Name: burn injury-induced pain and depression-like behavior in mice
Uploaded: 2021-09-29T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Burn Injury-Induced Pain and Depression-Like Behavior in Mice at JoVE.com

Denna forskning stöddes av Chungnam National University och National Research Foundation of Korea (NRF) -bidrag finansierat av Koreas regering (NRF-2019R1A6A3A01093963 och NRF-2021R1F1A1062509).

Alla experimentella protokoll granskades och godkändes av Institutional Animal Care and Use Committee vid Chungnam National University i Sydkorea och genomfördes sedan baserat på de etiska riktlinjerna från International Association for the Study of Pain18.
1. Induktion av skållningsskada på bakpoten
<ol><li>Hus de manliga ICR-mössen som väger 20-25 g i ett ljust och temperaturkontrollerat rum (12/12 h ljus-mörk cykel, 22,5 ° C ± 2,5 ° C) ...

<ol>
	<li>Peck, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epidemiology+of+burns+throughout+the+World.+Part+II:+intentional+burns+in+adults.">Epidemiology of burns throughout the World. Part II: intentional burns in adults.</a> Burns. 38 (5), 630-637 (2012).</li><li>Tracy, L. M., Cleland, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pain+assessment+following+burn+injury+in+Australia+and+New+Zealand:+Variation+in+practice+and+its+association+on+in-hospital+outcomes.">Pain assessment following burn injury in Australia and New Zealand: Variation in practice and its association on in-hospital outcomes.</a> Australasian Emergency Care. 24 (1), 73-79 (2021).</li><li>Montgomery, R. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pain+management+in+burn+injury.">Pain management in burn injury.</a> Critical Care Nursing Clinics of North America. 16 (1), 39-49 (2004).</li><li>Kang, D. W., Choi, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bee+venom+reduces+burn-induced+pain+via+the+suppression+of+peripheral+and+central+substance+P+expression+in+mice.">Bee venom reduces burn-induced pain via the suppression of peripheral and central substance P expression in mice.</a> Journal of Veterinary Science. 22 (1), 9 (2021).</li><li>Abdi, S., Zhou, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Management+of+pain+after+burn+injury.">Management of pain after burn injury.</a> Current Opinion in Anaesthesiology. 15 (5), 563-567 (2002).</li><li>Ullrich, P. M., Askay, S. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pain,+depression,+and+physical+functioning+following+burn+injury.">Pain, depression, and physical functioning following burn injury.</a> Rehabilitation Psychology. 54 (2), 211-216 (2009).</li><li>Patwa, S., Benson, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spinal+cord+motor+neuron+plasticity+accompanies+second-degree+burn+injury+and+chronic+pain.">Spinal cord motor neuron plasticity accompanies second-degree burn injury and chronic pain.</a> Physiological Reports. 7 (23), 14288 (2019).</li><li>Michaelides, A., Zis, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Depression,+anxiety+and+acute+pain:+links+and+management+challenges.">Depression, anxiety and acute pain: links and management challenges.</a> Postgraduate Medicine. 131 (7), 438-444 (2019).</li><li>Doan, L., Manders, T., Wang, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neuroplasticity+underlying+the+comorbidity+of+pain+and+depression.">Neuroplasticity underlying the comorbidity of pain and depression.</a> Neural Plasticity. 2015, 504691 (2015).</li><li>Vachon-Presseau, E., Centeno, M. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+emotional+brain+as+a+predictor+and+amplifier+of+chronic+pain.">The emotional brain as a predictor and amplifier of chronic pain.</a> Journal of Dental Research. 95 (6), 605-612 (2016).</li><li>Apkarian, A. V., Baliki, M. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Predicting+transition+to+chronic+pain.">Predicting transition to chronic pain.</a> Current Opinion in Neurology. 26 (4), 360-367 (2013).</li><li>Yin, W., Mei, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Central+amygdala-ventrolateral+periaqueductal+gray+matter+pathway+for+pain+in+a+mouse+model+of+depression-like+behavior.">A Central amygdala-ventrolateral periaqueductal gray matter pathway for pain in a mouse model of depression-like behavior.</a> Anesthesiology. 132 (5), 1175-1196 (2020).</li><li>Deng, Y. T., Zhao, M. G., Xu, T. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gentiopicroside+abrogates+lipopolysaccharide-induced+depressive-like+behavior+in+mice+through+tryptophan-degrading+pathway.">Gentiopicroside abrogates lipopolysaccharide-induced depressive-like behavior in mice through tryptophan-degrading pathway.</a> Metabolic Brain Disease. 33 (5), 1413-1420 (2018).</li><li>Zhang, G. F., Wang, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acute+single+dose+of+ketamine+relieves+mechanical+allodynia+and+consequent+depression-like+behaviors+in+a+rat+model.">Acute single dose of ketamine relieves mechanical allodynia and consequent depression-like behaviors in a rat model.</a> Neuroscience Letters. 631, 7-12 (2016).</li><li>Edwards, R. R., Smith, M. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Symptoms+of+depression+and+anxiety+as+unique+predictors+of+pain-related+outcomes+following+burn+injury.">Symptoms of depression and anxiety as unique predictors of pain-related outcomes following burn injury.</a> Annals of Behavioral Medicine. 34 (3), 313-322 (2007).</li><li>Pincus, T., Vlaeyen, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cognitive-behavioral+therapy+and+psychosocial+factors+in+low+back+pain:+directions+for+the+future.">Cognitive-behavioral therapy and psychosocial factors in low back pain: directions for the future.</a> Spine. 27 (5), 133-138 (2002).</li><li>Laumet, G., Edralin, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=CD3(+)+T+cells+are+critical+for+the+resolution+of+comorbid+inflammatory+pain+and+depression-like+behavior.">CD3(+) T cells are critical for the resolution of comorbid inflammatory pain and depression-like behavior.</a> Neurobiology of Pain. 7, 100043 (2020).</li><li>Zimmermann, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ethical+guidelines+for+investigations+of+experimental+pain+in+conscious+animals.">Ethical guidelines for investigations of experimental pain in conscious animals.</a> Pain. 16 (2), 109-110 (1983).</li><li>Deuis, J. R., Dvorakova, L. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Methods+used+to+evaluate+pain+behaviors+in+rodents.">Methods used to evaluate pain behaviors in rodents.</a> Frontiers in Molecular Neuroscience. 10, 284 (2017).</li><li>Scholz, J., Broom, D. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Blocking+caspase+activity+prevents+transsynaptic+neuronal+apoptosis+and+the+loss+of+inhibition+in+lamina+II+of+the+dorsal+horn+after+peripheral+nerve+injury.">Blocking caspase activity prevents transsynaptic neuronal apoptosis and the loss of inhibition in lamina II of the dorsal horn after peripheral nerve injury.</a> The Journal of Neuroscience: The Official Journal of the Society for Neuroscience. 25 (32), 7317-7323 (2005).</li><li>Kang, D. W., Choi, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Automated+gait+analysis+in+mice+with+chronic+constriction+injury.">Automated gait analysis in mice with chronic constriction injury.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (128), e56402 (2017).</li><li>Kang, D. W., Moon, J. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Antinociceptive+profile+of+levo-tetrahydropalmatine+in+acute+and+chronic+pain+mice+models:+Role+of+spinal+sigma-1+receptor.">Antinociceptive profile of levo-tetrahydropalmatine in acute and chronic pain mice models: Role of spinal sigma-1 receptor.</a> Scientific Reports. 6, 37850 (2016).</li><li>Huang, W., Chen, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Piperine+potentiates+the+antidepressant-like+effect+of+trans-resveratrol:+involvement+of+monoaminergic+system.">Piperine potentiates the antidepressant-like effect of trans-resveratrol: involvement of monoaminergic system.</a> Metabolic Brain Disease. 28 (4), 585-595 (2013).</li><li>Can, A., Dao, D. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+mouse+forced+swim+test.">The mouse forced swim test.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (59), e3638 (2012).</li><li>Choi, J. G., Kang, S. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Antinociceptive+effect+of+Cyperi+rhizoma+and+Corydalis+tuber+extracts+on+neuropathic+pain+in+rats.">Antinociceptive effect of Cyperi rhizoma and Corydalis tuber extracts on neuropathic pain in rats.</a> Korean Journal of Physiology &amp; Pharmacology. 16 (6), 387-392 (2012).</li><li>Mosby's. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Mosby's Dictionary of Medicine, Nursing &amp; Health Professions - Seventh edition, Nursing Standard. 20 (22), 36 (2006).</li><li>Vandeputte, C., Taymans, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Automated+quantitative+gait+analysis+in+animal+models+of+movement+disorders.">Automated quantitative gait analysis in animal models of movement disorders.</a> BMC Neuroscience. 11, 92 (2010).</li><li>Isvoranu, G., Manole, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gait+analysis+using+animal+models+of+peripheral+nerve+and+spinal+cord+injuries.">Gait analysis using animal models of peripheral nerve and spinal cord injuries.</a> Biomedicines. 9 (8), 1050 (2021).</li><li>Yankelevitch-Yahav, R., Franko, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+forced+swim+test+as+a+model+of+depressive-like+behavior.">The forced swim test as a model of depressive-like behavior.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (97), e52587 (2015).</li><li>Yan, H. C., Cao, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Behavioral+animal+models+of+depression.">Behavioral animal models of depression.</a> Neuroscience Bulletin. 26 (4), 327-337 (2010).</li><li>Papp, M., Willner, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+animal+model+of+anhedonia:+attenuation+of+sucrose+consumption+and+place+preference+conditioning+by+chronic+unpredictable+mild+stress.">An animal model of anhedonia: attenuation of sucrose consumption and place preference conditioning by chronic unpredictable mild stress.</a> Psychopharmacology. 104 (2), 255-259 (1991).</li><li>Seminowicz, D. A., Laferriere, A. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=MRI+structural+brain+changes+associated+with+sensory+and+emotional+function+in+a+rat+model+of+long-term+neuropathic+pain.">MRI structural brain changes associated with sensory and emotional function in a rat model of long-term neuropathic pain.</a> Neuroimage. 47 (3), 1007-1014 (2009).</li><li>Yalcin, I., Barthas, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Emotional+consequences+of+neuropathic+pain:+insight+from+preclinical+studies.">Emotional consequences of neuropathic pain: insight from preclinical studies.</a> Neuroscience and Biobehavioral Reviews. 47, 154-164 (2014).</li><li>Choi, J. W., Kang, S. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Analgesic+effect+of+electroacupuncture+on+paclitaxel-induced+neuropathic+pain+via+spinal+opioidergic+and+adrenergic+mechanisms+in+mice.">Analgesic effect of electroacupuncture on paclitaxel-induced neuropathic pain via spinal opioidergic and adrenergic mechanisms in mice.</a> American Journal of Chinese Medicine. 43 (1), 57-70 (2015).</li></ol>

Skållningsbränningen är en slags termisk brännskada som orsakas av uppvärmda vätskor. Det har föreslagits att första eller andra gradens brännskador uppträder i de flesta fall, men långvarig kontakt med värmekällor kan orsaka tredje gradens brännskador26. I den aktuella studien inducerades brännskador genom att exponera mössens högra baktass i varmt vatten vid 65 ° C i 3 s 4,26. Vävnadsskador upptäcktes i den brännskad...

Vävnadsskador, såsom brännskador och trauma, är i allmänhet förknippade med samtidig förekomst av akut smärta. Brännskador och traumarelaterade symtom är uppskattningsvis 1 80 000 dödsfall varje år orsakas av brännskador - de allra flesta förekommer i låg- och medelinkomstländer från olika typer av brännskador1. Enligt en världsomspännande rapport är brännskador vanliga hos barn och står för cirka 40% -60% avsjukhuspatienterna 2,3. Dessa specifika skador är ännu allvarligare eftersom de kan uppstå i vardagen, såsom kokning eller badvatten 4,5. Även om akut smärta kan lösas spontant efter återhämtning från vävnadsskada i de flesta fall, kan det vara möjligt att bli kronisk på grund av onormala förändringar i nervsystemet 6,7.
Nyligen har det föreslagits att akut smärta kan inducera ett deprimerat humör, och kronisk smärta kan orsaka ångest och depression 8,9,10,11. Samexistensen av smärta och depression gör det svårare att behandla patienten. Depression tenderar också att öka smärtkänsligheten, vilket sannolikt kommer att inducera mer intensiv depression och smärta12. Komplikationer av smärta och depression visas i djurmodeller av perifer inflammation 13,14,15,16. De detaljerade mekanismerna bakom smärtinducerad depression är inte välkända förrän nu17. Således är det nödvändigt att utveckla effektivare behandlingar för brännskador för att lindra biverkningar och symtom.
Således var den föreliggande studien utformad för att utveckla en djurmodell för att studera brännskadeinducerad akut smärta och depressionsliknande beteende hos möss. För detta mättes brännskaderelaterad onormal taktil känslighet, förändrat gångmönster och depressionsliknande beteende. Dessutom försöker denna studie validera modellen med hjälp av NSAID.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>1 mL syringe</td>
			<td>BD</td>
			<td>307809</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1.5 mL tube</td>
			<td>Axygen</td>
			<td>MCT-150-C</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>50 mL tube</td>
			<td>SPL</td>
			<td>50050</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acetaminophen BioXtra, &#8805;99.0%</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>A7085-100G</td>
			<td>Positive control (The analgesic agent, acetaminophen (200 mg/kg) was administered intraperitoneally once-daily for 7 days starting from the day of after burn injury (Only Burn + Acetaminophen group. (von-Frey test, gait analysis, and forced swimming test: Used for drug-dependent behavioral testing after burn injury), (Rota-rod test: It was used to investigate the motor and functional impairments of the drug in animals after burn injury).</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alfaxan multidose (Alfaxalone)</td>
			<td>JUROX Pty.Limited</td>
			<td></td>
			<td>In this experiment, this material used for animal anesthesia, and was used as a positive control for experimentally treated drugs in the rota-rod test.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CatWalk automated gait analysis system</td>
			<td>Noldus</td>
			<td>CatWalk XT</td>
			<td>Gait analysis in freely walking rodents is used to study the changes in limb movement and positioning in models with sensory-motor dysfunction</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>OPTISHIELD (Cyclosporin ophthalmic ointment)</td>
			<td>Ashish Life Science</td>
			<td></td>
			<td>In this experiment, this material was used for an ointment to prevent corneal drying after induction of anesthesia.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Plexiglass cylinder</td>
			<td>SCITECH KOREA</td>
			<td>custom made products</td>
			<td>Used in forced swimming test</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rota-rod system</td>
			<td>SCITECH KOREA</td>
			<td>Accelerating rota rod</td>
			<td>Used in the measurement of Normal Motor Function</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>von Frey filaments</td>
			<td>North Coast Medical</td>
			<td>NC12775</td>
			<td>Used in the measurement of Mechanical Allodynia</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Waterbath</td>
			<td>CHANGSHIN SCIENCE</td>
			<td>C-WBE</td>
			<td>Used in the burn injury induction</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

burn injury-induced pain and depression-like behavior in mice

Skållande vatten är den vanligaste orsaken till brännskador hos både äldre och unga befolkningar. Det är en av de stora kliniska utmaningarna på grund av den höga dödligheten och följdsjukdomarna i låg- och medelinkomstländer. Brännskador inducerar ofta intensiv spontan smärta och ihållande allodyni samt livshotande problem. Ännu viktigare är att överdriven smärta ofta åtföljs av depression, vilket kan minska livskvaliteten avsevärt. Denna artikel visar hur man utvecklar en djurmodell för studier av bränninducerad smärta och depressionsliknande beteende. Efter anestesi orsakades brännskador genom att en baktass på musen doppades i varmt vatten (65 °C ± 0,5 °C) i 3 s. von Frey-testet och automatiserad gånganalys utfördes varannan dag efter brännskada. Dessutom undersöktes depressionsliknande beteende med hjälp av det tvingade simningstestet, och rota-stavtestet utfördes för att differentiera den onormala motorfunktionen efter brännskada. Huvudsyftet med denna studie är att beskriva utvecklingen av en djurmodell för studier av brännskadeinducerad smärta och depressionsliknande beteende hos möss.

För att minimera djurens lidande och minska antalet djur som används enligt riktlinjerna för tre R (ersättning, minskning och förfining) utformades denna studie med det minsta antalet djur för insamling av betydande data som fastställts genom preliminära experiment. I denna studie genomfördes beteendeexperiment oberoende av följande två gånger enligt följande. Gånganalysen, mekanisk allodyni och depressionsliknande beteendetester utfördes med kontroll (n = 5), brännskada (n = 7; fordonskontroll; saltlösn...

Watch this Scientific Journal Video about Burn Injury-Induced Pain and Depression-Like Behavior in Mice at JoVE.com

Burn Injury-Induced Pain and Depression-Like Behavior in Mice

En övergående skållningsskada (65 °C ± 0,5 °C, 3 s) på en baktass minskar tröskeln (g) till von Frey-filamentstimulering av den ipsilaterala sidan och förändrar gångmönstret. Dessutom inducerar brännskada depressionsliknande beteende i det tvingade simtestet.

Brännskadeinducerad smärta och depressionsliknande beteende hos möss

Scalding water is the most common cause of burn injury in both elderly and young populations. It is one of the major clinical challenges because of the ...

Detta protokoll är lämpligt för forskning om de olika aspekterna och resultaten av brännsmärta och dess behandling, och förväntas ge viktig information till detta forskningsområde. Detta protokoll etablerar en varmvatteninducerad bränndjursmodell och föreslår en metod för att mäta relaterad smärta, gångstörningar och depressionsliknande beteendemässiga svar. Demonstrerar proceduren kommer att vara Jaehyuk Kim, en masterstudent i Dr.Kims laboratorium.Till att börja med, hysa de manliga ICR-mössen som väger 20 till 25 gram i ett ljust och temperaturkontrollerat rum. Låt mössen ha fri tillgång till mat och vatten och acklimatisera sig i minst en vecka innan experimentet börjar. Efter en vecka, tilldela mössen slumpmässigt till experiment- eller kontrollgruppen och använd djurnummer som koder för att utföra blinda experiment.Innan du utför bränninduktionen, använd en kirurgisk klänning, handskar och mask. Därefter, efter djup bedövande musen, desinficera runt höger bakpote med 70% etanol och applicera en oftalmisk salva på ögonen för att förhindra torkning av hornhinnan, gör sedan ett märke på fotleden på varje mus och fördjupa höger bakpot i varmt vatten vid 65 grader Celsius i tre sekunder. Efter brännskadan, placera musen på en värmepanna i en ren hembur tills den återhämtar sig från anestesi.Ta mössen till beteendetestrummet och låt dem acklimatisera sig i minst 30 minuter före testet. Medan mössen acklimatiseras, ta på dig en kirurgisk klänning, handskar och mask. Placera sedan mössen i en fyrkantig låda på ett metallnätgolv och låt dem acklimatisera sig i ytterligare 30 minuter.För att sedan bedöma den mekaniska tröskeln för bakpoten med hjälp av den stigande stimulansmetoden, peka försiktigt tassen med en serie Von Frey-filament i fem till åtta sekunders intervall för att stimulera bakplantaren. Utför fem försök för att utvärdera mekaniska trösklar för varje ipsilateral baktass. För gånganalys, acklimatisera mössen i gånganalyssystemet dagligen i 10 till 15 minuter med början fem dagar före brännskadan.På testdagen, efter att ha använt kirurgisk klänning, handskar och mask, ta mössen till beteendetestrummet och låt dem acklimatisera i 30 minuter före testet, starta sedan gånganalysprogrammet och klicka på menyn Skapa nytt experiment för att ange mappen för att spara data. Efter beteckningen ställer du in den maximala körtiden till fem sekunder och maximala tillåtna hastighetsvariationer till 50%Nästa, på inställningsfliken i programmet, välj en registrerad kamera och ställ in gångbanans längd till 30 centimeter. Välj sedan öppet förvärv på den förvärvade fliken i programmenyn och baserat på statusmeddelandena klickar du på knappen snap background för att få en bakgrundsbild av en tom gångväg.Klicka sedan på startförvärvsknappen och placera musen vid ingången till vänster / höger transversabel gångväg. Inspelningen startar automatiskt efter musens fria rörlighet. Efter en lyckad inspelning väljer du Klassificera körningar från den förvärvade fliken i programmenyn, väljer sedan den körning som ska analyseras och klickar på knappen klassificera automatiskt.När den automatiska klassificeringen är klar tar du bort näsa, könsigenkänning och felaktigt erkännande av tassar till skräpdata i varje körning och analyserar sedan data. Efter en 30-minuters acklimatiseringsperiod i beteendetestrummet, placera musen i en klar plexiglascylinder som innehåller 15 centimeter vatten i 15 minuter. Nästa dag, placera musen i cylindern igen under samma förhållanden och mät immobilitetstiden, det vill säga när musen slutar klättra eller simma och bara flyter med huvudet ovanför vattenytan.Därefter, för att mäta normal motorfunktion, placera djuret på en rullande cylindrisk plattform upphängd 16 centimeter ovanför apparatens botten. Innan du inducerar brännskada, låt mössen träna en gång om dagen på rotarod i minst fem dagar. Efter administrering av läkemedel, utför ett rotarodtest var 20: e minut i två timmar med en avstängningstid på två minuter.Mät hur länge musen körs på en roterande stång med en konstant hastighet på 15 varv per minut utan att falla. Tröskeln för tassuttag hos brännskadeinducerade möss minskade efter dag ett och kvarstod i sju dagar jämfört med kontrollgruppen. Acetaminophen administrering minskade signifikant den bränninducerade minskningen av tassuttagströskeln.Dessutom visade området under kurvanalysen att paracetamol administrering signifikant minskade den brännskadeskadeinducerade mekaniska allodyni. Bakpotens utskriftsområde minskade också signifikant efter induktion av brännskada och kvarstod i sju dagar. Acetaminophen administrering förbättrade avsevärt bakpotens utskriftsområde jämfört med fordonsbehandlingen.Vidare minskade brännskada den enda hållningen hos den ipsilaterala baktassen efter dag ett och denna minskning upprätthölls i sju dagar. Baktassens enda hållning förbättrades genom paracetamol administrering. I det tvingade simningstestet ökade orörlighetstiderna för de brännskadeinducerade mössen sju dagar efter skadan jämfört med kontrollgruppens.Acetaminophen administrering minskade signifikant den brännskador skada-inducerad ökning av immobilitetstid. I rotarodtestet liknade körtiderna för de brännskadeinducerade mössen de i kontrollgruppen sju dagar efter bränninduktion. Däremot minskade körtiderna för alfaxolonbehandlade möss signifikant med cirka 60 minuter, vilket indikerar att denna brännskademetod inte orsakar motorisk försämring.Omfattningen av bränningen som appliceras på varje djur måste hållas konstant för att uppnå exakta resultat. De olika beteendeexperimentella analysmetoderna som föreslås i denna studie kan också tillämpas på andra djurmodeller relaterade till smärta, gångstörning och depressionsliknande beteende. De föreslagna analysmetoderna kan kvantifiera olika symtom efter induktion av brännskada, vilket kommer att vara till hjälp för utvecklingen av brännskaderelaterad forskning och behandlingsmetoder i framtiden.

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Single Sensillum Recordings in the Insects Drosophila melanogaster and Anopheles gambiae

Single Sensillum Recordings in the Insects Drosophila melanogaster and Anopheles gambiae

Enstaka Sensillum Inspelningar i Insekter Drosophila melanogaster Och Anopheles gambiae</em

The sense of smell is essential for insects to find foods, mates, predators, and oviposition sites3. Insect olfactory sensory neurons (OSNs) are enclosed ...

Low-stress Route Learning Using the Lashley III Maze in Mice

Låg-stress Route lärande Använda Lashley III Maze hos möss

Many behavior tests designed to assess learning and memory in rodents, particularly mice, rely on visual cues, food and/or water deprivation, or other ...

T-maze Forced Alternation and Left-right Discrimination Tasks for Assessing Working and Reference Memory in Mice

T-labyrinten Påtvingad alterneringsledighet och vänster-höger uppgifter diskriminering bedöma arbets-och referens minne hos möss

Forced alternation and left-right discrimination tasks using the T-maze have been widely used to assess working and reference memory, respectively, in ...

Membrane Potential Dye Imaging of Ventromedial Hypothalamus Neurons From Adult Mice to Study Glucose Sensing

Membranpotential Dye avbildning av ventromediala Hypothalamus nervceller från vuxna möss för att studera Glucose Sensing

Studies of neuronal activity are often performed using neurons from rodents less than 2 months of age due to the technical difficulties associated with ...

A Simple and Inexpensive Method for Determining Cold Sensitivity and Adaptation in Mice

En enkel och billig metod för bestämning Cold Känslighet och anpassning hos möss

Cold hypersensitivity is a serious clinical problem, affecting a broad subset of patients and causing significant decreases in quality of life.  The cold ...

Optogenetic Entrainment of Hippocampal Theta Oscillations in Behaving Mice

Optogenetic ångan av hippocampus Theta svängningar i beter sig möss

Extensive data on relationships of neural network oscillations to behavior and organization of neuronal discharge across brain regions call for new tools ...

Intracerebroventricular Treatment with Resiniferatoxin and Pain Tests in Mice

Intracerebroventricular behandling med resiniferatoxin och smärtprov hos möss

The transient receptor potential vanilloid type 1 (TRPV1), a thermosensitive cation channel, is known to trigger pain in the peripheral nerves. In ...

Intracranial Pharmacotherapy and Pain Assays in Rodents

Intrakraniell farmakoterapi och smärta analyser hos gnagare

Pain is a salient sensory experience with affective and cognitive dimensions. However, central mechanisms for pain remain poorly understood, hindering the ...

Combining Behavior and EEG to Study the Effects of Mindfulness Meditation on Episodic Memory

Kombinera beteende och EEG för att studera effekterna av mindfulnessmeditation på episodiskt minne

Although there has been recent interest in how mindfulness meditation can affect episodic memory as well as brain structure and function, no study has ...

Dural Stimulation and Periorbital von Frey Testing in Mice As a Preclinical Model of Headache

Dural stimulering och periorbital von Frey-testning hos möss som en preklinisk modell av huvudvärk

The cranial meninges, comprised of the dura mater, arachnoid, and pia mater, are thought to primarily serve structural functions for the nervous system.  ...