Name: 3d bioprinting of murine cortical astrocytes for engineering neural-like tissue
Uploaded: 2021-07-16T13:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about 3D Bioprinting of Murine Cortical Astrocytes for Engineering Neural-Like Tissue at JoVE.com

Эта работа была поддержана Исследовательским фондом Сан-Паулу (FAPESP), номера грантов 2018/23039-3 и 2018/12605-8; Национальный совет по научно-техническому развитию (CNPq), номера грантов 465656/2014-5 и 309679/2018-4; и Координация по совершенствованию кадров высшего образования (CAPES), финансовый код 001.

Все процедуры с участием животных соответствовали международным руководящим принципам использования животных в исследованиях (http://www.iclas.org) и были одобрены Комитетом по этике в исследованиях Федерального университета Сан-Паулу (CEUA 2019 / 9292090519).
1. Рассечение мозга мышей
<o...

Технология 3D-биопечати появилась как альтернатива биофабрикации, которая позволяет создавать усовершенствованные конструкции, которые структурно и физиологически напоминают нативныеткани 22,включая мозг23. Биофабрикация нервно-подобных тканей позволяет ?...

Астроциты являются наиболее распространенным типом клеток в центральной нервной системе (ЦНС) и играют ключевую роль в гомеостазе мозга. В дополнение к устойчивой поддержке нейронов, астроциты отвечают за модуляцию поглощения нейротрансмиттеров, поддержание целостности гематоэнцефалического барьера и регулирование нейронального синаптогенеза1,2. Астроциты также играют существенную роль в воспалении ЦНС, реагируя на травмы головного мозга в процессе, который приводит к астрограционной реактивности или реактивному астроглиозу3,4,образуя глиальный рубец, который препятствует поражению здоровой ткани дегенеративными агентами5. Это событие приводит к изменениям в экспрессии генов астроцитов, морфологии и функции6,7. Поэтому исследования, связанные с функциональностью астроцитов, полезны для разработки методов лечения неврологических расстройств.
Модели in vitro имеют решающее значение для изучения механизмов, связанных с неврологическими травмами, и хотя была установлена успешная изоляция и двумерная (2D) культура корковых астроцитов8,эта модель не может обеспечить реалистичную среду, которая имитирует поведение нативных клеток и воспроизводит сложность мозга9 . В 2D-состоянии плохая механическая и биохимическая поддержка, низкоклеточные и клеточно-матричные взаимодействия и сплющивание клеток, приводящее к отсутствию базально-апикальной полярности, влияют на динамику клеточной сигнализации и экспериментальные результаты, приводящие к изменению морфологии клеток и экспрессии генов, которые ставят под угрозу реакцию на лечение10. Поэтому крайне важно разработать альтернативы, которые обеспечивают более реалистичную нейронную среду, направленную на перевод результатов в клинику.
Трехмерная (3D) клеточная культура представляет собой более продвинутую модель, которая рекапитулирует с повышенной точностью особенности органов и тканей, включая ЦНС11. Что касается глиальной культуры, 3D-модели способствуют поддержанию морфологии астроцитов, базально-апикальной полярности клеток и клеточной сигнализации12,13. Технология 3D-биопечати стала мощным инструментом для контролируемого биофабрикатирования живых тканей 3D с использованием клеток и биоматериалов для воссоздания структуры и свойств нативных тканей. Использование этой технологии привело к существенному улучшению прогнозирования результатов и способствовало регенеративной медицине, применяемой в ЦНС14,15,16.
Протокол, описанный здесь, детализирует выделение и культуру корковых астроцитов. В протоколе также подробно описывается воспроизводимый метод биопечати астроцитов, встроенных в желатин / желатин метанрилоил (GelMA) / фибриноген, дополненный ламинином. В этой работе биопринтер на основе экструзии использовался для печати композиции биоматериала, содержащей корковые астроциты при плотности 1 х 106 клеток/мл. Напряжение сдвига биопечати было сведено к минимуму за счет контроля скорости печати, а астроциты показали высокую жизнеспособность после процесса. Биопечатные конструкции культивировали в течение 1 недели, и астроциты смогли распространяться, прикрепляться и выживать в гидрогеле, сохраняя астроцитарную морфологию и экспрессируя специфический маркер глиального фибриллярного кислого белка (GFAP)4.
Эта процедура совместима с биопринтерами на основе экструзии с поршневым приводом и может быть использована для биопечати астроцитов, полученных из разных источников. Предложенная здесь 3D-биопечатная модель подходит для широкого спектра применений нейронной инженерии, таких как исследования механизмов, участвующих в функциональности астроцитов в здоровых тканях и понимание прогрессирования неврологических патологий и развития лечения.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>3D Bioprinter</td>
			<td>3D Biotechnology Solutions</td>
			<td></td>
			<td>Extrusion-based bioprinter</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Blunt-tip forceps</td>
			<td>Integra Miltex</td>
			<td>6--30</td>
			<td>Forceps for brain dissection previously sterilized</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bovine serum albumin</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>9048-46-8</td>
			<td>Protease free, fatty acid free, essentially globulin free</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CaCl2</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>10043-52-4</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell culture flask</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>156340</td>
			<td>Culture flask T25</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell strainer</td>
			<td>Corning Incorporated</td>
			<td>352340</td>
			<td>Cell strainer 40 &#181;m</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Confocal microscope</td>
			<td>Leica</td>
			<td></td>
			<td>Confocal TCS SP8 microscopy coupled with an Olympus FluoView 300 confocal system</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Conical tubes</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>339651, 339652</td>
			<td>Sterile tubes of 15 mL and 50 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DAPI</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab224589</td>
			<td>DAPI staining solution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM/F12</td>
			<td>Gibco; Life Technologies Corporation</td>
			<td>12500062</td>
			<td>DMEM/F-12 50/50, 1X (Dulbecco&#39;s Mod. Of Eagle&#39;s Medium/Ham&#39;s F12 50/50 Mix) with L-glutamine</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dyalisis tubing</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>D9527</td>
			<td>Molecular weight cut-off = 14 kDa</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>64-15-5</td>
			<td>Reagent grade</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal Bovine Serum</td>
			<td>Gibco; Life Technologies Corporation</td>
			<td>12657011</td>
			<td>Research Grade</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fibrinogen</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>9001-32-5</td>
			<td>Fibrinogen cristalline powder from bovine plasma</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gelatin</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>9000-70-8</td>
			<td>Gelatin powder from porcine skin</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glycine</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>56-40-6</td>
			<td>Glycine powder</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hanks Buffered Salt Solution (HBSS)</td>
			<td>Gibco; Life Technologies Corporation</td>
			<td>14175095</td>
			<td>No calcium, no magnesium, no phenol red</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L-Glutamine</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>56-85-9</td>
			<td>L-Glutamine crystalline powder</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Laminin</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>114956-81-9</td>
			<td>Laminin 1-2 mg/mL L in 50 mM Tris-HCl</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Live dead kit cell imaging kit</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>R37601</td>
			<td>Green fluorescence in live cells (ex/em 488 nm/515 nm). Red fluorescence in dead cells (ex/em 570 nm/602 nm)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Methacrylic anhydride</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>760-93-0</td>
			<td>For GelMA preparation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microtubes</td>
			<td>Corning Incorporated</td>
			<td>MCT-150-C</td>
			<td>Microtubes of 1,5 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaCl</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>7647-14-5</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needle 22G</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>NC1362045</td>
			<td>Sterile blunt needle</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Operating scissor</td>
			<td>Integra Miltex</td>
			<td>05--02</td>
			<td>Sharp scissor for brain dissection previously sterilized</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Paraformaldehyde</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>30525-89-4</td>
			<td>Paraformaldehyde powder</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin/Streptomycin</td>
			<td>Gibco; Life Technologies Corporation</td>
			<td>15070063</td>
			<td>Pen Strep (5,000 Units/ mL Penicillin; 5,000 ug/mL Streptomycin)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Petri dish</td>
			<td>Corning Incorporated</td>
			<td>430591, 430588</td>
			<td>Sterile petri dishes of 35 and 100 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phalloidin</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab176753</td>
			<td>iFluor 488 reagent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Photoinitiator</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>106797-53-9</td>
			<td>2-Hydroxy-4&#8242;-(2-hydroxyethoxy)-2-methylpropiophenone</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphate buffer saline (PBS)</td>
			<td>Gibco; Life Technologies Corporation</td>
			<td>10010023</td>
			<td>PBS 1 x, culture grade, no calcium, no magnesium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Poly-L-lysine</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>25988-63-0</td>
			<td>Poly-L-lysine hydrobromide mol wt 30,000-70,000</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Primary antobody</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab4674</td>
			<td>Chicken polyclonal to GFAP</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Secondary antibody</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab150176</td>
			<td>Alexa fluor 594 anti-chicken</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Spatula</td>
			<td>Miltex</td>
			<td>V973-70</td>
			<td>Number 24 cement spatula previously sterilized</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stereomicroscope</td>
			<td>Fisherbrand</td>
			<td>3000038</td>
			<td>Microscope for brain dissection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe 5 mL</td>
			<td>BD</td>
			<td>1222C84</td>
			<td>Sterile syringe</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe filter 2 &#181;m</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>09-740-105</td>
			<td>Polypropylene filter for sterilization</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Thrombin</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>9002--04-4</td>
			<td>Thrombin cristalline powder from bovine plasma</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Triton X-100</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>9002-93-1</td>
			<td>Laboratory grade</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypsin-EDTA</td>
			<td>Gibco; Life Technologies Corporation</td>
			<td>15400054</td>
			<td>Trypsin no phenol red 1 x diluted in PBS</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Versene solution</td>
			<td>Gibco; Life Technologies Corporation</td>
			<td>15040066</td>
			<td>Versene Solution (0.48 mM) formulated as 0.2 g EDTA(Na4) per liter of PBS</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Well plate</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>144530</td>
			<td>Sterile 24-well plate</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

3d bioprinting of murine cortical astrocytes for engineering neural-like tissue

Астроциты представляют собой глиальные клетки с существенной ролью в центральной нервной системе (ЦНС), включая поддержку и функциональность нейронов. Эти клетки также реагируют на нервные травмы и защищают ткани от дегенеративных событий. Исследования функциональности астроцитов in vitro важны для выяснения механизмов, участвующих в таких событиях, и способствуют разработке методов лечения неврологических расстройств. Этот протокол описывает метод биофабрикатного моделирования невроходной структуры ткани, богатой астроцитами, с помощью 3D-биопечати биоинков, нагруженных астроцитами. В этой работе был использован 3D-биопринтер на основе экструзии, а астроциты были извлечены из коры головного мозга детенышей мышей C57Bl/6. Биомочинку готовили путем смешивания кортикальных астроцитов от пассажа до пассажа 3 с раствором биоматериала, состоящим из желатина, желатино-метанрилоила (GelMA) и фибриногена, дополненного ламинином, который представлял оптимальные условия биопечати. Условия 3D-биопечати минимизировали клеточный стресс, способствуя высокой жизнеспособности астроцитов во время процесса, в котором 74,08% ± 1,33% клеток были жизнеспособными сразу после биопечати. После 1 недели инкубации жизнеспособность астроцитов значительно возросла до 83,54% ± 3,00%, что указывает на то, что 3D-конструкция представляет собой подходящую микросреду для роста клеток. Состав биоматериала позволял прикреплять клетки и стимулировал астроцитарное поведение, при этом клетки экспрессировали специфический маркер астроцитов глиального фибриллярного кислого белка (GFAP) и обладали типичной астроцитарной морфологией. Этот воспроизводимый протокол обеспечивает ценный метод биофабрикатного 3D-невроходобной ткани, богатой астроцитами, которая напоминает нативную микросреду клеток, полезный для исследователей, которые стремятся понять функциональность астроцитов и их связь с механизмами, участвующими в неврологических заболеваниях.

Эта работа была направлена на разработку невроподобной ткани с использованием технологии 3D-биопечати для нанесения послойного первичного астроцита, нагруженного желатином / GelMA / фибриногеном биоинке. Астроциты были извлечены и выделены из коры головного мозга детенышей мышей<strong class=...

Watch this Scientific Journal Video about 3D Bioprinting of Murine Cortical Astrocytes for Engineering Neural-Like Tissue at JoVE.com

3D Bioprinting of Murine Cortical Astrocytes for Engineering Neural-Like Tissue

Здесь мы сообщаем о методе 3D-биопечати мышиных кортикальных астроцитов для биофабрикации нервно-подобных тканей для изучения функциональности астроцитов в центральной нервной системе и механизмов с участием глиальных клеток при неврологических заболеваниях и методах лечения.

3D-биопечать мышиных кортикальные астроциты для инженерии невроходобной ткани

Astrocytes are glial cells with an essential role in the central nervous system (CNS), including neuronal support and functionality. These cells also ...

3D-биопечать астроцитов представляет собой прогресс в нейротканевой инженерии, позволяя биофабрикацию моделей in vitro, которые полезны для понимания механизмов, участвующих в неврологических заболеваниях. Основным преимуществом 3D-биопечати является биофабрикат клеточных вспомогательных структур, которые имитируют биохимические и механические особенности тканей, обеспечивая лучшее понимание динамики клеток в здоровье и болезни. Этот протокол может быть применен к биофабрикации других мягких тканей, так как он основан на 3D-биопечати био-чернил, состоящих из природных полимеров и компонентов внеклеточного матрикса.Для начала разрежьте кортикальные ткани, выделенные от усыпленной мыши, на мелкие кусочки изогнутыми микронарезами. Промыть кусочки ткани три раза одним миллилитром HBSS путем пипетки вверх и вниз. После удаления HBSS добавляют в третий раз, добавляют один миллилитр 0,05% трипсина и инкубируют ткань в течение пяти минут при 37 градусах Цельсия.При механической диссоциации тканей аккуратно пипеткой смесь трипсина тканей вверх и вниз 15 раз. Затем переложите диссоциированную смесь в коническую трубку объемом 15 миллилитров и добавьте равный объем FBS для нейтрализации активности трипсина. Отфильтруйте суспензию через 0,4-микрометровый фильтр клеточного сетчатого фильтра для удаления недиссоциированных фрагментов.Промыть фильтр одним миллилитром среды астроцитов. Гранулировать фильтрованную клеточную суспензию центрифугированием. После выброса супернатанта суспендируют клеточную гранулу в одном миллилитре культурального носителя астроцитов.Переложите клеточную суспензию в колбу для культуры Т25. Составьте общий объем среды 3,5 миллилитра и инкубируют клетки при 37 градусах Цельсия и 5% углекислого газа. Для получения фибриногена в конечной концентрации три миллиграмма на миллилитр переложите 0,9 миллилитра по 10 миллиграммов на миллилитр раствора фибриногена в желатино-желатиновый метанрилоиловый раствор.Для получения фотоинициатора в конечной концентрации 0,5% массы по объему добавляют 0,015 г фотоинициатора к приготовленному желатино-желатиновой метакрилоилфабриногену. После вихря держите раствор при 40 градусах Цельсия, защищенный от света, чтобы избежать деградации PI. Затем отфильтруйте раствор через фильтр 0,2 микрометра в стерильную коническую трубку размером 15 миллилитров.Переложите 980 микролитров раствора биоматериала в коническую трубку размером 15 миллилитров. Для получения ламинина в конечной концентрации двух микрограммов на миллилитр добавляют 20 микролитров разбавленного ламинина в пробирку, содержащую биочерна. Осторожно перемешайте, пипетируя вверх и вниз, избегая пузырьков, и держите раствор био-чернил при 37 градусах Цельсия до готовности к смешиванию с клетками.Трипсинизируют первичные астроциты с 0,05% трипсина в течение 5 минут и нейтрализуют активность трипсина с FPS в соотношении один к одному. Затем перенесите клетки в коническую трубку 15 миллилитров и центрифугу в 200 раз G в течение пяти минут. После подсчета клеток переложите 1 раз 10 на 6 клеток в другую коническую трубку и центрифугу, как показано на демонстрации.Оставьте только 200 микролитров супернатанта в трубке и подвешивайте гранулу ячейки, осторожно постукивая по дну конической трубки. Для получения конечной концентрации от 1 раза 10 до 6 клеток на миллилитр перенесите один миллилитр желатино-желатинового метанрилоилфабриногена в трубку, содержащую клетки, и гомогенизируйте путем осторожной пипетки вверх и вниз. Используйте пипетку 1000 микролитров для медленного переноса астроцитов, уложенных в желатино-желатиновый раствор биочернил фибриногена, в пятимиллилитровой пластиковый шприц, избегая образования пузырьков.Подключите к шприцеву стерильную тупую иглу 22 калибра. Подвергайте биопринтер воздействию ультрафиолетового излучения в течение 15 минут, а затем протрите биопринтер 70% этанолом, затем подключите шприц к печатающей головке биопринтера и вручную промойте биочернаки, чтобы удалить оставшиеся пузырьки. Для проведения биопечати поместите на 35-миллиметровую культурную тарелку на стол биопринтера, расположите иглу на 0,1 миллиметра от поверхности чашки для культивирования, чтобы обеспечить движение иглы, и нажмите кнопку «Печать».Как только биопечать закончится, убедитесь, что шприц отходит от тарелки и закрывает чашку для культуры. Поместите культурную посуду под ультрафиолетовый свет для сшивания желатина метакрилоила. Используйте стерильный шпатель для переноса биопечатной конструкции на пластину из 24 скважин.Добавьте 500 микролитров раствора тромбина кальция хлорида и оставьте на 30 минут, чтобы фибрин сросся. После удаления сшивающего раствора промыть конструкцию двумя миллилитрами PBS, затем заменить PBS одним миллилитром культурального среды астроцитов. Инкубируют при 37 градусах Цельсия и 5% углекислого газа и меняют среду каждые три дня.Используйте шпатель, чтобы перенести биопечатную конструкцию на 35-миллиметровую культурную чашку. Вымойте конструкцию одним миллилитром PBS. Нанесите 100 микролитров живого мертвого реагента на конструкцию и держите его при 37 градусах Цельсия в течение 30 минут, сохраняя его защищенным от света.После удаления живого мертвого реагента промыте конструкцию PBS, как показано на продемонстрированной. Перенесите образец на конфокальную тарелку и наблюдайте за клетками внутри конструкции под конфокальным микроскопом, используя возбуждение 488 и 570 нанометров для получения изображения. После 3D-биопечати была оценена целостность биопечатного каркаса и наблюдалось формирование четко определенной структуры с клетками, попав в ловушку биоматериала.После биопечати и процессов сшивания большинство клеток представляли круглую морфологию, когда конструкт инкубировали с астроцитарной средой. Биопечатные каркасы сохраняли целостность после семи дней инкубации, и хотя наблюдались некоторые круглые клетки, многие астроциты распространялись по всей конструкции, представляя астроцитическую морфологию и взаимосвязь. Жизнеспособность клеток оценивалась сразу после биопечати, и результаты показали, что при более низкой скорости жизнеспособные клетки составляли до 74% от общего количества клеток, будучи значительно выше, чем клетки, биопечатанные на более высокой скорости.Жизнеспособность биопечатных астроцитов была нормализована до 2D культивируемых астроцитов, и результаты показали, что на седьмой день биопечатные астроциты значительно увеличили жизнеспособность. Сразу после биопечати астроциты показали круглую морфологию и живой мертвый анализ. Через неделю астроциты распространились по всей конструкции и представили отчетливую морфологию клеток, идентичную 2D-культуре.3D-биопечатные астроциты характеризовались иммунофлуоресценцией. После семи дней инкубации в биопечатной конструкции наблюдались высокоплотные астроциты со звездоподобной морфологией. Биопечатные клетки астроцитов, экспрессирующие специфический маркер астроцитов глиального фибриллярного кислого белка, указывает на сохранение астроцитарного фенотипа после семи дней биопечати, и эти результаты указывают на то, что композиция биочернил обеспечила биосовместимую микросреду для содействия адгезии, распространению и росту астроцитов.Оценка экспрессии специфических генов и клеточных маркеров биопечатными астроцитами обеспечит доказательства нейротканевой функции, такой как астроцитарно-реактивность после специфических стимулов. Этот протокол прокладывает путь для биофабрикации более сложных нейро-подобных структур, состоящих из различных типов клеток в биомолекулах, позволяя имитировать конкретные нейрогенные ниши.

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Tissue Engineering of the Intestine in a Murine Model

Tissue Engineering кишечника в мышиной модели

Tissue-engineered small intestine (TESI) has successfully been used to rescue Lewis rats after massive small bowel resection, resulting in return to ...

Tissue Engineering of a Human 3D in vitro Tumor Test System

Tissue Engineering of a Human 3D in vitro Tumor Test System

Тканевая инженерия человеческого 3D<em&gt; В пробирке</em&gt; Опухоль Тестовая система

Cancer is one of the leading causes of death worldwide.  Current therapeutic strategies are predominantly developed in 2D culture  systems, which ...

Tissue Engineering: Construction of a Multicellular 3D Scaffold for the Delivery of Layered Cell Sheets

Тканевая инженерия: Строительство многоклеточного 3D строительные леса на поставки слоистых сотовых листов

Many tissues, such as the adult human hearts, are unable to adequately regenerate after damage.2,3 Strategies in tissue engineering propose innovations to ...

Engineering 3D Cellularized Collagen Gels for Vascular Tissue Regeneration

Инженерные 3D Cellularized Коллаген Гели для сосудистой регенерации ткани

Synthetic materials are known to initiate clinical complications such as inflammation, stenosis, and infections when implanted as vascular substitutes. ...

Creation of Cardiac Tissue Exhibiting Mechanical Integration of Spheroids Using 3D Bioprinting

Создание сердечной ткани, обеспечивающей механическую интеграцию сфероидов с использованием 3D-биопреобразования

This protocol describes 3D bioprinting of cardiac tissue without the use of biomaterials, using only cells. Cardiomyocytes, endothelial cells and ...

Isolation of Murine Adipose Tissue-derived Microvascular Fragments as Vascularization Units for Tissue Engineering

Выделение мышиных полученных из жировой ткани микрососудистых Фрагментов как васкуляризация единицы для тканевой инженерии

A functional microvascular network is of pivotal importance for the survival and integration of engineered tissue constructs. For this purpose, several ...

Microfluidic Bioprinting for Engineering Vascularized Tissues and Organoids

Microfluidic подложке для инженерных васкуляризированной ткани и Organoids

Engineering vascularized tissue constructs and organoids has been historically challenging. Here we describe a novel method based on microfluidic ...

Bioprinting of Cartilage and Skin Tissue Analogs Utilizing a Novel Passive Mixing Unit Technique for Bioink Precellularization

Подложке хряща и аналогов ткани кожи, используя Роман пассивного смешивания единицы техники для Bioink Precellularization

Bioprinting is a powerful technique for the rapid and reproducible fabrication of constructs for tissue engineering applications. In this study, both ...

Protocols of 3D Bioprinting of Gelatin Methacryloyl Hydrogel Based Bioinks

Протоколы 3D биопечати желатина Methacryloyl Гидрогель на основе биоинков

Gelatin methacryloyl (GelMA) has become a popular biomaterial in the field of bioprinting. The derivation of this material is gelatin, which is hydrolyzed ...