Name: targeting the corticospinal tract in neonatal rats with a double-viral vector using combined brain and spine surgery
Uploaded: 2021-06-30T13:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Targeting the Corticospinal Tract in Neonatal Rats with a Double-Viral Vector using Combined Brain and Spine Surgery at JoVE.com

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<ol>
	<li>Parent, S., Mac-Thiong, J., Roy-Beaudry, M., Sosa, J. F., Labelle, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spinal+cord+injury+in+the+pediatric+population:+A+systematic+review+of+the+literature.">Spinal cord injury in the pediatric population: A systematic review of the literature.</a> Journal of Neurotrauma. 28 (8), 1515-1524 (2011).</li><li>Vitale, M. G., Goss, J. M., Matsumoto, H., Roye, D. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epidemiology+of+pediatric+spinal+cord+injury+in+the+united+states:+Years+1997+and+2000.">Epidemiology of pediatric spinal cord injury in the united states: Years 1997 and 2000.</a> Journal of Pediatric Orthopedics. 26 (6), 745-749 (2006).</li><li>Bregman, B. S., Goldberger, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anatomical+plasticity+and+sparing+of+function+after+spinal+cord+damage+in+neonatal+cats.">Anatomical plasticity and sparing of function after spinal cord damage in neonatal cats.</a> Science. 217 (4559), 553-555 (1982).</li><li>Castro, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ipsilateral+corticospinal+projections+after+large+lesions+of+the+cerebral+hemisphere+in+neonatal+rats.">Ipsilateral corticospinal projections after large lesions of the cerebral hemisphere in neonatal rats.</a> Experimental Neurology. 46 (1), 1-8 (1975).</li><li>Commissiong, J. W., Toffano, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Complete+spinal+cord+transection+at+different+postnatal+ages:+Recovery+of+motor+coordination+correlated+with+spinal+cord+catecholamines.">Complete spinal cord transection at different postnatal ages: Recovery of motor coordination correlated with spinal cord catecholamines.</a> Experimental Brain Research. 78 (3), 597-603 (1989).</li><li>Yuan, Q., Su, H., Chiu, K., Wu, W., Lin, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Contrasting+neuropathology+and+functional+recovery+after+spinal+cord+injury+in+developing+and+adult+rats.">Contrasting neuropathology and functional recovery after spinal cord injury in developing and adult rats.</a> Neuroscience Bulletin. 29 (4), 509-516 (2013).</li><li>Kim, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Viral+transduction+of+the+neonatal+brain+delivers+controllable+genetic+mosaicism+for+visualizing+and+manipulating+neuronal+circuits+in+vivo.">Viral transduction of the neonatal brain delivers controllable genetic mosaicism for visualizing and manipulating neuronal circuits in vivo.</a> The European Journal of Neuroscience. 37 (8), 1203-1220 (2013).</li><li>Pawliuk, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Correction+of+sickle+cell+disease+in+transgenic+mouse+models+by+gene+therapy.">Correction of sickle cell disease in transgenic mouse models by gene therapy.</a> Science. 294 (5550), 2368-2371 (2001).</li><li>Atasoy, D., Sternson, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chemogenetic+tools+for+causal+cellular+and+neuronal+biology.">Chemogenetic tools for causal cellular and neuronal biology.</a> Physiological Reviews. 98 (1), 391-418 (2018).</li><li>Brandt, H. M., Apkarian, A. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biotin-dextran:+A+sensitive+anterograde+tracer+for+neuroanatomic+studies+in+rat+and+monkey.">Biotin-dextran: A sensitive anterograde tracer for neuroanatomic studies in rat and monkey.</a> Journal of Neuroscience Methods. 45 (1-2), 35-40 (1992).</li><li>Veenman, C. L., Reiner, A., Honig, M. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biotinylated+dextran+amine+as+an+anterograde+tracer+for+single-+and+double-labeling+studies.">Biotinylated dextran amine as an anterograde tracer for single- and double-labeling studies.</a> Journal of Neuroscience Methods. 41 (3), 239-254 (1992).</li><li>Reiner, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pathway+tracing+using+biotinylated+dextran+amines.">Pathway tracing using biotinylated dextran amines.</a> Journal of Neuroscience Methods. 103 (1), 23-37 (2000).</li><li>Oguchi, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Double+virus+vector+infection+to+the+prefrontal+network+of+the+macaque+brain.">Double virus vector infection to the prefrontal network of the macaque brain.</a> PloS One. 10 (7), 0132825 (2015).</li><li>Kinoshita, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetic+dissection+of+the+circuit+for+hand+dexterity+in+primates.">Genetic dissection of the circuit for hand dexterity in primates.</a> Nature. 487 (7406), 235-238 (2012).</li><li>Bernstein, D. R., Stelzner, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Plasticity+of+the+corticospinal+tract+following+midthoracic+spinal+injury+in+the+postnatal+rat.">Plasticity of the corticospinal tract following midthoracic spinal injury in the postnatal rat.</a> The Journal of Comparative Neurology. 221 (4), 382-400 (1983).</li><li>Brown, K., Wolfe, B., Wrathall, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rapid+functional+recovery+after+spinal+cord+injury+in+young+rats.">Rapid functional recovery after spinal cord injury in young rats.</a> Journal of Neurotrauma. 22, 559-574 (2005).</li><li>Tillakaratne, N. J. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Functional+recovery+of+stepping+in+rats+after+a+complete+neonatal+spinal+cord+transection+is+not+due+to+regrowth+across+the+lesion+site.">Functional recovery of stepping in rats after a complete neonatal spinal cord transection is not due to regrowth across the lesion site.</a> Neuroscience. 166 (1), 23-33 (2010).</li><li>Kartje-Tillotson, G., Neafsey, E. J., Castro, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Electrophysiological+analysis+of+motor+cortical+plasticity+after+cortical+lesions+in+newborn+rats.">Electrophysiological analysis of motor cortical plasticity after cortical lesions in newborn rats.</a> Brain Research. 332 (1), 103-111 (1985).</li><li>Gennaro, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Focal+stroke+in+the+developing+rat+motor+cortex+induces+age-+and+experience-dependent+maladaptive+plasticity+of+corticospinal+system.">Focal stroke in the developing rat motor cortex induces age- and experience-dependent maladaptive plasticity of corticospinal system.</a> Frontiers in Neural Circuits. 11, 47 (2017).</li><li>Brichta, A. M., Grant, G., Paxinos, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cytoarchitectural+organization+of+the+spinal+cord.">Cytoarchitectural organization of the spinal cord.</a> The rat nervous system. 2, 294-309 (1985).</li><li>Kjell, J., Olson, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rat+models+of+spinal+cord+injury:+From+pathology+to+potential+therapies.">Rat models of spinal cord injury: From pathology to potential therapies.</a> Disease Models &amp; Mechanisms. 9 (10), 1125-1137 (2016).</li><li>Takeoka, A., Arber, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Functional+local+proprioceptive+feedback+circuits+initiate+and+maintain+locomotor+recovery+after+spinal+cord+injury.">Functional local proprioceptive feedback circuits initiate and maintain locomotor recovery after spinal cord injury.</a> Cell Reports. 27 (1), 71-85 (2019).</li><li>Flynn, J. R., Graham, B. A., Galea, M. P., Callister, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+propriospinal+interneurons+in+recovery+from+spinal+cord+injury.">The role of propriospinal interneurons in recovery from spinal cord injury.</a> Neuropharmacology. 60 (5), 809-822 (2011).</li><li>Ohne, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanism+of+forelimb+motor+function+restoration+in+rats+with+cervical+spinal+cord+hemisection-neuroanatomical+validation.">Mechanism of forelimb motor function restoration in rats with cervical spinal cord hemisection-neuroanatomical validation.</a> IBRO Reports. 7, 10-25 (2019).</li><li>Wang, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Deconstruction+of+corticospinal+circuits+for+goal-directed+motor+skills.">Deconstruction of corticospinal circuits for goal-directed motor skills.</a> Cell. 171 (2), 440-455 (2017).</li><li>Sheikh, I. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Retrogradely+transportable+lentivirus+tracers+for+mapping+spinal+cord+locomotor+circuits.">Retrogradely transportable lentivirus tracers for mapping spinal cord locomotor circuits.</a> Frontiers in Neural Circuits. 12, 60 (2018).</li><li>Kinoshita, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetic+dissection+of+the+circuit+for+hand+dexterity+in+primates.">Genetic dissection of the circuit for hand dexterity in primates.</a> Nature. 487, 235-238 (2012).</li><li>Keefe, K. M., Junker, I. P., Sheikh, I. S., Campion, T. J., Smith, G. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Direct+injection+of+a+lentiviral+vector+highlights+multiple+motor+pathways+in+the+rat+spinal+cord.">Direct injection of a lentiviral vector highlights multiple motor pathways in the rat spinal cord.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (145), e59160 (2019).</li><li>Hutson, T. H., Verhaagen, J., Y&#225;&#241;ez-Mu&#241;oz, R. J., Moon, L. D. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Corticospinal+tract+transduction:+A+comparison+of+seven+adeno-associated+viral+vector+serotypes+and+a+non-integrating+lentiviral+vector.">Corticospinal tract transduction: A comparison of seven adeno-associated viral vector serotypes and a non-integrating lentiviral vector.</a> Gene Therapy. 19 (1), 49-60 (2012).</li><li>Liu, Y., Keefe, K., Tang, X., Lin, S., Smith, G. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Use+of+self-complementary+adeno-associated+virus+serotype+2+as+a+tracer+for+labeling+axons:+Implications+for+axon+regeneration.">Use of self-complementary adeno-associated virus serotype 2 as a tracer for labeling axons: Implications for axon regeneration.</a> Plos One. 9 (2), 87447 (2014).</li><li>Tervo, D. G. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+designer+AAV+variant+permits+efficient+retrograde+access+to+projection+neurons.">A designer AAV variant permits efficient retrograde access to projection neurons.</a> Neuron. 92 (2), 372-382 (2016).</li><li>Abdellatif, A. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=delivery+to+the+spinal+cord:+Comparison+between+lentiviral,+adenoviral,+and+retroviral+vector+delivery+systems.">delivery to the spinal cord: Comparison between lentiviral, adenoviral, and retroviral vector delivery systems.</a> Journal of Neuroscience Research. 84 (3), 553-567 (2006).</li><li>Zingg, B., Peng, B., Huang, J., Tao, H. W., Zhang, L. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Synaptic+specificity+and+application+of+anterograde+transsynaptic+AAV+for+probing+neural+circuitry.">Synaptic specificity and application of anterograde transsynaptic AAV for probing neural circuitry.</a> The Journal of Neuroscience. 40 (16), 3250-3267 (2020).</li><li>Armbruster, B. N., Li, X., Pausch, M. H., Herlitze, S., Roth, B. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evolving+the+lock+to+fit+the+key+to+create+a+family+of+G+protein-coupled+receptors+potently+activated+by+an+inert+ligand.">Evolving the lock to fit the key to create a family of G protein-coupled receptors potently activated by an inert ligand.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 104 (12), 5163-5168 (2007).</li><li>Roth, B. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=DREADDs+for+neuroscientists.">DREADDs for neuroscientists.</a> Neuron. 89 (4), 683-694 (2016).</li><li>Hasegawa, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanism+of+forelimb+motor+function+restoration+after+cervical+spinal+cord+hemisection+in+rats:+A+comparison+of+juveniles+and+adults.">Mechanism of forelimb motor function restoration after cervical spinal cord hemisection in rats: A comparison of juveniles and adults.</a> Behavioural Neurology. 2016, 1035473 (2016).</li><li>Alstermark, B., Isa, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Circuits+for+skilled+reaching+and+grasping.">Circuits for skilled reaching and grasping.</a> Annual Review of Neuroscience. 35, 559-578 (2012).</li><li>Garc&#237;a-Al&#237;as, G., Truong, K., Shah, P. K., Roy, R. R., Edgerton, V. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Plasticity+of+subcortical+pathways+promote+recovery+of+skilled+hand+function+in+rats+after+corticospinal+and+rubrospinal+tract+injuries.">Plasticity of subcortical pathways promote recovery of skilled hand function in rats after corticospinal and rubrospinal tract injuries.</a> Experimental Neurology. 266, 112-119 (2015).</li><li>Tohyama, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Contribution+of+propriospinal+neurons+to+recovery+of+hand+dexterity+after+corticospinal+tract+lesions+in+monkeys.">Contribution of propriospinal neurons to recovery of hand dexterity after corticospinal tract lesions in monkeys.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 114 (3), 604-609 (2017).</li><li>Z'Graggen, W. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Compensatory+sprouting+and+impulse+rerouting+after+unilateral+pyramidal+tract+lesion.">Compensatory sprouting and impulse rerouting after unilateral pyramidal tract lesion.</a> Journal of Neuroscience. 20 (17), 6561-6569 (2000).</li><li>Ueno, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Corticospinal+circuits+from+the+sensory+and+motor+cortices+differentially+regulate+skilled+movements+through+distinct+spinal+interneurons.">Corticospinal circuits from the sensory and motor cortices differentially regulate skilled movements through distinct spinal interneurons.</a> Cell Reports. 23 (5), 1286-1300 (2018).</li><li>Kim, J., Grunke, S. D., Levites, Y., Golde, T. E., Jankowsky, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intracerebroventricular+viral+injection+of+the+neonatal+mouse+brain+for+persistent+and+widespread+neuronal+transduction.">Intracerebroventricular viral injection of the neonatal mouse brain for persistent and widespread neuronal transduction.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (91), e51863 (2014).</li></ol>

इंजेक्टेबल केमोजेनेटिक संशोधक के साथ मस्तिष्क गतिविधि का इंड्यूसेबल जेनेटिक मॉड्यूलेशन एससीआई से वसूली को रेखांकित करने वाले विभिन्न तंत्रों का अध्ययन करने में एक शक्तिशाली उपकरण है। इंड्यूसेबल ?...

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>#11 scalpel blades</td>
			<td>Roboz</td>
			<td>RS-9801-11</td>
			<td>For use with the scalpel.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>#10 Scalpel Blades</td>
			<td>Roboz</td>
			<td>RS-9801-10</td>
			<td>For use with the scalpel.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1 mL Syringes</td>
			<td>Becton, Dickinson and Company</td>
			<td>309659</td>
			<td>For anesthetic SC injection and fluid bolus</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4.0 silk suture</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td>771-683G</td>
			<td>For skin closure</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4.0 Chromic Catgut Suture</td>
			<td>DemeTECH</td>
			<td>NN374-16</td>
			<td>To re-bind muscle during closing.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>48000 Micropipette Beveler</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>32416</td>
			<td>Used to bevel the tips of the pulled glass capillary tubes to form functional glass needles.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>5% Iodine Solution</td>
			<td>Purdue Products L.P.</td>
			<td>L01020-08</td>
			<td>For use in sterilzation of the surgical site.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>70% Ethanol</td>
			<td>N/A</td>
			<td>N/A</td>
			<td>For sterilization of newly prepared glass needles, animal models during surgical preparation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ketamine (Ketaset)</td>
			<td>Zoetis</td>
			<td>240048</td>
			<td>For keeping the animal in the correct plane of consciousness during surgery.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bead Sterilizer</td>
			<td>CellPoint</td>
			<td>5-1450</td>
			<td>To heat sterilize surgical instruments.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Digital Scale</td>
			<td>Okaus</td>
			<td>REV.005</td>
			<td>For weighing the animal during surgical preparation.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Flexible Needle Attachment</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>MF34G-5</td>
			<td>For cleaning glass needles and loading red oil into glass needles.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass Capillary Tubes</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>4878</td>
			<td>For pulled glass needles - should be designed for nanoliter injectors.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hemostats</td>
			<td>Roboz</td>
			<td>RS-7231</td>
			<td>For general use in surgery.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medium Point Curved Forceps</td>
			<td>Roboz</td>
			<td>RS-5136</td>
			<td>For general use in surgery.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micromanipulator with a Vernier Scale</td>
			<td>Kanetec</td>
			<td>N/A</td>
			<td>For precise targeting during surgery.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microscissors</td>
			<td>Roboz</td>
			<td>RS-5621</td>
			<td>For cutting glass whisps off of freshly pulled glass capillary tubes.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lab Standard Stereotaxic Instrument</td>
			<td>Stoelting</td>
			<td>51600</td>
			<td>To hold the neonatal sterotaxic holder in place</td>
		</tr>
		<tr>
			<td colspan="2">Lab Standard with Mouse &#38; Neonates Adaptor</td>
			<td>51615</td>
			<td>For neonatal skull fixation during cranial surgery and spinal injections</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microscope with Light and Vernier Scale Ocular</td>
			<td>Leitz Wetzlar</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Used to visualize and measure beveling of pulled glass capillary tubes into functional glass needles.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MicroSyringe Pump Controller</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>62403</td>
			<td>To control the rate of injection.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nanoliter 2000 Pump Head Injector</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>500150</td>
			<td>To load and inject virus in a controlled fashion.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needle Puller</td>
			<td>Narishige</td>
			<td>PC-100</td>
			<td>To heat and pull apart glass capillary tubes to form glass needles.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pAAV-CMV-scCre</td>
			<td>Wu lab&#160;</td>
			<td></td>
			<td>Cre plasmid</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pAAV-hSyn-DIO-hM3Dq-mCherry (plasmid #44361)</td>
			<td>Bryan Roth&#8217;s lab through Addgene</td>
			<td></td>
			<td>DREADD plasmid</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Parafilm</td>
			<td>Bemis</td>
			<td>PM-996</td>
			<td>To assist with loading virus into the nanoinjector.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PrecisionGlide Needles (25G x 5/8)</td>
			<td>Becton, Dickinson and Company</td>
			<td>305122</td>
			<td>For use with the 1mL and 10 mL syringes to allow injection of the animal model.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rat Tooth Forceps</td>
			<td>Roboz</td>
			<td>RS-5152</td>
			<td>For griping spinous processes.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Red Oil</td>
			<td>N/A</td>
			<td>N/A</td>
			<td>To provide a front for visualization of virus entering tissue during injection.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Retractors</td>
			<td>Roboz</td>
			<td>RS-6510</td>
			<td>To hold open the surgical wound.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rongeurs</td>
			<td>Roboz</td>
			<td>RS-8300</td>
			<td>To remove muscle from the spinal column during surgery.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scalpel Blade Handle</td>
			<td>Roboz</td>
			<td>RS-9843</td>
			<td>To slice open skin and fat pad of animal model during surgery.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scissors</td>
			<td>Roboz</td>
			<td>RS-5980</td>
			<td>For general use in surgery.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Staple Removing Forceps</td>
			<td>Kent Scientific</td>
			<td>INS750347</td>
			<td>To remove the staples, should they be applied incorrectly.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile Cloth</td>
			<td>Phenix Research Products</td>
			<td>BP-989</td>
			<td>To provide a sterile surface for the operation.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile Cotton-Tipped Applicators</td>
			<td>Puritan</td>
			<td>806-WC</td>
			<td>To soak up blood in the surgical wound while maintaining sterility.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile Gauze</td>
			<td>Covidien</td>
			<td>2146</td>
			<td>To clean the surgical area and surgical tools while maintaining sterility.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile Saline</td>
			<td>Baxter Healthcare Corporation</td>
			<td>281324</td>
			<td>For use in blood clearing, and for replacing fluids post-surgery.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical Gloves</td>
			<td>N/A</td>
			<td>N/A</td>
			<td>For use by the surgeon to maintain sterile field during surgery.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical Heating Pad</td>
			<td>N/A</td>
			<td>N/A</td>
			<td>For maintaining the body temperature of the animal model during surgery.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical Microscope</td>
			<td>N/A</td>
			<td>N/A</td>
			<td>For enhanced visualization of the surgical wound.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical Stapler</td>
			<td>Kent Scientific</td>
			<td>INS750546</td>
			<td>To apply the staples.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Water Convection Warming Pad</td>
			<td>Baxter Healthcare Corporation</td>
			<td>L1K018</td>
			<td>For use in the post-operational recovery area to maintain the body temperature of the unconscious animal.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Weighted Hooks</td>
			<td>N/A</td>
			<td>N/A</td>
			<td>To hold open the surgical wound.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Liquid bandage</td>
			<td>NewSkin</td>
			<td>985838</td>
			<td>To apply along sutures following surgery and encourage wound healing</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Wire Cage Lamp</td>
			<td>ZooMed</td>
			<td>LF10EC</td>
			<td>To help animals recover from anesthesia and retain warm body temperature naturally</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

targeting the corticospinal tract in neonatal rats with a double-viral vector using combined brain and spine surgery

वयस्क एससीआई की तुलना में बाल चिकित्सा रीढ़ की हड्डी की चोटों (एससीआई) में देखे गए परिणामों में अंतर का अध्ययन करने के लिए नवजात चूहों पर अनुसंधान को बाधित करने वाली बाधाओं से सफलतापूर्वक निपटना महत्वपूर्ण है। इसके अलावा, केंद्रीय तंत्रिका तंत्र (सीएनएस) की लक्षित कोशिकाओं में विश्वसनीय रूप से उपचार पेश करना चुनौतीपूर्ण हो सकता है, और अशुद्धियां अध्ययन या चिकित्सा की प्रभावकारिता से समझौता कर सकती हैं। यह प्रोटोकॉल वायरल वेक्टर तकनीक को एक नई शल्य चिकित्सा तकनीक के साथ जोड़ता है ताकि प्रसवोत्तर दिन 5 पर नवजात चूहों में जीन थेरेपी को सही ढंग से पेश किया जा सके। यहां, सीआरई के प्रतिगामी परिवहन (रेट्रोएएवी 2) के लिए इंजीनियर किए गए वायरस को रीढ़ की हड्डी में कॉर्टिकोस्पाइनल न्यूरॉन्स के अक्षतंतु टर्मिनलों पर पेश किया जाता है, जहां इसे बाद में कोशिका निकायों में ले जाया जाता है। डिजाइनर ड्रग (ओं) (डीआरईडीडी) वायरस द्वारा विशेष रूप से सक्रिय एक डबल-फ्लोक्स्ड इनवर्टेड ओरिएंटेशन (डीआईओ) डिजाइनर रिसेप्टर को तब मस्तिष्क के सोमाटोमोटर कॉर्टेक्स में इंजेक्ट किया जाता है। यह डबल-संक्रमण तकनीक केवल सह-संक्रमित कॉर्टिकोस्पाइनल ट्रैक्ट (सीएसटी) न्यूरॉन्स में ड्रेड्स की अभिव्यक्ति को बढ़ावा देती है। इस प्रकार, नवजात चूहों में ग्रीवा एससीआई मॉडल के बाद वसूली के केमोजेनेटिक मॉड्यूलेशन का अध्ययन करने के लिए सोमाटोमोटर कॉर्टेक्स और ग्रीवा सीएसटी टर्मिनलों का एक साथ सह-इंजेक्शन एक वैध तरीका है।

वायरल वेक्टर के सफल इंजेक्शन और परिवहन के परिणामस्वरूप रीढ़ की हड्डी और मोटर कॉर्टेक्स में एकतरफा न्यूरॉन्स का पारगमन होना चाहिए। चित्रा 4 मस्तिष्क कोरोनल सेक्शन के मोटर कॉर्टेक्स में ले?...

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Targeting the Corticospinal Tract in Neonatal Rats with a Double-Viral Vector using Combined Brain and Spine Surgery

यह प्रोटोकॉल प्रसवोत्तर 5-10 दिनों की उम्र में नवजात चूहों में कोशिकाओं की उप-आबादी के लिए जीन थेरेपी लागू करने के लिए एक नई विधि प्रदर्शित करता है, जिसमें सोमाटोमोटर कॉर्टेक्स में एक एंटेरोग्रेड केमोजेनेटिक संशोधक और ग्रीवा रीढ़ की हड्डी में प्रतिगामी रूप से परिवहन योग्य क्रे रिकोम्बिनेस इंजेक्ट किया जाता है।

संयुक्त मस्तिष्क और रीढ़ की सर्जरी का उपयोग करके डबल-वायरल वेक्टर के साथ नवजात चूहों में कॉर्टिकोस्पाइनल ट्रैक्ट को लक्षित करना

Successfully tackling the obstacles that constrain research on neonatal rats is important for studying the differences in outcomes seen in pediatric ...

यह नवजात चूहों में कॉर्टिकोस्पाइनल ट्रैक्ट के सफल सह-संक्रमण का प्रदर्शन करने वाला पहला प्रोटोकॉल है। यह यह जांचने के लिए एक सटीक खाका प्रदान करता है कि युवा स्तनधारियों में कोशिकाओं की व्यक्तिगत उप-आबादी रीढ़ की हड्डी की चोट से वसूली में कैसे योगदान करती है। अन्य डबल वायरल वेक्टर तकनीकों की तरह, यह विधि उपयोगकर्ता को न्यूरॉन्स की विशिष्ट उप-आबादी को सटीक रूप से ट्रांसड्यूस करने की अनुमति देती है, बदले में, शोधकर्ताओं को वसूली को बढ़ावा देने में विभिन्न केमोजेनेटिक तकनीकों की प्रभावशीलता की पहचान करने की अनुमति देती है।हम उम्मीद करेंगे कि शोधकर्ता जो इस तकनीक से अपरिचित हैं, उचित रीढ़ की हड्डी की शारीरिक रचना का पता लगाने के साथ संघर्ष करेंगे। और इसलिए हम आपको अक्सर कशेरुक खंडों की लगातार गणना करने के लिए प्रोत्साहित करते हैं और हमेशा अपने स्थलों को वापस संदर्भित करते हैं। नवजात स्प्राग डॉवले पिल्ले में संज्ञाहरण की गहराई की पुष्टि करने के बाद, उस क्षेत्र की पहचान करें जहां खोपड़ी के शीर्ष पर मध्य रेखा में बल को दबाकर चीरा लगाया जाएगा, जो कि सीवन के लिए महसूस करता है।एक साफ, सीधे और सटीक चीरा सुनिश्चित करने के लिए त्वचा को तना हुआ पकड़ते हुए, आई लाइन के ठीक ऊपर शुरू होने वाले सीवन प्लेन के साथ एक सेंटीमीटर चीरा लगाएं। इसके बाद, खोपड़ी की सतह के साथ बल की धीरे से जांच करके ब्रेग्मा की पहचान करें, सीवन लाइनों पर पूरा ध्यान दें और पार्श्विका और ललाट हड्डियों के साथ चलने वाले बल के कारण इंडेंटेशन करें। ब्याज के किनारे भारित हुक लगाकर उद्घाटन बनाए रखें।बढ़ी हुई सटीकता के लिए ब्रेग्मा के जोखिम को अधिकतम करने के लिए कपास युक्तियों और माइक्रो कैंची के संयोजन का उपयोग करके एपोन्यूरोसिस को साफ करें। सुनिश्चित करें कि कोरोनल सीवन स्पष्ट रूप से स्पष्ट रूप से दिखाई दे ताकि बाद के इंजेक्शन के लिए एक मोटा टेम्पलेट प्रदान किया जा सके। माइक्रो कैंची का उपयोग करके, ब्रेग्मा से सटे बाएं ललाट खोपड़ी की हड्डी के लगभग तीन-बाय-दो मिलीमीटर खंड को काट लें।कपास युक्तियों के साथ किसी भी मलबे, मस्तिष्कमेरु द्रव और रक्त को साफ करें। वायरस को इंजेक्ट करने के लिए, सुई को जगह पर रखें और इंजेक्टर को 250 नैनोलीटर प्रति मिनट की दर से एक माइक्रोलीटर इंजेक्ट करने के लिए प्रोग्राम करें। इंजेक्शन के पूरा होने पर, सुई को तीन मिनट के लिए कॉर्टेक्स में आराम करने दें।ब्रेग्मा के संबंध में कॉर्टेक्स के साथ कुल तीन इंजेक्शन के लिए अन्य निर्देशांक पर इंजेक्शन दोहराएं, सभी 0.6 मिलीमीटर की गहराई पर। इंजेक्शन पूरा करने के बाद, खोपड़ी को सीवन करें और ग्रीवा लैमिनेक्टॉमी के लिए जानवर को अन्य ऑपरेटिंग टेबल पर स्थानांतरित करें। चीरा स्थल की पहचान करने के लिए उंगलियों का उपयोग करके खोपड़ी के आधार को पालपेट करें।अंगूठे और तर्जनी से तनाव लगाकर त्वचा को तना हुआ रखें। एक नंबर 11 ब्लेड का उपयोग करके, खोपड़ी के आधार से एक से दो मिलीमीटर पीछे मध्य रेखा पर चीरा शुरू करें और सतही मांसपेशियों को उजागर करने के लिए चीरा को एक सेंटीमीटर पीछे की ओर बढ़ाएं। ब्लेड के तेज बिंदु का उपयोग करके, रीढ़ की हड्डी की गुहा और गहरी रीढ़ की हड्डी की मांसपेशियों को उजागर करने के लिए सतही मांसपेशियों की मध्य रेखा के साथ धीरे से कटौती की एक श्रृंखला बनाएं।फिर मांसपेशियों को खोलने और सर्जिकल विंडो की कल्पना करने के लिए बल की एक जोड़ी का उपयोग करें। एक बार गहरी रीढ़ की हड्डी की मांसपेशियों को उजागर करने के बाद, सर्जिकल विंडो में रिट्रैक्टर्स डालें और सर्जिकल विंडो को चौड़ाई में सात से आठ मिलीमीटर तक वापस ले लें, जिससे रीढ़ की हड्डी का एक अबाधित दृश्य हो सके। दूसरे ग्रीवा कशेरुका को इसकी प्रमुख स्पिनस प्रक्रिया द्वारा पहचानें जो पृष्ठीय रूप से प्रोजेक्ट करता है और एक बड़े गुंबद के आकार की मांसपेशियों को समाहित करता है।एक हड्डी स्क्रैपर के सपाट किनारे का उपयोग करके, सी 3 से सी 7 कशेरुक को उजागर करने के लिए धीरे से गहरी रीढ़ की हड्डी की मांसपेशियों को किनारों पर खुरचें। उचित जोखिम सुनिश्चित करने के लिए कशेरुक लैमिना के समानांतर दिशा के साथ मध्यवर्ती और खुरचना शुरू करें, जिससे कशेरुक लैमिनेट के स्पष्ट अंतर की अनुमति मिलती है। कॉटन टिप्स से किसी भी ब्लीडिंग को कंट्रोल करें।कशेरुक स्तरों की गणना करते समय एक गाइड के रूप में सी 2 का उपयोग करते हुए, माइक्रो कैंची की एक जोड़ी का उपयोग करके सी 6 और सी 7 पर कार्टिलाजिनस लैमिनेट के पार्श्व किनारों को सावधानीपूर्वक काटें। बारीक बल की एक जोड़ी का उपयोग करके, रीढ़ की हड्डी को उजागर करने के लिए लैमिना के विच्छेदित हिस्से को सावधानीपूर्वक हटा दें, यह सुनिश्चित करते हुए कि रीढ़ की हड्डी की खिड़की वांछित इंजेक्शन साइट को समायोजित करने के लिए पर्याप्त बड़ी है। जानवर को स्टीरियोटैक्सिक कपाल धारक में सेट करें और अपने पिछले क्वार्टर को ऊपर उठाने के लिए जानवर के ट्रंक के नीचे धुंध का एक लुढ़का हुआ टुकड़ा रखें।इंजेक्शन शुरू करने से पहले, रीढ़ की हड्डी का अपमान न करने का ध्यान रखते हुए, धीरे से कपास युक्तियों और सुगी त्रिकोण को लागू करके किसी भी रक्त या मस्तिष्कमेरु द्रव की रीढ़ की हड्डी की खिड़की को साफ करें। इसके अलावा, निरंतर रक्तस्राव या सीएसएफ रिसाव द्वारा इंजेक्शन साइट के रोड़ा को रोकने के लिए रीढ़ की हड्डी की खिड़की के पार्श्व भागों में अवशोषित कपास का एक छोटा टुकड़ा रखकर खिड़की की परिधि के चारों ओर एक बाधा बनाएं। रीढ़ की हड्डी में सीधे इंजेक्शन के लिए, रीढ़ की हड्डी की धमनी की पहचान करके रीढ़ की हड्डी की मध्य रेखा का अनुमान लगाने के लिए ग्लास इंजेक्शन सुई की नोक का उपयोग करें।इसके बाद, सुई को अनुमानित मध्य रेखा पर सी 5 लैमिना के ठीक पीछे रखें और इसे संदर्भ बिंदु के रूप में उपयोग करें। फिर, माइक्रो मैनिपुलेटर का उपयोग करके, सुई को 0.3 मिलीमीटर से दाईं ओर ले जाएं और सुई को तब तक कम करें जब तक कि यह रीढ़ की हड्डी की सतह को न छू ले। इस गहराई से, सुई को डुबोएं।रीढ़ की हड्डी में 0.6 मिलीमीटर। रेट्रो एडेनो से जुड़े वायरस के एक माइक्रोलीटर को इंजेक्ट करें, जिसमें क्रे रिकोम्बिनेस जीन प्रति मिनट 250 नैनोलीटर होता है। फिर धीरे-धीरे सुई को वापस लेने से पहले वायरस को रीढ़ की हड्डी में फैलाने के लिए दो मिनट तक प्रतीक्षा करें।मस्तिष्क कोरोनल सेक्शन के मोटर कॉर्टेक्स में परत पांच कॉर्टिकोस्पाइनल ट्रैक्ट न्यूरॉन्स की लेबलिंग जो रेट्रो सीआरई के विपरीत रीढ़ इंजेक्शन के साथ सह-इंजेक्शन को व्यक्त करती है। विशिष्ट न्यूरोनल आबादी को लक्षित करने में सक्षम होने से रिकवरी को चलाने की बारीकियों को चित्रित करने में मदद मिलेगी और विकासशील तंत्रिका तंत्र में अंतर्निहित रीढ़ की हड्डी की चोट के इलाज के लिए अधिक सटीकता प्रदान की जाएगी। इस विधि ने हमारे लिए किशोर चूहों में रीढ़ की हड्डी की चोट के इलाज के लिए एक साधन के रूप में उत्तेजक डीआरईडी का उपयोग करने की व्यवहार्यता की जांच करने का मार्ग प्रशस्त किया।

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Stereotaxic Surgery for Excitotoxic Lesion of Specific Brain Areas in the Adult Rat

वयस्क चूहे में विशिष्ट मस्तिष्क क्षेत्रों की Excitotoxic घाव के लिए stereotaxic सर्जरी

Many behavioral functions in mammals, including rodents and humans, are mediated principally by discrete brain regions. A common method for discerning the ...

Unilateral Pyramidotomy of the Corticospinal Tract in Rats for Assessment of Neuroplasticity-inducing Therapies

Neuroplasticity उत्प्रेरण उपचारों के आकलन के लिए चूहे में corticospinal पथ की एकतरफा Pyramidotomy

The corticospinal tract (CST) can be completely severed unilaterally in the medullary pyramids of the rodent brainstem. The CST is a motor tract that has ...

Intracerebroventricular Viral Injection of the Neonatal Mouse Brain for Persistent and Widespread Neuronal Transduction

लगातार और व्यापक Neuronal पारगमन के लिए नवजात माउस ब्रेन की Intracerebroventricular वायरल इंजेक्शन

With the pace of scientific advancement accelerating rapidly, new methods are needed for experimental neuroscience to quickly and easily manipulate gene ...

Regioselective Biolistic Targeting in Organotypic Brain Slices Using a Modified Gene Gun

Regioselective biolistic एक संशोधित जीन बंदूक का इस्तेमाल Organotypic मस्तिष्क स्लाइसें में लक्ष्य निर्धारण

Transfection of DNA has been invaluable for biological sciences and with recent advances to organotypic brain slice preparations, the effect of various ...

Recording EEG in Freely Moving Neonatal Rats Using a Novel Method

एक उपन्यास पद्धति का उपयोग करते हुए मुक्त नवजात चूहों को उड़ाने में ईईजी रिकॉर्डिंग

EEG is a useful method to detect electrical activity in the brain. Moreover, it is a widely used diagnostic tool for various neurological conditions, such ...

Imaging Neural Activity in the Primary Somatosensory Cortex Using Thy1-GCaMP6s Transgenic Mice

Imaging Neural Activity in the Primary Somatosensory Cortex Using Thy1-GCaMP6s Transgenic Mice

इमेजिंग तंत्रिका गतिविधि प्राथमिक Somatosensory प्रांतस्था का उपयोग Thy1-GCaMP6s ट्रांसजेनिक चूहों में

The mammalian brain exhibits marked symmetry across the sagittal plane. However, detailed description of neural dynamics in symmetric brain regions in ...

Stereotaxic Surgery for Genetic Manipulation in Striatal Cells of Neonatal Mouse Brains

नवजात माउस दिमाग के Striatal कोशिकाओं में आनुवंशिक हेरफेर के लिए Stereotaxic सर्जरी

Many genes are expressed in embryonic brains, and some of them are continuously expressed in the brain after birth. For such persistently expressed genes, ...

Advanced Diffusion Imaging in The Hippocampus of Rats with Mild Traumatic Brain Injury

हल्के अभिघातजन्य मस्तिष्क की चोट के साथ चूहों के हिप्पोकैम्पस में उन्नत प्रसार इमेजिंग

Mild traumatic brain injury (mTBI) is the most common type of acquired brain injury. Since patients with traumatic brain injury show a tremendous ...

Determining the Functional Status of the Corticospinal Tract Within One Week of Stroke

स्ट्रोक के एक सप्ताह के भीतर कोर्टिकोस्पाइनल ट्रैक्ट की कार्यात्मक स्थिति का निर्धारण

High interindividual variability in the recovery of upper limb (UL) function after stroke means it is difficult to predict an individual&#39;s potential ...

Laser-Induced Brain Injury in the Motor Cortex of Rats

चूहों के मोटर कॉर्टेक्स में लेजर प्रेरित मस्तिष्क चोट

A common technique for inducing stroke in experimental rodent models involves the transient (often denoted as MCAO-t) or permanent (designated as MCAO-p) ...