Name: fibroblast derived human engineered connective tissue for screening applications
Uploaded: 2021-08-20T13:00:00
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<p class="jove_content">इस काम को जर्मन कार्डियक सोसाइटी (जीएलएस के लिए डीजीके रिसर्च फैलोशिप) और जर्मन रिसर्च फाउंडेशन (जीएलएस और एडी के लिए परियोजना आईआरटीजी 1816 के माध्यम से डीएफजी) द्वारा समर्थित किया गया था; एमटी के लिए डीएफजी 417880571 और डीएफजी टीआई 956/1-1; एमटी और डब्ल्यूएचजेड के लिए एसएफबी 1002 टीपी सी04; WHZ के लिए SFB 1002 TP S01; और WHZ के लिए EXC 2067/1-390729940J)। WHZ विज्ञान और शिक्षा के लिए जर्मन संघीय मंत्रालय (परियोजना IndiHEART के माध्यम से BMBF), और Fondation Leducq (20CVD04) द्वारा समर्थित है। MT, WHZ और SL जर्मन सेंटर फॉर कार्डियोवैस्कुलर रिसर्च (DZHK) द्वारा समर्थित हैं।</p>

<p class="jove_content">रोकथाम स्तर 1 के तहत प्रयोगशालाओं में स्थापित कक्षा II जैव सुरक्षा हुड में सभी कदम उठाए जाने चाहिए। स्थानीय नियमों और प्रदर्शन किए जाने वाले जोड़तोड़ के प्रकार के आधार पर, जैसे कि वायरल-मध्यस्थता जीन हस?...

<p class="jove_content">प्रस्तुत प्रोटोकॉल प्राथमिक मानव सीएफ से ईसीटी की पीढ़ी का वर्णन करता है, जो इन कोशिकाओं के यांत्रिक प्रभाव का अध्ययन उनके बाह्य कोशिकीय मैट्रिक्स वातावरण पर और इसके विपरीत करने की अनुमति देता है।</p>
<p ...

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Cell culture reagents:</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Accutase Solution</td>
			<td>Merk Millipore</td>
			<td>SCR005</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dissociation reagent &#8211; TrypLE Express</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>12604013</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dulbecco&#39;s Modified Eagle Medium (DMEM) powder, high glucose</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>12100061</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dulbecco&#8217;s phosphate buffered saline (DPBS), pH 7.2, -Ca2+, -Mg2+</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>14190144</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FGM-2 Fibroblast Growth Medium-2 BulletKit</td>
			<td>Lonza</td>
			<td>CC-3132</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FBM&#160;Fibroblast Growth Basal Medium</td>
			<td>Lonza</td>
			<td>CC-3131</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FGM-2 Fibroblast Growth Medium-2 SingleQuots,&#160;Supplements and Growth Factors</td>
			<td>Lonza</td>
			<td>CC-4126</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fibroblast Growth Medium 3 KIT</td>
			<td>PromoCell</td>
			<td>C-23130</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fibroblast Basal Medium 3</td>
			<td>PromoCell</td>
			<td>C-23230</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Growth Medium 3 SupplementPack</td>
			<td>PromoCell</td>
			<td>C-39350</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin (10000 U/mL)/ Streptomycin (10000 &#956;L/mL)</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>15140122</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium hydroxide solution (NaOH) 1.0 N</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>S2770-100ML</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell sources:</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Normal human cardiac fibroblasts from the ventricle (NHCF-V)</td>
			<td>Lonza</td>
			<td>CC-2904</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Human Cardiac Fibroblasts (HCF-c)</td>
			<td>PromoCell</td>
			<td>C-12375</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Human Cardiac Fibroblasts (HCF-p)</td>
			<td>PromoCell</td>
			<td>C-12377</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Primary human foreskin fibroblasts-1 (HFF-1)</td>
			<td>ATCC</td>
			<td>SCRC- 1041</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Collagen sourses:</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Collagen Type I (bovine) in 0.01 M HCl</td>
			<td>LLC Collagen Solutions</td>
			<td>FS22024</td>
			<td>6-7 mg/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Collagen Type I (rat tail) in 0.02 M HCl</td>
			<td>Corning</td>
			<td>354236</td>
			<td>~4 mg/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Drugs:</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Latrunculin-A (Lat-A)</td>
			<td>Enzo Life Sciences</td>
			<td>BML-T119-0100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Plastic ware:</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell culture plastic ware</td>
			<td>Sarstedt and Starlab</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mesh cell strainer (Nylon, pore size 40 &#956;m)</td>
			<td>Falcon</td>
			<td>352340</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>myrPlate-uniform</td>
			<td>myriamed GmbH</td>
			<td>TM5 med</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Serological pipettes wide opening, sterile (10 mL)</td>
			<td>Corning</td>
			<td>07-200-619</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Specific instruments:</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bi-telecentric CORE lens for 1/2&#8243; detectors</td>
			<td>OptoEngineering</td>
			<td>TCCR12096</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Area scan camera Basler ace acA4024</td>
			<td>Basler</td>
			<td>107404</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

fibroblast derived human engineered connective tissue for screening applications

<p class="jove_content">फाइब्रोब्लास्ट फेनोटाइपिक रूप से अत्यधिक गतिशील कोशिकाएं हैं, जो जैव रासायनिक और बायोमैकेनिकल उत्तेजनाओं के जवाब में मायोफाइब्रोब्लास्ट्स में जल्दी से ट्रांसडिफरेंटिएट होती हैं। कार्डियक फाइब्रोसिस सहित फाइब्रोटिक प्रक्रियाओं की वर्तमान समझ खराब बनी हुई है, जो नए एंटी-फाइब्रोटिक उपचारों के विकास में बाधा डालती है। फाइब्रोसिस पैथोलॉजी की बेहतर समझ के लिए नियंत्रणीय और विश्वसनीय मानव मॉडल सिस्टम महत्वपूर्ण हैं। यह एक अत्यधिक पुनरुत्पादक और स्केलेबल प्रोटोकॉल है जो 48-अच्छी तरह से कास्टिंग प्लेट में इंजीनियर संयोजी ऊतकों (ईसीटी) को उत्पन्न करने के लिए है ताकि फाइब्रोब्लास्ट्स के अध्ययन और 3-आयामी (3 डी) वातावरण में फाइब्रोटिक ऊतक के पैथोफिजियोलॉजी के अध्ययन की सुविधा हो सके। ईसीटी को ट्यूनेबल कठोरता के साथ ध्रुवों के चारों ओर उत्पन्न किया जाता है, जो एक परिभाषित बायोमैकेनिकल लोड के तहत अध्ययन की अनुमति देता है। परिभाषित लोडिंग स्थितियों के तहत, सेल-मैट्रिक्स इंटरैक्शन द्वारा नियंत्रित फेनोटाइपिक अनुकूलन का अध्ययन किया जा सकता है। समानांतर परीक्षण 48-अच्छी तरह से प्रारूप में कई मापदंडों के समय-पाठ्यक्रम विश्लेषण के अवसर के साथ संभव है, जैसे कि ऊतक संघनन और लोड के खिलाफ संकुचन। इन मापदंडों से, ऊतक कठोरता और लोच जैसे बायोमैकेनिकल गुणों का अध्ययन किया जा सकता है। </p>

<p class="jove_content">ईसीटी पहले 24 घंटे के भीतर प्रारंभिक सेल-कोलेजन हाइड्रोजेल वॉल्यूम की तुलना में लगभग 95% संघनन तक पहुंचता है। नियंत्रण की स्थिति में और एफसीएस की उपस्थिति में ऊतक संघनन और संकुचन कास्टिंग के कुछ घंटों बा?...

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Fibroblast Derived Human Engineered Connective Tissue for Screening Applications

<p class="jove_content">यहां प्रस्तुत किया गया एक प्रोटोकॉल है जो दोहरे ध्रुवों के साथ एक बहु-अच्छी तरह से प्लेट में 48 ऊतकों की समानांतर संस्कृति के लिए इंजीनियर संयोजी ऊतकों को उत्पन्न करने के लिए है, जो यांत्रिक अध्ययन, रोग मॉडलिंग और स्क्रीनिंग अनुप्रयोगों के लिए उपयुक्त है। प्रोटोकॉल विभिन्न अंगों और प्रजातियों से फाइब्रोब्लास्ट के साथ संगत है और यहां मानव प्राथमिक कार्डियक फाइब्रोब्लास्ट के साथ उदाहरण दिया गया है।</p>

फाइब्रोब्लास्ट व्युत्पन्न मानव इंजीनियर संयोजी ऊतक स्क्रीनिंग अनुप्रयोगों के लिए

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