Name: two-layered membrane sandwich method for laodelphax striatellus saliva collection
Uploaded: 2021-08-27T13:00:00
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इस काम को नेशनल साइंस फाउंडेशन ऑफ चाइना (नंबर 32072385) और यूथ इनोवेशन प्रमोशन एसोसिएशन सीएएस (2021084) द्वारा चीन के नेशनल प्रमुख अनुसंधान और विकास कार्यक्रम (नंबर 2019YFC1200503) द्वारा समर्थित किया गया था ।

1. एसबीपीएच रखरखाव
<ol><li>प्रयोगशाला में प्रति ग्लास चैंबर 5-6 चावल(ओरिज़ा सतिवा सीवी निप्पोंबाड़े) रोपण के साथ एक ग्लास इनक्यूबेटर (65 x 200 मिमी) में वीरुलीफेरस और आरएसवी-मुक्त एसबीपीएच व्यक्तियों को पीछे ?...

<ol>
	<li>Cheng, X., Zhu, L., He, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Towards+understanding+of+molecular+interactions+between+rice+and+the+brown+planthopper.">Towards understanding of molecular interactions between rice and the brown planthopper.</a> Molecular Plant. 6 (3), 621-634 (2013).</li><li>Cho, W. K., Lian, S., Kim, S. M., Park, S. H., Kim, K. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Current+insights+into+research+on+Rice+Stripe+Virus.">Current insights into research on Rice Stripe Virus.</a> The Plant Pathology Journal. 29 (3), 223-233 (2013).</li><li>He, M., Guan, S. Y., He, C. Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evolution+of+rice+stripe+virus.">Evolution of rice stripe virus.</a> Molecular Phylogenetics and Evolution. 109, 343-350 (2017).</li><li>Wu, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nonstructural+protein+NS4+of+Rice+Stripe+Virus+plays+a+critical+role+in+viral+spread+in+the+body+of+vector+insects.">Nonstructural protein NS4 of Rice Stripe Virus plays a critical role in viral spread in the body of vector insects.</a> PLoS One. 9 (2), 88636 (2014).</li><li>Huo, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transovarial+transmission+of+a+plant+virus+is+mediated+by+vitellogenin+of+its+insect+vector.">Transovarial transmission of a plant virus is mediated by vitellogenin of its insect vector.</a> PLoS Pathogens. 10 (3), 1003949 (2014).</li><li>Taning, C. N., Andrade, E. C., Hunter, W. B., Christiaens, O., Smagghe, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Asian+citrus+psyllid+RNAi+pathway-RNAi+evidence.">Asian citrus psyllid RNAi pathway-RNAi evidence.</a> Scientific Reports. 6, 38082 (2016).</li><li>Garbutt, J. S., Bell&#233;s, X., Richards, E. H., Reynolds, S. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Persistence+of+double-stranded+RNA+in+insect+hemolymph+as+a+potential+determiner+of+RNA+interference+success:+evidence+from+Manduca+sexta+and+Blattella+germanica.">Persistence of double-stranded RNA in insect hemolymph as a potential determiner of RNA interference success: evidence from Manduca sexta and Blattella germanica.</a> Journal of Insect Physiology. 59 (2), 171-178 (2013).</li><li>Huo, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Artificial+feeding+Rice+Stripe+Virus+enables+efficient+virus+infection+of+Laodelphax+striatellus.">Artificial feeding Rice Stripe Virus enables efficient virus infection of Laodelphax striatellus.</a> Journal of Virological Methods. 235, 139-143 (2016).</li><li>Huo, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Insect+tissue-specific+vitellogenin+facilitates+transmission+of+plant+virus.">Insect tissue-specific vitellogenin facilitates transmission of plant virus.</a> PLoS Pathogens. 14 (2), 1006909 (2018).</li><li>Huo, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rice+Stripe+Virus+hitchhikes+the+vector+insect+vitellogenin+ligand-receptor+pathway+for+ovary+entry.">Rice Stripe Virus hitchhikes the vector insect vitellogenin ligand-receptor pathway for ovary entry.</a> Philosophical Transactions of the Royal Society of London. Series B, Biological Sciences. 374, 20180312 (2019).</li><li>Bao, Y. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=De+novo+intestine-specific+transcriptome+of+the+brown+planthopper+Nilaparvata+lugens+revealed+potential+functions+in+digestion,+detoxification+and+immune+response.">De novo intestine-specific transcriptome of the brown planthopper Nilaparvata lugens revealed potential functions in digestion, detoxification and immune response.</a> Genomics. 99 (4), 256-264 (2012).</li><li>Elzinga, D. A., Jander, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+protein+effectors+in+plant-aphid+interactions.">The role of protein effectors in plant-aphid interactions.</a> Current Opinion In Plant Biology. 16 (4), 451-456 (2013).</li><li>Chung, S. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Herbivore+exploits+orally+secreted+bacteria+to+suppress+plant+defenses.">Herbivore exploits orally secreted bacteria to suppress plant defenses.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 110 (39), 15728-15733 (2013).</li><li>Bos, J. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+functional+genomics+approach+identifies+candidate+effectors+from+the+aphid+species+Myzus+persicae+(green+peach+aphid).">A functional genomics approach identifies candidate effectors from the aphid species Myzus persicae (green peach aphid).</a> PLoS Genetics. 6 (11), 1001216 (2010).</li><li>Liu, X., Zhou, H., Zhao, J., Hua, H., He, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+of+the+secreted+watery+saliva+proteins+of+the+rice+brown+planthopper,+Nilaparvata+lugens+(St&#229;l)+by+transcriptome+and+Shotgun+LC-MS/MS+approach.">Identification of the secreted watery saliva proteins of the rice brown planthopper, Nilaparvata lugens (St&#229;l) by transcriptome and Shotgun LC-MS/MS approach.</a> Journal of Insect Physiology. 89, 60-69 (2016).</li><li>Cao, T. T., L&#252;, J., Lou, Y. G., Cheng, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Feeding-induced+interactions+between+two+rice+planthoppers,+Nilaparvata+lugens+and+Sogatella+furcifera+(Hemiptera:+Delphacidae):+effects+on+feeding+and+honeydew+excretion.">Feeding-induced interactions between two rice planthoppers, Nilaparvata lugens and Sogatella furcifera (Hemiptera: Delphacidae): effects on feeding and honeydew excretion.</a> Environmental Entomology. 42 (6), 1281-1291 (2013).</li><li>De Vos, M., Jander, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Myzus+persicae+(green+peach+aphid)+salivary+components+induce+defence+responses+in+Arabidopsis+thaliana.">Myzus persicae (green peach aphid) salivary components induce defence responses in Arabidopsis thaliana.</a> Plant, Cell &amp; Environment. 32 (11), 1548-1560 (2009).</li><li>Wang, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Understanding+the+immune+system+architecture+and+transcriptome+responses+to+southern+rice+black-streaked+dwarf+virus+in+Sogatella+furcifera.">Understanding the immune system architecture and transcriptome responses to southern rice black-streaked dwarf virus in Sogatella furcifera.</a> Scientific Reports. 6, 36254 (2016).</li><li>Wang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Penetration+into+rice+tissues+by+brown+planthopper+and+fine+structure+of+the+salivary+sheaths.">Penetration into rice tissues by brown planthopper and fine structure of the salivary sheaths.</a> Entomologia Experimentalis et Applicata. 129 (3), 295-307 (2008).</li><li>Wang, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Armet+is+an+effector+protein+mediating+aphid-plant+interactions.">Armet is an effector protein mediating aphid-plant interactions.</a> FASEB Journal: Official Publication of the Federation of American Societies for Experimental Biology. 29 (5), 2032-2045 (2015).</li><li>Chaudhary, R., Atamian, H. S., Shen, Z., Briggs, S. P., Kaloshian, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=GroEL+from+the+endosymbiont+Buchnera+aphidicola+betrays+the+aphid+by+triggering+plant+defense.">GroEL from the endosymbiont Buchnera aphidicola betrays the aphid by triggering plant defense.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 111 (24), 8919-8924 (2014).</li><li>Ma, R., Chen, J. L., Cheng, D. F., Sun, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Activation+of+defense+mechanism+in+wheat+by+polyphenol+oxidase+from+aphid+saliva.">Activation of defense mechanism in wheat by polyphenol oxidase from aphid saliva.</a> Journal of Agricultural and Food Chemistry. 58 (4), 2410-2418 (2010).</li><li>Zheng, L., Seon, Y. J., McHugh, J., Papagerakis, S., Papagerakis, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Clock+genes+show+circadian+rhythms+in+salivary+glands.">Clock genes show circadian rhythms in salivary glands.</a> Journal of Dental Research. 91 (8), 783-788 (2012).</li><li>Huang, H. J., Lu, J. B., Li, Q., Bao, Y. Y., Zhang, C. X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Combined+transcriptomic/proteomic+analysis+of+salivary+gland+and+secreted+saliva+in+three+planthopper+species.">Combined transcriptomic/proteomic analysis of salivary gland and secreted saliva in three planthopper species.</a> Journal of Proteomics. 172, 25-35 (2018).</li><li>Huang, H. J., Liu, C. W., Xu, H. J., Bao, Y. Y., Zhang, C. X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mucin-like+protein,+a+saliva+component+involved+in+brown+planthopper+virulence+and+host+adaptation.">Mucin-like protein, a saliva component involved in brown planthopper virulence and host adaptation.</a> Journal of Insect Physiology. 98, 223-230 (2017).</li><li>Shangguan, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+mucin-like+protein+of+planthopper+is+required+for+feeding+and+induces+immunity+response+in+plants.">A mucin-like protein of planthopper is required for feeding and induces immunity response in plants.</a> Plant Physiology. 176 (1), 552-565 (2018).</li><li>Petrova, A., Smith, C. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immunodetection+of+a+brown+planthopper+(Nilaparvata+lugens+St&#229;l)+salivary+catalase-like+protein+into+tissues+of+rice,+Oryza+sativa.">Immunodetection of a brown planthopper (Nilaparvata lugens St&#229;l) salivary catalase-like protein into tissues of rice, Oryza sativa.</a> Insect Molecular Biology. 23 (1), 13-25 (2014).</li><li>Zhu, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genome+sequence+of+the+small+brown+planthopper,+Laodelphax+striatellus.">Genome sequence of the small brown planthopper, Laodelphax striatellus.</a> GigaScience. 6 (12), 1-12 (2017).</li><li>Van Bel, A. J., Will, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Functional+evaluation+of+proteins+in+watery+and+gel+saliva+of+aphids.">Functional evaluation of proteins in watery and gel saliva of aphids.</a> Frontiers In Plant Science. 7, 1840 (2016).</li><li>Perez-Vilar, J., Hill, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+structure+and+assembly+of+secreted+mucins.">The structure and assembly of secreted mucins.</a> The Journal of Biological Chemistry. 274 (45), 31751-31754 (1999).</li><li>Pitino, M., Hogenhout, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aphid+protein+effectors+promote+aphid+colonization+in+a+plant+species-specific+manner.">Aphid protein effectors promote aphid colonization in a plant species-specific manner.</a> Molecular Plant-Microbe Interactions: MPMI. 26 (1), 130-139 (2013).</li><li>Zhang, F., Zhu, L., He, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differential+gene+expression+in+response+to+brown+planthopper+feeding+in+rice.">Differential gene expression in response to brown planthopper feeding in rice.</a> Journal of Plant Physiology. 161 (1), 53-62 (2004).</li><li>Hogenhout, S. A., Ammar, E. -. D., Whitfield, A. E., Redinbaugh, M. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Insect+vector+interactions+with+persistently+transmitted+viruses.">Insect vector interactions with persistently transmitted viruses.</a> Annual Review of Phytopathology. 46, 327-359 (2008).</li><li>Boissot, N., Schoeny, A., Vanlerberghe-Masutti, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vat,+an+amazing+gene+conferring+resistance+to+aphids+and+viruses+they+carry:+from+molecular+structure+to+field+effects.">Vat, an amazing gene conferring resistance to aphids and viruses they carry: from molecular structure to field effects.</a> Frontiers In Plant Science. 7, 1420 (2016).</li></ol>

कृत्रिम आहार पर कीटों के सफल पालन की सूचना सबसे पहले 1962 में दी गई थी जब मिटलर और देड ने29,30कृत्रिम आहार धारण करने के लिए पैराफिन झिल्ली तकनीक का वर्णन किया था । और इस विधि कीट जीव विज्?...

टेनुइवायरसजीनस में नकारात्मक रूप से फंसे आरएनए वायरस चावल धारी वायरस (आरएसवी)पूर्वी एशिया1,2,3में चावल उत्पादन में गंभीर बीमारियों का कारण बनता है । संक्रमित चावल के पौधों से स्वस्थ लोगों के लिए आरएसवी का संचरण कीट वैक्टर पर निर्भर करता है, मुख्य रूप से लाओडेल्फैक्स स्ट्राटेलस, जो लगातार प्रचारात्मक तरीके से आरएसवी को पहुंचाता है। एसबीपीएच आरएसवी-संक्रमित पौधों पर भोजन करने के बाद वायरस प्राप्त करता है। एक बार कीट के अंदर, आरएसवी खिलाने के एक दिन बाद मिडगुट एपिथेलियल सेल को संक्रमित करता है और फिर हीमोलिम्फ में प्रवेश करने के लिए मिडगुट बैरियर से गुजरता है। इसके बाद, आरएसवी हीमोलिम्फ के माध्यम से विभिन्न ऊतकों में फैलता है और फिर प्रचारित करता है। अधिग्रहण के बाद लगभग 10-14 दिनों की अव्यक्त अवधि के बाद, लार ग्रंथि के अंदर वायरस को स्रावित लार के माध्यम से स्वस्थ मेजबान पौधों में प्रेषित किया जा सकता है जबकिएसबीपीएच फ्लोएम4,5,6,7,8,9,10 से रस बेकार करता है . कीट से मेजबान पौधे तक आरएसवी के प्रसार के लिए एक कुशल भोजन प्रक्रिया और लार में विभिन्न कारक आवश्यक हैं।
लार ग्रंथियों द्वारा स्रावित कीट लार को कीड़े, वायरस और मेजबान पौधों में मध्यस्थता करने के लिए माना जाता है। हेमीप्टरन कीट आमतौर पर दो प्रकार की लार उत्पन्न करते हैं: लार और पानी की लार11,12,13. गेलिंग लार मुख्य रूप से मेजबान कोशिकाओं के बीच स्टाइल के आंदोलन को बनाए रखने के लिए एपोप्लाज्म में स्रावित होती है और इसका संबंध पौधों के प्रतिरोध और प्रतिरक्षा प्रतिक्रियाओं पर काबू पाने से भी है14,15,16,17. भोजन के जांच चरण में, कीड़े रुक-रुककर जेलिंग लार को स्रावित करते हैं जो तुरंत सतह फ्लैंज बनाने के लिए ऑक्सीकरण हो जाता है। फिर, एकल या शाखादार म्यान एक ट्यूबलर चैनल 18,19,20आरक्षित करने के लिए स्टाइल को संलग्नकरतेहैं। एपिडर्मिस पर सतह फ्लैंज को एक लंगर बिंदु के रूप में सेवा करके स्टाइल के प्रवेश को सुविधाजनक माना जाता है, जबकि स्टाइल के चारों ओर म्यान यांत्रिक स्थिरता और स्नेहन16, 21,22,23प्रदान कर सकता है। एनएलएसएचपी को लार म्यान गठन और भूरे रंग के प्लांटहॉपर(निलापरवता लुगेन्स,बीपीएच) के सफल भोजन के लिए एक आवश्यक प्रोटीन के रूप में पहचाना गया था। एफिड एसिर्थोस्फोन पिसम द्वारा स्रावित संरचनात्मक म्यान प्रोटीन (एसएचपी) की अभिव्यक्ति के अवरोध ने मेजबान छलनीट्यूबों 24से भोजन में बाधा डालकर अपने प्रजनन को कम कर दिया । इसके अलावा, कुछ कीट प्रजातियों में, जेल लार कारकों को तथाकथित शाकाहारी से जुड़े आणविक पैटर्न (HAMPs) बनाकर पौधों की प्रतिरक्षा प्रतिक्रियाओं को ट्रिगर करने के लिए माना जाता है। एन लुगेन्स,एनएलएमएलपी में, म्यान गठन से संबंधित एक म्यूसिन जैसे प्रोटीन, सेल मृत्यु, रक्षा से संबंधित जीन की अभिव्यक्ति, और कैलोस बयान 25,26सहित खिलाने के खिलाफ पौधे की सुरक्षा प्रेरित करता है। इसके अलावा, एफिड्स में कुछ जेल लार कारकों को रोगजनक से जुड़े आणविक पैटर्न12, 15, 27के समान जीन-टू-जीन इंटरैक्शन के माध्यम से संयंत्र रक्षा प्रतिक्रियाओं को ट्रिगर करने के लिए साबित किया गया है।
कीट आहार और/या रोगजनक संचरण के लिए आवश्यक लार कारकों का अध्ययन करने के लिए, स्रावित लार का विश्लेषण करना आवश्यक है । यहां, लार की पर्याप्त मात्रा प्राप्त करने के लिए कृत्रिम भोजन और संग्रह विधियों को आगे के विश्लेषण के लिए वर्णित किया गया है। केवल एक ही पोषण तत्व युक्त माध्यम का उपयोग करके, कई लार प्रोटीन एकत्र किए गए और चांदी के धुंधला और पश्चिमी दाग द्वारा विश्लेषण किया गया। यह विधि लार में कारकों पर आगे अनुसंधान में सहायक होगी जो एसबीपीएच द्वारा आरएसवी संचरण के लिए आवश्यक हैं।

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>10-KD centrifugal filter</td>
			<td>Merck Millipore</td>
			<td>R5PA83496</td>
			<td>For concentration</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10x Protein Transfer Buffer(wet)</td>
			<td>macGENE</td>
			<td>MP008</td>
			<td>Transfer buffer for western blotting</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10x TBST buffer</td>
			<td>Coolaber</td>
			<td>SL1328-500mL&#215;10</td>
			<td>Wash buffer for western blotting</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Azure c600 biosystems</td>
			<td>Azure Biosystems</td>
			<td>Azure c600</td>
			<td>Imaging system for western blotting and silver staining</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Color Prestained protein ladder</td>
			<td>GenStar</td>
			<td>M221-01</td>
			<td>Protein marker for western blotting</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ECL&#160;western blotting detection reagents</td>
			<td>GE Healthcare</td>
			<td>RPN2209</td>
			<td>Western blotting detection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Enchanced HRP-DAB Chromogenic Kit</td>
			<td>TIANGEN</td>
			<td>#PA110</td>
			<td>Chromogenic reaction</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Horseradish peroxidase-conjugated goat anti-rabbit antibodies</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>401393-2ML</td>
			<td>Polyclonal secondary antibody for western blotting</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Immobilon(R)-P Polyvinylidene difluoride membrane</td>
			<td>Merck Millipore</td>
			<td>IPVH00010</td>
			<td>Transfer membrane for western blotting</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>iTaq Universal SYBR Green Supermix</td>
			<td>Bio-Rad</td>
			<td>1725125</td>
			<td>For quantitative real-time PCR (qRT-PCR)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>KIT,iSCRIPT cDNA SYNTHES</td>
			<td>Bio-Rad</td>
			<td>1708891</td>
			<td>For Reverse-transcriptional PCR (RT-PCR)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Millex-GP Filter, 0.22 &#181;m</td>
			<td>Merck Millipore</td>
			<td>SLGP033RB</td>
			<td>For filtration</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mini-PROTEAB TGX Gels</td>
			<td>Bio-Rad</td>
			<td>4561043</td>
			<td>For SDS-PAGE</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NanoDrop One</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>ND-ONEC-W</td>
			<td>Detection of protein concentration</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nylon membrane</td>
			<td>PALL</td>
			<td>T42754</td>
			<td>Membrane for dot-ELISA</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Parafilm M Membrane</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>P7793-1EA</td>
			<td>Making artifical diet sandwichs</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rabbit anti-LssgMP polyclonal antibody against LssgMP peptides</td>
			<td>Genstript</td>
			<td></td>
			<td>Rabbit primary anti-LssgMP polyclonal antibody for western blotting</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rabbit anti-RSV polyclonal antibody</td>
			<td>Genstript</td>
			<td></td>
			<td>Rabbit primary anti-RSV polyclonal antibody for western blotting and dot-ELISA</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RNAprep pure Micro Kit</td>
			<td>TIANGEN</td>
			<td>DP420</td>
			<td>For RNA Extraction</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

two-layered membrane sandwich method for laodelphax striatellus saliva collection

चावल धारी वायरस (आरएसवी), जो पूर्वी एशिया में कृषि के महत्वपूर्ण आर्थिक नुकसान का कारण बनता है, पूरी तरह से मेजबान चावल के बीच अपने प्रभावी संचरण के लिए कीट वैक्टर पर निर्भर करता है । लाओडेल्फैक्स स्ट्राटेलस (छोटे भूरे रंग के प्लांटहॉपर, एसबीपीएच) प्राथमिक कीट वेक्टर है जो क्षैतिज रूप से आरएसवी को पहुंचाता है जबकि फ्लोएम से रस चूसने के दौरान। लार कीड़ों के खिलाने के व्यवहार में महत्वपूर्ण भूमिका निभाता है। एक सुविधाजनक विधि जो भेदी-चूसने वाले भोजन व्यवहार के साथ कीड़ों की लार पर शोध के लिए उपयोगी होगी, यहां वर्णित है। इस विधि में, कीड़ों को दो फैला पैराफिन फिल्म परतों के बीच सैंडविच किए गए कृत्रिम आहार पर खिलाने की अनुमति दी गई थी। लार युक्त आहार प्रत्येक दिन एकत्र किया गया था, फ़िल्टर किया गया था, और आगे के विश्लेषण के लिए केंद्रित था। अंत में, एकत्र लार की गुणवत्ता प्रोटीन धुंधला और इम्यूनोब्लोटिंग द्वारा जांच की गई। एसबीपीएच की लार में आरएसवी की उपस्थिति और म्यूसिन जैसे प्रोटीन का पता लगाकर इस विधि का उदाहरण दिया गया। ये कृत्रिम भोजन और लार संग्रह विधि भोजन व्यवहार और वायरस संचरण से संबंधित कीट लार में कारकों पर आगे अनुसंधान के लिए एक नींव रखेंगे ।

कृत्रिम भोजन स्थापना और लार संग्रह की योजनाबद्ध चित्रा 1A में लार को इकट्ठा करने के लिए फीडिंग चैंबर के रूप में उपयोग किए जाने वाले ग्लास सिलेंडर (15 सेमी x 2.5 सेमी) को दर्शाया गया है। सबसे...

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Two-layered Membrane Sandwich Method for Laodelphax striatellus Saliva Collection

वर्तमान प्रोटोकॉल कृत्रिम माध्यम का उपयोग करके भेदी-चूसने वाली कीड़ों से पर्याप्त लार एकत्र करने की विधि का वर्णन करता है। यह कीट लार इकट्ठा करने और कीट खिला व्यवहार और वेक्टर जनित वायरस संचरण पर लार समारोह का अध्ययन करने के लिए एक सुविधाजनक तरीका है।

लाओडेल्फैक्स स्ट्राटेलस लार संग्रह के लिए दो स्तरित झिल्ली सैंडविच विधि

Rice stripe virus (RSV), which causes significant economic loss of agriculture in East Asia, entirely depends on insect vectors for its effective ...

कृत्रिम भोजन और लार संग्रह कीट लार में प्रभावकों का पता लगाने के लिए एक सीधी विधि प्रदान करते हैं। हालांकि, इससे पहले विस्तार से इसका वर्णन नहीं किया गया है। यह प्रोटोकॉल सैप्रोफाइटिक कीड़ों से लार संग्रह के लिए प्रभावी है।इसके अतिरिक्त, यह एक सरल तकनीक है, क्योंकि हम कृत्रिम आहार के रूप में केवल सुक्रोज युक्त माध्यम का उपयोग करते हैं। सैप्रोफाइटिक कीड़े की लार भोजन व्यवहार को लाभ पहुंचाने और रोगजनकों को संचारित करने के लिए मेजबान की प्रतिरक्षा प्रणाली के खिलाफ प्रभावित हो सकती है। यह दवा जिसका उपयोग कीट व्यवहार और कीट हड्डी पथ अनुसंधान के लिए किया जा सकता है।यह प्रदर्शन करने के लिए एक सरल तरीका है। हालांकि, यह सुझाव है कि स्वच्छ प्रयोगात्मक वातावरण के बढ़ते के रूप में लार आगे अनुसंधान के लिए एकत्र किया जा रहा है । कृत्रिम आहार के लिए 5% सुक्रोज समाधान तैयार करके शुरू करें, और बैक्टीरियल संदूषण और अशुद्धियों को दूर करने के लिए 0.22 माइक्रोन फिल्टर के माध्यम से समाधान को फ़िल्टर करें।उन्हें एक खिला कक्ष में शुरू करने से पहले तीन से पांच घंटे के लिए लगभग 200 छोटे भूरे रंग के पौधे हॉपर लार्वा भूखा। इसके बाद, ग्लास सिलेंडरों को खिलाने वाले कक्षों के रूप में तैयार करने के लिए, प्रयोगात्मक कीड़ों को पेश करने से पहले एक पैराफिन झिल्ली के साथ कक्ष के एक खुले छोर को कवर करें, फिर कीड़ों को ग्लास सिलेंडर में स्थानांतरित करें और कक्ष के दूसरे छोर को फैला हुआ पैराफिन झिल्ली के साथ कवर करें। झिल्ली पर कृत्रिम आहार के 200 माइक्रोलीटर जोड़ें, फिर तरल को फैला पैराफिन झिल्ली की एक और परत के साथ कवर करें।अंत में, एल्यूमीनियम पन्नी के साथ कक्ष को कवर, कृत्रिम आहार प्रकाश के संपर्क में डिवाइस के साथ अंत छोड़ । 24 घंटे के बाद, कीड़ों को स्थिर करने के लिए सिलेंडर को चार डिग्री सेल्सियस पर ठंडा करके एसबीपीएच लार एकत्र करें, फिर बाहरी फिल्म को उजागर करें और बाँझ पिपेट का उपयोग करके कृत्रिम आहार को 1.5 मिलीलीटर बाँझ ट्यूबों में एकत्र करें। एकत्र लार को विश्लेषण तक शून्य से 80 डिग्री सेल्सियस पर रखें।इसके बाद, धीरे-धीरे पाइपिंग करके तीन बार ताजा कृत्रिम आहार के 50 माइक्रोलीटर के साथ आंतरिक झिल्ली को कुल्लाएं, और कृत्रिम वाशिंग आहार को 1.5 मिलीलीटर बाँझ ट्यूबों में एकत्र करें। तीन कुल्ला के बाद, आंतरिक झिल्ली पर ताजा कृत्रिम आहार जोड़ें और शीर्ष पर एक ताजा फैला पैराफिन झिल्ली रखें। अंत में, रोगाणुओं और अन्य प्रदूषकों को हटाने के लिए 0.22 माइक्रोन फिल्टर यूनिट के माध्यम से एकत्र नमूनों को फ़िल्टर करें।सामूहिक लार के नमूनों को 500 माइक्रोलीटर, 10 किलोडलटन सेंट्रलीफ्यूगल फिल्टर में स्थानांतरित करें। नमूना सेंट्रलाइज करें। सुपरनेट को इकट्ठा करें और अंतिम मात्रा को 100 माइक्रोलीटर तक लाएं।एकत्र लार की एकाग्रता को मापने के लिए, यूवी दृश्य स्पेक्ट्रोफोटोमीटर चालू करें और आसन को डबल-आसुत पानी से तीन बार धोएं। निम्नलिखित क्रम, प्रोटीन, प्रोटीन A280 में स्क्रीन पर विकल्पों का चयन करें। प्रति मिलीलीटर एक मिलीग्राम के बराबर प्रकार और एक अवशोषण इकाई का चयन करें।फिर बेसलाइन करेक्शन के लिए बॉक्स की जांच करें, 340 नैनोमीटर। इसके बाद, 5% सुक्रोज जलीय समाधान के दो माइक्रोलीटर को खाली के रूप में लोड करें, फिर स्क्रीन के नीचे खाली स्पर्श करें। अंत में, मानकों को स्थापित करने के बाद, एकत्र लार के दो माइक्रोलीटर लोड करें और प्रोटीन एकाग्रता रिकॉर्ड करें।जब 5% सुक्रोज पर भोजन, SBPH के ८०% से अधिक पहले चार दिनों के लिए बच गया । हालांकि, पांचवें दिन से मृत्यु दर तेजी से बढ़कर ४०% हो गई और सातवें दिन आधे से भी कम एसबीपीएच बच गई । एक एसडीएस पृष्ठ विश्लेषण आरएसवी से केंद्रित लार के नमूनों से पता चला-संक्रमित SBPH लार 5% सुक्रोज नकारात्मक नियंत्रण की तुलना में कई अधिक प्रोटीन निहित ।आरएसवी कैप्सिड प्रोटीन, एक गैर-संक्रमित और उग्र कीड़े का पता लगाने के लिए एक पश्चिमी दाग विश्लेषण में। आरएसवी कैप्सिड प्रोटीन का सफलतापूर्वक पता वीरउर्फिक नमूने में लगाया गया, एलएसजीएमपी जीन उत्पाद के खिलाफ डिजाइन किए गए एक एंटीबॉडी ने गैर-संक्रमित और उग्रफेरस नमूनों में ७८ किलोडलटन प्रोटीन का पता लगाया, यह प्रदर्शित करता है कि एलएसजीएमपी एक लार प्रोटीन है । विभिन्न ऊतकों में LssgMP प्रतिलिपि स्तर के एक QRT पीसीआर विश्लेषण से पता चला है कि लार ग्रंथि में Lssg प्रतिलिपि स्तर पूरे शरीर और पेट की तुलना में 20 गुना अधिक था, लार ग्रंथि में LssgMP की विशिष्ट अभिव्यक्ति की पुष्टि ।उन्हें कक्ष में पेश करने से पहले प्रायोगिक कीड़ों को भूखा रखना हमारे लार संग्रह की दक्षता सुनिश्चित करने के लिए आवश्यक है। इसके अलावा, एकत्र नमूने में माइक्रोबियल संदूषण को कम करने के लिए हर 24 घंटे में एक कृत्रिम माध्यम एकत्र और आदान-प्रदान किया जाना चाहिए। यह तकनीक रोगजनकों के प्रसारण में लार के कार्य का अध्ययन करने के लिए एक सीधी विधि प्रदान करती है।इसके अतिरिक्त, यह कीट रोगजनक मेजबान बातचीत का अध्ययन करने में मदद कर सकता है।

Research

JoVE Journal

Biology

Two-layered Membrane Sandwich Method for Laodelphax striatellus Saliva Collection

Crystallizing Membrane Proteins for Structure Determination using Lipidic Mesophases

संरचना lipídic Mesophases का उपयोग कर निर्धारण के लिए झिल्ली प्रोटीन crystallizing

A detailed protocol for crystallizing membrane proteins by using lipidic mesophases is described. This method has variously been referred to as the ...

High-throughput Crystallization of Membrane Proteins Using the Lipidic Bicelle Method

Lipídic Bicelle विधि का प्रयोग झिल्ली प्रोटीन की उच्च throughput Crystallization

Membrane proteins (MPs) play a critical role in many physiological processes such as pumping specific molecules across the otherwise impermeable membrane ...

Blood Collection for Biochemical Analysis in Adult Zebrafish

वयस्क Zebrafish में बायोकेमिकल विश्लेषण के लिए रक्त संग्रह

The zebrafish has been used as an animal model for studies of several human diseases. It can serve as a powerful preclinical platform for studies of ...

Use of a Robot for High-throughput Crystallization of Membrane Proteins in Lipidic Mesophases

Lipidic Mesophases में उच्च throughput झिल्ली प्रोटीन का Crystallization के लिए एक रोबोट का प्रयोग

Structure-function studies of membrane proteins greatly benefit from having available high-resolution 3-D structures of the type provided through ...

Harvesting and Cryo-cooling Crystals of Membrane Proteins Grown in Lipidic Mesophases for Structure Determination by Macromolecular Crystallography

झिल्ली macromolecular क्रिस्टलोग्राफी द्वारा संरचना निर्धारण के लिए lipidic Mesophases में बढ़ी प्रोटीन की कटाई और क्रायो ठंडा कण

An important route to understanding how proteins function at a mechanistic level is to have the structure of the target protein available, ideally at ...

A Practical and Novel Method to Extract Genomic DNA from Blood Collection Kits for Plasma Protein Preservation

प्लाज्मा प्रोटीन संरक्षण के लिए रक्त संग्रह किट से जीनोमिक डीएनए निकालने के लिए एक व्यावहारिक और उपन्यास विधि

Laboratory tests can be done on the cellular or  fluid portions of the blood. The use of different blood collection tubes  determines the portion of the ...

Collection and Analysis of Arabidopsis Phloem Exudates Using the EDTA-facilitated Method

Collection and Analysis of Arabidopsis Phloem Exudates Using the EDTA-facilitated Method

के संग्रह और विश्लेषण<em&gt; Arabidopsis</em&gt; फ्लोएम ईडीटीए-मदद की विधि का प्रयोग exudates

The plant phloem is essential for the long-distance transport of (photo-) assimilates as well as of signals conveying biotic or abiotic stress. It ...

Microperfusion Technique to Investigate Regulation of Microvessel Permeability in Rat Mesentery

Microperfusion तकनीक चूहा अन्त्रपेशी में microvessel पारगम्यता के नियमन जांच

Experiments to measure the permeability properties of individually perfused microvessels provide a bridge between investigation of molecular and cellular ...

Repeated Blood Collection for Blood Tests in Adult Zebrafish

वयस्क zebrafish में रक्त परीक्षण के लिए बार-बार रक्त संग्रह

Repeated blood collection is one of the most common techniques performed on laboratory animals. However, a non-lethal protocol for blood collection from ...

Ground State Depletion Super-resolution Imaging in Mammalian Cells

स्तनधारी कोशिकाओं में जमीन राज्य घट सुपर संकल्प इमेजिंग

Advances in fluorescent microscopy and cell biology are intimately correlated, with the enhanced ability to visualize cellular events often leading to ...