Name: 3d bioprinting of murine cortical astrocytes for engineering neural-like tissue
Uploaded: 2021-07-16T13:30:00
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Este trabajo fue apoyado por la Fundación de Investigación de São Paulo (FAPESP), números de subvención 2018/23039-3 y 2018/12605-8; Consejo Nacional de Desarrollo Científico y Tecnológico (CNPq), números de subvención 465656/2014-5 y 309679/2018-4; y Coordinación para el Perfeccionamiento del Personal de Educación Superior (CAPES), código financiero 001.

Todos los procedimientos con animales siguieron las pautas internacionales para el uso de animales en la investigación (http://www.iclas.org) y fueron aprobados por el Comité de Ética en Investigación de la Universidade Federal de São Paulo (CEUA 2019 / 9292090519).
1. Disección cerebral de ratones
<ol><li>Transfiera 10 ml de solución de sal tamponada de Hanks fría (HBSS) a un plato de cultivo de 100 mm y 1 ml a un microtubo de 1,5 ml. Preparar un microtubo por animal. NOTA: Tanto...

La tecnología de bioimpresión 3D ha surgido como una alternativa de biofabricación que permite la ingeniería de construcciones refinadas que estructural y fisiológicamente se asemejan a tejidos nativos22,incluido el cerebro23. La biofabricación de tejidos neurales permite el modelado de microambientes nativos in vitro, siendo una herramienta importante para comprender los mecanismos celulares y moleculares asociados con el desarrollo y tratamiento de muchas e...

Los astrocitos son el tipo de célula más abundante en el Sistema Nervioso Central (SNC) y juegan un papel clave en la homeostasis cerebral. Además de soportar el apoyo neuronal, los astrocitos son responsables de modular la absorción de neurotransmisores, mantener la integridad de la barrera hematoencefálica y regular la sinaptogénesis neuronal1,2. Los astrocitos también tienen un papel esencial en la inflamación del SNC, respondiendo a lesiones en el cerebro en un proceso que conduce a la reactividad astrociátrica o astrogliosis reactiva3,4,formando una cicatriz glial que impide la exposición del tejido sano a agentes degenerativos5. Este evento resulta en cambios en la expresión génica, morfología y función de los astrocitos6,7. Por lo tanto, los estudios que involucran la funcionalidad de los astrocitos son útiles para el desarrollo de terapias para tratar trastornos neurológicos.
Los modelos in vitro son cruciales para estudiar los mecanismos relacionados con las lesiones neurológicas, y aunque se ha establecido un aislamiento exitoso y un cultivo bidimensional (2D) de astrocitos corticales8,este modelo no proporciona un entorno realista que imite el comportamiento de las células nativas y reproduzca la complejidad del cerebro9 . En condición 2D, el pobre soporte mecánico y bioquímico, las bajas interacciones célula-célula y célula-matriz, y el aplanamiento celular que conduce a la ausencia de polaridad basal-apical, afectan la dinámica de señalización celular y los resultados experimentales que conducen a la alteración de la morfología celular y la expresión génica, que comprometen la respuesta a los tratamientos10. Por lo tanto, es crucial desarrollar alternativas que proporcionen un entorno neuronal más realista, con el objetivo de traducir los resultados a la clínica.
El cultivo celular tridimensional (3D) representa un modelo más avanzado que recapitula con mayor fidelidad las características de órganos y tejidos, incluido el SNC11. En cuanto al cultivo glial, los modelos 3D contribuyen al mantenimiento de la morfología de los astrocitos, la polaridad basal-apical celular y la señalización celular12,13. La tecnología de bioimpresión 3D surgió como una poderosa herramienta para biofabricar tejidos vivos 3D de manera controlada mediante el uso de células y biomateriales para recrear la estructura y las propiedades de los tejidos nativos. El uso de esta tecnología ha supuesto una mejora sustancial de la predicción de resultados y ha contribuido a la medicina regenerativa aplicada al SNC14,15,16.
El protocolo descrito aquí detalla el aislamiento y cultivo de astrocitos corticales. El protocolo también detalla un método reproducible para bioimprimir astrocitos incrustados en gelatina / gelatina metacriloilo (GelMA) / fibrinógeno, complementado con laminina. En este trabajo, se utilizó una bioimpresora basada en extrusión para imprimir la composición del biomaterial que contiene astrocitos corticales a una densidad de 1 x 106 células/ ml. El estrés de cizallamiento de bioimpresión se minimizó mediante el control de la velocidad de impresión, y los astrocitos mostraron una alta viabilidad después del proceso. Los constructos bioimpresos se cultivaron durante 1 semana, y los astrocitos pudieron propagarse, adherirse y sobrevivir dentro del hidrogel, manteniendo la morfología astrocítica y expresando un marcador específico de proteína ácida fibrilar glial (GFAP)4.
Este procedimiento es compatible con bioimpresoras basadas en extrusión accionadas por pistón y se puede utilizar para bioimprimir astrocitos derivados de diferentes fuentes. El modelo bioimpreso en 3D propuesto aquí es adecuado para una amplia gama de aplicaciones de ingeniería neuronal, como los estudios de los mecanismos involucrados en la funcionalidad de los astrocitos en tejidos sanos y la comprensión de la progresión de las patologías neurológicas y el desarrollo de tratamientos.

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	<tbody>
		<tr>
			<td>3D Bioprinter</td>
			<td>3D Biotechnology Solutions</td>
			<td></td>
			<td>Extrusion-based bioprinter</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Blunt-tip forceps</td>
			<td>Integra Miltex</td>
			<td>6--30</td>
			<td>Forceps for brain dissection previously sterilized</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bovine serum albumin</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>9048-46-8</td>
			<td>Protease free, fatty acid free, essentially globulin free</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CaCl2</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>10043-52-4</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell culture flask</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>156340</td>
			<td>Culture flask T25</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell strainer</td>
			<td>Corning Incorporated</td>
			<td>352340</td>
			<td>Cell strainer 40 &#181;m</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Confocal microscope</td>
			<td>Leica</td>
			<td></td>
			<td>Confocal TCS SP8 microscopy coupled with an Olympus FluoView 300 confocal system</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Conical tubes</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>339651, 339652</td>
			<td>Sterile tubes of 15 mL and 50 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DAPI</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab224589</td>
			<td>DAPI staining solution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM/F12</td>
			<td>Gibco; Life Technologies Corporation</td>
			<td>12500062</td>
			<td>DMEM/F-12 50/50, 1X (Dulbecco&#39;s Mod. Of Eagle&#39;s Medium/Ham&#39;s F12 50/50 Mix) with L-glutamine</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dyalisis tubing</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>D9527</td>
			<td>Molecular weight cut-off = 14 kDa</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>64-15-5</td>
			<td>Reagent grade</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal Bovine Serum</td>
			<td>Gibco; Life Technologies Corporation</td>
			<td>12657011</td>
			<td>Research Grade</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fibrinogen</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>9001-32-5</td>
			<td>Fibrinogen cristalline powder from bovine plasma</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gelatin</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>9000-70-8</td>
			<td>Gelatin powder from porcine skin</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glycine</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>56-40-6</td>
			<td>Glycine powder</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hanks Buffered Salt Solution (HBSS)</td>
			<td>Gibco; Life Technologies Corporation</td>
			<td>14175095</td>
			<td>No calcium, no magnesium, no phenol red</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L-Glutamine</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>56-85-9</td>
			<td>L-Glutamine crystalline powder</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Laminin</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>114956-81-9</td>
			<td>Laminin 1-2 mg/mL L in 50 mM Tris-HCl</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Live dead kit cell imaging kit</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>R37601</td>
			<td>Green fluorescence in live cells (ex/em 488 nm/515 nm). Red fluorescence in dead cells (ex/em 570 nm/602 nm)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Methacrylic anhydride</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>760-93-0</td>
			<td>For GelMA preparation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microtubes</td>
			<td>Corning Incorporated</td>
			<td>MCT-150-C</td>
			<td>Microtubes of 1,5 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaCl</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>7647-14-5</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needle 22G</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>NC1362045</td>
			<td>Sterile blunt needle</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Operating scissor</td>
			<td>Integra Miltex</td>
			<td>05--02</td>
			<td>Sharp scissor for brain dissection previously sterilized</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Paraformaldehyde</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>30525-89-4</td>
			<td>Paraformaldehyde powder</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin/Streptomycin</td>
			<td>Gibco; Life Technologies Corporation</td>
			<td>15070063</td>
			<td>Pen Strep (5,000 Units/ mL Penicillin; 5,000 ug/mL Streptomycin)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Petri dish</td>
			<td>Corning Incorporated</td>
			<td>430591, 430588</td>
			<td>Sterile petri dishes of 35 and 100 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phalloidin</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab176753</td>
			<td>iFluor 488 reagent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Photoinitiator</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>106797-53-9</td>
			<td>2-Hydroxy-4&#8242;-(2-hydroxyethoxy)-2-methylpropiophenone</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphate buffer saline (PBS)</td>
			<td>Gibco; Life Technologies Corporation</td>
			<td>10010023</td>
			<td>PBS 1 x, culture grade, no calcium, no magnesium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Poly-L-lysine</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>25988-63-0</td>
			<td>Poly-L-lysine hydrobromide mol wt 30,000-70,000</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Primary antobody</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab4674</td>
			<td>Chicken polyclonal to GFAP</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Secondary antibody</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab150176</td>
			<td>Alexa fluor 594 anti-chicken</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Spatula</td>
			<td>Miltex</td>
			<td>V973-70</td>
			<td>Number 24 cement spatula previously sterilized</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stereomicroscope</td>
			<td>Fisherbrand</td>
			<td>3000038</td>
			<td>Microscope for brain dissection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe 5 mL</td>
			<td>BD</td>
			<td>1222C84</td>
			<td>Sterile syringe</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe filter 2 &#181;m</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>09-740-105</td>
			<td>Polypropylene filter for sterilization</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Thrombin</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>9002--04-4</td>
			<td>Thrombin cristalline powder from bovine plasma</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Triton X-100</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>9002-93-1</td>
			<td>Laboratory grade</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypsin-EDTA</td>
			<td>Gibco; Life Technologies Corporation</td>
			<td>15400054</td>
			<td>Trypsin no phenol red 1 x diluted in PBS</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Versene solution</td>
			<td>Gibco; Life Technologies Corporation</td>
			<td>15040066</td>
			<td>Versene Solution (0.48 mM) formulated as 0.2 g EDTA(Na4) per liter of PBS</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Well plate</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>144530</td>
			<td>Sterile 24-well plate</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

3d bioprinting of murine cortical astrocytes for engineering neural-like tissue

Los astrocitos son células gliales con un papel esencial en el sistema nervioso central (SNC), incluyendo el soporte neuronal y la funcionalidad. Estas células también responden a las lesiones neuronales y actúan para proteger el tejido de eventos degenerativos. Los estudios in vitro de la funcionalidad de los astrocitos son importantes para dilucidar los mecanismos implicados en tales eventos y contribuir al desarrollo de terapias para tratar trastornos neurológicos. Este protocolo describe un método para biofabricar una estructura de tejido de tipo neural rica en astrocitos mediante bioimpresión 3D de biotinta cargada de astrocitos. En este trabajo se utilizó una bioimpresora 3D basada en extrusión, y se extrajeron astrocitos de las cortezas cerebrales de los cachorros de ratones C57Bl / 6. La biotinta se preparó mezclando astrocitos corticales de hasta el pasaje 3 a una solución de biomaterial compuesta de gelatina, gelatina-metacriloil (GelMA) y fibrinógeno, complementada con laminina, que presentaba condiciones óptimas de bioimpresión. Las condiciones de bioimpresión 3D minimizaron el estrés celular, contribuyendo a la alta viabilidad de los astrocitos durante el proceso, en el que el 74,08% ± el 1,33% de las células eran viables justo después de la bioimpresión. Después de 1 semana de incubación, la viabilidad de los astrocitos aumentó significativamente a 83.54% ± 3.00%, lo que indica que la construcción 3D representa un microambiente adecuado para el crecimiento celular. La composición del biomaterial permitió la unión celular y estimuló el comportamiento astrocítico, con células que expresan el marcador específico de astrocitos glial de proteína ácida fibrilar (GFAP) y poseen la morfología astrocítica típica. Este protocolo reproducible proporciona un método valioso para biofabricar tejido neural 3D rico en astrocitos que se asemeja al microambiente nativo de las células, útil para los investigadores que tienen como objetivo comprender la funcionalidad de los astrocitos y su relación con los mecanismos involucrados en las enfermedades neurológicas.

Este trabajo tuvo como objetivo desarrollar un tejido similar a un neural utilizando la tecnología de bioimpresión 3D para depositar capa por capa la biotinta cargada de estratocitos primarios / GelMA / fibrinógeno. Los astrocitos fueron extraídos y aislados de la corteza cerebral de cachorros de ratones(Figura 1),añadidos a una composición de biomaterial, permitiendo la biofabricación de una construcción 3D viva.
El diseño asistido por ordenador (CAD) se...

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3D Bioprinting of Murine Cortical Astrocytes for Engineering Neural-Like Tissue

Aquí informamos un método de bioimpresión 3D de astrocitos corticales murinos para biofabricar tejidos neurales para estudiar la funcionalidad de los astrocitos en el sistema nervioso central y los mecanismos que involucran a las células gliales en enfermedades y tratamientos neurológicos.

Bioimpresión 3D de astrocitos corticales murinos para la ingeniería de tejido neural

Astrocytes are glial cells with an essential role in the central nervous system (CNS), including neuronal support and functionality. These cells also ...

La bioimpresión 3D de astrocitos supone un avance en la ingeniería de tejidos neuro, permitiendo la biofabricación de modelos in vitro que son útiles para comprender los mecanismos implicados en la enfermedad neurológica. La principal ventaja de la bioimpresión 3D es biofabricar estructuras adjuntas de células que imitan las características bioquímicas y mecánicas de los tejidos, proporcionando una mejor comprensión de la dinámica celular en la salud y la enfermedad. Este protocolo se puede aplicar a la biofabricación de otros tejidos blandos, ya que se basa en la bioimpresión 3D de una biotinta compuesta por polímeros naturales y componentes de matriz extracelular.Para empezar, corte el tejido cortical aislado del ratón eutanasiado en trozos pequeños con una micro tijera curva. Lave las piezas de tejido tres veces con un mililitro de HBSS mediante pipeteo hacia arriba y hacia abajo. Después de eliminar el HBSS agregado por tercera vez, agregue un mililitro de tripsina al 0.05% e incube el tejido durante cinco minutos a 37 grados centígrados.Para la disociación mecánica del tejido, pipetee suavemente la mezcla de tripsina tisular hacia arriba y hacia abajo 15 veces. A continuación, transfiera la mezcla disociada a un tubo cónico de 15 mililitros y agregue un volumen igual de FBS para neutralizar la actividad de tripsina. Filtre la suspensión a través de un filtro colador de células de 0,4 micrómetros para eliminar fragmentos no disociados.Lavar el filtro con un mililitro de astrocitos de medio. Pellet por la suspensión de la celda filtrada por centrifugación. Después de desechar el sobrenadante, suspenda la bolita celular en un mililitro de medio de cultivo de astrocitos.Transfiera la suspensión celular a un matraz de cultivo T25. Componen el volumen medio total de 3,5 mililitros e incuban las células a 37 grados centígrados y 5% de dióxido de carbono. Para obtener el fibrinógeno a la concentración final de tres miligramos por mililitro, transfiera 0,9 mililitros de 10 miligramos por mililitro de solución de fibrinógeno a la solución de metacriloilo de gelatina-gelatina.Para obtener el fotoiniciador a la concentración final de 0.5% en peso por volumen, agregue 0.015 gramos de fotoiniciador a la solución preparada de gelatina-gelatina metacriloil fibrinógeno. Después del vórtice, mantenga la solución a 40 grados centígrados, protegida de la luz para evitar la degradación de PI. A continuación, filtre la solución a través de un filtro de 0,2 micrómetros en un tubo cónico estéril de 15 mililitros.Transfiera 980 microlitros de la solución de biomaterial a un tubo cónico de 15 mililitros. Para obtener la laminina a la concentración final de dos microgramos por mililitro, agregue 20 microlitros de laminina diluida al tubo que contiene biotinta. Mezclar suavemente mediante pipeteo hacia arriba y hacia abajo, evitando burbujas y mantener la solución de biotinta a 37 grados centígrados hasta que esté lista para mezclarse con las células.Tripsinizar los astrocitos primarios con tripsina al 0,05% durante 5 minutos y neutralizar la actividad de tripsina con FPS en una proporción de uno a uno. Luego, transfiera las células a un tubo cónico de 15 mililitros y centrífuga a 200 veces G durante cinco minutos. Después de contar las células, transfiera 1 veces 10 a las 6 células a un tubo cónico y centrífuga diferentes como se ha demostrado.Deje solo 200 microlitros del sobrenadante en el tubo y suspenda la bolita celular golpeando suavemente la parte inferior del tubo cónico. Para obtener una concentración final de 1 veces 10 a las 6 células por mililitro, transfiera un mililitro de solución de gelatina-gelatina metacriloil fibrinógeno al tubo que contiene las células y homogeneice canalizando suavemente hacia arriba y hacia abajo. Use una pipeta de 1000 microlitros para transferir lentamente los astrocitos colocados en la solución de biotinta de gelatina-gelatina metacriloil fibrinógeno a una jeringa de plástico de cinco mililitros, evitando la formación de burbujas.Conecte una aguja roma estéril de calibre 22 a la jeringa. Exponga la bioimpresora a la luz UV durante 15 minutos y luego limpie la bioimpresora con etanol al 70%, luego conecte la jeringa al cabezal de impresión de la bioimpresora y enjuague manualmente la biotinta para eliminar las burbujas restantes. Para realizar la bioimpresión, coloque a 35 milímetros el plato de cultivo en la mesa de la bioimpresora, coloque la aguja a 0,1 milímetros de distancia de la superficie del plato de cultivo para permitir el movimiento de la aguja y presione el botón Imprimir.Una vez finalada la bioimpresión, asegúrese de que la jeringa se aleje del plato y cierre el plato de cultivo. Coloque el plato de cultivo bajo luz UV para la reticulación de gelatina metacriloil. Use una espátula estéril para transferir la construcción bioimpresa a una placa de 24 pozos.Agregue 500 microlitros de solución de cloruro de calcio de trombina y deje actuar durante 30 minutos para permitir la reticulación de fibrina. Después de retirar la solución de reticulación, lave la construcción con dos mililitros de PBS, luego reemplace el PBS con un mililitro de medio de cultivo de astrocitos. Incubar a 37 grados centígrados y 5% de dióxido de carbono y cambiar el medio cada tres días.Use una espátula para transferir la construcción bioimpresa a un plato de cultivo de 35 milímetros. Lave la construcción con un mililitro de PBS. Deposite 100 microlitros del reactivo muerto vivo sobre la construcción y manténgalo a 37 grados centígrados durante 30 minutos, manteniéndolo protegido de la luz.Después de retirar el reactivo muerto vivo, lave la construcción con PBS como se ha demostrado. Transfiera la muestra a un plato confocal y observe las células dentro de la construcción bajo un microscopio confocal utilizando excitación de 488 y 570 nanómetros para la adquisición de imágenes. Después de la bioimpresión 3D, se estimó la integridad del andamio bioimpreso y se observó la formación de una estructura bien definida con células atrapadas dentro del biomaterial.Después de los procesos de bioimpresión y reticulación, la mayoría de las células presentaron una morfología redonda cuando el constructo se incubó con un medio de astrocitos. Los andamios bioimpresos mantuvieron la integridad después de siete días de incubación, y aunque se observaron algunas células redondas, muchos astrocitos se extendieron por todo el constructo, presentando morfología astrocítica e interconexión. La viabilidad celular se evaluó inmediatamente después de la bioimpresión y los resultados mostraron que a menor velocidad, las células viables representaban hasta el 74% del total de células, siendo significativamente más altas que las células bioimpresas a mayor velocidad.La viabilidad de los astrocitos bioimpresos se normalizó a astrocitos cultivados en 2D y los resultados indicaron que en el séptimo día, los astrocitos bioimpresos habían aumentado significativamente la viabilidad. Inmediatamente después de la bioimpresión, los astrocitos mostraron morfología redonda y ensayo de muertos vivos. Después de una semana, los astrocitos se extendieron por todo el constructo y presentaron una morfología distinta de las células, idéntica al cultivo 2D.Los astrocitos bioimpresos en 3D se caracterizaron por la inmunofluorescencia. Después de siete días de incubación en el constructo bioimpreso, se observaron astrocitos altamente densos con una morfología similar a una estrella. Las células de astrocitos bioimpresas expresaron el marcador específico de astrocitos la proteína ácida fibrilar glial indica la retención del fenotipo astrocítico después de siete días de bioimpresión, y estos resultados indican que la composición de biotinta proporcionó un microambiente biocompatible para promover la adhesión, propagación y crecimiento de los astrocitos.La evaluación de genes específicos y la expresión de marcadores celulares por los astrocitos bioimpresos proporcionaría evidencia de la función neuro-tisular, como la reactividad astrocitary siguiendo estímulos específicos. Este protocolo allana el camino para la biofabricación de estructuras neuro-similares más complejas compuestas por diferentes tipos de células en biomoléculas, permitiendo la imitación de nichos neurogénicos específicos.

Research

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Tissue-engineered small intestine (TESI) has successfully been used to rescue Lewis rats after massive small bowel resection, resulting in return to ...

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Bioingeniería

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Ingeniería de tejidos de un humano 3D<em&gt; In vitro</em&gt; Sistema de Prueba de Tumores

Cancer is one of the leading causes of death worldwide.  Current therapeutic strategies are predominantly developed in 2D culture  systems, which ...

Tissue Engineering: Construction of a Multicellular 3D Scaffold for the Delivery of Layered Cell Sheets

Ingeniería de tejidos: Construcción de un multicelular 3D Andamios para la entrega de láminas de células en capas

Many tissues, such as the adult human hearts, are unable to adequately regenerate after damage.2,3 Strategies in tissue engineering propose innovations to ...

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Ingeniería 3D Cellularized colágeno Geles para Vascular Regeneración Tisular

Synthetic materials are known to initiate clinical complications such as inflammation, stenosis, and infections when implanted as vascular substitutes. ...

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Creación de tejido cardiaco que exhibe la integración mecánica de esferoides usando bioprinting 3D

This protocol describes 3D bioprinting of cardiac tissue without the use of biomaterials, using only cells. Cardiomyocytes, endothelial cells and ...

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Aislamiento de murino tejido adiposo derivado de microvascular Fragmentos como Unidades Vascularización para ingeniería de tejidos

A functional microvascular network is of pivotal importance for the survival and integration of engineered tissue constructs. For this purpose, several ...

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Vascularizado de Bioprinting de microfluidos para la ingeniería de tejidos y organitas

Engineering vascularized tissue constructs and organoids has been historically challenging. Here we describe a novel method based on microfluidic ...

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Bioprinting de cartílago y piel análogos de tejido utilizando un pasivo novela mezcla de unidad técnica de Bioink Precellularization

Bioprinting is a powerful technique for the rapid and reproducible fabrication of constructs for tissue engineering applications. In this study, both ...

Protocols of 3D Bioprinting of Gelatin Methacryloyl Hydrogel Based Bioinks

Protocolos de Bioimpresión 3D de Bioinks basados en Gelatin Methacryloyl Hydrogel

Gelatin methacryloyl (GelMA) has become a popular biomaterial in the field of bioprinting. The derivation of this material is gelatin, which is hydrolyzed ...