Name: three-dimensional collagen matrix scaffold implantation as a liver regeneration strategy
Uploaded: 2021-06-29T14:15:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Three-Dimensional Collagen Matrix Scaffold Implantation as a Liver Regeneration Strategy at JoVE.com

Författarna vill tacka personalen vid laboratoriedjursanläggningen vid enheten för experimentell medicin, sjuksköterska Carolina Baños G. för tekniskt och kirurgiskt stöd, Marco E. Gudiño Z. för stöd i mikrofotografier och Erick Apo för stöd i lever histologi. Det nationella rådet stödde denna forskning för vetenskap och teknik(CONACyT),bidragsnummer SALUD-2016-272579 och PAPIIT-UNAM TA200515.

Den aktuella forskningen godkändes av etikkommittén vid School of Medicine (DI/115/2015) vid Universidad Nacional Autónoma de México (UNAM) och etikkommittén för Hospital General de Mexico (CI/314/15). Institutionen uppfyller alla tekniska specifikationer för produktion, vård och användning av försöksdjur och är lagligt certifierad enligt nationell lagstiftning (NOM-062-ZOO-1999). Hanråttor från Hanen som väger 150-250 g (6-8 veckor) erhölls från Laboratoriedjuranläggningen vid School of Medicine, UNAM,...

<ol>
	<li>Li, N., Hua, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immune+cells+in+liver+regeneration.">Immune cells in liver regeneration.</a> Oncotarget. 8 (2), 3628-3639 (2017).</li><li>Langer, R., Vacanti, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tissue+Engineering.">Tissue Engineering.</a> Science. 260 (5110), 920-926 (1993).</li><li>Lee, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+liver+decellularized+extracellular+matrix+bioink+for+three-dimensional+cell+printing-based+liver+tissue+engineering.">Development of liver decellularized extracellular matrix bioink for three-dimensional cell printing-based liver tissue engineering.</a> Biomacromolecules. 18 (4), 1229-1237 (2017).</li><li>Shafiee, A., Atla, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tissue+engineering:+Toward+a+new+era+of+medicine.">Tissue engineering: Toward a new era of medicine.</a> Annual Review of Medicine. 68, 29-40 (2017).</li><li>Hu, C., Zhao, L., Wu, Z., Li, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transplantation+of+mesenchymal+stem+cells+and+their+derivatives+effectively+promotes+liver+regeneration+to+attenuate+acetaminophen-induced+liver+injury.">Transplantation of mesenchymal stem cells and their derivatives effectively promotes liver regeneration to attenuate acetaminophen-induced liver injury.</a> Stem Cell Research &amp; Therapy. 11 (1), 88 (2020).</li><li>Sancho-Bru, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Therapeutic+possibilities+of+stem+cells+in+the+treatment+of+liver+diseases.">Therapeutic possibilities of stem cells in the treatment of liver diseases.</a> Gastroenterologia y Hepatologia. 34 (10), 701-710 (2011).</li><li>Kobolak, J., Dinnyes, A., Memic, A., Khademhosseini, A., Mobasheri, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mesenchymal+stem+cells:+Identification,+phenotypic+characterization,+biological+properties+and+potential+for+regenerative+medicine+through+biomaterial+micro-engineering+of+their+niche.">Mesenchymal stem cells: Identification, phenotypic characterization, biological properties and potential for regenerative medicine through biomaterial micro-engineering of their niche.</a> Methods. 99, 62-68 (2016).</li><li>Freedman, B. R., Mooney, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biomaterials+to+mimic+and+heal+connective+tissues.">Biomaterials to mimic and heal connective tissues.</a> Advanced Materials. 31 (19), 1806695 (2019).</li><li>Meyer, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Processing+of+collagen+based+biomaterials+and+the+resulting+materials+properties.">Processing of collagen based biomaterials and the resulting materials properties.</a> Biomedical Engineering Online. 18 (1), 24 (2019).</li><li>El Baz, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transplant+of+hepatocytes,+undifferentiated+mesenchymal+stem+cells,+and+in+vitro+hepatocyte-differentiated+mesenchymal+stem+cells+in+a+chronic+lver+failure+experimental+model:+a+comparative+study.">Transplant of hepatocytes, undifferentiated mesenchymal stem cells, and in vitro hepatocyte-differentiated mesenchymal stem cells in a chronic lver failure experimental model: a comparative study.</a> Experimental and Clinical Transplantation. 16 (1), 81-89 (2018).</li><li>Nedjari, S., Awaja, F., Guarino, R., Gugutkov, D., Altankov, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Establishing+multiple+osteogenic+differentiation+pathways+of+mesenchymal+stem+cells+through+different+scaffold+configurations.">Establishing multiple osteogenic differentiation pathways of mesenchymal stem cells through different scaffold configurations.</a> Journal of Tissue Engineering and Regenerative Medicine. 14 (10), 1428-1437 (2020).</li><li>Chan, E. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Three+dimensional+collagen+scaffold+promotes+intrinsic+vascularisation+for+tissue+engineering+applications.">Three dimensional collagen scaffold promotes intrinsic vascularisation for tissue engineering applications.</a> PLoS One. 11 (2), 0149799 (2016).</li><li>Arenas-Herrera, J. E., Ko, I. K., Atala, A., Yoo, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Decellularization+for+whole+organ+bioengineering.">Decellularization for whole organ bioengineering.</a> Biomedical Materials. 8 (1), 014106 (2013).</li><li>Parmaksiz, M., Dogan, A., Odabas, S., El&#231;in, A. E., El&#231;in, Y. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Clinical+applications+of+decellularized+extracellular+matrices+for+tissue+engineering+and+regenerative+medicine.">Clinical applications of decellularized extracellular matrices for tissue engineering and regenerative medicine.</a> Biomedical Materials. 11 (2), 022003 (2016).</li><li>Gacek, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stereo+microscope,+neglected+tool.">Stereo microscope, neglected tool.</a> Postepy Biochemii. 63 (1), 68-73 (2017).</li><li>Oldham, S., Rivera, C., Boland, M. L., Trevaskis, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Incorporation+of+a+survivable+liver+biopsy+procedure+in+mice+to+assess+non-alcoholic+steatohepatitis+(NASH)+resolution.">Incorporation of a survivable liver biopsy procedure in mice to assess non-alcoholic steatohepatitis (NASH) resolution.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (146), e59130 (2019).</li><li>The University of Texas at Austin Institutional Animal Care and Use Committee. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Guidelines for the Use of Chemical Depilatory Agents on Laboratory Animals. , (2021).</li><li>Sivridis, L., Kotini, A., Anninos, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+process+of+learning+in+neural+net+models+with+Poisson+and+Gauss+connectivities.">The process of learning in neural net models with Poisson and Gauss connectivities.</a> Neural Networks. 21 (1), 28-35 (2008).</li><li>Le&#243;n-Mancilla, B. H., Araiza-T&#233;llez, M. A., Flores-Flores, J. O., Pi&#241;a-Barba, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Physico-chemical+characterization+of+collagen+scaffolds+for+tissue+engineering.">Physico-chemical characterization of collagen scaffolds for tissue engineering.</a> Journal of Applied Research and Technology. 14 (1), 77-85 (2016).</li><li>Le&#243;n, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hematological+and+biochemical+parameters+in+Sprague+Dawley+laboratory+rats+breed+in+CENPALAB,+Cenp:SPRD.">Hematological and biochemical parameters in Sprague Dawley laboratory rats breed in CENPALAB, Cenp:SPRD.</a> Revista Electronica de Veterinaria. 12, 1-10 (2011).</li><li>Tsuchiya, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mesenchymal+stem+cell+therapies+for+liver+cirrhosis:+MSCs+as+"conducting+cells"+for+improvement+of+liver+fibrosis+and+regeneration.">Mesenchymal stem cell therapies for liver cirrhosis: MSCs as "conducting cells" for improvement of liver fibrosis and regeneration.</a> Inflammation and Regeneration. 39, 18 (2019).</li><li>Badylak, S. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+extracellular+matrix+as+a+biologic+scaffold+material.">The extracellular matrix as a biologic scaffold material.</a> Biomaterials. 28, 3587-3593 (2007).</li><li>Acevedo, G. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Xenoimplante+de+col&#225;gena+en+uretra+de+perro.">Xenoimplante de col&#225;gena en uretra de perro.</a> Universidad Nacional Aut&#243;noma de M&#233;xico. , (2011).</li><li>Montalvo-Jave, E. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Absorbable+bioprosthesis+for+the+treatment+of+bile+duct+injury+in+an+experimental+model.">Absorbable bioprosthesis for the treatment of bile duct injury in an experimental model.</a> International Journal of Surgery. 20, 163-169 (2015).</li></ol>

Organtransplantation är stöttepelaren för behandling hos patienter med leverfibros eller cirros. Några patienter drar nytta av denna procedur, vilket gör det nödvändigt att tillhandahålla terapeutiska alternativ för patienter på väntelistan. Vävnadsteknik är en lovande strategi som använder byggnadsställningar och celler med regenerativ potential2,4,13. Avlägsnandet av en del av levern är ett kritiskt steg i det...

Levern är ett av de viktigaste organen som är involverade i att upprätthålla homeostas och proteinproduktion1. Tyvärr är leversjukdom den främsta dödsorsaken i världen. I avancerade stadier av leverskador, som inkluderar cirros och hepatocellulär carcinom, är levertransplantation det kliniskt rekommenderade förfarandet. Men på grund av bristen på donatorer och den låga andelen framgångsrika transplantationer har nya tekniker inom vävnadsteknik (TE) och regenerativ medicin (RM) utvecklats2,3.
TE innebär användning av stamceller, byggnadsställningar och tillväxtfaktorer4 för att främja restaurering av inflammerade, fibrotiska och edematösa organ och vävnader1,5,6. De biomaterial som används i byggnadsställningar efterliknar den inhemska ECM, vilket ger de fysiska, kemiska och biologiska ledtrådarna för guidad cellulär ombyggnad7. Kollagen är ett av de mest rikliga proteinerna som erhålls från dermis, sena, tarm och perikardium8,9. Dessutom kan kollagen erhållas som biopolymer för att producera två- och tredimensionella byggnadsställningar genom bioprinting eller elektrospinning10,11. Denna grupp är den första att rapportera användningen av kollagen från en benkälla för regenerering av levervävnad. En annan studie rapporterar användningen av byggnadsställningar syntetiserade från nötkreatur kollagen, som erhölls från huden, med homogena och nära belägna porer, utan någon kommunikation mellan dem12.
Decellularisering bevarar den ursprungliga ECM, vilket möjliggör efterföljande införlivande av celler med stamcellspotential13,14. Denna procedur är dock fortfarande i experimentfasen i lever, hjärta, njure, tunntarmen och urinblåsan från möss, råttor, kaniner, grisar, får, nötkreatur och hästar3,14. För närvarande ersätts inte den resected levermassavolymen i någon av djur hepatectomy-modellerna. Användning av ytterligare stöd eller nätverk (biomaterial) som möjliggör cellproliferation och angiogenes kan dock vara avgörande för snabb restaurering av lever parenkymal funktioner. Således kan byggnadsställningar användas som alternativa metoder för att regenerera eller reparera vävnad i kroniska leversjukdomar, vilket i sin tur eliminerar begränsningar på grund av donation och de kliniska komplikationerna av levertransplantation.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Anionic detergent</td>
			<td>Alconox</td>
			<td>Z273228</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Biopsy cassettes</td>
			<td>Leica</td>
			<td>3802453</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Camera DMX</td>
			<td>Nikon</td>
			<td>DXM1200F</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Centrifuge</td>
			<td>Eppendorf</td>
			<td>5424</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chlorhexidine gluconate 4%</td>
			<td>BD</td>
			<td>372412</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cover glasses 25 mm x 40 mm</td>
			<td>Corning</td>
			<td>2980-224</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Eosin</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>200-M</td>
			<td>CAS 17372-87-1</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethyl alcohol, pure</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>459836</td>
			<td>CAS 64-17-5</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Flunixine meglumide</td>
			<td>MSD</td>
			<td>Q-0273-035</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass slides 75 mm x 25 mm</td>
			<td>Corning</td>
			<td>101081022</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hematoxylin</td>
			<td>Merck</td>
			<td>H9627</td>
			<td>CAS 571-28-2</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hydrochloric acid 37%</td>
			<td>Merck</td>
			<td>339253</td>
			<td>CAS 7647-01-0</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ketamine</td>
			<td>Pisa agropecuaria</td>
			<td>Q-7833-028</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Light microscopy</td>
			<td>Nikon</td>
			<td>Microphoto-FXA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microtainer yellow cape</td>
			<td>Beckton Dickinson</td>
			<td>365967</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microtome</td>
			<td>Leica</td>
			<td>RM2125</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Model animal: Wistar rats</td>
			<td>Universidad Nacional Aut&#243;noma de M&#233;xico</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nylon 3-0 (Dermalon)</td>
			<td>Covidien</td>
			<td>1750-41</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Polypropylene 7-0</td>
			<td>Atramat</td>
			<td>SE867/2-60</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Povidone-iodine10% cutaneous solution</td>
			<td>Diafra SA de CV</td>
			<td>1.37E+86</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scaning electronic microscopy</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td>DSM-950</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium hydroxide, pellets</td>
			<td>J. T. Baker</td>
			<td>3722-01</td>
			<td>CAS 1310-73-2</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Software ACT-1</td>
			<td>Nikon</td>
			<td>Ver 2.70</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stereoscopy macroscopy</td>
			<td>Leica</td>
			<td>EZ4Stereo 8X-35X</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterrad 100S</td>
			<td>Johnson and Johnson</td>
			<td>99970</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgipath paraplast</td>
			<td>Leica</td>
			<td>39601006</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Synringe of 1 mL with needle (27G x 13 mm)</td>
			<td>SensiMedical</td>
			<td>LAN-078-077</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue Processor (Histokinette)</td>
			<td>Leica</td>
			<td>TP1020</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue-Tek TEC 5 (Tissue embedder)</td>
			<td>Sakura Finetek USA</td>
			<td>5229</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trichrome stain kit</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>HT15</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Unicell DxC600 Analyzer</td>
			<td>Beckman Coulter</td>
			<td>BC 200-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Xylazine</td>
			<td>Pisa agropecuaria</td>
			<td>Q-7833-099</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Xylene</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>534056</td>
			<td>CAS 1330-20-7</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

three-dimensional collagen matrix scaffold implantation as a liver regeneration strategy

Leversjukdomar är den främsta dödsorsaken i världen. Överdriven alkoholkonsumtion, en fettrik kost och hepatit C virusinfektion främjar fibros, cirros och/eller hepatocellulärt carcinom. Levertransplantation är det kliniskt rekommenderade förfarandet för att förbättra och förlänga livslängden för patienter i avancerade sjukdomsstadier. Endast 10% av transplantationerna är dock framgångsrika, med organtillgänglighet, presurgical och postsurgical förfaranden och förhöjda kostnader direkt korrelerade med det resultatet. Extracellulär matris (ECM) byggnadsställningar har dykt upp som ett alternativ för vävnad restaurering. Biokompatibilitet och ympningsacceptans är de viktigaste fördelaktiga egenskaperna hos dessa biomaterial. Även om förmågan att återställa storleken och korrekt funktion av levern har utvärderats i lever hepatectomy modeller, har användningen av byggnadsställningar eller någon form av stöd för att ersätta volymen av extirpated lever massa inte bedömts.
Partiell hepatectomy utfördes i en råtta lever med xenoimplantation av en kollagen matris byggnadsställning (CMS) från en bovin condyle. Vänster leverlob vävnad togs bort (cirka 40%), och en lika stor andel av CMS implanterades kirurgiskt. Lever funktion tester utvärderades före och efter kirurgiska ingreppet. Efter dagar 3, 14 och 21 avlivades djuren och makroskopiska och histologic utvärderingar utfördes. På dag 3 och 14 observerades fettvävnad runt CMS, utan kliniska tecken på avstötning eller infektion, liksom kärl neoformation och CMS reabsorption dag 21. det fanns histologic bevis på en obetydlig inflammation process och migration av intilliggande celler till CMS, observerade med hematoxylin och eosin (H&E) och Massons trichrome färgning. CMS visade sig fungera bra i levervävnad och kan vara ett användbart alternativ för att studera vävnadsregenerering och reparation i kroniska leversjukdomar.

Benavmineralisering påverkar cms mekaniska egenskaper utan att ändra den ursprungliga formen eller sammankopplingen av dess porer. CMS kan ha vilken form som helst och kan därför justeras till storleken och formen på det valda organet eller vävnaden19. I det här protokollet använde vi ett triangulärt CMS (figur 1A-D). En råtta modell användes för att utvärdera den regenerativa kapaciteten av CMS xenoimpl...

Watch this Scientific Journal Video about Three-Dimensional Collagen Matrix Scaffold Implantation as a Liver Regeneration Strategy at JoVE.com

Three-Dimensional Collagen Matrix Scaffold Implantation as a Liver Regeneration Strategy

Leversjukdomar framkallas av många orsaker som främjar fibros eller cirros. Transplantation är det enda alternativet för att återställa hälsan. Med tanke på bristen på transplanterbara organ måste dock alternativ undersökas. Vår forskning föreslår implantation av kollagenställningar i levervävnad från en djurmodell.

Tredimensionell kollagenmatris byggnadsställning implantation som en leverregenereringsstrategi

Liver diseases are the leading cause of death worldwide. Excessive alcohol consumption, a high-fat diet, and hepatitis C virus infection promote fibrosis, ...

Denna metod innebär att placera ett implantat av kollagen matris som en ställning i levern för att främja leverregenerering. Denna implantationsmetod har öppnat dörren för en strateg som utforskar restaureringen av formen och ballongen hos de resected vävnaderna, vilket minskar anestesi, kirurgisk varaktighet och återhämtningstid. Denna metod kan användas för att främja regenerering som involverar modeller av leverfibros, liksom andra däggdjursarter.Denna metod är baserad på vävnadsteknik och regenerativ medicin för att främja restaurering av skadad vävnad. Börja med att sanera operationsområdets arbetsbord, mikrokirurgimikroskop och sittplats med en 2% klorhexidinlösning och hydrera sedan kollagenmatrisställningen som erhållits från en bovin condyle i steril saltlösning i 20 minuter. Därefter, med kirurgisk tvål och ett dubbelkantat blad, raka bukhuden hos en bedövad sex till åtta veckor gammal manlig Wistar-råtta och desinficera sedan huden tre gånger med en 10% povidone jodlösning.Placera djuret på en varm tallrik i decilubitus dorsala position med nacken hyperextended för att upprätthålla en genomsläpplig luftväg. Utvärdera djupet av anestesi genom andningsmönstret och förlust av abstinensreflex i benen. Placera sedan ett engångskirurgiskt draperi runt den rakade huden och använd xiphoidprocessen som referenspunkt, gör ett 2,5 centimeter snitt på alpislinjen med dissekeringstång, var noga med att undvika bukväggens blodkärl för att förhindra blödning.Observera bukhålan efter placering av bukupprullningen. Använd dissekeringstången, extrahera den vänstra leverloben och placera den på metallplattan. Använd en steril en efter en efter en centimeter triangulär metallmall, utför en hepatectomy.För att förhindra blödning i levern, behåll kirurgisk komprimering med en bomullspinne på kanten av levern i fem minuter. Därefter, med hjälp av 7-O icke-absorberbara polypropylen suturer, implantera den hydratiserade kollagen matris byggnadsställningen i hepatectomy platsen med fyra stygn mellan levervävnaden och ställningen för att förhindra förskjutning av biomaterialet. Sätt tillbaka levern i bukhålan och suturera bukväggen och huden med en 3-O nylon sutur.Rengör det kirurgiska snittet två gånger med en kirurgisk jodddränkt svamp och övervaka djurets vitala tecken. Placera sedan djuret i lateral decubitus-position. Efter administrering av ett smärtstillande medel, placera djuret i en individuell polykarbonatlåda med laboratoriedjurssängkläder i ett ljudfritt område med temperaturkontroll.Observera återhämtningen från anestesi och övervaka vatten- och matkonsumtionen i två timmar. Det fanns ingen skillnad i leverfunktionen mellan SHAM-gruppen och de experimentella grupperna med och utan kollagenmatrisens ställning vid tre, 14 och 21 dagar, vilket indikerar att kollagenmatrisställningen inte stör leverfunktionen. Histologisk analys på dag tre visar att förekomsten av kollagen matris byggnadsställning i levern inte främja en främmande kroppsreaktion och den iögonfallande förekomsten av slapp bindväv observeras.På dag 14 och 21 är den slappa bindväven rikligare med kollagen matrisen ställning trabeculae omgiven av hepatocyter tyder på att hepatocyter har migrerat till kollagen matris byggnadsställning. Områden av hepatocyter bevattnade av ett kärl kan ses och hepatocyterna som följer kollagenmatrisen trabeculae är ibland omgivna av slapp bindväv. När du utför hepatektomin, använd aseptisk teknik för att undvika infektion och applicera komprimering efteråt för att förhindra blödning från levern.Använd också 7-O suturer för implantation av kollagenmatrisställningar för att undvika rivning. Efter implantation av kollagenmatrisens ställning i en fibrotisk djurmodell kan fördelarna med sinogen implantation för leverregenerering utvärderas. Användningen av kollagen matris ställning för att ersätta levern extubated massa har inte utvärderats förrän nu.Dessa genogena material banar väg som ett annat terapeutiskt alternativ inom området för kroniska leversjukdomar.

Research

JoVE Journal

Medicine

A Strategy to Identify de Novo Mutations in Common Disorders such as Autism and Schizophrenia

En strategi för att identifiera de novo mutationer i vanliga sjukdomar som autism och schizofreni

There are several lines of evidence supporting the role of de novo mutations as a mechanism for common disorders, such as autism and schizophrenia. First, ...

Heterotypic Three-dimensional In Vitro Modeling of Stromal-Epithelial Interactions During Ovarian Cancer Initiation and Progression

Heterotypic Three-dimensional In Vitro Modeling of Stromal-Epithelial Interactions During Ovarian Cancer Initiation and Progression

Heterotypisk Tredimensionell<em&gt; In Vitro</em&gt; Modellering av Stromal-Epithelial interaktioner Under äggstockscancer Inledande och progression

Epithelial ovarian cancers (EOCs) are the leading cause of death from gynecological malignancy in Western societies. Despite advances in surgical ...

Human Neuroendocrine Tumor Cell Lines as a Three-Dimensional Model for the Study of Human Neuroendocrine Tumor Therapy

Mänskliga neuroendokrin tumör cellinjer som en tredimensionell modell för studiet av mänskliga neuroendokrin tumör Therapy

Neuroendocrine tumors (NETs) are rare tumors, with an incidence of two per 100,&#x200A;000 individuals per year, and they account for 0.5% of all human ...

Quantification of Breast Cancer Cell Invasiveness Using a Three-dimensional (3D) Model

Quantification of Breast Cancer Cell Invasiveness Using a Three-dimensional 3D Model

Kvantifiering av bröstcancer Cell Invasivt hjälp av en tredimensionell (3D) Modell

It is now well known that the cellular and tissue microenvironment are critical regulators influencing tumor initiation and progression. Moreover, the ...

Isolated Hepatic Perfusion as a Treatment for Liver Metastases of Uveal Melanoma

Isolerade lever Perfusion som behandling för levermetastaser av Uveal Melanom

Isolated hepatic perfusion (IHP) is a procedure where the liver is surgically isolated and perfused with a high concentration of the chemotherapeutic ...

Three-Dimensional (3D) Tumor Spheroid Invasion Assay

Three-Dimensional 3D Tumor Spheroid Invasion Assay

Tredimensionell (3D) Tumör Spheroid invasionsanalys

Invasion of surrounding normal tissues is generally considered to be a key hallmark of malignant (as opposed to benign) tumors. For some cancers in ...

Three-dimensional Alginate-bead Culture of Human Pituitary Adenoma Cells

Tredimensionell alginat-pärla Culture of Human hypofysadenom Cells

A three-dimensional culture method is described in which primary pituitary adenoma cells are grown in alginate beads. Alginate is a polymer derived from ...

Method of Direct Segmental Intra-hepatic Delivery Using a Rat Liver Hilar Clamp Model

Metod för Direct segment Intra-lever Delivery hjälp av en råttlever hilar Clamp Modell

Major hepatic surgery with inflow occlusion, and liver transplantation, necessitate a period of warm ischemia, and a period of reperfusion leading to ...

Three-Dimensional Printing of a Complex Aortic Anomaly

Tredimensionella utskrift av en komplex aorta anomali

Complex congenital aortic anomalies include diverse types of malformations that may be clinically asymptomatic or present with respiratory or esophageal ...

Three-Dimensional Printing Guide Template Assisted Percutaneous Vertebroplasty (PVP)

Three-Dimensional Printing Guide Template Assisted Percutaneous Vertebroplasty PVP

Tredimensionell utskrift guide mall assisterad perkutan vertebroplasty (PVP)

Percutaneous vertebroplasty (PVP) is considered an effective treatment for the back pain caused by osteoporotic vertebral compression fracture. The ...