Name: microelectrode array recording of sinoatrial node firing rate to identify intrinsic cardiac pacemaking defects in mice
Uploaded: 2021-07-05T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Microelectrode Array Recording of Sinoatrial Node Firing Rate to Identify Intrinsic Cardiac Pacemaking Defects in Mice at JoVE.com

Detta arbete finansierades av National Institutes of Health, bidragsnumren R01NS100954 och R01NS099188.

Alla experimentella förfaranden som beskrivs här har utförts i enlighet med riktlinjerna från National Institutes of Health (NIH), som godkänts av Institutional Animal Care and Use Committee (IACUC) vid Southern Methodist University.
1. Beläggning av multielektrodmatrisen (MEA) för inspelning
<ol><li>Gör 25 mM boratbuffert.<ol>
<li>Lös upp 0,953 g Na2B4O7·10 H2O i 80 ml destillerat vatten.</li>
		<li>Justera pH-talet till 8,4 med HCl och ...

Att öva och behärska SAN-dissekeringsprocessen är absolut nödvändigt eftersom vävnaden är bräcklig och frisk vävnad är nödvändig för en framgångsrik inspelning. Under SAN dissekering är korrekt orientering avgörande för att få rätt region av vävnad. Hjärtats ursprungliga orientering kan dock lätt gå förlorad under dissekeringsprocessen, vilket komplicerar denna strävan. För att säkerställa rätt vänster-högerorientering bör atria därför inspekteras visuellt. Vanligtvis tenderar det högra...

Hjärtat är ett komplext organ som styrs av både hjärt-inneboende och extrinsiska influenser som de som har sitt ursprung i hjärnan. Den sinoatrial noden (SAN) är en definierad region i hjärtat som rymmer pacemakercellerna (även kallade sinoatrial celler, eller SA-celler) som ansvarar för initiering och fortlevnad av däggdjurs hjärtslag1,2. Den inneboende hjärtfrekvensen är den hastighet som drivs av pacemakercellerna utan påverkan av andra hjärt- eller neurohumorala influenser, men traditionella mått på hjärtfrekvens hos människor och levande djur, såsom elektrokardiogram, återspeglar både pacemaker och neurala influenser på hjärtat. Det mest anmärkningsvärda neurala inflytandet på SA-celler är från det autonoma nervsystemet, som ständigt modulerar bränningsmönster för att uppfylla kroppens fysiologiska krav3. Stödja denna idé, både sympatiska och parasympatiska projektioner kan hittas nära SAN4. Det inneboende hjärtnervsystemet (ICNS) är en annan viktig neural påverkan där ganglionated plexi, särskilt i rätt atria, innervate och reglera aktiviteten hos SAN5,6.
Att förstå pacemaking underskott är kliniskt viktigt, eftersom dysfunktion kan lindra många hjärtsjukdomar, samt bidra till risken för andra komplikationer. Sjuk sinus syndrom (SSS) är en kategori av sjukdomar som kännetecknas av dysfunktion i sinoatrial noden som hindrar korrekt pacemaking7,8. SSS kan presentera med sinus bradykardi, sinus pauser, sinus gripande, sinoatrial exit block och alternerande bradyarrythmias och takyarrhythmias9 och kan leda till komplikationer inklusive ökad risk för embolisk stroke och plötslig död8,10. De med Brugada syndrom, en hjärtsjukdom som kännetecknas av ventrikulär förmaksflimmer med en ökad risk för plötslig hjärtdöd, har större risk för arytmogena händelser om de också har komorbid SAN dysfunktion11,12. Sinoatrie dysfunktion kan också ha fysiologiska konsekvenser bortom hjärtat. Till exempel har SSS observerats för att utlösa anfall hos en patient på grund av cerebral hypoperfusion13.
För att identifiera sinoatrial pacemaking underskott, inneboende hjärtfrekvenser måste bestämmas genom att mäta san verksamhet utan påverkan av autonoma nervsystemet eller humorala faktorer. Kliniskt kan detta approximeras av farmakologisk autonom blockad14, men samma teknik kan också tillämpas i däggdjursmodeller för att studera inneboende hjärtfunktion15,16. Medan detta tillvägagångssätt blockerar en stor del av bidragande neurala influenser och möjliggör hjärtundersökning in vivo, eliminerar det inte helt alla extrinsiska influenser på hjärtat. En annan forskningsteknik som används för att studera inneboende hjärtfunktion i djurmodeller är isolerade hjärtinspelningar med Langendorff-perfused hjärtan, som vanligtvis involverar mätningar med hjälp av elektrogram, pacing eller epicardial multielektrod arrayer17,18,19,20. Medan denna teknik är mer specifik för hjärtfunktion eftersom det innebär att ta bort hjärtat från kroppen, kan mätningarna fortfarande påverkas av mekano-elektriska autoregulatoriska mekanismer som kan påverka inneboende pulsmätningar21. De isolerade hjärtinspelningarna kan också fortfarande påverkas av autonom reglering genom ICNS5,6,22,23. Dessutom kan det vara svårt att upprätthålla en fysiologiskt relevant temperatur i hjärtat, vilket är avgörande för hjärtfunktionsmätningar, i isolerade hjärtmetoder20. En mer direkt metod för att studera SAN-funktion är att specifikt isolera SAN-vävnad och mäta dess aktivitet. Detta kan åstadkommas genom SAN-remsor (isolerad SAN-vävnad) eller isolerade SAN pacemakerceller24,25. Båda kräver en hög grad av teknisk utbildning, eftersom SAN är en mycket liten och mycket definierad region, och cellisolering utgör en ännu större utmaning eftersom dissociation kan skada cellens allmänna hälsa om den inte utförs korrekt. Dessutom kräver dessa tekniker expertelektrofiologiska färdigheter för att framgångsrikt registrera från vävnaden eller cellerna med hjälp av enskilda registrering av mikroelektroder.
I det här protokollet beskriver vi en teknik för att spela in SAN in vitro med hjälp av en mikroelektrod array (MEA) för att erhålla inneboende pulsmätningar. Detta tillvägagångssätt har fördelen att göra mycket specifika elektrofysiologiska inspelningar tillgängliga för forskare som saknar intensiva elektrofysiologiska färdigheter. MEAs har tidigare använts för att studera kardiomyocyt funktion i primära kardiomyocyt kulturer26,27,28,29,30,31,32,hjärt täcker33,34,35,36,37, 38,39,och vävnad hela fästen40, 41,42,43,44,45,46,47. Tidigare arbete har också gjorts för att undersöka fältpotentialer iSAN-vävnad 41,42. Här tillhandahåller vi en metodik för att använda MEA för att registrera och analysera murin inneboende SAN-avfyrningshastigheter. Vi beskriver också hur denna teknik kan användas för att testa farmakologiska effekter av läkemedel på SAN inneboende avfyrningshastigheter genom att tillhandahålla ett provexperiment som visar effekterna av 4-aminopyridin (4-AP), en spänning-gated K+ kanalblockerare. Med hjälp av definierade anatomiska landmärken kan vi noggrant registrera SAN utan att behöva utföra de omfattande vävnadsdesektioner eller cellisoleringar som krävs i andra metoder. Även om mea kan vara kostnadsöverkomliga, ger inspelningarna mycket specifika och tillförlitliga mått på pacemaking som kan användas i ett stort antal kliniska och fysiologiska forskningsapplikationer.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>4-Aminopyridine</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>A78403-25G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>22 gauge syringe needle</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>14-826-5A</td>
			<td>Used for dissection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>23 gauge syringe needle</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>14-826-6C</td>
			<td>Used for dissection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>60mm Petri Dishes</td>
			<td>Genesee Scientific</td>
			<td>32-105G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>500mL Pyrex Bottle</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>06-414-1C</td>
			<td>Used to store solutions</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1000 mL Pyrex Bottle</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>06-414-1D</td>
			<td>Used to store solutions</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bone Forceps</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>16060-11</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Calcium chloride dihydrate (CaCl2&#183;2H2O)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>C5080-500G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Carbogen (95% O2, 5% CO2)</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Castroviejo Scissors, 4&#34;</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>15024-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>D-(+)-Glucose</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>G7021-1KG</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Data Acquisition PC</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>CPU: Intel Xeon or Intel Core i7, Memory: 8GB, HDD: 1TB, Graphic Card: NVIDIA or On-board, Screen: 1920x1080</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dissection Microscope</td>
			<td>Jenco</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dissecting Pins</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>26002-20</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dumont #2 Laminectomy Forceps</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>11223-20</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dumont #55 Forceps</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>11295-51</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>&#160;Extra Fine Graefe Forceps</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>11152-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass Chamber</td>
			<td>Grainger</td>
			<td>49WF30</td>
			<td>Used for mouse euthanization</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Harp Anchor Kit</td>
			<td>Warner Instruments</td>
			<td>&#160;SHD-22CL/15 WI 64-0247</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HCl</td>
			<td>Fisher Chemicals</td>
			<td>SA48-4</td>
			<td>Used for pH balancing</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hemostat</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>13013-14</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heparin</td>
			<td>Aurobindo Pharma Limited IDA, Pashamylaram</td>
			<td>NDC 63739-953-25</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HEPES</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>H3375-250G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Inverted Microscope</td>
			<td>Motic</td>
			<td>AE2000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>Patterson Veterinary</td>
			<td>07-893-1389</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lab Tape</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>15-950</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Light for Dissection Microscope</td>
			<td>Dolan-Jenner</td>
			<td>MI150DG 660000391014</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Magesium chloride (MgCl2)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>208337-100G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MED64 Head Amplifier</td>
			<td>MED64</td>
			<td>MED-A64HE1S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MED64 Main Amplifier</td>
			<td>MED64</td>
			<td>MED-A64MD1A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MED64 Perfusion Cap</td>
			<td>MED64</td>
			<td>MED-KCAP01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MED64 Perfusion Pipe Holder Kit</td>
			<td>MED64</td>
			<td>MED-KPK02</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MED64 ThermoConnector</td>
			<td>MED64</td>
			<td>MED-CP04</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mesh</td>
			<td>&#160;Warner Instruments</td>
			<td>640246</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microelectrode array (MEA)</td>
			<td>Alpha Med Scientific</td>
			<td>MED-R515A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mobius Software</td>
			<td>WitWerx Inc.</td>
			<td></td>
			<td>Specific software for the MED64</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaOH</td>
			<td>Fisher Chemicals</td>
			<td>S320-500</td>
			<td>Used for pH balancing</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Normal Saline</td>
			<td>Ultigiene</td>
			<td>NDC 50989-885-17</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Paint Brush</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>NC1751733</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Parafilm</td>
			<td>Genesee Scientific</td>
			<td>PM-996</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Peristaltic Pump</td>
			<td>Gilson</td>
			<td>F155009</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Peristaltic Pump Tubing</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>14-171-298</td>
			<td>1/8&#39;&#39; Interior Diameter</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Polyethyleneimine</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>P3143</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Potassium chloride (KCl)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>P9333-500G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Potassium phosphate monobasic (KH2PO4)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>P5655-500G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium Bicarbonate</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>S6297</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium chloride (NaCl)</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>S671-3</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sylgruard Elastomer Kit</td>
			<td>Dow Corning</td>
			<td>184 SIL ELAST KIT 0.5KG</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium Phosphate Monobasic</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>S6566</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium tetraborate</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>S9640</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical Scissors</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>14074-09</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Transfer Pipets (3mL graduated)</td>
			<td>Samco Scientific</td>
			<td>225</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

microelectrode array recording of sinoatrial node firing rate to identify intrinsic cardiac pacemaking defects in mice

Den sinoatrial noden (SAN), som ligger i rätt atrium, innehåller pacemaker celler i hjärtat, och dysfunktion i denna region kan orsaka takykardi eller bradykardi. Tillförlitlig identifiering av hjärt pacemaking defekter kräver mätning av inneboende hjärtfrekvenser genom att till stor del förhindra påverkan av det autonoma nervsystemet, som kan maskera hastighet underskott. Traditionella metoder för att analysera inneboende hjärt pacemaker funktion inkluderar droginducerad autonoma blockad för att mäta in vivo hjärtfrekvenser, isolerade hjärtinspelningar för att mäta inneboende hjärtfrekvenser och sinoatrial remsa eller encelliga patch-clamp inspelningar av sinoatrial pacemaker celler för att mäta spontana åtgärder potentiella avfyrning priser. Dessa mer traditionella tekniker kan dock vara tekniskt utmanande och svåra att utföra. Här presenterar vi en ny metod för att mäta inneboende hjärtbränningshastighet genom att utföra mikroelektrodmatrisinspelningar (MEA) av hela berget sinoatrienodpreparat från möss. MeAs består av flera mikroelektroder ordnade i ett rutnätsliknande mönster för registrering av in vitro extracellulära fältpotentialer. Metoden som beskrivs häri har den kombinerade fördelen att vara relativt snabbare, enklare och mer exakt än tidigare metoder för att registrera inneboende hjärtfrekvenser, samtidigt som det möjliggör enkla farmakologiska förhör.

Efter att ha tillåtit vävnaden att acklimatisera sig i skålen i 15 min registreras 10 enminspår. Vårt nuvarande protokoll registrerar aktivitet i över en timme, men vi har registrerat stabila avfyrningsmönster för ≥4 h i opublicerade data som inte visas här. Om en experimentell förberedelse är bra för datainsamling bör varje inspelningskanal uppvisa konsekventa och jämnt försedda återkommande vågformer (dvs. spikar) av enhetlig form för en viss kanal (figur 11D). Dessa v?...

Watch this Scientific Journal Video about Microelectrode Array Recording of Sinoatrial Node Firing Rate to Identify Intrinsic Cardiac Pacemaking Defects in Mice at JoVE.com

Microelectrode Array Recording of Sinoatrial Node Firing Rate to Identify Intrinsic Cardiac Pacemaking Defects in Mice

Detta protokoll syftar till att beskriva en ny metod för att mäta inneboende hjärtbränningshastighet med hjälp av mikroelektrod array registrering av hela sinoatrial nodvävnad för att identifiera pacemaking defekter hos möss. Farmakologiska medel kan också införas i denna metod för att studera deras effekter på inneboende pacemaking.

Mikroelektrod arrayinspelning av sinoatrie nodavfyrningshastighet för att identifiera inneboende hjärt pacemaking defekter hos möss

The sinoatrial node (SAN), located in the right atrium, contains the pacemaker cells of the heart, and dysfunction of this region can cause tachycardia or ...

Att mäta inneboende hjärtfrekvens är en viktig indikator på hjärthälsa. Denna teknik mäter exakt denna hastighet samtidigt som majoriteten av förvirrande influenser på sinoatrial noden utesluts. MEA-registrering av inneboende hjärtfrekvens fångar exakta avfyrningshastighetsdata som liknar encelliga inspelningar utan omfattande elektrofysiologiutbildning.Individer som använder denna teknik kan kämpa för att få friska vävnadspreparat i tidiga experiment, så öva dissekeringen och optimera buffertarna och datainsamlingsinställningarna innan du börjar den verkliga datainsamlingen. I proceduren demonstreras läkare Man Si och Praveen Kumar, postdoktorer i mitt laboratorium. Börja med att hålla huden på den avlivade musen med en hemostat och använd kirurgisk sax för att göra ett tvärgående snitt i huden precis under botten av bröstkorgen från vänster kostnadsbåge till rätt kostnadsbåge.Använd kirurgisk sax för att skära upp bukhinnan och separera försiktigt levern från membranet utan att hugga levern för att förhindra överdriven blödning. Inkapsla membranet längs bröstkorgen för att exponera brösthålan. Använd den kirurgiska saxen för att skära ribcageets sidoväggar från kanterna på kostnadsbågarna upp till nyckelbenen för att exponera hjärtat och använd sedan en 23 gauge spruta nål för att fästa ribcage över axeln.Använd en överföringspipett för att släppa varm hepariniserad komplett Tyrodes lösning på hjärtat för att hålla den fuktig. Håll lungorna med extra fina Graefe-tång och skär luftstrupen med kirurgisk sax för att ta bort lungorna. För att ta bort hjärtat, håll hjärtats spets med extra fina Graefe-tångar och skär aortan och sämre vena cava med kirurgisk sax.Överför hjärtat till en Petri-maträtt som innehåller härdad silikon elastomer och använd en överföringspipett för att bada hjärtat med två till tre milliliter varm hepariniserad komplett Tyrodes lösning. Fäst hjärtats spets på skålen med en dissekeringsstift. Håll den sämre vena cava med Dumont 2 laminectomy tång.Sätt in en 22 gauge spruta nål genom den sämre och överlägsna vena cava för att hitta deras position i rätt atrium, som också identifierar den ungefärliga positionen för sinoatrial noden. Håll rätt förmaksbihang med Dumont 2 laminectomy tång och sätt en dissekering stift genom rätt förmaksflimmer bihang för att hålla den på plats. Upprepa samma procedur för det vänstra förmaksbihanget och ta sedan bort sprutans nål som sträcker sig över vena cavae.Använd Castroviejo sax för att ta bort hjärtats spets genom att göra ett tvärgående snitt över ventriklarna för att frigöra blodet från hjärtat och tvätta sedan hjärtat genom att lägga till varm hepariniserad komplett Tyrodes lösning. Använd Castroviejo sax för att skära längs atrioventricular septum tills atria separeras från ventriklarna och hålla snittet närmare ventrikeln. Skär längs det interarteriala septumet för att ta bort det vänstra atriumet.Placera dissekeringsstiften i periferin på rätt atrium för att få det att ligga platt. Avlägsna eventuellt återstående fett, kärl eller vävnad från atriumet med castroviejo-saxen och lokalisera sinoatrialnoden i rätt atrium. Tillsätt Tyrodes lösning till ingångslösningsmodellen och slå på flödet av karbongas för att syresätta Tyrodens lösning.Ställ in peristaltic pumpen på 25 RPM, vilket ger ett flöde på två milliliter per minut. Efter start av pumpen, se till att bufferten inte läcker från systemet och ställ in temperaturregulatorn på 37 grader Celsius. Använd Dumont 55 tång för att överföra den dissekerade vävnaden från den dissekerande Petri-skålen till mikroelektrodmatrisnätet.Placera försiktigt vävnaden med en mjuk pensel för att överlagra elektrodnätets sinoatrialnodområde. Placera sedan nätet över vävnaden med hjälp av bentången eller några böjda tångar. Använd bentångarna och placera harpankaret på nätet för att hålla allt på plats.Ordna matrisen microelectrode på kopplingsplattan. Placera försiktigt perfusionslocket på mikroelektrodmatrisen utan att störa harpaskivan och säkra perfusionsgapet med tejp. Slå på förstärkaren och konfigurera ett arbetsflöde för inspelningen i programvaran.Välj beat_recording. moflo mall. Öppna den och ställ in antalet spår, spårlängd, spårintervall, ingångsspänning, samplingshastighet och andra inspelningsparametrar enligt önskade inspelningsförhållanden.Klicka på post- och uppspelningsknappen för att starta inspelningen och hämta data i 10 spår av en minuts varaktighet med två minuters intervall mellan spåren. Pausa pumpen och byt pumpens inflödesrör från den normala inspelningslösningen till Tyrodes lösning som innehåller önskat läkemedel. Starta om pumpen och återuppta inspelningen.När den läkemedelsinfuserade Tyrodes lösning har nått vävnaden, registrera 10 spår på samma sätt som tidigare för baslinjeinspelningarna. Ta en slutlig bild av vävnadens placering på mikroelektrodmatrisen. Öppna den sparade inspelade datafilen i analysprogramvaran för beatfrekvensanalys.Klicka på uppspelningen och låt hela inspelningen köras för datavisualisering och tilldela sedan lämpliga analysparametrar. Välj de kanaler som ska inkluderas i analysen och ställ in önskade amplitud maxima eller amplitud minima tröskelvärden för automatiserad vågform topp identifiering. Klicka på uppspelningsikonen igen för att köra datauppsättningen igen och bekräfta att analysparametrarna är lämpliga för en extraktion av toppar.För analys, identifiera de tre mest stabila på varandra följande spår som uppvisar en stabil slaghastighet för varje spår över de flesta kanaler under experimentets baslinjeperiod och ytterligare tre stabila spår i följd under läkemedelsexponeringsperioden. Klicka på uppspelnings- och postikonen för att starta analysen. Datan samlades in från en 45-dagars gammal manlig vild-typ svart schweizisk mus för sinoatrial nod beat frekvens mätning.Vågformerna med olika former och amplituder observerades i olika kanaler och alla kanaler visade identiska interspike intervaller och avfyrningsfrekvenser. Graden av vävnadskontakt med elektroden kan dock också påverka vågformsegenskaperna såsom amplitud. Från de 10 inspelade spåren valdes de tre på varandra följande kanalerna med stabil slagfrekvens och interspike intervall för vidare analys.De dåliga extraherade spikmönstren bör vara frånvarande, men om de finns påverkas de antingen av buller eller instabila. Vågformerna som motsvarar enskilda hjärtslag återspeglar inneboende hjärt pacemaking aktivitet. Mikroelektrodmatsystemet möjliggör enkel applicering av läkemedelsagenter för att analysera de farmakologiska effekterna.Den inneboende avfyrningshastigheten för utvalda tre spår i alla 64 kanaler visade sig vara cirka 320 slag per minut i provtagningsdata. Införandet av 4-aminopyrimidin ökade interspike intervallen som förväntat, vilket minskade slagfrekvensen från 320 till 210 slag per minut. För att samla in tillförlitliga data för analys är det viktigt att bekräfta att vävnad är frisk under registreringen genom att verifiera att spåren är stabila och uppfyller standardkriterierna.MEAs kan användas för att registrera hjärtaktivitet i andra delar av hjärtat, vilket möjliggör detaljerad regionspecifik karakterisering som är mottaglig för att studera effekterna av genetisk och farmakologisk manipulation.

Research

JoVE Journal

Medicine

A Strategy to Identify de Novo Mutations in Common Disorders such as Autism and Schizophrenia

En strategi för att identifiera de novo mutationer i vanliga sjukdomar som autism och schizofreni

There are several lines of evidence supporting the role of de novo mutations as a mechanism for common disorders, such as autism and schizophrenia. First, ...

Cardiac Stress Test Induced by Dobutamine and Monitored by Cardiac Catheterization in Mice

Hjärt stresstest inducerad av dobutamin och övervakas av hjärtkateterisering i möss

Dobutamine is a &beta;-adrenergic agonist with an affinity higher for receptor expressed in the heart (&beta;1) than for receptors expressed in the ...

A Method to Study the Impact of Chemically-induced Ovarian Failure on Exercise Capacity and Cardiac Adaptation in Mice

En metod för att undersöka effekterna av Kemiskt inducerad ovariesvikt på fysisk kapacitet och Hjärt-anpassning hos möss

The risk of cardiovascular disease (CVD) increases in post-menopausal women, yet, the role of exercise, as a preventative measure for CVD risk in ...

Multi-electrode Array Recordings of Human Epileptic Postoperative Cortical Tissue

Multi-elektrod Array Inspelningar av Human Epileptic Postoperativ kortikalvävnad

Epilepsy, affecting about 1% of the population, comprises a group of neurological disorders characterized by the periodic occurrence of seizures, which ...

Cardiac Catheterization in Mice to Measure the Pressure Volume Relationship: Investigating the Bowditch Effect

Hjärtkateterisering i möss för att mäta trycket Volym Förhållande: Undersöka Bowditch Effect

Animal models that mimic human cardiac disorders have been created to test potential therapeutic strategies. A key component to evaluating these ...

Myocardial Infarction in Neonatal Mice, A Model of Cardiac Regeneration

Hjärtinfarkt i neonatala möss, en modell av Cardiac Regeneration

Myocardial infarction induced by coronary artery ligation has been used in many animal models as a tool to study the mechanisms of cardiac repair and ...

A Closed-chest Model to Induce Transverse Aortic Constriction in Mice

En stängd-bröst modell att inducera tvärgående aorta förträngning i möss

Research on cardiac hypertrophy and heart failure is frequently based on pressure overload mouse models induced by TAC. The standard procedure is to ...

Adeno-Associated Virus-Mediated Delivery of CRISPR for Cardiac Gene Editing in Mice

Adeno-associerade Virus-medierad leverans av CRISPR för hjärt gen redigering i möss

The clustered, regularly interspaced, short, palindromic repeat (CRISPR) system has greatly facilitated genome engineering in both cultured cells and ...

Autonomic Function Following Concussion in Youth Athletes: An Exploration of Heart Rate Variability Using 24-hour Recording Methodology

Autonom funktion efter hjärnskakning i Ungdom idrottare: en utforskning av hjärtfrekvensvariationen med 24-timmars inspelning metod

Participation in organized sports makes a significant contribution to youth development, but places youth at a higher risk for sustaining a concussion. To ...

Transdermal Measurement of Glomerular Filtration Rate in Mice

Transdermal mätning av glomerulär filtrationshastighet hos möss

Transdermal analysis of glomerular filtration rate (GFR) is an established technique that is used to assess renal function in mouse and rat models of ...