Name: burn injury-induced pain and depression-like behavior in mice
Uploaded: 2021-09-29T14:00:00
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Questa ricerca è stata sostenuta dalla Chungnam National University e dalla sovvenzione della National Research Foundation of Korea (NRF) finanziata dal governo della Corea (NRF-2019R1A6A3A01093963 e NRF-2021R1F1A1062509).

Tutti i protocolli sperimentali sono stati esaminati e approvati dall'Institutional Animal Care and Use Committee presso la Chungnam National University in Corea del Sud, e quindi condotti sulla base delle linee guida etiche dell'Associazione internazionale per lo studio del dolore18.
1. Induzione di lesioni da ustione scottante sulla zampa posteriore
<ol><li>Ospitare i topi ICR maschi del peso di 20-25 g in una stanza luminosa e a temperatura control...

<ol>
	<li>Peck, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epidemiology+of+burns+throughout+the+World.+Part+II:+intentional+burns+in+adults.">Epidemiology of burns throughout the World. Part II: intentional burns in adults.</a> Burns. 38 (5), 630-637 (2012).</li><li>Tracy, L. M., Cleland, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pain+assessment+following+burn+injury+in+Australia+and+New+Zealand:+Variation+in+practice+and+its+association+on+in-hospital+outcomes.">Pain assessment following burn injury in Australia and New Zealand: Variation in practice and its association on in-hospital outcomes.</a> Australasian Emergency Care. 24 (1), 73-79 (2021).</li><li>Montgomery, R. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pain+management+in+burn+injury.">Pain management in burn injury.</a> Critical Care Nursing Clinics of North America. 16 (1), 39-49 (2004).</li><li>Kang, D. W., Choi, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bee+venom+reduces+burn-induced+pain+via+the+suppression+of+peripheral+and+central+substance+P+expression+in+mice.">Bee venom reduces burn-induced pain via the suppression of peripheral and central substance P expression in mice.</a> Journal of Veterinary Science. 22 (1), 9 (2021).</li><li>Abdi, S., Zhou, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Management+of+pain+after+burn+injury.">Management of pain after burn injury.</a> Current Opinion in Anaesthesiology. 15 (5), 563-567 (2002).</li><li>Ullrich, P. M., Askay, S. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pain,+depression,+and+physical+functioning+following+burn+injury.">Pain, depression, and physical functioning following burn injury.</a> Rehabilitation Psychology. 54 (2), 211-216 (2009).</li><li>Patwa, S., Benson, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spinal+cord+motor+neuron+plasticity+accompanies+second-degree+burn+injury+and+chronic+pain.">Spinal cord motor neuron plasticity accompanies second-degree burn injury and chronic pain.</a> Physiological Reports. 7 (23), 14288 (2019).</li><li>Michaelides, A., Zis, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Depression,+anxiety+and+acute+pain:+links+and+management+challenges.">Depression, anxiety and acute pain: links and management challenges.</a> Postgraduate Medicine. 131 (7), 438-444 (2019).</li><li>Doan, L., Manders, T., Wang, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neuroplasticity+underlying+the+comorbidity+of+pain+and+depression.">Neuroplasticity underlying the comorbidity of pain and depression.</a> Neural Plasticity. 2015, 504691 (2015).</li><li>Vachon-Presseau, E., Centeno, M. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+emotional+brain+as+a+predictor+and+amplifier+of+chronic+pain.">The emotional brain as a predictor and amplifier of chronic pain.</a> Journal of Dental Research. 95 (6), 605-612 (2016).</li><li>Apkarian, A. V., Baliki, M. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Predicting+transition+to+chronic+pain.">Predicting transition to chronic pain.</a> Current Opinion in Neurology. 26 (4), 360-367 (2013).</li><li>Yin, W., Mei, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Central+amygdala-ventrolateral+periaqueductal+gray+matter+pathway+for+pain+in+a+mouse+model+of+depression-like+behavior.">A Central amygdala-ventrolateral periaqueductal gray matter pathway for pain in a mouse model of depression-like behavior.</a> Anesthesiology. 132 (5), 1175-1196 (2020).</li><li>Deng, Y. T., Zhao, M. G., Xu, T. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gentiopicroside+abrogates+lipopolysaccharide-induced+depressive-like+behavior+in+mice+through+tryptophan-degrading+pathway.">Gentiopicroside abrogates lipopolysaccharide-induced depressive-like behavior in mice through tryptophan-degrading pathway.</a> Metabolic Brain Disease. 33 (5), 1413-1420 (2018).</li><li>Zhang, G. F., Wang, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acute+single+dose+of+ketamine+relieves+mechanical+allodynia+and+consequent+depression-like+behaviors+in+a+rat+model.">Acute single dose of ketamine relieves mechanical allodynia and consequent depression-like behaviors in a rat model.</a> Neuroscience Letters. 631, 7-12 (2016).</li><li>Edwards, R. R., Smith, M. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Symptoms+of+depression+and+anxiety+as+unique+predictors+of+pain-related+outcomes+following+burn+injury.">Symptoms of depression and anxiety as unique predictors of pain-related outcomes following burn injury.</a> Annals of Behavioral Medicine. 34 (3), 313-322 (2007).</li><li>Pincus, T., Vlaeyen, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cognitive-behavioral+therapy+and+psychosocial+factors+in+low+back+pain:+directions+for+the+future.">Cognitive-behavioral therapy and psychosocial factors in low back pain: directions for the future.</a> Spine. 27 (5), 133-138 (2002).</li><li>Laumet, G., Edralin, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=CD3(+)+T+cells+are+critical+for+the+resolution+of+comorbid+inflammatory+pain+and+depression-like+behavior.">CD3(+) T cells are critical for the resolution of comorbid inflammatory pain and depression-like behavior.</a> Neurobiology of Pain. 7, 100043 (2020).</li><li>Zimmermann, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ethical+guidelines+for+investigations+of+experimental+pain+in+conscious+animals.">Ethical guidelines for investigations of experimental pain in conscious animals.</a> Pain. 16 (2), 109-110 (1983).</li><li>Deuis, J. R., Dvorakova, L. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Methods+used+to+evaluate+pain+behaviors+in+rodents.">Methods used to evaluate pain behaviors in rodents.</a> Frontiers in Molecular Neuroscience. 10, 284 (2017).</li><li>Scholz, J., Broom, D. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Blocking+caspase+activity+prevents+transsynaptic+neuronal+apoptosis+and+the+loss+of+inhibition+in+lamina+II+of+the+dorsal+horn+after+peripheral+nerve+injury.">Blocking caspase activity prevents transsynaptic neuronal apoptosis and the loss of inhibition in lamina II of the dorsal horn after peripheral nerve injury.</a> The Journal of Neuroscience: The Official Journal of the Society for Neuroscience. 25 (32), 7317-7323 (2005).</li><li>Kang, D. W., Choi, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Automated+gait+analysis+in+mice+with+chronic+constriction+injury.">Automated gait analysis in mice with chronic constriction injury.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (128), e56402 (2017).</li><li>Kang, D. W., Moon, J. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Antinociceptive+profile+of+levo-tetrahydropalmatine+in+acute+and+chronic+pain+mice+models:+Role+of+spinal+sigma-1+receptor.">Antinociceptive profile of levo-tetrahydropalmatine in acute and chronic pain mice models: Role of spinal sigma-1 receptor.</a> Scientific Reports. 6, 37850 (2016).</li><li>Huang, W., Chen, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Piperine+potentiates+the+antidepressant-like+effect+of+trans-resveratrol:+involvement+of+monoaminergic+system.">Piperine potentiates the antidepressant-like effect of trans-resveratrol: involvement of monoaminergic system.</a> Metabolic Brain Disease. 28 (4), 585-595 (2013).</li><li>Can, A., Dao, D. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+mouse+forced+swim+test.">The mouse forced swim test.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (59), e3638 (2012).</li><li>Choi, J. G., Kang, S. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Antinociceptive+effect+of+Cyperi+rhizoma+and+Corydalis+tuber+extracts+on+neuropathic+pain+in+rats.">Antinociceptive effect of Cyperi rhizoma and Corydalis tuber extracts on neuropathic pain in rats.</a> Korean Journal of Physiology &amp; Pharmacology. 16 (6), 387-392 (2012).</li><li>Mosby's. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Mosby's Dictionary of Medicine, Nursing &amp; Health Professions - Seventh edition, Nursing Standard. 20 (22), 36 (2006).</li><li>Vandeputte, C., Taymans, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Automated+quantitative+gait+analysis+in+animal+models+of+movement+disorders.">Automated quantitative gait analysis in animal models of movement disorders.</a> BMC Neuroscience. 11, 92 (2010).</li><li>Isvoranu, G., Manole, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gait+analysis+using+animal+models+of+peripheral+nerve+and+spinal+cord+injuries.">Gait analysis using animal models of peripheral nerve and spinal cord injuries.</a> Biomedicines. 9 (8), 1050 (2021).</li><li>Yankelevitch-Yahav, R., Franko, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+forced+swim+test+as+a+model+of+depressive-like+behavior.">The forced swim test as a model of depressive-like behavior.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (97), e52587 (2015).</li><li>Yan, H. C., Cao, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Behavioral+animal+models+of+depression.">Behavioral animal models of depression.</a> Neuroscience Bulletin. 26 (4), 327-337 (2010).</li><li>Papp, M., Willner, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+animal+model+of+anhedonia:+attenuation+of+sucrose+consumption+and+place+preference+conditioning+by+chronic+unpredictable+mild+stress.">An animal model of anhedonia: attenuation of sucrose consumption and place preference conditioning by chronic unpredictable mild stress.</a> Psychopharmacology. 104 (2), 255-259 (1991).</li><li>Seminowicz, D. A., Laferriere, A. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=MRI+structural+brain+changes+associated+with+sensory+and+emotional+function+in+a+rat+model+of+long-term+neuropathic+pain.">MRI structural brain changes associated with sensory and emotional function in a rat model of long-term neuropathic pain.</a> Neuroimage. 47 (3), 1007-1014 (2009).</li><li>Yalcin, I., Barthas, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Emotional+consequences+of+neuropathic+pain:+insight+from+preclinical+studies.">Emotional consequences of neuropathic pain: insight from preclinical studies.</a> Neuroscience and Biobehavioral Reviews. 47, 154-164 (2014).</li><li>Choi, J. W., Kang, S. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Analgesic+effect+of+electroacupuncture+on+paclitaxel-induced+neuropathic+pain+via+spinal+opioidergic+and+adrenergic+mechanisms+in+mice.">Analgesic effect of electroacupuncture on paclitaxel-induced neuropathic pain via spinal opioidergic and adrenergic mechanisms in mice.</a> American Journal of Chinese Medicine. 43 (1), 57-70 (2015).</li></ol>

La scottatura è una sorta di bruciatura termica causata da liquidi riscaldati. È stato suggerito che le ustioni di primo o secondo grado si verificano nella maggior parte dei casi, ma il contatto a lungo termine con fonti di calore può causare ustioni di terzo grado26. Nel presente studio, la lesione da ustione è stata indotta esponendo la zampa posteriore destra dei topi in acqua calda a 65 ° C per 3 s 4,26. Il danno tissutale è sta...

Il danno tissutale, come ustioni e traumi, è generalmente associato alla co-occorrenza di dolore acuto. Le ustioni e i sintomi legati al trauma sono stimati in 1.80.000 morti ogni anno causati da ustioni: la stragrande maggioranza si verifica nei paesi a basso e medio reddito da diversi tipi di ustioni1. Secondo un rapporto mondiale, le ustioni sono comuni nei bambini e rappresentano circa il 40% -60% dei pazienti ospedalizzati 2,3. Queste lesioni specifiche sono ancora più gravi in quanto possono verificarsi nella vita di tutti i giorni, come l'ebollizione o l'acqua di balneazione 4,5. Sebbene il dolore acuto possa essere risolto spontaneamente dopo il recupero dal danno tissutale nella maggior parte dei casi, può essere possibile diventare cronico a causa di cambiamenti anormali nel sistema nervoso 6,7.
Recentemente, è stato suggerito che il dolore acuto può indurre uno stato d'animo depresso e il dolore cronico può causare ansia e depressione 8,9,10,11. La coesistenza di dolore e depressione rende più difficile trattare il paziente. La depressione tende anche ad aumentare la sensibilità al dolore, che è probabile che induca depressione e dolore più intensi12. Le complicanze del dolore e della depressione sono mostrate in modelli animali di infiammazione periferica 13,14,15,16. I meccanismi dettagliati alla base della depressione indotta dal dolore non sono ben noti fino ad ora17. Pertanto, è necessario sviluppare trattamenti più efficaci per le ustioni per alleviare gli effetti collaterali e i sintomi.
Pertanto, il presente studio è stato progettato per sviluppare un modello animale per studiare il dolore acuto indotto da ustioni e il comportamento simile alla depressione nei topi. Per questo, sono stati misurati la sensibilità tattile anormale correlata alle ustioni, il modello di andatura alterato e il comportamento simile alla depressione. Inoltre, questo studio tenta di convalidare il modello utilizzando i FANS.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>1 mL syringe</td>
			<td>BD</td>
			<td>307809</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1.5 mL tube</td>
			<td>Axygen</td>
			<td>MCT-150-C</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>50 mL tube</td>
			<td>SPL</td>
			<td>50050</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acetaminophen BioXtra, &#8805;99.0%</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>A7085-100G</td>
			<td>Positive control (The analgesic agent, acetaminophen (200 mg/kg) was administered intraperitoneally once-daily for 7 days starting from the day of after burn injury (Only Burn + Acetaminophen group. (von-Frey test, gait analysis, and forced swimming test: Used for drug-dependent behavioral testing after burn injury), (Rota-rod test: It was used to investigate the motor and functional impairments of the drug in animals after burn injury).</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alfaxan multidose (Alfaxalone)</td>
			<td>JUROX Pty.Limited</td>
			<td></td>
			<td>In this experiment, this material used for animal anesthesia, and was used as a positive control for experimentally treated drugs in the rota-rod test.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CatWalk automated gait analysis system</td>
			<td>Noldus</td>
			<td>CatWalk XT</td>
			<td>Gait analysis in freely walking rodents is used to study the changes in limb movement and positioning in models with sensory-motor dysfunction</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>OPTISHIELD (Cyclosporin ophthalmic ointment)</td>
			<td>Ashish Life Science</td>
			<td></td>
			<td>In this experiment, this material was used for an ointment to prevent corneal drying after induction of anesthesia.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Plexiglass cylinder</td>
			<td>SCITECH KOREA</td>
			<td>custom made products</td>
			<td>Used in forced swimming test</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rota-rod system</td>
			<td>SCITECH KOREA</td>
			<td>Accelerating rota rod</td>
			<td>Used in the measurement of Normal Motor Function</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>von Frey filaments</td>
			<td>North Coast Medical</td>
			<td>NC12775</td>
			<td>Used in the measurement of Mechanical Allodynia</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Waterbath</td>
			<td>CHANGSHIN SCIENCE</td>
			<td>C-WBE</td>
			<td>Used in the burn injury induction</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

burn injury-induced pain and depression-like behavior in mice

L'acqua scottante è la causa più comune di ustioni sia nelle popolazioni anziane che in quelle giovani. È una delle principali sfide cliniche a causa dell'alta mortalità e delle sequele nei paesi a basso e medio reddito. Le ustioni spesso inducono intenso dolore spontaneo e allodinia persistente, nonché problemi potenzialmente letali. Ancora più importante, il dolore eccessivo è spesso accompagnato da depressione, che può ridurre significativamente la qualità della vita. Questo articolo mostra come sviluppare un modello animale per lo studio del dolore indotto da ustioni e del comportamento simile alla depressione. Dopo l'anestesia, la lesione da ustione è stata indotta immergendo una zampa posteriore del topo in acqua calda (65 ° C ± 0,5 ° C) per 3 s. Il test di von Frey e l'analisi automatizzata dell'andatura sono stati eseguiti ogni 2 giorni dopo la lesione da ustione. Inoltre, il comportamento simile alla depressione è stato esaminato utilizzando il test di nuoto forzato e il test a rotazione è stato eseguito per differenziare la funzione motoria anormale dopo la lesione da ustione. Lo scopo principale di questo studio è descrivere lo sviluppo di un modello animale per lo studio del dolore indotto da ustioni e del comportamento simile alla depressione nei topi.

Al fine di ridurre al minimo la sofferenza animale e ridurre il numero di animali utilizzati secondo le linee guida Three R (Replacement, Reduction, and Refinement), questo studio è stato progettato con il numero minimo di animali per la raccolta di dati significativi stabiliti attraverso esperimenti preliminari. In questo studio, gli esperimenti comportamentali sono stati condotti in modo indipendente due volte come segue. L'analisi dell'andatura, l'allodinia meccanica e i test di comportamento simile alla depressione ...

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Burn Injury-Induced Pain and Depression-Like Behavior in Mice

Una lesione transitoria da scottatura (65 °C ± 0,5 °C, 3 s) di una zampa posteriore riduce la soglia (g) alla stimolazione del filamento di von Frey del lato ipsilaterale e altera il modello dell'andatura. Inoltre, la lesione da ustione induce un comportamento simile alla depressione nel test di nuoto forzato.

Dolore indotto da ustioni e comportamento simile alla depressione nei topi

Scalding water is the most common cause of burn injury in both elderly and young populations. It is one of the major clinical challenges because of the ...

Questo protocollo è adatto per la ricerca sui vari aspetti e gli esiti del dolore da ustione e del suo trattamento, e si prevede che porterà informazioni importanti a questo campo di ricerca. Questo protocollo stabilisce un modello animale di ustione indotto dall'acqua calda e propone un metodo per misurare il dolore correlato, i disturbi dell'andatura e le risposte comportamentali simili alla depressione. A dimostrare la procedura sarà Jaehyuk Kim, uno studente master nel laboratorio del Dr.Kim.Per iniziare, ospita i topi ICR maschi del peso di 20-25 grammi in una stanza luminosa e a temperatura controllata. Consenti ai topi di avere libero accesso al cibo e all'acqua e acclimatarsi per almeno una settimana prima dell'inizio dell'esperimento. Dopo una settimana, assegna i topi in modo casuale al gruppo sperimentale o di controllo e usa i numeri degli animali come codici per condurre esperimenti ciechi.Prima di eseguire l'induzione dell'ustione, indossare un camice chirurgico, guanti e maschera. Successivamente, dopo aver anestetizzato profondamente il topo, disinfettare intorno alla zampa posteriore destra con etanolo al 70% e applicare un unguento oftalmico agli occhi per prevenire l'essiccazione corneale, quindi fare un segno sulla caviglia di ciascun topo e immergere la zampa posteriore destra in acqua calda a 65 gradi Celsius per tre secondi. Dopo la lesione da ustione, posizionare il mouse su una piastra riscaldante in una gabbia domestica pulita fino a quando non si riprende dall'anestesia.Porta i topi nella sala di test comportamentali e lasciali acclimatare per almeno 30 minuti prima del test. Mentre i topi si acclimatano, indossa un camice chirurgico, guanti e maschera. Quindi, posizionare i topi in una scatola quadrata su un pavimento in rete metallica e lasciarli acclimatare per altri 30 minuti.Quindi, per valutare la soglia meccanica della zampa posteriore usando il metodo dello stimolo ascendente, colpire delicatamente la zampa con una serie di filamenti di Von Frey a intervalli da cinque a otto secondi per stimolare il plantare posteriore. Eseguire cinque prove per valutare le soglie meccaniche per ogni zampa posteriore ipsilaterale. Per l'analisi dell'andatura, acclimatare i topi nel sistema di analisi dell'andatura ogni giorno per 10-15 minuti a partire da cinque giorni prima della lesione da ustione.Il giorno del test, dopo aver indossato camice chirurgico, guanti e maschera, porta i topi nella sala test comportamentale e lasciali acclimatare per 30 minuti prima del test, quindi avvia il programma di analisi dell'andatura e fai clic sul menu Crea nuovo esperimento per designare la cartella in cui salvare i dati. Dopo la designazione, impostare il tempo di esecuzione massimo su cinque secondi e le variazioni di velocità massime consentite su 50%Successivamente, nella scheda di configurazione del programma, selezionare una fotocamera registrata e impostare la lunghezza della passerella su 30 centimetri. Quindi nella scheda acquisita del menu del programma, selezionare l'acquisizione aperta e in base ai messaggi di stato, fare clic sul pulsante di sfondo a scatto per acquisire un'immagine di sfondo di una passerella vuota.Quindi, fare clic sul pulsante di avvio dell'acquisizione e posizionare il mouse all'ingresso della passerella trasversale sinistra / destra. La registrazione inizierà automaticamente seguendo il libero movimento del mouse. Dopo una registrazione riuscita, selezionare classifica esecuzioni dalla scheda acquisita del menu del programma, quindi selezionare l'esecuzione da analizzare e fare clic sul pulsante di classificazione automatica.Una volta completata la classificazione automatica, rimuovere il naso, il riconoscimento genitale e il riconoscimento errato delle zampe ai dati spazzatura in ogni corsa, quindi analizzare i dati. Dopo un periodo di acclimatazione di 30 minuti nella sala di test comportamentale, posizionare il mouse in un cilindro di plexiglas trasparente contenente 15 centimetri di acqua per 15 minuti. Il giorno dopo, metti di nuovo il mouse nel cilindro nelle stesse condizioni e misura il tempo di immobilità, cioè quando il mouse smette di arrampicarsi o nuotare e galleggia con la testa sopra la superficie dell'acqua.Successivamente, per misurare la normale funzione motoria, posizionare l'animale su una piattaforma cilindrica rotante sospesa a 16 centimetri sopra il fondo dell'apparecchio. Prima di indurre lesioni da ustione, consentire ai topi di allenarsi una volta al giorno sul rotarod per almeno cinque giorni. Dopo la somministrazione del farmaco, eseguire un test rotarod ogni 20 minuti per due ore con un tempo limite di due minuti.Misurare la durata del tempo in cui il mouse scorre su un'asta rotante alla velocità costante di 15 giri al minuto senza cadere. La soglia di ritiro della zampa dei topi indotti da ustioni è diminuita dopo il primo giorno ed è stata sostenuta per sette giorni rispetto al gruppo di controllo. La somministrazione di paracetamolo ha ridotto significativamente la diminuzione indotta da ustioni nella soglia di prelievo della zampa.Inoltre, l'area sotto l'analisi della curva ha mostrato che la somministrazione di paracetamolo ha ridotto significativamente l'allodinia meccanica indotta da ustioni. Anche l'area di stampa della zampa posteriore si è ridotta significativamente dopo l'induzione della lesione da ustione e ha persistito per sette giorni. La somministrazione di paracetamolo ha migliorato significativamente l'area di stampa della zampa posteriore rispetto al trattamento del veicolo.Inoltre, la lesione da ustione ha ridotto la singola posizione della zampa posteriore ipsilaterale dopo il primo giorno e questa riduzione è stata mantenuta per sette giorni. La posizione singola della zampa posteriore è stata migliorata dalla somministrazione di paracetamolo. Nel test di nuoto forzato, i tempi di immobilità dei topi indotti da ustioni sono aumentati sette giorni dopo l'infortunio rispetto a quelli del gruppo di controllo.La somministrazione di paracetamolo ha ridotto significativamente l'aumento del tempo di immobilità indotto da ustioni. Nel test rotarod, i tempi di esecuzione dei topi indotti da ustioni erano simili a quelli del gruppo di controllo sette giorni dopo l'induzione dell'ustione. Al contrario, i tempi di esecuzione dei topi trattati con alfaxolone sono stati significativamente ridotti di circa 60 minuti, indicando che questo metodo di ustione non causa compromissione motoria.L'entità dell'ustione applicata a ciascun animale deve essere mantenuta costante per ottenere risultati accurati. I vari metodi di analisi sperimentale comportamentale proposti in questo studio possono anche essere applicati ad altri modelli animali legati al dolore, ai disturbi dell'andatura e al comportamento simile alla depressione. I metodi di analisi proposti possono quantificare vari sintomi dopo l'induzione di lesioni da ustione, che saranno utili per lo sviluppo di metodi di ricerca e trattamento relativi alle ustioni in futuro.

Research

JoVE Journal

Neuroscience

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Ricerca

Neuroscienze

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