Name: isolated lung perfusion system in the rabbit model
Uploaded: 2021-07-15T14:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Isolated Lung Perfusion System in the Rabbit Model at JoVE.com

ويود المؤلفان أن يشكرا الدكتورة بيتينا سومر سرفانتس على دعمها في كتابة هذه المخطوطة، وكيتزيا إيلينا لارا سافونت على دعمها للرسوم التوضيحية.

وقد استخدم نظام التشوه المعزول في نموذج الأرانب على نطاق واسع في مختبر فرط الاستجابة القصبية في المعهد الوطني للتنفس. ويشمل البروتوكول أرانب نيوزيلندية يبلغ وزنها التقريبي 2.5-3 كيلوغرامات. تم الاحتفاظ بجميع الحيوانات في ظروف vivarium القياسية وتغذية libitum الإعلانية وفقا للمبادئ التوجيهي?...

<ol>
	<li>Dixon, W. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Contributions+to+the+physiology+of+the+lungs:+Part+I.+The+bronchial+muscles,+their+innervation,+and+the+action+of+drugs+upon+them.">Contributions to the physiology of the lungs: Part I. The bronchial muscles, their innervation, and the action of drugs upon them.</a> The Journal of Physiology. 29 (2), 97-173 (1903).</li><li>Nelson, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+of+ex+vivo+lung+perfusion+as+a+platform+for+transplantation+research.">Animal models of ex vivo lung perfusion as a platform for transplantation research.</a> World Journal of Experimental Medicine. 4 (2), 7-15 (2014).</li><li>Roman, M. A., Nair, S., Tsui, S., Dunning, J., Parmar, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ex+vivo+lung+perfusion:+a+comprehensive+review+of+the+development+and+exploration+of+future+trends.">Ex vivo lung perfusion: a comprehensive review of the development and exploration of future trends.</a> Transplantation. 96 (6), 509-518 (2013).</li><li>Delaunois, A., Gustin, P., Ansay, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Multiple+muscarinic+receptor+subtypes+mediating+pulmonary+oedema+in+the+rabbit.">Multiple muscarinic receptor subtypes mediating pulmonary oedema in the rabbit.</a> Pulmonary Pharmacology. 7 (3), 185-193 (1994).</li><li>Delaunois, A., Gustin, P., Vargas, M., Ansay, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protective+effect+of+various+antagonists+of+inflammatory+mediators+against+paraoxon-induced+pulmonary+edema+in+the+rabbit.">Protective effect of various antagonists of inflammatory mediators against paraoxon-induced pulmonary edema in the rabbit.</a> Toxicology and Applied Pharmacology. 132 (2), 343-345 (1995).</li><li>Barr, H. A., Nicholas, T. E., Power, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Control+of+alveolar+surfactant+in+rats+at+rest+and+during+prolonged+hyperpnoea:+pharmacological+evidence+for+two+tissue+pools+of+surfactant.">Control of alveolar surfactant in rats at rest and during prolonged hyperpnoea: pharmacological evidence for two tissue pools of surfactant.</a> British Journal of Pharmacology. 93 (3), 473-482 (1988).</li><li>Machuca, T. N., Cypel, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ex+vivo+lung+perfusion.">Ex vivo lung perfusion.</a> Journal of Thoracic Disease. 6 (8), 1054-1062 (2014).</li><li>Steen, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=First+human+transplantation+of+a+nonacceptable+donor+lung+after+reconditioning+ex+vivo.">First human transplantation of a nonacceptable donor lung after reconditioning ex vivo.</a> The Annals of Thoracic Surgery. 83 (6), 2191-2194 (2007).</li><li>Cypel, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Technique+for+prolonged+normothermic+ex+vivo+lung+perfusion.">Technique for prolonged normothermic ex vivo lung perfusion.</a> The Journal of Heart and Lung Transplantation: The Official Publication of the International Society for Heart and Lung Transplantation. 27 (12), 1319-1325 (2008).</li><li>Cypel, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Normothermic+ex+vivo+lung+perfusion+in+clinical+lung+transplantation.">Normothermic ex vivo lung perfusion in clinical lung transplantation.</a> New England Journal of Medicine. 364 (15), 1431-1440 (2011).</li><li>Kao, C. C., Parulekar, A. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Is+perfusate+exchange+during.">Is perfusate exchange during.</a> Annals of Translational Medicine. 8 (3), 43 (2020).</li><li>Alquicira-Mireles, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Participaci&#243;n de la serotonina en los cambios de permeabilidad vascular en la preservaci&#243;n pulmonar en conejo. , (2013).</li><li>Arreola-Ram&#237;rez, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Papel de la liberaci&#243;n de acetilcolina y sustancia P en el deterioro de la funci&#243;n pulmonar en un modelo experimental de preservaci&#243;n pulmonar en conejo. , (2009).</li><li>Isolated lung perfusion systems for small to large animal models. Harvard Apparatus. Hugo Sachs Elektronik (HSE) Available from: <a target="_blank" href="https://www.harvardapparatus.com/media/harvard/pdf/Isolated%20Lung%20Perfusion%20Systems%20Brochure.pdf">https://www.harvardapparatus.com/media/harvard/pdf/Isolated%20Lung%20Perfusion%20Systems%20Brochure.pdf</a> (2021)</li><li>Jiao, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evolving+trend+of+EVLP:+Advancements+and+emerging+pathways.">Evolving trend of EVLP: Advancements and emerging pathways.</a> SN Comprehensive Clinical Medicine. 1 (4), 287-303 (2019).</li><li>Mordant, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mesenchymal+stem+cell+treatment+is+associated+with+decreased+perfusate+concentration+of+interleukin-8+during+ex+vivo+perfusion+of+donor+lungs+after+18-hour+preservation.">Mesenchymal stem cell treatment is associated with decreased perfusate concentration of interleukin-8 during ex vivo perfusion of donor lungs after 18-hour preservation.</a> The Journal of Heart and Lung Transplantation: The Official Publication of the International Society for Heart and Lung Transplantation. 35 (10), 1245-1254 (2016).</li><li>Cowan, P. J., Hawthorne, W. J., Nottle, M. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Xenogeneic+transplantation+and+tolerance+in+the+era+of+CRISPR-Cas9.">Xenogeneic transplantation and tolerance in the era of CRISPR-Cas9.</a> Current Opinion in Organ Transplantation. 24 (1), 5-11 (2019).</li><li>Collaborators, G. C. R. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prevalence+and+attributable+health+burden+of+chronic+respiratory+diseases,+1990-2017:+a+systematic+analysis+for+the+Global+Burden+of+Disease+Study+2017.">Prevalence and attributable health burden of chronic respiratory diseases, 1990-2017: a systematic analysis for the Global Burden of Disease Study 2017.</a> The Lancet Respiratory Medicine. 8 (6), 585-596 (2020).</li><li>Bravo-Reyna, C. C., Torres-Villalobos, G., Aguilar-Blas, N., Fr&#237;as-Guill&#233;n, J., Guerra-Mora, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparative+study+of+capillary+filtration+coefficient+(Kfc)+determination+by+a+manual+and+automatic+perfusion+system.+Step+by+step+technique+review.">Comparative study of capillary filtration coefficient (Kfc) determination by a manual and automatic perfusion system. Step by step technique review.</a> Physiological Research. 68 (6), 901-908 (2019).</li><li>Pereira, M. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=COVID-19+in+solid+organ+transplant+recipients:+Initial+report+from+the+US+epicenter.">COVID-19 in solid organ transplant recipients: Initial report from the US epicenter.</a> American Journal of Transplantation. 20 (7), 1800-1808 (2020).</li></ol>

يعرض هذا العمل رؤية عامة لنظام تغلغل الرئة المعزول ، وهو تقنية أساسية في أبحاث فسيولوجيا الرئة. يوفر نظام تغلغل الرئة المعزول درجة كبيرة من التنوع في استخدامه ويسمح بتقييم العديد من المعلمات ذات الصلة في اختبار مجموعة واسعة من الفرضيات15. نظام الرئة المعزول هو أداة ذات حضور عا...

وصف برودي وديسون لأول مرة نظام التشويش الرئوي السابق في عام 1903 1. ومنذ ذلك الحين، أصبح أداة معيار الذهب لدراسة علم وظائف الأعضاء، وعلم الصيدلة، وعلم السموم، والكيمياء الحيوية للرئتين2،3. تقدم هذه التقنية طريقة متسقة وقابلة للاستنساخ لتقييم صلاحية عمليات زرع الرئة ، وتحديد تأثير الوسطاء الالتهابيين مثل الهيستامين ، ونواتج الأيض حمض الأراكيدونيك ، والمادة P ، من بين أمور أخرى ، وكذلك تفاعلاتها خلال الظواهر الرئوية مثل القصبات الهوائية ، وانتفاخات الشعر ، والوذمة الرئوية. كان نظام الرئة المعزول تقنية رئيسية في الكشف عن الدور الهام للرئتين في القضاء على الأمينات الحيوية من الدورة الدموية العامة4،5. بالإضافة إلى ذلك، تم استخدام النظام لتقييم الكيمياء الحيوية لخافق الماء الرئوي6. على مدى العقود القليلة الماضية، أصبح نظام تغلغل الرئة في الجسم الحي السابق منصة مثالية لأبحاث زرع الرئة7. في عام 2001 وصف فريق بقيادة ستيغ ستين أول تطبيق سريري لنظام تغلغل الرئة السابق في الجسم الحي باستخدامه لإعادة تجديد رئتي متبرع يبلغ من العمر 19 عاما ، والذي رفضته مراكز الزرع في البداية بسبب إصاباته. تم حصاد الرئة اليسرى وثقبها لمدة 65 دقيقة. بعد ذلك ، تم زرعها بنجاح في رجل يبلغ من العمر 70 عاما مصابا بمرض COPD8. أدى إجراء مزيد من الأبحاث في تجديد الرئة باستخدام التشوه السابق في الجسم الحي إلى تطوير تقنية تورونتو لتشويش الرئة الممتد لتقييم وعلاج الرئتين المتبرعتين المصابتين9,10. سريريا، أظهر نظام تغلغل الرئة الحية السابقة أنه استراتيجية آمنة لزيادة تجمعات المانحين من خلال علاج وإعادة تجديد الرئتين المانحتين دون المستوى، مما لا يمثل فرقا كبيرا في المخاطر أو النتائج مقابل المعايير القياسية للمتبرعين10.
الميزة الرئيسية لنظام تغلغل الرئة المعزول هي أنه يمكن تقييم المعلمات التجريبية في جهاز وظيفي كامل يحافظ على وظيفته الفسيولوجية تحت إعداد مختبر اصطناعي. وعلاوة على ذلك، فإنه يسمح لقياس والتلاعب التهوية الميكانيكية الرئوية لتحليل مكونات فسيولوجيا الرئة مثل مقاومة مجرى الهواء، ومقاومة الأوعية الدموية الكلية، وتبادل الغاز، وتشكيل وذمة، والتي حتى الآن لا يمكن قياسها بدقة في الجسم الحي على المختبر2. وتجدر الإشارة إلى أن تكوين المحلول الذي يتم به تغلغل الرئة يمكن التحكم فيه بالكامل ، مما يتيح إضافة مواد لتقييم آثارها في الوقت الحقيقي وجمع العينات من التشوه لمزيد من الدراسة11. يجب على الباحثين الذين يعملون مع نظام الرئة المعزول أن يضعوا في اعتبارهم أن التهوية الميكانيكية تسبب تسوس الأنسجة الرئوية تقصير وقتها المفيد. يمكن أن يتأخر هذا الانخفاض التدريجي في المعلمات الميكانيكية بشكل كبير عن طريق تضخم الرئتين في بعض الأحيان خلال وقت التجربة4. ومع ذلك، لا يمكن أن يستمر التحضير عادة أكثر من ثماني ساعات. وثمة اعتبار آخر لنظام التشوه الرئة السابق في الجسم الحي هو عدم وجود تنظيم العصبي المركزي والصرف اللمفاوي. ولم تفهم آثار غيابهم فهما كاملا بعد، ويمكن أن تكون مصدرا للتحيز في تجارب معينة. 
يمكن إجراء تقنية نظام تغلغل الرئة المعزولة في نموذج الأرنب بدرجة عالية من الاتساق والتكرار. يصف هذا العمل الإجراءات التقنية والجراحية لتنفيذ تقنية التشويش الرئوي المعزولة السابقة كما تم تطويرها لنموذج الأرانب في المعهد الوطني للتنفس في مكسيكو سيتي ، بهدف مشاركة الأفكار وتقديم دليل واضح حول الخطوات الرئيسية في تطبيق هذا النموذج التجريبي.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>2-Stop Tygon E-Lab Tubing, 3.17 mm ID, 12/pack, Black/White</td>
			<td>Hugo Sachs Elektronik (HSE)</td>
			<td>73-1864</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Adapter for Positive Pressure Ventilation on IPL-4</td>
			<td>Hugo Sachs Elektronik (HSE)</td>
			<td>73-4312</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Adapter for Positive Pressure Ventilation on IPL-4</td>
			<td>Hugo Sachs Elektronik (HSE)</td>
			<td>73-4312</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alternative Pressure-Free Gas Supply for IPL-4: To supply the trachea with gas mixture different from room air during negative ventilation</td>
			<td>Hugo Sachs Elektronik (HSE)</td>
			<td>73-4309</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Base Unit for the Rabbit to Fetal Pig Isolated Perfused Lung</td>
			<td>Hugo Sachs Elektronik (HSE)</td>
			<td>73-4138</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bovine serum A2:D41albumin lyophilized powder</td>
			<td>sigma</td>
			<td>3912</td>
			<td>500 g</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Calcium chloride, CaCl2&#183;2H2O.</td>
			<td>JT Baker</td>
			<td>10035-04-8</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cryogenic vials</td>
			<td>Corning</td>
			<td>430659</td>
			<td>2 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>D-glucosa, C6H12O6.</td>
			<td>sigma</td>
			<td>G5767</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Differential Low Pressure Transducer DLP2.5, Range +- 2.5 cmH2O, HSE Connector</td>
			<td>Hugo Sachs Elektronik (HSE)</td>
			<td>73-3882</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Differential Pressure Transducer MPX, Range +- 100 cmH2O, HSE Connector</td>
			<td>Hugo Sachs Elektronik (HSE)</td>
			<td>73-0064</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Eppendorf tubes</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol absolute HPLC grade</td>
			<td>Caledon</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Falcon tubes</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>14 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Harvard Peristaltic Pump P-230 (Complete with Control Box and P-230 Motor Drive)</td>
			<td>Hugo Sachs Elektronik (HSE)</td>
			<td>70-7001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heated Linear Pneumotachometer 0 to 10 L/min flow range</td>
			<td>Hugo Sachs Elektronik (HSE)</td>
			<td>59-9349</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heater Controller for Single Pneumotachometer 230 VAC, 50 Hz</td>
			<td>Hugo Sachs Elektronik (HSE)</td>
			<td>59-9703</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heparin</td>
			<td>PISA</td>
			<td></td>
			<td>5000 UI</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HPLC Column (C18 100A 5U)</td>
			<td>Alltech</td>
			<td>98121213</td>
			<td>150 mm x 4.6 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hydrophilic Syringe Filter</td>
			<td>Millex</td>
			<td>SLLGR04NL</td>
			<td>4 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>IPL-4 Core System for Isolated Rabbit to Fetal Pig Lung, 230</td>
			<td>Hugo Sachs Elektronik (HSE)</td>
			<td>73-4296</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>IPL-4 Core System for Isolated Rabbit to Fetal Pig Lung, 230 V</td>
			<td>Hugo Sachs Elektronik (HSE)</td>
			<td>73-4296</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Jacketed Glass Reservoir for Buffer Solution, with Frit and Tubing, 6.0 L</td>
			<td>Hugo Sachs Elektronik (HSE)</td>
			<td>73-0322</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lauda Thermostatic Circulator, Type E-103, 230 V/50 Hz, 3 L Bath Volume, Temperature Range 20 to 150&#176;C</td>
			<td>Hugo Sachs Elektronik (HSE)</td>
			<td>73-0125</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Left Atrium Cannula for Rabbit with Basket, OD 5.9 mm</td>
			<td>Hugo Sachs Elektronik (HSE)</td>
			<td>73-4162</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Low Range Blood Pressure Transducer P75 for PLUGSYS Module</td>
			<td>Hugo Sachs Elektronik (HSE)</td>
			<td>73-0020</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Magnesium sulfate heptahydrate, MgSO4&#183;7H2O</td>
			<td>JT Baker</td>
			<td>10034-99-8</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microcentrifuge Tube</td>
			<td>Corning</td>
			<td>430909</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Negative Pressure Ventilation Control Option with Pressure Regulator for IPL-4</td>
			<td>Hugo Sachs Elektronik (HSE)</td>
			<td>73-4298</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>New Zeland rabbits</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PISABENTAL (Pentobarbital sodium)</td>
			<td>PISA</td>
			<td>Q-7833-215</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PLUGSYS Case, Type 603* 7</td>
			<td>Hugo Sachs Elektronik (HSE)</td>
			<td>73-0045</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PLUGSYS TCM Time Counter Module</td>
			<td>Hugo Sachs Elektronik (HSE)</td>
			<td>73-1750</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PLUGSYS Transducer Amplifier Module (TAM-A)</td>
			<td>Hugo Sachs Elektronik (HSE)</td>
			<td>73-0065</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PLUGSYS Transducer Amplifier Module (TAM-D)</td>
			<td>Hugo Sachs Elektronik (HSE)</td>
			<td>73-1793</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PLUGSYS VCM-4R Ventilation Control Module with Pressure Regulator</td>
			<td>Hugo Sachs Elektronik (HSE)</td>
			<td>73-1755</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Potassium chloride, KCl.</td>
			<td>JT Baker</td>
			<td>3040-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Potassium dihydrogen phosphate, KH2PO4</td>
			<td>JT Baker</td>
			<td>7778-77-0</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PROCIN (Xylacine clorhydrate)</td>
			<td>PISA</td>
			<td>Q-7833-099</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pulmonary Artery Cannula for Rabbit with Basket, OD 4.6 mm</td>
			<td>Hugo Sachs Elektronik (HSE)</td>
			<td>73-4161</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scalpel knife</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Serotonin 5-HT</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Servo Controller for Perfusion (SCP</td>
			<td>Hugo Sachs Elektronik (HSE)</td>
			<td>73-2806</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Snap Cap Microcentrifuge Tube</td>
			<td>Costar</td>
			<td>3620</td>
			<td>1.7 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium bicarbonate, NaHCO3</td>
			<td>sigma</td>
			<td>S6014</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium chloride, NaCl.</td>
			<td>sigma</td>
			<td>S9888</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical gloves No. 7 1/2</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical gloves No. 8</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Taygon tubes</td>
			<td>Masterflex</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tracheal Cannula for Rabbit, OD 5.0 mm</td>
			<td>Hugo Sachs Elektronik (HSE)</td>
			<td>73-4163</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

isolated lung perfusion system in the rabbit model

وقد استخدم نظام تغلغل الرئة المعزول على نطاق واسع في البحوث الرئوية، مما ساهم في توضيح الأعمال الداخلية للرئتين، سواء على المستوى الجزئي أو الكلي. هذه التقنية مفيدة في توصيف فسيولوجيا الرئة وعلم الأمراض من خلال قياس الأنشطة الأيضية ووظائف الجهاز التنفسي ، بما في ذلك التفاعلات بين المواد الدورة الدموية وآثار المواد المستنشقة أو المتغلغلة ، كما هو الحال في اختبار المخدرات. بينما في طرق المختبر تنطوي على تشريح وزراعة الأنسجة، ونظام التشوه الرئة السابقين فيفو معزولة يسمح للعمل مع جهاز وظيفي كامل مما يجعل من الممكن دراسة وظيفة الفسيولوجية المستمرة في حين إعادة التهوية والتشويش. ومع ذلك ، تجدر الإشارة إلى أن آثار عدم وجود ال الداخلي المركزي والصرف اللمفاوي لا يزال يتعين تقييمها بشكل كامل. يهدف هذا البروتوكول إلى وصف تجميع جهاز الرئة المعزول ، يليه الاستخراج الجراحي وزراعة الرئتين والقلب من المختبر التجريبية ، وكذلك عرض تقنية التخثر ومعالجة الإشارات للبيانات. متوسط صلاحية الرئة المعزولة يتراوح بين 5-8 ساعة؛ خلال هذه الفترة ، تزداد نفاذية الشعرية الرئوية ، مما يسبب وذمة وإصابات في الرئة. يتم قياس وظيفة النسيج الرئوي المحفوظ بمعامل الترشيح الشعري (Kfc) ، المستخدم لتحديد مدى الوذمة الرئوية عبر الزمن.

يسمح نظام تغلغل الرئة المعزول بمعالجة الأعضاء للخزعة ، وجمع العينات من التشوه ، وجمع البيانات في الوقت الفعلي للمعلمات الفسيولوجية. يمكن استخدام النظام المعزول لاختبار العديد من الفرضيات التي تنطوي على وظائف مختلفة وظواهر الرئة ، من النشاط الأيضي والانزيمي إلى تكوين الوذمة وفترات الحفظ...

Watch this Scientific Journal Video about Isolated Lung Perfusion System in the Rabbit Model at JoVE.com

Isolated Lung Perfusion System in the Rabbit Model

إعداد الرئة أرنب معزولة هو أداة معيار الذهب في البحوث الرئوية. يهدف هذا المنشور إلى وصف هذه التقنية كما تم تطويرها لدراسة الآليات الفسيولوجية والمرضية المشاركة في التفاعل في مجرى الهواء ، والحفاظ على الرئة ، والبحوث قبل السريرية في زرع الرئة والوذمة الرئوية.

عزل الرئة Perfusion النظام في نموذج الأرنب

The isolated lung perfusion system has been widely used in pulmonary research, contributing to elucidate the lungs&#39; inner workings, both micro and ...

هذه التقنية مفيدة في توصيف فسيولوجيا الرئة وعلم الأمراض عن طريق قياس الأنشطة الأيضية ووظيفة الجهاز التنفسي. يسمح نظام تغلغل الرئة المعزول بالعمل مع جهاز وظيفي كامل مما يجعل من الممكن دراسة وظيفة فسيولوجية مستمرة مع إعادة التهوية والتشويش. يمكن أن توفر هذه الطريقة نظرة ثاقبة في توصيف القدرات غير التنفسية للأنسجة الرئوية ، مثل النشاط الأيضي وأنشطة المكونات المختلفة مثل الضامة السنفية والأنسجة البطانية.لتبدأ، وتجميع جهاز العمل، وضمان أنه يحتوي على عمود الصلب الرئيسي التي شنت على لوحة قاعدة عقد الصدر الاصطناعي مع مقياس التنفس ومحول الوزن تقع فوق العمود وخلف لفائف التسخين مع فخ فقاعة. توصيل جميع المحولات إلى وحدة الالكترونيات المركزية وإعداد نظام التهوية إلى جانب الجهاز. بعد حلق الموقع الجراحي للأرانب المخدرة ، قم بعمل شق خط وسطي بطني يتراوح بين ثلاثة وخمسة سنتيمترات من عظم القص حتى الرقبة.استخدام مقص التشغيل لقطع الأمامي 2/3 من القصبة الهوائية بين حلقات الغضاريف. أدخل قنية القصبة الهوائية عيار خمسة ملليمترات من خلال الغشاء الليفي القصبي وإصلاح القنية بعناية مع خياطة حريرية 4-0. ضع ملقط أو ملاقط تحت القصبة الهوائية لضمان عدم انحناء القنية ضد القصبة الهوائية.قم بتوصيل مضخة التنفس بقنية القصبة الهوائية، وحدد حجم المد والجزر عند 10 ملليلترات للكيلوغرام الواحد، وابدأ التهوية بسرعة بعد استئصال القصبة الهوائية وقبل فتح الصدر للحفاظ على الضغط الإيجابي في الرئتين لمنع انهيار الرئة أثناء الجراحة. للوصول إلى تجويف الصدر، استخدم مشرط أو مقص لفتح جدار الصدر وإجراء استئصال القص الوسيط حتى الثلث العلوي من الصدر. عقد نصفي الصدر مفتوحة مع اثنين من السحب.توطين الخضار متفوقة وأدنى كافا والعلامة لهم مع المواضيع. قبل إستئصال الحيوان، حدد البطين الأيمن وحقن 1000 وحدة دولية لكل كيلوغرام من الهيبارين. مباشرة بعد الحقن، ligate فينا كافا متفوقة وأدنى مع الموضوع قبل حلقة.قطع من خلال ستيرني manubrium لتمديد القص المتوسط نحو قنية القصبة الهوائية، والإفراج عن القصبة الهوائية على كلا الجانبين من ربط الأنسجة. الآن استئصال القصبة الهوائية فوق قنية القصبة الهوائية وسحب بلطف حتى القنية في محور الجمجمة / caudal. بعد الاستئصال لحصاد كتلة القلب والرئة، استخدم تشريح الرقمية المباشرة أو مقص الربيع لفصل النسيج الضام وإزالة الرئتين من الصدر.بعد ذلك ، تشريح الأوعية والمريء. ارفع الرئتين المعزولتين من الصدر وضع الرئتين بعناية فوق شاش معقم على طبق بيتري. لمنع atelectasis، تهوية الرئتين باستخدام التهوية الضغط الإيجابي مع ضغط الزواية نهاية إيجابية تعيين في سنتيمترين من عمود الماء.قطع البطينين قبالة القلب على مستوى الأخدود البطين. بعد فتح البطينين، أدخل قنية الشريان الرئوي عبر الشريان الرئوي الأيمن وقنية الأذين الأيسر من خلال الصمام التاجي إلى الأذين الأيسر. إصلاح cannulae مع خياطة الحرير 4-0 بما في ذلك الأنسجة المحيطة بها في أربطة الشريان الرئوي والأذين الأيسر لتجنب التفكك الهيكلي.حقن 250 ملليلتر من محلول متساوي التوتر المالحة من خلال القنية الشريانية لطرد الدم المتبقي من السرير الوعائي. لإعداد التشوه، ضع الرئتين المعزولتين بعناية في غرفة الرئة. إرفاق القصبة الهوائية إلى محول على غطاء الغرفة وربط الأوعية المعلبة إلى نظام التخثر، ثم إغلاق وتأمين الغرفة مع القفل الدوار.بعد ذلك، نعلق غطاء الغرفة والتبديل على stopcock للتحول من التهوية الضغط الإيجابي إلى السلبي. Perfuse الرئتين مع 200 ملليلتر من perfusate الاصطناعي خالية من الدم بدءا من تدفق في ثلاثة ملليلتر في الدقيقة الواحدة للكيلوغرام الواحد، ثم بطء تكثيف تدفق أكثر من خمس دقائق إلى خمسة ملليلتر في الدقيقة الواحدة للكيلوغرام الواحد. وللدقائق الخمس التالية، اسمح للتدفق بالوصول إلى ثمانية ملليلترات في الدقيقة للكيلوغرام الواحد، يليه تدفق أقصى قدره 10 ملليلترات في الدقيقة للكيلوغرام لمدة خمس دقائق.تهوية الرئتين مع الهواء المرطب على تردد 30 نبضة في الدقيقة الواحدة، وحجم المد والجزر من 10 ملليلتر للكيلوغرام الواحد وضغط انتهاء الصلاحية من سنتيمترين من عمود الماء. لتحقيق المنطقة ثلاثة شروط، انتظر لمدة 10 إلى 15 دقيقة للحصول على توازن يتميز بحالة الجاذبية ISO، وضمان أن الضغط الوريدي مستقر في جميع أنحاء السجل. تأكد من أن وزن الرئة لا يزال ثابتا وأن تكون الضغوط الشريانية والأصطنائية اليسرى مستقرة لتحقيق المنطقة الثالثة من الشروط لفتح أكبر عدد ممكن من الأوعية الرئوية والحفاظ على محتوى السرير الأوعية الدموية الدقيقة أثناء التجربة.للتحكم الإلكتروني ومعالجة الإشارات، تأكد من أن تدفق الجهاز التنفسي، وتغيرات الوزن، وضغط الأوعية الدموية الدقيقة، وحجم المد والجزر، ومقاومة الأوعية الدموية، من بين أمور أخرى، مسجلة على وحدة إلكترونيات مركزية متعددة تدمج الإشارات القادمة من المحولات وتعرضها على نظام التقييم. تم تقييم تركيز 5-HT وأوكسيديز أحادي الأمين المشاركة في عملية التمثيل الغذائي للرئة و نفاذية الأوعية الدموية. بلغ تركيز 5-HT وأوكسيديز أحادي الأمين ذروته بعد 15 دقيقة من الحفظ ثم انخفض خلال الساعات الست التالية.بعد ذلك ، أظهرت مستويات التشوه زيادة غير ذات دلالة إحصائية تصل إلى 24 ساعة. وأشارت معدلات إطلاق 5-HT وأوكسيديز أحادي الأمين إلى أنه خلال الساعة الأولى من الحفظ ، ارتفعت مستويات 5-HT أعلى من أوكسيداز مونوامين وانخفضت في غضون ست ساعات بعد استعادتها من قبل الخلايا البطانية والصفائح الدموية ، وكذلك استقلاب أحادي الأمين بوساطة الأوكسيديز. وازداد نشاط الاندوبتيداز المحايد في تسع ساعات ثم انخفض وظل مستقرا خلال 12 إلى 24 ساعة.انخفض نشاط إنزيم تحويل الأنجيوتنسين بعد أربع ساعات ، ثم زاد وظل مستقرا خلال الوقت حتى 24 ساعة. تم تقييم تأثير الحفاظ الرئوي في نفاذية الشعرية لمدة 24 ساعة ، مما يشير إلى أن الرئة المتغلغلة عانت من زيادة تدريجية في معامل الترشيح الشعري. تم فحص تأثير الإضافات المختلفة في نفاذية الشعرية لنظام تغلغل الرئة المعزول في ظل ظروف متنوعة ولوحظت زيادة قصوى في نفاذية الأتروبين.أهم مناورة هي وضع الرئتين بشكل صحيح في غرفة الرئة وربط الأوعية المعلبة بنظام التخثر. تمتد آثار هذه التقنية نحو التفاعلات بين المواد الدورة الدموية وآثار المواد المستنشقة أو المتغلغلة كما هو الحال في اختبار الأدوية وأمراض الرئة المختلفة.

Research

JoVE Journal

Medicine

Microsurgical Venous Pouch Arterial-Bifurcation Aneurysms in the Rabbit Model: Technical Aspects

الحقيبة المجهرية وريدي شرياني ، تمدد الأوعية الدموية في مفرق النموذجي الأرنب : الجوانب الفنية

For ruptured human cerebral aneurysms endovascular embolization has become an equivalent alternative to aneurysm clipping.1 However, large clinical trials ...

NADH Fluorescence Imaging of Isolated Biventricular Working Rabbit Hearts

NADH الإسفار التصوير من البطينين متفرقة العامل قلوب الأرنب

Since its inception by Langendorff1, the isolated perfused heart remains a prominent tool for studying cardiac physiology2. However, it is not well-suited ...

Optimized System for Cerebral Perfusion Monitoring in the Rat Stroke Model of Intraluminal Middle Cerebral Artery Occlusion

الأمثل نظام لرصد الإرواء الدماغي في نموذج الفئران من السكتة الدماغية داخل اللمعة انسداد الشريان الدماغي الأوسط

The translational potential of pre-clinical stroke research depends on the accuracy of experimental modeling. Cerebral perfusion monitoring in animal ...

The Rabbit Blood-shunt Model for the Study of Acute and Late Sequelae of Subarachnoid Hemorrhage: Technical Aspects

الأرنب نموذج الدم تحويلة لدراسة الحاد وعقابيل في وقت متأخر نزيف تحت العنكبوتية: الجوانب التقنية

Early brain injury and delayed cerebral vasospasm both contribute to unfavorable outcomes after subarachnoid hemorrhage (SAH). Reproducible and ...

Method of Isolated Ex Vivo Lung Perfusion in a Rat Model: Lessons Learned from Developing a Rat EVLP Program

Method of Isolated Ex Vivo Lung Perfusion in a Rat Model: Lessons Learned from Developing a Rat EVLP Program

طريقة معزولة<em&gt; فيفو السابقين</em&gt; الإرواء الرئة في الفئران نموذج: الدروس المستفادة من تطوير برنامج EVLP الجرذ

The number of acceptable donor lungs available for lung transplantation is severely limited due to poor quality. Ex-Vivo Lung Perfusion (EVLP) has allowed ...

Isolated Hepatic Perfusion as a Treatment for Liver Metastases of Uveal Melanoma

معزولة كبدي الإرواء كعلاج للالانبثاث الكبد من العنبية الميلانوما

Isolated hepatic perfusion (IHP) is a procedure where the liver is surgically isolated and perfused with a high concentration of the chemotherapeutic ...

Open Tracheostomy Gastric Acid Aspiration Murine Model of Acute Lung Injury Results in Maximal Acute Nonlethal Lung Injury

فتح القصبة الهوائية المعدة حمض الطموح فأري موديل الحاد الرئة إصابة النتائج في القصوى الحاد غير قاتل الرئة الإصابات

Acid pneumonitis is a major cause of sterile acute lung injury (ALI) in humans. Acid pneumonitis spans the clinical spectrum from asymptomatic to acute ...

Method of Direct Segmental Intra-hepatic Delivery Using a Rat Liver Hilar Clamp Model

طريقة التسليم المباشر القطاعي البينية الكبد باستخدام نموذج الفأر الكبد نقيري المشبك

Major hepatic surgery with inflow occlusion, and liver transplantation, necessitate a period of warm ischemia, and a period of reperfusion leading to ...

Isometric Contractility Measurement of the Mouse Mesenteric Artery Using Wire Myography

متساوي القياس كونتراكتيليتي القياس الشريان المساريقي العلوي الماوس باستخدام أسلاك ميوجرافي

The wire myograph technique is used to assess the contractility of vascular smooth muscles in response to depolarization, GPCR agonists/inhibitors and ...

Transthoracic Echocardiographic Examination in the Rabbit Model

فحص صدى القلب عبر الصدر في نموذج الأرنب

Large animal models such as the rabbit are valuable for translational preclinical research. Rabbits have a similar cardiac electrophysiology compared to ...