Name: dural stimulation and periorbital von frey testing in mice as a preclinical model of headache
Uploaded: 2021-07-29T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Dural Stimulation and Periorbital von Frey Testing in Mice As a Preclinical Model of Headache at JoVE.com

Bu çalışma Ulusal Sağlık Enstitüleri (NS104200 ve NS072204 to GD) tarafından desteklenmiştir.

Tüm prosedürler, Dallas'taki Teksas Üniversitesi'ndeki kurumsal Hayvan Bakımı ve Kullanımı Komitesi'nin önceden onayı ile gerçekleştirildi. Bu çalışmada 6-8 haftalık ICR (CD-1) (30-35 g) ve C57/BL6 (25-30 g) fareler kullanıldı.
1. Dural demlik
<ol><li>Ticari olarak temin edilebilen bir iç kanülü değiştirerek fare infüzörlerini ve tek taraflı enjeksiyonlar için infüzer'ı, ayarlanabilir ve iç çapı (I.D.) 0,18 mm ve dış çapı (O.D.) 0,35 mm olan 28 G kılavuz k...

<ol>
	<li>GBD 2016 Disease and Injury Incidence and Prevalence Collaborators. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Global,+regional,+and+national+incidence,+prevalence,+and+years+lived+with+disability+for+328+diseases+and+injuries+for+195+countries,+1990-2016:+a+systematic+analysis+for+the+Global+Burden+of+Disease+Study+2016.">Global, regional, and national incidence, prevalence, and years lived with disability for 328 diseases and injuries for 195 countries, 1990-2016: a systematic analysis for the Global Burden of Disease Study 2016.</a> Lancet. 390 (10100), 1211-1259 (2017).</li><li>Woldeamanuel, Y. W., Cowan, R. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Migraine+affects+1+in+10+people+worldwide+featuring+recent+rise:+A+systematic+review+and+meta-analysis+of+community-based+studies+involving+6+million+participants.">Migraine affects 1 in 10 people worldwide featuring recent rise: A systematic review and meta-analysis of community-based studies involving 6 million participants.</a> Journal of the Neurological Sciences. 372, 307-315 (2017).</li><li>Burch, R. C., Loder, S., Loder, E., Smitherman, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+prevalence+and+burden+of+migraine+and+severe+headache+in+the+United+States:+updated+statistics+from+government+health+surveillance+studies.">The prevalence and burden of migraine and severe headache in the United States: updated statistics from government health surveillance studies.</a> Headache. 55 (1), 21-34 (2015).</li><li>Ashina, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Migraine.">Migraine.</a> New England Journal of Medicine. 383 (19), 1866-1876 (2020).</li><li>Ashina, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Migraine:+integrated+approaches+to+clinical+management+and+emerging+treatments.">Migraine: integrated approaches to clinical management and emerging treatments.</a> Lancet. 397 (10283), 1505-1518 (2021).</li><li>Jacobs, B., Dussor, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neurovascular+contributions+to+migraine:+Moving+beyond+vasodilation.">Neurovascular contributions to migraine: Moving beyond vasodilation.</a> Neuroscience. 338, 130-144 (2016).</li><li>Koyuncu Irmak, D., Kilinc, E., Tore, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Shared+Fate+of+Meningeal+Mast+Cells+and+Sensory+Neurons+in+Migraine.">Shared Fate of Meningeal Mast Cells and Sensory Neurons in Migraine.</a> Frontiers in Cellular Neuroscience. 13, 136 (2019).</li><li>Levy, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Migraine+pain,+meningeal+inflammation,+and+mast+cells.">Migraine pain, meningeal inflammation, and mast cells.</a> Current Pain and Headache Reports. 13 (3), 237-240 (2009).</li><li>Levy, D., Labastida-Ramirez, A., MaassenVanDenBrink, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Current+understanding+of+meningeal+and+cerebral+vascular+function+underlying+migraine+headache.">Current understanding of meningeal and cerebral vascular function underlying migraine headache.</a> Cephalalgia. 39 (13), 1606-1622 (2019).</li><li>Phebus, L. A., Johnson, K. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dural+inflammation+model+of+migraine+pain.">Dural inflammation model of migraine pain.</a> Current Protocols in Neuroscience. , (2001).</li><li>Fried, N. T., Maxwell, C. R., Elliott, M. B., Oshinsky, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Region-specific+disruption+of+the+blood-brain+barrier+following+repeated+inflammatory+dural+stimulation+in+a+rat+model+of+chronic+trigeminal+allodynia.">Region-specific disruption of the blood-brain barrier following repeated inflammatory dural stimulation in a rat model of chronic trigeminal allodynia.</a> Cephalalgia. 38 (4), 674-689 (2018).</li><li>Avona, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dural+calcitonin+gene-related+peptide+produces+female-specific+responses+in+rodent+migraine+models.">Dural calcitonin gene-related peptide produces female-specific responses in rodent migraine models.</a> The Journal of Neuroscience. 39 (22), 4323-4331 (2019).</li><li>Burgos-Vega, C. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Non-invasive+dural+stimulation+in+mice:+A+novel+preclinical+model+of+migraine.">Non-invasive dural stimulation in mice: A novel preclinical model of migraine.</a> Cephalalgia. 39 (1), 123-134 (2019).</li><li>Avona, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Meningeal+CGRP-Prolactin+interaction+evokes+female-specific+migraine+behavior.">Meningeal CGRP-Prolactin interaction evokes female-specific migraine behavior.</a> Annals of Neurology. 89 (6), 1129-1144 (2021).</li><li>Deuis, J. R., Dvorakova, L. S., Vetter, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Methods+used+to+evaluate+pain+behaviors+in+rodents.">Methods used to evaluate pain behaviors in rodents.</a> Frontiers in Molecular Neuroscience. 10, 284 (2017).</li><li>Lipton, R. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cutaneous+allodynia+in+the+migraine+population.">Cutaneous allodynia in the migraine population.</a> Annals of Neurology. 63 (2), 148-158 (2008).</li><li>Goadsby, P. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Migraine,+allodynia,+sensitisation+and+all+of+that.">Migraine, allodynia, sensitisation and all of that.</a> European Neurology. 53, 10-16 (2005).</li><li>Langford, D. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Coding+of+facial+expressions+of+pain+in+the+laboratory+mouse.">Coding of facial expressions of pain in the laboratory mouse.</a> Nature Methods. 7 (6), 447-449 (2010).</li><li>Mogil, J. S., Pang, D. S. J., Silva Dutra, G. G., Chambers, C. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+development+and+use+of+facial+grimace+scales+for+pain+measurement+in+animals.">The development and use of facial grimace scales for pain measurement in animals.</a> Neuroscience &amp; Biobehavioral Reviews. 116, 480-493 (2020).</li><li>Vuralli, D., Wattiez, A. S., Russo, A. F., Bolay, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Behavioral+and+cognitive+animal+models+in+headache+research.">Behavioral and cognitive animal models in headache research.</a> The Journal of Headache and Pain. 20 (1), 11 (2019).</li><li>Mason, B. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induction+of+migraine-like+photophobic+behavior+in+mice+by+both+peripheral+and+central+CGRP+mechanisms.">Induction of migraine-like photophobic behavior in mice by both peripheral and central CGRP mechanisms.</a> The journal of Neuroscience. 37 (1), 204-216 (2017).</li><li>Dixon, W. J., Mood, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+method+for+obtaining+and+analyzing+sensitivity+data.">A method for obtaining and analyzing sensitivity data.</a> The Journal of the American Statistical Association. 43 (241), 109-126 (1948).</li><li>Dixon, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+up-and-down+method+for+small+samples.">The up-and-down method for small samples.</a> The Journal of the American Statistical Association. 60, (1965).</li><li>Bonin, R. P., Bories, C., De Koninck, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+simplified+up-down+method+(SUDO)+for+measuring+mechanical+nociception+in+rodents+using+von+Frey+filaments.">A simplified up-down method (SUDO) for measuring mechanical nociception in rodents using von Frey filaments.</a> Molecular Pain. 10, 26 (2014).</li><li>Ramachandran, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neurogenic+inflammation+and+its+role+in+migraine.">Neurogenic inflammation and its role in migraine.</a> Seminars in Immunopathology. 40 (3), 301-314 (2018).</li><li>Edvinsson, L., Haanes, K. A., Warfvinge, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Does+inflammation+have+a+role+in+migraine.">Does inflammation have a role in migraine.</a> Nature Reviews Neurology. 15 (8), 483-490 (2019).</li><li>Stokely, M. E., Orr, E. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acute+effects+of+calvarial+damage+on+dural+mast+cells,+pial+vascular+permeability,+and+cerebral+cortical+histamine+levels+in+rats+and+mice.">Acute effects of calvarial damage on dural mast cells, pial vascular permeability, and cerebral cortical histamine levels in rats and mice.</a> Journal of Neurotrauma. 25 (1), 52-61 (2008).</li><li>Theoharides, T. C., Donelan, J., Kandere-Grzybowska, K., Konstantinidou, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+mast+cells+in+migraine+pathophysiology.">The role of mast cells in migraine pathophysiology.</a> Brain Research Reviews. 49 (1), 65-76 (2005).</li><li>Conti, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Progression+in+migraine:+Role+of+mast+cells+and+pro-inflammatory+and+anti-inflammatory+cytokines.">Progression in migraine: Role of mast cells and pro-inflammatory and anti-inflammatory cytokines.</a> European Journal of Pharmacology. 844, 87-94 (2019).</li><li>Rea, B. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Peripherally+administered+calcitonin+gene-related+peptide+induces+spontaneous+pain+in+mice:+implications+for+migraine.">Peripherally administered calcitonin gene-related peptide induces spontaneous pain in mice: implications for migraine.</a> Pain. 159 (11), 2306-2317 (2018).</li></ol>

Dura'daki lokal nosiseptif sistemdeki uyumsuz değişiklikler, doku hasarı olmamasına rağmen migren ataklarının baş ağrısı fazına önemli bir katkıda bulunur25,26. Burada çalışma, duranın minimal invaziv stimülasyonunun yüz dokunsal aşırı duyarlılığını indükleyebileceği bir yöntem sunmaktadır. Dural nosiseptör aktivasyonunda rol oynayan mekanizmaların ve olayların kafatasına ve dokulara zarar vermeden aydınlatılması, migren mek...

Migren ağrısı dünya çapında önemli bir halk sağlığı sorunu olmaya devam etmektedir. Dünya Sağlık Örgütü, onu dünyadaki en yaygın altıncı hastalık olarak sıralamakta, Dünya nüfusunun% 15'inden biraz daha azını etkilemektedir1 ve toplum üzerinde önemli bir sosyoekonomik yüke neden olmaktadır 2,3. Tedavi seçenekleri ve etkinlikleri yetersiz kalmıştır ve sadece semptomatik rahatlama sağlar ve migren oluşumunun altında yatan patofizyolojik olayları önemli ölçüde değiştirmez 4,5. Tedavi başarısının olmaması, migrenin patolojisi tam olarak anlaşılamayan ve sınırlı sayıda terapötik hedefe yol açan çok faktörlü bir bozukluk olmasından kaynaklanmaktadır. Migren, hayvan modellerinde tam olarak yakalanması da zordur, özellikle migren tanısının, aura, baş ağrısı, fotofobi ve allodinya gibi migren ayırt edici özellikleri ile deneyimlerini tanımlayan hastalarla sözlü iletişime dayanarak yapıldığı göz önüne alındığında. Bununla birlikte, migren tedavilerindeki son gelişmelerin şu anda klinik öncesi modeller tarafından iyi doğrulanmış birçok nörolojik durum için tedavilerden daha iyi performans gösterdiğini belirtmek önemlidir. Örneğin, kalsitonin geni ile ilişkili peptidi veya reseptörünü hedef alan monoklonal antikorlar ve küçük moleküller, migren hastalarının yaşam kalitesini iyileştirmede çok başarılı olmuştur ve migrenin klinik yönetimini potansiyel olarak dönüştürebilir. Bu bozukluğu anlamada ilerleme kaydedilmiş olsa da, henüz açıklığa kavuşturulması gereken çok şey olmaya devam ediyor.
Preklinik hayvan modellerine ve insan çalışmalarına dayanarak, migren baş ağrılarının, trigeminal ve üst servikal dorsal kök ganglionları 6,7,8,9,10 yoluyla sinyal veren meninkslerdeki nosiseptif liflerin anormal aktivasyonu ile başlatıldığı yaygın olarak kabul edilmektedir. Bu teoriye rağmen, birçok çalışma hala migrende altta yatan katkıda bulunan mekanizmaları anlamak için sistemik ilaç uygulamasını kullanmaktadır. İlaçların sistemik dozlanması anlayışımızı önemli ölçüde güçlendirmiş olsa da, bu bulgular hedef doku içindeki lokal eylemlerin migrende rol oynayıp oynamadığını doğrudan değerlendirmemektedir. Tersine, birkaç çalışma durayı uyarmak için bir yaklaşım benimsemiştir; Bununla birlikte, bu deneyler invaziv bir kraniyotomi yoluyla kanül implantasyonu ve uzatılmış iyileşme süreleri11,12 gerektirir. Bu sınırlamalar nedeniyle, kraniyotomi eksikliğinin cerrahi sonrası iyileşmeyi ortadan kaldırdığı ve uyanık hayvanlarda derhal test edilmesine izin verdiği durayı lokal olarak uyarmak için minimal invaziv bir yaklaşım geliştirdik12,13,14. Bu enjeksiyonlar hafif izofluran anestezisi altında gerçekleştirilir ve farelerde sagital ve lambdoid sütürlerin birleşme noktasında uygulanır.
Kemirgenlerde nosiseptif davranışsal yanıtları değerlendirmek için çeşitli yaklaşımlar geliştirilmiştir15. Kutanöz allodinya, migren hastalarının yaklaşık% 80'inde16,17 bildirilmiştir ve kemirgenlerde kullanım için potansiyel bir translasyonel son noktayı temsil etmektedir. Preklinik modellerde, von Frey filamentlerinin kemirgen pençesinin plantar bölgesine uygulanması, klinik öncesi migren modellerinde ağrı davranışlarını değerlendirmek için kullanılmıştır. Bu yaklaşımın birincil sınırlaması, sefalik bölgeyi test etmemesidir. Yüz buruşma skorlaması, ağrı uyaranlarının indüklenmesinden sonra yüz ifadelerini analiz ederek kemirgenlerde ağrı davranışlarını yakalamak için kullanılmıştır18,19. Bununla birlikte, sınırlamaları sadece akut uyaranlara verilen yanıtları yakalamayı ve kronik orofasiyal ağrı koşullarını içermez. Yüz bakımı ve azalmış yetiştirme de migrenin klinik öncesi modellerinde davranışsal yanıtların çıktıları olarak kabul edilir20,21. İlkinin sınırlamaları, ağrı tepkilerini normal rutin tımar ve kaşıntı gibi diğer duyumlardan ayırt etmede zorluğu içerir. İkincisi durumunda, yetiştirme davranışları tipik olarak kemirgenlerin yeni ortamlara girmesinden sonra hızla azalır. Bu davranışsal sonlanım noktalarının her biri, ağrı koşullarına katkıda bulunan çeşitli mekanizmaların anlaşılmasında değerli olmasına rağmen, migren gibi ağrı bozukluklarının klinik öncesi modellerinin, özellikle sefalik aşırı duyarlılık yanıtlarını yakalayan son noktaları içermesi için kritik bir ihtiyaç vardır. Dural stimülasyonu takiben periorbital derinin dokunsal aşırı duyarlılığının değerlendirilmesi, duyusal semptomların ağırlıklı olarak sefalik olduğu migrenlere katkıda bulunan mekanizmalar hakkında daha iyi bir fikir verebilecek bir yöntemdir. Burada, klinik öncesi bir migren modeli olarak fare durasına madde uygulamak için bir yöntem açıklıyoruz. Dural uygulamayı takiben, Dixon yukarı-aşağı yönteminde uygulanan kalibre edilmiş von Frey filamentlerini kullanarak periorbital dokunsal aşırı duyarlılığı test etmek için ayrıntılı bir yöntem de sunuyoruz.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>4 oz Hot Paper Cups</td>
			<td>Choice Paper Company</td>
			<td>5004W</td>
			<td>https://www.webstaurantstore.com/choice-4-oz-white-poly-paper-hot-cup-case/5004W.html</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Absorbent Underpads</td>
			<td>Fisherbrand</td>
			<td>14-206-65</td>
			<td>https://www.fishersci.com/shop/products/fisherbrand-absorbent-underpads-8/p-306048</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>C313I/SPC Internal 28 G cannula</td>
			<td>P1 Technologies (formerly Plastics One)</td>
			<td>8IC313ISPCXC</td>
			<td>I.D. 18 mm, O.D. 35 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gastight Model 1701 SN Syringes</td>
			<td>Hamilton</td>
			<td>80008</td>
			<td>https://www.hamiltoncompany.com/laboratory-products/syringes/80008</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ismatec Pump Tubing, 0.19 mm</td>
			<td>Cole-Palmer</td>
			<td>EW-96460-10</td>
			<td>https://www.coleparmer.com/i/ismatec-pump-tubing-2-stop-tygon-s3-e-lab-0-19-mm-id-12-pk/9646010</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stand with chicken wire</td>
			<td>Custom</td>
			<td></td>
			<td>The galvanized steel chicken wire dimensions are 0.25 in. x 19-gauge</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Testing Rack with individual&#160; Chambers</td>
			<td>Custom</td>
			<td></td>
			<td>Each chamber should have a division between each mouse and lids to contain the mouse. The chambers should also be large enough to hold a 4 oz. paper cup.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>von Frey Filaments</td>
			<td>Touch test/Stoelting</td>
			<td>58011</td>
			<td>https://www.stoeltingco.com/touch-test.html</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

dural stimulation and periorbital von frey testing in mice as a preclinical model of headache

Dura mater, araknoid ve pia mater'den oluşan kraniyal meninkslerin öncelikle sinir sistemi için yapısal fonksiyonlara hizmet ettiği düşünülmektedir. Örneğin, beyni kafatasından korurlar ve korteksin vasküler ve nöronal beslemesini demirlerler / düzenlerler. Bununla birlikte, meninksler, migren sırasında yaşanan ağrının lokal steril inflamasyona ve ardından lokal nosiseptif afferentlerin aktivasyonuna atfedildiği migren gibi sinir sistemi bozukluklarında da rol oynar. Meninkslerdeki tabakalardan dura mater, migrenlerin patofizyolojisinde özellikle ilgi çekicidir. Yüksek oranda vaskülarize olur, lokal nosiseptif nöronları barındırır ve bağışıklık hücreleri gibi çeşitli yerleşik hücrelere ev sahipliği yapar. Lokal meningeal mikroortamdaki ince değişiklikler, dural perivasküler nosiseptörlerin aktivasyonuna ve sensitizasyonuna yol açarak migren ağrısına yol açabilir. Çalışmalar, dural afferentlerin in vivo elektrofizyoloji, görüntüleme teknikleri veya davranışsal modeller kullanılarak nasıl aktive edildiğini / hassaslaştığını ele almaya çalışmıştır, ancak bunlar genellikle çok invaziv ameliyatlar gerektirir. Bu protokol, farelerde dura mater üzerindeki bileşiklerin nispeten invaziv olmayan bir şekilde uygulanması için bir yöntem ve dural stimülasyonu takiben periorbital von Frey testini kullanarak baş ağrısı benzeri dokunsal duyarlılığı ölçmek için uygun bir yöntem sunmaktadır. Bu yöntem, dura ve kafatasının bütünlüğünü korur ve kaynaşmamış sagital ve lambdoid sütürlerin birleşme noktasında 0.65 mm'lik modifiye edilmiş bir kanül yoluyla maddeler enjekte ederek invaziv tekniklerden kaynaklanan kafa karıştırıcı etkileri azaltır. Bu klinik öncesi model, araştırmacıların çok çeşitli dural uyaranları ve nosiseptör aktivasyonu, bağışıklık hücresi aktivasyonu, vasküler değişiklikler ve ağrı davranışları gibi migrenin patolojik ilerlemesindeki rollerini araştırmalarına izin verirken, kafatası ve meninkslere yaralanmayan koşulları koruyarak izin verecektir.

Bu enjeksiyon yöntemi, uyaranları farelerin durasına uygulamak için kullanılır, böylece daha sonra davranışsal testler yapılabilir. Bu modelle ölçülen en yaygın davranışsal çıktı, von Frey12,13,14 ile değerlendirilen kutanöz yüz aşırı duyarlılığıdır. Burada, bu modelin migren patolojisine cinsiyete özgü potansiyel katkıları değerlendirmek için nasıl kullanılabileceğini gösteriyoruz (<stron...

Watch this Scientific Journal Video about Dural Stimulation and Periorbital von Frey Testing in Mice As a Preclinical Model of Headache at JoVE.com

Dural Stimulation and Periorbital von Frey Testing in Mice As a Preclinical Model of Headache

Migrenin en önemli belirtisi şiddetli baş ağrısıdır ve bunun meninksleri innerve eden duyusal nöronlar tarafından aracılık ettiği varsayılmaktadır. Burada, yüz aşırı duyarlılığını bir çıktı olarak kullanırken, maddeleri duraya minimal invaziv bir şekilde lokal olarak uygulamak için bir yöntem sunuyoruz.

Preklinik Bir Baş Ağrısı Modeli Olarak Farelerde Dural Stimülasyon ve Periorbital von Frey Testi

The cranial meninges, comprised of the dura mater, arachnoid, and pia mater, are thought to primarily serve structural functions for the nervous system.  ...

Meninkslerde doku hasarı olmadığında baş ağrısına katkıda bulunan hangi olaylar meydana gelir? Sıçanlarda dural stimülasyon modellerinin önceki kullanımından farklı olarak, genetiği değiştirilmiş farelerin kapsamlı kataloğunun kullanılmasına izin verir. Birincil mücadele, kafatasını enjektörle palpe ederek lambdoidal ve sagital sütürlerin kesişimini bulmak olacaktır.Başlamak için, piyasada satılan bir iç kanülü değiştirerek fare demleyicilerini oluşturun ve ayarlanabilir ve 28 gauge kılavuz kanülüne yerleştirilen kaynaşmış bir silika plastik kapakla demleyin. Demlik üzerindeki kaynaşmış silika plastik kapağı, demleyiciyi bükmeden ayarlamak için bir kumpas kullanın. Demlikayı, demlik ucundan silika plastik kapağın kenarına kadar ölçülen 6 milimetre uzunluğa ayarlayın.Diğer fare suşları için pilot enjeksiyonlar yapın ve uzunluğu dura mater'e tam olarak enjekte edecek şekilde ayarlayın. Ardından, beş mikrolitre hacmini tutmak için demlik makinenin uzun ucunu sekiz inç veya daha fazla plastik boruya takın. Hava kabarcıklarının hatta birikmesini önlemek için metal parçanın ve demlik üzerinde bulunan plastik tıpanın üst kısmının tam olarak kaplanmasını sağlarken tüpü yerleştirin.Daha sonra, mikroşırıngayı doldurun ve borunun diğer ucunu 10 mikrolitrelik bir cam mikroşırıngaya takın ve şırınganın metal kısmı üzerinde sıkı bir sızdırmazlık sağlayın. Ardından, hava kabarcığı oluşumunu önlemek için şırıngayı beş mikrolitre PBS veya sentetik geçiş sıvısı veya tercih edilen diğer araçlarla doldurun. Gerekirse, önceden biçimlendirilmiş kabarcıkları dağıtmak için hattı araçla doldurun.Alternatif olarak, şırıngayı önceden doldurun ve bağladıktan sonra sıvıyı bağlı hattan geçirin. Araç dolu hat verimli bir şekilde çalıştıktan sonra, çözeltinin beş mikrolitresini Hamilton şırıngasına yükleyin. Fare tamamen anestezi altına alındıktan sonra, gözlere steril oftalmik merhem uygulayın ve hayvanın kafasını tıraş edin, ardından cildi povidon iyot ve etanol ile dezenfekte edin.Hayvanın başını bir elinizle sabitleyin ve infuser'ı diğer elinizle ilaç yüklü şırınga ile tutun. Daha sonra, bir demleyici kullanarak, farenin kafatasındaki sagital ve lambdoidal sütürlerin birleşmesini dikkatlice araştırın, bulun ve doğrulayın. Dikiş yerleştirildikten ve demlik yerine oturduğunda, in infüzörü cildi delene ve plastik tıpaya kadar kavşağa düşene kadar yavaşça ve nazikçe ileri geri sallayın ve 6 milimetrelik demlik ucun tamamının kavşağa yerleştirilmesini sağlayın.Ardından, beş mikrolitre sıvıyı dura materine atmak için şırınganın pistonunu yavaşça itin. Test gününde, odaya alıştıktan sonra, fincanla birlikte bir fareyi ilgili odadan çıkarın. Eşit olmayan ağırlık dağılımı hayvanların tepkisini değiştirebileceğinden veya önleyebileceğinden, eşit olarak dağılmış vücut ağırlığı için bardağı yatay konumda tutun.Bardağı fareyle birlikte test rafının altındaki masada tutulan emici bir pedin üzerine yerleştirin. Daha sonra, periorbital von Frey testi için, 07 gramlık von Frey filamentini yüzün merkezine gözlerin arasına yerleştirin ve von Frey saçının C şeklinde bir formasyona bükülmesine neden olacak kadar filament üzerine yeterli basınç uygulayın. Filament temasını yaklaşık üç ila beş saniye boyunca veya fare başını veya pençelerini kullanarak filamenti kaydırana kadar koruyun.Dixon yukarı-aşağı yöntemini takip etmek için, fare filamente yanıt verirse bir sonraki düşük ağırlıklı filamenti uygulayın, aksi takdirde daha yüksek ağırlıklı filament uygulayın. Prosedür, dural prolaktinin mekanik olarak uyarılmış yüz aşırı duyarlılığı üzerindeki etkilerini incelemek için kullanıldı. Çalışmanın sonuçları, beş mikrogram dural prolaktin'e yanıt olarak dişi ICR farelerinde yüz yoksunluk eşiklerinin önemli ölçüde azaldığını göstermiştir.On kat daha düşük bir 5 mikrogram prolaktin dozu, yüksek dozda prolaktin'e benzer şekilde, azalmış yüz yoksunluk eşikleri de göstermiştir. Prolaktin enjeksiyonları, buruşma yoluyla değerlendirilen spontan ağrı ile ilgili davranışlar üretti. Dural 5 mikrogram prolaktin, dişi farelerde önemli grimacing'e neden oldu ve ayrıca kadın migren benzeri davranışlarda dural prolaktin için açık bir rol gösterdi Uyaranın yaralanma yokluğunda baş ağrısı tepkisine neden olup olmadığını belirlemek için von Frey filamentleri veya yüz buruşması kullanılarak yapılan davranış testleri.Bu teknik şimdi kraniyotomilerin ve müteakip inflamasyonun neden olduğu uyarılar konusunda endişe duymadan meninkslerdeki enflamatuar temelli mekanizmaları araştırmak için kullanılabilir.

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Combining Transcranial Magnetic Stimulation and fMRI to Examine the Default Mode Network

Varsayılan Modu Ağ inceleyin Transkraniyal Manyetik Uyarım ve fMRI birleştiren

The default mode network is a group of brain regions that are active when an individual is not focused on the outside world and the brain is at "wakeful ...

TMS: Using the Theta-Burst Protocol to Explore Mechanism of Plasticity in Individuals with Fragile X Syndrome and Autism

TMS: Fragile X Sendromu ve Otizm Bireylerde Plastisite, Mechasnism keşfedin Theta-Burst Protokolü kullanma

Fragile X Syndrome (FXS), also known as Martin-Bell Syndrome, is a genetic abnormality found on the X chromosome.1,2 Individuals suffering from FXS ...

The NeuroStar TMS Device: Conducting the FDA Approved Protocol for Treatment of Depression

NeuroStar TMS Aygıt: FDA yürütülmesi Depresyon Tedavisinde Protokolü Onaylandı

The Neuronetics NeuroStar Transcranial Magnetic Stimulation (TMS) System is a class II medical device that produces brief duration, pulsed magnetic ...

Electrode Positioning and Montage in Transcranial Direct Current Stimulation

Transkraniyal Doğru Akım Uyarım Elektrot Konumlandırma ve Montaj

Transcranial direct current stimulation (tDCS) is a technique that has been intensively investigated in the past decade as this method offers a ...

Measuring Changes in Tactile Sensitivity in the Hind Paw of Mice Using an Electronic von Frey Apparatus

Measuring inflammation-induced changes in thresholds of hind paw withdrawal from mechanical pressure is a useful technique to assess changes in pain ...

The Olfactory System as a Model to Study Axonal Growth Patterns and Morphology In Vivo

The Olfactory System as a Model to Study Axonal Growth Patterns and Morphology In Vivo

Bir Model Olarak Koku Sistemi Akson Büyüme Modelleri ve Morfoloji Eğitim için<em&gt; In Vivo</em

The olfactory system has the unusual capacity to generate new neurons throughout the lifetime of an organism. Olfactory stem cells in the basal portion of ...

A Simple and Inexpensive Method for Determining Cold Sensitivity and Adaptation in Mice

Fareler Soğuk Hassasiyeti ve Uyum belirlenmesi için Basit ve ucuz Yöntem

Cold hypersensitivity is a serious clinical problem, affecting a broad subset of patients and causing significant decreases in quality of life.  The cold ...

Simultaneous ex vivo Functional Testing of Two Retinas by in vivo Electroretinogram System

Simultaneous ex vivo Functional Testing of Two Retinas by in vivo Electroretinogram System

Eşzamanlı<em&gt; Ex vivo</emİki retina&gt; Fonksiyonel Test tarafından<em&gt; In vivo</em&gt; Elektroretinogram Sistemi

An In vivo electroretinogram (ERG) signal is composed of several overlapping components originating from different retinal cell types, as well as noise ...

An In Ovo Model for Testing Insulin-mimetic Compounds

An In Ovo Model for Testing Insulin-mimetic Compounds

İnsülin mimetic bileşikler test etmek için bir Ovo içinde modeli

Elevated blood glucose levels in type 2 diabetes mellitus (T2DM), a complex and multifactorial metabolic disease, are caused by insulin resistance and ...

Transcranial Direct Current Stimulation (tDCS) in Mice

Transcranial Direct Current Stimulation tDCS in Mice

Farelerde Transkraniyal doğru akım stimülasyon (tDCS)

Transcranial direct current stimulation (tDCS) is a non-invasive neuromodulation technique proposed as an alternative or complementary treatment for ...