Name: in vivo methods to assess retinal ganglion cell and optic nerve function and structure in large animals
Uploaded: 2022-02-26T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about In Vivo Methods to Assess Retinal Ganglion Cell and Optic Nerve Function and Structure in Large Animals at JoVE.com

تم تمويل هذه الدراسة من المنح التالية: البرنامج الوطني للبحث والتطوير الرئيسي في الصين (2021YFA1101200)؛ برنامج البحث والتطوير الوطني في الصين (2021YFA1101200)؛ برنامج البحث والتطوير الوطني (2021YFA1101200)؛ برنامج البحث والتطوير الوطني (2021YFA101200)؛ برنامج البحث والتطوير الوطني (2021Y مشروع البحوث الطبية في ونتشو (Y20170188)، البرنامج الوطني للبحث والتطوير الرئيسي في الصين (2016YFC1101200)؛ المؤسسة الوطنية للعلوم الطبيعية في الصين (81770926؛81800842)؛ برنامج البحث والتطوير الرئيسي لمقاطعة تشجيانغ (2018C03G2090634)؛ وبرنامج البحث والتطوير الرئيسي لمستشفى ونتشو للعيون (YNZD1201902). ولم يكن للراعي أو لمنظمة التمويل أي دور في تصميم أو إجراء هذا البحث.

أجريت التجارب بدقة وفقا للمبادئ التوجيهية وصول والمعاهد الوطنية للصحة دليل لرعاية واستخدام المختبر، والالتزام بالبروتوكولات التي وافقت عليها اللجنة المؤسسية لرعاية الحيوان واستخدامه في جامعة ونتشو الطبية (WMU) ومختبر Joinn (سوتشو). تم إيواء ماعز سانين الذكر ، الذي تتراوح أعمارهم بين 4 و 6 أشه...

<ol>
	<li>Benowitz, L., Yin, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rewiring+the+injured+CNS:+lessons+from+the+optic+nerve.">Rewiring the injured CNS: lessons from the optic nerve.</a> Experimental Neurology. 209 (2), 389-398 (2008).</li><li>Park, K. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Promoting+axon+regeneration+in+the+adult+CNS+by+modulation+of+the+PTEN/mTOR+pathway.">Promoting axon regeneration in the adult CNS by modulation of the PTEN/mTOR pathway.</a> Science. 322 (5903), 963-966 (2008).</li><li>Duan, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Subtype-specific+regeneration+of+retinal+ganglion+cells+following+axotomy:+effects+of+osteopontin+and+mTOR+signaling.">Subtype-specific regeneration of retinal ganglion cells following axotomy: effects of osteopontin and mTOR signaling.</a> Neuron. 85 (6), 1244-1256 (2015).</li><li>Bei, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Restoration+of+visual+function+by+enhancing+conduction+in+regenerated+axons.">Restoration of visual function by enhancing conduction in regenerated axons.</a> Cell. 164 (1-2), 219-232 (2016).</li><li>He, Z., Jin, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intrinsic+control+of+axon+regeneration.">Intrinsic control of axon regeneration.</a> Neuron. 90 (3), 437-451 (2016).</li><li>Yang, S. -. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Strategies+to+promote+long-distance+optic+nerve+regeneration.">Strategies to promote long-distance optic nerve regeneration.</a> Frontiers in Cellular Neuroscience. 14, 119 (2020).</li><li>Foroozan, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=New+treatments+for+nonarteritic+anterior+ischemic+optic+neuropathy.">New treatments for nonarteritic anterior ischemic optic neuropathy.</a> Neurologic Clinics. 35 (1), 1-15 (2017).</li><li>Singman, E. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Indirect+traumatic+optic+neuropathy.">Indirect traumatic optic neuropathy.</a> Military Medical Research. 3, 2 (2016).</li><li>Zhang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+evaluation+of+retinal+ganglion+cells+and+optic+nerve's+integrity+in+large+animals+by+multi-modality+analysis.">In vivo evaluation of retinal ganglion cells and optic nerve's integrity in large animals by multi-modality analysis.</a> Experimental Eye Research. 197, 108117 (2020).</li><li>Tolbert, W. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=From+Rhesus+macaque+to+human:+structural+evolutionary+pathways+for+immunoglobulin+G+subclasses.">From Rhesus macaque to human: structural evolutionary pathways for immunoglobulin G subclasses.</a> mAbs. 11 (4), 709-724 (2019).</li><li>Preuss, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Specializations of the human visual system: the monkey model meets human reality. , 231-259 (2004).</li><li>Friedli, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pronounced+species+divergence+in+corticospinal+tract+reorganization+and+functional+recovery+after+lateralized+spinal+cord+injury+favors+primates.">Pronounced species divergence in corticospinal tract reorganization and functional recovery after lateralized spinal cord injury favors primates.</a> Science Translational Medicine. 7 (302), (2015).</li><li>Porciatti, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Electrophysiological+assessment+of+retinal+ganglion+cell+function.">Electrophysiological assessment of retinal ganglion cell function.</a> Experimental Eye Research. 141, 164-170 (2015).</li><li>Smith, C. A., Vianna, J. R., Chauhan, B. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assessing+retinal+ganglion+cell+damage.">Assessing retinal ganglion cell damage.</a> Eye. 31 (2), 209-217 (2017).</li><li>Schuman, J. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optical+coherence+tomography+and+histologic+measurements+of+nerve+fiber+layer+thickness+in+normal+and+glaucomatous+monkey+eyes.">Optical coherence tomography and histologic measurements of nerve fiber layer thickness in normal and glaucomatous monkey eyes.</a> Investigative Ophthalmology &amp; Visual Science. 48 (8), 3645-3654 (2007).</li><li>You, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improving+reproducibility+of+VEP+recording+in+rats:+electrodes,+stimulus+source+and+peak+analysis.">Improving reproducibility of VEP recording in rats: electrodes, stimulus source and peak analysis.</a> Documenta Ophthalmologica. 123 (2), 109-119 (2011).</li><li>Odom, J. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=ISCEV+standard+for+clinical+visual+evoked+potentials:+(2016+update).">ISCEV standard for clinical visual evoked potentials: (2016 update).</a> Documenta Ophthalmologica. 133 (1), 1-9 (2016).</li><li>Zhang, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Silicone+oil-induced+ocular+hypertension+and+glaucomatous+neurodegeneration+in+mouse.">Silicone oil-induced ocular hypertension and glaucomatous neurodegeneration in mouse.</a> eLife. 8, 45881 (2019).</li><li>Seidman, S. H., Telford, L., Paige, G. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vertical,+horizontal,+and+torsional+eye+movement+responses+to+head+roll+in+the+squirrel+monkey.">Vertical, horizontal, and torsional eye movement responses to head roll in the squirrel monkey.</a> Experimental Brain Research. 104 (2), 218-226 (1995).</li><li>Porciatti, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+mouse+pattern+electroretinogram.">The mouse pattern electroretinogram.</a> Documenta Ophthalmologica. 115 (3), 145-153 (2007).</li></ol>

في هذه الدراسة، نقدم بروتوكول VEP، PERG، وأكتوبر في الماعز والمكاك ريسوس. يمكن تطبيق هذه في أساليب الجسم الحي في نماذج حيوانية كبيرة من الاعتلالات العصبية البصرية المختلفة، مثل الزرق، الإقفاري، أو اعتلال الأعصاب البصرية الرضية والتهاب العصب البصري9.
PVEP هو أك...

ينقل العصب البصري (ON)، الذي يتكون من محاور عصبية من خلايا العقدة الشبكية (RGC)، إشارة بصرية من شبكية العين إلى الدماغ. على الأمراض، مثل الزرق، اعتلال الأعصاب البصرية الصدمة أو الإقفارية، وغالبا ما تسبب انحطاط ON / RGC لا رجعة فيه وفقدان البصرية المدمرة. على الرغم من أن هناك حاليا العديد من الاختراقات في تجديد ON وحماية RGC في نماذج القوارض1,2,3,4,5,6, ظلت العلاجات السريرية لمعظم أمراض ON هي نفسها بشكل أساسي على مدى نصف القرن الماضي مع نتائج غير مرضية7,8 . لسد الفجوة بين البحوث الأساسية والممارسة السريرية ، والدراسات التحويلية باستخدام نموذج حيواني كبير من أمراض ON غالبا ما تكون ضرورية ومفيدة بسبب تشابهها التشريحي أوثق للبشر من نماذج القوارض.
الماعز والمكاك ريسوس هما نوعان من الحيوانات الكبيرة المستخدمة في مختبرنا لنموذج مرض ON الإنسان. حجم مقلة عين الماعز ، ON ، والهيكل المجاور (تجويف مداري وأنفي ، قاعدة الجمجمة ، وما إلى ذلك) يشبه حجم الإنسان القائم على الأشعة المقطعية الجمجمة9. على هذا النحو، نموذج الماعز يوفر فرصة لتقييم وصقل الأجهزة العلاجية أو العمليات الجراحية قبل استخدامها في البشر. المكاك ريسوس، كما الرئيسيات غير البشرية (NHP)، لديه نظام بصري فريد من نوعه مثل الإنسان الذي لا وجود له في الأنواع الأخرى10،11. بالإضافة إلى ذلك ، فإن الاستجابات المرضية الفسيولوجية للإصابات والعلاجات في NHP تشبه إلى حد كبير تلك الموجودة في humans12.
في الاختبارات الحية لتقييم بنية ON وRGC وظيفة طوليا مهمة في الدراسات الحيوانية الكبيرة. تم استخدام مخطط كهربية النمط (PERG) لتقييم وظيفة RGC. فلاش البصرية أثار المحتملة (FVEP) يعكس سلامة retino-geniculo-القشرية المسار في النظام البصري. وهكذا، PERG جنبا إلى جنب مع FVEP يمكن أن تعكس الدالة ON9،13،14 . يمكن للتصوير المقطعي للتماسك البصري الشبكي (OCT) أن يظهر بنية الشبكية بدقة زمنية ومكانية عالية، مما يتيح قياس سمك مجمع العقدة الشبكية (GCC)9,15. بالنسبة للفحوصات الكهربية في هذه الدراسة ، فإن مراقبة العلامات الحيوية (معدل الحرارة ومعدل الخرق وضغط الدم) ومستوى تشبع الأكسجين (SpO2) قبل الاختبار أمران حاسمان لأن هذه المعلمات لها تأثيرات قوية على تدفق الدم العيني وبالتالي وظيفة النظام البصري. ومع ذلك ، لم نراقب العلامات الحيوية عند إجراء تصوير شبكية العين OCT من أجل البساطة. وفقا للدراسة السابقة9، سمك دول مجلس التعاون الخليجي التي تقاس بالتصوير الشبكي أكتوبر مستقرة تماما، مع معامل بين الدورات من الاختلاف ما يقرب من 3٪. وقد وصفت هذه الاختبارات في الجسم الحي في الماعز والمكاك ريسوس بالتفصيل في دراستنا السابقة9. هنا نقدم هذه الأساليب للمساعدة في زيادة الشفافية التجريبية وقابلية الاستنساخ.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>47.6 x 26.8 cm monitors</td>
			<td>DELL Inc.</td>
			<td>E2216HV</td>
			<td>The visual stimuli of contrast-reversal black-white checkerboards were displayed on screens</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>6.0 mm tracheal tube</td>
			<td>Henan Tuoren Medical Device Co., Ltd</td>
			<td>PVC 6.0</td>
			<td>ensure the airway</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>alligator clip</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>atropine</td>
			<td>Guangdong Jieyang Longyang Animal pharmaceutical Co.,Ltd.</td>
			<td></td>
			<td>reduce bronchial secretion and protect heart from vagal nerve activation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Carbomer Eye Gel</td>
			<td>Fabrik GmbH Subsidiary of Bausch &#38; Lomb</td>
			<td></td>
			<td>moisten the cornea and stabilize the recording electrodes</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ERG-Jet recording electrodes</td>
			<td>Roland Consult Stasche&#38;Finger GmbH</td>
			<td>2300 La Chaux-De-Fonds</td>
			<td>ERG recording</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>eye speculum</td>
			<td>Shanghai Jinzhong Medical Device Co., Ltd</td>
			<td>ZYD020</td>
			<td>open palpebral fissure</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heidelberg Spectralis OCT system</td>
			<td>Heidelberg Engineering</td>
			<td></td>
			<td>OCT system</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Imaging</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>(https://www.heidelbergengineering.com/media/e-learning/Totara-US/files/pdf-tutorials/2238-003_Spectralis-Training-Guide.pdf)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>isoflurane</td>
			<td>RWD Life Science Co., Ltd</td>
			<td>R510-22</td>
			<td>isoflurane anesthesia</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>male Saanen goats</td>
			<td>Caimu Livestock Company, country (Hangzhou, China)</td>
			<td></td>
			<td>The male Saanen goats, aged from 4 to 6 months with weight of 19&#8211;23 kg</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>needle electrode</td>
			<td>Roland Consult Stasche&#38;Finger GmbH</td>
			<td>U51-426-G-D</td>
			<td>use for FVEP ground electrode and PERG reference electrodes</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>periphery venous catheter intravenously</td>
			<td>BD shanghai Medical Device Co., Ltd</td>
			<td>383019</td>
			<td>intravenous access for atropine and propofol</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>propofol</td>
			<td>Xian Lipont Enterprise Union Management Co.,Ltd.</td>
			<td></td>
			<td>induce Isoflurane anesthesia in goat</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tropicamide Phenylephrine Eye Drops</td>
			<td>SANTEN OY, Japan</td>
			<td></td>
			<td>5% tropicamide and 5% phenylephrine hydrochloride</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>visual electrophysiology device</td>
			<td>Gotec Co., Ltd</td>
			<td>GT-2008V-III</td>
			<td>use for FVEP &#38; PERG</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>xylazine</td>
			<td>Huamu Animal Health Products Co., Ltd.</td>
			<td></td>
			<td>xylazine anesthesia: intramuscular injection of xylazine 3mg/kg</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>zoletil50</td>
			<td>Virbac</td>
			<td></td>
			<td>induce Isoflurane anesthesia in monkey</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

in vivo methods to assess retinal ganglion cell and optic nerve function and structure in large animals

يجمع العصب البصري إشارات المحاور من خلايا العقدة الشبكية وينقل إشارة بصرية إلى الدماغ. نماذج حيوانية كبيرة من إصابة العصب البصري ضرورية لترجمة استراتيجيات علاجية جديدة من نماذج القوارض إلى التطبيق السريري بسبب أوجه التشابه الوثيقة مع البشر في الحجم والتشريح. هنا نصف بعض في أساليب الجسم الحي لتقييم وظيفة وهيكل خلايا العقدة الشبكية (RGCs) والعصب البصري (ON) في الحيوانات الكبيرة، بما في ذلك الإمكانات البصرية التي أثارها (VEP)، ونمط الكهربائي (PERG) والتصوير المقطعي التماسك البصري (أكتوبر). تم توظيف كل من الماعز والرئيسيات غير البشرية في هذه الدراسة. من خلال تقديم هذه الأساليب في الجسم الحي خطوة بخطوة، ونحن نأمل في زيادة استنساخ التجريبية بين مختبرات مختلفة وتسهيل استخدام نماذج حيوانية كبيرة من الاعتلالات العصبية البصرية.

ويبين الشكل 1A النتائج التمثيلية ل FVEP في الماعز. على الرغم من أن الأشكال الموجية في نفس شدة الفلاش لها تشابه نسبي ، إلا أننا لا نزال نوصي بفحص الأشكال الموجية مرتين. الموجات الكهرومغناطيسية التي تولدها الأجهزة الإلكترونية سوف تتداخل مع الإشارات الكهربائية التي تم جمعها، مم...

Watch this Scientific Journal Video about In Vivo Methods to Assess Retinal Ganglion Cell and Optic Nerve Function and Structure in Large Animals at JoVE.com

In Vivo Methods to Assess Retinal Ganglion Cell and Optic Nerve Function and Structure in Large Animals

هنا نحن demostrate عدة في اختبارات الجسم الحي (فلاش البصرية أثار المحتملة، ونمط electroretinogram والتصوير المقطعي التماسك البصري) في الماعز والمكاك ريسوس لفهم هيكل ووظيفة العصب البصري والخلايا العصبية.

في فيفو طرق لتقييم خلية العقدة الشبكية ووظيفة العصب البصري وهيكل في الحيوانات الكبيرة

The optic nerve collects axons signals from the retinal ganglion cells and transmits visual signal to the brain. Large animal models of optic nerve injury ...

مرحبًا بالجميع. هذا ييكوي زانغ من مستشفى ونتشو للعيون العصب العلوي يفتقر إلى إكسون من خلايا العقدة orexin، ومن ثم نقل الإشارة البصرية إلى الدماغ.نموذج أكبر من إصابة العصب العلوي ضرورية لترجمة العلاج الجديد من نموذج الروبوت إلى تطبيق الليمفاوية. هنا، ونحن نصف بعض في أساليب الجسم الحي لتقييم هيكل ووظيفة خلايا العقدة orexin في العصب العلوي في الحيوانات الكبيرة. من خلال تقديم هذه الطريقة خطوة بخطوة، نأمل في زيادة الإعاقات الإنجابية التجريبية وتسهيل استخدام نماذج أكبر من العصاب البصري.حلق مع شفرة الحلاقة الإلكترونية. و، الإعدادية مع الكحول 70٪ثلاث مرات، لتنظيف الجلد وفضح الوريد تحت الجلد. إدراج الخروع الوريدي المحيطي عن طريق الوريد.ثم بالتنقيط الأتروبين والبروبوفول. Intubate الماعز مع أنبوب القصبة الهوائية ستة ملليمتر والاتصال بجهاز تنفس اصطناعي. تم الحفاظ على التخدير مع 3.5٪ isoflurane في الأكسجين بمعدل تدفق ثابت اثنين لتر المدارة.ضع مستشعر درجة الحرارة تحت لسان الماعز. قص تشبع الأكسجين يشق إلى نهاية قريبة من أذن الماعز. ربط الكفة ضغط الدم إلى قاعدة الفخذ.المشبك ECG يشق على الأطراف في النظام. ثم، يمكننا مراقبة المؤشرات الحيوية للماعز. حلق الشعر وتطهير الجلد مع بيتادين والكحول 70٪ ثلاث مرات في وسط العظام الأمامية.افتح كيس التعقيم الذي يحتوي على مقص والأظافر. جعل شقوق الجلد لفضح الجمجمة مع مقص. مسامير الصلب لزرعها في وسط العظام الأمامية.حلق الشعر وتطهير الجلد مع بيتادين والكحول 70٪ ثلاث مرات في نقطة وسطى من أذنين في عظم القذالي. جعل شقوق الجلد. مسامير الصلب لزرعها في النقطة الوسطى من أذنين في عظم القذالي.يتم إدخال قطب الإبرة الأرضية تحت الجلد تحت المسمار الجمجمة الأمامية. يتم توصيل القطب النشط والقطب المرجعي بمسامير أمامية وقذالية على التوالي مع مقاطع التمساح للحد من العجز الكهربائي. رقعة عين واحدة.تطبيق موضعي قطرات العين التخدير على سطح العين. يتم توسيع التلاميذ على كلا الجانبين عن طريق قطرات العين النخر. ضع رأس الماعز في محفز مملوء بالغاز يهدف إلى ضوء النتوء.ضع البطانية السوداء فوق المحفز ورأس الماعز لمدة خمس دقائق التكيف. يتم استخدام منظار الجفن لفضح تلميذه بالكامل. تحقق من العجز الجنسي الاتصال الأنسجة القطب.تأكد من أن العجز الجنسي أقل من 10 كيلومترات لكل لتجنب التداخل الكهرومغناطيسي من الأجهزة الكهربائية الأخرى في نفس الغرفة. تحقق من الضوضاء الأساسية دون تحفيز الضوء. بدء تسجيل FVEP.لاحظ أن تسجيل FVEP في كل كثافة الضوء يتم تنفيذ مرتين. لاحظ أن ترطب القرنية مع المسيل للدموع الاصطناعية إذا كان يبدو الجافة. كرر عن خطوات للعين الكونترالاتال.بدء تسجيل FVEP في كثافة الضوء المختلفة على التوالي. لكل تسجيل، يتم متوسط 64 آثار لتسفر عن شكل موجة واحدة. تم تعيين أول ذروة إيجابية ونشطة في شكل موجة FVEP ك P1 و N1. يتم وضع القطب الأرضي المعقم في شحمة الأذن.يتم إدخال الأقطاب الكهربائية النشطة والمرجعية المعقمة تحت الجلد على طول الخط الوسطي والعظام الأمامية والعظم القذالي على التوالي. يتم استخدام منظار الجفن لفضح تلميذه بالكامل. رقعة عين واحدة.تسجيل استجابات VEP نمط العين الأخرى في ترددات مكانية مختلفة على التوالي. الاتصال بالقطب الأرضي مع مقطع التمساح. يتم وضع اثنين من الأقطاب المرجعية إبرة معقمة تحت الجلد سنتيمتر واحد وراء canthus الجانبية على كلا الجانبين.يتم استخدام منظار الجفن لفضح تلميذه بالكامل. يتم توسيط اثنين من أقطاب تسجيل ERG المطهرة على حد سواء القرنية بعد التطبيق الموضعي للتمزق الاصطناعي. يتم وضع اثنين من المحفزات أمام كل عين مع مسافة مشاهدة 50 سم.تأكد من أن العجز الجنسي أقل من 10 كيلومترات. تتبع الضوضاء الأساسية دون تحفيز الضوء. صوب الضوء النتوئ.بدء نمط تسجيل ERG من كلتا العينين في وقت واحد على ترددات مكانية مختلفة على التوالي. وأخيرا، عودة الشاشة لتسجيل نمط ERG دون المحفزات البصرية والتحكم النشط. تم تعيين مرشح ممر النطاق لتتراوح من 1 إلى 75 هيرتز لثلاثة CPD نمط ERG.مرشح ممر باند من 1 إلى 50 هيرتز لتنعيم الشكل دون التأثير على اتساعه. يتم تعيين القمم الإيجابية والنشطة الأولى في شكل موجة P1 و N1. نمط ERG السعة تقاس من N1 إلى P1.To الحد من العجز الكهربائي، يتم وضع مرجع إبرة معقمة تحت الجلد الأمامي. ويتم وضع قطب مرجعي إبرة معقمة تحت الجلد سنتيمتر واحد وراء canthus الجانبية على جانب واحد.يتم وضع قطب تسجيل ERG مطهر على القرنية على تطبيق موضعي للتمزق الاصطناعي. رقعة عين واحدة. يتم وضع شاشة عرض على مسافة عرض 50 سنتيمترا.يتم استخدام منظار الجفن لفضح تلميذه بالكامل. ثم، يتم وضع الماعز على بقية الذقن. محاذاة الماعز مع الكاميرا لإرسال رأسه العصب البصري في صورة فحص الليزر confocal ophthalmoscopy عن طريق تعديل موقفها الرأس.انقر فوق زر البدء لإدخال مرحلة نهاية الكشف. انتظر حتى ينتهي الجهاز من التحميل. اضغط على زر البدء الأصفر لبدء التصوير الرسمي.ضبط عصا التحكم لإلقاء الضوء بالتساوي على صورة الأشعة تحت الحمراء لتحسين جودة الصورة. مرر الكاميرا للأمام حتى تظهر صورة OCT الشبكية المستقيمة على الشاشة اليمنى العليا. تعديل عصا التحكم أن يكون الرقص بالتساوي في صورة أكتوبر الشبكية الأفقي.اضغط على الزر الموجود على عصا التحكم لالتقاط صورتك تلقائيا. أمسك عصا التحكم هذه للحفاظ على جودة الصورة على شاشة الصورة المباشرة حتى يتم الانتهاء من تنفيذ الصورة. ثم اضغط على اكتساب.حدد صورة أولية عالية الجودة. انقر بزر الماوس الأيمن وحدد تعيين مرجع. اضغط على زر المتابعة للسماح للبرنامج بمضاهاة المسح الضوئي الحالي تلقائيا بالمسح الأساسي.مرة واحدة مطابقة، الضغط على الزر على عصا التحكم لتنشيط التلقائي تتبع الوقت الحقيقي. انقر فوق زر القياس لإدخال منصة القياس. اختر الممحاة أداة ومسح خط RFL، الذي يتم تصنيفه تلقائيا بواسطة الجهاز.اختر أداة رسم الخط لتحديد الحدود بين IPL و INL يدويا. بين الخطين الأحمر والأزرق هو مجمع دول مجلس التعاون الخليجي. يتم إجراء التصوير المعدل الشبكية في المكاك ريسوس باستخدام نفس المعدات والإجراءات مثل تلك المستخدمة في الماعز.الشكل A يظهر ممثل FVEP في الماعز. يظهر الشكل B نموذج موجة ERG التمثيلية في الماعز. يظهر الشكل C نمط تمثيلي FVEP في المكاك ريسوس.ويظهر الشكل D نموذج موجة ERG التمثيلية في المكاك ريسوس. يظهر الشكل الثاني صور أكتوبر الشبكية التمثيلية حول رأس العصب البصري وسماكة مجمع دول مجلس التعاون الخليجي في المناطق الطرفية المختلفة في الماعز والمكاك ريسوس. يلعب النموذج الحيواني الكبير دورا مهما في الأبحاث التحويلية.وفي كثير من الحالات، فشلت الآثار العلاجية الواعدة في النماذج الحيوانية الصغيرة في ترجمتها إلى المرضى البشر. في هذه الدراسة، قدمنا بروتوكول الفيديو من FVEP، PERG، وأكتوبر في الماعز والمكاك ريسوس. يمكن تطبيق هذا في طريقة الجسم الحي في نموذج أكبر من مختلف العصاب البصري، مثل الجلوكوما الإقفارية أو الاعتلال العصبي البصري الرضي والتهاب العصب البصري.

Research

JoVE Journal

Neuroscience

In Vivo Methods to Assess Retinal Ganglion Cell and Optic Nerve Function and Structure in Large Animals

Methods for Experimental Manipulations after Optic Nerve Transection in the Mammalian CNS

أساليب التلاعب التجريبية بعد Transection العصب البصري الثدييات في الجهاز العصبي المركزي

Retinal ganglion cells (RGCs) are CNS neurons that output visual information from the retina to the brain, via the optic nerve. The optic nerve can be ...

Transfection of Mouse Retinal Ganglion Cells by in vivo Electroporation

Transfection of Mouse Retinal Ganglion Cells by in vivo Electroporation

ترنسفكأيشن من خلايا الشبكية بواسطة الماوس العقدة في الجسم الحي Electroporation

The targeting and refinement of RGC projections to the midbrain is a popular and powerful model system for studying how precise patterns of neural ...

An Optic Nerve Crush Injury Murine Model to Study Retinal Ganglion Cell Survival

وسحق العصب البصري النموذجي إصابة الفئران لدراسة الخلايا الشبكية بقاء العقدة

Injury to the optic nerve can lead to axonal degeneration, followed by a gradual death of retinal ganglion cells (RGCs), which results in irreversible ...

Functional Neuroimaging Using Ultrasonic Blood-brain Barrier Disruption and Manganese-enhanced MRI

تصوير الأعصاب وظيفية عن طريق الموجات فوق الصوتية تعطيل حاجز الدم في الدماغ والتصوير بالرنين المغناطيسي المنغنيز معززة لل

Although mice are the dominant model system for studying the genetic and molecular underpinnings of neuroscience, functional neuroimaging in mice remains ...

Retrograde Labeling of Retinal Ganglion Cells in Adult Zebrafish with Fluorescent Dyes

وصفها الوراء من خلايا الشبكية العقدة في اسماك الزرد الكبار مع الأصباغ نيون

As retrograde labeling retinal ganglion cells (RGCs) can isolate RGCs somata from dying sites, it has become the gold standard for counting RGCs in RGCs ...

In vivo Imaging of Optic Nerve Fiber Integrity by Contrast-Enhanced MRI in Mice

In vivo Imaging of Optic Nerve Fiber Integrity by Contrast-Enhanced MRI in Mice

في الجسم الحي التصوير من الألياف البصرية النزاهة العصب عن طريق التصوير بالرنين المغناطيسي تعزيز التباين في الفئران

The rodent visual system encompasses retinal ganglion cells and their axons that form the optic nerve to enter thalamic and midbrain centers, and ...

Imaging Serotonergic Fibers in the Mouse Spinal Cord Using the CLARITY/CUBIC Technique

التصوير ألياف هرمون السيروتونين في الحبل الشوكي الماوس عن طريق وضوح / تقنية مكعب

Long descending fibers to the spinal cord are essential for locomotion, pain perception, and other behaviors. The fiber termination pattern in the spinal ...

Single-cell RNA-Seq of Defined Subsets of Retinal Ganglion Cells

خلية واحدة من الحمض النووي الريبي-سيك من مجموعات فرعية محددة من خلايا العقدة الشبكية

The discovery of cell type-specific markers can provide insight into cellular function and the origins of cellular heterogeneity. With a recent push for ...

Optical Coherence Tomography: Imaging Mouse Retinal Ganglion Cells In Vivo

Optical Coherence Tomography: Imaging Mouse Retinal Ganglion Cells In Vivo

التصوير المقطعي التماسك البصري: التصوير الماوس العقدة الشبكية خلايا في فيفو

Structural changes in the retina are common manifestations of ophthalmic diseases. Optical coherence tomography (OCT) enables their identification in ...

Partial Optic Nerve Transection in Rats: A Model Established with a New Operative Approach to Assess Secondary Degeneration of Retinal Ganglion Cells

ترانسيكتيون جزئي في العصب البصري في الفئران: نموذج المنشأة مع نهج منطوق جديد لتقييم ثانوي ضمور خلايا الشبكية العقدة

Previous studies have shown that the secondary degeneration of retinal ganglion cells (RGCs) occurs commonly in glaucoma. Partial optic nerve transection ...