Name: synthesis and characterization of mrna-loaded poly(beta aminoesters) nanoparticles for vaccination purposes
Uploaded: 2021-08-13T14:00:00
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Le soutien financier de MINECO/FEDER (subventions SAF2015-64927-C2-2-R, RTI2018-094734-B-C22 et COV20/01100) est reconnu. CGF a reconnu sa bourse de doctorat IQS.

1. Synthèse du polymère pBAE avec des oligopeptides finaux (OM-pBAE)
<ol><li>Polymérisation du C6-pBAE<ol>
<li>Ajouter le 5-amino-1-pentanol (38 mmol; MW = 103,16 Da) 1-hexylamine (38 mmol; MW = 101,19 Da) dans une fiole en verre à fond rond (100 mL). Ensuite, ajouter le diacrylate de 1,4-butanediol (82 mmol; MW = 198,22 Da).</li>
		<li>Préchauffez le bain d’huile de silicone à 90 °C, placez la fiole à fond rond dans le bain d’huile et remuez le mélange à l’aide d’une barre d’agitation magnétique p...

<ol>
	<li>Chumakov, K., Benn, C. S., Aaby, P., Kottilil, S., Gallo, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Can+existing+live+vaccines+prevent+COVID-19.">Can existing live vaccines prevent COVID-19.</a> Science. 368 (6496), 1187-1188 (2020).</li><li>Zhang, C., Maruggi, G., Shan, H., Li, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Advances+in+mRNA+vaccines+for+infectious+diseases.">Advances in mRNA vaccines for infectious diseases.</a> Frontiers in Immunology. 10, 1-13 (2019).</li><li>Wherry, E. J., Jaffee, E. 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N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cationic+lipid-assisted+nanoparticles+for+delivery+of+mRNA+cancer+vaccine.">Cationic lipid-assisted nanoparticles for delivery of mRNA cancer vaccine.</a> Biomaterials Science. 6 (11), 3009-3018 (2018).</li><li>Le Moignic, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preclinical+evaluation+of+mRNA+trimannosylated+lipopolyplexes+as+therapeutic+cancer+vaccines+targeting+dendritic+cells.">Preclinical evaluation of mRNA trimannosylated lipopolyplexes as therapeutic cancer vaccines targeting dendritic cells.</a> Journal of Controlled Release. 278, 110-121 (2018).</li><li>Banerji, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=mRNA+vaccines+to+prevent+COVID-19+disease+and+reported+allergic+reactions:+Current+evidence+and+approach.">mRNA vaccines to prevent COVID-19 disease and reported allergic reactions: Current evidence and approach.</a> Journal of Allergy and Clinical Immunology: In Practice. 9 (4), 1423-1437 (2021).</li><li>Kaczmarek, J. C., Kowalski, P. S., Anderson, D. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Advances+in+the+delivery+of+RNA+therapeutics:+from+concept+to+clinical+reality.">Advances in the delivery of RNA therapeutics: from concept to clinical reality.</a> Genome Medicine. 9 (1), 1-16 (2017).</li><li>Dosta, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Delivery+of+anti-microRNA-712+to+inflamed+endothelial+cells+using+poly(&#946;-amino+ester)+nanoparticles+conjugated+with+VCAM-1+targeting+peptide.">Delivery of anti-microRNA-712 to inflamed endothelial cells using poly(&#946;-amino ester) nanoparticles conjugated with VCAM-1 targeting peptide.</a> Advanced Healthcare Materials. , 1-11 (2021).</li><li>Segovia, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hydrogel+doped+with+nanoparticles+for+local+sustained+release+of+siRNA+in+breast+cancer.">Hydrogel doped with nanoparticles for local sustained release of siRNA in breast cancer.</a> Advanced Healthcare Materials. 4 (2), 271-280 (2015).</li></ol>

Après l’apparition de la pandémie de Covid-19 l’année dernière, l’importance des vaccins en termes de contrôle des maladies infectieuses s’est manifestée comme une composante critique8. Les efforts des scientifiques du monde entier ont permis la mise sur le marché de nombreux vaccins. Pour la première fois dans l’histoire, les vaccins à ARNm ont démontré leur succès supposé auparavant, grâce à leur conception rapide en raison de leur capacité à s’adapter à tout nouvel...

Les maladies infectieuses ont représenté une grave menace pour des millions d’êtres humains dans le monde et restent l’une des principales causes de décès dans certains pays en développement. La vaccination prophylactique a été l’une des interventions les plus efficaces de la société moderne pour prévenir et contrôler les maladies infectieuses1,2. Ces jalons critiques de la science dans la pertinencedu 20esiècle ont été remarqués par la récente pandémie mondiale de Covid-19 causée par le virus SARS-CoV-23. Reconnaissant l’importance de disposer de vaccins efficaces pour réduire la dissémination de la maladie, les efforts de coopération de toutes les communautés biomédicales ont abouti à la mise sur le marché de nombreux vaccins prophylactiques en moins d’un an4.
Traditionnellement, les vaccins étaient composés de virus atténués (vivants, à virulence réduite) ou inactivés (particules de mort). Cependant, pour certaines maladies sans marge d’erreurs de sécurité, les particules virales ne sont pas possibles et des sous-unités protéiques sont utilisées à la place. Néanmoins, les sous-unités ne permettent généralement pas la combinaison de plus d’un épitope / antigène, et des adjuvants sont nécessaires pour améliorer la puissance vaccinale5,6. Par conséquent, le besoin de nouveaux types de vaccins est évident.
Comme démontré pendant la pandémie actuelle, de nouveaux candidats vaccins à base d’acides nucléiques peuvent être avantageux pour éviter de longs processus de développement et offrir une grande polyvalence tout en produisant, en même temps, une immunisation vitale pour les patients. C’est le cas des vaccins à ARNm, qui ont été initialement conçus comme des vaccins expérimentaux contre le cancer. Grâce à leur capacité naturelle à produire des réponses de lymphocytes T spécifiques à l’antigène3,5,6,7. Étant l’ARNm la molécule qui code pour la protéine antigénique, ne changeant que la même chose, le vaccin peut être rapidement adapté pour immuniser d’autres variantes du même micro-organisme, différentes souches, d’autres micro-organismes infectieux, ou même devenir un traitement immunothérapeutique du cancer. De plus, ils sont avantageux en termes de coûts de production à grande échelle. Cependant, l’ARNm a un obstacle important qui entrave leur administration nue: sa stabilité et son intégrité sont compromises dans des milieux physiologiques, pleins de nucléases. Pour cette raison, l’utilisation d’un support nanométrique qui le protège et vectorise l’ARNm vers les cellules présentatrices d’antigène est nécessaire2,8.
Dans ce contexte, les poly(bêta-aminoesters) (pBAE) sont une classe de polymères biocompatibles et biodégradables qui ont démontré une capacité remarquable à complexer l’ARNm dans des particules nanométriques, grâce à leurs charges cationiques 9,10,11. Ces polymères sont composés de liaisons esters, ce qui facilite leur dégradation par les estérases dans des conditions physiologiques. Parmi les candidats de la bibliothèque pBAE, ceux fonctionnalisés avec des oligopeptides cationiques finaux ont montré une plus grande capacité à former de petites nanoparticules pour pénétrer efficacement dans les cellules par endocytose et transfecter le matériel génétique encapsulé. De plus, grâce à leur capacité tampon, l’acidification du compartiment endosomique permet une fuite endosomale12,13. À savoir, un type spécifique de pBAE, y compris des fractions hydrophobes sur leur épine dorsale (le soi-disant C6 pBAE) pour améliorer leur stabilité et la combinaison d’oligopeptides finaux (60% de polymère modifié avec une tri-lysine et 40% du polymère avec une tri-histidine) qui transfecte sélectivement les cellules présentatrices d’antigènes après administration parentérale et produit la présentation de l’antigène codé par ARNm suivie de l’immunisation des souris a été récemment publié14 . En outre, il a également été démontré que ces formulations pouvaient contourner l’une des principales étapes goulots d’étranglement des formulations de nanomédecine: la possibilité de les lyophiliser sans perdre leur fonctionnalité, ce qui permet une stabilité à long terme dans des environnements mous et secs15.
Dans ce contexte, l’objectif du protocole actuel est de mettre la procédure de formation des nanoparticules d’ARNm à la disposition de la communauté scientifique en donnant une description des étapes critiques du protocole et en permettant la production de vaccins efficaces pour la prévention des maladies infectieuses et les applications de traitement des tumeurs.
Le protocole suivant décrit l’entraînement complet pour synthétiser des polymères poly(aminoesters bêta) modifiés par l’extrémité d’oligopeptides - OM-pBAE qui seront ensuite utilisés pour la synthèse de nanoparticules. Dans le protocole, la formulation de nanoparticules est également incluse. En outre, des étapes critiques pour le succès de la procédure et des résultats représentatifs sont également fournis pour s’assurer que les formulations résultantes remplissent les caractéristiques de caractérisation de contrôle de la qualité requises pour définir un résultat positif ou négatif. Ce protocole est résumé à la figure 1.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>1,4-butanediol diacrylate</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>123048</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1-hexylamine</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>219703</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>5-amino-1-pentanol</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>411744</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acetone</td>
			<td>Panreac</td>
			<td>141007</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CD11b antibody</td>
			<td>BD</td>
			<td>550993</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CD86 antibody</td>
			<td>Bioligend</td>
			<td>105007</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chlor hydroxhyde</td>
			<td>Panreac</td>
			<td>181023</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chloroform-d</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>151823</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cys-His-His-His peptide</td>
			<td>Ontores</td>
			<td>Custom</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cys-Lys-Lys-Lys peptide</td>
			<td>Ontores</td>
			<td>Custom</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>D2O</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>151882</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DEPC reagent for Rnase free water</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>D5758</td>
			<td>This reagent is important to treat MilliQ water to remove any RNases of the buffers</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Diethyl eter</td>
			<td>Panreac</td>
			<td>212770</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>dimethyl sulfoxide</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>276855</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HEPES</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>H3375</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>mRNA EGFP</td>
			<td>TriLink Technologies</td>
			<td>L-7601</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>mRNA OVA</td>
			<td>TriLink Technologies</td>
			<td>L-7610</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RiboGreen kit</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>R11490</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>sodium acetate</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>71196</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>sucrose</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>S0389</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trifluoroacetic acid</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>302031</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypsin-EDTA</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>11570626</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>&#945;-mouse AlexaFluor488 antibody</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>Ab450105</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Equipment</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nanoparticle Tracking Analyzer</td>
			<td>Malvern Panalytical</td>
			<td>NanoSight NS300</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nuclear Magnetic Ressonance Spectrometer</td>
			<td>Varian</td>
			<td>400 MHz</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ZetaSizer</td>
			<td>Malvern Panalytical</td>
			<td>Nano ZS</td>
			<td>For zeta potential and hydrodynamic size determination</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Software</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NanoSight NTA software</td>
			<td>Malvern Panalytical</td>
			<td>MAN0515-02-EN-00</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NovoExpress Software</td>
			<td>Agilent</td>
			<td>Not specified</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ZetaSizer software</td>
			<td>Malvern Panalytical</td>
			<td>DTS Application</td>
			<td>To analyze surface charge and hydrodynamic sizes</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

synthesis and characterization of mrna-loaded poly(beta aminoesters) nanoparticles for vaccination purposes

La vaccination a été l’un des succès majeurs de la société moderne et est indispensable pour contrôler et prévenir les maladies. Les vaccins traditionnels étaient composés de tout ou de fractions de l’agent infectieux. Cependant, des défis demeurent et les nouvelles technologies vaccinales sont obligatoires. Dans ce contexte, l’utilisation de l’ARNm à des fins d’immunisation a montré une performance accrue, comme en témoigne l’approbation rapide de deux vaccins à ARNm prévenant l’infection par le SRAS-CoV-2. Au-delà du succès dans la prévention des infections virales, les vaccins à ARNm peuvent également être utilisés pour des applications thérapeutiques contre le cancer.
Néanmoins, l’instabilité de l’ARNm et sa clairance rapide du corps en raison de la présence de nucléases rendent son administration nue impossible. Dans ce contexte, les nanomédicaments, et en particulier les nanoparticules polymères, sont des systèmes critiques d’administration d’ARNm. Ainsi, le but de cet article est de décrire le protocole de formulation et de test d’un candidat vaccin à ARNm basé sur les nanoparticules polymères propriétaires. La synthèse et la caractérisation chimique des polymères poly(bêta-aminoesters) utilisés, leur complexation avec l’ARNm pour former des nanoparticules et leur méthodologie de lyophilisation seront discutés ici. Il s’agit d’une étape cruciale pour réduire les coûts de stockage et de distribution. Enfin, les tests requis pour démontrer leur capacité à transfecter in vitro et à modéliser des cellules dendritiques matures seront indiqués. Ce protocole profitera à la communauté scientifique travaillant sur la vaccination en raison de sa grande polyvalence qui permet à ces vaccins de prévenir ou de guérir une grande variété de maladies.

Synthèse et caractérisation des polymères La procédure de synthèse OM-pBAE est donnée à la figure 2. Comme le montre la figure 2A, la première étape pour obtenir l’OM-pBAE consiste à synthétiser le C6-pBAE en ajoutant les amines (1-hexylamine et 5-amino-1-pentanol, rapport 1:1) au diacrylate (diacrylate de 1,4-butanediol). Cette réaction est réalisée à 90 °C pendant 20 h et sous agitation constante. Ensuite, une solution d?...

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Synthesis and Characterization of mRNA-Loaded PolyBeta Aminoesters Nanoparticles for Vaccination Purposes

Ici, un protocole simple est présenté pour produire des nanoparticules d’ARNm à base de polymères poly(bêta aminoesster), faciles à adapter en changeant l’ARNm encapsulé. Le flux de travail de synthèse des polymères, des nanoparticules et de leur caractérisation essentielle in vitro est également décrit. Une preuve de concept concernant la vaccination est également ajoutée.

Synthèse et caractérisation de nanoparticules poly(bêta-aminoesters) chargées d’ARNm à des fins de vaccination

Vaccination has been one of the major successes of modern society and is indispensable in controlling and preventing disease. Traditional vaccines were ...

Ce protocole est important car il démontre comment préparer des nanoparticules polymères, des acides nucléiques encapsulés en une seule étape. Les principaux avantages de cette technique sont la polyvalence, car elle peut être appliquée à différents acides nucléiques et types de cellules. L’utilisation de procédures simples pour la préparation des particules, telles que le pipetage de haut en bas, et la possibilité d’étendre la stabilité des nanoparticules et des conditions du tambour par lyophilisation.Laura Olmo, Coral Garcia-Fernandez, Maria Stampa Lopez-Pinto et Maria Navalon-Lopez, doctorante de notre laboratoire et Marta Diaz-Caballero, post-doctorante pour notre laboratoire, feront la démonstration de la procédure. Pour la formation de polyplexes, décongelez les polymères préalablement préparés, le peptide C6, les esters poly bêta-aminés et vortexez la solution. Après avoir pipeté le mélange de polymère de haut en bas, préparer une solution de 12,5 millimolaires dans de l’acétate de sodium.Vortex la solution et attendez 10 minutes. Ensuite, préparez l’ARNm à 0,5 milligramme par millilitre et mélangez-le par pipetage. Vortex la solution de polymère à nouveau, puis mélanger la solution de matériel génétique dans la solution de polymère dans un rapport de un à un dans un tube de microcentrifugation et incuber le tube à 25 degrés Celsius pendant 30 minutes dans un thermobloc.Après l’incubation, précipiter le mélange avec une à deux eau sans RNase en ajoutant l’échantillon à un tube de microcentrifugation contenant l’eau, puis pour inclure les excipients, ajouter un tas de 20 millimolaires et une solution de saccharose à 4% dans le même volume que le mélange d’ARNm et d’esters poly bêta-aminés, et mélangé par pipetage. Pour la lyophilisation après avoir congelé la solution de polyplex à moins 80 degrés Celsius pendant une heure, effectuez le séchage primaire, puis stockez immédiatement les polyplexes à moins 20 degrés Celsius pour éviter la réhydratation. Pour la remise en suspension polyplexe, retirez les nanoparticules lyophilisées du congélateur à moins 20 degrés Celsius et ajoutez rapidement la quantité correspondante d’eau hydrogénée profonde pour disperser à nouveau le solide et atteindre la concentration souhaitée.Pipetter doucement jusqu’à la remise en suspension totale et une fois dissous, pipeter vigoureusement de haut en bas en évitant les bulles. Après 24 heures de transfection pour évaluation qualitative par microscopie à fluorescence, placez la plaque de 96 puits contenant les cellules Hela transfectées sur le microscope et commencez à visualiser en utilisant l’objectif 10 fois. Tout d’abord, appliquez une balance des blancs pour créer une référence d’arrière-plan pour le logiciel, puis acquérez une image pour la superposer à l’image de fluorescence pendant l’analyse.Passez le mode microscope en mode réflexion et déplacez la roue filtrante vers le laser bleu pour visualiser l’EGFP. Ensuite, acquérez des images pour toutes les conditions ou puits en utilisant le même temps d’exposition. Pour l’évaluation quantitative par cytométrie en flux, laver les cellules Hela transfectées dans une plaque de 96 puits en utilisant 100 microlitres de PBS par puits.Après avoir aspiré le PBS à 25 microlitres de trypsine par puits et incuber à 37 degrés Celsius pendant cinq minutes. Une fois les cellules détachées, ajoutez le milieu précédemment récupéré pour inactiver la trypsine, puis fixez les cellules en ajoutant 31,25 microlitres de 10% de formol par puits et en incubant pendant 20 minutes. Allumez ensuite le cytomètre en flux et le logiciel, puis configurez les conditions appropriées pour l’expérience, y compris le type de volume d’échantillon de plaque et d’autres paramètres tels que l’agitation et le rinçage entre les échantillons.Configurez les paramètres appropriés pour quantifier le pourcentage de cellules transfectées positivement en visualisant d’abord les données de flux sur la lumière diffusée vers l’avant par rapport à la lumière diffusée latéralement pour distinguer les cellules des débris. Et puis tracer un autre nuage de points, en comparant l’amplitude par rapport à la hauteur à la porte et discriminer les cellules individuelles. Un jour avant la transfection, plaque 10 000 cellules JAWS II par puits dans une plaque de 96 puits pour une incubation de nuit.Le lendemain, transfectez les cellules avec 0,6 microgramme d’ARNm par puits et incubez la plaque pendant 24 heures dans un incubateur à air sec à 37 degrés Celsius et 5% de dioxyde de carbone. Le lendemain, lavez les cellules restantes dans le puits avec 25 microlitres de PBS. Après avoir aspiré le PBS à 25 microlitres de trypsine et incubé la plaque pendant cinq minutes à 37 degrés Celsius pour détacher les cellules.Arrêtez la réaction de trypsine en ajoutant le média précédemment récupéré sur le puits correspondant. Ensuite, centrifugez la plaque, aspirez le support et fixez les cellules en ajoutant 50 microlitres de PBS et 2,5% de formol par puits, puis en incubant la plaque à quatre degrés Celsius pendant 20 minutes, centrifugez la plaque. Ajoutez ensuite 50 microlitres de PBS et 3% de BSA par puits et incubateur pendant 30 minutes à quatre degrés Celsius.Après l’incubation, centrifugez à nouveau la plaque, puis ajoutez 50 microlitres de l’anticorps ovalbumine de souris dans pbS et 3% BSA et incubateur pendant 30 minutes à quatre degrés Celsius. Répétez l’étape de centrifugation, puis lavez les cellules avec 50 microlitres de PBS. Après avoir aspiré le PBS, ajoutez les anticorps secondaires et incubez pendant une heure à quatre degrés Celsius.Après l’incubation, répétez les étapes de centrifugation et de lavage. Ensuite, remettez en suspension les cellules et 100 microlitres de PBS et 2,5% de formol pour l’analyse de cytométrie en flux. La caractérisation physico-chimique de l’ARNm GFP frais et lyophilisé encapsulant des nanoparticules ne montre aucune différence significative de taille et d’indice de polydispersité.La microscopie électronique à transmission des polyplexes confirme la formation de nanoparticules sphériques et mono dispersées d’environ 50 nanomètres de diamètre. Les données d’efficacité d’encapsulation d’un peptide Lego et de poly bêta-aminoesters modifiés polyplexes encapsulant la GFP, ou ovalbumine, ne montrent aucune différence significative selon le type d’ARNm. Une analyse qualitative de l’expression de l’EGFP, 24 heures après la transaction dans la lignée cellulaire JAWS II est présentée ici.Quantitativement par rapport au contrôle négatif. Le pourcentage de cellules GFP positives est significativement plus élevé et comparable à un témoin positif effectué avec un réactif de transfection classique. L’oligopeptide chargé d’ARNm ovalbumine et les nanoparticules d’ester poly bêta-amino-aminé modifiées peuvent activer les cellules dendritiques, comme en témoigne l’expression significativement plus élevée des marqueurs membranaires CD11b et CD86 dans les cellules transfectées par rapport aux cellules non transfectées.Notre plateforme de vaccination basée sur l’utilisation de l’ARNm comme principe actif, ainsi que nos polymères exclusifs peuvent être adaptés pour être utilisés en prophylaxie ainsi que pour les thérapies contre le cancer. Nous pouvons utiliser notre technologie pour mettre en évidence cette contribution dans les immunothérapies contre le cancer. puisque nous pouvons encapsuler des antigènes associés à la tumeur dans nos nanoparticules et faire un changement dans les traitements contre le cancer.

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Synthesis and Characterization of mRNA-Loaded Poly(Beta Aminoesters) Nanoparticles for Vaccination Purposes

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Formulation de nanoparticules polymériques dibloc par la technique nanoprécipitation

Nanotechnology is a relatively new branch of science that involves harnessing the unique properties of particles that are nanometers in scale ...

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Bio-ingénierie

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