Name: co-culture of glutamatergic neurons and pediatric high-grade glioma cells into microfluidic devices to assess electrical interactions
Uploaded: 2021-11-17T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Co-culture of Glutamatergic Neurons and Pediatric High-Grade Glioma Cells Into Microfluidic Devices to Assess Electrical Interactions at JoVE.com

इस काम Satt Conectus कार्यक्रम, Fondation de l'Université de Strasbourg, «J'ai demandé la lune», «Une roulade pour Charline», «LifePink», «Frank,Rayon de Soleil» और «Semeurs d'Etoile» संघों से अनुदान द्वारा समर्थित था। हम इस शोध में उनके योगदान और उनके समर्थन के लिए एचजीजी से प्रभावित बच्चों और परिवारों को धन्यवाद देते हैं।

इस प्रोटोकॉल के लिए, मानव सामग्री के उपयोग से संबंधित मान्यता संख्या डीसी -2020-4203 है।
1. Microfluidic डिवाइस निर्माण, तैयारी और उपचार
<ol><li>पारंपरिक फोटोलिथोग्राफी तकनीकों का उपयोग करके SU-8 मोल्ड्स का निर्?...

<ol>
	<li>Mackay, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Integrated+molecular+meta-analysis+of+1,000+pediatric+high-grade+and+diffuse+intrinsic+pontine+glioma.">Integrated molecular meta-analysis of 1,000 pediatric high-grade and diffuse intrinsic pontine glioma.</a> Cancer Cell. 32 (4), 520-537 (2017).</li><li>Ostrom, Q. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Alex's+lemonade+stand+foundation+infant+and+childhood+primary+brain+and+central+nervous+system+tumors+diagnosed+in+the+United+States+in+2007-2011.">Alex's lemonade stand foundation infant and childhood primary brain and central nervous system tumors diagnosed in the United States in 2007-2011.</a> Neuro-Oncology. 16, 1-36 (2015).</li><li>Blandin, A. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hypoxic+environment+and+paired+hierarchical+3D+and+2D+models+of+pediatric+H3.3-mutated+gliomas+recreate+the+patient+tumor+complexity.">Hypoxic environment and paired hierarchical 3D and 2D models of pediatric H3.3-mutated gliomas recreate the patient tumor complexity.</a> Cancers (Basel). 11 (12), 1875 (2019).</li><li>Monje, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Synaptic+communication+in+brain+cancer.">Synaptic communication in brain cancer.</a> Cancer Research. 80 (14), 2979-2982 (2020).</li><li>Mount, C. W., Yal&#231;&#305;n, B., Cunliffe-Koehler, K., Sundaresh, S., Monje, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Monosynaptic+tracing+maps+brain-wide+afferent+oligodendrocyte+precursor+cell+connectivity.">Monosynaptic tracing maps brain-wide afferent oligodendrocyte precursor cell connectivity.</a> eLife. 18 (8), 49291 (2019).</li><li>Venkatesh, H. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Electrical+and+synaptic+integration+of+glioma+into+neural+circuits.">Electrical and synaptic integration of glioma into neural circuits.</a> Nature. 573 (7775), 539-545 (2019).</li><li>Blanco-Su&#225;rez, E., Caldwell, A. L., Allen, N. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+of+astrocyte-synapse+interactions+in+CNS+disorders.">Role of astrocyte-synapse interactions in CNS disorders.</a> Journal of Physiology. 595 (6), 1903-1916 (2017).</li><li>Neftel, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+integrative+model+of+cellular+states,+plasticity,+and+genetics+for+glioblastoma.">An integrative model of cellular states, plasticity, and genetics for glioblastoma.</a> Cell. 178 (4), 835-849 (2019).</li><li>Krishna, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Glioblastoma+remodeling+of+neural+circuits+in+the+human+brain+decreases+survival.">Glioblastoma remodeling of neural circuits in the human brain decreases survival.</a> BioRxiv. , (2021).</li><li>Venkataramani, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Glutamatergic+synaptic+input+to+glioma+cells+drives+brain+tumour+progression.">Glutamatergic synaptic input to glioma cells drives brain tumour progression.</a> Nature. 573 (7775), 532-538 (2019).</li><li>Wang, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reciprocal+signaling+between+glioblastoma+stem+cells+and+differentiated+tumor+cells+promotes+malignant+progression.">Reciprocal signaling between glioblastoma stem cells and differentiated tumor cells promotes malignant progression.</a> Cell Stem Cell. 22 (4), 514-528 (2018).</li><li>Venkatesh, H. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Targeting+neuronal+activity-regulated+neuroligin-3+dependency+in+high-grade+glioma.">Targeting neuronal activity-regulated neuroligin-3 dependency in high-grade glioma.</a> Nature. 549 (7673), 533-537 (2017).</li><li>Venkatesh, H. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neuronal+activity+promotes+glioma+growth+through+Neuroligin-3+secretion.">Neuronal activity promotes glioma growth through Neuroligin-3 secretion.</a> Cell. 161 (4), 803-816 (2015).</li><li>Buckingham, S. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Glutamate+release+by+primary+brain+tumors+induces+epileptic+activity.">Glutamate release by primary brain tumors induces epileptic activity.</a> Nature Medicine. 17 (10), 1269-1274 (2011).</li><li>Campbell, S. L., Buckingham, S. C., Sontheimer, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+glioma+cells+induce+hyperexcitability+in+cortical+networks.">Human glioma cells induce hyperexcitability in cortical networks.</a> Epilepsia. 53 (8), 1360-1370 (2012).</li><li>Maisonneuve, B. G. C., Vieira, J., Larramendy, F., Honegger, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microchannel+patterning+strategies+for+in+vitro+structural+connectivity+modulation+of+neural+networks.">Microchannel patterning strategies for in vitro structural connectivity modulation of neural networks.</a> BioRxiv. , (2021).</li><li>Pastore, V. P., Godjoski, A., Martinoia, S., Massobrio, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=SpiCoDyn:+A+toolbox+for+the+analysis+of+neuronal+network+dynamics+and+connectivity+from+multi-site+spike+signal+recordings.">SpiCoDyn: A toolbox for the analysis of neuronal network dynamics and connectivity from multi-site spike signal recordings.</a> Neuroinformatics. 16 (1), 15-30 (2018).</li><li>Honegger, T., Thielen, M. I., Feizi, S., Sanjana, N. E., Voldman, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microfluidic+neurite+guidance+to+study+structure-function+relationships+in+topologically-complex+population-based+neural+networks.">Microfluidic neurite guidance to study structure-function relationships in topologically-complex population-based neural networks.</a> Scientific Reports. 6, 28384 (2016).</li><li>Nguyen, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+the+transcriptional+and+metabolic+responses+of+pediatric+high+grade+gliomas+to+mTOR-HIF-1&#945;+axis+inhibition.">Characterization of the transcriptional and metabolic responses of pediatric high grade gliomas to mTOR-HIF-1&#945; axis inhibition.</a> Oncotarget. 8 (42), 71597-71617 (2017).</li><li>Taylor, A. M., Dieterich, D. C., Ito, H. T., Kim, S. A., Schuman, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microfluidic+local+perfusion+chambers+for+the+visualization+and+manipulation+of+synapses.">Microfluidic local perfusion chambers for the visualization and manipulation of synapses.</a> Neuron. 66 (1), 57-68 (2010).</li><li>Cerea, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Selective+intracellular+delivery+and+intracellular+recordings+combined+in+MEA+biosensors.">Selective intracellular delivery and intracellular recordings combined in MEA biosensors.</a> Lab on a Chip. 18 (22), 3492-3500 (2018).</li><li>Bruno, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microfluidic+multielectrode+arrays+for+spatially+localized+drug+delivery+and+electrical+recordings+of+primary+neuronal+cultures.">Microfluidic multielectrode arrays for spatially localized drug delivery and electrical recordings of primary neuronal cultures.</a> Frontiers in Bioengineering and Biotechnology. 8, 626 (2020).</li><li>Park, J. W., Vahidi, B., Taylor, A. M., Rhee, S. W., Jeon, N. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microfluidic+culture+platform+for+neuroscience+research.">Microfluidic culture platform for neuroscience research.</a> Nature Protocols. 1 (4), 2128-2136 (2006).</li><li>Maisonneuve, B. G. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Deposition+chamber+technology+as+building+blocks+for+a+standardized+brain+on+chip+framework.">Deposition chamber technology as building blocks for a standardized brain on chip framework.</a> BioRxiv. , (2021).</li><li>Maccione, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+algorithm+for+precise+identification+of+spikes+in+extracellularly+recorded+neuronal+signals.">A novel algorithm for precise identification of spikes in extracellularly recorded neuronal signals.</a> Journal of Neuroscience Methods. 177 (1), 241-249 (2009).</li><li>Andreiuk, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fluorescent+polymer+nanoparticles+for+cell+barcoding+in+vitro+and+in+vivo.">Fluorescent polymer nanoparticles for cell barcoding in vitro and in vivo.</a> Small. 13 (38), (2017).</li></ol>

यह काम मानव हाइप्स-व्युत्पन्न कॉर्टिकल ग्लूटामेटर्जिक न्यूरॉन्स और माइक्रोफ्लुइडिक उपकरणों में मस्तिष्क ट्यूमर कोशिकाओं के बीच बातचीत का मूल्यांकन करने के लिए एक सटीक कार्यात्मक इन विट्रो मॉड...

बाल चिकित्सा उच्च ग्रेड gliomas (pHGG) रोगी की उम्र, ट्यूमर शारीरिक स्थान और विस्तार, और आणविक ड्राइवरों 1 के आधार पर एक विस्तारित जीनोटाइपिक और फेनोटाइपिक विविधता प्रदर्शित करते हैं। वे आक्रामक मस्तिष्क ट्यूमर हैं जो वर्तमान में उपलब्ध उपचार विकल्पों के साथ खराब रूप से नियंत्रित होते हैं और बच्चों और किशोरों में मस्तिष्क कैंसर से संबंधित मृत्यु का प्रमुख कारण हैं2। इसलिए, 80% से अधिक रोगी अपने निदान के बाद 2 साल के भीतर पुनरावृत्ति कर रहे हैं, और उनका औसत अस्तित्व 9-15 महीने है, जो मस्तिष्क के स्थानों और ड्राइवर उत्परिवर्तन पर निर्भर करता है। उपचारात्मक उपचार की अनुपस्थिति प्रयोगशाला अनुसंधान के लिए प्राथमिक आग्रह है और नए अभिनव चिकित्सीय दृष्टिकोणों की तत्काल आवश्यकता पर प्रकाश डालती है। इस उद्देश्य के लिए, रोगी-व्युत्पन्न सेल लाइनों (पीडीसीएल) को दो-आयामी (2 डी) लाइनों और / या तीन-आयामी (3 डी) न्यूरोस्फीयर में पीएचजीजी विविधता 3 प्रदान करने की उम्मीद के साथ विकसित किया गया था। फिर भी, उन रोगी-व्युत्पन्न इन विट्रो सेल संस्कृतियों में सभी मस्तिष्क चर स्थितियों की नकल नहीं करते हैं। ये मॉडल आमतौर पर पीएचजीजी में वर्णित मैक्रोस्कोपिक और माइक्रोस्कोपिक न्यूरो-शारीरिक वातावरण पर विचार नहीं करते हैं।
आमतौर पर, छोटे बच्चों में पीएचजीजी मुख्य रूप से पोंटिन और थैलेमिक क्षेत्रों में विकसित हो रहा है, जबकि किशोर और युवा वयस्क के एचजीजी कॉर्टिकल क्षेत्रों में ध्यान केंद्रित करते हैं, विशेष रूप से फ्रंटोटेम्पोरल लोब 1 में। बाल चिकित्सा उम्र भर में इन स्थान-विशिष्टताओं में विभिन्न वातावरण शामिल होते हैं जो ग्लियोमाजेनेसिस और ट्यूमर कोशिकाओं और विशिष्ट न्यूरोनल गतिविधि 4,5,6 के बीच एक अंतर्निहित नेटवर्क के लिए अग्रणी होते हैं। यद्यपि तंत्र की अभी भी पहचान नहीं की गई है, पीएचजीजी मुख्य रूप से एस्ट्रोग्लियल और ओलिगोडेंड्रोग्लियल वंशों के भेदभाव प्रक्षेपवक्र के साथ तंत्रिका अग्रदूत कोशिकाओं से विकसित होता है। जबकि इन ग्लियाल वंशों की भूमिका लंबे समय से न्यूरॉन्स के लिए सरल संरचनात्मक समर्थन तक सीमित है, अब यह स्पष्ट रूप से स्थापित हो गया है कि वे पूरी तरह से तंत्रिका सर्किट में एकीकृत होते हैं और मस्तिष्क के संरचनात्मक क्षेत्रों को पुनर्गठित करने और न्यूरोनल सर्किटरी 4,7,8 को फिर से तैयार करने में सक्षम जटिल द्वि-दिशात्मक ग्लियाल-न्यूरोनल इंटरैक्शन प्रदर्शित करते हैं। . इसके अलावा, सबूतों के बढ़ते टुकड़े इंगित करते हैं कि केंद्रीय तंत्रिका तंत्र (सीएनएस) मस्तिष्क कैंसर की दीक्षा और प्रगति में एक महत्वपूर्ण भूमिका निभाता है। हाल के कार्यों ने न्यूरोनल गतिविधि पर ध्यान केंद्रित किया, जो स्रावित विकास कारकों और प्रत्यक्ष इलेक्ट्रोकेमिकल सिनैप्टिक संचार 6,9 के माध्यम से ग्लियाल दुर्दमताओं के विकास और माइटोसिस को चलाने के लिए प्रतीत होता है। पारस्परिक रूप से, उच्च ग्रेड ग्लियोमा कोशिकाएं एक बढ़ती हुई ग्लूटामेटर्जिक न्यूरोनल गतिविधि के साथ न्यूरोनल फ़ंक्शन को प्रभावित करती हैं और सर्किट के संचालन को संशोधित करती हैं जिसमें वे संरचनात्मक और विद्युत रूप से एकीकृत होते हैं। इसलिए, न्यूरॉन कार्रवाई को नियंत्रित करने वाले रोगी-व्युत्पन्न मॉडल और उपन्यास तंत्रिका विज्ञान उपकरणों का उपयोग करने वाले अध्ययनों ने ग्लियोमा स्थान, विकास और प्रगति पर न्यूरोनल गतिविधि के सर्किट-विशिष्ट प्रभाव का प्रदर्शन किया। ग्लियोमास में शामिल इन न्यूरोनल अनुमानों में से अधिकांश ग्लूटामेटर्जिक हैं और ग्लूटामेट स्राव के माध्यम से संवाद करते हैं। विशिष्ट ग्लूटामेटर्जिक बायोमार्कर जैसे कि mGluR2 या vGlut1/2 आमतौर पर वर्णित हैं6।
दिलचस्प बात यह है कि उनके आणविक विषमता के बावजूद, बाल चिकित्सा और वयस्क उच्च-ग्रेड ग्लियोमास ग्लूटामेटर्जिक न्यूरोनल गतिविधि और न्यूरोलिगिन -3 या बीडीएनएफ (मस्तिष्क-व्युत्पन्न न्यूरोट्रॉफिक कारक) जैसे अन्य स्रावित कारकों के लिए एक विशिष्ट प्रोलिफेरेटिव प्रतिक्रिया दिखाते हैं 4,6,10,11,12,13 . कॉर्टिकल क्षेत्रों में, बाल चिकित्सा और वयस्क एचजीजी एक बढ़े हुए ग्लूटामेट स्राव के माध्यम से न्यूरोनल हाइपरएक्साइटबिलिटी को प्रेरित कर सकते हैं और गैबा इंटरन्यूरॉन्स को बाधित कर सकते हैं जिससे मिर्गी नेटवर्क गतिविधि 14,15 से जुड़े ग्लियोमास होते हैं। इसके शीर्ष पर, तंत्रिका सर्किट को विशिष्ट न्यूरोलॉजिकल कार्यों को धक्का देने वाले ग्लियोमास द्वारा फिर से तैयार किया जा सकता है, उदाहरण के लिए, भाषा, और अतिरिक्त संगठित न्यूरोनल गतिविधि 9 की मांग कर सकता है।
इस तर्क के आधार पर, ग्लियोमा कोशिकाओं और न्यूरॉन्स के बीच द्विदिश संचार की समझ को आगे बढ़ाने के लिए पूरी तरह से स्पष्ट किया जाना चाहिए और इन विट्रो पीएचजीजी दृष्टिकोण के शुरुआती चरणों के साथ एकीकृत किया जाना चाहिए। इस तरह के अभिनव मॉडलिंग दवा परीक्षण के दौरान न्यूरोनल विद्युत गतिविधि प्रभाव को समझने और मापने और मस्तिष्क सर्किटरी में पीएचजीजी प्रतिक्रिया की उम्मीद करने में महत्वपूर्ण है। न्यूरोसाइंस उपकरणों में हाल के विकास, जैसे कि माइक्रोफ्लुइडिक उपकरण और पीएचजीजी अनुसंधान कार्य, नए मॉडलिंग दृष्टिकोण विकसित करने के लिए बिस्तर हैं और अब इन विट्रो पीएचजीजी मॉडल 3,16,17,18,19 में मस्तिष्क माइक्रोएन्वायरमेंट को एकीकृत करने में सक्षम हैं। मल्टीइलेक्ट्रोड सरणियों (एमईए) का उपयोग करके इलेक्ट्रोफिजियोलॉजिकल रिकॉर्डिंग के साथ युग्मित, माइक्रोफ्लुइडिक डिवाइस20,21,22 पूरे तंत्रिका नेटवर्क की विद्युत गतिविधि को रिकॉर्ड करते हुए शारीरिक स्थितियों की नकल करने और कई स्थितियों के तहत नेटवर्क कनेक्टिविटी पैरामीटर निकालने की संभावना प्रदान करते हैं। यह डिवाइस 23,24 पहले एमईए पर सीधे एक कक्ष में कोशिकाओं के सटीक जमाव की अनुमति देता है। यह तकनीक एमईए पर सेल सीडिंग घनत्व और समरूपता के नियंत्रण और मीडिया एक्सचेंज के ठीक नियंत्रण को सक्षम बनाती है, जो सीधे उपकरणों में मानव तंत्रिका पूर्वज भेदभाव के लिए एक महत्वपूर्ण कदम है। इसके अलावा, वर्तमान निक्षेपण कक्ष को अलग-अलग समय बिंदुओं पर कई कोशिकाओं के साथ बीज दिया जा सकता है।
इसलिए, इस अध्ययन का उद्देश्य एक कार्यात्मक इन विट्रो मॉडल को विकसित करना है, जो मानव प्लुरिपोटेंट स्टेम (एचआईपीएस) -व्युत्पन्न कॉर्टिकल ग्लूटामेटर्जिक न्यूरॉन्स और पीएचजीजी-व्युत्पन्न कोशिकाओं को माइक्रोफ्लुइडिक उपकरणों में विकसित करता है और दोनों सेल आबादी के बीच विद्युत इंटरैक्शन का मूल्यांकन करने के लिए उनकी विद्युत गतिविधि को रिकॉर्ड करता है। सबसे पहले, एचआईपीएस-व्युत्पन्न कॉर्टिकल ग्लूटामेटर्जिक न्यूरॉन्स को प्राप्त किया गया था और संस्कृति के विभिन्न चरणों में माइक्रोफ्लुइडिक उपकरणों में विशेषता थी [दिन 4 (डी 4), एचआईपीएस कोशिकाओं के रूप में, और दिन 21 (डी 21) और दिन 23 (डी 23), ग्लूटामेटर्जिक परिपक्व न्यूरॉन्स के रूप में। सह-संस्कृति के दूसरे चरण के लिए, दो pHGG मॉडल का उपयोग किया गया था: एक रोगी ट्यूमर (BT35)3 से शुरू की गई pHGG कोशिकाओं का व्यावसायीकरण किया गया था, जिसमें H3.3 K27M ड्राइवर उत्परिवर्तन था। अंत में, हमने PHGG सेल सीडिंग से पहले D21 पर ग्लूटामेटर्जिक कोशिकाओं की इलेक्ट्रोफिजियोलॉजिकल रिकॉर्डिंग का प्रदर्शन किया और एक ही माइक्रोफ्लुइडिक डिवाइस में सह-संस्कृति के 48 ज के बाद D23। ग्लूटामेटर्जिक न्यूरॉन्स और पीएचजीजी कोशिकाओं के बीच बातचीत को रिकॉर्ड की गई इलेक्ट्रोफिजियोलॉजिकल गतिविधि में महत्वपूर्ण वृद्धि की विशेषता थी।

<table fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr >
			<td >256MEA100/30iR-ITO-w/o</td>
			<td >MCS</td>
			<td >256MEA100/30iR-ITO-w/o</td>
			<td ></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >40 &#181;m probe for Scepter counter&#160;</td>
			<td >Dutscher</td>
			<td >53750</td>
			<td ></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >60 &#181;m probe for Scepter counter&#160;</td>
			<td >Dutscher</td>
			<td >51999</td>
			<td ></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Accutase</td>
			<td >Sigma</td>
			<td >A6964</td>
			<td ></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Ala -Gln (GlutaMAX)</td>
			<td >Sigma</td>
			<td >G8541</td>
			<td ></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Axel Observer 7 Microscope</td>
			<td >Zeiss</td>
			<td >431007-9904-000</td>
			<td ></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Cell culture flask with cap with filter membrane 70 mL Falcon&#174;</td>
			<td >Dutscher</td>
			<td >353109</td>
			<td ></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Class II Biological Safety Cabinet</td>
			<td >Thermo Scientific</td>
			<td >HERASafe type KS12</td>
			<td ></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Colibri 7 LED</td>
			<td >Zeiss</td>
			<td >4230529710-000</td>
			<td ></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >
			<div>Cortical Glutamatergic Neurons</div>
			</td>
			<td >BrainXell</td>
			<td >BX-0300</td>
			<td ></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >DMEM/F-12 (1:1) GlutaMAX</td>
			<td >Gibco</td>
			<td >31331-028</td>
			<td ></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >DMEM/F12 Medium</td>
			<td >Sigma</td>
			<td >D8437</td>
			<td ></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >DPBS 1X</td>
			<td >Dutscher</td>
			<td >L0615-500</td>
			<td ></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >EasYFlaskTM&#160;cell culture flasks 75cm3</td>
			<td >Nunc</td>
			<td >156499</td>
			<td ></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Foetal Bovine Serum (FBS)</td>
			<td >Dutscher</td>
			<td >500105</td>
			<td ></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >GDNF</td>
			<td >Peprotech</td>
			<td >450-10</td>
			<td ></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Geltrex</td>
			<td >Life Technologies</td>
			<td >A1413201</td>
			<td ></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Human BDNF</td>
			<td >Peprotech</td>
			<td >450-02</td>
			<td ></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Incubator</td>
			<td >Memmert</td>
			<td >IC0150med</td>
			<td ></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >MCS InterFace Boarder</td>
			<td >MCS</td>
			<td >181205-MEA2100-11240</td>
			<td ></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >MEA2100</td>
			<td >MCS</td>
			<td >181205-MEA2100-11240</td>
			<td ></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Micropipette P10</td>
			<td >Sartorius</td>
			<td >LH-729020</td>
			<td ></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Micropipette P100</td>
			<td >Sartorius</td>
			<td >LH-729050</td>
			<td ></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Micropipette P1000</td>
			<td >Sartorius</td>
			<td >LH-729070</td>
			<td ></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Micropipette P200</td>
			<td >Sartorius</td>
			<td >LH-729060</td>
			<td ></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Microtube Eppendorf 1,5 ml Safe-Lock</td>
			<td >Dutscher</td>
			<td >33290</td>
			<td ></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >MultiChannel Experimenter</td>
			<td >MCS</td>
			<td >-</td>
			<td ></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >N2 Supplement-A</td>
			<td >StemCell</td>
			<td >7152</td>
			<td ></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Neurobasal Medium</td>
			<td >Life Technologies</td>
			<td >21103049</td>
			<td ></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Neurocult SM1 neuronal supplement</td>
			<td >StemCell</td>
			<td >5711</td>
			<td ></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Non filter tip 0.1 - 10 &#181;l ClearLine&#174; sterile in removable-lid rack&#160;</td>
			<td >Dutscher</td>
			<td >030570ACL</td>
			<td ></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Non filter tip 1 - 200 &#181;l ClearLine&#174; sterile in removable-lid rack&#160;</td>
			<td >Dutscher</td>
			<td >032260CL</td>
			<td ></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Non filter tip 50 - 1250 &#181;l ClearLine&#174; sterile in removable-lid rack</td>
			<td >Dutscher</td>
			<td >134760CL</td>
			<td ></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Non-essential amino acids (NEAA) without L-glutamine</td>
			<td >Dutscher</td>
			<td >X0557-100</td>
			<td ></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Pipeteur Pipet-Aid XP Gravity</td>
			<td >Drummond</td>
			<td >4000202/4038202</td>
			<td ></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Pipette for cell culture 10 mL Falcon&#174;&#160;</td>
			<td >Dutscher</td>
			<td >357551</td>
			<td ></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Pipette for cell culture 5 mL Falcon&#174;&#160;</td>
			<td >Dutscher</td>
			<td >357543</td>
			<td ></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Plaque chauffante (CultureTemp)</td>
			<td >Belart</td>
			<td >370151000</td>
			<td ></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Poly-D-Lysine</td>
			<td >Sigma</td>
			<td >P6407</td>
			<td ></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Primovert microscope</td>
			<td >Zeiss</td>
			<td >415510-1100-000</td>
			<td ></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Scepter (Handheld Automated Cell Counter)</td>
			<td >Millipore</td>
			<td >PHCC00000</td>
			<td ></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >TGF-&#946;1</td>
			<td >Peprotech</td>
			<td >100-21C</td>
			<td ></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Tube with conical bottom 15 mL (bulk) Falcon&#174;&#160;</td>
			<td >Dutscher</td>
			<td >352096</td>
			<td ></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Tube with conical bottom 50 mL (bulk) Falcon&#174;&#160;</td>
			<td >Dutscher</td>
			<td >352070</td>
			<td ></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

co-culture of glutamatergic neurons and pediatric high-grade glioma cells into microfluidic devices to assess electrical interactions

बाल चिकित्सा उच्च ग्रेड ग्लियोमास (पीएचजीजी) बचपन और किशोर मस्तिष्क कैंसर का प्रतिनिधित्व करते हैं जो तेजी से निराशाजनक रोग का निदान करते हैं। चूंकि वर्तमान उपचारों के प्रतिरोध को दूर करने और इलाज का एक नया तरीका खोजने की आवश्यकता है, इसलिए नई दवाओं और चिकित्सीय प्रक्रियाओं का परीक्षण करने के लिए इन विट्रो सेटिंग में जितना संभव हो सके बीमारी को मॉडलिंग करना अत्यधिक मांग है। ग्लूटामेटर्जिक न्यूरॉन हाइपरएक्साइटबिलिटी सहित उनकी मौलिक पैथोबायोलॉजिकल प्रक्रियाओं का अध्ययन करना, पर्यावरणीय मस्तिष्क और पीएचजीजी कोशिकाओं के बीच बातचीत को समझने में एक वास्तविक अग्रिम होगा। इसलिए, न्यूरॉन्स / पीएचजीजी सेल इंटरैक्शन को फिर से बनाने के लिए, यह काम एक कार्यात्मक इन विट्रो मॉडल के विकास को दर्शाता है जो मानव-प्रेरित प्लुरिपोटेंट स्टेम (एचआईपीएस) -व्युत्पन्न कॉर्टिकल ग्लूटामेटर्जिक न्यूरॉन्स पीएचजीजी कोशिकाओं को कंपार्टमेंटलाइज्ड माइक्रोफ्लुइडिक उपकरणों में और उनके इलेक्ट्रोफिजियोलॉजिकल संशोधनों को रिकॉर्ड करने की प्रक्रिया है। पहला कदम मानव ग्लूटामेटर्जिक न्यूरॉन्स को अलग करना और चिह्नित करना था। दूसरे, कोशिकाओं को पीएचजीजी व्युत्पन्न सेल लाइनों के साथ माइक्रोफ्लुइडिक उपकरणों में सुसंस्कृत किया गया था। मस्तिष्क माइक्रोएन्वायरमेंट और न्यूरोनल गतिविधि को तब इन सूक्ष्म-पर्यावरणीय न्यूरॉन्स पर पीएचजी कोशिकाओं के विद्युत प्रभाव का विश्लेषण करने के लिए इस मॉडल में शामिल किया गया था। इलेक्ट्रोफिजियोलॉजिकल रिकॉर्डिंग को इन माइक्रोफ्लुइडिक उपकरणों के लिए मल्टीइलेक्ट्रोड सरणियों (एमईए) का उपयोग करके शारीरिक स्थितियों की नकल करने और पूरे तंत्रिका नेटवर्क की विद्युत गतिविधि को रिकॉर्ड करने के लिए युग्मित किया जाता है। ट्यूमर कोशिकाओं की उपस्थिति में न्यूरॉन उत्तेजना में एक महत्वपूर्ण वृद्धि को रेखांकित किया गया था।

ग्लूटामेटर्जिक न्यूरॉन्स और ग्लियोमा कोशिकाओं के बीच विद्युत बातचीत का अध्ययन करने से पहले, एचआईपीएस-व्युत्पन्न कॉर्टिकल ग्लूटामेटर्जिक न्यूरॉन्स को माइक्रोफ्लुइडिक उपकरणों (चि...

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Co-culture of Glutamatergic Neurons and Pediatric High-Grade Glioma Cells Into Microfluidic Devices to Assess Electrical Interactions

हाल के कार्यों में उच्च-ग्रेड बाल चिकित्सा ग्लियोमा (पीएचजीजी) कोशिकाओं और उनके पारस्परिक इंटरैक्शन पर न्यूरोनल प्रभाव को उजागर किया गया है। वर्तमान काम एक इन विट्रो मॉडल सह-culturing pHGG कोशिकाओं और glutametergic न्यूरॉन्स के विकास से पता चलता है और उन interactivities नकल करने के लिए उनके electrophysiological बातचीत दर्ज की।

Glutamatergic न्यूरॉन्स और बाल चिकित्सा उच्च ग्रेड ग्लियोमा कोशिकाओं की सह-संस्कृति माइक्रोफ्लुइडिक उपकरणों में विद्युत इंटरैक्शन का आकलन करने के लिए

Pediatric high-grade gliomas (pHGG) represent childhood and adolescent brain cancers that carry a rapid dismal prognosis. Since there is a need to ...

घातक ग्लियोमा कोशिकाओं और उनके आसपास के न्यूरॉन्स के बीच बातचीत रुचि प्राप्त कर रही है। यहां, हम एक इन विट्रो मॉडल सह-खेती व्युत्पन्न कॉर्टिकल ग्लूटामेटर्जिक न्यूरॉन्स और ट्यूमर कोशिकाओं के विकास को दिखाते हैं। मल्टीइलेक्ट्रोड सरणियों के लिए युग्मित सह-संस्कृतियों के लिए उपयोग किए जाने वाले माइक्रोफ्लुडिक उपकरण विभिन्न सेल प्रकारों के अध्ययन की अनुमति देते हैं और संस्कृतियों के विभिन्न समय बिंदुओं पर विद्युत गतिविधि रिकॉर्डिंग करते हैं।यह विधि विशेष रूप से कार्यात्मक और यांत्रिक अध्ययनों के लिए और औषधीय एजेंटों के प्रभावों का विश्लेषण करने के लिए सहायक है जो बाल चिकित्सा उच्च-ग्रेड ग्लियोमा सेल माइग्रेशन और न्यूरॉन्स के साथ बातचीत को अवरुद्ध करते हैं। व्यावसायीकृत मानव आईपीएस-व्युत्पन्न कॉर्टिकल ग्लूटामेटर्जिक न्यूरॉन्स को खेती शुरू करने के लिए, पिपेट आकांक्षा द्वारा माइक्रोफ्लुइडिक डिवाइस के इनलेट और आउटलेट जलाशयों को खाली करें, जिससे केवल डिवाइस चैनलों को माध्यम से भरा जा सके। माध्यम में प्रति मिलीलीटर निलंबन 6.5 मिलियन मानव आईपीएस कोशिकाओं के 10 माइक्रोलीटर जोड़कर मानव आईपीएस कोशिकाओं को बीज दें और कोशिकाओं को संलग्न करने की अनुमति देने के लिए डिवाइस को 15 मिनट के लिए हुड के नीचे रहने दें।15 मिनट के बाद, इनलेट और आउटलेट जलाशयों दोनों को दिन चार संस्कृति माध्यम के 50 माइक्रोलीटर के साथ भरें, फिर 23 दिनों के लिए कोशिकाओं को 37 डिग्री सेल्सियस और 5% कार्बन डाइऑक्साइड पर बनाए रखने के लिए इनक्यूबेटर में डिवाइस को स्थानांतरित करें। पाठ में वर्णित के रूप में हर तीन से चार दिनों में माध्यम को बदलें। कोशिकाओं की गणना करने और एक मानक चरण कंट्रास्ट माइक्रोस्कोप का उपयोग करके व्यवहार्यता का आकलन करने के लिए, चौथे दिन, 21 वें दिन और 23 वें दिन माइक्रोस्कोपिक चित्र लें।DMEM और F-12 ग्लूटामैक्स में UW479 और BT35 सेल लाइनों दोनों की संस्कृति एक सेल संस्कृति फ्लास्क में 10% भ्रूण गोजातीय सीरम के साथ पूरक। पूरे प्रयोग के दौरान नॉर्मोक्सिक स्थितियों में 37 डिग्री सेल्सियस पर एक नियंत्रित वातावरण के तहत सेल संस्कृति बनाए रखें। 80% confluency तक पहुँचने के लिए प्रत्येक सेल लाइन का निरीक्षण करें।ग्लूटामेटर्जिक न्यूरॉन्स के 21 पोस्ट-कल्चर पर, UW479 और BT35 कोशिकाओं को ट्रिप्सिनाइज़ करके सह-संस्कृति शुरू करें। प्रत्येक समर्पित माइक्रोफ्लुइडिक डिवाइस में परिपक्व अनुयायी ग्लूटामेटर्जिक न्यूरॉन्स के शीर्ष पर ट्रिप्सिनाइज्ड UW479 और BT35 कोशिकाओं को बीज दें। 37 डिग्री सेल्सियस पर एक नियंत्रित वातावरण के तहत दो दिनों के लिए सह-संस्कृतियों को बनाए रखें और ग्लूटामेटर्जिक न्यूरॉन डी 11 और आगे के माध्यम के साथ 5% कार्बन डाइऑक्साइड।उनकी व्यवहार्यता का आकलन करने और कोशिकाओं के प्रतिशत की गणना करने के लिए छवि विश्लेषण सॉफ्टवेयर के साथ विश्लेषण किए गए सूक्ष्म चित्रों का उपयोग करके बाल चिकित्सा उच्च-ग्रेड ग्लियोमा कोशिकाओं की गणना करें। रिकॉर्डिंग डिवाइस में एमएफडी रखें और 21 वें दिन ग्लूटामेटर्जिक न्यूरॉन्स की इलेक्ट्रोफिजियोलॉजिकल रिकॉर्डिंग करने के लिए एक व्यावसायिक रूप से उपलब्ध सॉफ़्टवेयर का उपयोग करें। बाल चिकित्सा उच्च ग्रेड ग्लियोमा कोशिकाओं को सीडिंग करने से पहले, सह-संस्कृति के समानांतर नियंत्रण के रूप में सुसंस्कृत विभेदित ग्लूटामेटर्जिक न्यूरॉन्स की दूसरी इलेक्ट्रोफिजियोलॉजिकल रिकॉर्डिंग करें।सह-संस्कृति के दो दिनों के बाद 23 वें दिन एक और इलेक्ट्रोफिजियोलॉजिकल रिकॉर्डिंग करें। मानव आईपीएस-व्युत्पन्न कॉर्टिकल ग्लूटामेटर्जिक न्यूरॉन्स को नेस्टिन, SOX2, मेटाबोट्रोपिक ग्लूटामेट रिसेप्टर्स II, और VGLUT1 इम्यूनोस्टेनिंग का उपयोग करके विशेषता और मूल्यांकन किया गया था। नेस्टिन एक मध्यवर्ती फिलामेंट प्रोटीन है और इसे अविभाजित सीएनएस कोशिकाओं में व्यक्त किया गया था।SOX2 को सीएनएस में तंत्रिका उपकला की अविभाजित कोशिकाओं में भी व्यक्त किया गया था। नेस्टिन और SOX2-सकारात्मक कोशिकाओं का प्रतिशत चौथे दिन से 21 वें दिन तक कम हो गया, जो ग्लूटामेटर्जिक न्यूरॉन्स की विभेदित स्थिति की पुष्टि करता है। माइक्रोस्कोपिक छवियों ने माइक्रोफ्लुइडिक उपकरणों में ग्लूटामेटर्जिक न्यूरॉन्स के प्रगतिशील वितरण का खुलासा किया।जब BT35 और UW479 को संस्कृति में जोड़ा गया था, तो यह देखा गया कि फ्लोटिंग कोशिकाएं 21 वें दिन ग्लियोमा सेल सीडिंग के बाद मौजूद थीं, जो 23 वें दिन तक धीरे-धीरे गायब हो गईं और डिवाइस में अनुयायी बन गईं। BT35 और UW479 के लिए व्यवहार्य कोशिकाओं के प्रतिशत तुलनीय थे और निहित थे कि रोगी-व्युत्पन्न सेल लाइनों का उचित उपयोग किया जा सकता है। संस्कृति के 23 वें दिन स्पाइक डिटेक्शन और रास्टर प्लॉट ने बाल चिकित्सा उच्च-ग्रेड ग्लियोमा कोशिकाओं को जोड़ने के बाद विद्युत गतिविधि में वृद्धि दिखाई।तंत्रिका नेटवर्क गतिविधि की synchronicity की निगरानी करने के लिए, BT35 या glutametergic न्यूरॉन्स में तात्कालिक फायरिंग दर दर्ज की गई थी। व्यक्तिगत रूप से सुसंस्कृत और सह-सुसंस्कृत ग्लूटामेटर्जिक न्यूरॉन्स के बीच विद्युत गतिविधि में अंतर 23 वें दिन महत्वपूर्ण था। आगे methodological विकास फट विश्लेषण और नेटवर्क के विशेष अस्थायी पार सहसंबंध के साथ नेटवर्क के कार्यात्मक मूल्यांकन शामिल हो सकता है।अब, शोधकर्ताओं के पास बाल चिकित्सा उच्च ग्रेड ग्लियोमा ट्यूमर लाइनों और उच्च पीएससी न्यूरॉन्स के इंटरैक्शन और औषधीय लक्ष्यीकरण का पता लगाने के लिए एक आशाजनक उपकरण है। कई ट्यूमर लाइनों और कई न्यूरॉन प्रकारों का उपयोग किया जा सकता है।

Research

JoVE Journal

Cancer Research

Transplantation of Zebrafish Pediatric Brain Tumors into Immune-competent Hosts for Long-term Study of Tumor Cell Behavior and Drug Response

ट्यूमर सेल व्यवहार और ड्रग रिस्पांस के दीर्घकालिक अध्ययन के लिए प्रतिरक्षा-सक्षम होस्ट में ज़ेफराफीश बाल रोग के ट्यूमर का प्रत्यारोपण

Tumor cell transplantation is an important technique to define the mechanisms controlling cancer cell growth, migration, and host response, as well as to ...

Comprehensive Protocol to Sample and Process Bone Marrow for Measuring Measurable Residual Disease and Leukemic Stem Cells in Acute Myeloid Leukemia

नमूना और प्रक्रिया के लिए व्यापक प्रोटोकॉल मापने योग्य अवशिष्ट रोग और ल्यूकेमिया से प्रभावित के लिए अस्थि मज्जा तीव्र माइलॉयड ल्यूकेमिया में स्टेम सेल

Response criteria in acute myeloid leukemia (AML) has recently been re-established, with morphologic examination utilized to determine whether patients ...

Mesenchymal Stem Cell Isolation from Pulp Tissue and Co-Culture with Cancer Cells to Study Their Interactions

Mesenchymal लुगदी ऊतक और सह कैंसर कोशिकाओं के साथ संस्कृति से कोशिका अलगाव स्टेम उनके बातचीत का अध्ययन करने के लिए

Cancer as a multistep process and complicated disease is not only regulated by individual cell proliferation and growth but also controlled by tumor ...

Evaluation of Biomarkers in Glioma by Immunohistochemistry on Paraffin-Embedded 3D Glioma Neurosphere Cultures

तंत्रिकाबंधार्बुद में Immunohistochemistry द्वारा आयल-एंबेडेड 3d तंत्रिकाबंधार्बुद Neurosphere संस्कृतियों का मूल्यांकन

Analysis of protein expression in glioma is relevant for several aspects in the study of its pathology. Numerous proteins have been described as ...

Measuring Bone Remodeling and Recreating the Tumor-Bone Microenvironment Using Calvaria Co-culture and Histomorphometry

बोन रीमॉडलिंग को मापने और Calvaria सह संस्कृति और हिस्टोमोर्पोमेट्री का उपयोग कर ट्यूमर हड्डी माइक्रोएनवायरमेंटल पुनः बनाने

Bone is a connective tissue constituted of osteoblasts, osteocytes, and osteoclasts and a mineralized extracellular matrix, which gives it its strength ...

Co-culture of Glioblastoma Stem-like Cells on Patterned Neurons to Study Migration and Cellular Interactions

प्रवासन और सेलुलर इंटरैक्शन का अध्ययन करने के लिए पैटर्न वाले न्यूरॉन्स पर ग्लियोब्लास्टोमा स्टेम जैसी कोशिकाओं की सह-संस्कृति

Glioblastomas (GBMs), grade IV malignant gliomas, are one of the deadliest types of human cancer because of their aggressive characteristics. Despite ...

A Rapid Screening Workflow to Identify Potential Combination Therapy for GBM using Patient-Derived Glioma Stem Cells

रोगी-व्युत्पन्न ग्लियोमा स्टेम सेल का उपयोग करके जीबीएम के लिए संभावित संयोजन थेरेपी की पहचान करने के लिए एक रैपिड स्क्रीनिंग वर्कफ़्लो

The glioma stem cells (GSCs) are a small fraction of cancer cells which play essential roles in tumor initiation, angiogenesis, and drug resistance in ...

Live-3D-Cell Immunocytochemistry Assays of Pediatric Diffuse Midline Glioma

लाइव-3 डी-सेल इम्यूनोसाइटोकेमिस्ट्री बाल चिकित्सा डिफ्यूज मिडलाइन ग्लियोमा के परीक्षण

Cell migration and invasion are specific hallmarks of Diffuse Midline Glioma (DMG) H3K27M-mutant tumors. We have already modeled these features using ...

Generation and Culturing of High-Grade Serous Ovarian Cancer Patient-Derived Organoids

उच्च श्रेणी के सीरस डिम्बग्रंथि के कैंसर रोगी-व्युत्पन्न ऑर्गेनोइड्स का उत्पादन और संवर्धन

Organoids are 3D dynamic tumor models that can be grown successfully from patient-derived ovarian tumor tissue, ascites, or pleural fluid and aid in the ...

Quantifying Telomere Length Using Non-Radioactive Chemiluminescence Detection

Optimization of Performance Parameters of the TAGGG Telomere Length Assay

Optimization of Performance Parameters of the TAGGG Telomere Length Assay (Video) | JoVE 

टीएजीजीजी टेलोमेरे लंबाई परख के प्रदर्शन मापदंडों का अनुकूलन

Telomeres are repetitive sequences which are present at chromosomal ends; their shortening is a characteristic feature of human somatic cells. Shortening ...