Name: measuring mitochondrial electron transfer complexes in previously frozen cardiac tissue from the offspring of sow: a model to assess exercise-induced mitochondrial bioenergetics changes
Uploaded: 2021-08-16T14:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Measuring Mitochondrial Electron Transfer Complexes in Previously Frozen Cardiac Tissue from the Offspring of Sow: A Model to Assess Exercise-Induced Mitochon

Эта работа была финансово поддержана внутренним грантом Университета Канзас-Сити для Абдулбаки Агбаса и Летней исследовательской стипендией для Даниэля Барреры. Авторы благодарны за редакционную работу доктора Яна Тэлли.

Замороженные сердечные ткани потомства были получены от доктора Шона Ньюкомера вместе с письмом об одобрении IACUC. Ткани сердца были получены в результате долгосрочного продольного исследования, заморожены во флеш-фазе в жидком азоте и сохранены при -80 °C для будущего использования. Все...

<ol>
	<li>Gross, V. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolation+of+functional+mitochondria+from+rat+kidney+and+skeletal+muscle+without+manual+homogenization.">Isolation of functional mitochondria from rat kidney and skeletal muscle without manual homogenization.</a> Analytical Biochemistry. 418 (2), 213-223 (2011).</li><li>Osto, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Measuring+mitochondrial+respiration+in+previously+frozen+biological+samples.">Measuring mitochondrial respiration in previously frozen biological samples.</a> Current Protocols in Cell Biology. 89 (1), 116 (2020).</li><li>Agbas, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mitochondrial+electron+transfer+cascade+enzyme+activity+assessment+in+cultured+neurons+and+select+brain+regions.">Mitochondrial electron transfer cascade enzyme activity assessment in cultured neurons and select brain regions.</a> Current Protocols in Toxicology. 80, 73 (2019).</li><li>Hathaway, Q. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Maternal-engineered+nanomaterial+exposure+disrupts+progeny+cardiac+function+and+bioenergetics.">Maternal-engineered nanomaterial exposure disrupts progeny cardiac function and bioenergetics.</a> American Journal of Physiology-Heart and Circulatory Physiology. 312 (3), 446-458 (2017).</li><li>May, L. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Influence+of+maternal+aerobic+exercise+during+pregnancy+on+fetal+cardiac+function+and+outflow.">Influence of maternal aerobic exercise during pregnancy on fetal cardiac function and outflow.</a> American Journal of Obstetrics &amp; Gynecology MFM. 2 (2), 100095 (2020).</li><li>Ehler, W. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Avoidance+of+malignant+hyperthermia+in+a+porcine+model+for+experimental+open+heart+surgery.">Avoidance of malignant hyperthermia in a porcine model for experimental open heart surgery.</a> Laboratory Animal Science. 35 (2), 172-175 (1985).</li><li>Panov, A. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+bovine+serum+albumin+on+mitochondrial+respiration+in+the+brain+and+liver+of+mice+and+rats.">Effect of bovine serum albumin on mitochondrial respiration in the brain and liver of mice and rats.</a> Bulletin of Experimental Biology and Medicine. 149 (2), 187-190 (2010).</li><li>Jha, P., Wang, X., Auwerx, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Analysis+of+mitochondrial+respiratory+chain+supercomplexes+using+blue+native+polyacrylamide+gel+electrophoresis+(BN-PAGE).">Analysis of mitochondrial respiratory chain supercomplexes using blue native polyacrylamide gel electrophoresis (BN-PAGE).</a> Current Protocols in Mouse Biology. 6 (1), 1-14 (2016).</li><li>Pressure Biosciences Inc. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Isolation of Functional Mitochondria from Whole Rat Heart Using a PBI Shredder and Pressure Cycling Technology (PCT). , (2010).</li><li>McLaughlin, K. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Novel+approach+to+quantify+mitochondrial+content+and+intrinsic+bioenergetic+efficiency+across+organs.">Novel approach to quantify mitochondrial content and intrinsic bioenergetic efficiency across organs.</a> Scientific Reports. 10 (1), 17599 (2020).</li><li>Hom, J., Sheu, S. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Morphological+dynamics+of+mitochondria--a+special+emphasis+on+cardiac+muscle+cells.">Morphological dynamics of mitochondria--a special emphasis on cardiac muscle cells.</a> Journal of Molecular and Cellular Cardiology. 46 (6), 811-820 (2009).</li><li>Greggio, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Enhanced+respiratory+chain+supercomplex+formation+in+response+to+exercise+in+human+skeletal+muscle.">Enhanced respiratory chain supercomplex formation in response to exercise in human skeletal muscle.</a> Cell Metabolism. 25 (2), 301-311 (2017).</li></ol>

Критические шаги для этого протокола указаны здесь. Во-первых, гомогенизация тканей должна быть тщательно обработана, чтобы во время процесса гомогенизации тканей не применялись чрезмерные эффекты. Следует использовать тканевой измельчитель, который является частью технологии цикли...

Цель этого протокола состояла в том, чтобы предоставить подробные шаги для получения обогащенного митохондриями препарата из ранее замороженной сердечной ткани с новой технологией низкоэнергетического механического разрушения ткани, которая улучшает лизис тканей и извлечение митохондрий. При этом методе повышается эффективность экстракции без создания высокого напряжения сдвига или высокой температуры и достигается короткое время гомогенизации (10-12 с)1.
Получение митохондрий из архивной замороженной ткани является ценным активом для выполнения как функциональных2 , так и биохимических исследований3, которые в противном случае нелегко повторить в точных экспериментальных условиях. Классический гомогенизатор стекла Potter-Elvehjem Teflon pestle или гомогенизатор Dounce использовался и до сих пор используется в исследовательских лабораториях для гомогенизации мягких тканей, таких как печень, почки и мозг. Тем не менее, гомогенизация твердых тканей, таких как мышцы и сердце, требует большего времени гомогенизации, ферментной обработки, высокоскоростной гомогенизации и обширного пользовательского опыта. Это невыгодно для извлечения интактных органелл, таких как митохондрии, из твердых тканей, таких как мышцы и сердце. Способ, описанный в этом протоколе, используется для получения высокопродуктивного обогащенного митохондриями препарата для анализа белковых комплексов митохондриальной электронной транспортной цепи (ETC) и их суперкомплексного образования в тканях сердца, собранных от потомства, рожденного от тренируемой и сидячей свиноматки, замороженного в жидком азоте и хранящегося при -80 °C для будущего использования. Этот метод позволяет пользователю изолировать обогащенный митохондриями препарат из ранее замороженных архивных тканей.
Внешнее воздействие наноматериалов на беременных грызунов может негативно повлиять на сердечную функцию и митохондриальное дыхание и биоэнергетику на потомство во время беременности4. Тем не менее, вызванные аэробными упражнениями положительные изменения в биоэнергетике миоцитов плода во время беременности еще предстоит задокументировать. Тем не менее, новые исследования свидетельствуют о том, что материнские аэробные упражнения во время беременности оказывают положительное влияние на сердечную функцию плода5. Чтобы предоставить дополнительные доказательства, был проведен анализ продольного воздействия материнских упражнений на митохондриальные комплексы дыхательной цепи сердца потомства (т.е. комплекс I через комплекс V) во время беременности.
Это исследование имеет важное значение для здоровья, поскольку результаты могут свидетельствовать о том, что материнские физические упражнения улучшают эффективность производства энергии в сердечных митохондриях потомства потомства. В этом исследовании свиноматки (самки свиней) использовались в качестве животной модели по двум причинам: (i) физиология сердца аналогична человеческой6, и (ii) сбор сердечной ткани у потомства из разных временных периодов возможен при институциональном одобрении IACUC. Предлагаемое исследование направлено на то, чтобы ответить на многие фундаментальные вопросы, связывающие материнские физические упражнения и их потенциальное положительное влияние на клеточный и биохимический состав сердечной ткани потомства. Этот подход требует мягких, но эффективных методов выделения митохондрий из ранее замороженной сердечной ткани, полученных в результате длительных и дорогостоящих продольных исследований, которые рассматривали вопросы биоэнергетических изменений в сердечных миоцитах плода во время беременности. Метод, описанный в данном исследовании, позволяет использовать большие суммы ранее замороженной архивной ткани для обогащенной митохондриями подготовки как для аналитических, так и для функциональных исследований. Исследование также поможет заполнить пробел в знаниях в этой области, предоставив предварительные данные, которые могут привести к будущим исследованиям, определяющим влияние материнских упражнений на здоровье сердца в утробе матери и за ее пределами.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Amino caproic acid</td>
			<td>Sigma/Aldrich</td>
			<td>A2504-100G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-Hu Total OxPhos complex kit</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>458199</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>anti-VDAC antibody</td>
			<td>abcam</td>
			<td>ab15895</td>
			<td>use 1 &#181;g/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Coomassie G-250</td>
			<td>ThermoSientific</td>
			<td>20279</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Coomassie GelCode Blue</td>
			<td>ThermoScientific</td>
			<td>24592</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Digitonin</td>
			<td>Cabiochem</td>
			<td>300410</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass-Glass pestle homogenizer</td>
			<td>VWR</td>
			<td>KT885451-0020</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Image Studio</td>
			<td>LICOR</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>IR-Dye conjugated anti-Rabbit Ab</td>
			<td>LICOR</td>
			<td>LC0725</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Multiwell plate reader</td>
			<td>BioTek</td>
			<td>Synergy HT</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Native molecular weight marker</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>BN2001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nylon mesh monofilament</td>
			<td>Small Part Inc</td>
			<td>CMN-74</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Orbital shaker</td>
			<td>ThermoScientfic</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PCT Shredder</td>
			<td>Pressure Bioscience Inc</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SEA BLOCK Blocking buffer</td>
			<td>ThermoScienctific</td>
			<td>37527</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Shredder PULSE Tube</td>
			<td>Pressure Bioscience Inc</td>
			<td>FT500-PS</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Table top centrifuge</td>
			<td>Eppendorf</td>
			<td>5418</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypsin</td>
			<td>Amresco</td>
			<td>M150-1G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypsin inhibitor</td>
			<td>Amresco</td>
			<td>M191-1G</td>
			<td>Requires fresh preparation</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

measuring mitochondrial electron transfer complexes in previously frozen cardiac tissue from the offspring of sow: a model to assess exercise-induced mitochondrial bioenergetics changes

Профиль митохондриального комплекса переноса электронов (ETC) модифицируется в сердечной ткани потомства, рожденного от тренированной свиноматки. Предложенная и проверенная гипотеза заключалась в том, что регулярное материнское упражнение свиноматки во время беременности повысит митохондриальную эффективность биоэнергетики сердца потомства. Эта гипотеза была проверена путем выделения митохондрий с использованием процедуры мягкой изоляции для оценки митохондриальных внеземных и суперкомплексных профилей. Описанная здесь процедура позволила обработать ранее замороженные архивные ткани сердца и исключила необходимость подготовки свежих митохондрий для оценки митохондриальных комплексов внеземных цивилизаций, суперкомплексов и сложных профилей активности внеземных цивилизаций. Этот протокол описывает оптимальное измерение белкового комплекса ETC в мультиплексированном иммуноблоттинге на основе антител и суперсложную оценку с использованием электрофореза синего геля.

Следуя протоколу, был получен хороший выход обогащенной митохондриями белковой смеси из сердечной ткани. Приблизительно 15 мг/мл обогащенной митохондриями белковой смеси было получено в среднем из 1,2 г замороженной сердечной ткани, собранной у потомства свиноматки. Наблюдения показал?...

Watch this Scientific Journal Video about Measuring Mitochondrial Electron Transfer Complexes in Previously Frozen Cardiac Tissue from the Offspring of Sow: A Model to Assess Exercise-Induced Mitochon

Measuring Mitochondrial Electron Transfer Complexes in Previously Frozen Cardiac Tissue from the Offspring of Sow: A Model to Assess Exercise-Induced Mitochondrial Bioenergetics Changes

Подготовка образцов, обогащенных митохондриями, из ранее замороженных архивных твердых тканей позволила исследователям выполнить как функциональные, так и аналитические оценки митохондрий в различных экспериментальных модальностях. Это исследование демонстрирует, как готовить обогащенные митохондриями препараты из замороженной сердечной ткани и выполнять аналитические оценки митохондрий.

Измерение митохондриальных комплексов переноса электронов в ранее замороженной сердечной ткани от потомства свиноматки: модель для оценки изменений митохондриальной биоэнергетики, вызванных физической нагрузкой

The mitochondrial electron transfer complex (ETC) profile is modified in the heart tissue of the offspring born to an exercised sow. The hypothesis ...

Этот протокол важен, потому что он позволяет пользователям готовить образцы митохондрий из замороженных тканей, собранных из предыдущих исследований и архивированных. Этот протокол также уменьшает использование живых животных для сбора тканей. Этот метод позволяет пользователям использовать ранее замороженные архивные ткани для подготовки образцов, обогащенных митохондриями, используя мягкий метод измельчения тканей.Этот метод приготовления максимизирует выход препарата митохондрий. Через чтение протокола рекомендуется обеспечить доступность всех компонентов и инструментов, особенно полностью заряженного привода шредера, а также упражнения с некоторыми нежелательными тканями, чтобы ознакомиться с шагами. Продемонстрировать процедуру будет Эдина Коса, научный сотрудник из моей лаборатории.Для начала запишите вес трубки, содержащей сердечную ткань. Теперь взвесьте пустую трубку и вычтите ее из ранее зарегистрированного веса, чтобы получить чистый вес сердечной ткани. Поместите замороженную сердечную ткань непосредственно в стакан ледяного раствора.Перемешивайте в течение пяти минут. Одновременно с помощью пинцета нанесите небольшое давление на ткани, чтобы вывести как можно больше крови. Выньте ткань щипцами и сожмите сердце чистым фильтрующим бумажным полотенцем, чтобы удалить кровь.Затем поместите ткань в другой стакан ледяного раствора. После перемешивания ткани в течение пяти минут аккуратно высушите ткань на бумажном полотенце и удалите жир, свернувшуюся кровь, ушные раковины и фасции. Пул желудочковой ткани.Чтобы измельчить образцы тканей, поместите от 50 до 300 миллиграммов сердечной ткани в камеру измельчителя тканей со стороны барана и закройте баранью сторону. Затем добавьте от 0,2 до 0,8 миллилитров промывочного буфера на сторону колпачка трубки. Используйте трубчатый инструмент, чтобы плотно закрыть камеру измельчителя крышкой измельчителя, не затягивая ее.Поместите камеру измельчителя в держатель измельчителя тараном стороной вниз для включения фитинга. Вставьте и задействуйте биту полностью заряженного измельчителя с помощью колпачка измельчителя, обеспечивающего плотную фиксацию долота на месте, а затем подайте давление на водителя измельчителя в камере измельчителя до тех пор, пока индикатор давления на держателе измельчителя не достигнет значения примерно двух. Нажмите на спусковой крючок и запустите драйвер шредера в течение примерно 10-12 секунд, сохраняя настройку на уровне двух.Наблюдайте за трубкой, чтобы обеспечить измельчение и прохождение всей или большей части тканевой массы через диск лизиса в верхнюю камеру измельчителя и при необходимости верните трубку держателю измельчителя для продолжения измельчения. После измельчения образца извлеките камеру измельчителя из держателя и используйте инструмент для трубки, чтобы снять крышку измельчителя и поместить ее на чистую поверхность для последующего использования, рекомендуется только в пределах того же образца, чтобы избежать перекрестного загрязнения от других образцов тканей. Переложите измельченную сердечную ткань в третий стакан с 40 миллилитрами промывочного буфера с перемешивающим батончиком и перемешайте ткань в течение пяти минут на средней скорости, находясь на перемешиваемой пластине.Отфильтруйте суспензию через предварительно смачиваемую мононитью из нейлоновой сетки. После выбрасывания фильтрата промыть измельченную ткань на фильтр три раза 10 миллилитрами промывочного буфера. Переложите промытую ткань в 50-миллилитровый стакан с 20 миллилитрами промывочного буфера, помещенного в ледяную ванну на магнитном перемешивании.Добавьте 0,5 миллилитра раствора трипсина, постоянно помешивая в течение 15 минут. Примерно на полпути через перемешивание перенесите суспензию ткани в свободно установленный ручной гомогенизатор из стекла на стекле, который может удерживать 15 миллилитров объема. Гомогенизируйте суспензию четырьмя-пятью мягкими ударами без образования пены.Затем поместите гомогенат в 50-миллилитровый стакан и перемешайте на перемешивающей пластине. Далее добавляют 10 миллилитров изоляционного буфера, содержащего ингибитор трипсина, к гомогенату и инкубируют при осторожном перемешивании. После повторной фильтрации суспензии через нейлоновый фильтр сохраните фильтр в конической трубке объемом 50 миллилитров и перенесите фракцию твердых частиц, оставшуюся на фильтре, в гомогенизатор «стекло на стекле».На 15-20 миллилитрах моющего буфера и аккуратно гомогенизируйте рукой в течение 25-30 секунд. После объединения гомогената с фильтратом и балансировки трубок центрифуга, а затем с помощью пластиковой пипетки удаляют супернатант, оставляя 0,2 миллилитра сверху пушистой гранулы. Отфильтруйте полученный супернатант в новую коническую трубку с помощью нейлонового фильтра, чтобы избежать загрязнения, и центрифугируйте еще раз.После выброса супернатанта промыть гранулу два-три раза, добавив изоляционный буфер на боковую сторону трубки, чтобы предотвратить разрушение или загрязнение гранулы. Каждый раз отбрасывайте пушистый белый слой внешнего обода. Добавьте пять миллилитров изоляционного буфера в каждую трубку и разбейте гранулу с помощью пипетки с наконечником в один миллилитр или новой передаточной пипетки Затем разбавьте суспензию 20 миллилитрами дополнительного изоляционного буфера и центрифугируйте суспензию при 8, 500 X г в течение 15 минут при четырех градусах Цельсия.После выброса супернатанта повторно суспендируют гранулу сначала в пяти миллилитрах, а затем в дополнительных 15 миллилитрах буфера повторного использования и центрифуги при 8 500 Х г в течение 15 минут при четырех градусах Цельсия. Теперь отбросьте супернатант и сохраните коричневую гранулу, содержащую вымытые неповрежденные митохондрии. Повторное суспендирование обогащенной митохондриями гранулы в 250 микролитрах повторного буфера, включая ингибиторы протеазы.Aliquot суспензия объемом 25 микролитров, быстро замораживается в жидком азоте и хранится в морозильной камере с температурой 80 градусов Цельсия в течение нескольких лет. Следуя протоколу, обогащенный митохондриями белок был получен из сердца потомства, рожденного двумя группами свиноматок. Один из них тренировался во время беременности, а другой вел сидячий образ жизни.Анализ белкового профиля ETC показал, что потомство тренирующихся свиноматок представляло относительно сниженные уровни в некоторых комплексах ETC. Митохондриальные белки были разрешены в 3-8% градиенте BN-PAGE и иммунопробированы коктейлями антител. Как физические, так и сидячие группы демонстрируют множественные суперкомплексы.Заметное суперкомплексное увеличение наблюдалось через девять месяцев в группе упражнений по сравнению с сидячей группой. Обогащенные митохондриями белки, полученные из разных возрастных групп 48 часов три месяца, шесть месяцев и девять месяцев, были проанализированы на комплексную активность I-II с использованием кинетического анализа. Тренируемая группа показала комплексную активность I-II по сравнению с сидячей группой.Целесообразность функциональных исследований митохондрий, полученных из замороженных тканей и клеток, показана другими исследователями. Препарат митохондрий, полученный из замороженной ткани, может применяться для самых разнообразных тканей с минимальным повреждением.

Research

JoVE Journal

Biochemistry

Using Scaffold Liposomes to Reconstitute Lipid-proximal Protein-protein Interactions In Vitro

Using Scaffold Liposomes to Reconstitute Lipid-proximal Protein-protein Interactions In Vitro

Используя строительные леса, липосом Развести липидами проксимальный белок-белковых взаимодействий<em&gt; In Vitro</em

Studies of integral membrane proteins in vitro are frequently complicated by the presence of a hydrophobic transmembrane domain. Further complicating ...

Analyzing Supercomplexes of the Mitochondrial Electron Transport Chain with Native Electrophoresis, In-gel Assays, and Electroelution

Анализ суперкомплексов транспортной цепи митохондриальных электронов с собственным электрофорезом, в-гель-анализах и электроизлучения

The mitochondrial electron transport chain (ETC) transduces the energy derived from the breakdown of various fuels into the bioenergetic currency of the ...

Optimized Protocol for the Extraction of Proteins from the Human Mitral Valve

Оптимизированный протокол для извлечения белков из митрального клапана человека

Analysis of the cellular proteome can help to elucidate the molecular mechanisms underlying diseases due to the development of technologies that permit ...

Analyses of Mitochondrial Calcium Influx in Isolated Mitochondria and Cultured Cells

Анализ митохондриальной кальция приток в изолированных митохондриях и культивируемых клеток

Ca2+ handling by mitochondria is a critical function regulating both physiological and pathophysiological processes in a broad spectrum of cells. The ...

Measurement of Mitochondrial Oxygen Consumption in Permeabilized Fibers of Drosophila Using Minimal Amounts of Tissue

Измерение потребления кислорода митохондрий в Permeabilized волокнах дрозофилы, используя минимальное количество ткани

The fruit fly, Drosophila melanogaster, represents an emerging model for the study of metabolism. Indeed, drosophila have structures homologous to human ...

Measuring Liver Mitochondrial Oxygen Consumption and Proton Leak Kinetics to Estimate Mitochondrial Respiration in Holstein Dairy Cattle

Измерение потребления кислорода печени митохондриальных и Протон утечки кинетики оценить митохондриальное дыхание в Гольштейн молочного скота

Oxygen consumption, proton motive force (PMF) and proton leak are measurements of mitochondrial respiration, or how well mitochondria are able to convert ...

Using In Vitro Fluorescence Resonance Energy Transfer to Study the Dynamics Of Protein Complexes at a Millisecond Time Scale

Использование в Vitro флуоресценции резонанс передачи энергии для изучения динамики белковых комплексов в масштабе времени миллисекунду

Proteins are the primary operators of biological systems, and they usually interact with other macro- or small molecules to carry out their biological ...

A Model Membrane Platform for Reconstituting Mitochondrial Membrane Dynamics

Модель Мембранная платформа для восстановления митохондриальной динамики мембран

Mitochondrial dynamics is essential for the organelle&#8217;s diverse functions and cellular responses. The crowded, spatially complex, mitochondrial ...

Labelling and Visualization of Mitochondrial Genome Expression Products in Baker's Yeast Saccharomyces cerevisiae

Labelling and Visualization of Mitochondrial Genome Expression Products in Baker's Yeast Saccharomyces cerevisiae

Маркировка и визуализация продуктов экспрессии митохондриального генома в хлебобулочных saccharomyces cerevisiae

Mitochondria are essential organelles of eukaryotic cells capable of aerobic respiration. They contain circular genome and gene expression apparatus. A ...

Assessing Mitochondrial Function in Sciatic Nerve by High-Resolution Respirometry

Оценка митохондриальной функции в седалищном нерве с помощью респирометрии высокого разрешения

Mitochondrial dysfunction in peripheral nerves accompanies several diseases associated with peripheral neuropathy, which can be triggered by multiple ...