Name: three-dimensional collagen matrix scaffold implantation as a liver regeneration strategy
Uploaded: 2021-06-29T14:15:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Three-Dimensional Collagen Matrix Scaffold Implantation as a Liver Regeneration Strategy at JoVE.com

Forfatterne ønsker å takke personellet til Laboratory Animal Facility of the Experimental Medicine Unit, Nurse Carolina Baños G. for teknisk og kirurgisk støtte, Marco E. Gudiño Z. for støtte i mikrofotografer, og Erick Apo for støtte i lever histologi. Nasjonalrådet støttet denne forskningen for vitenskap og teknologi (CONACyT), tilskuddsnummer SALUD-2016-272579 og PAPIIT-UNAM TA200515.

Den nåværende forskningen ble godkjent av etikkkomiteen ved School of Medicine (DI/115/2015) ved Universidad Nacional Autónoma de México (UNAM) og etikkkomiteen for Hospital General de Mexico (CI/314/15). Institusjonen oppfyller alle tekniske spesifikasjoner for produksjon, pleie og bruk av forsøksdyr og er juridisk sertifisert av nasjonal lovgivning (NOM-062-ZOO-1999). Mannlige Wistar-rotter som veide 150-250 g (6-8 uker gamle) ble hentet fra Laboratory Animal Facility ved School of Medicine, UNAM, for denne studie...

<ol>
	<li>Li, N., Hua, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immune+cells+in+liver+regeneration.">Immune cells in liver regeneration.</a> Oncotarget. 8 (2), 3628-3639 (2017).</li><li>Langer, R., Vacanti, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tissue+Engineering.">Tissue Engineering.</a> Science. 260 (5110), 920-926 (1993).</li><li>Lee, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+liver+decellularized+extracellular+matrix+bioink+for+three-dimensional+cell+printing-based+liver+tissue+engineering.">Development of liver decellularized extracellular matrix bioink for three-dimensional cell printing-based liver tissue engineering.</a> Biomacromolecules. 18 (4), 1229-1237 (2017).</li><li>Shafiee, A., Atla, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tissue+engineering:+Toward+a+new+era+of+medicine.">Tissue engineering: Toward a new era of medicine.</a> Annual Review of Medicine. 68, 29-40 (2017).</li><li>Hu, C., Zhao, L., Wu, Z., Li, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transplantation+of+mesenchymal+stem+cells+and+their+derivatives+effectively+promotes+liver+regeneration+to+attenuate+acetaminophen-induced+liver+injury.">Transplantation of mesenchymal stem cells and their derivatives effectively promotes liver regeneration to attenuate acetaminophen-induced liver injury.</a> Stem Cell Research &amp; Therapy. 11 (1), 88 (2020).</li><li>Sancho-Bru, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Therapeutic+possibilities+of+stem+cells+in+the+treatment+of+liver+diseases.">Therapeutic possibilities of stem cells in the treatment of liver diseases.</a> Gastroenterologia y Hepatologia. 34 (10), 701-710 (2011).</li><li>Kobolak, J., Dinnyes, A., Memic, A., Khademhosseini, A., Mobasheri, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mesenchymal+stem+cells:+Identification,+phenotypic+characterization,+biological+properties+and+potential+for+regenerative+medicine+through+biomaterial+micro-engineering+of+their+niche.">Mesenchymal stem cells: Identification, phenotypic characterization, biological properties and potential for regenerative medicine through biomaterial micro-engineering of their niche.</a> Methods. 99, 62-68 (2016).</li><li>Freedman, B. R., Mooney, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biomaterials+to+mimic+and+heal+connective+tissues.">Biomaterials to mimic and heal connective tissues.</a> Advanced Materials. 31 (19), 1806695 (2019).</li><li>Meyer, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Processing+of+collagen+based+biomaterials+and+the+resulting+materials+properties.">Processing of collagen based biomaterials and the resulting materials properties.</a> Biomedical Engineering Online. 18 (1), 24 (2019).</li><li>El Baz, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transplant+of+hepatocytes,+undifferentiated+mesenchymal+stem+cells,+and+in+vitro+hepatocyte-differentiated+mesenchymal+stem+cells+in+a+chronic+lver+failure+experimental+model:+a+comparative+study.">Transplant of hepatocytes, undifferentiated mesenchymal stem cells, and in vitro hepatocyte-differentiated mesenchymal stem cells in a chronic lver failure experimental model: a comparative study.</a> Experimental and Clinical Transplantation. 16 (1), 81-89 (2018).</li><li>Nedjari, S., Awaja, F., Guarino, R., Gugutkov, D., Altankov, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Establishing+multiple+osteogenic+differentiation+pathways+of+mesenchymal+stem+cells+through+different+scaffold+configurations.">Establishing multiple osteogenic differentiation pathways of mesenchymal stem cells through different scaffold configurations.</a> Journal of Tissue Engineering and Regenerative Medicine. 14 (10), 1428-1437 (2020).</li><li>Chan, E. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Three+dimensional+collagen+scaffold+promotes+intrinsic+vascularisation+for+tissue+engineering+applications.">Three dimensional collagen scaffold promotes intrinsic vascularisation for tissue engineering applications.</a> PLoS One. 11 (2), 0149799 (2016).</li><li>Arenas-Herrera, J. E., Ko, I. K., Atala, A., Yoo, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Decellularization+for+whole+organ+bioengineering.">Decellularization for whole organ bioengineering.</a> Biomedical Materials. 8 (1), 014106 (2013).</li><li>Parmaksiz, M., Dogan, A., Odabas, S., El&#231;in, A. E., El&#231;in, Y. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Clinical+applications+of+decellularized+extracellular+matrices+for+tissue+engineering+and+regenerative+medicine.">Clinical applications of decellularized extracellular matrices for tissue engineering and regenerative medicine.</a> Biomedical Materials. 11 (2), 022003 (2016).</li><li>Gacek, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stereo+microscope,+neglected+tool.">Stereo microscope, neglected tool.</a> Postepy Biochemii. 63 (1), 68-73 (2017).</li><li>Oldham, S., Rivera, C., Boland, M. L., Trevaskis, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Incorporation+of+a+survivable+liver+biopsy+procedure+in+mice+to+assess+non-alcoholic+steatohepatitis+(NASH)+resolution.">Incorporation of a survivable liver biopsy procedure in mice to assess non-alcoholic steatohepatitis (NASH) resolution.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (146), e59130 (2019).</li><li>The University of Texas at Austin Institutional Animal Care and Use Committee. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Guidelines for the Use of Chemical Depilatory Agents on Laboratory Animals. , (2021).</li><li>Sivridis, L., Kotini, A., Anninos, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+process+of+learning+in+neural+net+models+with+Poisson+and+Gauss+connectivities.">The process of learning in neural net models with Poisson and Gauss connectivities.</a> Neural Networks. 21 (1), 28-35 (2008).</li><li>Le&#243;n-Mancilla, B. H., Araiza-T&#233;llez, M. A., Flores-Flores, J. O., Pi&#241;a-Barba, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Physico-chemical+characterization+of+collagen+scaffolds+for+tissue+engineering.">Physico-chemical characterization of collagen scaffolds for tissue engineering.</a> Journal of Applied Research and Technology. 14 (1), 77-85 (2016).</li><li>Le&#243;n, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hematological+and+biochemical+parameters+in+Sprague+Dawley+laboratory+rats+breed+in+CENPALAB,+Cenp:SPRD.">Hematological and biochemical parameters in Sprague Dawley laboratory rats breed in CENPALAB, Cenp:SPRD.</a> Revista Electronica de Veterinaria. 12, 1-10 (2011).</li><li>Tsuchiya, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mesenchymal+stem+cell+therapies+for+liver+cirrhosis:+MSCs+as+"conducting+cells"+for+improvement+of+liver+fibrosis+and+regeneration.">Mesenchymal stem cell therapies for liver cirrhosis: MSCs as "conducting cells" for improvement of liver fibrosis and regeneration.</a> Inflammation and Regeneration. 39, 18 (2019).</li><li>Badylak, S. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+extracellular+matrix+as+a+biologic+scaffold+material.">The extracellular matrix as a biologic scaffold material.</a> Biomaterials. 28, 3587-3593 (2007).</li><li>Acevedo, G. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Xenoimplante+de+col&#225;gena+en+uretra+de+perro.">Xenoimplante de col&#225;gena en uretra de perro.</a> Universidad Nacional Aut&#243;noma de M&#233;xico. , (2011).</li><li>Montalvo-Jave, E. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Absorbable+bioprosthesis+for+the+treatment+of+bile+duct+injury+in+an+experimental+model.">Absorbable bioprosthesis for the treatment of bile duct injury in an experimental model.</a> International Journal of Surgery. 20, 163-169 (2015).</li></ol>

Organtransplantasjon er bærebjelken i behandlingen hos pasienter med leverfibrose eller skrumplever. Noen få pasienter drar nytte av denne prosedyren, noe som gjør det nødvendig å gi terapeutiske alternativer for pasienter på ventelisten. Vevsteknikk er en lovende strategi som bruker stillaser og celler med regenerativt potensial2,4,13. Fjerning av en del av leveren er et kritisk skritt i denne prosedyren på grunn av den ...

Leveren er et av de viktigste organene som er involvert i å opprettholde homeostase og proteinproduksjon1. Dessverre er leversykdom den ledende dødsårsaken over hele verden. I avanserte stadier av leverskade, som inkluderer skrumplever og hepatocellulært karsinom, er levertransplantasjon den klinisk anbefalte prosedyren. På grunn av mangel på donorer og den lave frekvensen av vellykkede transplantasjoner, er det imidlertid utviklet nye teknikker innen vevsteknikk (TE) og regenerativ medisin (RM)2,3.
TE innebærer bruk av stamceller, stillaser og vekstfaktorer4 for å fremme gjenoppretting av betente, fibrotiske og edematøse organer og vev1,5,6. Biomaterialene som brukes i stillaser etterligner den innfødte ECM, og gir de fysiske, kjemiske og biologiske signalene for guidet cellulær ombygging7. Kollagen er et av de mest tallrike proteinene hentet fra dermis, sene, tarm og perikardium8,9. Videre kan kollagen oppnås som biopolymer for å produsere to- og tredimensjonale stillaser gjennom bioprinting eller elektrospinning10,11. Denne gruppen er den første som rapporterer bruk av kollagen fra en benkilde for regenerering av levervev. En annen studie rapporterer bruk av stillaser syntetisert fra bovint kollagen, som ble hentet fra huden, med homogene og nærtliggende porer, uten kommunikasjon mellom dem12.
Decellularisering bevarer den opprinnelige ECM, slik at etterfølgende inkorporering av celler med stamcellepotensial13,14. Denne prosedyren er imidlertid fortsatt i eksperimentell fase i leveren, hjertet, nyren, tynntarmen og urinblæren fra mus, rotter, kaniner, griser, sauer, storfe og hester3,14. For tiden er det resekterte levermassevolumet ikke erstattet i noen av dyrets hepatektomimodeller. Imidlertid kan bruk av ytterligere støtte eller nettverk (biomaterialer) som muliggjør celleproliferasjon og angiogenese være avgjørende for rask restaurering av leverparenchymale funksjoner. Dermed kan stillaser brukes som alternative tilnærminger for å regenerere eller reparere vev i kroniske leversykdommer, i sin tur eliminere begrensninger på grunn av donasjon og kliniske komplikasjoner ved levertransplantasjon.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Anionic detergent</td>
			<td>Alconox</td>
			<td>Z273228</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Biopsy cassettes</td>
			<td>Leica</td>
			<td>3802453</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Camera DMX</td>
			<td>Nikon</td>
			<td>DXM1200F</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Centrifuge</td>
			<td>Eppendorf</td>
			<td>5424</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chlorhexidine gluconate 4%</td>
			<td>BD</td>
			<td>372412</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cover glasses 25 mm x 40 mm</td>
			<td>Corning</td>
			<td>2980-224</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Eosin</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>200-M</td>
			<td>CAS 17372-87-1</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethyl alcohol, pure</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>459836</td>
			<td>CAS 64-17-5</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Flunixine meglumide</td>
			<td>MSD</td>
			<td>Q-0273-035</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass slides 75 mm x 25 mm</td>
			<td>Corning</td>
			<td>101081022</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hematoxylin</td>
			<td>Merck</td>
			<td>H9627</td>
			<td>CAS 571-28-2</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hydrochloric acid 37%</td>
			<td>Merck</td>
			<td>339253</td>
			<td>CAS 7647-01-0</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ketamine</td>
			<td>Pisa agropecuaria</td>
			<td>Q-7833-028</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Light microscopy</td>
			<td>Nikon</td>
			<td>Microphoto-FXA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microtainer yellow cape</td>
			<td>Beckton Dickinson</td>
			<td>365967</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microtome</td>
			<td>Leica</td>
			<td>RM2125</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Model animal: Wistar rats</td>
			<td>Universidad Nacional Aut&#243;noma de M&#233;xico</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nylon 3-0 (Dermalon)</td>
			<td>Covidien</td>
			<td>1750-41</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Polypropylene 7-0</td>
			<td>Atramat</td>
			<td>SE867/2-60</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Povidone-iodine10% cutaneous solution</td>
			<td>Diafra SA de CV</td>
			<td>1.37E+86</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scaning electronic microscopy</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td>DSM-950</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium hydroxide, pellets</td>
			<td>J. T. Baker</td>
			<td>3722-01</td>
			<td>CAS 1310-73-2</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Software ACT-1</td>
			<td>Nikon</td>
			<td>Ver 2.70</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stereoscopy macroscopy</td>
			<td>Leica</td>
			<td>EZ4Stereo 8X-35X</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterrad 100S</td>
			<td>Johnson and Johnson</td>
			<td>99970</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgipath paraplast</td>
			<td>Leica</td>
			<td>39601006</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Synringe of 1 mL with needle (27G x 13 mm)</td>
			<td>SensiMedical</td>
			<td>LAN-078-077</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue Processor (Histokinette)</td>
			<td>Leica</td>
			<td>TP1020</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue-Tek TEC 5 (Tissue embedder)</td>
			<td>Sakura Finetek USA</td>
			<td>5229</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trichrome stain kit</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>HT15</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Unicell DxC600 Analyzer</td>
			<td>Beckman Coulter</td>
			<td>BC 200-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Xylazine</td>
			<td>Pisa agropecuaria</td>
			<td>Q-7833-099</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Xylene</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>534056</td>
			<td>CAS 1330-20-7</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

three-dimensional collagen matrix scaffold implantation as a liver regeneration strategy

Leversykdommer er den ledende dødsårsaken over hele verden. Overdreven alkoholforbruk, et fettrikt kosthold og hepatitt C-virusinfeksjon fremmer fibrose, skrumplever og/eller hepatocellulært karsinom. Levertransplantasjon er den klinisk anbefalte prosedyren for å forbedre og forlenge levetiden til pasienter i avanserte sykdomsstadier. Imidlertid er bare 10% av transplantasjonene vellykkede, med organtilgjengelighet, presurgiske og postsurgiske prosedyrer, og forhøyede kostnader direkte korrelert med det resultatet. Ekstracellulære matriser (ECM) stillaser har dukket opp som et alternativ for vevsrestaurering. Biokompatibilitet og graft aksept er de viktigste fordelaktige egenskapene til disse biomaterialer. Selv om kapasiteten til å gjenopprette størrelsen og riktig funksjon av leveren har blitt evaluert i leveren hepatectomy modeller, bruk av stillaser eller en slags støtte for å erstatte volumet av ekstirpated levermasse er ikke vurdert.
Delvis hepatektomi ble utført i en rottelever med xenoimplantasjon av et kollagenmatrise stillas (CMS) fra en bovin kondyle. Venstre leverlobervev ble fjernet (ca. 40%), og en lik andel cms ble kirurgisk implantert. Leverfunksjonstester ble evaluert før og etter den kirurgiske prosedyren. Etter dag 3, 14 og 21 ble dyrene euthanized, og makroskopiske og histologiske evalueringer ble utført. På dag 3 og 14 ble fettvev observert rundt CMS, uten klinisk bevis på avvisning eller infeksjon, som det var kar neoformasjon og CMS-reabsorpsjon på dag 21. Det var histologiske bevis på en ubetydelig betennelsesprosess og migrasjon av tilstøtende celler til CMS, observert med hematoksylin og eosin (H&E) og Massons trichrome farging. CMS ble vist å fungere godt i levervev og kan være et nyttig alternativ for å studere vevregenerering og reparasjon i kroniske leversykdommer.

Bendemineralisering påvirker cms mekaniske egenskaper uten å endre den opprinnelige formen eller sammenkoblingen av porene. CMS kan ha hvilken som helst form, og kan derfor justeres til størrelsen og formen på det valgte organet eller vevet19. I den nåværende protokollen brukte vi et trekantet CMS (Figur 1A-D). En rottemodell ble brukt til å evaluere den regenerative kapasiteten til CMS xenoimplant i leveren. ...

Watch this Scientific Journal Video about Three-Dimensional Collagen Matrix Scaffold Implantation as a Liver Regeneration Strategy at JoVE.com

Three-Dimensional Collagen Matrix Scaffold Implantation as a Liver Regeneration Strategy

Leversykdommer er indusert av mange årsaker som fremmer fibrose eller skrumplever. Transplantasjon er det eneste alternativet for å gjenopprette helse. Men gitt knappheten på transplanterbare organer, må alternativer utforskes. Vår forskning foreslår implantasjon av kollagen stillaser i levervev fra en dyremodell.

Tredimensjonal kollagen matrise stillas implantasjon som en lever regenerering strategi

Liver diseases are the leading cause of death worldwide. Excessive alcohol consumption, a high-fat diet, and hepatitis C virus infection promote fibrosis, ...

Denne metoden innebærer å plassere et implantat av kollagenmatrise som stillas i leveren for å fremme leverregenerering. Denne implantasjonsmetoden har åpnet døren for en strateg som utforsker restaureringen av formen og ballongen til det resekterte vevet, og dermed reduserer anestesi, kirurgisk varighet og gjenopprettingstid. Denne metoden kan brukes til å fremme regenerering som involverer modeller av leverfibrose, så vel som andre pattedyrarter.Denne metoden er basert på vevsteknikk og regenerativ medisin for å fremme restaurering av skadet vev. Begynn med å desinfisere arbeidsbordet for kirurgisk område, mikroskopet for mikrokirurgi og sete med en 2% klorhexidinløsning, og hydrer deretter det kollagenmatrise stillaset oppnådd fra en storfekondyle i steril saltløsning i 20 minutter. Deretter, ved hjelp av kirurgisk såpe og et dobbeltkantet blad, barberer bukhuden til en bedøvet seks til åtte uker gammel mannlig Wistar-rotte, og desinfiserer deretter huden tre ganger ved hjelp av en 10% povidon jodoppløsning.Plasser dyret på en varm tallerken i decubitus dorsal posisjon med nakken hypereksponert for å opprettholde en gjennomtrengelig luftvei. Evaluer dybden av anestesi gjennom åndedrettsmønsteret og tap av abstinensrefleks i lemmer. Plasser deretter en engangs kirurgisk gardin rundt den barberte huden og bruk xiphoid-prosessen som referansepunkt, gjør et 2,5 centimeter snitt på alpislinjen med disseksjons tang, og pass på å unngå mageveggen blodkar for å forhindre blødning.Etter å ha plassert abdominal retractor, observere bukhulen. Bruk disseksjons tang, trekk ut venstre leverlobe og legg den på metallplaten. Bruk en steril en etter en centimeter trekantet metallisk mal, utfør en hepatektomi.For å forhindre blødning av leveren, opprettholde kirurgisk kompresjon med en vattpinne på kanten av leveren i fem minutter. Deretter, ved hjelp av 7-O ikke-absorberbare polypropylen suturer, implantere hydrert kollagen matrise stillas i hepatectomy området med fire masker mellom leveren vev og stillaset for å hindre forskyvning av biomaterialet. Returner leveren til bukhulen og suturer bukveggen og huden med en 3-O nylon sutur.Rengjør det kirurgiske snittet to ganger med en kirurgisk jod-gjennomvåt svamp og overvåk dyrets vitale tegn. Plasser deretter dyret i lateral decubitus posisjon. Etter administrering av smertestillende midler, plasser dyret i en individuell polykarbonatboks med laboratoriedyr sengetøy i et støyfritt område med temperaturkontroll.Vær oppmerksom på utvinningen fra anestesi og overvåk vann- og matforbruket i to timer. Det var ingen forskjell i leverfunksjonen mellom SHAM-gruppen og de eksperimentelle gruppene med og uten kollagenmatrise stillas på tre, 14 og 21 dager, noe som indikerer at kollagenmatrisens stillas ikke forstyrrer leverfunksjonen. Histologisk analyse på dag tre viser at tilstedeværelsen av kollagenmatrisens stillas i leveren ikke fremmet en fremmedlegemereaksjon og den iøynefallende tilstedeværelsen av slapp bindevev observeres.På dag 14 og 21 er det slappe bindevevet mer rikelig med kollagenmatrisens stillas trabeculae omgitt av hepatocytter som tyder på at hepatocytter har migrert til kollagenmatrisens stillas. Områder av hepatocytter vannet av et fartøy kan ses, og hepatocyttene som holder seg til kollagenmatrisen stillas trabeculae er noen ganger omgitt av slapp bindevev. Mens du utfører hepatektomi, bruk aseptisk teknikk for å unngå infeksjon og bruke kompresjon etterpå for å forhindre blødning fra leveren.Bruk også 7-O suturer for implantasjon av kollagenmatrise stillas for å unngå riving. Etter implantasjon av kollagenmatrisens stillas i en fibrotisk dyremodell, kan fordelene ved sinogen implantasjon for leverregenerering evalueres. Bruken av kollagenmatrise stillas for å erstatte leveren extubated masse har ikke blitt evaluert før nå.Disse genogene materialene baner vei som et annet terapeutisk alternativ innen kroniske leversykdommer.

Research

JoVE Journal

Medicine

A Strategy to Identify de Novo Mutations in Common Disorders such as Autism and Schizophrenia

There are several lines of evidence supporting the role of de novo mutations as a mechanism for common disorders, such as autism and schizophrenia. First, ...

Heterotypic Three-dimensional In Vitro Modeling of Stromal-Epithelial Interactions During Ovarian Cancer Initiation and Progression

Heterotypic Three-dimensional In Vitro Modeling of Stromal-Epithelial Interactions During Ovarian Cancer Initiation and Progression

Heterotypic Tredimensjonal<em&gt; In Vitro</em&gt; Modellering av stromal-Epiteliale interaksjoner Ovarian Cancer initiering og progresjon

Epithelial ovarian cancers (EOCs) are the leading cause of death from gynecological malignancy in Western societies. Despite advances in surgical ...

Human Neuroendocrine Tumor Cell Lines as a Three-Dimensional Model for the Study of Human Neuroendocrine Tumor Therapy

Menneskelige Nevroendokrine tumorcellelinjer som en tredimensjonal modell for studiet av menneskelig nevroendokrin svulst Therapy

Neuroendocrine tumors (NETs) are rare tumors, with an incidence of two per 100,&#x200A;000 individuals per year, and they account for 0.5% of all human ...

Quantification of Breast Cancer Cell Invasiveness Using a Three-dimensional (3D) Model

Quantification of Breast Cancer Cell Invasiveness Using a Three-dimensional 3D Model

Kvantifisering av Breast Cancer Cell Invasivitet Ved hjelp av en tredimensjonal (3D) modell

It is now well known that the cellular and tissue microenvironment are critical regulators influencing tumor initiation and progression. Moreover, the ...

Isolated Hepatic Perfusion as a Treatment for Liver Metastases of Uveal Melanoma

Isolert Lever Perfusjons som en behandling for levermetastaser av Uveal Melanom

Isolated hepatic perfusion (IHP) is a procedure where the liver is surgically isolated and perfused with a high concentration of the chemotherapeutic ...

Three-Dimensional (3D) Tumor Spheroid Invasion Assay

Three-Dimensional 3D Tumor Spheroid Invasion Assay

Tredimensjonale (3D) Tumor Spheroid invasjonen analysen

Invasion of surrounding normal tissues is generally considered to be a key hallmark of malignant (as opposed to benign) tumors. For some cancers in ...

Three-dimensional Alginate-bead Culture of Human Pituitary Adenoma Cells

Tredimensjonal Alginat-perle Culture of Human hypofyseadenom Cells

A three-dimensional culture method is described in which primary pituitary adenoma cells are grown in alginate beads. Alginate is a polymer derived from ...

Method of Direct Segmental Intra-hepatic Delivery Using a Rat Liver Hilar Clamp Model

Metode for direkte Segmental Intra-lever Levering Ved hjelp av en rottelever hilar Clamp Model

Major hepatic surgery with inflow occlusion, and liver transplantation, necessitate a period of warm ischemia, and a period of reperfusion leading to ...

Three-Dimensional Printing of a Complex Aortic Anomaly

Tredimensjonale utskrift av en kompleks aorta anomali

Complex congenital aortic anomalies include diverse types of malformations that may be clinically asymptomatic or present with respiratory or esophageal ...

Three-Dimensional Printing Guide Template Assisted Percutaneous Vertebroplasty (PVP)

Three-Dimensional Printing Guide Template Assisted Percutaneous Vertebroplasty PVP

Tredimensjonal utskrift guide mal assistert perkutan Vertebroplasty (PVP)

Percutaneous vertebroplasty (PVP) is considered an effective treatment for the back pain caused by osteoporotic vertebral compression fracture. The ...