Name: rodent estrous cycle monitoring utilizing vaginal lavage: no such thing as a normal cycle
Uploaded: 2021-08-30T15:00:00
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이 연구는 캘리포니아 대학 로스 앤젤레스 뇌 손상 연구 센터 (BIRC) 간의 NIH 자금 협력을 통해 수행되었습니다.

이 프로토콜에 설명 된 모든 취급 및 절차 방법은 NIH (National Institutes of Health) 동물 관리 및 사용 지침과 일치하며 Pepperdine University의 IACUC (Institutional Animal Care and Use Committee) 및 UCLA Chancellor 's Animal Research Committee (ARC)의 승인을 받았습니다.
1. 동물 관리 및 사용
<ol><li>암컷 래트를 전력 분석에 따른 숫자로 획득하고, 수컷 래트를 획득하여 휘튼 효과 또는 보다 일관된 사이클링<su...

주요 단계 및 중요한 고려 사항 제공된 프로토콜의 특정 중요한 단계는 특히 질 세포 수집 내에서 강조가 필요합니다. 질액 추출 중에 주사기 삽입의 적절한 각도와 깊이를 보장하는 것이 만족스러운 결과를 산출하고 궁극적으로 동물에 대한 자극, 부상 또는 자궁 경부 자극을 예방하는 열쇠입니다. 자궁 경부의 자극은 백혈구 전용 질 도말 (11)의 12-14 일로 표시된 의사 임신 유도의 ...

새로운 기여 설치류 발정주기는 건강의 필수 지표로 확인되었습니다. 그러나 조사관의 무의식적 인 편견과 여성의 신체에 관한 부정확 한 해석은 과학계를 방해합니다. "estrous"라는 단어의 어원은 열등감과 부정감을 의미합니다. Euripides는이 용어를 사용하여 "광란"또는 광기를 묘사하고, 호머는 공황을 묘사하고, 플라톤은 비합리적인 드라이브를 묘사했습니다. 이 연구는 이러한 원시적 관점이 현재 과학계에 어떻게 영향을 미치는지 강조하고 이전에 연구 된 방법의 업데이트 된 조합 인 새로운 모자이크 패러다임을 통해보다 포괄적 인 접근 방식을 위해 범위를 확대 한 새로운 모자이크 패러다임을 통해 이러한 우려를 해결합니다.
표준화되고 포괄적 인 모니터링 기술이 없기 때문에이 기술의 연구와 사용이 필요하며 데이터 해석 관행이 불분명 할 수 있습니다. 둘째, 에스트로우스 사이클 특성은 연구되는 개별 쥐에 의존하지만, 종종 보편화됩니다. 셋째, 호르몬 순환은 일상적이고 유익한 과정이지만 '인간으로의 번역'섹션에서 탐구 된 위험한 낙인으로 둘러싸여 있습니다. 이 연구는 (A) 심층적 인 에스트로 사이클 모니터링 기술을 설명하고 결과를 해석 할 수있는 방법을 명확히하고, (B) 각 사이클의 무결성과 개성을 유지하는 방법을 요약하고, (C) 입증되지 않은 관행을 영속시키는 오해에주의를 환기시킴으로써 세 가지 방법으로이 세 가지 문제를 해결하는 것을 목표로합니다.
이 연구는 또한 청소년기 쥐에 초점을 맞추는 데있어 독특합니다.이 기간은 성인기의 다양한 행동, 해부학 적 및 생리적 징후를 밝히는 중요한 발달 변화로 특징 지어집니다1. 공통적 편향을 해체하면서 연구가 부족한 인구의 호르몬 주기를 모니터링하기 위한 표준화된 실험 설계를 구축하면 신뢰할 수 있고 유효한 호르몬 상관관계 2,3,4의 개발과 상태 의존적 주기 중단 5,6,7,8,9,10 의 결정이 가능합니다. . 궁극적으로, 이러한 참신함은 진단 기준, 치료 및 다양한 건강 문제의 개입을 확장하는 역할을합니다.
기본 정의 및 사용 에스트로우스 사이클은 세 가지 진동하는 여성 성 스테로이드 호르몬, 즉 에스트라 디올, 류틴 화 호르몬 (LH) 및 프로게스테론 (그림 1A, B)에 반응하여 발생하는 역동적 인 생리 학적 과정의 모음입니다. 내분비와 중추 신경계 사이의 상호 작용은 사이클을 조절하며, 이는 대부분 4-5 일 동안 지속되며 성적 성숙의 시작부터 생식 노화 및 / 또는 중단까지 재발합니다. 그것은 호르몬 수준에 따라 별도의 범주로 나뉩니다 - 가장 일반적으로 원형 방식으로 진행되는 디스트러스 (DIE), 돌출부 (PRO), 발정기 (EST) 및 metestrus (MET)의 4 단계로 나뉩니다. 분할의수는 연구 13의 성격에 따라 3 단계11에서 13 단계 12까지 다양 할 수 있습니다. 부서 수가 적을수록 MET는 종종 스테이지로 제외되고 단기간의 과도기 기간으로 분류됩니다. 더 높은 숫자는 전형적으로 종양 발달 또는 자발적 위임신과 같은 현상의 면밀한 검사를 허용하는 하위섹션, 배아 이식 없이 임신의 생리학적 상태(12,14,15)를 포함한다.
이 연구에서, 단계는 질 운하의 구성 요소를 통해 확인되었으며, 3 가지 분류 결정 인자 - 세포 유형 (들) 존재, 세포 배열 및 세포 양 (그림 2A-D)으로 명명되었습니다. 이 연구에서 질액의 상태는 모니터링되지 않았지만 네 번째 분류 구성 요소로 포함하는 것이 좋습니다. 질 유체를 검사하는 것에 대한 추가 정보는 참조 리스트(16)에서 찾을 수 있다. 분류 구성 요소는 질 세척을 통해 세포를 추출하여 검사 할 수 있습니다.이 기술은 현대 발정주기 모니터링에서 권장되는 기본 기술입니다. 각 단계 내의 심층적 인 생리 학적 과정이이 연구의 범위를 벗어나는 반면, 더 많은 정보는 문헌17에서 찾을 수 있습니다.
이 에스트로우스 사이클 모니터링 기술의 사용 및 지속적인 개발은 성 스테로이드 호르몬과 심혈관 시스템(18), 내분비계(8) 및 중 추신경계(19,20,21)와 같은신체 시스템의 기능 사이의 연결에 뿌리를 두고 있다. 동시에, 여성 설치류가22,23,24,25와 관련되어있을 때 발정주기 모니터링이 항상 필요한 것은 아닙니다. 오히려, 성별 차이가 연구의 특정 영역에서보고되었는지 여부를 고려하는 것이 중요하며, 이는 출판 된 리뷰22,23에서 더 탐구 될 수 있습니다. 에스트로우스 사이클 모니터링은 광범위한 연구 조사에서 필수적이지만, 실험에 여성 설치류를 포함시키는 데 장애물로 간주되어서는 안됩니다. 이 기술은 복잡하고 시간이 많이 걸리는 것처럼 보일 수 있지만 조사자에 따라 절차 자체를 완료하는 데 15 분 미만이 걸릴 수 있으며 비용 효율적입니다. 전반적으로, 과학 연구에 여성 설치류를 포함시키는 것은 신체 시스템, 다양한 조건 및 병리학 및 일반적인 건강에 대한 이해에 유리하며, 이러한 개발은 주로 남성 신체 템플릿에 기반을두고 있기 때문입니다.
설치류의 보편적 인 매개 변수와 자연 다양성 "전형적인"것으로 보이는 측면에 대한 범위를 설정하는 것은 표준 사이클 패턴을 정의하고, 비교 및 분석 목적을 위해 매개 변수를 설정하고, 이상 및 이상값을 감지하는 데 필요합니다. 동시에 각 쥐의주기가 독특하며 동물의 변형, 생리 학적 과정 및 환경 조건에 따른 편차가 예상된다는 것을 인식하는 것도 중요합니다. 사실, 에스트로우스 사이클의 가장 "정상적인"측면 중 하나는 변동성입니다. 이것은 3-38 일26,27의 범위와 함께 총 사이클 길이에서 볼 수 있습니다. 32-34 일에서 여러 주에 이르기까지 다양 할 수있는 성적 성숙의 나이28,29,30; 비주기적 11로 간주되는 것, 및 분류된 결정자 패턴(11,13)이 있다. 전반적으로, 에스트로우스 사이클에 대한 보편적 인 템플릿은 없으며, 과학계와 일반 대중 모두에게 그것을 번역하는 것은 실험 과정의 중요한 부분입니다.
실험 시점과 발달 연령 이러한 변동성 원칙을 인식하면 신뢰할 수 있고 유효한 실험 설계를 구축하는 데 도움이됩니다. 예를 들어, 에스트로우스 사이클링 모니터링의 시작은 쥐의 해부학 적 및 생리적 발달에 의존하며, 이는 환경 및 생리 학적 요인에 따라 다릅니다. 모니터링은 질 운하의 내부 부분으로 이어지는 외음부로 둘러싸인 외부 질 오리피스 인 질 개구부 (VO)가 발달 할 때까지 시작할 수 없습니다 (그림 3A-D). VO는 종종 32 일에서 34 일 사이에 완전히 발달하지만, 각 과목마다 개별화 된 채로 남아 있으며 그 과정에 대한 많은 부분은 알려지지 않았습니다. 이 개구부는 에스트라디올 31의 증가, 시상 하부 - 뇌하수체 - 난소 축 (32)의 성숙 및 쥐 17,33,34,35의 첫 번째 배란과 관련된 성적 성숙의 시작을 확인하는 데 사용되었습니다. 그러나, 최근의 간행물들은 그것이 불리한 환경(31)에서 호르몬 및 발달 발생으로부터 결합되지 않을 수 있고, 성적 성숙(33)보다는 에스트라디올 수준의 변화를 나타낼 수 있기 때문에, 생식 발달의 간접적인 마커일 뿐이라는 것을발견하였다. 따라서, 발달 연령을 결정하기 위해 VO에만 의존하지 않고, 발정기 모니터링(36)을 위한 한정자로서, 또한 성적 성숙의 개시를 표시하기 위해 상피 세포(30)의 첫 번째 EST 단계의 출현 및 각질화를 활용하는 것이 바람직하다.
체중은 설치류30,37의 청소년 기간 동안 발달 연령과 특히 관련이 있으므로이 기간의 발달 연령을 결정하는 데 도움이 될 수 있습니다. 이 현상과 관련된 제안 된 메커니즘은 성장 호르몬과 같은 생식 발달에 필요한 호르몬의 자극, 및 식욕 조절제, 렙틴30에 의한 시상 하부 - 뇌하수체 부신 (HPA) 축의 억제를 포함한다. 그러나, 종에 걸친 쥐와 공급 업체 제공자(38) 사이에서 볼 수있는 큰 차이로 인해이 측정을 발달 연령의 유일한 지표로 활용하는 것은 권장되지 않습니다. VO 및 체중의 발달에서 볼 수있는 변동성은 전체 실험 과정에서 개념의 중요성을 예증합니다.
인간에 대한 번역 : 문화적, 과학적 맥락 동물과 인간의 생식 연구의 번역 관계는 양방향입니다. 동물 기반 연구의 결과는 인간 과정이 어떻게 평가되고, 접근하고, 분석되는지에 영향을 미친다39. 인간의 생식 시스템과 관련 과정에 대한 인식은 동물을 연구하는 방법에 영향을 미칩니다. 사실,이 분야의 추가 연구에 대한 가장 큰 징후 중 하나는 과학적 과정에 영향을 미치는 호르몬주기와 관련된 편향된 사회 문화적 신념에서 비롯됩니다. 이러한 관습의 대부분은 월경을 논의하는 일반적인 문화적 혐오감에서 파생되었으며, 이는 잘 입증 된 지식40,41의 데이터 격차를 초래했습니다. 이것은 선반 높이와 스마트 폰 크기에서부터 경찰 갑옷 피팅 및 놓친 암 진단42에 이르기까지 사소한 것부터 치명적인 것까지 다양한 결과를 초래합니다.
월경을 비위생적이고 파괴적이며 독성이 강한 것으로 묘사하는 것은 존경받는 텍스트, 미디어, 사전 및 의학적 가르침에서 볼 수 있습니다 - 과학 출판물에 의해 보존됩니다. 이것은 호르몬 순환에 대한 부정확하고 편향된 설명, 생식 기관이 신경 내분비 대응 물 및 환경 영향으로부터 분리되는 것, 그리고 '임신 실패'로서의 순환의 완성에 대한 환원 주의적 관점을 통해 발생합니다.43,44. 이것은 호르몬 순환에 영향을 미치는 외부 변수의 생략, 해부학 적 발달만을 기반으로 시작과 종점을 결정하고, 순환 방식이 아닌 선형으로주기 진행을 측정하는 것과 같은 건전하지 않은 실험 관행의 창출로 이어집니다. 사회 문화적 요인과 생물학적 결과 사이의 직접적인 상관 관계에도 불구하고 과학 문헌에서는 종종 고려되지 않습니다. 보다 전체적인 출판물 43,44,45의 검사를 통해 연구자들은 이러한 오명을 해체하고보다 신뢰할 수 있고 유효한 실험 설계를 만들 수 있습니다.

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			<td>AmScope 40X-1000X LED Student Microscope + 5MP USB Camera</td>
			<td>AmScope</td>
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		<tr>
			<td>BD PrecisionGlide Needle Pack, 20G x 1, Short Bevel</td>
			<td>Fischer Scientific</td>
			<td>14-815-526</td>
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		</tr>
		<tr>
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			<td>NEWCO</td>
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		</tr>
		<tr>
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			<td>Fischer Scientific</td>
			<td>12-553-7A</td>
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			<td>Corning&#8482; Rectangular Cover Glasses</td>
			<td>Fischer Scientific</td>
			<td>12-553-464</td>
			<td>https://www.fishersci.com/shop/products/corning-square-rectangular-cover-glasses-rectangle-no-1-thickness-0-13-0-17mm-size-24-x-50mm/12553464#?keyword=true</td>
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			<td>Fischer Scientific</td>
			<td>06-666</td>
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		</tr>
		<tr>
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			<td>NEWCO Specialty and LabDiet</td>
			<td>5012</td>
			<td>https://www.labdiet.com/products/standarddiets/rodents/index.html</td>
		</tr>
		<tr>
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			<td>Grainger</td>
			<td>36UX10</td>
			<td>https://www.grainger.com/product/36UX10?gclid=CjwKCAjw_ 
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			<td>Sodium Chloride Injection Bags, 0.9%</td>
			<td>Live Action Safety</td>
			<td>ABB079830939</td>
			<td>https://www.liveactionsafety.com/injection-iv-solution-9-sodium-chloride-1000ml-bags/</td>
		</tr>
		<tr>
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			<td>Ultra Lightweight Tissue and Plastic 17&#39; x 24&#39; Disposable Underpad</td>
			<td>Medline</td>
			<td>EAN: 0480196288558 
			&#160;Global Trade Identification Number: 40080196288558</td>
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			sr=8-4</td>
		</tr>
	</tbody>
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rodent estrous cycle monitoring utilizing vaginal lavage: no such thing as a normal cycle

현재의 방법론은 여성 Sprague Dawley (SD) 청소년 쥐의 발정주기를 모니터링하기위한 재현 가능하고 표준화되고 비용 효율적인 접근법을 수립합니다. 이 연구는 호르몬주기의 복잡성과 신뢰할 수 있고 유효한 모니터링 기술을 구축하는 데 필요한 광범위한 이해를 보여줍니다. 주요 실험 설계 및 절차 요소에 대한 심층적 인 검토를 통해주기와 기본 원칙에 대한 이러한 설명은 향후 복제에 대한 오해를 더 깊이 이해하고 해체하기위한 틀을 제공합니다.
질 세척을 사용하는 샘플 수집 프로세스의 개요와 함께이 절차는 proestrus, estrus, metestrus 및 diestrus의 네 단계 모델로 데이터 분류 메커니즘을 설명합니다. 이러한 단계는 질액 상태, 존재하는 세포 유형, 세포 배열 및 수집시의 세포량의 4 가지 분류 결정 요인을 활용하는 새로운 제안 된 접근법을 특징으로합니다. 각 단계의 변형, 호의적이고 불리한 샘플, 순환성과 비순환성의 구별, 수집 된 분류 구성 요소의 그래픽 묘사는 데이터의 효과적인 해석 및 조직 관행과 함께 제시됩니다. 전반적으로 이러한 도구를 사용하면 처음으로 정량화 가능한 데이터 범위를 게시할 수 있으므로 복제 시 범주화 요소가 표준화됩니다.

현재의 데이터는 남성 SD 쥐가있는 여성 청소년 SD 국제 유전 표준화 프로그램 (IGS)의 데이터를 반영합니다. 이 동물들은 공동 연구의 일환으로 페퍼딘 대학과 UCLA 실험실에 위치했다. 그림 5는 4 사이클 단계의 여러 변형을 보여줍니다. 도 5A1은 여러 세포 유형이 존재하는 디스트러스 샘플로서 확인되었다. 이 예는 더 많은 수의 상피 세포를 ...

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Rodent Estrous Cycle Monitoring Utilizing Vaginal Lavage: No Such Thing As a Normal Cycle

이 연구는 암컷 쥐와 관련된 실험 설계에서 고려해야 할 중요한 요소를 자세히 설명합니다. 더 큰 의미에서 이러한 데이터는 낙인을 줄이고 더 포괄적 인 진단 및 개입 도구의 개발을 돕는 역할을합니다.

질 세척을 활용한 설치류 에스트로우스 사이클 모니터링 : 정상주기와 같은 것은 없습니다.

The current methodology establishes a reproducible, standardized, and cost-effective approach to monitoring the estrous cycle of female Sprague Dawley ...

이 프로토콜은 포괄적이고 저렴한 비용 시간 효과적인 기술을 제공한다는 점에서 중요합니다. 번역 연구의 핵심 요소에 답하고 개인 및 그룹 수준에서 구성 요소 데이터를 분류합니다. 이 기술은 동물의 전체 프로파일에 관하여 추출될 수 있는 정보의 총량으로 인해 유리하다.여기에는 분류 구성 요소와 후속 결론이 포함됩니다. 이 기술은 심장학, 신경학 및 약리학을 포함한 광범위한 연구 분야에 대한 통찰력을 제공 할 수 있습니다. 이 기술은 생식 연구에만 적용되는 것은 아닙니다.사춘기 노인 쥐를위한 압축 스타일 홀드와 같은 나이에 적합한 홀드로 쥐를 다루는 것으로 시작하여 코가 땅에 뾰족한 흉부 위쪽 부위에 피사체를 배치하십시오. 주사기를 삽입하기 전에 꼬리를 부드럽게 구부려 피험자의 질 운하를 노출시킵니다. 주사기를 앞 손가락과 가운데 손가락으로 단단히 잡고 주사기의 끝을 평행 한 각도로 질 운하에 삽입하고 엄지 손가락으로 플런저를 안쪽으로 밀어 염화나트륨을 운하로 천천히 배출하십시오.주사기의 플런저를 상피 내벽에서 멀리 당겨 질 운하에서 염화나트륨을 추출하십시오. 각 세포 유형에 대한 기준을 사용하여 샘플에 존재하는 세포를 특성화하고 결과를 기록하십시오. 유핵화된 각질화된 상피 또는 정량화된 상피 세포는 들쭉날쭉하거나 각진 가장자리로 나타날 것이다.핵이 부족함에도 불구하고, 그것은 핵이 한때 유령 핵이라고 불리는 곳을 나타내는 세포 내에서 가벼운 둥근 영역을 나타낼 수 있습니다. 큰 유핵화된 상피, 또는 LNE 세포는 전형적으로 불규칙한 들쭉날쭉한 또는 각진 경계에 의해 둘러싸인 다각형 모양의 세포에 둥글다. 그들의 핵은 손상되거나 악화되는 세포의 핵에서 크로마틴의 돌이킬 수없는 응축과 관련된 온전한 것에서 퇴화 또는 pyknotic까지 다양 할 수 있습니다.핵은 세포 내의 세포질보다 적은 공간을 차지하며, 작은 상피 세포보다 핵 대 세포질 비율이 낮습니다. 백혈구는 콤팩트한 구형 세포입니다. 다른 모든 기술된 세포 유형과 비교했을 때 가장 작다.SNE 세포는 세포 내부의 세포질보다 더 큰 공간을 차지하는 둥근 핵을 가진 비 케라틴화 된 세포로, 큰 상피 세포에 비해 더 높은 핵 대 세포질 비율을 만듭니다. 네 개의 X와 같은 더 낮은 객관화를 사용하여 전체 셀 배열의 대표적인 뷰를 얻는다. 세포가 함께 뭉쳐 있는지, 고르게 분산되었는지, 무작위로 분산되어 있는지 여부를 기록하고 각 세포 유형의 특정 조직을 기록하십시오.그런 다음 시각적으로 추정하고 총 세포량을 스미지, 중간 또는 수로 기록하고 개별 세포 양을 존재하는 각 세포 유형의 백분율로 기록합니다. 이러한 범주화 구성 요소를 결합하면 어떤 에스트로우스 사이클 단계가 제공되는지 결정하십시오. 디스트러스 단계 내에서, 백혈구가 우세하거나 유일한 세포 유형임을 알 수 있다.이들은 전형적으로 처음에 뭉친 방식으로 배열되지만, 후기 단계에서 더 분산된다. 세포의 총 양은 비교적 낮을 수 있으며, 가장 자주 두 번째 또는 세 번째 날에 디스트러스 기간의 후기 단계에서 발생할 수 있습니다. 백혈구의 농축 가닥은이 단계에서 존재할 수있는 많은 양의 점액으로 인해 관찰 될 수 있습니다.백혈구를 수반하는 SNE 세포의 세포 가닥의 작은 덩어리는 전두부로의 전이의 후기 단계 동안 볼 수 있다. 질액은 안으로 전환되고, 완전히 전환되고, 디스트러스에서 빠져 나올 때, 점성이 있고 불투명하게 보입니다. 발정기 단계 동안, SNE 세포는 백혈구, LNE, 및 AKE 세포가 낮은 숫자로 발견될 수 있는 동안 우세한 세포이다.SNE 세포는 전형적으로 이 단계 동안 클러스터, 시트 또는 가닥으로 배열되고, 더 높은 배율에서 관찰될 수 있는 과립 외관을 갖는다. 질액은 피사체가 완전히 돌출부 단계로 전환되면 점성이 없고 투명해진다. AKE 세포는 발정 단계에서 우세하며, SNE 세포의 감소와 발정이 계속됨에 따라 세포의 수와 크기가 전반적으로 증가합니다.AKE 세포는 종종 케라틴 바의 형태로 클러스터링됩니다. 그들은 또한 돌출부에서 metestrus로의 전환에서 더 분산 될 수있는 유령 핵을 포함 할 수 있습니다. 질액은 쥐가 에스트로우스로 전환하고, 완전히 전환하고, 발정기에서 빠져 나올 때 점성이 없으며 투명합니다.쥐가 메테스러스로 전환함에 따라, 모든 세포 유형을 찾지만, LEU에 비해 종종 더 많은 양의 SNE 및 LNE 세포가 존재한다. 더 많은 양의 파편이 metestrus 및 발정 후 상피 세포 붕괴로 인한 전이 중에 관찰됩니다. 이 단계에서 모든 세포 유형이 다양한 양으로 보이기 때문에 일관된 배열이 부족합니다.그러나, 초기 단계에서 상피 세포에 근접하여 패킹되는 백혈구는 디스트러스로 전환될 때 뭉친 배열로 돌아갈 수 있다. 질액은 단계에서 점성이 없으며 투명하게 보입니다. 그리고 diestrus로 이동하는 동안보다 점성이 있고 불투명 한 모양으로 바뀝니다.각 단계 내에서, 많은 변이가 보여질 수 있는데, 예를 들어 디스트러스 단계 내에서, 상피 세포와 백혈구 둘 모두가 관찰되었다. 배열에서, 백혈구로 구성된 뭉친 점액 가닥, 백혈구의 초기 응집, 그리고 나중에 무작위 또는 심지어 지출이 또한 보였다. 질액 샘플을 수집 할 때, 부적절한 주사기 삽입으로 인해 질 운하 벽에서 편평 세포를 추출하는 것을 포함하여 반복적 인 세척을 보증하는 대표되지 않은 컬렉션이있었습니다.유일한 파편, 분류하기에는 너무 낮은 세포 수, 초점이 맞지 않는 세포 수. 막대 그래프에 단계 진행 상황을 그래프로 표시하는 것이 일반적이며, 이를 통해 연구원은 전체 사이클 패턴을 검사하고 주기성을 확인할 수 있습니다. 그리고 샘플은 이어서 사이클 길이 및 단계 진행 패턴에 의해 분석될 수 있다.에스트로우스 사이클 프로파일은 누적된 막대 그래프를 사용하여 만들 수 있으며, 쥐 당 또는 코호트 당 단계 진행을 추적합니다. 여기서 매일 분류 구성 요소는 하루 또는 스테이지별로 그래프로 표시됩니다. 범주화 구성 요소 데이터를 숫자로 구성하여 표준화된 범위를 만들고 통계를 수집할 수도 있습니다.최소 침습성이 되도록 기술을 연습하고 현미경 슬라이드에서 대표적인 샘플을 스캔하여 선택 편향을 줄입니다. 전반적으로, 정상적인 사이클과 같은 것은 없다는 것을 기억하십시오. 이 절차에 따라 운동 및 행동 패러다임과 같은 실험 변수가 도입 될 수 있습니다.이를 통해 연구는 사전에 동물의 기본 사이클링을 확립하고 나중에 특정 개입에 대한 호르몬 반응을 탐지 할 수 있습니다. 이 방법을 통해 연구자들은 성 스테로이드 호르몬과 다른 신체 시스템 간의 연결을 탐구 할 수 있습니다. 이것의 예는 성 스테로이드 호르몬에 대한 심장 수용체가 시스템 기능과 어떻게 관련되는지입니다.

Research

JoVE Journal

Biology

Monitoring Kinase and Phosphatase Activities Through the Cell Cycle by Ratiometric FRET

안달 Ratiometric하여 세포주기를 통해 키나제와 인산 가수 분해 효소 활동을 모니터링

F&ouml;rster resonance energy transfer (FRET)-based reporters1 allow the assessment of endogenous kinase and phosphatase activities in living cells. Such ...

연구

생물학

Analysis of Cell Cycle Position in Mammalian Cells

포유 동물 세포의 세포주기의 위치 분석

The regulation of cell proliferation is central to tissue morphogenesis during the development of multicellular organisms. Furthermore, loss of control of ...

Measuring Cell Cycle Progression Kinetics with Metabolic Labeling and Flow Cytometry

신진 대사 레이블 및 유동세포계측법와 세포주기 진행의 동력학 측정

Precise control of the initiation and subsequent progression through the various phases of the cell cycle are of paramount importance in proliferating ...

Performing Vaginal Lavage, Crystal Violet Staining, and Vaginal Cytological Evaluation for Mouse Estrous Cycle Staging Identification

마우스 Estrous 사이클 스테이징 확인을 위해 질 세척, 크리스탈 바이올렛의 착색 및 질 Cytological 평가를 수행

A rapid means of assessing reproductive status in rodents is useful not only in the study of reproductive dysfunction but is also required for the ...

Synchronization of Caulobacter Crescentus for Investigation of the Bacterial Cell Cycle

Synchronization of Caulobacter Crescentus for Investigation of the Bacterial Cell Cycle

의 동기화<em&gt; Caulobacter Crescentus</em&gt; 세균 세포주기의 조사에 대한

The cell cycle is important for growth, genome replication, and development in all cells.  In bacteria, studies of the cell cycle have focused largely on ...

Temporal Tracking of Cell Cycle Progression Using Flow Cytometry without the Need for Synchronization

동기화를 필요로하지 않고 유동 세포 계측법을 사용하여 세포주기 진행의 시간적 추적

This protocol describes a method to permit the tracking of cells through the cell cycle without requiring the cells to be synchronized. Achieving cell ...

Experimental Approaches to Study Mitochondrial Localization and Function of a Nuclear Cell Cycle Kinase, Cdk1

실험 접근법은 미토콘드리아 현지화 및 핵 세포주기 키나제,는 Cdk1의 기능을 연구하는

Although mitochondria possess their own transcriptional machinery, merely 1% of mitochondrial proteins are synthesized inside the organelle. The ...

Application of Genetically Encoded Fluorescent Nitric Oxide (NO&#8226;) Probes, the geNOps, for Real-time Imaging of NO&#8226; Signals in Single Cells

Application of Genetically Encoded Fluorescent Nitric Oxide NOÃƒÆ’Ã‚Â¢ÃƒÂ¢Ã¢â‚¬Å¡Ã‚Â¬Ãƒâ€šÃ‚Â¢ Probes, the geNOps, for Real-time Imaging of NOÃƒÆ’Ã‚Â¢ÃƒÂ¢Ã¢â‚¬Å¡Ã‚Â¬Ãƒâ€šÃ‚Â¢ Signals in Single Cells

유전자 인코딩 된 형광 산화 질소의 응용 프로그램 (• NO) 단일 세포에서 NO • 신호의 실시간 이미징을위한 프로브의 geNOps,

Nitric Oxide (NO&#8226;) is a small radical, which mediates multiple important cellular functions in mammals, bacteria and plants. Despite the existence ...

Combining Mitotic Cell Synchronization and High Resolution Confocal Microscopy to Study the Role of Multifunctional Cell Cycle Proteins During Mitosis

유사 분열 동안 다기능 세포 주기 단백질의 역할을 연구 하기 Mitotic 세포 동기화와 고해상도 Confocal 현미경 검사 법

Study of the various regulatory events of the cell cycle in a phase-dependent manner provides a clear understanding about cell growth and division. The ...

Live-Cell Imaging of the Life Cycle of Bacterial Predator Bdellovibrio bacteriovorus using Time-Lapse Fluorescence Microscopy

Live-Cell Imaging of the Life Cycle of Bacterial Predator Bdellovibrio bacteriovorus using Time-Lapse Fluorescence Microscopy

시간 경과 형광 현미경 검사를 사용하여 세균 육식 동물 Bdellovibrio 박테리오보루스의 라이프 사이클의 라이브 세포 이미징

Bdellovibrio bacteriovorus is a small gram-negative, obligate predatory bacterium that kills other gram-negative bacteria, including harmful pathogens. ...