Name: three-dimensional collagen matrix scaffold implantation as a liver regeneration strategy
Uploaded: 2021-06-29T14:15:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Three-Dimensional Collagen Matrix Scaffold Implantation as a Liver Regeneration Strategy at JoVE.com

著者らは、実験医学ユニットの実験動物施設、技術的および外科的支援のための看護師カロライナ・バニョスG.、マイクロ写真のサポートのためのマルコ・E・グディーニョ・Z、肝臓のヒストロジーのサポートのためのエリック・アポの人員に感謝したいと考えています。国家評議会は、科学技術のためのこの研究を支援しました(CONACyT),助成金番号SALUD-2016-272579とPAPIIT-UNAM TA200515.

本研究は、国立大学オートノマ・デ・メヒコ(UNAM)医学部の倫理委員会(DI/115/2015)とメキシコ病院総合倫理委員会(CI/314/15)によって承認されました。この機関は、実験動物の生産、ケア、使用に関するすべての技術仕様を満たしており、国内法(NOM-062-ZOO-1999)によって法的に認定されています。この研究のために、150〜250g(生後6〜8週齢)の雄のウィスターラットを医学部の実験動物施設から得た。</...

<ol>
	<li>Li, N., Hua, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immune+cells+in+liver+regeneration.">Immune cells in liver regeneration.</a> Oncotarget. 8 (2), 3628-3639 (2017).</li><li>Langer, R., Vacanti, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tissue+Engineering.">Tissue Engineering.</a> Science. 260 (5110), 920-926 (1993).</li><li>Lee, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+liver+decellularized+extracellular+matrix+bioink+for+three-dimensional+cell+printing-based+liver+tissue+engineering.">Development of liver decellularized extracellular matrix bioink for three-dimensional cell printing-based liver tissue engineering.</a> Biomacromolecules. 18 (4), 1229-1237 (2017).</li><li>Shafiee, A., Atla, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tissue+engineering:+Toward+a+new+era+of+medicine.">Tissue engineering: Toward a new era of medicine.</a> Annual Review of Medicine. 68, 29-40 (2017).</li><li>Hu, C., Zhao, L., Wu, Z., Li, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transplantation+of+mesenchymal+stem+cells+and+their+derivatives+effectively+promotes+liver+regeneration+to+attenuate+acetaminophen-induced+liver+injury.">Transplantation of mesenchymal stem cells and their derivatives effectively promotes liver regeneration to attenuate acetaminophen-induced liver injury.</a> Stem Cell Research &amp; Therapy. 11 (1), 88 (2020).</li><li>Sancho-Bru, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Therapeutic+possibilities+of+stem+cells+in+the+treatment+of+liver+diseases.">Therapeutic possibilities of stem cells in the treatment of liver diseases.</a> Gastroenterologia y Hepatologia. 34 (10), 701-710 (2011).</li><li>Kobolak, J., Dinnyes, A., Memic, A., Khademhosseini, A., Mobasheri, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mesenchymal+stem+cells:+Identification,+phenotypic+characterization,+biological+properties+and+potential+for+regenerative+medicine+through+biomaterial+micro-engineering+of+their+niche.">Mesenchymal stem cells: Identification, phenotypic characterization, biological properties and potential for regenerative medicine through biomaterial micro-engineering of their niche.</a> Methods. 99, 62-68 (2016).</li><li>Freedman, B. R., Mooney, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biomaterials+to+mimic+and+heal+connective+tissues.">Biomaterials to mimic and heal connective tissues.</a> Advanced Materials. 31 (19), 1806695 (2019).</li><li>Meyer, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Processing+of+collagen+based+biomaterials+and+the+resulting+materials+properties.">Processing of collagen based biomaterials and the resulting materials properties.</a> Biomedical Engineering Online. 18 (1), 24 (2019).</li><li>El Baz, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transplant+of+hepatocytes,+undifferentiated+mesenchymal+stem+cells,+and+in+vitro+hepatocyte-differentiated+mesenchymal+stem+cells+in+a+chronic+lver+failure+experimental+model:+a+comparative+study.">Transplant of hepatocytes, undifferentiated mesenchymal stem cells, and in vitro hepatocyte-differentiated mesenchymal stem cells in a chronic lver failure experimental model: a comparative study.</a> Experimental and Clinical Transplantation. 16 (1), 81-89 (2018).</li><li>Nedjari, S., Awaja, F., Guarino, R., Gugutkov, D., Altankov, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Establishing+multiple+osteogenic+differentiation+pathways+of+mesenchymal+stem+cells+through+different+scaffold+configurations.">Establishing multiple osteogenic differentiation pathways of mesenchymal stem cells through different scaffold configurations.</a> Journal of Tissue Engineering and Regenerative Medicine. 14 (10), 1428-1437 (2020).</li><li>Chan, E. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Three+dimensional+collagen+scaffold+promotes+intrinsic+vascularisation+for+tissue+engineering+applications.">Three dimensional collagen scaffold promotes intrinsic vascularisation for tissue engineering applications.</a> PLoS One. 11 (2), 0149799 (2016).</li><li>Arenas-Herrera, J. E., Ko, I. K., Atala, A., Yoo, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Decellularization+for+whole+organ+bioengineering.">Decellularization for whole organ bioengineering.</a> Biomedical Materials. 8 (1), 014106 (2013).</li><li>Parmaksiz, M., Dogan, A., Odabas, S., El&#231;in, A. E., El&#231;in, Y. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Clinical+applications+of+decellularized+extracellular+matrices+for+tissue+engineering+and+regenerative+medicine.">Clinical applications of decellularized extracellular matrices for tissue engineering and regenerative medicine.</a> Biomedical Materials. 11 (2), 022003 (2016).</li><li>Gacek, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stereo+microscope,+neglected+tool.">Stereo microscope, neglected tool.</a> Postepy Biochemii. 63 (1), 68-73 (2017).</li><li>Oldham, S., Rivera, C., Boland, M. L., Trevaskis, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Incorporation+of+a+survivable+liver+biopsy+procedure+in+mice+to+assess+non-alcoholic+steatohepatitis+(NASH)+resolution.">Incorporation of a survivable liver biopsy procedure in mice to assess non-alcoholic steatohepatitis (NASH) resolution.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (146), e59130 (2019).</li><li>The University of Texas at Austin Institutional Animal Care and Use Committee. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Guidelines for the Use of Chemical Depilatory Agents on Laboratory Animals. , (2021).</li><li>Sivridis, L., Kotini, A., Anninos, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+process+of+learning+in+neural+net+models+with+Poisson+and+Gauss+connectivities.">The process of learning in neural net models with Poisson and Gauss connectivities.</a> Neural Networks. 21 (1), 28-35 (2008).</li><li>Le&#243;n-Mancilla, B. H., Araiza-T&#233;llez, M. A., Flores-Flores, J. O., Pi&#241;a-Barba, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Physico-chemical+characterization+of+collagen+scaffolds+for+tissue+engineering.">Physico-chemical characterization of collagen scaffolds for tissue engineering.</a> Journal of Applied Research and Technology. 14 (1), 77-85 (2016).</li><li>Le&#243;n, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hematological+and+biochemical+parameters+in+Sprague+Dawley+laboratory+rats+breed+in+CENPALAB,+Cenp:SPRD.">Hematological and biochemical parameters in Sprague Dawley laboratory rats breed in CENPALAB, Cenp:SPRD.</a> Revista Electronica de Veterinaria. 12, 1-10 (2011).</li><li>Tsuchiya, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mesenchymal+stem+cell+therapies+for+liver+cirrhosis:+MSCs+as+"conducting+cells"+for+improvement+of+liver+fibrosis+and+regeneration.">Mesenchymal stem cell therapies for liver cirrhosis: MSCs as "conducting cells" for improvement of liver fibrosis and regeneration.</a> Inflammation and Regeneration. 39, 18 (2019).</li><li>Badylak, S. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+extracellular+matrix+as+a+biologic+scaffold+material.">The extracellular matrix as a biologic scaffold material.</a> Biomaterials. 28, 3587-3593 (2007).</li><li>Acevedo, G. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Xenoimplante+de+col&#225;gena+en+uretra+de+perro.">Xenoimplante de col&#225;gena en uretra de perro.</a> Universidad Nacional Aut&#243;noma de M&#233;xico. , (2011).</li><li>Montalvo-Jave, E. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Absorbable+bioprosthesis+for+the+treatment+of+bile+duct+injury+in+an+experimental+model.">Absorbable bioprosthesis for the treatment of bile duct injury in an experimental model.</a> International Journal of Surgery. 20, 163-169 (2015).</li></ol>

臓器移植は、肝線維症または肝硬変患者における治療の主力である。いくつかの患者がこの処置の恩恵を受け、待機リストの患者に治療的代替手段を提供する必要がある。組織工学は、再生電位2、4、13を有する足場と細胞を採用する有望な戦略である。肝臓の一部の除去は、この血管化された器官の多量の出血のために?...

肝臓は、ホメオスタシスおよびタンパク質産生の維持に関与する最も重要な器官の1つである。残念ながら、肝臓病は世界的に主要な死因です。肝硬変や肝細胞癌を含む肝臓損傷の進行段階では、肝臓移植が臨床的に推奨される手順です。しかし、ドナーの不足と移植の成功率が低いため、組織工学(TE)および再生医療(RM)における新しい技術が2,3に開発された。
TEは、炎症、線維性、および浮腫性の器官および組織1、5、6の回復を促進するために幹細胞、足場、および成長因子4を使用することを含む。足場に使用される生体材料は、ネイティブECMを模倣し、誘導細胞リモデリング7のための物理的、化学的、生物学的手掛かりを提供する。コラーゲンは、真皮、腱、腸、心膜8、9から得られる最も豊富なタンパク質の一つです。さらに、コラーゲンは、バイオプリンティングまたはエレクトロスピニング10、11を介して二次元および3次元足場を生成するバイオポリマーとして得ることができる。このグループは、肝臓組織の再生のための骨源からのコラーゲンの使用を報告する最初のグループです。別の研究は、皮膚から得られたウシコラーゲンから合成された足場の使用を、均質で密接に位置する細孔で、それらの間に何の通信もせずに12を報告する。
脱細胞化は、ネイティブECMを保存し、幹細胞電位13、14を有する細胞のその後の組み込みを可能にする。しかし、この手順は、マウスから肝臓、心臓、腎臓、小腸、および尿膀胱の実験段階にまだあるが、ラット、ウサギ、豚、羊、牛、および馬3、14。現在、切除された肝臓質量容積は、いずれの動物肝切除モデルにも置き換えられない。しかし、細胞増殖や血管新生を可能にする追加の支援またはネットワーク(生体材料)の使用は、肝臓の小葉機能の迅速な回復に不可欠である可能性があります。したがって、足場は慢性肝疾患の組織を再生または修復するための代替アプローチとして採用することができ、ひいては寄付や肝臓移植の臨床合併症による制限を排除する。

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Anionic detergent</td>
			<td>Alconox</td>
			<td>Z273228</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Biopsy cassettes</td>
			<td>Leica</td>
			<td>3802453</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Camera DMX</td>
			<td>Nikon</td>
			<td>DXM1200F</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Centrifuge</td>
			<td>Eppendorf</td>
			<td>5424</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chlorhexidine gluconate 4%</td>
			<td>BD</td>
			<td>372412</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cover glasses 25 mm x 40 mm</td>
			<td>Corning</td>
			<td>2980-224</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Eosin</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>200-M</td>
			<td>CAS 17372-87-1</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethyl alcohol, pure</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>459836</td>
			<td>CAS 64-17-5</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Flunixine meglumide</td>
			<td>MSD</td>
			<td>Q-0273-035</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass slides 75 mm x 25 mm</td>
			<td>Corning</td>
			<td>101081022</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hematoxylin</td>
			<td>Merck</td>
			<td>H9627</td>
			<td>CAS 571-28-2</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hydrochloric acid 37%</td>
			<td>Merck</td>
			<td>339253</td>
			<td>CAS 7647-01-0</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ketamine</td>
			<td>Pisa agropecuaria</td>
			<td>Q-7833-028</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Light microscopy</td>
			<td>Nikon</td>
			<td>Microphoto-FXA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microtainer yellow cape</td>
			<td>Beckton Dickinson</td>
			<td>365967</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microtome</td>
			<td>Leica</td>
			<td>RM2125</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Model animal: Wistar rats</td>
			<td>Universidad Nacional Aut&#243;noma de M&#233;xico</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nylon 3-0 (Dermalon)</td>
			<td>Covidien</td>
			<td>1750-41</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Polypropylene 7-0</td>
			<td>Atramat</td>
			<td>SE867/2-60</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Povidone-iodine10% cutaneous solution</td>
			<td>Diafra SA de CV</td>
			<td>1.37E+86</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scaning electronic microscopy</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td>DSM-950</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium hydroxide, pellets</td>
			<td>J. T. Baker</td>
			<td>3722-01</td>
			<td>CAS 1310-73-2</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Software ACT-1</td>
			<td>Nikon</td>
			<td>Ver 2.70</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stereoscopy macroscopy</td>
			<td>Leica</td>
			<td>EZ4Stereo 8X-35X</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterrad 100S</td>
			<td>Johnson and Johnson</td>
			<td>99970</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgipath paraplast</td>
			<td>Leica</td>
			<td>39601006</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Synringe of 1 mL with needle (27G x 13 mm)</td>
			<td>SensiMedical</td>
			<td>LAN-078-077</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue Processor (Histokinette)</td>
			<td>Leica</td>
			<td>TP1020</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue-Tek TEC 5 (Tissue embedder)</td>
			<td>Sakura Finetek USA</td>
			<td>5229</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trichrome stain kit</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>HT15</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Unicell DxC600 Analyzer</td>
			<td>Beckman Coulter</td>
			<td>BC 200-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Xylazine</td>
			<td>Pisa agropecuaria</td>
			<td>Q-7833-099</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Xylene</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>534056</td>
			<td>CAS 1330-20-7</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

three-dimensional collagen matrix scaffold implantation as a liver regeneration strategy

肝臓病は世界中の主要な死因です。過度のアルコール摂取、高脂肪食、C型肝炎ウイルス感染は、線維症、肝硬変、および/または肝細胞癌を促進します。肝臓移植は、進行した疾患段階における患者の寿命を改善し、延長するための臨床的に推奨される手順である。しかし、移植の10%だけが成功し、臓器の入手可能性、術前および術後の処置、および上昇したコストはその結果と直接相関している。細胞外マトリックス(ECM)足場は、組織修復の代替手段として登場しました。生体適合性および移植片の受容は、これらの生体材料の主な有益な特性である。肝臓の大きさと正しい機能を回復する能力は肝臓肝切除モデルで評価されているが、押し出された肝臓質量の体積を置き換える足場または何らかの支持の使用は評価されていない。
部分的な肝切除術は、ウシのコンダイルからのコラーゲンマトリックス足場(CMS)の異種移植を伴うラット肝臓で行った。左肝葉組織を取り除き(約40%)、同じ割合のCMSを外科的に移植した。肝機能検査は、外科的処置の前後に評価された。3日目、14日、21日後、動物を安楽死させ、巨視的および組織学的評価を行った。3日目と14日目には、21日目に血管の新形化およびCMS再吸収と同様に、拒絶反応または感染の臨床的証拠を伴って、CMSを取り巻く脂肪組織が観察された。ヘマトキシリンとエオシン(H&E)とマッソンのトリクローム染色で観察されたCMSへの微小な炎症プロセスと隣接する細胞の移行の組織学的証拠があった。CMSは肝臓組織で良好なパフォーマンスを示し、慢性肝疾患における組織再生および修復を研究するための有用な代替手段となり得る。

骨脱塩は、元の形状や毛穴の相互接続を変更することなく、CMSの機械的特性に影響を与えます。CMSは任意の形状を有することができ、したがって、選択された器官または組織19の大きさおよび形状に調整することができる。本プロトコルでは、三角形のCMSを使用しました(図1A-D)。ラットモデルを用いて、肝臓にお?...

Watch this Scientific Journal Video about Three-Dimensional Collagen Matrix Scaffold Implantation as a Liver Regeneration Strategy at JoVE.com

Three-Dimensional Collagen Matrix Scaffold Implantation as a Liver Regeneration Strategy

肝疾患は、線維症や肝硬変を促進する多くの原因によって誘発される。移植は健康回復のための唯一の選択肢です。しかし、移植可能な臓器の不足を考えると、代替案を検討する必要があります。我々の研究は、動物モデルからの肝臓組織におけるコラーゲン足場の移植を提案する。

肝再生戦略としての三次元コラーゲンマトリックス足場移植

Liver diseases are the leading cause of death worldwide. Excessive alcohol consumption, a high-fat diet, and hepatitis C virus infection promote fibrosis, ...

この方法は、肝臓の再生を促進するために肝臓の足場としてコラーゲンマトリックスのインプラントを配置することを含む.この移植方法は、切除された組織の形状とバルーンの修復を探求する戦略家のための扉を開き、それによって麻酔、外科的持続時間、および回復時間を短縮する。この方法は、肝臓線維症のモデル、ならびに他の哺乳類種を含む再生を促進するために使用することができる。この方法は、負傷した組織の修復を促進するために組織工学と再生医療に基づいています。手術領域作業テーブル、マイクロサージャスト顕微鏡、および2%クロルヘキシジン溶液でシートを消毒し、次に、滅菌生理食塩水で牛のコンディレから得られたコラーゲンマトリックス足場を20分間水和することから始めます。次に、外科用石鹸と両刃の刃を使用して、6〜8週齢の雄のウィスターラットの腹腔皮膚を剃り、10%ポビトンヨウ素溶液を使用して皮膚を3回消毒する。動物を、透過性の気道を維持するために頸部を伸ばして、褥瘡の位置に暖かいプレートに置きます。呼吸パターンを通して麻酔の深さを評価し、手足の離脱反射の喪失を評価する。次に、剃った皮膚の周りに使い捨ての外科用ドレープを配置し、xiphoidプロセスを基準点として使用し、切断鉗子でアルピスラインに2.5センチメートルの切開を行い、出血を防ぐために腹壁血管を避けるように注意する。腹部レトラクタを配置した後、腹腔を観察する。解剖鉗子を使用して、左肝葉を抽出し、金属板の上に置きます。滅菌を1センチ三角金属鋳型で一つ使用して、肝切除術を行う。肝臓の出血を防ぐために、5分間肝臓の端に綿棒で外科的圧迫を維持する。次に、7-O非吸収性ポリプロピレン縫合糸を使用して、肝組織と足場の間に4針の縫い目を有する肝切除部位に水和コラーゲンマトリックス足場を移植し、生体材料の変位を防ぐ。肝臓を腹腔に戻し、3-Oナイロン縫合糸で腹壁と皮膚を縫合する。手術用ヨウ素浸しスポンジで外科切開を2回洗浄し、動物のバイタルサインを監視します。次に、動物を横の褥瘡の位置に置きます。鎮痛薬を投与した後、温度制御のある騒音のない場所に実験用の動物の寝具と個々のポリカーボネートボックスに動物を置きます。麻酔からの回復を観察し、水と食物の消費量を2時間監視します。3日、14日、21日のコラーゲンマトリックス足場の有無にかかわらずSHAM群と実験群の肝機能に違いはなく、コラーゲンマトリックス足場が肝機能を破壊しないことを示した。3日目の組織学的分析は、肝臓におけるコラーゲンマトリックス足場の存在が異物反応を促進せず、緩い結合組織の顕著な存在が観察されたことを示す。14日目と21日目には、肝細胞に囲まれたコラーゲンマトリックス足場のトラベキュラとの緩い結合組織がより豊富になり、肝細胞がコラーゲンマトリックス足場に移行したことを示唆する。血管によって灌漑された肝細胞の領域が見られ、コラーゲンマトリックス足場のトラベキュラに付着する肝細胞が緩い結合組織に囲まれていることがあります。肝切除術を行っている間、無菌技術を使用して感染を防ぎ、その後、肝臓からの出血を防ぐために圧縮を適用する。また、7-O縫合糸を使用して、コラーゲンマトリックス足場の移植を行い、引き裂きを避けてください。線維性動物モデルにおけるコラーゲンマトリックス足場の移植後、肝再生のためのシノジェニック移植の利点を評価することができる。肝臓を取り除いた質量を置換するためのコラーゲンマトリックス足場の使用は、今まで評価されていなかった。これらの遺伝子由来物質は、慢性肝疾患の分野における別の治療オプションとしての道を開く。

Research

JoVE Journal

Medicine

A Strategy to Identify de Novo Mutations in Common Disorders such as Autism and Schizophrenia

そのような自閉症や統合失調症のような一般的な疾患でのde novo変異を同定するための戦略

There are several lines of evidence supporting the role of de novo mutations as a mechanism for common disorders, such as autism and schizophrenia. First, ...

Heterotypic Three-dimensional In Vitro Modeling of Stromal-Epithelial Interactions During Ovarian Cancer Initiation and Progression

Heterotypic Three-dimensional In Vitro Modeling of Stromal-Epithelial Interactions During Ovarian Cancer Initiation and Progression

三次元異<em&gt; in vitroで</em卵巣がんの発生と進行中に間質相互作用の上皮&gt;モデリング

Epithelial ovarian cancers (EOCs) are the leading cause of death from gynecological malignancy in Western societies. Despite advances in surgical ...

Human Neuroendocrine Tumor Cell Lines as a Three-Dimensional Model for the Study of Human Neuroendocrine Tumor Therapy

人間の神経内分泌腫瘍療法の研究のための三次元モデルとしての人間の神経内分泌腫瘍細胞株

Neuroendocrine tumors (NETs) are rare tumors, with an incidence of two per 100,&#x200A;000 individuals per year, and they account for 0.5% of all human ...

Quantification of Breast Cancer Cell Invasiveness Using a Three-dimensional (3D) Model

Quantification of Breast Cancer Cell Invasiveness Using a Three-dimensional 3D Model

3次元（3D）モデルを用いた乳癌細胞浸潤の定量化

It is now well known that the cellular and tissue microenvironment are critical regulators influencing tumor initiation and progression. Moreover, the ...

Isolated Hepatic Perfusion as a Treatment for Liver Metastases of Uveal Melanoma

ブドウ膜黒色腫の肝転移の治療として単離した肝灌流

Isolated hepatic perfusion (IHP) is a procedure where the liver is surgically isolated and perfused with a high concentration of the chemotherapeutic ...

Three-Dimensional (3D) Tumor Spheroid Invasion Assay

Three-Dimensional 3D Tumor Spheroid Invasion Assay

三次元（3D）腫瘍スフェロイド浸潤アッセイ

Invasion of surrounding normal tissues is generally considered to be a key hallmark of malignant (as opposed to benign) tumors. For some cancers in ...

Three-dimensional Alginate-bead Culture of Human Pituitary Adenoma Cells

ヒト下垂体腺腫細胞の三次元アルギン酸ビーズ文化

A three-dimensional culture method is described in which primary pituitary adenoma cells are grown in alginate beads. Alginate is a polymer derived from ...

Method of Direct Segmental Intra-hepatic Delivery Using a Rat Liver Hilar Clamp Model

ラット肝臓肝門部クランプモデルを用いたダイレクトセグメント別肝臓内送達方法

Major hepatic surgery with inflow occlusion, and liver transplantation, necessitate a period of warm ischemia, and a period of reperfusion leading to ...

Three-Dimensional Printing of a Complex Aortic Anomaly

複雑な大動脈の異常の三次元印刷

Complex congenital aortic anomalies include diverse types of malformations that may be clinically asymptomatic or present with respiratory or esophageal ...

Three-Dimensional Printing Guide Template Assisted Percutaneous Vertebroplasty (PVP)

Three-Dimensional Printing Guide Template Assisted Percutaneous Vertebroplasty PVP

3次元印刷ガイドテンプレートアシスト経皮椎形成術(PVP)

Percutaneous vertebroplasty (PVP) is considered an effective treatment for the back pain caused by osteoporotic vertebral compression fracture. The ...