Results: Protein Expression from the Rolling Circle Amplification (RCA) Templates Using Cell-Free Systems
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Conclusion
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Questo protocollo è significativo perché descrive in dettaglio come generare rapidamente grandi quantità di modello di DNA da utilizzare in reazioni prive di cellule da un piccolo frammento di gene ricevuto da una struttura di sintesi. L'amplifica
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Lo studio descrive un protocollo per la creazione di grandi quantità (μg-mg) di DNA per campagne di screening proteico da frammenti di geni sintetici senza clonazione o utilizzando cellule viventi. Il modello minimo viene digerito enzimaticamente e circolarizzato e quindi amplificato utilizzando l'amplificazione isotermica del cerchio di rotolamento. Le reazioni di espressione senza cellule potrebbero essere eseguite con il prodotto non purificato.