physiology of cerebrospinal fluid.</a> European Annals of Otorhinolaryngology, Head and Neck Diseases. 128 (6), 309-316 (2011).</li><li>Nedergaard, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Garbage+truck+of+the+brain.">Garbage truck of the brain.</a> Science. 340 (6140), 1529-1530 (2013).</li><li>Iliff, J. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Paravascular+pathway+facilitates+csf+flow+through+the+brain+parenchyma+and+the+clearance+of+interstitial+solutes,+including+amyloid+B.">A Paravascular pathway facilitates csf flow through the brain parenchyma and the clearance of interstitial solutes, including amyloid B.</a> Science Translational Medicine. 4 (147), (2012).</li><li>Xie, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sleep+drives+metabolite+clearance+from+the+Adult+Brain.">Sleep drives metabolite clearance from the Adult Brain.</a> Science. 342 (6156), 373-378 (2013).</li><li>Mestre, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aquaporin-4-dependent+glymphatic+solute+transport+in+the+rodent+brain.">Aquaporin-4-dependent glymphatic solute transport in the rodent brain.</a> eLife. 7, 40070 (2018).</li><li>Ringstad, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Brain-wide+glymphatic+enhancement+and+clearance+in+humans+assessed+with+MRI.">Brain-wide glymphatic enhancement and clearance in humans assessed with MRI.</a> JCI Insight. 3 (13), 121537 (2018).</li><li>Lundgaard, I., Wang, W., Eberhardt, A., Vinitsky, H. S., Cameron, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Beneficial+effects+of+low+alcohol+exposure,+but+adverse+effects+of+high+alcohol+intake+on+glymphatic+function.">Beneficial effects of low alcohol exposure, but adverse effects of high alcohol intake on glymphatic function.</a> Scientific Reports. , 1-16 (2018).</li><li>Munk, A. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=PDGF-B+is+required+for+development+of+the+glymphatic+system.">PDGF-B is required for development of the glymphatic system.</a> Cell Reports. 26 (11), 2955-2969 (2019).</li><li>Plog, B. 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R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cannula+implantation+into+the+cisterna+magna+of+rodents.">Cannula implantation into the cisterna magna of rodents.</a> Journal of Visualized Experiments. (135), e57378 (2018).</li><li>Ramos, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cisterna+magna+injection+in+rats+to+study+glymphatic+function.">Cisterna magna injection in rats to study glymphatic function.</a> Methods in Molecular Biology. 1938, (2019).</li><li>Sweeney, A. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=in+vivo+imaging+of+cerebrospinal+fluid+transport+through+the+intact+mouse+skull+using+fluorescence+macroscopy.">in vivo imaging of cerebrospinal fluid transport through the intact mouse skull using fluorescence macroscopy.</a> Journal of visualized experiments. (149), e59774 (2019).</li><li>Eide, P. K., Ringstad, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=MRI+with+intrathecal+MRI+gadolinium+contrast+medium+administration:+A+possible+method+to+assess+glymphatic+function+in+human+brain.">MRI with intrathecal MRI gadolinium contrast medium administration: A possible method to assess glymphatic function in human brain.</a> Acta Radiologica Open. 4 (11), 205846011560963 (2015).</li><li>Ringstad, G., Vatnehol, S. A. S., Eide, P. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Glymphatic+MRI+in+idiopathic+normal+pressure+hydrocephalus.">Glymphatic MRI in idiopathic normal pressure hydrocephalus.</a> Brain. 140 (10), 2691-2705 (2017).</li><li>Kornum, B. R., Knudsen, G. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cognitive+testing+of+pigs+(Sus+scrofa)+in+translational+biobehavioral+research.">Cognitive testing of pigs (Sus scrofa) in translational biobehavioral research.</a> Neuroscience and Biobehavioral Reviews. 35 (3), 437-451 (2011).</li><li>B&#232;chet, N. B., Shanbhag, N. C., Lundgaard, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Glymphatic+function+in+the+gyrencephalic+brain.">Glymphatic function in the gyrencephalic brain.</a> Journal of Cerebral Blood Flow &amp; Metabolism. , (2021).</li><li>Raghunandan, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bulk+flow+of+cerebrospinal+fluid+observed+in+periarterial+spaces+is+not+an+artifact+of+injection.">Bulk flow of cerebrospinal fluid observed in periarterial spaces is not an artifact of injection.</a> bioRxiv. , (2020).</li><li>D'Angelo, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spinal+fluid+collection+technique+from+the+atlanto-occipital+space+in+pigs.">Spinal fluid collection technique from the atlanto-occipital space in pigs.</a> Acta Veterinaria Brno. 78 (2), 303-305 (2009).</li><li>Ma, Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rapid+lymphatic+efflux+limits+cerebrospinal+fluid+flow+to+the+brain.">Rapid lymphatic efflux limits cerebrospinal fluid flow to the brain.</a> Acta Neuropathologica. 137 (1), 151-165 (2019).</li><li>Hablitz, L. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Increased+glymphatic+influx+is+correlated+with+high+EEG+delta+power+and+low+heart+rate+in+mice+under+anesthesia.">Increased glymphatic influx is correlated with high EEG delta power and low heart rate in mice under anesthesia.</a> Science Advances. 5 (2), 5447 (2019).</li><li>Mestre, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Flow+of+cerebrospinal+fluid+is+driven+by+arterial+pulsations+and+is+reduced+in+hypertension.">Flow of cerebrospinal fluid is driven by arterial pulsations and is reduced in hypertension.</a> Nature Communications. 9 (1), 4878 (2018).</li><li>Pleticha, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pig+lumbar+spine+anatomy+and+imaging-guided+lateral+lumbar+puncture:+A+new+large+animal+model+for+intrathecal+drug+delivery.">Pig lumbar spine anatomy and imaging-guided lateral lumbar puncture: A new large animal model for intrathecal drug delivery.</a> Journal of Neuroscience Methods. 216 (1), 10-15 (2013).</li></ol>

इसमें, वर्णित है, सूअरों में टंकी मैग्ना के प्रत्यक्ष कैनुलेशन को निष्पादित करने के लिए एक विस्तृत प्रोटोकॉल, जिसमें आवश्यक तैयारी, सर्जिकल प्रक्रिया, अनुरेखक जलसेक और मस्तिष्क का निष्कर्षण शामिल है?...

मस्तिष्कमेरु द्रव (सीएसएफ) रक्त का एक अल्ट्राफिल्ट्रेट है जो केंद्रीय तंत्रिका तंत्र (सीएनएस) 1,2 के भीतर और उसके आसपास पाया जाता है। मस्तिष्क को उछाल देने या हानिकारक यांत्रिक बलों को अवशोषित करने के अलावा, सीएसएफ सीएनएस 3 से चयापचय अपशिष्ट को साफ करने में भी महत्वपूर्ण भूमिका निभाता है। अपशिष्ट निकासी को हाल ही में विशेषता वाले ग्लिम्फेटिक सिस्टम द्वारा सुविधाजनक बनाया गया है जो पेरिवैस्कुलर स्पेस (पीवीएस) के माध्यम से मस्तिष्क पैरेन्काइमा के माध्यम से सीएसएफ के संवहनी प्रवाह की अनुमति देता है, जो धमनियों को घेरता है3,4,5। इस प्रक्रिया को एक्वापोरिन -4 (AQP4) पर निर्भर दिखाया गया है, जो मुख्य रूप से एस्ट्रोसाइटिक एंडफीट पर व्यक्त किया गया एक जल चैनल है, जो PVS4,6 से बंधा हुआ है। ग्लिम्फेटिक सिस्टम का अध्ययन विवो और एक्स वीवो इमेजिंग दोनों में प्राप्त किया जाता है, या तो उन्नत प्रकाश माइक्रोस्कोपी या चुंबकीय अनुनाद इमेजिंग (एमआरआई) का उपयोग करके, सीएसएफ 7,8,9,10,11 में फ्लोरोसेंट / रेडियोधर्मी अनुरेखक या कंट्रास्ट एजेंट की शुरुआत के बाद।
मस्तिष्क पैरेन्काइमा को नुकसान पहुंचाए बिना सीएसएफ में एक ट्रेसर पेश करने का एक प्रभावी तरीका टंकी मैग्ना कैनुलेशन (सीएमसी) 12,13 के माध्यम से है। सभी ग्लिम्फेटिक अध्ययनों का एक बड़ा बहुमत, इस प्रकार अब तक कृन्तकों में किया गया है और एक छोटे से स्तनपायी के साथ काम करने की व्यावहारिक सादगी के लिए युग्मित सीएमसी की आक्रामकता के कारण उच्च स्तनधारियों में बचा गया है। इसके अतिरिक्त, चूहों की पतली खोपड़ी एक कपाल खिड़की की आवश्यकता के बिना विवो इमेजिंग में अनुमति देती है और बाद में एक जटिल मस्तिष्क निष्कर्षण 11,14 के लिए अनुमति देती है। मनुष्यों में किए गए प्रयोगों ने ग्लिम्फेटिक फ़ंक्शन पर विवो डेटा में एक मूल्यवान मैक्रोस्कोपिक प्राप्त किया है, लेकिन डिस्टल काठ की रीढ़ में इंट्राथेकल ट्रेसर इंजेक्शन पर भरोसा किया है और इसके अलावा, एमआरआई का उपयोग करता है जो माइक्रोएनाटॉमी को कैप्चर करने के लिए पर्याप्त संकल्प उत्पन्न नहीं करता है ग्लाइम्फेटिक सिस्टम7,15,16 . उच्च स्तनधारियों में ग्लिम्फेटिक प्रणाली की वास्तुकला और सीमा को समझना मनुष्यों के लिए इसके अनुवाद के लिए आवश्यक है। मनुष्यों के लिए ग्लिम्फेटिक अनुवाद को सुविधाजनक बनाने के लिए, उन तकनीकों को लागू करना महत्वपूर्ण है जो कृन्तकों में उच्च स्तनधारियों के लिए किए जाते हैं ताकि बढ़ती अनुभूति और मस्तिष्क की जटिलता की प्रजातियों में ग्लिम्फेटिक सिस्टम की सीधी तुलना की अनुमति दी जा सके। सुअर और मानव मस्तिष्क gyrencephalic हैं, एक तह neuroarchitecture धारण करते हैं, जबकि कृंतक मस्तिष्क lissencephalic हैं, जिससे एक दूसरे के बीच काफी अंतर होता है। समग्र आकार के संदर्भ में, सुअर के दिमाग भी, मनुष्यों के लिए अधिक तुलनीय हैं, मानव मस्तिष्क की तुलना में 10-15 गुना छोटे हैं, जबकि माउस दिमाग 3,000 गुना छोटे हैं। बड़े स्तनधारियों में ग्लिम्फेटिक प्रणाली को बेहतर ढंग से समझने से, स्ट्रोक, दर्दनाक मस्तिष्क की चोट और न्यूरोडीजेनेरेशन जैसी स्थितियों में भविष्य के चिकित्सीय हस्तक्षेप के लिए मानव ग्लिम्फेटिक सिस्टम का उपयोग करना संभव हो सकता है। विवो में सूअरों में प्रत्यक्ष सीएमसी एक ऐसी विधि है जो एक उच्च स्तनपायी में ग्लिम्फेटिक सिस्टम के उच्च-रिज़ॉल्यूशन प्रकाश माइक्रोस्कोपी की अनुमति देती है। इसके अलावा, उपयोग किए जाने वाले सूअरों के आकार के कारण, मानव सर्जरी में उपयोग किए जाने वाले लोगों के समान निगरानी प्रणालियों को लागू करना संभव है, जिससे यह आकलन करने के लिए महत्वपूर्ण कार्यों को कसकर दस्तावेज और विनियमित करना संभव हो जाता है कि ये ग्लिम्फेटिक फ़ंक्शन में कैसे योगदान करते हैं।

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>0.01% azide in PBS</td>
			<td>Sigmaaldrich</td>
			<td>S2002</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>18G needle</td>
			<td>Mediq</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1ml Syringe</td>
			<td>FischerSci</td>
			<td>15849152</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>20G cannula</td>
			<td>Mediq</td>
			<td>NA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>22G cannula</td>
			<td>Mediq</td>
			<td>NA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4% paraformaldehyde</td>
			<td>Sigmaaldrich</td>
			<td>P6148</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anatomical forceps</td>
			<td>NA</td>
			<td>NA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bovine serum albumin Alexa-Fluor 647 Conjugate</td>
			<td>ThermoFischer</td>
			<td>A34785</td>
			<td>2 vials (10mg)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CaCl2</td>
			<td>Sigmaaldrich</td>
			<td>C1016</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chisel</td>
			<td>ClasOhlson</td>
			<td>40-8870</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dental cement</td>
			<td>Agnthos</td>
			<td>7508</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>compact saw</td>
			<td>ClasOhlson</td>
			<td>40-9517</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glucose</td>
			<td>Sigmaaldrich</td>
			<td>G8270</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hammer</td>
			<td>ClasOhlson</td>
			<td>40-7694</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Insta-Set CA Accelerator</td>
			<td>BSI-Inc</td>
			<td>BSI-151</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>IV line TAP, 3-WAYS with 10cm extension</td>
			<td>Bbraun</td>
			<td>NA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>KCl</td>
			<td>Sigmaaldrich</td>
			<td>P9333</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Marker pen</td>
			<td>NA</td>
			<td>NA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MgCl2</td>
			<td>Sigmaaldrich</td>
			<td>M8266</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MilliQ water</td>
			<td>NA</td>
			<td>NA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaCL</td>
			<td>Sigmaaldrich</td>
			<td>S7653</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaH2PO4</td>
			<td>Sigmaaldrich</td>
			<td>S8282</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaHCO3</td>
			<td>Sigmaaldrich</td>
			<td>S5761</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>No. 20 scalpel blade</td>
			<td>Agnthos</td>
			<td>BB520</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>No. 21 Scalpel blade</td>
			<td>Agnthos</td>
			<td>BB521</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>No. 4 Scalpel handle</td>
			<td>Agnthos</td>
			<td>10004-13</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Saline</td>
			<td>Mediq</td>
			<td>NA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Salmon knife</td>
			<td>Fiskers</td>
			<td>NA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Self-retaining retractors</td>
			<td>NA</td>
			<td>NA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Superglue</td>
			<td>NA</td>
			<td>NA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical curved scissors</td>
			<td>NA</td>
			<td>NA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical forceps</td>
			<td>NA</td>
			<td>NA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical towel clamps</td>
			<td>NA</td>
			<td>NA</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

direct cannula implantation in the cisterna magna of pigs

ग्लिम्फेटिक सिस्टम मस्तिष्क में एक अपशिष्ट निकासी प्रणाली है जो एस्ट्रोसाइट-बाउंड पेरिवैस्कुलर रिक्त स्थान में मस्तिष्कमेरु द्रव (सीएसएफ) के प्रवाह पर निर्भर करती है और एमिलॉइड-बीटा जैसे न्यूरोटॉक्सिक पेप्टाइड्स की निकासी में फंस गई है। बिगड़ा हुआ ग्लिम्फेटिक फ़ंक्शन न्यूरोडीजेनेरेटिव बीमारियों के पशु मॉडल में रोग विकृति को बढ़ाता है, जैसे कि अल्जाइमर, जो इस निकासी प्रणाली को समझने के महत्व पर प्रकाश डालता है। ग्लिम्फेटिक प्रणाली का अध्ययन अक्सर सिस्टेरा मैग्ना कैनुलेशन (सीएमसी) द्वारा किया जाता है, जहां ट्रेसर्स को सीधे मस्तिष्कमेरु द्रव (सीएसएफ) में वितरित किया जाता है। हालांकि, अधिकांश अध्ययन कृन्तकों में किए गए हैं। यहां, हम सूअरों में सीएमसी तकनीक के अनुकूलन का प्रदर्शन करते हैं। सूअरों में सीएमसी का उपयोग करते हुए, ग्लिम्फेटिक सिस्टम का अध्ययन gyrencephalic दिमाग में एक उच्च ऑप्टिकल रिज़ॉल्यूशन पर किया जा सकता है और ऐसा करने में कृंतक और मानव ग्लिम्फेटिक्स के बीच ज्ञान के अंतर को पुल किया जा सकता है।

एक बार जब सुअर बेहोश हो जाता है, तो इसे पैलेट किया जाता है, और इसकी सतह की शारीरिक रचना को चिह्नित किया जाता है, जो ओसीसीपटल शिखा (ओसी) से शुरू होता है और वक्षीय कशेरुकाओं (टीवी) और प्रत्येक कान के आधार (ईबी) क...

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Direct Cannula Implantation in the Cisterna Magna of Pigs

यह लेख सूअरों के टंकी मैग्ना में प्रत्यक्ष कैनुला आरोपण के लिए एक चरण-दर-चरण प्रोटोकॉल प्रस्तुत करता है।

सूअरों के टंकी मैग्ना में प्रत्यक्ष कैनुला आरोपण

The glymphatic system is a waste clearance system in the brain that relies on the flow of cerebrospinal fluid (CSF) in astrocyte-bound perivascular spaces ...

यह प्रोटोकॉल महत्वपूर्ण है क्योंकि यह एक बड़े स्तनपायी में ग्लिम्फेटिक सिस्टम की जांच की अनुमति देता है, जिससे हम मनुष्यों में ग्लिम्फेटिक सिस्टम को समझने के करीब आते हैं। इस तकनीक के दो फायदे हैं। सिस्टेरा मैग्ना में निशान का परिचय मस्तिष्क को किसी भी प्रत्यक्ष क्षति से बचाता है, जो इंट्रावेंट्रिकुलर इंजेक्शन के विपरीत है।दूसरे, यह एक प्रत्यक्ष दृष्टिकोण है जो कैनुलेशन के तत्काल विज़ुअलाइज़ेशन की अनुमति देता है और यह जानने की अनुमति देता है कि यह सफल रहा है या नहीं। सुअर को एक प्रवण स्थिति में रखकर शुरू करें। पश्चकपाल शिखा, पहले वक्षीय कशेरुकाओं की रीढ़, और प्रत्येक कान के आधार का पता लगाने और चिह्नित करने के लिए इसके सिर और गर्दन के पीछे palpate।अनुदैर्ध्य अक्ष के साथ शिखा और कशेरुकाओं के बीच एक सीधी रेखा खींचें। फिर खोपड़ी के आधार का पालन करते हुए, शिखा से प्रत्येक कान के आधार तक दो रेखाएं खींचें। ध्यान से जानवर की पूंछ को दबाएं और यह देखने के लिए एक पलटा देखें कि क्या यह गहरी नींद में है।एक संख्या 21 ब्लेड के साथ एक स्केलपेल का उपयोग करके मांसपेशियों के लिए नीचे अनुदैर्ध्य रेखा के साथ एक त्वचीय चीरा बनाकर शुरू करें, फिर कंधों के साथ दो लंबवत चीरों का विस्तार करें, प्रत्येक 10 से 15 सेंटीमीटर लंबाई में। ओसीसीपटल शिखा से शुरू करते हुए, प्रत्येक कान के आधार तक लाइन के साथ त्वचीय चीरों को बनाएं। ओसीसीपटल शिखा पर गठित त्वचा के कोनों को पकड़ने के लिए शारीरिक संदंश का उपयोग करें, फिर त्वचा को अंतर्निहित मांसपेशी से अलग करने के लिए प्रावरणी पर हल्के से स्केलपेल ब्लेड चलाएं।ट्रेपेज़ियस मांसपेशी के कुछ हिस्सों की कल्पना करने के लिए पांच चीरों में से प्रत्येक के साथ त्वचा को उच्छेदित करें। स्केलपेल का उपयोग एक अनुदैर्ध्य चीरा लगभग एक सेंटीमीटर गहरा बनाने के लिए करें जहां ट्रेपेज़ियस मध्य रेखा पर एक साथ आता है, फिर सीधे और घुमावदार सर्जिकल संदंश के संयोजन का उपयोग करके मांसपेशियों में अनुदैर्ध्य कटौती के साथ एक कुंद विच्छेदन करता है, जो ट्रेपेज़ियस और अंतर्निहित सेमीस्पिनलिस कैपिटिस बिवेंटर मांसपेशी के पेट को अलग करेगा। एक स्केलपेल के साथ किसी भी निरंतर मांसपेशी तंतुओं को तोड़दें और कुंद विच्छेदन करना जारी रखें जब तक कि सेमीस्पिनलिस कैपिटिस कॉम्प्लेक्स दिखाई न दे।खोपड़ी के पीछे के पहलू के साथ ले जाएँ और trapezius और semispinalis capitis biventer मांसपेशियों की उत्पत्ति को अलग करें। दो मांसपेशियों को अनुदैर्ध्य रूप से अलग करने के लिए, सर्जिकल संदंश का उपयोग कुंद विच्छेदन करने के लिए करें जब तक कि सेमीस्पिनलिस कैपिटिस कॉम्प्लेक्स पूरी तरह से दिखाई न दे। फिर ट्रेपेज़ियस और सेमीस्पिनलिस कैपिटिस बिवेंटर मांसपेशियों को वापस लेने के लिए स्व-बनाए रखने वाले रिट्रेक्टर्स का उपयोग करें।एक सेंटीमीटर गहरे अनुदैर्ध्य चीरा बनाने के लिए स्केलपेल का उपयोग करें जहां सेमीस्पिनलिस कैपिटिस कॉम्प्लेक्स के पेट मिडलाइन पर एक साथ आते हैं। मांसपेशियों के पेट के बीच अनुदैर्ध्य कटौती के साथ काम करने वाले सर्जिकल संदंश का उपयोग करके एक कुंद विच्छेदन करें जब तक कि एटलस और अक्ष दोनों स्पष्ट न हों। खोपड़ी के पीछे के पहलू के साथ आगे बढ़ें, सेमीस्पाइनलिस कैपिटिस कॉम्प्लेक्सस मांसपेशियों की उत्पत्ति को अलग करें।अंतर्निहित कशेरुकाओं से मांसपेशियों को अनुदैर्ध्य रूप से अलग करने के लिए स्केलपेल और कुंद विच्छेदन का उपयोग करें, फिर सेमीस्पिनलिस कैपिटिस कॉम्प्लेक्सस मांसपेशियों को वापस लेने के लिए आत्म-बनाए रखने वाले रिट्रेक्टर्स के एक और सेट का उपयोग करें। उस क्षेत्र में किसी भी शेष ऊतक को सावधानीपूर्वक हटाने के लिए एक स्केलपेल का उपयोग करें जहां एटलस खोपड़ी के आधार से मिलता है। एटलस और खोपड़ी के मोड़ पर जानवर की गर्दन और एक उंगली पर एक हाथ रखें, फिर एक साथ सिर को ऊपर उठाएं और गर्दन को फ्लेक्स करें, जबकि टंकी मैग्ना को प्रकट करने के लिए उंगली से पैलेटिंग करें।सुनिश्चित करें कि एक व्यक्ति जानवर के सिर और गर्दन को ऊंचा और फ्लेक्स करता है, जबकि अन्य टंकी मैग्ना के लिए पैलेट्स करते हैं, जिससे इसके शारीरिक स्थान का एक नोट बनता है। अनुदैर्ध्य अक्ष के लिए तिरछे कोण पर ड्यूरा के माध्यम से धीरे-धीरे और सावधानी से टंकी मैग्ना में एक 22 गेज कैनुला का परिचय दें, फिर कैनुला से सुई को वापस लें और लॉक पर एक टोपी रखें। सुपर गोंद और एक त्वरक को लागू करने के साथ शुरू करें जहां प्रवेशनी ऊतक में प्रवेश करती है, फिर दंत सीमेंट लागू करें।सीमेंट के सख्त होने के लिए पांच मिनट प्रतीक्षा करें। कैनुला से सावधानी से टोपी को हटा दें। एक 10 सेंटीमीटर विस्तार का उपयोग कर अनुरेखक के साथ IV लाइन नल के पुरुष अंत के लिए प्रवेशनी संलग्न करें।ट्रेसर को धीरे-धीरे 100 माइक्रोलीटर प्रति मिनट की दर से या तो हाथ से या माइक्रो इन्फ्यूजन पंप का उपयोग करके इंजेक्ट करें। IV लाइन नल निकालें और इसे टोपी के साथ बदलें। जाँचें कि क्या अनुरेखक कैनुला के आधार पर स्पंदन दिखाई दे रहा है।फिर कुछ लचीलापन बनाए रखने के लिए जानवर की गर्दन के नीचे सैंडबैग रखें। सिर को छोड़ दें और जानवर को आराम करने वाली प्रवण स्थिति में छोड़ दें। स्व-बनाए रखने वाले retractors जारी करें और मांसपेशियों को बदलें।मांसपेशियों पर त्वचा को एक साथ लाने के लिए सर्जिकल तौलिया क्लैंप का उपयोग करें। पहले धुंध का उपयोग करें और फिर तौलिया क्लैंप को कवर करने के लिए एक कंबल और गर्मी के नुकसान को सीमित करने के लिए चीरा। अनुरेखक को वांछित समय के लिए परिचालित करने की अनुमति दें।मस्तिष्क की पृष्ठीय सतह की सिली हुई मैक्रोस्कोपिक छवियां sulci और विदर में अनुरेखक के वितरण पैटर्न में विस्तृत अंतर्दृष्टि प्रदान कर सकती हैं। मस्तिष्क के वेंट्रल और पार्श्व सतहों से समान छवियां टेम्पोरल लोब और पार्श्व विदर में अनुरेखक वितरण के बारे में जानकारी प्रदान कर सकती हैं। एक स्टीरियोस्कोप का उपयोग करके उत्पादित उच्च आवर्धन की मस्तिष्क सतह की छवियां धमनियों के साथ पीवीएस में ट्रेसर की कल्पना करने में मदद कर सकती हैं।मैक्रोस्कोपिक कोरोनल मस्तिष्क अनुभाग इंटरहेमिस्फेरिक विदर और सबकॉर्टिकल ट्रेसर वितरण और संरचना में अनुरेखक प्रवेश की गहराई में अंतर्दृष्टि प्रदान करते हैं, जैसे कि हिप्पोकैम्पस और स्ट्रिएटम। AQP4, ग्लियाल फाइब्रिलरी अम्लीय प्रोटीन, और चिकनी मांसपेशी एक्टिन के लिए इम्यूनोहिस्टोकेमिकल स्टेनिंग से पता चला है कि ट्रेसर पीवीएस के भीतर स्थानीयकृत है, साथ ही साथ मस्तिष्क पैरेन्काइमा में चला गया है। एस्ट्रोसाइट पैर प्रक्रियाएं जो पीवीएस की बाहरी सतह बनाती हैं, उन्हें AQP4 और ग्लियाल फाइब्रिलरी अम्लीय प्रोटीन स्टेनिंग का उपयोग करके पहचाना जाता है।एंडोथेलियल कोशिकाएं जो पीवीएस की आंतरिक सतह बनाती हैं, उन्हें लेक्टिन और GLUT-1 दाग का उपयोग करके दाग दिया जाता है। एसएमए धुंधला धमनियों और धमनियों की पहचान करता है और इसका उपयोग यह दिखाने के लिए किया जा सकता है कि पीवीएस प्रवाह नसों के बजाय धमनियों के साथ होता है, जो सामान्य ग्लिम्फेटिक फ़ंक्शन के मूल शरीर विज्ञान का गठन करता है। आगे बढ़ते हुए, हम स्ट्रोक और दर्दनाक मस्तिष्क की चोट जैसे न्यूरोपैथोलॉजी के संदर्भ में बड़े स्तनपायी में एक उच्च संकल्प पर ग्लिम्फेटिक सिस्टम का पता लगाने की उम्मीद करते हैं।

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Electrode Positioning and Montage in Transcranial Direct Current Stimulation

इलेक्ट्रोड और transcranial प्रत्यक्ष वर्तमान उत्तेजना में पोजिशनिंग संग्रथित

Transcranial direct current stimulation (tDCS) is a technique that has been intensively investigated in the past decade as this method offers a ...

Multimodal Imaging of Stem Cell Implantation in the Central Nervous System of Mice

चूहे के केंद्रीय तंत्रिका तंत्र में स्टेम सेल आरोपण के मल्टीमॉडल इमेजिंग

During the past decade, stem cell transplantation has gained increasing interest as primary or secondary therapeutic modality for a variety of diseases, ...

Direct Intraventricular Delivery of Drugs to the Rodent Central Nervous System

कृंतक केन्द्रीय तंत्रिका तंत्र के लिए ड्रग्स का प्रत्यक्ष intraventricular डिलिवरी

Due to an inability to cross the blood brain barrier, certain drugs need to be directly delivered into the central nervous system (CNS). Our lab focuses ...

Cannula Implantation into the Cisterna Magna of Rodents

कुतर के Cisterna Magna में प्रवेशनी आरोपण

Cisterna magna cannulation (CMc) is a straightforward procedure that enables direct access to the cerebrospinal fluid (CSF) without operative damage to ...

Laminectomy and Spinal Cord Window Implantation in the Mouse

माउस में लेमिनेक्टॉमी और स्पाइनल कॉर्ड विंडो प्रत्यारोपण

This protocol describes a method for spinal cord laminectomy and glass window implantation for in vivo imaging of the mouse spinal cord. An integrated ...

Chronic Implantation of Whole-cortical Electrocorticographic Array in the Common Marmoset

जीर्ण-cortical Electrocorticographic सरणी के आम Marmoset में पुरानी आरोपण

Electrocorticography (ECoG) allows the monitoring of electrical field potentials from the cerebral cortex with high spatiotemporal resolution. Recent ...

Stereotaxic Surgery for Implantation of Microelectrode Arrays in the Common Marmoset (Callithrix jacchus)

Stereotaxic Surgery for Implantation of Microelectrode Arrays in the Common Marmoset Callithrix jacchus

आम Marmoset में Microelectrode ऐरे के प्रत्यारोपण के लिए स्टीरियोटैक्सिक सर्जरी (Calithrix Jacchus)

Marmosets (Callithrix jacchus) are small non-human primates that are gaining popularity in biomedical and preclinical research, including the ...

Double Direct Injection of Blood into the Cisterna Magna as a Model of Subarachnoid Hemorrhage

सबराचनॉइड हेमरेज के मॉडल के रूप में सिस्टर्ना मैग्ना में रक्त का डबल डायरेक्ट इंजेक्शन

Among strokes, subarachnoid hemorrhage (SAH) consecutive to the rupture of a cerebral arterial aneurysm represents 5-9% but is responsible for about 30% ...

Stereotaxic Surgical Approach to Microinject the Caudal Brainstem and Upper Cervical Spinal Cord via the Cisterna Magna in Mice

Stereotaxic Surgical Approach to Microinject the Caudal Brainstem and Upper Cervical Spinal Cord via the Cisterna Magna in Mice

स्टीरियोटैक्सिक सर्जिकल दृष्टिकोण माइक्रोइंजेक्ट करने के लिए पुच्छल ब्रेनस्टेम और ऊपरी ग्रीवा रीढ़ की हड्डी चूहों में टंकी मैग्ना के माध्यम से

Stereotaxic surgery to target brain sites in mice is commonly guided by skull landmarks. Access is then obtained via burr holes drilled through the skull. ...

Pupillometry to Assess Auditory Sensation in Guinea Pigs

गिनी सूअरों में श्रवण संवेदना का आकलन करने के लिए प्यूपिलोमेट्री

Noise exposure is a leading cause of sensorineural hearing loss. Animal models of noise-induced hearing loss have generated mechanistic insight into the ...