Name: anterior segment organ culture platform for tracking open globe injuries and therapeutic performance
Uploaded: 2021-08-25T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Anterior Segment Organ Culture Platform for Tracking Open Globe Injuries and Therapeutic Performance at JoVE.com

Bu materyal, Geçici Kornea Onarım satın alma programı (Amerika Birleşik Devletleri Ordusu Tıbbi Materiel Geliştirme Ajansı) ile kurumlar arası bir anlaşma (#19-1006-IM) aracılığıyla Amerika Birleşik Devletleri Savunma Bakanlığı tarafından desteklenen çalışmalara dayanmaktadır.

Bu protokolü gerçekleştirmeden önce, hayvanların araştırma ve eğitimde kullanımı için yasal ve etik gerekliliklerin mevcut olduğunu unutmayın. Canlı hayvanlar oküler doku kaynağı için kullanılıyorsa, başlamadan önce yerel etik veya yasal otorite (IACUC veya Etik kurulu vb.) tarafından onay alın. Hayvanların kullanımı için onay alma konusunda herhangi bir soru varsa, devam etmeyin. Daha önce in vivo fizyolojiye en yakın 24 saat içinde elde edilen ve kullanılan taze gözenekli gözl...

<ol>
	<li>Hilber, D., Mitchener, T. A., Stout, J., Hatch, B., Canham-Chervak, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Eye+injury+surveillance+in+the+US+Department+of+Defense,+1996-2005.">Eye injury surveillance in the US Department of Defense, 1996-2005.</a> American Journal of Preventive Medicine. 38, 78-85 (2010).</li><li>Linde, A. S., McGinnis, L. J., Thompson, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Multi-Battle+domain-perspective+in+military+medical+simulation+trauma+training.">Multi-Battle domain-perspective in military medical simulation trauma training.</a> Journal of Trauma &amp; Treatment. 06 (04), (2017).</li><li>Riesberg, J., Powell, D., Loos, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+loss+of+the+golden+hour.">The loss of the golden hour.</a> Special Warfare. , 49-51 (2017).</li><li>Townsend, S., Lasher, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> The US Army in Multi-Domain Operations 2028. (525-3-1), (2018).</li><li>Blanch, R. J., Bishop, J., Javidi, H., Murray, P. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+time+to+primary+repair+on+final+visual+outcome+after+open+globe+injury.">Effect of time to primary repair on final visual outcome after open globe injury.</a> The British Journal of Ophthalmology. 103 (10), 1491-1494 (2019).</li><li>Lesniak, S. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characteristics+and+outcomes+of+delayed+open+globe+repair.">Characteristics and outcomes of delayed open globe repair.</a> Investigative Ophthalmology &amp; Visual Science. 53 (14), 4954 (2012).</li><li>Loporchio, D., Mukkamala, L., Gorukanti, K., Zarbin, M., Langer, P., Bhagat, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intraocular+foreign+bodies:+A+review.">Intraocular foreign bodies: A review.</a> Survey of Ophthalmology. 61 (5), 582-596 (2016).</li><li>Jonas, J. B., Budde, W. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Early+versus+late+removal+of+retained+intraocular+foreign+bodies.">Early versus late removal of retained intraocular foreign bodies.</a> Retina. 19 (3), 193-197 (1999).</li><li>Watson, P. G., Jovanovik-Pandova, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prolonged+ocular+hypotension:+would+ciliary+tissue+transplantation+help.">Prolonged ocular hypotension: would ciliary tissue transplantation help.</a> Eye. 23 (10), 1916-1925 (2009).</li><li>Snider, E. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+and+characterization+of+a+benchtop+corneal+puncture+injury+model.">Development and characterization of a benchtop corneal puncture injury model.</a> Scientific Reports. 10 (1), 4218 (2020).</li><li>Snider, E. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+open-globe+porcine+injury+platform+for+assessing+therapeutics+and+characterizing+biological+effects.">An open-globe porcine injury platform for assessing therapeutics and characterizing biological effects.</a> Current Protocols in Toxicology. 86 (1), 98 (2020).</li><li>Snider, E. J., Cornell, L. E., Gross, B., Zamora, D. O., Boice, E. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assessment+of+commercial+off-the-shelf+tissue+adhesives+for+sealing+military+relevant+corneal+perforation+injuries.">Assessment of commercial off-the-shelf tissue adhesives for sealing military relevant corneal perforation injuries.</a> Military Medicine. , (2021).</li><li>Snider, E. J., Boice, E. N., Butler, J. J., Gross, B., Zamora, D. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+an+anterior+segment+organ+culture+model+for+open+globe+injuries.">Characterization of an anterior segment organ culture model for open globe injuries.</a> Scientific Reports. 11 (1), 8546 (2021).</li><li>Erickson-Lamy, K., Rohen, J. W., Grant, W. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Outflow+facility+studies+in+the+perfused+human+ocular+anterior+segment.">Outflow facility studies in the perfused human ocular anterior segment.</a> Experimental Eye Research. 52 (6), 723-731 (1991).</li><li>Johnson, D. H., Tschumper, R. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effect+of+organ+culture+on+human+trabecular+meshwork.">The effect of organ culture on human trabecular meshwork.</a> Experimental Eye Research. 49 (1), 113-127 (1989).</li><li>Johnson, D. H., Tschumper, R. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+trabecular+meshwork+organ+culture.+A+new+method.">Human trabecular meshwork organ culture. A new method.</a> Investigative Ophthalmology &amp; Visual Science. 28 (6), 945-953 (1987).</li><li>Snider, E. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improving+stem+cell+delivery+to+the+trabecular+meshwork+using+magnetic+nanoparticles.">Improving stem cell delivery to the trabecular meshwork using magnetic nanoparticles.</a> Scientific Reports. 8 (1), 12251 (2018).</li><li>Llobet, A., Gasull, X., Gual, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Understanding+trabecular+meshwork+physiology:+a+key+to+the+control+of+intraocular+pressure.">Understanding trabecular meshwork physiology: a key to the control of intraocular pressure.</a> Physiology. 18 (5), 205-209 (2003).</li><li>Goel, M., Picciani, R. G., Lee, R. K., Bhattacharya, S. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aqueous+humor+dynamics:+A+review.">Aqueous humor dynamics: A review.</a> The Open Ophthalmology Journal. 4, 52-59 (2010).</li><li>Snider, E. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+a+porcine+organ-culture+glaucoma+model+mimicking+trabecular+meshwork+damage.">Development of a porcine organ-culture glaucoma model mimicking trabecular meshwork damage.</a> Investigative Ophthalmology &amp; Visual Science. 62 (3), 18 (2021).</li><li>Ren, H., Wilson, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Apoptosis+in+the+corneal+epithelium.">Apoptosis in the corneal epithelium.</a> Investigative Ophthalmology &amp; Visual Science. 37 (6), 1017-1025 (1996).</li><li>Komuro, A., Hodge, D. O., Gores, G. J., Bourne, W. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell+death+during+corneal+storage+at+4&#176;C.">Cell death during corneal storage at 4&#176;C.</a> Investigative Ophthalmology &amp; Visual Science. 40 (12), 2827-2832 (1999).</li><li>Crespo-Moral, M., Garc&#237;a-Posadas, L., L&#243;pez-Garc&#237;a, A., Diebold, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Histological+and+immunohistochemical+characterization+of+the+porcine+ocular+surface.">Histological and immunohistochemical characterization of the porcine ocular surface.</a> PLOS One. 15 (1), e0227732 (2020).</li><li>Wilson, S. E., Medeiros, C. S., Santhiago, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pathophysiology+of+corneal+scarring+in+persistent+epithelial+defects+after+prk+and+other+corneal+injuries.">Pathophysiology of corneal scarring in persistent epithelial defects after prk and other corneal injuries.</a> Journal of Refractive Surgery. 34 (1), 59-64 (2018).</li><li>Auw-Haedrich, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immunohistochemical+expression+of+epithelial+cell+markers+in+corneas+with+congenital+aniridia+and+ocular+cicatrizing+pemphigoid.">Immunohistochemical expression of epithelial cell markers in corneas with congenital aniridia and ocular cicatrizing pemphigoid.</a> Acta Ophthalmologica. 89 (1), 47-53 (2011).</li><li>Lyngholm, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immunohistochemical+markers+for+corneal+stem+cells+in+the+early+developing+human+eye.">Immunohistochemical markers for corneal stem cells in the early developing human eye.</a> Experimental Eye Research. 87 (2), 115-121 (2008).</li><li>Bandamwar, K. L., Papas, E. B., Garrett, Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fluorescein+staining+and+physiological+state+of+corneal+epithelial+cells.">Fluorescein staining and physiological state of corneal epithelial cells.</a> Contact Lens &amp; Anterior Eye: The Journal of the British Contact Lens Association. 37 (3), 213-223 (2014).</li><li>Bandamwar, K. L., Garrett, Q., Papas, E. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sodium+fluorescein+staining+of+the+corneal+epithelium:+What+does+it+mean+at+a+cellular+level.">Sodium fluorescein staining of the corneal epithelium: What does it mean at a cellular level.</a> Investigative Ophthalmology &amp; Visual Science. 52 (14), 6496 (2011).</li><li>Sherwood, J. M., Reina-Torres, E., Bertrand, J. A., Rowe, B., Overby, D. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Measurement+of+outflow+facility+using+iPerfusion.">Measurement of outflow facility using iPerfusion.</a> PLoS One. 11 (3), (2016).</li><li>Weichel, E. D., Colyer, M. H., Ludlow, S. E., Bower, K. S., Eiseman, A. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Combat+ocular+trauma+visual+outcomes+during+operations+iraqi+and+enduring+freedom.">Combat ocular trauma visual outcomes during operations iraqi and enduring freedom.</a> Ophthalmology. 115 (12), 2235-2245 (2008).</li><li>Colyer, M. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Delayed+intraocular+foreign+body+removal+without+endophthalmitis+during+Operations+Iraqi+Freedom+and+Enduring+Freedom.">Delayed intraocular foreign body removal without endophthalmitis during Operations Iraqi Freedom and Enduring Freedom.</a> Ophthalmology. 114 (8), 1439-1447 (2007).</li><li>Geggel, H. S., Maza, C. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anterior+stromal+puncture+with+the+Nd:YAG+laser.">Anterior stromal puncture with the Nd:YAG laser.</a> Investigative Ophthalmology &amp; Visual Science. 31 (8), 1555-1559 (1990).</li><li>Matthews, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Indentation+and+needle+insertion+properties+of+the+human+eye.">Indentation and needle insertion properties of the human eye.</a> Eye. 28 (7), 880-887 (2014).</li><li>Rau, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+mechanics+of+corneal+deformation+and+rupture+for+penetrating+injury+in+the+human+eye.">The mechanics of corneal deformation and rupture for penetrating injury in the human eye.</a> Injury. 49 (2), 230-235 (2018).</li><li>Agrawal, R., Ho, S. W., Teoh, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pre-operative+variables+affecting+final+vision+outcome+with+a+critical+review+of+ocular+trauma+classification+for+posterior+open+globe+(zone+III)+injury.">Pre-operative variables affecting final vision outcome with a critical review of ocular trauma classification for posterior open globe (zone III) injury.</a> Indian Journal of Ophthalmology. 61 (10), 541 (2013).</li><li>Knyazer, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prognostic+factors+in+posterior+open+globe+injuries+(zone-III+injuries).">Prognostic factors in posterior open globe injuries (zone-III injuries).</a> Clinical &amp; Experimental Ophthalmology. 36 (9), 836-841 (2008).</li><li>Tan, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=C3+Transferase-Expressing+scAAV2+Transduces+Ocular+Anterior+Segment+Tissues+and+Lowers+Intraocular+Pressure+in+Mouse+and+Monkey.">C3 Transferase-Expressing scAAV2 Transduces Ocular Anterior Segment Tissues and Lowers Intraocular Pressure in Mouse and Monkey.</a> Molecular Therapy - Methods &amp; Clinical Development. 17, 143-155 (2020).</li><li>Bhattacharya, S. K., Gabelt, B. T., Ruiz, J., Picciani, R., Kaufman, P. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cochlin+Expression+in+Anterior+Segment+Organ+Culture+Models+after+TGF&#946;2+Treatment.">Cochlin Expression in Anterior Segment Organ Culture Models after TGF&#946;2 Treatment.</a> Investigative Ophthalmology &amp; Visual Science. 50 (2), 551-559 (2009).</li><li>Zhu, W., Godwin, C. R., Cheng, L., Scheetz, T. E., Kuehn, M. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transplantation+of+iPSC-TM+stimulates+division+of+trabecular+meshwork+cells+in+human+eyes.">Transplantation of iPSC-TM stimulates division of trabecular meshwork cells in human eyes.</a> Scientific Reports. 10 (1), 2905 (2020).</li></ol>

ASOC OG yaralanma platformunda, metodolojiyi kullanırken başarı olasılığını artırmak için vurgulanması gereken kritik adımlar vardır. İlk olarak, ön segment diseksiyonu sırasında, trabeküler meshwork'ü korumak esastır, ancak doğru şekilde yapılması zordur. TM bozulursa, göz fizyolojik basıncı korumaz ve deneysel kullanım için uygunluk kriterlerini karşılamaz. Uygun diseksiyonlar elde edilene kadar ek aseptik teknik zorluklarının ortaya konması yerine, diseksiyon işleminin normal koşull...

Açık küre (OG) yaralanmaları tedavi edilmezse veya yaralanmadan sonra en azından stabilize edildiğinde kalıcı görme kaybına neden olabilir1. Ancak gecikmeler, kırsal alanlarda veya askeri senaryolarda savaş alanında olduğu gibi oftalmik müdahaleye erişimin hazır olmadığı uzak bölgelerde yaygındır. Tedavi hazır olmadığında, mevcut bakım standardı, tıbbi müdahale mümkün olana kadar gözü sert bir kalkanla korumaktır. Askeri tıpta, bu gecikme şu anda 24 saate kadardır, ancak hava tahliyenin mümkün olmadığı kentsel ortamlarda gelecekteki savaş operasyonlarında 72 h'ye kadar artması bekmektedir2,3,4. Oftalmik müdahaleye erişimin sınırlı olduğu kırsal, uzak sivil uygulamalarda bu gecikmeler daha da uzun olabilir5,6. Tedavi edilmemiş bir OG yaralanması, gözün su geçirmez mührü tehlikeye atıldığınız için enfeksiyona ve göz içi basıncı kaybına (Gİb) oldukça duyarlıdır7,8. Gİb kaybı doku canlılığını etkileyebilir, yaralanma ve terapötik arasındaki gecikme çok uzunsa, herhangi bir tıbbi müdahalenin görüşü geri getirme olasılığını düşük hale getirir9.
Bir oftalmik uzmana ulaşılana kadar OG yaralanmalarını kapatmak için uygulanması kolay terapötiklerin geliştirilmesini sağlamak için, daha önce10 , 11. Bu model ile tüm gözenekli gözlerde yüksek hızlı yaralanmalar oluşturulurken, Gİb basınç dönüştürücüler tarafından yakalandı. Terapötikler daha sonra OG yaralanma bölgesini mühürleme yeteneklerini değerlendirmek için uygulanabilir12. Bununla birlikte, bu model tüm gözenekli gözleri kullandığından, sadece hasta özel bakıma ulaşana kadar terapötik yaralanma bölgesini stabilize etmesi gereken olası 72 saat penceresinde daha uzun süreli performansı izlemenin bir yolu olmadan hemen terapötik performansı değerlendirebilir. Sonuç olarak, ön segment organ kültürü (ASOC) OG yaralanma modeli geliştirilmiş ve uzun süreli terapötik performansı izlemek için bir platform olarak bu protokoldedetaylandır 13.
ASOC, kornea gibi ön segmentin avasküler dokusunun, enükleasyon sonrası 14 , 15,16,17gibi birkaç hafta boyunca korunması için yaygın olarak kullanılan bir tekniktir. Ön segment fizyolojik akış hızlarında sıvı perfüzyon ve TRABEKÜler meshwork çıkış bölgesi korunarak fizyolojik Gİb altında korunur, Gİb düzenleme sorumlu doku, ASOC kurulumu sırasında18,19. ASOC platformu doku fizyolojik olarak koruyabilir, pnömatik güçlendirilmiş bir cihaz kullanarak OG yaralanmasına neden olabilir, terapötik uygulayabilir ve yaralanma sonrası en az 72 saat boyunca yaralanma stabilizasyonunu izleyebilir13.
Burada, protokol ASOC platformunu kullanmak için adım adım bir metodoloji sağlar. İlk olarak, ASOC platformunun nasıl kurulayıp üretılacağını detaylandırıyor. Daha sonra, protokol ön segmentin nasıl aseptik olarak parçalanıp trabeküler mesh çalışmasının nasıl korunduğunu ve ardından özel yapım organ kültürü yemeklerinde ön segment dokusunun nasıl kurulduğunu detaylandırıyor. Daha sonra, açık küre yaralanmalarının nasıl oluşturulacağını ve yaralanmadan hemen sonra terapötik nasıl uygulanacağını detaylandırıyor. Son olarak, protokol, gözün fonksiyonel, mekanik ve biyolojik özelliklerini ve yaralanmanın ne kadar iyi stabilize edildiğini değerlendiren bu yöntemle kullanımı mümkün olan karakterizasyon parametrelerine genel bir bakış sağlar. Genel olarak, bu model açık küre yaralanmalarını stabilize etmek ve tedavi etmek için ürün geliştirmeyi hızlandırmak ve yaralanmadan sonra zayıf görme prognozunu iyileştirmek için çok ihtiyaç duyulan bir platform sağlar.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>10-32 Polycarbonate straight plug, male threaded pipe connector</td>
			<td>McMaster-Carr</td>
			<td>51525K431</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10-32 Socket cap screw, &#189;&#34;</td>
			<td>McMaster-Carr</td>
			<td>92196A269</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10 mL syringe</td>
			<td>BD</td>
			<td>302995</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>20 mL syringe</td>
			<td>BD</td>
			<td>302830</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-Anti</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>15240-096</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ball-End L key</td>
			<td>McMaster-Carr</td>
			<td>5020A25</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Betadine</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>NC1696484</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD&#160;Intramedic&#160;PE 160 Tubing</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>14-170-12E</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cotton swabs</td>
			<td>Puritan</td>
			<td>25-8061WC</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM media</td>
			<td>ATCC</td>
			<td>30-2002</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FBS</td>
			<td>ATCC</td>
			<td>30-2020</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fine forceps</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>15914</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gauze</td>
			<td>Covidien</td>
			<td>8044</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gentamicin</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>15710-064</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glutamax</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>35050-061</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>High temperature silicone O-ring, 2 mm wide, 4 mm ID</td>
			<td>McMaster-Carr</td>
			<td>5233T47</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Large forceps</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>500365</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Large surgical scissors</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>503261</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medium toothed forceps</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>501217</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nail (puncture object)</td>
			<td>McMaster-Carr</td>
			<td>97808A503</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nylon syringe filters</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>09-719C</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PBS</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>10010-023</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Petri dish (100 mm)</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>FB0875713</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Polycarbonate, three-way, stopcock with male&#160;luer&#160;lock</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>NC9593742</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Razor blade</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>12-640</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stainless steel 18 G&#160;90 degree&#160;angle dispensing needle</td>
			<td>McMaster-Carr</td>
			<td>75165A81</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stainless steel 18 G straight &#189;&#39;&#8217; dispensing needle</td>
			<td>McMaster-Carr</td>
			<td>75165A675</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile 100 mL beakers with lids</td>
			<td>VWR</td>
			<td>15704-092</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vannas&#160;scissors</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>WP5070</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

anterior segment organ culture platform for tracking open globe injuries and therapeutic performance

Açık küre yaralanmaları kötü görsel sonuçlara sahiptir ve genellikle kalıcı görme kaybına neden olabilir. Bu kısmen, kırsal ortamlarda yaralanma ve tıbbi müdahale ile oftalmik bakımın hazır olmadığı askeri tıp uygulamaları arasındaki uzun gecikmeden kaynaklanmaktadır. Tedavi edilmeyen yaralanmalar, göz su geçirmez mührünü kaybettikten sonra enfeksiyona ve göz içi hipotensiyona bağlı doku canlılığı kaybına karşı hassastır. Açık küre yaralanmalarını geçici olarak mühürlemek için terapötikler, uygun şekilde geliştirilirse, göz içi basıncını geri getirebilir ve uygun oftalmik bakım mümkün olana kadar enfeksiyonu önleyebilir. Ürün geliştirmeyi kolaylaştırmak için, burada ayrıntılı olarak, yaralanma sonrası en az 72 saat boyunca terapötik performansı izlemek için ön segment organ kültürü açık küre yaralanma platformunun kullanımı ayrıntılı olarak açıktır. Porcine ön segment dokusu özel tasarlanmış organ kültürü yemeklerinde tutulabilir ve fizyolojik göz içi basıncında tutulabilir. Delinme yaralanmaları, askeri yaralanma boyutlarına benzer şekilde 4,5 mm çapa kadar yaralanma boyutları üretebilen pnömatik güçte bir sistemle oluşturulabilir. Göz içi basıncı kaybı, uygun yaralanma indüksiyonunu ve gözün su geçirmez contasının kaybını doğrulayan 72 saat sonrası yaralanma için gözlenebilir. Terapötik performans, yaralanma indüksiyonu sonrası göze uygulama ve daha sonra göz içi basıncının birden fazla gün boyunca izlenmesi ile takip edilebilir. Ayrıca, ön segment yaralanması modeli, saydamlığı, oküler mekaniği, kornea epitel sağlığını ve doku canlılığını değerlendirmek gibi ön segment fizyolojisini fonksiyonel ve biyolojik olarak izlemek için yaygın olarak kullanılan yöntemler için geçerlidir. Genel olarak, burada açıklanan yöntem, oftalmik bakım hazır olmadığında açık küre yaralanmalarını geçici olarak kapatmak için biyomalzeme terapötikleri geliştirmek için gerekli bir sonraki adımdır.

Optik Koherens Tomografi (OCT) ile çekilen görüntüler, başarılı bir yaralanma indüksiyonun nasıl göründüğünü göstermek için OG yaralı gözleri için gösterilir. Şekil 3, yaralanmadan hemen sonra ve 72 saat sonra kontrol ve OG yaralı AS dokusu için görüntüler göstermektedir. İki görünüm gösterilir: yaralanma bölgesinden kesitsel görüntüler ve görüntünün yüzey alanını görselleştirmek için yukarıdan aşağıya maksimum yoğunluk projeksiyonu (MIP'le...

Watch this Scientific Journal Video about Anterior Segment Organ Culture Platform for Tracking Open Globe Injuries and Therapeutic Performance at JoVE.com

Anterior Segment Organ Culture Platform for Tracking Open Globe Injuries and Therapeutic Performance

Açık küre göz yaralanmaları, kırsal veya askeri senaryolarda birden fazla gün boyunca tedavi edilmeyebilir ve bu da körlüğe neden olabilir. Görme kaybını en aza indirmek için terapötiklere ihtiyaç vardır. Burada, bir organ kültürü açık küre yaralanma modelini detaylandırıyoruz. Bu model ile, bu yaralanmaları stabilize etmek için potansiyel terapötikler uygun şekilde değerlendirilebilir.

Açık Küre Yaralanmalarını ve Terapötik Performansı İzlemek için Ön Segment Organ Kültürü Platformu

Open globe injuries have poor visual outcomes, often resulting in permanent loss of vision. This is partly due to an extended delay between injury and ...

Açık küre yaralanmaları tedavi edilmezse kalıcı görme kaybına yol açabilir. Bu ön segment organ kültürü modeli, hayvan testine ihtiyaç duyan bu yaralanmaların değerlendirilmesini sağlar. Bu protokol, açık küre yaralanmalarını ve terapötikleri izlemenin, bir organ kültürü platformuyla yaralanmayı üç veya daha fazla gün boyunca stabilize etmesine izin verir.Prosedürü gösteren, Dr.Boice laboratuvarından bir araştırma teknisyeni olan Trent Pearson olacak. Başlamak için, cerrahi örtü ve brüt diseksiyon için gerekli aletleri döşeyin. Diseksiyon mikroskopunda gözleri görselleştirmek için biyogüvenlik kabinini kurun.Bulaşık montajı için biyogüvenlik kabinini kurun. Biyogüvenlik kabininin içindeki açık küre yaralanma indüksiyon çalışma alanını kurun. Çapraz izleme mengenesini laboratuvar jakına, delinme platformunun önüne yerleştirin.Ekstra orbital dokuları çıkardıktan ve gözleri antibiyotik antimycotic PBS ile yıkadıktan sonra, gözü nemlendirerek gözü antibiyotik antimykotik PBS ıslatılmış gazlı bez üzerine yerleştirin. Gözün ekvatorunun yakınında bir kesi oluşturmak için steril bir jilet veya neşter kullanın. Daha sonra ön gözü izole etmek için kavisli cerrahi makas kullanarak gözü yarımnect.Ön segmentten vitreus mizahını kepçeyle almak ve lensi ön segmentten mikro makasla çıkarmak için kürek olarak mikro makas kullanın. Trabeküler meshwork görünene kadar iris köküne yavaş yavaş kesin. Tüm trabeküler meshwork bölgesini ortaya çıkarmak ve gerekirse trabeküler meshwork'ü kaplayan kalan irisleri temizlemek için kesimi irisin etrafına 360 derece uzatın.Silier gövde kalıntılarını trabeküler meshwork bölgesine sadece bir milimetre incelikte doku bandı bırakarak kırpın. Ön segmenti Petri kabına yerleştirdikten sonra. Medyada bir pamuklu çubuk ıslatın ve herhangi bir pigmenti çıkarmak için korneanın ortasına hafifçe dablayın.Gözleri asalarla tutun ve silerek skleranın etrafındaki ekstra pigmenti çıkarın. Ters ön segmenti alt kabın yükseltilmiş bölgesinin üzerine yerleştirin ve korneanın yükseltilmiş bölgenin merkezinde kalmasını sağlayın. Sıkma halkasını yeni yerleştirilen ön segmentin üzerine yerleştirin ve vidaları L tuşuyla hafifçe sıkın.Her iki akışkan konektörü de O halkalı olarak kabın altındaki dişli bağlantı noktalarına takın. İlk akışkan konektöre 18 ölçer 90 derece bükülmüş iğne göbeği, boru uzunluğu, 18 kalibrelik iğne göbeği, naylon şırınga filtresi, üç yönlü valf ve medya ile dolu 20 milimetre şırınga takın. İkinci akışkan konektöre 18 ölçer 90 derece bükülmüş iğne göbeği, bir boru uzunluğu, 18 kalibrelik bir iğne göbeği, ilk sıvı konektörü için gösterildiği gibi üç yönlü bir valf takın ve ardından sıvıyı ve kabarcıkları yakalamak için bir rezervuar görevi görecek steril 10 mililitrelik bir şırınganın namlu kısmını takın.Üç yönlü vanaları şırınna uygun şekilde açık tutun, ilk akışkanlar konektör bağlantı noktasını kullanarak ortamı yavaşça sistemden geçirin. Ön segmenti şişirmek için boruyu ortamla doldurun ve sonunda rezervuarı doldurun. Ortamı yavaşça yemeğe iterek kabarcıkları çıkarın ve kabarcıkları dışarı itmek için tabağı ters çevirin.Ön segment organ kültürü çanasını hücre kültürü inkübatörüne yerleştirin. Kapının açılıp kapanmasına müdahaleyi önlemek için boru hatlarını inkübatör kapısının altından dışarı doğru yönlendirin. Boru hatlarını basınç dönüştürücü cihazına rezervuar ile yerleştirin.Hava kabarcıklarının boru hatlarına girmesini önlemek için PBS çizgiden akarken yan üç yönlü vanayı basınç dönüştürücüye bağlayın. Açık yaralanma indüksiyonu için hazırlanan biyo güvenlik kabininin içinde, 4,5 milimetre çapa kadar olan nesnelerde yeterli delinme kuvveti üretmek için delinme platformundaki basınç regülatörünü inç kare başına 50 pound kuvvete ayarlayın. Çapraz izleme mengenesini laboratuvar jakına delinme platformunun önüne yerleştirin.Piston kolunu maksimum mesafesine uzatın ve kornea tepesini delici nesnenin bir milimetre bölgesi içinde konumlandırın, piston kolunu geri çekin ve ön segmenti delici nesneye bir santimetre yaklaştırın. Delinme cihazını ateşlemek için cihazı açın ve solenoid vanayı cihazdaki ikinci anahtarla açın. Cihazı gözlerden geri çekmek için ikinci düğmeye basın, yaralanma bölgesinden sızan görsel inceleme ve ortamla uygun yaralanma indüksiyonunu doğrulayın.Ameliyattan sonra kornea epitel bütünlüğü optik koherens tomografisi kullanılarak görüntüleme ile değerlendirildi. Yaralanan ön segment dokusu yaralanmadan hemen sonra ve yaralanma sonrası 72 saat görüntülendi. Kontrol edilen gözler korneada gözle görülür bir bozulma göstermezken, yaralanmadan sonra korneadan net yaralanmalar tespit edildi.Yukarıdan aşağıya maksimum yoğunluk projeksiyonundan, yaralanmaların şekil ve boyut olarak düzensiz olduğu açıktı, ancak yaralanma boyutu 72 saat içinde azaldı. Kabul edilebilir aralıkta basınç stabilitesini belirlemek için ameliyattan önceki ilk üç gün gözlenen interoküler basınç gözlendi. Temsili sonuçlarda her beş gözden üçü kabul edilebilir interoküler basınç aralığına girer.Açık küre yaralanması ve terapötik müdahale nedeniyle interoküler basınç değişir. Açık küre yaralanma indüksiyonu sonrasında basınç önemli ölçüde azaldı ve deney tamamlanana kadar düşük kaldı. Yaralı dokuların dermabond yapıştırıcı ile tedavisi, tedavi edilmemiş dokuya kıyasla göz içi basıncının artmasına neden oldu, bu da bu yöntemin göz içi basıncını geri yüklemek için terapötiklerin etkinliğini ölçmek için kullanılabileceğini gösteriyor.Segmentin organ kültüründe ilk kurulumu dokunun uzun süreli stabilitesi için kritik öneme sahiptir. Halkanın aşırı sıkması doku üzerinde strese neden olabilir ve uyumu azaltabilir.

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Alginate Hydrogels for Three-Dimensional Organ Culture of Ovaries and Oviducts

Yumurtalıklar ve fallop borularında Üç Boyutlu Organ Kültür Aljinatta Hidrojeller

Ovarian cancer is the fifth leading cause of cancer deaths in women and has a 63% mortality rate in the United States1. The cell type of origin for ...

Biyomühendislik

Preparation of Intact Bovine Tail Intervertebral Discs for Organ Culture

Organ Kültür bozulmamış Sığır Kuyruğu İntervertebral Disklerin Hazırlanması

The intervertebral disc (IVD) is the joint of the spine connecting  vertebra to vertebra. It functions to transmit loading of the spine and give  ...

The Multi-organ Chip - A Microfluidic Platform for Long-term Multi-tissue Coculture

Çok organ Chip - Uzun vadeli Çok doku kokültürü için mikroakışkan Platformu

The ever growing amount of new substances released onto the market and the limited predictability of current in vitro test systems has led to a high need ...

A Microfluidic Platform for High-throughput Single-cell Isolation and Culture

Yüksek verim Tek hücreli İzolasyonu ve Kültür mikroakışkan Platformu

Studying the heterogeneity of single cells is crucial for many biological questions, but is technically difficult. Thus, there is a need for a simple, yet ...

Fabrication of Inverted Colloidal Crystal Poly(ethylene glycol) Scaffold: A Three-dimensional Cell Culture Platform for Liver Tissue Engineering

Fabrication of Inverted Colloidal Crystal Polyethylene glycol Scaffold: A Three-dimensional Cell Culture Platform for Liver Tissue Engineering

Ters Kolloidal Kristal Poli (etilen glikol) İskele imalatı: Karaciğer Doku Mühendisliği için Üç boyutlu Hücre Kültürü Platformu

The ability to maintain hepatocyte function in vitro, for the purpose of testing xenobiotics&#39; cytotoxicity, studying virus infection and developing ...

Layered Alginate Constructs: A Platform for Co-culture of Heterogeneous Cell Populations

Katmanlı Aljinat Yapıları: Heterojen hücre popülasyonlarının Co-kültür için bir platform

Many load bearing tissues possess structurally and functionally distinct regions, typically accompanied by different cell phenotypes with differential ...

Microfluidic Platform with Multiplexed Electronic Detection for Spatial Tracking of Particles

Parçacıkların Mekansal Takip için Çoklanmış Elektronik Algılama ile mikroakışkan Platformu

Microfluidic processing of biological samples typically involves differential manipulations of suspended particles under various force fields in order to ...

An In Vitro Organ Culture Model of the Murine Intervertebral Disc

An In Vitro Organ Culture Model of the Murine Intervertebral Disc

bir<em&gt; İn Vitro</emKemirgen İntervertebral Disk&gt; Organ Kültürü Modeli

Intervertebral disc (IVD) degeneration is a significant contributor to low back pain. The IVD is a fibrocartilaginous joint that serves to transmit and ...

Assembly and Tracking of Microbial Community Development within a Microwell Array Platform

Bir Mikro Kuyruklu Dizi Platformunda Mikrobik Topluluk Geliştirmenin Montajı ve Takibi

The development of microbial communities depends on a combination of complex deterministic and stochastic factors that can dramatically alter the spatial ...

A Performance-testing Platform for a Conduction Micropump with an FR-4 Copper-clad Electrode Plate

Performans Test platformu ve tel Micropump FR-4 bakır kaplı elektrot plaka ile için

Here, a conduction micropump with symmetric planar electrode pairs prepared on flame-retardant glass-reinforced epoxy (FR-4) copper-clad laminate (CCL) is ...