Name: in vivo methods to assess retinal ganglion cell and optic nerve function and structure in large animals
Uploaded: 2022-02-26T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about In Vivo Methods to Assess Retinal Ganglion Cell and Optic Nerve Function and Structure in Large Animals at JoVE.com

מחקר זה מומן על ידי המענקים הבאים: תוכנית המפתח הלאומית של סין (2021YFA1101200); פרויקט המחקר הרפואי של וונג'ואו (Y20170188), תוכנית המחקר והמחקר הלאומית של סין (2016YFC1101200); הקרן הלאומית למדעי הטבע של סין (81770926;81800842); תוכנית מפתח למו"פ של מחוז ג'ה-ג'יאנג (2018C03G2090634); ותוכנית מפתח מו"פ של בית החולים עין וונג'ואו (YNZD1201902). לארגון החסות או למימון לא היה כל תפקיד בעיצוב או בהתנהלות של מחקר זה.

הניסויים נערכו אך ורק בהתאם להנחיות ARRIVE ומדריך המכונים הלאומיים לבריאות לטיפול ושימוש בבעלי חיים במעבדה, ודבקים בפרוטוקולים שאושרו על ידי הוועדה המוסדית לטיפול בבעלי חיים ושימוש באוניברסיטה הרפואית וונג'ואו (WMU) ובמעבדה להצטרפות (סוג'ואו). זכרי עזי סאנן, בגילאי 4 עד 6 חודשים במשקל של 19-23 ק"ג,...

<ol>
	<li>Benowitz, L., Yin, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rewiring+the+injured+CNS:+lessons+from+the+optic+nerve.">Rewiring the injured CNS: lessons from the optic nerve.</a> Experimental Neurology. 209 (2), 389-398 (2008).</li><li>Park, K. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Promoting+axon+regeneration+in+the+adult+CNS+by+modulation+of+the+PTEN/mTOR+pathway.">Promoting axon regeneration in the adult CNS by modulation of the PTEN/mTOR pathway.</a> Science. 322 (5903), 963-966 (2008).</li><li>Duan, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Subtype-specific+regeneration+of+retinal+ganglion+cells+following+axotomy:+effects+of+osteopontin+and+mTOR+signaling.">Subtype-specific regeneration of retinal ganglion cells following axotomy: effects of osteopontin and mTOR signaling.</a> Neuron. 85 (6), 1244-1256 (2015).</li><li>Bei, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Restoration+of+visual+function+by+enhancing+conduction+in+regenerated+axons.">Restoration of visual function by enhancing conduction in regenerated axons.</a> Cell. 164 (1-2), 219-232 (2016).</li><li>He, Z., Jin, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intrinsic+control+of+axon+regeneration.">Intrinsic control of axon regeneration.</a> Neuron. 90 (3), 437-451 (2016).</li><li>Yang, S. -. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Strategies+to+promote+long-distance+optic+nerve+regeneration.">Strategies to promote long-distance optic nerve regeneration.</a> Frontiers in Cellular Neuroscience. 14, 119 (2020).</li><li>Foroozan, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=New+treatments+for+nonarteritic+anterior+ischemic+optic+neuropathy.">New treatments for nonarteritic anterior ischemic optic neuropathy.</a> Neurologic Clinics. 35 (1), 1-15 (2017).</li><li>Singman, E. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Indirect+traumatic+optic+neuropathy.">Indirect traumatic optic neuropathy.</a> Military Medical Research. 3, 2 (2016).</li><li>Zhang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+evaluation+of+retinal+ganglion+cells+and+optic+nerve's+integrity+in+large+animals+by+multi-modality+analysis.">In vivo evaluation of retinal ganglion cells and optic nerve's integrity in large animals by multi-modality analysis.</a> Experimental Eye Research. 197, 108117 (2020).</li><li>Tolbert, W. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=From+Rhesus+macaque+to+human:+structural+evolutionary+pathways+for+immunoglobulin+G+subclasses.">From Rhesus macaque to human: structural evolutionary pathways for immunoglobulin G subclasses.</a> mAbs. 11 (4), 709-724 (2019).</li><li>Preuss, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Specializations of the human visual system: the monkey model meets human reality. , 231-259 (2004).</li><li>Friedli, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pronounced+species+divergence+in+corticospinal+tract+reorganization+and+functional+recovery+after+lateralized+spinal+cord+injury+favors+primates.">Pronounced species divergence in corticospinal tract reorganization and functional recovery after lateralized spinal cord injury favors primates.</a> Science Translational Medicine. 7 (302), (2015).</li><li>Porciatti, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Electrophysiological+assessment+of+retinal+ganglion+cell+function.">Electrophysiological assessment of retinal ganglion cell function.</a> Experimental Eye Research. 141, 164-170 (2015).</li><li>Smith, C. A., Vianna, J. R., Chauhan, B. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assessing+retinal+ganglion+cell+damage.">Assessing retinal ganglion cell damage.</a> Eye. 31 (2), 209-217 (2017).</li><li>Schuman, J. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optical+coherence+tomography+and+histologic+measurements+of+nerve+fiber+layer+thickness+in+normal+and+glaucomatous+monkey+eyes.">Optical coherence tomography and histologic measurements of nerve fiber layer thickness in normal and glaucomatous monkey eyes.</a> Investigative Ophthalmology &amp; Visual Science. 48 (8), 3645-3654 (2007).</li><li>You, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improving+reproducibility+of+VEP+recording+in+rats:+electrodes,+stimulus+source+and+peak+analysis.">Improving reproducibility of VEP recording in rats: electrodes, stimulus source and peak analysis.</a> Documenta Ophthalmologica. 123 (2), 109-119 (2011).</li><li>Odom, J. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=ISCEV+standard+for+clinical+visual+evoked+potentials:+(2016+update).">ISCEV standard for clinical visual evoked potentials: (2016 update).</a> Documenta Ophthalmologica. 133 (1), 1-9 (2016).</li><li>Zhang, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Silicone+oil-induced+ocular+hypertension+and+glaucomatous+neurodegeneration+in+mouse.">Silicone oil-induced ocular hypertension and glaucomatous neurodegeneration in mouse.</a> eLife. 8, 45881 (2019).</li><li>Seidman, S. H., Telford, L., Paige, G. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vertical,+horizontal,+and+torsional+eye+movement+responses+to+head+roll+in+the+squirrel+monkey.">Vertical, horizontal, and torsional eye movement responses to head roll in the squirrel monkey.</a> Experimental Brain Research. 104 (2), 218-226 (1995).</li><li>Porciatti, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+mouse+pattern+electroretinogram.">The mouse pattern electroretinogram.</a> Documenta Ophthalmologica. 115 (3), 145-153 (2007).</li></ol>

במחקר זה, אנו מציגים פרוטוקול של VEP, PERG, ו- OCT במקוק עז ורזוס. שיטות ויואו אלה ניתן ליישם במודלים בעלי חיים גדולים של נוירופתיות אופטיות שונות, כגון גלאוקומה, איסכמי, או נוירופתיה אופטית טראומטית ודלקת עצבים אופטית9.
PVEP יציב ורגיש יותר מאשר FVEP17; עם...

עצב הראייה (ON), המורכב אקסונים מתאי הגנגליון ברשתית (RGC), משדר אות חזותי מהרשתית למוח. מחלות ON, כגון גלאוקומה, נוירופתיה אופטית טראומטית או איסכמית, גרמו לעתים קרובות ניוון ON/ RGC בלתי הפיך ואובדן חזותי הרסני. למרות שיש כיום פריצות דרך רבות בהתחדשות ON והגנה על RGC במודלים מכרסמים1,2,3,4,5,6, טיפולים קליניים עבור רוב מחלות ON נותרו זהים במהותם בחצי המאה האחרונה עם תוצאה לא מספקת7,8 . כדי למלא את הפער בין מחקר בסיסי לפרקטיקה קלינית, מחקרים תרגומיים המשתמשים במודל בעלי חיים גדול של מחלות ON נחוצים ומועילים לעתים קרובות בגלל הדמיון האנטומי הקרוב יותר שלהם לבני אדם מאשר מודלים מכרסמים.
מקוק עזים ורזוס הם שני מינים גדולים של בעלי חיים המשמשים במעבדה שלנו לדגם מחלת ON של האדם. גודל גלגל העין של עז, ON, והמבנה הסמוך (חלל מסלולית ואף, בסיס הגולגולת וכו ') דומה לזה של אדם המבוסס על סריקת CT גולגולת9. ככזה, מודל עז מספק הזדמנות להעריך ולשכלל מכשירים טיפוליים או הליכים כירורגיים לפני השימוש בבני אדם. מקוק רזוס, כמו פרימט לא אנושי (NHP), יש מערכת חזותית ייחודית דמוית אדם שאינו קיים במינים אחרים10,11. בנוסף, תגובות פתולוגיות לפציעות וטיפולים ב- NHP דומה בהרבה לזה אצל בני אדם12.
בבדיקות vivo להערכת המבנה והתפקוד של ON ו- RGC חשובים במחקרים בבעלי חיים גדולים. אלקטרורטינוגרמה דפוס (PERG) שימש להערכת הפונקציה RGC. פוטנציאל עורר חזותי פלאש (FVEP) משקף את השלמות של מסלול רטינו-geniculo-קליפת המוח במערכת הראייה. לכן, PERG בשילוב עם FVEP יכול לשקף את הפונקציה ON9,13,14 . הדמיית טומוגרפיה של קוהרנטיות רשתית אופטית (OCT) יכולה להראות את מבנה הרשתית ברזולוציה טמפורלית ומרחבית גבוהה, המאפשרת מדידה של עובי קומפלקס הגנגליון ברשתית (GCC)9,15. לבדיקות אלקטרופיזיולוגיות במחקר זה, ניטור סימנים חיוניים (קצב חום, קצב הפרה, לחץ דם) ורמת רוויית החמצן (SpO2) לפני הבדיקה הם קריטיים שכן לפרמטרים אלה יש השפעות חזקות על זרימת הדם העין ולכן על תפקוד מערכת הראייה. עם זאת, לא עקבנו אחר הסימנים החיוניים בעת ביצוע הדמיית רשתית OCT למען הפשטות. על פי המחקר הקודם שלנו9, עובי GCC נמדד על ידי הדמיית רשתית OCT הוא יציב למדי, עם מקדם בין מפגשים של וריאציה קרוב ל 3%. אלה במבחני vivo במקוק עז ורזוס תוארו בפירוט במחקר הקודם שלנו9. כאן אנו מציגים שיטות אלה כדי לסייע בהגברת השקיפות והשחזור הניסיוניים.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>47.6 x 26.8 cm monitors</td>
			<td>DELL Inc.</td>
			<td>E2216HV</td>
			<td>The visual stimuli of contrast-reversal black-white checkerboards were displayed on screens</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>6.0 mm tracheal tube</td>
			<td>Henan Tuoren Medical Device Co., Ltd</td>
			<td>PVC 6.0</td>
			<td>ensure the airway</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>alligator clip</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>atropine</td>
			<td>Guangdong Jieyang Longyang Animal pharmaceutical Co.,Ltd.</td>
			<td></td>
			<td>reduce bronchial secretion and protect heart from vagal nerve activation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Carbomer Eye Gel</td>
			<td>Fabrik GmbH Subsidiary of Bausch &#38; Lomb</td>
			<td></td>
			<td>moisten the cornea and stabilize the recording electrodes</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ERG-Jet recording electrodes</td>
			<td>Roland Consult Stasche&#38;Finger GmbH</td>
			<td>2300 La Chaux-De-Fonds</td>
			<td>ERG recording</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>eye speculum</td>
			<td>Shanghai Jinzhong Medical Device Co., Ltd</td>
			<td>ZYD020</td>
			<td>open palpebral fissure</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heidelberg Spectralis OCT system</td>
			<td>Heidelberg Engineering</td>
			<td></td>
			<td>OCT system</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Imaging</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>(https://www.heidelbergengineering.com/media/e-learning/Totara-US/files/pdf-tutorials/2238-003_Spectralis-Training-Guide.pdf)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>isoflurane</td>
			<td>RWD Life Science Co., Ltd</td>
			<td>R510-22</td>
			<td>isoflurane anesthesia</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>male Saanen goats</td>
			<td>Caimu Livestock Company, country (Hangzhou, China)</td>
			<td></td>
			<td>The male Saanen goats, aged from 4 to 6 months with weight of 19&#8211;23 kg</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>needle electrode</td>
			<td>Roland Consult Stasche&#38;Finger GmbH</td>
			<td>U51-426-G-D</td>
			<td>use for FVEP ground electrode and PERG reference electrodes</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>periphery venous catheter intravenously</td>
			<td>BD shanghai Medical Device Co., Ltd</td>
			<td>383019</td>
			<td>intravenous access for atropine and propofol</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>propofol</td>
			<td>Xian Lipont Enterprise Union Management Co.,Ltd.</td>
			<td></td>
			<td>induce Isoflurane anesthesia in goat</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tropicamide Phenylephrine Eye Drops</td>
			<td>SANTEN OY, Japan</td>
			<td></td>
			<td>5% tropicamide and 5% phenylephrine hydrochloride</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>visual electrophysiology device</td>
			<td>Gotec Co., Ltd</td>
			<td>GT-2008V-III</td>
			<td>use for FVEP &#38; PERG</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>xylazine</td>
			<td>Huamu Animal Health Products Co., Ltd.</td>
			<td></td>
			<td>xylazine anesthesia: intramuscular injection of xylazine 3mg/kg</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>zoletil50</td>
			<td>Virbac</td>
			<td></td>
			<td>induce Isoflurane anesthesia in monkey</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

in vivo methods to assess retinal ganglion cell and optic nerve function and structure in large animals

עצב הראייה אוסף אותות אקסונים מתאי הגנגליון ברשתית ומשדר אות חזותי למוח. מודלים גדולים של בעלי חיים של פגיעה בעצב הראייה חיוניים לתרגום אסטרטגיות טיפוליות חדשניות ממודלים מכרסמים ליישום קליני בשל הדמיון הקרוב יותר שלהם לבני אדם בגודל ובאנטומיה. כאן אנו מתארים כמה שיטות vivo כדי להעריך את הפונקציה והמבנה של תאי גנגליון הרשתית (RGCs) ועצב הראייה (ON) בבעלי חיים גדולים, כולל פוטנציאל מעורר חזותי (VEP), אלקטרורטינוגרמה דפוס (PERG) וטומוגרפיה קוהרנטית אופטית (OCT). במחקר זה הועסקו גם עיזים וגם פרימטים לא אנושיים. על ידי הצגת שיטות ויוו אלה צעד אחר צעד, אנו מקווים להגדיל את הרבייה הניסיונית בין מעבדות שונות ולהקל על השימוש במודלים בעלי חיים גדולים של נוירופתיות אופטיות.

איור 1A מציג תוצאות מייצגות של FVEP בעז. למרות צורות הגל באותה עוצמת הבזק יש דמיון יחסי, אנו עדיין ממליצים לבחון את צורות הגל פעמיים. גלים אלקטרומגנטיים הנוצרים על ידי מכשירים אלקטרוניים יפריעו לאותות החשמליים שנאספו, וכתוצאה מכך רעש בסיסי גבוה ויכולת חזרה לקויה של צורת הגל. ל...

Watch this Scientific Journal Video about In Vivo Methods to Assess Retinal Ganglion Cell and Optic Nerve Function and Structure in Large Animals at JoVE.com

In Vivo Methods to Assess Retinal Ganglion Cell and Optic Nerve Function and Structure in Large Animals

כאן אנו מורידים בדרגה מספר בדיקות ויואו (פוטנציאל מעורר חזותי פלאש, אלקטרורטינוגרמה דפוס וטומוגרפיה קוהרנטיות אופטית) במקוק עזים ורזוס כדי להבין את המבנה והתפקוד של עצב הראייה והנוירונים שלו.

ב-Vivo שיטות להערכת תפקוד ומבנה תאי גנגליון רשתית ועצבי הראייה בבעלי חיים גדולים

The optic nerve collects axons signals from the retinal ganglion cells and transmits visual signal to the brain. Large animal models of optic nerve injury ...

שלום לכולם. זה ייקוי ג'אנג מבית החולים וונג'ואו איי. העצב העליון חסר אקסונים מתאי גנגליון orexin, ולאחר מכן להעביר את האות החזותי למוח.מודל גדול יותר של פגיעה בעצבים העליונים חיוניים כדי לתרגם את הטיפול החדש ממודל רובוט ליישום לימפה. כאן, אנו מתארים כמה שיטות vivo כדי להעריך את המבנה והתפקוד של תאי גנגליון orexin בעצב העליון בבעלי חיים גדולים. על ידי הצגת שיטה זו צעד אחר צעד, אנו מקווים להגדיל את לקויות הרבייה הניסיוניות ולהקל על השימוש במודלים גדולים יותר של נוירוזה אופטית.תגלח עם סכין גילוח אלקטרוני. וגם, להכין אותו עם 70% אלכוהול שלוש פעמים, כדי לנקות את העור ולחשוף את הווריד התת עורי. הכנס גלגלית ורידית היקפית תוך ורידי.ואז לטפטף אטרופין ופרופופול. לצנרר את העז עם צינור קנה הנשימה שישה מילימטר ולהתחבר למכונת הנשמה מלאכותית. הרדמה נשמרה עם 3.5% איזופלוראן בחמצן בקצב זרימה קבוע של שני ליטרים מנוהל.מניחים את חיישן הטמפרטורה מתחת ללשון העז. חותכים את דבק רוויית החמצן לקצה הפרוקסימלי של אוזן העז. לקשור את שרוול לחץ הדם לבסיס הירך.מהדק א.ק.ג. נצמד על הגפיים לפי הסדר. לאחר מכן, אנו יכולים לפקח על האינדיקטורים החיוניים של העז. לגלח את השיער ולחטא את העור עם betadine ו 70% אלכוהול שלוש פעמים במרכז העצם הקדמית.פתחו את שקית החיטוי המכילה מספריים ומסמרים. לעשות חותמות בעור כדי לחשוף את הגולגולת עם מספריים. ברגי פלדה להשתלה במרכז העצם הקדמית.לגלח את השיער ולחטא את העור עם betadine ו 70% אלכוהול שלוש פעמים בנקודת אמצע של שתי אוזניים בעצם העורף. לעשות חותמות בעור. ברגי פלדה להשתלה בנקודת האמצע של שתי אוזניים בעצם העורפית.המחט הקרקעית מתחשמלת מתחת לבורג הגולגולת הקדמי. האלקטרודה הפעילה ואלקטרודה הייחוס מחוברות לברגים חזיתיים ומערביים בהתאמה עם קליפים תנין כדי להפחית את אימפוטנציה אלקטרודה. תיקון עין אחת.יש למרוח טיפות עיניים הרדמה אקטואלי על פני השטח העין. האישונים משני הצדדים מתרחבים על ידי טיפות עיניים רידריאזיס. מניחים את ראש העז במעורר מלא גז מכוון לאור אמבולנטי.מניחים את השמיכה השחורה מעל הממריץ ואת ראש העז למשך חמש דקות הסתגלות. ספקולום עפעפיים משמש כדי לחשוף באופן מלא את האישון שלה. בדוק את אימפוטנציית המגע של רקמת האלקטרודה.ודא כי אימפוטנציה היא מתחת 10 ק"מ עבור כל אחד כדי למנוע הפרעות אלקטרומגנטיות ממכשירים חשמליים אחרים באותו החדר. בדוק את הרעש הבסיסי ללא גירוי אור. התחל הקלטת FVEP.שים לב שהקלטת FVEP בכל עוצמת אור מתבצעת פעמיים. שימו לב כי לחות הקרנית עם קרע מלאכותי אם היא נראית יבשה. חזור על צעדים לעין הנגדית.התחל הקלטת FVEP בעוצמות אור שונות ברציפות. עבור כל הקלטה, 64 עקבות הם בממוצע להניב צורת גל אחד. השיא החיובי והפעיל הראשון בצורת גל FVEP הוגדר כ- P1 ו- N1. אלקטרודה הקרקע מעוקר ממוקם בתנוך האוזן.האלקטרודות הפעילות והמתייחסות המעוקרות מוכנסות באופן תת עורי לאורך קו האמצע ועצם קדמית וערופית בהתאמה. ספקולום עפעפיים משמש כדי לחשוף באופן מלא את האישון שלה. תיקון עין אחת.דפוס רישום תגובות VEP של העין השנייה בתדרים מרחביים שונים ברציפות. התחבר לאלקטרודה הקרקעית עם קליפ תנין. שתי אלקטרודות התייחסות מחט מעוקרות ממוקמות מתחת לעור סנטימטר אחד מאחורי הקנתוס לרוחב משני הצדדים.ספקולום עפעפיים משמש כדי לחשוף באופן מלא את האישון שלה. שתי אלקטרודות הקלטה ERG מחוטאות מרוכזות הן בקרנית לאחר יישום אקטואלי של קרע מלאכותי. שני ממריצים ממוקמים מול כל עין עם מרחק צפייה של 50 ס"מ.ודא כי אימפוטנציה היא מתחת 10 ק"מ. עקוב אחר רעש הבסיס ללא גירוי אור. כוון את האור האמבולנטי.התחל דפוס ERG הקלטה משתי העיניים בו זמנית בתדרים מרחביים שונים ברציפות. לבסוף, החזרה של המסך כדי להקליט תבנית ERG ללא ממריצים חזותיים ושליטה פעילה. מסנן bandpass מוגדר לנוע בין אחד ל 75 הרץ עבור שלושה דפוס CPD ERG.מסנן bandpass הוא מאחד עד 50 הרץ כדי להחליק את הצורה מבלי להשפיע על המשרעת שלה. הפסגות החיוביות והפעילות הראשונות בצורת הגל מיועדות כ-P1 ו-N1. התבנית משרעת ERG נמדדת מ- N1 עד P1.To להפחית אימפוטנציה אלקטרודה, התייחסות מחט מעוקרת ממוקמת מתחת לעור הקדמי. ואלקטרודה התייחסות מחט מעוקרת ממוקמת מתחת לעור סנטימטר אחד מאחורי הקנתוס לרוחב בצד אחד.אלקטרודה הקלטת ERG מחוטא ממוקם על הקרנית על יישום אקטואלי של קרע מלאכותי. תיקון עין אחת. תצוגה ממוקמת במרחק צפייה של 50 ס"מ.ספקולום עפעפיים משמש כדי לחשוף באופן מלא את האישון שלה. לאחר מכן, העז מונחת על מנוחת הסנטר. יישר את העז עם המצלמה כדי לשלוח את ראש עצב הראייה שלו בתמונת הלייזר אופטלמוסקופיה של סריקת הקונפוקלים על ידי שינוי תנוחת הראש שלה.לחץ על לחצן התחל כדי להזין את שלב הסיום של הזיהוי. המתן עד שהמכונה תסיים לטעון. לחץ על לחצן ההתחלה הצהוב כדי להתחיל את ההדמיה הרשמית.התאם את הג'ויסטיק כדי להאיר באופן שווה את תמונת האינפרא-אדום כדי לשפר את איכות התמונה. החלק את המצלמה קדימה עד שתמונת OCT ברשתית הזקופה תוצג במסך הימני העליון. שנה את הג'ויסטיק כדי שהוא ירקוד באופן שווה בתמונת OCT רשתית אופקית.לחץ על הלחצן בג'ויסטיק כדי לתפוס את התמונה באופן אוטומטי. החזק ג'ויסטיק זה כדי לשמור על איכות התמונה במסך התמונה החיה עד להשלמת ביצוע התמונה. לאחר מכן לחץ על רכוש.בחר תמונה ראשונית באיכות גבוהה. לחץ באמצעות לחצן העכבר הימני ובחר הגדר הפניה. לחץ על לחצן המשך טיפול כדי לאפשר לתוכנית להתאים באופן אוטומטי את הסריקה הנוכחית לסריקה הבסיסית.לאחר ההתאמה, לחץ על הכפתור על הג'ויסטיק כדי להפעיל מעקב אוטומטי בזמן אמת. לחץ על לחצן המדידה כדי להזין את פלטפורמת המדידה. בחר את המחק כלי ונגב את קו ה- RFL, המסומן באופן אוטומטי על-ידי מחשב.בחר בכלי ציור הקו כדי לחלק באופן ידני את הגבול בין IPL ל- INL. בין הקווים האדומים והכחולים נמצא מתחם GCC. Retina השתנה הדמיה מקוק רזוס מבוצע באמצעות אותו ציוד והליך כמו אלה המשמשים עז.איור א' מציג FVEP מייצג בעז. איור B מציג תבנית מייצגת של צורת גל ERG בעז. איור C מציג תבנית מייצגת FVEP במקוק רזוס.ואיור ד' מראה תבנית מייצגת של צורת גל ERG במקוק רזוס. איור 2 מציג תמונות OCT רשתית מייצגות סביב ראש עצב הראייה ואת עובי קומפלקס GCC באזורים היקפיים שונים בעז ומקוק רזוס. מודל בעלי חיים גדול ממלא תפקיד חשוב במחקר התרגומי.במקרים רבים, השפעות טיפוליות מבטיחות במודלים של בעלי חיים קטנים לא תורגמו לחולים אנושיים. במחקר זה הצגנו פרוטוקול וידאו של FVEP, PERG ו- OCT בעז ומקוק רזוס. שיטה זו ב- vivo יכולה להיות מיושמת במודל גדול יותר של נוירוזה אופטית שונה, כגון גלאוקומה איסכמית או נוירופתיה אופטית טראומטית ודלקת עצבים אופטית.

Research

JoVE Journal

Neuroscience

In Vivo Methods to Assess Retinal Ganglion Cell and Optic Nerve Function and Structure in Large Animals

Methods for Experimental Manipulations after Optic Nerve Transection in the Mammalian CNS

שיטות מניפולציות ניסויית, לאחר חיתוך רוחב עצב הראייה של מערכת העצבים המרכזית היונקים

Retinal ganglion cells (RGCs) are CNS neurons that output visual information from the retina to the brain, via the optic nerve. The optic nerve can be ...

Transfection of Mouse Retinal Ganglion Cells by in vivo Electroporation

Transfection of Mouse Retinal Ganglion Cells by in vivo Electroporation

Transfection של תאים עכבר רשתית גנגליון על ידי In vivo Electroporation

The targeting and refinement of RGC projections to the midbrain is a popular and powerful model system for studying how precise patterns of neural ...

An Optic Nerve Crush Injury Murine Model to Study Retinal Ganglion Cell Survival

עצב הראייה קראש פגיעה דגם Murine לחקר הישרדות רשתית תא גנגליון

Injury to the optic nerve can lead to axonal degeneration, followed by a gradual death of retinal ganglion cells (RGCs), which results in irreversible ...

Functional Neuroimaging Using Ultrasonic Blood-brain Barrier Disruption and Manganese-enhanced MRI

הדמייה תפקודית באמצעות שיבוש Ultrasonic הדם למוח הגדר מנגן משופרת MRI

Although mice are the dominant model system for studying the genetic and molecular underpinnings of neuroscience, functional neuroimaging in mice remains ...

Retrograde Labeling of Retinal Ganglion Cells in Adult Zebrafish with Fluorescent Dyes

תיוג מדרדר של תאים ברשתית גנגליון מבוגרים דג הזברה עם צבעי ניאון

As retrograde labeling retinal ganglion cells (RGCs) can isolate RGCs somata from dying sites, it has become the gold standard for counting RGCs in RGCs ...

In vivo Imaging of Optic Nerve Fiber Integrity by Contrast-Enhanced MRI in Mice

In vivo Imaging of Optic Nerve Fiber Integrity by Contrast-Enhanced MRI in Mice

בהדמית vivo של יושרה סיבי עצב הראייה על ידי contrast-enhanced MRI בעכברים

The rodent visual system encompasses retinal ganglion cells and their axons that form the optic nerve to enter thalamic and midbrain centers, and ...

Imaging Serotonergic Fibers in the Mouse Spinal Cord Using the CLARITY/CUBIC Technique

הדמית סיבי serotonergic בחוט שדרת עכבר שימוש CLARITY / טכניקה מעוקבת

Long descending fibers to the spinal cord are essential for locomotion, pain perception, and other behaviors. The fiber termination pattern in the spinal ...

Single-cell RNA-Seq of Defined Subsets of Retinal Ganglion Cells

יחיד תא RNA-Seq של קבוצות מוגדרות של תאים גנגליון רשתית

The discovery of cell type-specific markers can provide insight into cellular function and the origins of cellular heterogeneity. With a recent push for ...

Optical Coherence Tomography: Imaging Mouse Retinal Ganglion Cells In Vivo

Optical Coherence Tomography: Imaging Mouse Retinal Ganglion Cells In Vivo

טומוגרפיה אופטית קוהרנטית: הדמיה העכבר גנגליון תאים In Vivo

Structural changes in the retina are common manifestations of ophthalmic diseases. Optical coherence tomography (OCT) enables their identification in ...

Partial Optic Nerve Transection in Rats: A Model Established with a New Operative Approach to Assess Secondary Degeneration of Retinal Ganglion Cells

חיתוך חלקי עצב הראייה אצל חולדות: מודל הקים עם גישה חדשה פעיל כדי להעריך משני ניוון של תאי גנגליון

Previous studies have shown that the secondary degeneration of retinal ganglion cells (RGCs) occurs commonly in glaucoma. Partial optic nerve transection ...