Name: in vivo methods to assess retinal ganglion cell and optic nerve function and structure in large animals
Uploaded: 2022-02-26T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about In Vivo Methods to Assess Retinal Ganglion Cell and Optic Nerve Function and Structure in Large Animals at JoVE.com

Denne undersøgelse blev finansieret af følgende tilskud: National Key F & Program of China (2021YFA1101200); Medicinsk forskningsprojekt i Wenzhou (Y20170188), National Key R &D Program of China (2016YFC1101200); Kinas National Natural Science Foundation (81770926;81800842); Zhejiangprovins vigtigste F&U-program (2018C03G2090634); og Key R &D Program af Wenzhou Eye Hospital (YNZD1201902). Sponsoren eller finansieringsorganisationen havde ingen rolle i udformningen eller udførelsen af denne forskning.

Eksperimenter blev udført strengt i overensstemmelse med ARRIVE retningslinjer og National Institutes of Health guide for pleje og brug af laboratoriedyr, og overholde de protokoller, der er godkendt af den institutionelle Animal Care and Use Committee i Wenzhou Medical University (WMU) og Joinn Laboratory (Suzhou). De mandlige Saanen geder, i alderen fra 4 til 6 måneder med vægt på 19-23 kg, blev opstaldt i WMU dyrefaciliteten. De mandlige Rhesus makakaber, i alderen fra 5 til 6 år med vægt på 5-7 kg, blev anbrag...

<ol>
	<li>Benowitz, L., Yin, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rewiring+the+injured+CNS:+lessons+from+the+optic+nerve.">Rewiring the injured CNS: lessons from the optic nerve.</a> Experimental Neurology. 209 (2), 389-398 (2008).</li><li>Park, K. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Promoting+axon+regeneration+in+the+adult+CNS+by+modulation+of+the+PTEN/mTOR+pathway.">Promoting axon regeneration in the adult CNS by modulation of the PTEN/mTOR pathway.</a> Science. 322 (5903), 963-966 (2008).</li><li>Duan, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Subtype-specific+regeneration+of+retinal+ganglion+cells+following+axotomy:+effects+of+osteopontin+and+mTOR+signaling.">Subtype-specific regeneration of retinal ganglion cells following axotomy: effects of osteopontin and mTOR signaling.</a> Neuron. 85 (6), 1244-1256 (2015).</li><li>Bei, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Restoration+of+visual+function+by+enhancing+conduction+in+regenerated+axons.">Restoration of visual function by enhancing conduction in regenerated axons.</a> Cell. 164 (1-2), 219-232 (2016).</li><li>He, Z., Jin, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intrinsic+control+of+axon+regeneration.">Intrinsic control of axon regeneration.</a> Neuron. 90 (3), 437-451 (2016).</li><li>Yang, S. -. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Strategies+to+promote+long-distance+optic+nerve+regeneration.">Strategies to promote long-distance optic nerve regeneration.</a> Frontiers in Cellular Neuroscience. 14, 119 (2020).</li><li>Foroozan, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=New+treatments+for+nonarteritic+anterior+ischemic+optic+neuropathy.">New treatments for nonarteritic anterior ischemic optic neuropathy.</a> Neurologic Clinics. 35 (1), 1-15 (2017).</li><li>Singman, E. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Indirect+traumatic+optic+neuropathy.">Indirect traumatic optic neuropathy.</a> Military Medical Research. 3, 2 (2016).</li><li>Zhang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+evaluation+of+retinal+ganglion+cells+and+optic+nerve's+integrity+in+large+animals+by+multi-modality+analysis.">In vivo evaluation of retinal ganglion cells and optic nerve's integrity in large animals by multi-modality analysis.</a> Experimental Eye Research. 197, 108117 (2020).</li><li>Tolbert, W. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=From+Rhesus+macaque+to+human:+structural+evolutionary+pathways+for+immunoglobulin+G+subclasses.">From Rhesus macaque to human: structural evolutionary pathways for immunoglobulin G subclasses.</a> mAbs. 11 (4), 709-724 (2019).</li><li>Preuss, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Specializations of the human visual system: the monkey model meets human reality. , 231-259 (2004).</li><li>Friedli, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pronounced+species+divergence+in+corticospinal+tract+reorganization+and+functional+recovery+after+lateralized+spinal+cord+injury+favors+primates.">Pronounced species divergence in corticospinal tract reorganization and functional recovery after lateralized spinal cord injury favors primates.</a> Science Translational Medicine. 7 (302), (2015).</li><li>Porciatti, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Electrophysiological+assessment+of+retinal+ganglion+cell+function.">Electrophysiological assessment of retinal ganglion cell function.</a> Experimental Eye Research. 141, 164-170 (2015).</li><li>Smith, C. A., Vianna, J. R., Chauhan, B. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assessing+retinal+ganglion+cell+damage.">Assessing retinal ganglion cell damage.</a> Eye. 31 (2), 209-217 (2017).</li><li>Schuman, J. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optical+coherence+tomography+and+histologic+measurements+of+nerve+fiber+layer+thickness+in+normal+and+glaucomatous+monkey+eyes.">Optical coherence tomography and histologic measurements of nerve fiber layer thickness in normal and glaucomatous monkey eyes.</a> Investigative Ophthalmology &amp; Visual Science. 48 (8), 3645-3654 (2007).</li><li>You, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improving+reproducibility+of+VEP+recording+in+rats:+electrodes,+stimulus+source+and+peak+analysis.">Improving reproducibility of VEP recording in rats: electrodes, stimulus source and peak analysis.</a> Documenta Ophthalmologica. 123 (2), 109-119 (2011).</li><li>Odom, J. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=ISCEV+standard+for+clinical+visual+evoked+potentials:+(2016+update).">ISCEV standard for clinical visual evoked potentials: (2016 update).</a> Documenta Ophthalmologica. 133 (1), 1-9 (2016).</li><li>Zhang, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Silicone+oil-induced+ocular+hypertension+and+glaucomatous+neurodegeneration+in+mouse.">Silicone oil-induced ocular hypertension and glaucomatous neurodegeneration in mouse.</a> eLife. 8, 45881 (2019).</li><li>Seidman, S. H., Telford, L., Paige, G. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vertical,+horizontal,+and+torsional+eye+movement+responses+to+head+roll+in+the+squirrel+monkey.">Vertical, horizontal, and torsional eye movement responses to head roll in the squirrel monkey.</a> Experimental Brain Research. 104 (2), 218-226 (1995).</li><li>Porciatti, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+mouse+pattern+electroretinogram.">The mouse pattern electroretinogram.</a> Documenta Ophthalmologica. 115 (3), 145-153 (2007).</li></ol>

I denne undersøgelse præsenterer vi en protokol af VEP, PERG og OCT i ged og rhesus makak. Disse in vivo metoder kan anvendes i store dyremodeller af forskellige optiske neuropatier, såsom grøn stær, iskæmisk, eller traumatisk optisk neuropati og optisk neuritis9.
PVEP er mere stabil og følsom end FVEP17; Det kan dog ikke fremkaldes i gede9. Som sådan udføres FVEP i ged, og PVEP udføres i rhesus makak i ...

Synsnerven (ON), som består af axoner fra de retinale ganglionceller (RGC), overfører visuelt signal fra nethinden til hjernen. ON sygdomme, såsom grøn stær, traumatisk eller iskæmisk optisk neuropati, ofte forårsaget irreversibel ON / RGC degeneration og ødelæggende visuelle tab. Selv om der i øjeblikket er mange gennembrud inden for ON regenerering og RGC-beskyttelse i gnavermodeller1,2,3,4,5,6, forblev kliniske behandlinger for de fleste ON-sygdomme stort set de samme i løbet af det sidste halve århundrede med utilfredsstillende resultat7,8 . For at udfylde kløften mellem grundforskning og klinisk praksis er translationelle undersøgelser ved hjælp af stor dyremodel af ON-sygdomme ofte nødvendige og gavnlige på grund af deres tættere anatomiske lighed med mennesker end gnavermodeller.
Ged og rhesus makakaber er to store dyrearter, der anvendes i vores laboratorium til at modellere menneskets ON sygdom. Størrelsen af en ged øjeæble, ON, og den tilstødende struktur (orbital og næsehulen, kraniet base, osv.) svarer til et menneske baseret på kraniet CT-scanning9. Som sådan giver gedemodellen mulighed for at evaluere og forfine terapeutiske anordninger eller kirurgiske procedurer før brug hos mennesker. Rhesus macaque, som ikke-menneskelige primat (NHP), har menneskelignende unikt visuelt system, der ikke findes i andre arter10,11. Hertil kommer, patofysiologiske reaktioner på skader og behandlinger i NHP er meget lig den hos mennesker12.
In vivo-test for at vurdere ON- og RGC's struktur og funktion i længderetningen er vigtige i store dyreforsøg. Mønsterelektroretinogram (PERG) er blevet brugt til at evaluere RGC-funktionen. Flash visuelle fremkaldte potentiale (FVEP) afspejler integriteten af retino-geniculo-kortikale vej i det visuelle system. Perg kombineret med FVEP kan således afspejle FUNKTIONEN ON9,13,14 . Den retinale optiske sammenhæng tomografi (OCT) billeddannelse kan vise retinal struktur med høj tidsmæssig og rumlig opløsning, som muliggør måling af tykkelsen af retinal ganglion kompleks (GCC)9,15. Til elektrofysiologiske undersøgelser i denne undersøgelse er overvågning af vitale tegn (varmehastighed, brudshastighed, blodtryk) og niveauet af iltmætning (SpO2) før test afgørende, da disse parametre har potente virkninger på okulær blodgennemstrømning og dermed det visuelle systems funktion. Men vi overvågede ikke de vitale tegn, når de udfører OCT retinal billeddannelse af hensyn til enkelhed. Ifølge vores tidligere undersøgelse9, GCC tykkelse målt ved OCT retinal billeddannelse er ganske stabil, med inter-session variationskoefficient tæt på 3%. Disse in vivo-test i ged og rhesus makak er blevet beskrevet i detaljer i vores tidligere undersøgelse9. Her præsenterer vi disse metoder for at bidrage til at øge eksperimentel gennemsigtighed og reproducerbarhed.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>47.6 x 26.8 cm monitors</td>
			<td>DELL Inc.</td>
			<td>E2216HV</td>
			<td>The visual stimuli of contrast-reversal black-white checkerboards were displayed on screens</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>6.0 mm tracheal tube</td>
			<td>Henan Tuoren Medical Device Co., Ltd</td>
			<td>PVC 6.0</td>
			<td>ensure the airway</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>alligator clip</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>atropine</td>
			<td>Guangdong Jieyang Longyang Animal pharmaceutical Co.,Ltd.</td>
			<td></td>
			<td>reduce bronchial secretion and protect heart from vagal nerve activation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Carbomer Eye Gel</td>
			<td>Fabrik GmbH Subsidiary of Bausch &#38; Lomb</td>
			<td></td>
			<td>moisten the cornea and stabilize the recording electrodes</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ERG-Jet recording electrodes</td>
			<td>Roland Consult Stasche&#38;Finger GmbH</td>
			<td>2300 La Chaux-De-Fonds</td>
			<td>ERG recording</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>eye speculum</td>
			<td>Shanghai Jinzhong Medical Device Co., Ltd</td>
			<td>ZYD020</td>
			<td>open palpebral fissure</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heidelberg Spectralis OCT system</td>
			<td>Heidelberg Engineering</td>
			<td></td>
			<td>OCT system</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Imaging</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>(https://www.heidelbergengineering.com/media/e-learning/Totara-US/files/pdf-tutorials/2238-003_Spectralis-Training-Guide.pdf)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>isoflurane</td>
			<td>RWD Life Science Co., Ltd</td>
			<td>R510-22</td>
			<td>isoflurane anesthesia</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>male Saanen goats</td>
			<td>Caimu Livestock Company, country (Hangzhou, China)</td>
			<td></td>
			<td>The male Saanen goats, aged from 4 to 6 months with weight of 19&#8211;23 kg</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>needle electrode</td>
			<td>Roland Consult Stasche&#38;Finger GmbH</td>
			<td>U51-426-G-D</td>
			<td>use for FVEP ground electrode and PERG reference electrodes</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>periphery venous catheter intravenously</td>
			<td>BD shanghai Medical Device Co., Ltd</td>
			<td>383019</td>
			<td>intravenous access for atropine and propofol</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>propofol</td>
			<td>Xian Lipont Enterprise Union Management Co.,Ltd.</td>
			<td></td>
			<td>induce Isoflurane anesthesia in goat</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tropicamide Phenylephrine Eye Drops</td>
			<td>SANTEN OY, Japan</td>
			<td></td>
			<td>5% tropicamide and 5% phenylephrine hydrochloride</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>visual electrophysiology device</td>
			<td>Gotec Co., Ltd</td>
			<td>GT-2008V-III</td>
			<td>use for FVEP &#38; PERG</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>xylazine</td>
			<td>Huamu Animal Health Products Co., Ltd.</td>
			<td></td>
			<td>xylazine anesthesia: intramuscular injection of xylazine 3mg/kg</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>zoletil50</td>
			<td>Virbac</td>
			<td></td>
			<td>induce Isoflurane anesthesia in monkey</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

in vivo methods to assess retinal ganglion cell and optic nerve function and structure in large animals

Synsnerven indsamler axoner signaler fra retinal ganglion celler og sender visuelt signal til hjernen. Store dyremodeller af synsnerveskader er afgørende for at oversætte nye terapeutiske strategier fra gnavermodeller til klinisk anvendelse på grund af deres tættere ligheder med mennesker i størrelse og anatomi. Her beskriver vi nogle in vivo metoder til at evaluere funktionen og strukturen af retinale ganglion celler (RGCs) og synsnerven (ON) i store dyr, herunder visuelle fremkaldte potentiale (VEP), mønster elektroretinogram (PERG) og optisk sammenhæng tomografi (OKT). Både ged og ikke-menneskelige primat blev ansat i denne undersøgelse. Ved at præsentere disse in vivo metoder trin for trin, håber vi at øge eksperimentel reproducerbarhed blandt forskellige laboratorier og lette brugen af store dyremodeller af optiske neuropatier.

Figur 1A viser repræsentative resultater af FVEP hos geder. Selvom bølgeformerne i samme flashintensitet har relativ lighed, anbefaler vi stadig at undersøge bølgeformene to gange. Elektromagnetiske bølger genereret af elektroniske enheder vil forstyrre de indsamlede elektriske signaler, hvilket resulterer i høj baseline støj og dårlig repeterbarhed af bølgeformen. Derfor anbefales det at sikre, at der ikke er redundante elektroniske enheder tilsluttet det omgivende miljø under ele...

Watch this Scientific Journal Video about In Vivo Methods to Assess Retinal Ganglion Cell and Optic Nerve Function and Structure in Large Animals at JoVE.com

In Vivo Methods to Assess Retinal Ganglion Cell and Optic Nerve Function and Structure in Large Animals

Her demostrate flere in vivo tests (flash visuelle fremkaldte potentiale, mønster elektroretinogram og optisk sammenhæng tomografi) i ged og rhesus makak at forstå strukturen og funktionen af synsnerven og dens neuroner.

In vivo Metoder til vurdering retinal ganglion celle og optisk nerve funktion og struktur i store dyr

The optic nerve collects axons signals from the retinal ganglion cells and transmits visual signal to the brain. Large animal models of optic nerve injury ...

Hej, alle sammen. Dette er Yikui Zhang fra Wenzhou Eye Hospital. Den øvre nerve mangler Exxons fra orexin ganglion celler, og derefter overføre det visuelle signal til hjernen.Større model af øvre nerve skade er afgørende for at oversætte den nye behandling fra robot model til lymfe ansøgning. Her beskriver vi nogle in vivo metoder til at evaluere strukturen og funktionen af orexin ganglion celler i den øvre nerve i store dyr. Ved at præsentere denne metode trin for trin håber vi at øge eksperimentelle reproduktive handicap og lette brugen af større modeller af optisk neurose.Barber den med elektronisk barbermaskine. Og prep det med 70% alkohol tre gange, at rense huden og udsætte den subkutane vene. Indsæt en perifer venøs hjul intravenøst.Dryp derefter atropin og propofol. Intuberere geden med en seks millimeter luftrør og forbinde til en kunstig åndedrætsværn. Anæstesi blev opretholdt med 3,5% isoflurane i ilt ved en konstant to liter styret strømningshastighed.Placer temperatursensoren under gedens tunge. Klip iltmætningsspalte til den proksimale ende af gedeøret. Bind blodtryksmanchetten til bunden af låret.Clamp EKG klamrer sig på lemmerne i orden. Derefter kan vi overvåge gedens vitale indikatorer. Barber håret og desinficere huden med betadin og 70% alkohol tre gange i midten af frontal knoglen.Åbn sterilisatorposen med en saks og neglene. Lav hud snit til at udsætte kraniet med en saks. Stålskruer til indopereret i midten af frontalbenet.Barber håret og desinficere huden med betadin og 70% alkohol tre gange i et midtpunkt på to ører i occipital knogle. Lav hud snit. Stålskruer til implanteret i midten af to ører i occipital knogle.Jorden nål elektrode er indsat subkutant under frontal kraniet skrue. Den aktive elektrode og referenceelektroden er forbundet med henholdsvis frontale og occipitale skruer med alligatorclips for at reducere elektrode impotensen. Lappe det ene øje.Påfør topisk anæstesi øjendråber på den okulære overflade. Elever på begge sider er udvidet af mydriasis øjendråber. Placer gedehovedet i en gasfyldt stimulator rettet ambulant lys.Placer det sorte tæppe over stimulatoren og gedehovedet i fem minutter tilpasning. Øjenlåg speculum bruges til fuldt ud at udsætte sin elev. Kontroller elektrodevævskontaktens impotens.Sørg for, at impotens er under 10 kilometer for hver for at undgå elektromagnetisk interferens fra andre elektriske enheder i samme rum. Kontroller baseline støj uden lysstimulering. Start FVEP-optagelsen.Bemærk, at FVEP-optagelse ved hver lysintensitet udføres to gange. Bemærk, at fugt hornhinden med kunstig tåre, hvis den ser tør ud. Gentag om trin til det kontralaterale øje.Start FVEP-optagelse ved forskellige lysintensiteter i træk. For hver optagelse er 64 spor i gennemsnit for at give en bølgeform. Den første positive og aktive top i FVEP-bølgeformen blev udpeget som P1 og N1. Den steriliserede jordelektrode er placeret i øreflippen.De steriliserede aktive og referenceelektroder indsættes subkutant langs henholdsvis midterlinjen og frontal- og occipital knoglen. Øjenlåg speculum bruges til fuldt ud at udsætte sin elev. Lappe det ene øje.Optag mønster VEP svar af det andet øje på forskellige rumlige frekvenser fortløbende. Opret forbindelse til jorden elektrode med en alligator klip. To steriliserede nålereferenceelektroder placeres under huden en centimeter bag den laterale canthus på begge sider.Øjenlåg speculum bruges til fuldt ud at udsætte sin elev. To desinficerede ERG-optagelseselektroder er centreret både hornhinden efter aktuel påføring af kunstig tåre. To stimulatorer er placeret foran hvert øje med en visningsafstand på 50 centimeter.Sørg for, at impotens er under 10 kilometer. Spor baseline støj uden lysstimulering. Sigt ambulant lys.Start mønster ERG optagelse fra begge øjne samtidigt ved forskellige rumlige frekvenser fortløbende. Endelig vender du tilbage på skærmen for at optage mønster ERG uden visuelle stimulatorer og et aktivt kontrolelement. Den bandpass filter er indstillet til at variere fra en til 75 Hertz for tre CPD mønster ERG.Den bandpass filter er fra en til 50 Hertz at udjævne formen uden at påvirke dens amplitud. De første positive og aktive toppe i bølgeformen er udpeget som P1 og N1. Mønsteret ERG amplitud målt fra N1 til P1.To reducere elektrode impotens, en steriliseret nål reference er placeret under frontal hud. Og en steriliseret nål reference elektrode er placeret under huden en centimeter bag den laterale canthus på den ene side.En desinficeret ERG-optagelseselektrode placeres på hornhinden på en aktuel anvendelse af kunstig tåre. Lappe det ene øje. En skærm er placeret i visningsafstand på 50 centimeter.Øjenlåg speculum bruges til fuldt ud at udsætte sin elev. Derefter placeres geden på hagen resten. Juster geden med kameraet for at sende hans synsnervehoved i det konfokale scanningslaser oftalmoscopybillede ved at ændre hovedpositionen.Klik på startknappen for at angive registreringsafslutningsfasen. Vent på, at maskinen er færdig med at indlæse. Tryk på den gule startknap for at starte den formelle billedbehandling.Juster joysticket for at belyse det infrarøde billede jævnt for at forbedre billedkvaliteten. Skub kameraet fremad, indtil det opretstående retinale OLT-billede vises på øverste højre skærm. Ændre joysticket at have det jævnt danse i en vandret retinal OKT billede.Tryk på knappen på joysticket for at fange dit billede automatisk. Hold dette joystick nede for at bevare billedkvaliteten på skærmen med levende billeder, indtil billedudførelsen er fuldført. Tryk derefter på hent.Vælg et førstefoto af høj kvalitet. Højreklik, og vælg angiv reference. Tryk på opfølgningsknappen for at give programmet mulighed for automatisk at matche den aktuelle scanning med den oprindelige scanning.Når matchet, trykkede på knappen på joysticket for at aktivere automatisk realtidssporing. Klik på målingsknappen for at angive måleplatformen. Vælg viskelæderet et værktøj og tør RFL-linjen, som automatisk mærkes af maskinen.Vælg stregtegningsværktøjet for manuelt at skitsere grænsen mellem IPL og INL. Mellem de røde og blå linjer er GCC-komplekset. Retina ændret billeddannelse i rhesus makak udføres ved hjælp af det samme udstyr og procedure som dem, der anvendes i ged.Figur A viser repræsentativ FVEP i ged. Figur B viser repræsentativ mønster ERG bølgeform i ged. Figur C viser repræsentativt mønster FVEP i rhesus makak.Og figur D viser repræsentativ mønster ERG bølgeform i rhesus makak. Figur to viser repræsentative retinale OLT billeder omkring synsnervehoved og tykkelsen af GCC kompleks i forskellige perifere regioner i ged og rhesus makak. Stor dyremodel spiller en vigtig rolle i translationel forskning.I mange tilfælde blev lovende terapeutiske virkninger i små dyremodeller ikke oversat til menneskelige patienter. I denne undersøgelse præsenterede vi videoprotokol af FVEP, PERG og OCT i ged og rhesus makak. Denne in vivo metode kan anvendes i større model af forskellige optiske neurose, såsom grøn stær iskæmisk eller traumatisk optisk neuropati og optisk neuritis.

Research

JoVE Journal

Neuroscience

In Vivo Methods to Assess Retinal Ganglion Cell and Optic Nerve Function and Structure in Large Animals

Methods for Experimental Manipulations after Optic Nerve Transection in the Mammalian CNS

Retinal ganglion cells (RGCs) are CNS neurons that output visual information from the retina to the brain, via the optic nerve. The optic nerve can be ...

Transfection of Mouse Retinal Ganglion Cells by in vivo Electroporation

Transfection of Mouse Retinal Ganglion Cells by in vivo Electroporation

The targeting and refinement of RGC projections to the midbrain is a popular and powerful model system for studying how precise patterns of neural ...

An Optic Nerve Crush Injury Murine Model to Study Retinal Ganglion Cell Survival

Injury to the optic nerve can lead to axonal degeneration, followed by a gradual death of retinal ganglion cells (RGCs), which results in irreversible ...

Functional Neuroimaging Using Ultrasonic Blood-brain Barrier Disruption and Manganese-enhanced MRI

Funktionel Neuroimaging Med Ultrasonic blod-hjerne barrieren forstyrrelser og mangan-forstærket MRI

Although mice are the dominant model system for studying the genetic and molecular underpinnings of neuroscience, functional neuroimaging in mice remains ...

Retrograde Labeling of Retinal Ganglion Cells in Adult Zebrafish with Fluorescent Dyes

Retrograd Mærkning af retina-ganglieceller i Voksen Zebrafisk med fluorescerende farvestoffer

As retrograde labeling retinal ganglion cells (RGCs) can isolate RGCs somata from dying sites, it has become the gold standard for counting RGCs in RGCs ...

In vivo Imaging of Optic Nerve Fiber Integrity by Contrast-Enhanced MRI in Mice

In vivo Imaging of Optic Nerve Fiber Integrity by Contrast-Enhanced MRI in Mice

In vivo billeddannelse af Optic Nerve Fiber Integritet ved kontrast-forstærket MRI i mus

The rodent visual system encompasses retinal ganglion cells and their axons that form the optic nerve to enter thalamic and midbrain centers, and ...

Imaging Serotonergic Fibers in the Mouse Spinal Cord Using the CLARITY/CUBIC Technique

Imaging Serotonerge Fibers i Mouse Spinal Cord Brug af CLARITY / CUBIC Teknik

Long descending fibers to the spinal cord are essential for locomotion, pain perception, and other behaviors. The fiber termination pattern in the spinal ...

Single-cell RNA-Seq of Defined Subsets of Retinal Ganglion Cells

Single-cell RNA-Seq af definerede subsæt af retinale Ganglion-celler

The discovery of cell type-specific markers can provide insight into cellular function and the origins of cellular heterogeneity. With a recent push for ...

Optical Coherence Tomography: Imaging Mouse Retinal Ganglion Cells In Vivo

Optical Coherence Tomography: Imaging Mouse Retinal Ganglion Cells In Vivo

Optisk kohærens tomografi: Imaging mus Retinal Ganglion celler In Vivo

Structural changes in the retina are common manifestations of ophthalmic diseases. Optical coherence tomography (OCT) enables their identification in ...

Partial Optic Nerve Transection in Rats: A Model Established with a New Operative Approach to Assess Secondary Degeneration of Retinal Ganglion Cells

Delvis synsnerven Transection i rotter: en standardformular, som udarbejdes med en ny operativ tilgang til at vurdere sekundære Degeneration af Retinal Ganglion celler

Previous studies have shown that the secondary degeneration of retinal ganglion cells (RGCs) occurs commonly in glaucoma. Partial optic nerve transection ...