Name: in vivo methods to assess retinal ganglion cell and optic nerve function and structure in large animals
Uploaded: 2022-02-26T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about In Vivo Methods to Assess Retinal Ganglion Cell and Optic Nerve Function and Structure in Large Animals at JoVE.com

Denne studien ble finansiert av følgende tilskudd: National Key R&D Program of China (2021YFA1101200); Medisinsk forskningsprosjekt av Wenzhou (Y20170188), National Key FoU Program of China (2016YFC1101200); National Natural Science Foundation of China (81770926;81800842); Nøkkel-FoU-program i Zhejiang-provinsen (2018C03G2090634); og Key FoU-programmet til Wenzhou Eye Hospital (YNZD1201902). Sponsor- eller finansieringsorganisasjonen hadde ingen rolle i utformingen eller gjennomføringen av denne forskningen.

Eksperimenter ble utført strengt i samsvar med ARRIVE-retningslinjene og National Institutes of Health guide for pleie og bruk av laboratoriedyr, og overholde protokollene godkjent av Institutional Animal Care and Use Committee i Wenzhou Medical University (WMU) og Joinn Laboratory (Suzhou). De mannlige Saanen geiter, i alderen 4 til 6 måneder med vekt på 19-23 kg, ble plassert i WMU dyreanlegg. De mannlige Rhesus macaques, i alderen 5 til 6 år med vekt på 5-7 kg, ble plassert i Joinn dyreanlegg. Alle dyrene ble ved...

<ol>
	<li>Benowitz, L., Yin, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rewiring+the+injured+CNS:+lessons+from+the+optic+nerve.">Rewiring the injured CNS: lessons from the optic nerve.</a> Experimental Neurology. 209 (2), 389-398 (2008).</li><li>Park, K. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Promoting+axon+regeneration+in+the+adult+CNS+by+modulation+of+the+PTEN/mTOR+pathway.">Promoting axon regeneration in the adult CNS by modulation of the PTEN/mTOR pathway.</a> Science. 322 (5903), 963-966 (2008).</li><li>Duan, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Subtype-specific+regeneration+of+retinal+ganglion+cells+following+axotomy:+effects+of+osteopontin+and+mTOR+signaling.">Subtype-specific regeneration of retinal ganglion cells following axotomy: effects of osteopontin and mTOR signaling.</a> Neuron. 85 (6), 1244-1256 (2015).</li><li>Bei, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Restoration+of+visual+function+by+enhancing+conduction+in+regenerated+axons.">Restoration of visual function by enhancing conduction in regenerated axons.</a> Cell. 164 (1-2), 219-232 (2016).</li><li>He, Z., Jin, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intrinsic+control+of+axon+regeneration.">Intrinsic control of axon regeneration.</a> Neuron. 90 (3), 437-451 (2016).</li><li>Yang, S. -. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Strategies+to+promote+long-distance+optic+nerve+regeneration.">Strategies to promote long-distance optic nerve regeneration.</a> Frontiers in Cellular Neuroscience. 14, 119 (2020).</li><li>Foroozan, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=New+treatments+for+nonarteritic+anterior+ischemic+optic+neuropathy.">New treatments for nonarteritic anterior ischemic optic neuropathy.</a> Neurologic Clinics. 35 (1), 1-15 (2017).</li><li>Singman, E. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Indirect+traumatic+optic+neuropathy.">Indirect traumatic optic neuropathy.</a> Military Medical Research. 3, 2 (2016).</li><li>Zhang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+evaluation+of+retinal+ganglion+cells+and+optic+nerve's+integrity+in+large+animals+by+multi-modality+analysis.">In vivo evaluation of retinal ganglion cells and optic nerve's integrity in large animals by multi-modality analysis.</a> Experimental Eye Research. 197, 108117 (2020).</li><li>Tolbert, W. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=From+Rhesus+macaque+to+human:+structural+evolutionary+pathways+for+immunoglobulin+G+subclasses.">From Rhesus macaque to human: structural evolutionary pathways for immunoglobulin G subclasses.</a> mAbs. 11 (4), 709-724 (2019).</li><li>Preuss, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Specializations of the human visual system: the monkey model meets human reality. , 231-259 (2004).</li><li>Friedli, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pronounced+species+divergence+in+corticospinal+tract+reorganization+and+functional+recovery+after+lateralized+spinal+cord+injury+favors+primates.">Pronounced species divergence in corticospinal tract reorganization and functional recovery after lateralized spinal cord injury favors primates.</a> Science Translational Medicine. 7 (302), (2015).</li><li>Porciatti, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Electrophysiological+assessment+of+retinal+ganglion+cell+function.">Electrophysiological assessment of retinal ganglion cell function.</a> Experimental Eye Research. 141, 164-170 (2015).</li><li>Smith, C. A., Vianna, J. R., Chauhan, B. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assessing+retinal+ganglion+cell+damage.">Assessing retinal ganglion cell damage.</a> Eye. 31 (2), 209-217 (2017).</li><li>Schuman, J. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optical+coherence+tomography+and+histologic+measurements+of+nerve+fiber+layer+thickness+in+normal+and+glaucomatous+monkey+eyes.">Optical coherence tomography and histologic measurements of nerve fiber layer thickness in normal and glaucomatous monkey eyes.</a> Investigative Ophthalmology &amp; Visual Science. 48 (8), 3645-3654 (2007).</li><li>You, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improving+reproducibility+of+VEP+recording+in+rats:+electrodes,+stimulus+source+and+peak+analysis.">Improving reproducibility of VEP recording in rats: electrodes, stimulus source and peak analysis.</a> Documenta Ophthalmologica. 123 (2), 109-119 (2011).</li><li>Odom, J. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=ISCEV+standard+for+clinical+visual+evoked+potentials:+(2016+update).">ISCEV standard for clinical visual evoked potentials: (2016 update).</a> Documenta Ophthalmologica. 133 (1), 1-9 (2016).</li><li>Zhang, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Silicone+oil-induced+ocular+hypertension+and+glaucomatous+neurodegeneration+in+mouse.">Silicone oil-induced ocular hypertension and glaucomatous neurodegeneration in mouse.</a> eLife. 8, 45881 (2019).</li><li>Seidman, S. H., Telford, L., Paige, G. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vertical,+horizontal,+and+torsional+eye+movement+responses+to+head+roll+in+the+squirrel+monkey.">Vertical, horizontal, and torsional eye movement responses to head roll in the squirrel monkey.</a> Experimental Brain Research. 104 (2), 218-226 (1995).</li><li>Porciatti, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+mouse+pattern+electroretinogram.">The mouse pattern electroretinogram.</a> Documenta Ophthalmologica. 115 (3), 145-153 (2007).</li></ol>

I denne studien presenterer vi en protokoll av VEP, PERG og OCT i geit og rhesus macaque. Disse in vivo-metodene kan brukes i store dyremodeller av ulike optiske nevropatier, som glaukom, iskemisk eller traumatisk optisk nevropati og optisk nevritt9.
PVEP er mer stabil og følsom enn FVEP17; Det kan imidlertid ikke fremkalles i goat9. Som sådan utføres FVEP i geit og PVEP utføres i rhesus macaque i laboratoriet...

Synsnerven (ON), som består av axoner fra netthinnen ganglion celler (RGC), overfører visuelt signal fra netthinnen til hjernen. PÅ sykdommer, som glaukom, traumatisk eller iskemisk optisk nevropati, forårsaket ofte irreversibel ON / RGC degenerasjon og ødeleggende visuelt tap. Selv om det for tiden er mange gjennombrudd i ON regenerering og RGC-beskyttelse i gnagermodeller1,2,3,4,5,6, forble kliniske behandlinger for de fleste ON-sykdommene i hovedsak de samme i løpet av det siste halve århundret med utilfredsstillende utfall7,8 . For å fylle gapet mellom grunnleggende forskning og klinisk praksis, er translasjonsstudier ved hjelp av stor dyremodell av ON-sykdommer ofte nødvendige og fordelaktige på grunn av deres nærmere anatomiske likhet med mennesker enn gnagermodeller.
Geit og rhesus macaques er to store dyrearter som brukes i laboratoriet vårt for å modellere menneskets ON-sykdom. Størrelsen på en geit øyeboll, PÅ, og den tilstøtende strukturen (orbital og nesehule, hodeskalle base, etc.) ligner på et menneske basert på skallen CT scan9. Som sådan gir geitmodell en mulighet til å evaluere og foredle terapeutiske enheter eller kirurgiske prosedyrer før bruk hos mennesker. Rhesus macaque, som ikke-menneskelig primat (NHP), har menneskelignende unikt visuelt system som ikke eksisterer i andre arter10,11. I tillegg er patofysiologiske responser på skader og behandlinger i NHP mye lik den hos mennesker12.
In vivo-tester for å vurdere ON og RGCs struktur og funksjon langsgående er viktige i store dyrestudier. Mønsterelektroretinogram (PERG) har blitt brukt til å evaluere RGC-funksjonen. Flash visuelt fremkalt potensial (FVEP) gjenspeiler integriteten til retino-geniculo-kortikale veier i det visuelle systemet. Dermed kan PERG kombinert med FVEP gjenspeile ON-funksjonen9,13,14 . Den retinal optiske koherenstomografien (OCT) avbildningen kan vise retinalstrukturen med høy temporal og romlig oppløsning, noe som muliggjør måling av tykkelsen på retinal ganglion-komplekset (GCC) 9,15. For elektrofysiologiske undersøkelser i denne studien er overvåking av vitale tegn (varmefrekvens, bruddfrekvens, blodtrykk) og oksygenmetningsnivå (SpO2) før testing avgjørende siden disse parametrene har potente effekter på okulær blodstrøm og dermed funksjonen til det visuelle systemet. Vi overvåket imidlertid ikke de vitale tegnene når vi utførte OCT retinal avbildning for enkelhets skyld. Ifølge vår forrige studie9 er GCC-tykkelsen målt ved OCT retinal imaging ganske stabil, med inter-session koeffisient av variasjon nær 3%. Disse in vivo-testene i geit og rhesus macaque har blitt beskrevet i detalj i vår forrige studie9. Her presenterer vi disse metodene for å bidra til å øke eksperimentell transparens og reproduserbarhet.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>47.6 x 26.8 cm monitors</td>
			<td>DELL Inc.</td>
			<td>E2216HV</td>
			<td>The visual stimuli of contrast-reversal black-white checkerboards were displayed on screens</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>6.0 mm tracheal tube</td>
			<td>Henan Tuoren Medical Device Co., Ltd</td>
			<td>PVC 6.0</td>
			<td>ensure the airway</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>alligator clip</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>atropine</td>
			<td>Guangdong Jieyang Longyang Animal pharmaceutical Co.,Ltd.</td>
			<td></td>
			<td>reduce bronchial secretion and protect heart from vagal nerve activation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Carbomer Eye Gel</td>
			<td>Fabrik GmbH Subsidiary of Bausch &#38; Lomb</td>
			<td></td>
			<td>moisten the cornea and stabilize the recording electrodes</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ERG-Jet recording electrodes</td>
			<td>Roland Consult Stasche&#38;Finger GmbH</td>
			<td>2300 La Chaux-De-Fonds</td>
			<td>ERG recording</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>eye speculum</td>
			<td>Shanghai Jinzhong Medical Device Co., Ltd</td>
			<td>ZYD020</td>
			<td>open palpebral fissure</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heidelberg Spectralis OCT system</td>
			<td>Heidelberg Engineering</td>
			<td></td>
			<td>OCT system</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Imaging</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>(https://www.heidelbergengineering.com/media/e-learning/Totara-US/files/pdf-tutorials/2238-003_Spectralis-Training-Guide.pdf)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>isoflurane</td>
			<td>RWD Life Science Co., Ltd</td>
			<td>R510-22</td>
			<td>isoflurane anesthesia</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>male Saanen goats</td>
			<td>Caimu Livestock Company, country (Hangzhou, China)</td>
			<td></td>
			<td>The male Saanen goats, aged from 4 to 6 months with weight of 19&#8211;23 kg</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>needle electrode</td>
			<td>Roland Consult Stasche&#38;Finger GmbH</td>
			<td>U51-426-G-D</td>
			<td>use for FVEP ground electrode and PERG reference electrodes</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>periphery venous catheter intravenously</td>
			<td>BD shanghai Medical Device Co., Ltd</td>
			<td>383019</td>
			<td>intravenous access for atropine and propofol</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>propofol</td>
			<td>Xian Lipont Enterprise Union Management Co.,Ltd.</td>
			<td></td>
			<td>induce Isoflurane anesthesia in goat</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tropicamide Phenylephrine Eye Drops</td>
			<td>SANTEN OY, Japan</td>
			<td></td>
			<td>5% tropicamide and 5% phenylephrine hydrochloride</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>visual electrophysiology device</td>
			<td>Gotec Co., Ltd</td>
			<td>GT-2008V-III</td>
			<td>use for FVEP &#38; PERG</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>xylazine</td>
			<td>Huamu Animal Health Products Co., Ltd.</td>
			<td></td>
			<td>xylazine anesthesia: intramuscular injection of xylazine 3mg/kg</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>zoletil50</td>
			<td>Virbac</td>
			<td></td>
			<td>induce Isoflurane anesthesia in monkey</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

in vivo methods to assess retinal ganglion cell and optic nerve function and structure in large animals

Synsnerven samler aksoner signaler fra retinal ganglion celler og overfører visuelt signal til hjernen. Store dyremodeller av optisk nerveskade er avgjørende for å oversette nye terapeutiske strategier fra gnagermodeller til klinisk anvendelse på grunn av deres nærmere likheter med mennesker i størrelse og anatomi. Her beskriver vi noen in vivo-metoder for å evaluere funksjonen og strukturen til netthinne ganglioncellene (RGC) og optisk nerve (ON) hos store dyr, inkludert visuelt fremkalt potensial (VEP), mønsterelektroretinogram (PERG) og optisk koherenstomografi (OCT). Både geit og ikke-menneskelig primat ble ansatt i denne studien. Ved å presentere disse in vivo-metodene trinnvis, håper vi å øke eksperimentell reproduserbarhet blant forskjellige laboratorier og lette bruken av store dyremodeller av optiske nevropatier.

Figur 1A viser representative resultater av FVEP i geit. Selv om bølgeformene i samme blitsintensitet har relativ likhet, anbefaler vi fortsatt å undersøke bølgeformene to ganger. Elektromagnetiske bølger generert av elektroniske enheter vil forstyrre de innsamlede elektriske signalene, noe som resulterer i høy baseline støy og dårlig repeterbarhet av bølgeformen. Derfor anbefales det å sikre at det ikke er noen redundante elektroniske enheter koblet til omgivelsene under elektrofy...

Watch this Scientific Journal Video about In Vivo Methods to Assess Retinal Ganglion Cell and Optic Nerve Function and Structure in Large Animals at JoVE.com

In Vivo Methods to Assess Retinal Ganglion Cell and Optic Nerve Function and Structure in Large Animals

Her demostrate vi flere in vivo tester (flash visuell fremkalt potensial, mønster elektroretinogram og optisk koherens tomografi) i geit og rhesus macaque å forstå strukturen og funksjonen til synsnerven og dens nevroner.

In Vivo Metoder for å vurdere retinal ganglioncelle og optisk nervefunksjon og struktur hos store dyr

The optic nerve collects axons signals from the retinal ganglion cells and transmits visual signal to the brain. Large animal models of optic nerve injury ...

Hei, alle sammen. Dette er Yikui Zhang fra Wenzhou Eye Hospital. Den øvre nerven mangler Exxons fra orexin ganglion cellene, og deretter overføre det visuelle signalet til hjernen.Større modell av øvre nerveskade er avgjørende for å oversette den nye behandlingen fra robotmodell til lymfeapplikasjon. Her beskriver vi noen in vivo-metoder for å evaluere strukturen og funksjonen til orexin ganglioncellene i øvre nerve hos store dyr. Ved å presentere denne metoden trinn for trinn, håper vi å øke eksperimentelle reproduktive funksjonshemninger og lette bruken av større modeller for optisk neurose.Barber med elektronisk barberhøvel. Og klargjør den med 70% alkohol tre ganger, for å rense huden og utsette den subkutane venen. Sett inn en perifer venekaster intravenøst.Drypp deretter atropin og propofol. Intuber geiten med et seks millimeter trakealrør og koble til en kunstig åndedrettsvern. Anestesi ble opprettholdt med 3,5% isofluran i oksygen med en konstant to liter administrert strømningshastighet.Plasser temperatursensoren under geitens tunge. Klipp oksygenmetningen til den proksimale enden av geitøret. Bind blodtrykksmansjetten til bunnen av låret.Klem EKG-klemmer på lemmer i rekkefølge. Deretter kan vi overvåke geitens vitale indikatorer. Barber håret og desinfiser huden med betadine og 70% alkohol tre ganger i midten av frontbenet.Åpne sterilisatorposen som inneholder saks og neglene. Lag hudinnsnitt for å eksponere skallen med en saks. Stålskruer for implantert i midten av frontbenet.Barber håret og desinfiser huden med betadine og 70% alkohol tre ganger på et midtpunkt på to ører i oksipitale bein. Lag hudinnsnitt. Stålskruer for implantert på midten av to ører i oksipitale bein.Jordnålelektroden settes subkutant inn under frontskalleskruen. Den aktive elektroden og referanseelektroden er koblet til henholdsvis front- og oksipitale skruer med alligatorklemmer for å redusere elektrodeimpotensen. ett øye.Påfør aktuelle anestesi øyedråper på okulær overflate. Elever på begge sider utvides av mydriasis øyedråper. Plasser geitens hode i en gassfylt stimulator rettet mot ambulantlys.Plasser det svarte teppet over stimulatoren og geithodet i fem minutter tilpasning. Øyelokk spekulum brukes til å eksponere sin elev fullt ut. Kontroller elektrodevevskontaktimpotensen.Sørg for at impotensen er under 10 kilometer for hver for å unngå elektromagnetiske forstyrrelser fra andre elektriske apparater i samme rom. Kontroller grunnlinjestøyen uten lysstimulering. Start FVEP-opptak.Vær oppmerksom på at FVEP-opptak ved hver lysintensitet utføres to ganger. Legg merke til at fukt hornhinnen med kunstig tåre hvis den ser tørr ut. Gjenta om trinn for det kontralaterale øyet.Start FVEP-opptak med forskjellige lysintensiteter fortløpende. For hver innspilling er 64 spor i gjennomsnitt for å gi en bølgeform. Den første positive og aktive toppen i FVEP-bølgeformen ble utpekt som P1 og N1. Den steriliserte jordelektroden er plassert i øreflippen.De steriliserte aktive og referanseelektrodene settes subkutant inn langs henholdsvis midtlinjen og front- og oksipitale bein. Øyelokk spekulum brukes til å eksponere sin elev fullt ut. ett øye.Registrer mønster VEP-responser fra det andre øyet ved forskjellige romlige frekvenser fortløpende. Koble til jordelektroden med en alligatorklemme. To steriliserte nåleereferanseelektroder er plassert under huden en centimeter bak sidekanthus på begge sider.Øyelokk spekulum brukes til å eksponere sin elev fullt ut. To desinfiserte ERG-registreringselektroder er sentrert både hornhinnen etter aktuell påføring av kunstig tåre. To stimulatorer er plassert foran hvert øye med en visningsavstand på 50 centimeter.Sørg for at impotensen er under 10 kilometer. Spor grunnlinjestøyen uten lysstimulering. Sikt på ambulantlyset.Start mønster ERG-opptak fra begge øynene samtidig ved forskjellige romlige frekvenser fortløpende. Til slutt, gå tilbake av skjermen for å registrere mønster ERG uten visuelle stimulatorer og en aktiv kontroll. Bandpassfilteret er satt til å variere fra en til 75 Hertz for tre CPD mønster ERG.Bandpassfilteret er fra en til 50 Hertz for å glatte formen uten å påvirke amplituden. De første positive og aktive toppene i bølgeformen er angitt som P1 og N1. Mønsteret ERG amplitude målt fra N1 til P1.To redusere elektrode impotens, en sterilisert nål referanse er plassert under frontal hud. Og en sterilisert nåleereferanseelektrode er plassert under huden en centimeter bak lateralkanthus på den ene siden.En desinfisert ERG-registreringselektrode er plassert på hornhinnen på en aktuell påføring av kunstig tåre. ett øye. En skjerm er plassert i visningsavstand på 50 centimeter.Øyelokk spekulum brukes til å eksponere sin elev fullt ut. Deretter plasseres geiten på hakestøtten. Juster geiten med kameraet for å sende sitt optiske nervehode i det kondokale skannelaseroftalmoskopibildet ved å endre hodeposisjonen.Klikk startknappen for å gå inn i gjenkjenningssluttfasen. Vent til maskinen er ferdig lastet inn. Trykk på den gule startknappen for å starte det formelle bildet.Juster styrespaken slik at det infrarøde bildet lyser jevnt for å forbedre bildekvaliteten. Skyv kameraet fremover til det oppreiste retinal OCT-bildet vises øverst til høyre. Endre styrespaken slik at den danser jevnt i et horisontalt retinal OCT-bilde.Trykk på knappen på styrespaken for å fange bildet automatisk. Hold inne denne styrespaken for å opprettholde bildekvaliteten på live-bildeskjermen til bildeutførelsen er fullført. Trykk deretter på Acquire.Velg et første bilde av høy kvalitet. Høyreklikk og velg angi referanse. Trykk oppfølgingsknappen for å tillate at programmet automatisk samsvarer med gjeldende skanning med grunnlinjeskanningen.Når den er matchet, trykket du på knappen på styrespaken for å aktivere automatisk sanntidssporing. Klikk målingsknappen for å gå inn i måleplattformen. Velg viskelæret et verktøy og tørk RFL-linjen, som automatisk merkes av maskinen.Velg linjetegningsverktøyet for å skissere grensen mellom IPL og INL manuelt. Mellom de røde og blå linjene er GCC-komplekset. Retina endret avbildning i rhesus macaque utføres ved hjelp av samme utstyr og prosedyre som de som brukes i geit.Figur A viser representativ FVEP i geit. Figur B viser representativt mønster ERG bølgeform i geit. Figur C viser representativt mønster FVEP i rhesus macaque.Og figur D viser representativt mønster ERG bølgeform i rhesus macaque. Figur to viser representative retinal OCT-bilder rundt optisk nervehode og tykkelsen på GCC-komplekset i forskjellige perifere områder i geit og rhesus macaque. Stor dyremodell spiller en viktig rolle i translasjonell forskning.I mange tilfeller klarte ikke lovende terapeutiske effekter i små dyremodeller å bli oversatt til menneskelige pasienter. I denne studien presenterte vi videoprotokoll av FVEP, PERG og OCT i geit og rhesus macaque. Denne in vivo-metoden kan brukes i større modell av ulike optiske nevroser, for eksempel glaukom iskemisk eller traumatisk optisk nevropati og optisk nevritt.

Research

JoVE Journal

Neuroscience

In Vivo Methods to Assess Retinal Ganglion Cell and Optic Nerve Function and Structure in Large Animals

Methods for Experimental Manipulations after Optic Nerve Transection in the Mammalian CNS

Retinal ganglion cells (RGCs) are CNS neurons that output visual information from the retina to the brain, via the optic nerve. The optic nerve can be ...

Transfection of Mouse Retinal Ganglion Cells by in vivo Electroporation

Transfection of Mouse Retinal Ganglion Cells by in vivo Electroporation

The targeting and refinement of RGC projections to the midbrain is a popular and powerful model system for studying how precise patterns of neural ...

An Optic Nerve Crush Injury Murine Model to Study Retinal Ganglion Cell Survival

Injury to the optic nerve can lead to axonal degeneration, followed by a gradual death of retinal ganglion cells (RGCs), which results in irreversible ...

Functional Neuroimaging Using Ultrasonic Blood-brain Barrier Disruption and Manganese-enhanced MRI

Funksjonell Bildediagnostiske Bruke Ultrasonic blod-hjerne barrieren avbrudd og mangan forbedret MR

Although mice are the dominant model system for studying the genetic and molecular underpinnings of neuroscience, functional neuroimaging in mice remains ...

Retrograde Labeling of Retinal Ganglion Cells in Adult Zebrafish with Fluorescent Dyes

Retrograd Merking av retinal ganglion celler i voksen sebrafisk med fluorescerende fargestoffer

As retrograde labeling retinal ganglion cells (RGCs) can isolate RGCs somata from dying sites, it has become the gold standard for counting RGCs in RGCs ...

In vivo Imaging of Optic Nerve Fiber Integrity by Contrast-Enhanced MRI in Mice

In vivo Imaging of Optic Nerve Fiber Integrity by Contrast-Enhanced MRI in Mice

In vivo avbildning av Optic Nerve Fiber Integritet av Kontrast-forsterket MR i Mus

The rodent visual system encompasses retinal ganglion cells and their axons that form the optic nerve to enter thalamic and midbrain centers, and ...

Imaging Serotonergic Fibers in the Mouse Spinal Cord Using the CLARITY/CUBIC Technique

Imaging Serotonerge Fibers i Mouse Spinal Cord Bruke CLARITY / CUBIC Technique

Long descending fibers to the spinal cord are essential for locomotion, pain perception, and other behaviors. The fiber termination pattern in the spinal ...

Single-cell RNA-Seq of Defined Subsets of Retinal Ganglion Cells

Enkeltcelle RNA-Seq av definerte subsets av retinal Ganglion-celler

The discovery of cell type-specific markers can provide insight into cellular function and the origins of cellular heterogeneity. With a recent push for ...

Optical Coherence Tomography: Imaging Mouse Retinal Ganglion Cells In Vivo

Optical Coherence Tomography: Imaging Mouse Retinal Ganglion Cells In Vivo

Optical Coherence tomografi: Bildebehandling musen Retinal Ganglion celler i Vivo

Structural changes in the retina are common manifestations of ophthalmic diseases. Optical coherence tomography (OCT) enables their identification in ...

Partial Optic Nerve Transection in Rats: A Model Established with a New Operative Approach to Assess Secondary Degeneration of Retinal Ganglion Cells

Delvis synsnerven Transection i rotter: modell etablert med en ny Operative tilnærming til vurdere sekundære degenerasjon av netthinnen ganglieceller

Previous studies have shown that the secondary degeneration of retinal ganglion cells (RGCs) occurs commonly in glaucoma. Partial optic nerve transection ...