Name: synthesis and characterization of mrna-loaded poly(beta aminoesters) nanoparticles for vaccination purposes
Uploaded: 2021-08-13T14:00:00
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Se agradece el apoyo financiero del MINECO/FEDER (subvenciones SAF2015-64927-C2-2-R, RTI2018-094734-B-C22 y COV20/01100). CGF reconoció su beca de doctorado IQS.

1. Síntesis de polímero pBAE con oligopéptidos finales (OM-pBAE)
<ol><li>Polimerización de C6-pBAE<ol>
<li>Añadir 5-amino-1-pentanol (38 mmol; MW = 103.16 Da) 1-hexilamina (38 mmol; MW = 101,19 Da) en un matraz de vidrio de fondo redondo (100 mL). Luego, agregue diacrilato de 1,4-butanediol (82 mmol; MW = 198,22 Da).</li>
		<li>Precaliente el baño de aceite de silicona a 90 °C, coloque el matraz de fondo redondo en el baño de aceite y revuelva la mezcla con la ayuda de una barra de agitación magnética durante...

<ol>
	<li>Chumakov, K., Benn, C. S., Aaby, P., Kottilil, S., Gallo, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Can+existing+live+vaccines+prevent+COVID-19.">Can existing live vaccines prevent COVID-19.</a> Science. 368 (6496), 1187-1188 (2020).</li><li>Zhang, C., Maruggi, G., Shan, H., Li, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Advances+in+mRNA+vaccines+for+infectious+diseases.">Advances in mRNA vaccines for infectious diseases.</a> Frontiers in Immunology. 10, 1-13 (2019).</li><li>Wherry, E. J., Jaffee, E. 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N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cationic+lipid-assisted+nanoparticles+for+delivery+of+mRNA+cancer+vaccine.">Cationic lipid-assisted nanoparticles for delivery of mRNA cancer vaccine.</a> Biomaterials Science. 6 (11), 3009-3018 (2018).</li><li>Le Moignic, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preclinical+evaluation+of+mRNA+trimannosylated+lipopolyplexes+as+therapeutic+cancer+vaccines+targeting+dendritic+cells.">Preclinical evaluation of mRNA trimannosylated lipopolyplexes as therapeutic cancer vaccines targeting dendritic cells.</a> Journal of Controlled Release. 278, 110-121 (2018).</li><li>Banerji, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=mRNA+vaccines+to+prevent+COVID-19+disease+and+reported+allergic+reactions:+Current+evidence+and+approach.">mRNA vaccines to prevent COVID-19 disease and reported allergic reactions: Current evidence and approach.</a> Journal of Allergy and Clinical Immunology: In Practice. 9 (4), 1423-1437 (2021).</li><li>Kaczmarek, J. C., Kowalski, P. S., Anderson, D. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Advances+in+the+delivery+of+RNA+therapeutics:+from+concept+to+clinical+reality.">Advances in the delivery of RNA therapeutics: from concept to clinical reality.</a> Genome Medicine. 9 (1), 1-16 (2017).</li><li>Dosta, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Delivery+of+anti-microRNA-712+to+inflamed+endothelial+cells+using+poly(&#946;-amino+ester)+nanoparticles+conjugated+with+VCAM-1+targeting+peptide.">Delivery of anti-microRNA-712 to inflamed endothelial cells using poly(&#946;-amino ester) nanoparticles conjugated with VCAM-1 targeting peptide.</a> Advanced Healthcare Materials. , 1-11 (2021).</li><li>Segovia, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hydrogel+doped+with+nanoparticles+for+local+sustained+release+of+siRNA+in+breast+cancer.">Hydrogel doped with nanoparticles for local sustained release of siRNA in breast cancer.</a> Advanced Healthcare Materials. 4 (2), 271-280 (2015).</li></ol>

Después del brote de la pandemia de Covid-19 el año pasado, la importancia de las vacunas en términos de control de enfermedades infecciosas se ha manifestado como un componente crítico8. Los esfuerzos de científicos de todo el mundo han permitido el lanzamiento al mercado de muchas vacunas. Por primera vez en la historia, las vacunas de ARNm han demostrado su éxito previamente hipotético, gracias a su rápido diseño debido a su capacidad para adaptarse a cualquier antígeno nuevo en unos<...

Las enfermedades infecciosas han representado una grave amenaza para millones de seres humanos en todo el mundo y siguen siendo una de las principales causas de muerte en algunos países en desarrollo. La vacunación profiláctica ha sido una de las intervenciones más eficaces de la sociedad moderna para prevenir y controlar las enfermedadesinfecciosas1,2. Estos hitos críticos de la ciencia en relevancia del sigloXXhan sido señalados por la reciente pandemia mundial de Covid-19 causada por el virus SARS-CoV-23. Reconociendo la importancia de contar con vacunas eficientes para reducir la diseminación de la enfermedad, los esfuerzos cooperativos de todas las comunidades biomédicas han dado como resultado con éxito muchas vacunas profilácticas en el mercado en menos de un año4.
Tradicionalmente, las vacunas se componían de virus atenuados (vivos, de virulencia reducida) o inactivados (partículas de muerte). Sin embargo, para algunas enfermedades sin margen de errores de seguridad, las partículas virales no son posibles, y en su lugar se utilizan subunidades de proteínas. Sin embargo, las subunidades generalmente no permiten la combinación de más de un epítopo / antígeno, y se requieren adyuvantes para mejorar la potencia de vacunación5,6. Por lo tanto, la necesidad de nuevos tipos de vacunas es clara.
Como se demostró durante la pandemia actual, las nuevas vacunas candidatas basadas en ácidos nucleicos pueden ser ventajosas en términos de evitar largos procesos de desarrollo y proporcionar una alta versatilidad al tiempo que producen, al mismo tiempo, una inmunización vital para el paciente. Este es el caso de las vacunas de ARNm, que inicialmente fueron diseñadas como vacunas experimentales contra el cáncer. Gracias a su capacidad natural para producir respuestas de células T específicas de antígenos3,5,6,7. Al ser el ARNm la molécula que codifica la proteína antigénica, solo cambiando la misma, la vacuna puede adaptarse rápidamente para inmunizar otras variantes del mismo microorganismo, diferentes cepas, otros microorganismos infecciosos, o incluso convertirse en un tratamiento inmunoterapéutico contra el cáncer. Además, son ventajosos en términos de costos de producción a gran escala. Sin embargo, el ARNm tiene un obstáculo importante que dificulta su administración desnuda: su estabilidad e integridad se ven comprometidas en medios fisiológicos, llenos de nucleasas. Por esta razón, se requiere el uso de un portador nanométrico que lo proteja y vectorice el ARNm a las células presentadoras de antígenos2,8.
En este contexto, los poli(beta aminoésteres) (pBAE) son una clase de polímeros biocompatibles y biodegradables que demostraron una notable capacidad para complejar el ARNm en partículas nanométricas, gracias a sus cargas catiónicas9,10,11. Estos polímeros están compuestos por enlaces éster, lo que facilita su degradación por las esterasas en condiciones fisiológicas. Entre los candidatos a la biblioteca pBAE, los funcionalizados con oligopéptidos catiónicos finales mostraron una mayor capacidad para formar nanopartículas pequeñas para penetrar eficientemente en las células a través de la endocitosis y transfectar el material genético encapsulado. Además, gracias a su capacidad de amortiguación, la acidificación del compartimento endosómico permite el escape endosomal12,13. A saber, un tipo específico de pBAE, incluyendo partes hidrofóbicas en su columna vertebral (el llamado C6 pBAE) para mejorar su estabilidad y combinación de oligopéptidos finales (60% de polímero modificado con una tri-lisina y 40% del polímero con una tri-histidina) que transfecta selectivamente las células presentadoras de antígenos después de la administración parenteral y produce la presentación del antígeno codificado en ARNm seguido de la inmunización de ratones se ha publicado recientemente14 . Además, también se ha demostrado que estas formulaciones podrían sortear uno de los principales pasos de cuello de botella de las formulaciones de nanomedicina: la posibilidad de liofilizarlas sin perder su funcionalidad, lo que permite la estabilidad a largo plazo en ambientes secos suaves15.
En este contexto, el objetivo del protocolo actual es poner a disposición de la comunidad científica el procedimiento para la formación de las nanopartículas de ARNm, dando una descripción de los pasos críticos en el protocolo y permitiendo la producción de vacunas eficientes para la prevención de enfermedades infecciosas y aplicaciones de tratamiento tumoral.
El siguiente protocolo describe el entrenamiento completo para sintetizar polímeros poli(beta aminoésteres) modificados al final del oligopéptido - OM-pBAE que se utilizarán para la síntesis de nanopartículas. En el protocolo, también se incluye la formulación de nanopartículas. Además, también se proporcionan pasos críticos para el éxito del procedimiento y resultados representativos para garantizar que las formulaciones resultantes cumplan con las características de caracterización de control de calidad requeridas para definir un resultado positivo o negativo. Este protocolo se resume en la Figura 1.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>1,4-butanediol diacrylate</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>123048</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1-hexylamine</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>219703</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>5-amino-1-pentanol</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>411744</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acetone</td>
			<td>Panreac</td>
			<td>141007</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CD11b antibody</td>
			<td>BD</td>
			<td>550993</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CD86 antibody</td>
			<td>Bioligend</td>
			<td>105007</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chlor hydroxhyde</td>
			<td>Panreac</td>
			<td>181023</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chloroform-d</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>151823</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cys-His-His-His peptide</td>
			<td>Ontores</td>
			<td>Custom</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cys-Lys-Lys-Lys peptide</td>
			<td>Ontores</td>
			<td>Custom</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>D2O</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>151882</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DEPC reagent for Rnase free water</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>D5758</td>
			<td>This reagent is important to treat MilliQ water to remove any RNases of the buffers</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Diethyl eter</td>
			<td>Panreac</td>
			<td>212770</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>dimethyl sulfoxide</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>276855</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HEPES</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>H3375</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>mRNA EGFP</td>
			<td>TriLink Technologies</td>
			<td>L-7601</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>mRNA OVA</td>
			<td>TriLink Technologies</td>
			<td>L-7610</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RiboGreen kit</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>R11490</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>sodium acetate</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>71196</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>sucrose</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>S0389</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trifluoroacetic acid</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>302031</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypsin-EDTA</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>11570626</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>&#945;-mouse AlexaFluor488 antibody</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>Ab450105</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Equipment</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nanoparticle Tracking Analyzer</td>
			<td>Malvern Panalytical</td>
			<td>NanoSight NS300</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nuclear Magnetic Ressonance Spectrometer</td>
			<td>Varian</td>
			<td>400 MHz</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ZetaSizer</td>
			<td>Malvern Panalytical</td>
			<td>Nano ZS</td>
			<td>For zeta potential and hydrodynamic size determination</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Software</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NanoSight NTA software</td>
			<td>Malvern Panalytical</td>
			<td>MAN0515-02-EN-00</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NovoExpress Software</td>
			<td>Agilent</td>
			<td>Not specified</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ZetaSizer software</td>
			<td>Malvern Panalytical</td>
			<td>DTS Application</td>
			<td>To analyze surface charge and hydrodynamic sizes</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

synthesis and characterization of mrna-loaded poly(beta aminoesters) nanoparticles for vaccination purposes

La vacunación ha sido uno de los mayores éxitos de la sociedad moderna y es indispensable para controlar y prevenir enfermedades. Las vacunas tradicionales estaban compuestas por enteros o fracciones del agente infeccioso. Sin embargo, siguen existiendo desafíos y las nuevas tecnologías de vacunación son obligatorias. En este contexto, el uso de ARNm con fines de inmunización ha demostrado un mejor rendimiento, como lo demuestra la rápida aprobación de dos vacunas de ARNm que previenen la infección por SARS-CoV-2. Más allá del éxito en la prevención de infecciones virales, las vacunas de ARNm también se pueden utilizar para aplicaciones terapéuticas contra el cáncer.
Sin embargo, la inestabilidad del ARNm y su rápida eliminación del cuerpo debido a la presencia de nucleasas hace que su entrega desnuda no sea posible. En este contexto, las nanomedicamentos, y específicamente las nanopartículas poliméricas, son sistemas críticos de administración de ARNm. Por lo tanto, el objetivo de este artículo es describir el protocolo para la formulación y prueba de un candidato a vacuna de ARNm basado en las nanopartículas poliméricas patentadas. La síntesis y caracterización química de los polímeros poli(beta aminoésteres) utilizados, su complejación con ARNm para formar nanopartículas y su metodología de liofilización se discutirán aquí. Este es un paso crucial para disminuir los costos de almacenamiento y distribución. Por último, se indicarán las pruebas necesarias para demostrar su capacidad de transfectar in vitro y madurar células dendríticas modelo. Este protocolo beneficiará a la comunidad científica que trabaja en la vacunación debido a su alta versatilidad que permite a estas vacunas prevenir o curar una amplia variedad de enfermedades.

Síntesis y caracterización de polímeros El procedimiento de síntesis OM-pBAE se da en la Figura 2. Como muestra la Figura 2A, el primer paso para obtener el OM-pBAE es sintetizar el C6-pBAE añadiendo las aminas (1-hexilamina y 5-amino-1-pentanol, relación 1:1) al diacrilato (diacrilato de 1,4-butanodiol). Esta reacción se lleva a cabo a 90 °C durante 20 h y con agitación constante. Posteriormente, se añade una solución de oligopép...

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Synthesis and Characterization of mRNA-Loaded PolyBeta Aminoesters Nanoparticles for Vaccination Purposes

Aquí, se presenta un protocolo simple para producir nanopartículas de ARNm basadas en polímeros de poli(beta aminoéster), fáciles de adaptar cambiando el ARNm encapsulado. También se describe el flujo de trabajo para sintetizar los polímeros, las nanopartículas y su caracterización esencial in vitro. También se agrega una prueba de concepto con respecto a la inmunización.

Síntesis y caracterización de nanopartículas de poli(beta aminoésteres) cargadas de ARNm con fines de vacunación

Vaccination has been one of the major successes of modern society and is indispensable in controlling and preventing disease. Traditional vaccines were ...

Este protocolo es significativo porque demuestra, cómo preparar nanopartículas poliméricas, ácidos nucleicos encapsulados en un simple paso. Las principales ventajas de esta técnica, son la versatilidad, ya que se puede aplicar a diferentes ácidos nucleicos y tipos celulares. El uso de procedimientos simples para la preparación de partículas, como el pipeteo hacia arriba y hacia abajo, y la posibilidad de extender la estabilidad de las nanopartículas y las condiciones del tambor mediante la liofilización.Demostrando el procedimiento estarán Laura Olmo, Coral García-Fernández, María Stampa López-Pinto y María Navalón-López, estudiante de doctorado de nuestro laboratorio y Marta Díaz-Caballero, postdoctorado de nuestro laboratorio. Para la formación de poliplexos, descongele los polímeros previamente preparados, el péptido C6, los ésteres poli beta amino y el vórtice de la solución. Después de pipetear la mezcla de polímero hacia arriba y hacia abajo, prepare una solución de 12.5 milimolares en acetato de sodio.Vórtice la solución y espere 10 minutos. A continuación, prepare el ARNm a 0,5 miligramos por mililitro y mezcle mediante pipeteo. Vuelva a envúcer la solución de polímero, luego mezcle la solución de material genético en la solución de polímero en una proporción de uno a uno en un tubo de micro centrífuga e incube el tubo a 25 grados Celsius durante 30 minutos en un termobloque.Después de la incubación, precipitar la mezcla con una o dos RNasa de agua libre agregando la muestra a un tubo de micro centrífuga que contiene el agua, luego para incluir los excipientes, agregue un montón de 20 milimolares y una solución de sacarosa al 4% en el mismo volumen que la mezcla de ARNm y ésteres de poli beta amino, y mezcle mediante pipeteo. Para la liofilización después de congelar la solución de poliplex a menos 80 grados Celsius durante una hora, realice el secado primario, luego almacene inmediatamente los poliplexos a menos 20 grados Celsius para evitar la rehidratación. Para la resuspensión poliplex, retire las nanopartículas liofilizadas del congelador de menos 20 grados Celsius y agregue rápidamente la cantidad correspondiente de agua hidrogenada profunda para volver a dispersar el sólido y lograr la concentración deseada.Pipetear suavemente hasta la resuspensión total y una vez disuelto, pipetear hacia arriba y hacia abajo vigorosamente evitando burbujas. Después de 24 horas de transfección para evaluación cualitativa por microscopía de fluorescencia, coloque la placa de 96 pocillos que contiene las células Hela transfectadas en el microscopio y comience a visualizar utilizando el objetivo de 10 veces. Primero, aplique un balance de blancos para crear una referencia de fondo para el software, luego adquiera una imagen para superponerla con la imagen de fluorescencia durante el análisis.Cambie el modo de microscopio al modo de reflexión y mueva la rueda del filtro al láser azul para visualizar EGFP. Luego adquiera imágenes para todas las condiciones o pozos que emplean el mismo tiempo de exposición. Para la evaluación cuantitativa por citometría de flujo, lave las células Hela transfectadas en una placa de 96 pocillos utilizando 100 microlitros de PBS por pozo.Después de aspirar el PBS a 25 microlitros de tripsina por pozo e incubar a 37 grados Centígrados durante cinco minutos. Una vez que las células se desprenden, agregue los medios previamente recuperados para inactivar la tripsina, luego fije las células agregando 31.25 microlitros de 10% de formalina por pozo e incubando durante 20 minutos. A continuación, encienda el citómetro de flujo y el software, luego configure las condiciones adecuadas para el experimento, incluido el tipo de volumen de muestra de placa y otros parámetros como agitar y enjuagar entre muestras.Configure los parámetros apropiados para cuantificar el porcentaje de células transfectadas positivamente viendo primero los datos de flujo en la luz dispersa hacia adelante frente a la luz dispersa lateral para distinguir las células de los escombros. Y luego trazar otro diagrama de dispersión, comparando la amplitud versus la altura para cerrar y discriminar las celdas individuales. Un día antes de la transfección, placa 10, 000 células JAWS II por pozo en una placa de 96 pocillos para incubación durante la noche.Al día siguiente transfecta las células con 0,6 microgramos de ARNm por pozo e incuba la placa durante 24 horas en una incubadora de aire seco a 37 grados centígrados y 5% de dióxido de carbono. Al día siguiente, lave las células que quedan en el pozo con 25 microlitros de PBS. Después de aspirar el PBS a 25 microlitros de tripsina e incubar la placa durante cinco minutos a 37 grados centígrados para separar las células.Detenga la reacción de tripsina agregando los medios previamente recuperados al pozo correspondiente. Luego centrifugue la placa, aspire el medio y fije las células agregando 50 microlitros de PBS y 2.5% de formalina por pozo, seguido de incubar la placa a cuatro grados Celsius durante 20 minutos, centrifugue la placa. Luego agregue 50 microlitros de PBS y 3% BSA por pozo e incubadora durante 30 minutos a cuatro grados centígrados.Después de la incubación, centrifugue la placa nuevamente, luego agregue 50 microlitros del anticuerpo de ovoalbúmina de ratón en PBS y 3% BSA e incubadora durante 30 minutos a cuatro grados centígrados. Repita el paso de centrifugación, luego lave las células con 50 microlitros de PBS. Después de aspirar el PBS, agregue los anticuerpos secundarios e incube durante una hora a cuatro grados centígrados.Después de la incubación, repita los pasos de centrifugación y lavado. Luego resuspende las células y 100 microlitros de PBS y 2.5% de formalina para el análisis de citometría de flujo. La caracterización fisicoquímica de nanopartículas encapsulantes de ARNm GFP fresco y liofilizado no muestra diferencias significativas en el tamaño y el índice de polidispersión.La microscopía electrónica de transmisión de los poliplexos confirma la formación de nanopartículas esféricas y mono dispersas de aproximadamente 50 nanómetros de diámetro. Los datos de eficiencia de encapsulación de un péptido de Lego y poliplexos poli beta amino éster modificados que encapsulan GFP u ovoalbúmina no muestran diferencias significativas según el tipo de ARNm. Aquí se muestra un análisis cualitativo de la expresión de EGFP, 24 horas después de la transacción en la línea celular JAWS II.Cuantitativamente comparado con el control negativo. El porcentaje de células GFP positivas es significativamente mayor y comparable a un control positivo realizado con un reactivo de transfección clásico. El oligopéptido cargado de ARNm de ovoalbúmina y las nanopartículas modificadas de poli beta amino éster pueden activar las células dendríticas como se ve por la expresión significativamente mayor de marcadores de membrana CD11b y CD86 en células transfectadas en comparación con células no transfectadas.Nuestra plataforma de vacunación basada en el uso de ARNm como principio activo, así como nuestros polímeros patentados se pueden adaptar para ser utilizados en profilaxis, así como para la terapéutica del cáncer. Podemos utilizar nuestra tecnología para destacar esa contribución en la inmunoterapia contra el cáncer. ya que podemos encapsular antígenos asociados a tumores en nuestras nanopartículas y hacer un cambio en los tratamientos contra el cáncer.

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Synthesis and Characterization of mRNA-Loaded Poly(Beta Aminoesters) Nanoparticles for Vaccination Purposes

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Investigación

Bioingeniería

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