Name: in vivo methods to assess retinal ganglion cell and optic nerve function and structure in large animals
Uploaded: 2022-02-26T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about In Vivo Methods to Assess Retinal Ganglion Cell and Optic Nerve Function and Structure in Large Animals at JoVE.com

Bu çalışma aşağıdaki hibelerle finanse edildi: Çin Ulusal Anahtar Ar-Ge Programı (2021YFA1101200); Wenzhou Tıbbi Araştırma Projesi (Y20170188), Çin Ulusal Anahtar Ar-Ge Programı (2016YFC1101200); Çin Ulusal Doğa Bilimleri Vakfı (81770926;81800842); Zhejiang Eyaleti Anahtar Ar-Ge Programı (2018C03G2090634); ve Wenzhou Göz Hastanesi (YNZD1201902) Anahtar Ar-Ge Programı. Sponsor veya finansman kuruluşunun bu araştırmanın tasarımında veya yürütülmesinde hiçbir rolü yoktu.

Deneyler kesinlikle ARRIVE yönergelerine ve Laboratuvar hayvanlarının bakımı ve kullanımı için Ulusal Sağlık Enstitüleri kılavuzuna uygun olarak yapıldı ve Wenzhou Tıp Üniversitesi (WMU) ve Joinn Laboratuvarı'ndaki (Suzhou) Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Komitesi tarafından onaylanan protokollere uyuldu. Yaşları 4 ila 6 ay arasında değişen ve ağırlığı 19-23 kg olan erkek Saanen keçileri WMU hayvan tesisinde barındırıldı. Yaşları 5-7 kg olan 5 ila 6 yaş arası erkek Rhesus makaklar...

<ol>
	<li>Benowitz, L., Yin, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rewiring+the+injured+CNS:+lessons+from+the+optic+nerve.">Rewiring the injured CNS: lessons from the optic nerve.</a> Experimental Neurology. 209 (2), 389-398 (2008).</li><li>Park, K. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Promoting+axon+regeneration+in+the+adult+CNS+by+modulation+of+the+PTEN/mTOR+pathway.">Promoting axon regeneration in the adult CNS by modulation of the PTEN/mTOR pathway.</a> Science. 322 (5903), 963-966 (2008).</li><li>Duan, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Subtype-specific+regeneration+of+retinal+ganglion+cells+following+axotomy:+effects+of+osteopontin+and+mTOR+signaling.">Subtype-specific regeneration of retinal ganglion cells following axotomy: effects of osteopontin and mTOR signaling.</a> Neuron. 85 (6), 1244-1256 (2015).</li><li>Bei, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Restoration+of+visual+function+by+enhancing+conduction+in+regenerated+axons.">Restoration of visual function by enhancing conduction in regenerated axons.</a> Cell. 164 (1-2), 219-232 (2016).</li><li>He, Z., Jin, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intrinsic+control+of+axon+regeneration.">Intrinsic control of axon regeneration.</a> Neuron. 90 (3), 437-451 (2016).</li><li>Yang, S. -. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Strategies+to+promote+long-distance+optic+nerve+regeneration.">Strategies to promote long-distance optic nerve regeneration.</a> Frontiers in Cellular Neuroscience. 14, 119 (2020).</li><li>Foroozan, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=New+treatments+for+nonarteritic+anterior+ischemic+optic+neuropathy.">New treatments for nonarteritic anterior ischemic optic neuropathy.</a> Neurologic Clinics. 35 (1), 1-15 (2017).</li><li>Singman, E. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Indirect+traumatic+optic+neuropathy.">Indirect traumatic optic neuropathy.</a> Military Medical Research. 3, 2 (2016).</li><li>Zhang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+evaluation+of+retinal+ganglion+cells+and+optic+nerve's+integrity+in+large+animals+by+multi-modality+analysis.">In vivo evaluation of retinal ganglion cells and optic nerve's integrity in large animals by multi-modality analysis.</a> Experimental Eye Research. 197, 108117 (2020).</li><li>Tolbert, W. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=From+Rhesus+macaque+to+human:+structural+evolutionary+pathways+for+immunoglobulin+G+subclasses.">From Rhesus macaque to human: structural evolutionary pathways for immunoglobulin G subclasses.</a> mAbs. 11 (4), 709-724 (2019).</li><li>Preuss, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Specializations of the human visual system: the monkey model meets human reality. , 231-259 (2004).</li><li>Friedli, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pronounced+species+divergence+in+corticospinal+tract+reorganization+and+functional+recovery+after+lateralized+spinal+cord+injury+favors+primates.">Pronounced species divergence in corticospinal tract reorganization and functional recovery after lateralized spinal cord injury favors primates.</a> Science Translational Medicine. 7 (302), (2015).</li><li>Porciatti, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Electrophysiological+assessment+of+retinal+ganglion+cell+function.">Electrophysiological assessment of retinal ganglion cell function.</a> Experimental Eye Research. 141, 164-170 (2015).</li><li>Smith, C. A., Vianna, J. R., Chauhan, B. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assessing+retinal+ganglion+cell+damage.">Assessing retinal ganglion cell damage.</a> Eye. 31 (2), 209-217 (2017).</li><li>Schuman, J. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optical+coherence+tomography+and+histologic+measurements+of+nerve+fiber+layer+thickness+in+normal+and+glaucomatous+monkey+eyes.">Optical coherence tomography and histologic measurements of nerve fiber layer thickness in normal and glaucomatous monkey eyes.</a> Investigative Ophthalmology &amp; Visual Science. 48 (8), 3645-3654 (2007).</li><li>You, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improving+reproducibility+of+VEP+recording+in+rats:+electrodes,+stimulus+source+and+peak+analysis.">Improving reproducibility of VEP recording in rats: electrodes, stimulus source and peak analysis.</a> Documenta Ophthalmologica. 123 (2), 109-119 (2011).</li><li>Odom, J. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=ISCEV+standard+for+clinical+visual+evoked+potentials:+(2016+update).">ISCEV standard for clinical visual evoked potentials: (2016 update).</a> Documenta Ophthalmologica. 133 (1), 1-9 (2016).</li><li>Zhang, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Silicone+oil-induced+ocular+hypertension+and+glaucomatous+neurodegeneration+in+mouse.">Silicone oil-induced ocular hypertension and glaucomatous neurodegeneration in mouse.</a> eLife. 8, 45881 (2019).</li><li>Seidman, S. H., Telford, L., Paige, G. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vertical,+horizontal,+and+torsional+eye+movement+responses+to+head+roll+in+the+squirrel+monkey.">Vertical, horizontal, and torsional eye movement responses to head roll in the squirrel monkey.</a> Experimental Brain Research. 104 (2), 218-226 (1995).</li><li>Porciatti, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+mouse+pattern+electroretinogram.">The mouse pattern electroretinogram.</a> Documenta Ophthalmologica. 115 (3), 145-153 (2007).</li></ol>

Bu çalışmada keçi ve rhesus makaklarında VEP, PERG ve OCT protokolünü sunuyoruz. Bu in vivo yöntemler glokom, iskemik veya travmatik optik nöropati ve optik nörit9 gibi çeşitli optik nöropatilerin büyük hayvan modellerinde uygulanabilir9.
PVEP, FVEP17'den daha kararlı ve hassastır; ancak, goat9'da ortaya çıkaramaz. Bu nedenle FVEP keçide, PVEP ise retino-genikülo-kortikal yolun bütünlüğün...

Retina ganglion hücrelerinden (RGC) gelen aksonlardan oluşan optik sinir (ON), retinadan beyne görsel sinyal iletir. Glokom, travmatik veya iskemik optik nöropati gibi ON hastalıkları genellikle geri dönüşü olmayan ON / RGC dejenerasyonuna ve yıkıcı görme kaybına neden oldu. Kemirgen modellerinde ON rejenerasyon ve RGC korumasında şu anda birçok atılım olmasına rağmen1,2,3,4,5,6, ON hastalıklarının çoğu için klinik tedaviler son yarım yüzyılda tatmin edici olmayan sonuçlarla temelde aynı kaldı7,8 . Temel araştırma ve klinik uygulama arasındaki boşluğu doldurmak için, ON hastalıklarının büyük hayvan modelini kullanan çeviri çalışmaları, insanlara kemirgen modellerinden daha yakın anatomik benzerlikleri nedeniyle genellikle gerekli ve faydalıdır.
Keçi ve rhesus makaklar, laboratuvarımızda insanın ON hastalığını modellemek için kullanılan iki büyük hayvan türüdür. Bir keçinin göz küresi, ON ve bitişik yapının büyüklüğü (orbital ve burun boşluğu, kafatası tabanı, vb.) kafatası CT taramasına dayanan bir insanınkine benzer9. Bu nedenle, keçi modeli insanlarda kullanılmadan önce terapötik cihazları veya cerrahi prosedürleri değerlendirmek ve iyileştirmek için bir fırsat sağlar. Rhesus makak, insan olmayan primat (NHP) olarak, diğer türlerde bulunmayan insan benzeri benzersiz bir görsel sisteme sahiptir10,11. Ek olarak, NHP'deki yaralanmalara ve tedavilere verilen patofizyolojik yanıtlar insanlardakine çok benzer12.
ON ve RGC'nin yapısını ve işlevini uzunlamasına değerlendirmek için in vivo testler büyük hayvan çalışmalarında önemlidir. RGC fonksiyonunu değerlendirmek için desen elektroretinogramı (PERG) kullanılmıştır. Flash görsel uyarılmış potansiyel (FVEP), retino-geniculo-kortikal yolun görsel sistemdeki bütünlüğünü yansıtır. Böylece, PERG FVEP ile birlikte ON işlevini yansıtabilir9,13,14 . Retina optik koherens tomografisi (OCT) görüntülemesi, retina ganglion kompleksinin (GCC)9,15 kalınlığının ölçülmesine olanak sağlayan yüksek zamansal ve mekansal çözünürlüğe sahip retina yapısını gösterebilir. Bu çalışmadaki elektrofizyolojik incelemeler için, testten önce hayati belirtilerin (ısı oranı, ihlal oranı, kan basıncı) ve oksijen doygunluk seviyesinin (SpO2) izlenmesi çok önemlidir, çünkü bu parametrelerin oküler kan akışı ve dolayısıyla görsel sistemin işlevi üzerinde güçlü etkileri vardır. Ancak, basitlik adına OCT retina görüntüleme yaparken hayati belirtileri izlemedik. Önceki çalışmamıza göre9, OCT retina görüntüleme ile ölçülen GCC kalınlığı oldukça kararlıdır ve seanslar arası değişim katsayısı% 3'e yakındır. Keçi ve rhesus makaklarındaki bu in vivo testler önceki çalışmamızda ayrıntılı olarak açıklanmıştır9. Burada deneysel şeffaflığı ve tekrarlanabilirliği artırmaya yardımcı olmak için bu yöntemleri sunuyoruz.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>47.6 x 26.8 cm monitors</td>
			<td>DELL Inc.</td>
			<td>E2216HV</td>
			<td>The visual stimuli of contrast-reversal black-white checkerboards were displayed on screens</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>6.0 mm tracheal tube</td>
			<td>Henan Tuoren Medical Device Co., Ltd</td>
			<td>PVC 6.0</td>
			<td>ensure the airway</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>alligator clip</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>atropine</td>
			<td>Guangdong Jieyang Longyang Animal pharmaceutical Co.,Ltd.</td>
			<td></td>
			<td>reduce bronchial secretion and protect heart from vagal nerve activation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Carbomer Eye Gel</td>
			<td>Fabrik GmbH Subsidiary of Bausch &#38; Lomb</td>
			<td></td>
			<td>moisten the cornea and stabilize the recording electrodes</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ERG-Jet recording electrodes</td>
			<td>Roland Consult Stasche&#38;Finger GmbH</td>
			<td>2300 La Chaux-De-Fonds</td>
			<td>ERG recording</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>eye speculum</td>
			<td>Shanghai Jinzhong Medical Device Co., Ltd</td>
			<td>ZYD020</td>
			<td>open palpebral fissure</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heidelberg Spectralis OCT system</td>
			<td>Heidelberg Engineering</td>
			<td></td>
			<td>OCT system</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Imaging</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>(https://www.heidelbergengineering.com/media/e-learning/Totara-US/files/pdf-tutorials/2238-003_Spectralis-Training-Guide.pdf)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>isoflurane</td>
			<td>RWD Life Science Co., Ltd</td>
			<td>R510-22</td>
			<td>isoflurane anesthesia</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>male Saanen goats</td>
			<td>Caimu Livestock Company, country (Hangzhou, China)</td>
			<td></td>
			<td>The male Saanen goats, aged from 4 to 6 months with weight of 19&#8211;23 kg</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>needle electrode</td>
			<td>Roland Consult Stasche&#38;Finger GmbH</td>
			<td>U51-426-G-D</td>
			<td>use for FVEP ground electrode and PERG reference electrodes</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>periphery venous catheter intravenously</td>
			<td>BD shanghai Medical Device Co., Ltd</td>
			<td>383019</td>
			<td>intravenous access for atropine and propofol</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>propofol</td>
			<td>Xian Lipont Enterprise Union Management Co.,Ltd.</td>
			<td></td>
			<td>induce Isoflurane anesthesia in goat</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tropicamide Phenylephrine Eye Drops</td>
			<td>SANTEN OY, Japan</td>
			<td></td>
			<td>5% tropicamide and 5% phenylephrine hydrochloride</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>visual electrophysiology device</td>
			<td>Gotec Co., Ltd</td>
			<td>GT-2008V-III</td>
			<td>use for FVEP &#38; PERG</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>xylazine</td>
			<td>Huamu Animal Health Products Co., Ltd.</td>
			<td></td>
			<td>xylazine anesthesia: intramuscular injection of xylazine 3mg/kg</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>zoletil50</td>
			<td>Virbac</td>
			<td></td>
			<td>induce Isoflurane anesthesia in monkey</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

in vivo methods to assess retinal ganglion cell and optic nerve function and structure in large animals

Optik sinir, retina ganglion hücrelerinden akson sinyallerini toplar ve beyne görsel sinyal iletir. Optik sinir hasarının büyük hayvan modelleri, boyut ve anatomi olarak insanlara daha yakın benzerlikleri nedeniyle kemirgen modellerinden klinik uygulamaya yeni terapötik stratejilerin çevrilmesi için gereklidir. Burada, görsel uyarılmış potansiyel (VEP), desen elektroretinogram (PERG) ve optik koherens tomografi (OCT) dahil olmak üzere büyük hayvanlarda retina ganglion hücrelerinin (RGC'ler) ve optik sinirin (ON) işlevini ve yapısını değerlendirmek için bazı in vivo yöntemleri açıklıyoruz. Bu çalışmada hem keçi hem de insan dışı primat istihdam edilmiştir. Bu in vivo yöntemleri adım adım sunarak, farklı laboratuvarlar arasında deneysel tekrarlanabilirliği artırmayı ve optik nöropatilerin büyük hayvan modellerinin kullanımını kolaylaştırmayı umuyoruz.

Şekil 1A keçide FVEP'nin temsili sonuçlarını göstermektedir. Aynı flaş yoğunluğundaki dalga formları göreceli benzerliğe sahip olsa da, dalga formlarını iki kez incelemenizi öneririz. Elektronik cihazlar tarafından oluşturulan elektromanyetik dalgalar toplanan elektrik sinyallerini bozarak yüksek taban çizgisi gürültüsüne ve dalga biçiminin zayıf tekrarlanabilirliğine neden olur. Bu nedenle, bu tür girişimlerden kaçınmak için elektrofizyolojik inceleme sıras?...

Watch this Scientific Journal Video about In Vivo Methods to Assess Retinal Ganglion Cell and Optic Nerve Function and Structure in Large Animals at JoVE.com

In Vivo Methods to Assess Retinal Ganglion Cell and Optic Nerve Function and Structure in Large Animals

Burada, optik sinirin ve nöronlarının yapısını ve işlevini anlamak için keçi ve rhesus makakında birkaç in vivo testi (flaş görsel uyarılmış potansiyel, desen elektroretinogramı ve optik koherens tomografisi) demostrate ediyoruz.

In Vivo Büyük Hayvanlarda Retina Ganglion Hücre ve Optik Sinir Fonksiyonu ve Yapısını Değerlendirme Yöntemleri

The optic nerve collects axons signals from the retinal ganglion cells and transmits visual signal to the brain. Large animal models of optic nerve injury ...

Herkese merhabalar. Ben Wenzhou Göz Hastanesi'nden Yikui Zhang. Üst sinirde orexin ganglion hücrelerinden Exxons yok ve sonra görsel sinyali beyne ilet.Yeni tedaviyi robot modelden lenf uygulamasına çevirmek için daha büyük bir üst sinir yaralanması modeli gereklidir. Burada, büyük hayvanlarda üst sinirdeki orexin ganglion hücrelerinin yapısını ve işlevini değerlendirmek için bazı in vivo yöntemleri açıklıyoruz. Bu yöntemi adım adım sunarak, deneysel üreme engellerini artırmayı ve daha büyük optik nevroz modellerinin kullanımını kolaylaştırmayı umuyoruz.Elektronik jiletle tıraş edin. Ve cildi temizlemek ve deri altı damarını açığa çıkarmak için üç kez% 70 alkolle hazırlayın. İntravenöz olarak periferik venöz bir hintkenar yerleştirin.Sonra atropin ve propofol damlatın. Keçiyi altı milimetre trakeal tüple entübe edin ve suni bir solunum cihazına bağlayın. Anestezi, oksijende %3,5 izofluran ile sabit iki litre yönetilen debide korundu.Sıcaklık sensörini keçi dilinin altına yerleştirin. Oksijen doygunluğu bölünmesini keçi kulağının proksimal ucuna kırpın. Kan basıncı manşetini uyluğun tabanına bağlayın.EKG yarıklarını sırayla uzuvlara sıkıştırın. Daha sonra, keçinin hayati göstergelerini izleyebiliriz. Saçı tıraş edin ve ön kemiğin merkezinde üç kez betadin ve% 70 alkol ile cildi dezenfekte edin.Makas ve tırnak içeren sterilizatör torbasını açın. Kafatasını makasla ortaya çıkarmak için deri kesileri yapın. Ön kemiğin ortasına implante için çelik vidalar.Saçları tıraş edin ve oksipital kemikte iki kulağın orta noktasında cildi betadin ve% 70 alkol ile üç kez dezenfekte edin. Deri kesileri yapın. Oksipital kemikte iki kulağın orta noktasına implante için çelik vidalar.Zemin iğnesi elektrodu, ön kafatası vidasının altına deri altından yerleştirilir. Aktif elektrot ve referans elektrot, elektrot iktidarsızlığını azaltmak için sırasıyla timsah klipsleri ile ön ve oksipital vidalara bağlanır. Bir gözünü yama.Oküler yüzeye topikal anestezi göz damlaları uygulayın. Her iki taraftaki gözbebekleri midriazis göz damlaları ile genişler. Keçinin kafasını gaz dolu bir uyarıcıya yerleştirin.Siyah battaniyeyi beş dakikalık adaptasyon için uyarıcı ve keçi kafasının üzerine yerleştirin. Göz kapağı spekulum, göz bebeğini tamamen açığa çıkarmak için kullanılır. Elektrot dokusu teması iktidarsızlığını kontrol edin.Aynı odadaki diğer elektrikli cihazlardan elektromanyetik paraziti önlemek için iktidarsızlığın her biri için 10 kilometrenin altında olduğundan emin olun. Işık stimülasyonu olmadan taban çizgisi gürültüsünü kontrol edin. FVEP kaydını başlatın.Her ışık yoğunluğunda FVEP kaydının iki kez gerçekleştirildiğini unutmayın. Korneayı kuru görünüyorsa yapay yırtıkla nemlendirmeyi unutmayın. Kontralteral göz için adımlar hakkında tekrarlayın.FVEP kaydını art arda farklı ışık yoğunluklarında başlatın. Her kayıt için, bir dalga formu vermek için ortalama 64 iz vardır. FVEP dalga formundaki ilk pozitif ve aktif zirve P1 ve N1 olarak belirlenmişti. Sterilize edilmiş yer elektrotu kulak memesi içine yerleştirilmiştir.Sterilize edilmiş aktif ve referans elektrotlar sırasıyla orta hat ve frontal ve oksipital kemik boyunca deri altı olarak yerleştirilir. Göz kapağı spekulum, göz bebeğini tamamen açığa çıkarmak için kullanılır. Bir gözünü yama.Diğer gözün desen VEP yanıtlarını ardışık olarak farklı uzamsal frekanslarda kaydedin. Bir timsah klipsi ile yer elektrodlarına bağlanın. İki sterilize iğne referans elektrodu, her iki taraftaki yanal kantusun bir santimetre gerisinde derinin altına yerleştirilir.Göz kapağı spekulum, göz bebeğini tamamen açığa çıkarmak için kullanılır. İki adet dezenfekte edilmiş ERG kayıt elektrotları, yapay yırtılmanın topikal uygulamasından sonra her iki korneayı da ortalar. Her gözün önüne 50 santimetre görüş mesafesine sahip iki uyarıcı yerleştirilir.İktidarsızlığın 10 kilometrenin altında olduğundan emin olun. Işık stimülasyonu olmadan taban çizgisi gürültüsünü izleyin. Ambulant ışığı hedef al.Her iki gözden de art arda farklı uzamsal frekanslarda desen ERG kaydını başlatın. Son olarak, ekranın görsel uyarıcılar ve etkin bir kontrol olmadan desen ERG'yi kaydetmek için geri dönüşü. Bandpass filtresi, üç CPD desen ERG için bir ila 75 Hertz arasında değişecek şekilde ayarlanmıştır.Bandpass filtresi, genliğini etkilemeden şekli yumuşatmak için bir ila 50 Hertz arasındadır. Dalga formundaki ilk pozitif ve aktif zirveler P1 ve N1 olarak belirlenmiştir. N1'den elektrot iktidarsızlığını azaltmak P1.To için ölçülen ERG genliği deseni, ön cildin altına sterilize edilmiş bir iğne referansı yerleştirilir. Ve sterilize edilmiş bir iğne referans elektrotu, bir taraftaki yanal kantusun bir santimetre arkasına deri altına yerleştirilir.Yapay gözyaşının topikal bir uygulaması üzerine kornea üzerine dezenfekte edilmiş bir ERG kayıt elektrot yerleştirilir. Bir gözünü yama. 50 santimetre görüş mesafesine bir ekran yerleştirilir.Göz kapağı spekulum, göz bebeğini tamamen açığa çıkarmak için kullanılır. Daha sonra, keçi çene istirahatinin üzerine yerleştirilir. Keçiyi kamera ile hizalayarak optik sinir kafasını konfokal tarama lazer oftalmoskopi görüntüsüne baş pozisyonunu değiştirerek gönderin.Algılama bitiş aşamasına girmek için başlat düğmesini tıklatın. Makinenin yüklenmesini bekleyin. Resmi görüntülemeyi başlatmak için sarı başlat düğmesine basın.Görüntü kalitesini artırmak için kızılötesi görüntüyü eşit şekilde aydınlatmak için oyun çubuğunu ayarlayın. Sağ üst ekranda dik retinal OCT görüntüsü gösterilene kadar kamerayı öne kaydırın. Joystick'i yatay retinaL OCT görüntüde eşit şekilde dans edecek şekilde değiştirin.Görüntünüzü otomatik olarak yakalamak için oyun çubuğundaki düğmeye basın. Görüntü yürütme tamamlanana kadar canlı görüntü ekranında görüntü kalitesini korumak için bu oyun çubuğunu basılı tutun. O zaman acquire tuşuna bas.Yüksek kaliteli bir başlangıç fotoğrafı seçin. Sağ tıklatın ve başvuru ayarla'yı seçin. Programın geçerli taramayı temel taramayla otomatik olarak eşleştirmesine izin vermek için izleme düğmesine basın.Eşleştirildikten sonra, otomatik gerçek zamanlı izlemeyi etkinleştirmek için oyun çubuğundaki düğmeye bastı. Ölçüm platformuna girmek için ölçüm düğmesini tıklatın. Silgiyi bir araç seçin ve makine tarafından otomatik olarak etiketlenen RFL hattını silin.IPL ve INL arasındaki sınırı el ile anahat oluşturmak için çizgi çizim aracını seçin. Kırmızı ve mavi çizgiler arasında GCC kompleksi vardır. Rhesus makaktaki retina altered görüntüleme, keçide kullanılanlarla aynı ekipman ve prosedür kullanılarak gerçekleştirilir.Şekil A keçide temsili FVEP gösterir. Şekil B keçide temsili desen ERG dalga formunu gösterir. Şekil C, rhesus makakında temsili desen FVEP'i gösterir.Ve şekil D rhesus makak temsili desen ERG dalga formu gösterir. Şekil iki, optik sinir kafasının etrafındaki temsili retinal OCT görüntülerini ve keçi ve rhesus makaktaki farklı periferik bölgelerde GCC kompleksinin kalınlığını göstermektedir. Büyük hayvan modeli çeviri araştırmalarında önemli bir rol oynar.Birçok durumda, küçük hayvan modellerinde umut verici terapötik etkiler insan hastalara çevrilemedi. Bu çalışmada keçi ve rhesus makaklarında FVEP, PERG ve OCT video protokolünü sunduk. Bu in vivo yöntem, glokom iskemik veya travmatik optik nöropati ve optik nörit gibi çeşitli optik nevrozların daha büyük modelinde uygulanabilir.

Research

JoVE Journal

Neuroscience

In Vivo Methods to Assess Retinal Ganglion Cell and Optic Nerve Function and Structure in Large Animals

Methods for Experimental Manipulations after Optic Nerve Transection in the Mammalian CNS

Memeli MSS Optik Sinir transeksiyonu sonra Deneysel İşlemler Yöntemleri

Retinal ganglion cells (RGCs) are CNS neurons that output visual information from the retina to the brain, via the optic nerve. The optic nerve can be ...

Transfection of Mouse Retinal Ganglion Cells by in vivo Electroporation

Transfection of Mouse Retinal Ganglion Cells by in vivo Electroporation

Fare Retina Ganglion Hücreleri Transfeksiyon tarafından In vivo Elektroporasyon

The targeting and refinement of RGC projections to the midbrain is a popular and powerful model system for studying how precise patterns of neural ...

An Optic Nerve Crush Injury Murine Model to Study Retinal Ganglion Cell Survival

Retina Ganglion Hücre Survival Eğitim Bir Optik Sinir Crush Yaralanma murin Modeli

Injury to the optic nerve can lead to axonal degeneration, followed by a gradual death of retinal ganglion cells (RGCs), which results in irreversible ...

Functional Neuroimaging Using Ultrasonic Blood-brain Barrier Disruption and Manganese-enhanced MRI

Ultrasonik Kan-beyin bariyeri bozulması ve Manganez kontrastlı MRG kullanma İşlevsel beyin görüntüleme

Although mice are the dominant model system for studying the genetic and molecular underpinnings of neuroscience, functional neuroimaging in mice remains ...

Retrograde Labeling of Retinal Ganglion Cells in Adult Zebrafish with Fluorescent Dyes

Floresan Boyalar Yetişkin Zebra balığı Retina Ganglion Hücreleri retrograd Etiketleme

As retrograde labeling retinal ganglion cells (RGCs) can isolate RGCs somata from dying sites, it has become the gold standard for counting RGCs in RGCs ...

In vivo Imaging of Optic Nerve Fiber Integrity by Contrast-Enhanced MRI in Mice

In vivo Imaging of Optic Nerve Fiber Integrity by Contrast-Enhanced MRI in Mice

Farelerde kontrastlı MR ile optik sinir lifi Dürüstlük İn vivo

The rodent visual system encompasses retinal ganglion cells and their axons that form the optic nerve to enter thalamic and midbrain centers, and ...

Imaging Serotonergic Fibers in the Mouse Spinal Cord Using the CLARITY/CUBIC Technique

Kullanımı Netlik Fare Omurilik içinde Serotonerjik Elyaf Görüntüleme / KÜBİK Tekniği

Long descending fibers to the spinal cord are essential for locomotion, pain perception, and other behaviors. The fiber termination pattern in the spinal ...

Single-cell RNA-Seq of Defined Subsets of Retinal Ganglion Cells

Retinal Ganglion Hücrelerinin Tanımlanmış Alt Kümelerinin Tek Hücreli RNA-Seqi

The discovery of cell type-specific markers can provide insight into cellular function and the origins of cellular heterogeneity. With a recent push for ...

Optical Coherence Tomography: Imaging Mouse Retinal Ganglion Cells In Vivo

Optical Coherence Tomography: Imaging Mouse Retinal Ganglion Cells In Vivo

Optik Koherens tomografi: Fare retina Ganglion hücreleri Vivo içinde görüntüleme

Structural changes in the retina are common manifestations of ophthalmic diseases. Optical coherence tomography (OCT) enables their identification in ...

Partial Optic Nerve Transection in Rats: A Model Established with a New Operative Approach to Assess Secondary Degeneration of Retinal Ganglion Cells

Kısmi optik sinir transeksiyon Sıçanlarda: ikincil dejenerasyonu retina Ganglion hücrelerinin değerlendirmek için yeni bir operatif yaklaşım ile kurulan bir Model

Previous studies have shown that the secondary degeneration of retinal ganglion cells (RGCs) occurs commonly in glaucoma. Partial optic nerve transection ...