Name: resin-assisted capture coupled with isobaric tandem mass tag labeling for multiplexed quantification of protein thiol oxidation
Uploaded: 2021-06-21T13:00:00
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काम के कुछ हिस्सों को एनआईएच ग्रांट्स आर01 डीके122160, आर01 एचएल139335 और यू24 डीके112349 द्वारा समर्थित किया गया था

पशु या मानव नमूने / ऊतकों से संबंधित प्रोटोकॉल में वर्णित सभी प्रक्रियाओं को मानव और पशु अनुसंधान नैतिकता समिति के संस्थागत दिशानिर्देशों द्वारा अनुमोदित और पालन किया गया था।
1. नमूना समरूपी...

सिस्टीन अवशेषों25,29,30 के ऑक्सीडेटिव संशोधनों की जांच के लिए विभिन्न प्रकार के नमूना प्रकारों और जैविक प्रणालियों में राल-सहायता प्राप्त कैप्चर का उपयोग किया गया है। ?...

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	<tbody>
		<tr>
			<td>2-(Pyridyldithio)ethylamine hydrochloride</td>
			<td>Med Chem Express</td>
			<td>HY-101794</td>
			<td>Reagent for in-house resin synthesis</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2.0 mL LoBind centrifuge tubes</td>
			<td>Eppendorf</td>
			<td>22431048</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>5.0 mL LoBind centrifuge tubes</td>
			<td>Eppendorf</td>
			<td>30108310</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>5.0 mL round bottom tubes</td>
			<td>Falcon</td>
			<td>352054</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acetone</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>A949-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acetonitrile</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>34998</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Activated Thiol&#8211;Sepharose&#160;4B</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>T8512</td>
			<td>Potential replacement for thiol-affinity resin</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Amicon Ultra 0.5 mL centrifugal filter</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>UFC5010BK</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ammonium bicarbonate</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>09830</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bicinchonicic acid (BCA)</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>23227</td>
			<td>Protein Assay Reagent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Centrifuge</td>
			<td>Eppendorf</td>
			<td>5810R</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Centrifuge</td>
			<td>Eppendorf</td>
			<td>5415R</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dithiothreitol (DTT)</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>20291</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EDTA</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>E5134</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HEPES buffer</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>H4034</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Homogenizer</td>
			<td>BioSpec Products</td>
			<td>985370</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Iodoacetimide (IAA)</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>I1149</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>N-ethylmaleimide</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>4259</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NHS-Activated Sepharose 4 Fast Flow</td>
			<td>Cytiva</td>
			<td>17-0906-01</td>
			<td>Reagent for in-house resin synthesis</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>QIAvac 24 Plus vacuum manifold</td>
			<td>Qiagen</td>
			<td>19413</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium chloride</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>S3014</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium dodecyl sulfate (SDS)</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>L6026</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sonicator</td>
			<td>Branson</td>
			<td>1510R-MT</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Spin columns</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>69705</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Strata C18-E reverse phase columns</td>
			<td>Phenomenex</td>
			<td>8B-S001-DAK</td>
			<td>Peptide desalting</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Thermomixer</td>
			<td>Eppendorf</td>
			<td>5355</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Thiopropyl Sepharose 6B</td>
			<td>GE Healthcare</td>
			<td>17-0420-01</td>
			<td>Thiol-affinity resin; *Production of Thiopropyl Sepharose 6B resin has been discontinued by the manufacturer (see protocol for details).</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TMT isobaric labels (16 plex)</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>A44522</td>
			<td>Peptide labeling reagent; available in multiple formats</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Triethylammonium bicarbonate buffer (TEAB)</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>T7408</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trifluoroacetic acid (TFA)</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>T6508</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Triton X-100</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>T8787</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypsin</td>
			<td>Promega</td>
			<td>V5820</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Urea</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>U5378</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vacufuge Plus speedvac</td>
			<td>Eppendorf</td>
			<td>22820001</td>
			<td>vacuum concentrator</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vortex mixer</td>
			<td>Scientific Industries</td>
			<td>SI-0236</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

resin-assisted capture coupled with isobaric tandem mass tag labeling for multiplexed quantification of protein thiol oxidation

प्रोटीन थिओल पर प्रतिवर्ती ऑक्सीडेटिव संशोधन हाल ही में सेलुलर फ़ंक्शन के महत्वपूर्ण मध्यस्थों के रूप में उभरे हैं। यहां हम एक मात्रात्मक रेडॉक्स प्रोटिओमिक्स विधि की विस्तृत प्रक्रिया का वर्णन करते हैं जो प्रोटिओम स्तर पर ऑक्सीकृत प्रोटीन थिओल के मल्टीप्लेक्स स्टोचियोमेट्रिक परिमाणीकरण की अनुमति देने के लिए टेंडम मास टैग (टीएमटी) आइसोबेरिक लेबलिंग और तरल क्रोमैटोग्राफी-टेंडम मास स्पेक्ट्रोमेट्री (एलसी-एमएस / एमएस) के साथ संयोजन में राल-असिस्टेड कैप्चर (आरएसी) का उपयोग करता है। ऑक्सीकृत सिस्टीन अवशेषों पर साइट-विशिष्ट मात्रात्मक जानकारी ऐसे संशोधनों के कार्यात्मक प्रभावों में अतिरिक्त अंतर्दृष्टि प्रदान करती है। 
वर्कफ़्लो कई नमूना प्रकारों में अनुकूलनीय है, जिसमें सुसंस्कृत कोशिकाएं (जैसे, स्तनधारी, प्रोकैरियोटिक) और पूरे ऊतक (जैसे, हृदय, फेफड़े, मांसपेशी) शामिल हैं, जिन्हें शुरू में लाइस्ड / होमोजिनाइज्ड किया जाता है और कृत्रिम ऑक्सीकरण को रोकने के लिए मुक्त थिओल को अल्काइलेटेड किया जाता है। ऑक्सीकृत प्रोटीन थिओल को तब कम किया जाता है और एक थिओल-आत्मीयता राल द्वारा कैप्चर किया जाता है, जो प्रोटीन / पेप्टाइड्स के अतिरिक्त हस्तांतरण के बिना पाचन, लेबलिंग और धोने की प्रक्रियाओं को आगे बढ़ाने की अनुमति देकर वर्कफ़्लो चरणों को सुव्यवस्थित और सरल बनाता है। अंत में, लेबल किए गए पेप्टाइड्स को एलसी-एमएस / एमएस द्वारा पूरे प्रोटिओम में थिओल ऑक्सीकरण से संबंधित व्यापक स्टोइकोमेट्रिक परिवर्तनों को प्रकट करने के लिए एल्यूट और विश्लेषण किया जाता है। यह विधि प्रोटीन थिओल ऑक्सीकरण से संबंधित शारीरिक और पैथोफिजियोलॉजिकल राज्यों के तहत रेडॉक्स-निर्भर विनियमन की भूमिका की समझ में काफी सुधार करती है।

प्रोटोकॉल के पूरा होने से पूर्व में ऑक्सीकृत सिस्टीन युक्त पेप्टाइड्स का अत्यधिक विशिष्ट संवर्धन होगा, अक्सर >95% विशिष्टता 27,35,36 के साथ। हालांकि, प्रोटोकॉल के कई प्रम?...

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Resin-Assisted Capture Coupled with Isobaric Tandem Mass Tag Labeling for Multiplexed Quantification of Protein Thiol Oxidation

प्रोटीन थिओल ऑक्सीकरण में सामान्य शारीरिक और पैथोफिजियोलॉजिकल स्थितियों के तहत महत्वपूर्ण निहितार्थ हैं। हम एक मात्रात्मक रेडॉक्स प्रोटिओमिक्स विधि के विवरण का वर्णन करते हैं, जो राल-सहायता प्राप्त कैप्चर, आइसोबेरिक लेबलिंग और मास स्पेक्ट्रोमेट्री का उपयोग करता है, जिससे साइट-विशिष्ट पहचान और प्रोटीन के विपरीत ऑक्सीकृत सिस्टीन अवशेषों का परिमाणीकरण सक्षम होता है।

प्रोटीन थिओल ऑक्सीकरण के मल्टीप्लेक्स परिमाणीकरण के लिए आइसोबेरिक टेंडम मास टैग लेबलिंग के साथ युग्मित राल-असिस्टेड कैप्चर

Reversible oxidative modifications on protein thiols have recently emerged as important mediators of cellular function. Herein we describe the detailed ...

यह प्रोटोकॉल एक विधि का वर्णन करता है जो प्रोटीन के ऑक्सीकृत सिस्टीन अवशेषों की साइट-विशिष्ट पहचान को सक्षम बनाता है। विधि ऑक्सीकृत सिस्टीन अवशेषों के मात्रात्मक और साइट-विशिष्ट डेटा को विभिन्न नमूना प्रकारों से उत्पन्न करने की अनुमति देती है। सहायक कैप्चर प्रक्रिया शुरू करने के लिए, अवक्षेपित प्रोटीन छर्रों को एसीटोन के साथ दो बार 10 मिनट के लिए चार डिग्री सेल्सियस में 20, 500 ग्राम पर सेंट्रीफ्यूज करके धोएं।फिर एसीटोन को डिकेंट करें और शेष एसीटोन को माइक्रो पिपेट के साथ हटा दें। ग्लास सीरोलॉजिकल पिपेट का उपयोग करके ट्यूब में तीन मिलीलीटर ताजा बर्फ ठंडा एसीटोन जोड़ें और ट्यूब को कई बार उल्टा करके अच्छी तरह से मिलाएं। दूसरे धोने के बाद, छर्रों को सूखने के बिना एक से दो मिनट के लिए हवा में सूखने दें।सूखे प्रोटीन गोली में एक मिलीलीटर बफर बी जोड़ें। प्रोटीन को घुलनशील बनाने के लिए, एक बार में 15 से 30 सेकंड के लिए 250 वाट के आउटपुट के साथ बाथ सोनिकेटर में बार-बार गोली को सोनिकेट करें, साथ ही संक्षिप्त भंवर के साथ। प्रोटीन एकाग्रता को मापने के लिए बिसिनकोनिनिक एसिड या बीसीए परख करें।प्रोटीन सांद्रता को मानकीकृत करने के लिए, प्रोटीन के नमूने के 500 माइक्रोग्राम को 0.5 मिलीलीटर, 10 किलोडाल्टन केन्द्रापसारक फ़िल्टर में स्थानांतरित करें, और नमूने को पुन: निलंबन बफर के साथ 500 माइक्रोलीटर तक बढ़ाएं। कमरे के तापमान में 14,000 जी पर प्रोटीन बफर मिश्रण को सेंट्रीफ्यूज करें, जब तक कि केन्द्रापसारक फिल्टर में मात्रा 100 माइक्रोलीटर से कम न हो। एक संग्रह ट्यूब में फ़िल्टर को इनवर्ट करके नमूना एकत्र करें।दो मिनट के लिए 1000 जी पर नमूने को सेंट्रीफ्यूज करें और 500 माइक्रोलीटर की अंतिम मात्रा प्राप्त करने के लिए बफर सी जोड़ें। प्रोटीन थिओल को कम करने के लिए, 20 मिलीमोलर की अंतिम सांद्रता प्राप्त करने के लिए नमूने में 500 मिलीमोलर डिथियोथ्रेइटोल या डीटीटी के 20 माइक्रोलीटर जोड़ें, और नमूनों को 850 आरपीएम पर झटकों के साथ 37 डिग्री सेल्सियस पर 30 मिनट के लिए इनक्यूबेट करें। कमी के बाद, नमूनों को कमरे के तापमान पर 14,000 जी पर 0.5 मिलीलीटर 10 किलोडाल्टन केन्द्रापसारक फिल्टर में सेंट्रीफ्यूज करें, जब तक कि केन्द्रापसारक फिल्टर में मात्रा 100 माइक्रोलीटर से कम न हो।वॉल्यूम को 500 माइक्रोलीटर तक बनाने के लिए बफर डी जोड़ें और सेंट्रीफ्यूजेशन दोहराएं। चौथे सेंट्रीफ्यूजेशन के बाद, दो मिनट के लिए 1000 जी पर सेंट्रीफ्यूज करने के लिए एक संग्रह ट्यूब में फ़िल्टर को उलटकर नमूने एकत्र करें। फिर बीसीए परख का उपयोग करके प्रोटीन एकाग्रता को मापें।इसके बाद, स्पिन कॉलम को वैक्यूम पर कई गुना रखें, और एक माइक्रो पिपेट का उपयोग करके प्रत्येक कॉलम में ताजा तैयार थिओल एफिनिटी राल घोल के 500 माइक्रोलीटर ट्रांसफर करें। पानी को हटाने के लिए वैक्यूम लागू करें। प्रति कॉलम 30 मिलीग्राम राल प्राप्त करने के लिए प्रक्रिया को एक बार दोहराएं।राल को अल्ट्राप्योर पानी के 500 माइक्रोलीटर के साथ पांच बार धोएं, पानी को हटाने के लिए वैक्यूम लगाकर और फिर एक नई ट्यूब E.In बफर के 500 माइक्रोलीटर के साथ पांच बार, कम प्रोटीन नमूने के 150 माइक्रोग्राम में बफर सी जोड़ें जब तक कि अंतिम मात्रा 120 माइक्रोलीटर न हो। प्रोटीन समाधान को राल युक्त प्लग किए गए स्पिन कॉलम में स्थानांतरित करें। स्तंभ पर टोपी रखें और 850 आरपीएम पर झटकों के साथ कमरे के तापमान पर दो घंटे के लिए इनक्यूबेट करें।राल को धो लें जैसा कि पांडुलिपि में वर्णित है। प्लग बदलें। ऑन-राल ट्रिप्टिक पाचन करने के लिए, नमूनों में ताजा तैयार ट्रिप्सिन समाधान के 120 माइक्रोलीटर जोड़ें, और कॉलम को रात भर 37 डिग्री सेल्सियस पर इनक्यूबेट करें, जिसमें 850 आरपीएम पर झटका लगा।अगले दिन, राल को पांडुलिपि में वर्णित कई बार धोएं और प्लग को बदलें। एक माइक्रो पिपेट का उपयोग करके, धुले हुए राल में 100 मिलीमोलर ट्राइथाइलामोनियम बाइकार्बोनेट बफर के 40 माइक्रोलीटर जोड़ें। फिर विघटित अग्रानुक्रम द्रव्यमान टैग या टीएमटी लेबलिंग अभिकर्मक के 70 माइक्रोलीटर जोड़ें, और 850 आरपीएम पर झटकों के साथ कमरे के तापमान पर एक घंटे के लिए इनक्यूबेट करें।किसी भी शेष टीएमटी अभिकर्मक को शून्य से 80 डिग्री सेल्सियस नीचे स्टोर करें। राल धो लें और प्लग को बदलें। टीएमटी ने पीएच 8.0 पर 100 मिलीमोलर अमोनियम बाइकार्बोनेट बफर के 100 माइक्रोलीटर जोड़कर पेप्टाइड्स को लेबल किया, जिसमें कॉलम में 20 मिलीमोलर डीटीटी होता है, और कॉलम को 850 आरपीएम पर 30 मिनट के लिए कमरे के तापमान पर थर्मल मिक्सर पर इंजेक्ट किया जाता है।इनक्यूबेशन के बाद, स्तंभ को वैक्यूम मैनिफोल्ड पर रखकर, वैक्यूम को लागू करके और नमूनों को पांच मिलीलीटर माइक्रो सेंट्रीफ्यूज ट्यूब में डालकर क्षालन करें। चरण को एक बार दोहराएं, फिर कॉलम में 0.1% ट्राइफ्लोरोएसिटिक एसिड के साथ 80% एसिटोनिट्राइल के 100 माइक्रोलीटर जोड़ें। कमरे के तापमान पर 10 मिनट के लिए कॉलम को इनक्यूबेट करने के बाद, नमूने को उसी पांच मिलीलीटर सेंट्रीफ्यूज ट्यूब में डालें।सूखे होने तक वैक्यूम कंसंट्रेटर में इल्यूटेड नमूने रखें। फिर आगे के उपयोग तक शुष्क पेप्टाइड्स को माइनस 80 डिग्री सेल्सियस पर स्टोर करें। रॉ 264.7 कोशिकाओं से पेप्टाइड नमूनों का गुणात्मक विश्लेषण एसडीएस-पेज के साथ किया गया था, जिसमें उपचार के कारण ऑक्सीकरण के विभिन्न स्तरों को निर्धारित करके नमूनों की तुलना की गई थी।अलग-अलग प्रोटीन के ऑक्सीकरण स्तरों की जांच करने के लिए बाद में पश्चिमी धब्बा द्वारा अलग किए गए प्रोटीन की जांच की गई। पेप्टाइड्स युक्त सिस्टीन की रिपोर्ट की गई आयन तीव्रता का विश्लेषण तरल क्रोमैटोग्राफी टेंडम मास स्पेक्ट्रोमेट्री द्वारा किया गया था। आईटीआरएक्यू के थिओल ऑक्सीकरण स्टोइकोमेट्री, जिसे व्यक्तिगत सिस्टीन साइट स्तरों पर समृद्ध और ऑक्सीकृत पेप्टाइड्स लेबल किया गया था, को परिमाणित किया गया था।प्रोटीन गोली को परेशान किए बिना एसीटोन को सावधानीपूर्वक हटा दें। सुनिश्चित करें कि प्रोटीन गोली पूरी तरह से घुलनशील और सटीक रूप से मात्रात्मक है, और राल को स्पिन कॉलम के लिए सटीक रूप से आवंटित किया गया है। धोने के चरणों के दौरान राल को फिर से निलंबित करना सुनिश्चित करें।समृद्ध प्रोटीन और पेप्टाइड्स का आगे मूल्यांकन एसडीएस-पेज और धुंधला, पश्चिमी सोख्ता और मास स्पेक्ट्रोमेट्री द्वारा किया जा सकता है।

Research

JoVE Journal

Biochemistry

Protein Complex Affinity Capture from Cryomilled Mammalian Cells

Cryomilled स्तनधारी कोशिकाओं से प्रोटीन जटिल संबंध कब्जा

Affinity capture is an effective technique for isolating endogenous protein complexes for further study. When used in conjunction with an antibody, this ...

Enhanced Sample Multiplexing of Tissues Using Combined Precursor Isotopic Labeling and Isobaric Tagging (cPILOT)

Enhanced Sample Multiplexing of Tissues Using Combined Precursor Isotopic Labeling and Isobaric Tagging cPILOT

बढ़ी नमूना संयुक्त पूर्वगामी समस्थानिक लेबलिंग और समदाब रेखीय टैगिंग का उपयोग ऊतकों की Multiplexing (cPILOT)

There is an increasing demand to analyze many biological samples for disease understanding and biomarker discovery. Quantitative proteomics strategies ...

Resolving Affinity Purified Protein Complexes by Blue Native PAGE and Protein Correlation Profiling

ब्लू मूल निवासी पृष्ठ और प्रोटीन सहसंबंध रूपरेखा द्वारा समानता शुद्ध प्रोटीन परिसरों का समाधान करना

Most proteins act in association with others; hence, it is crucial to characterize these functional units in order to fully understand biological ...

A Tandem Liquid Chromatography&#8211;Mass Spectrometry-based Approach for Metabolite Analysis of Staphylococcus aureus

A Tandem Liquid ChromatographyÃƒÆ’Ã‚Â¢ÃƒÂ¢Ã¢â‚¬Å¡Ã‚Â¬ÃƒÂ¢Ã¢â€šÂ¬Ã…â€œMass Spectrometry-based Approach for Metabolite Analysis of Staphylococcus aureus

की Metabolite विश्लेषण के लिए एक अग्रानुक्रम तरल क्रोमैटोग्राफी मास स्पेक्ट्रोमेट्री आधारित दृष्टिकोण<em&gt; स्ताफ्य्लोकोच्चुस</em

In an effort to thwart bacterial pathogens, hosts often limit the availability of nutrients at the site of infection. This limitation can alter the ...

Deep Proteome Profiling by Isobaric Labeling, Extensive Liquid Chromatography, Mass Spectrometry, and Software-assisted Quantification

Isobaric लेबलिंग, व्यापक तरल क्रोमैटोग्राफी, मास स्पेक्ट्रोमेट्री, और सॉफ्टवेयर असिस्टेड ठहराव द्वारा डीप Proteome profile

Many exceptional advances have been made in mass spectrometry (MS)-based proteomics, with particular technical progress in liquid chromatography (LC) ...

Growing Protein Crystals with Distinct Dimensions Using Automated Crystallization Coupled with In Situ Dynamic Light Scattering

Growing Protein Crystals with Distinct Dimensions Using Automated Crystallization Coupled with In Situ Dynamic Light Scattering

अलग आयामों के साथ बढ़ती प्रोटीन क्रिस्टल का उपयोग कर स्वचालित क्रिस्टलीकरण में सीटू गतिशील प्रकाश बिखरने के साथ युग्मित

The automated crystallization device is a patented technique1 especially developed for monitoring protein crystallization experiments with the aim to ...

Proteome-wide Quantification of Labeling Homogeneity at the Single Molecule Level

प्रोसिटोम एकल अणु स्तर पर लेबलिंग एकरूपता का व्यापक परिमाणन

Cell proteomes are often characterized using electrophoresis assays, where all species of proteins in the cells are non-specifically labeled with a ...

Quantification of Protein Interaction Network Dynamics using Multiplexed Co-Immunoprecipitation

मल्टीप्लेक्स्ड सह-प्रतिरक्षा का उपयोग कर प्रोटीन इंटरेक्शन नेटवर्क गतिशीलता का परिमाणीकरण

Dynamic protein-protein interactions control cellular behavior, from motility to DNA replication to signal transduction. However, monitoring dynamic ...

Absolute Quantification of Cell-Free Protein Synthesis Metabolism by Reversed-Phase Liquid Chromatography-Mass Spectrometry

उलट-चरण तरल क्रोमैटोग्राफी-मास स्पेक्ट्रोमेट्री द्वारा सेल मुक्त प्रोटीन संश्लेषण चयापचय का निरपेक्ष क्वांटिफिकेशन

Cell-free protein synthesis (CFPS) is an emerging technology in systems and synthetic biology for the in vitro production of proteins. However, if CFPS is ...

Quantitative Analysis of the Cellular Lipidome of Saccharomyces Cerevisiae Using Liquid Chromatography Coupled with Tandem Mass Spectrometry

Quantitative Analysis of the Cellular Lipidome of Saccharomyces Cerevisiae Using Liquid Chromatography Coupled with Tandem Mass Spectrometry

सचारोमाइसेस सेरेविसी के सेलुलर लिपिडोम का मात्रात्मक विश्लेषण टैंडेम मास स्पेक्ट्रोमेट्री के साथ मिलकर तरल क्रोमेटोग्राफी का उपयोग करके

Lipids are structurally diverse amphipathic molecules that are insoluble in water. Lipids are essential contributors to the organization and function of ...