Name: direct reprogramming of mouse fibroblasts into melanocytes
Uploaded: 2021-08-27T14:30:00
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この研究は、中国国家自然科学財団(82070638および81770621)および江蘇省自然科学財団(BK20180281)からの助成金によって部分的に支援された。

この研究は、江蘇大学実験動物管理使用委員会(UJS-IACUC-AP--20190305010)によって承認されました。実験は、国際実験動物ケア評価認定協会(AAALACインターナショナル)が定めた基準に厳密に従って実施された。人間を対象とした実験はなかったので、人間研究倫理委員会の承認は必要なかった。試薬の詳細については 、材料表 を参照してください。
1. 転写因子の濃?...

<ol>
	<li>Ezzedine, K., Eleftheriadou, V., Whitton, M., van Geel, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vitiligo.">Vitiligo.</a> Lancet. 386 (9988), 74-84 (2015).</li><li>Picardo, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vitiligo.">Vitiligo.</a> Nature Reviews. 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B., Raghow, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+streamlined+protocol+for+extracting+RNA+and+genomic+DNA+from+archived+human+blood+and+muscle.">A streamlined protocol for extracting RNA and genomic DNA from archived human blood and muscle.</a> Analytical Biochemistry. 474, 25-27 (2015).</li><li>Bachman, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reverse-transcription+PCR+(RT-PCR).">Reverse-transcription PCR (RT-PCR).</a> Methods in Enzymology. 530, 67-74 (2013).</li><li>Donaldson, J. 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ウイルスの品質は、このプロトコルにおけるメラノサイトへの直接リプログラミングの成功に不可欠です。このプロトコルでウイルスをパッケージングして濃縮する方法は、簡単で繰り返しが容易であり、他の補助濃縮試薬に依存しない。このプロトコルは、ほとんどの研究室でうまく従うことができます。濃縮ウイルスの品質を確保するためには、以下の点に特に注意が必要です。一つはH...

白斑は、罹患した個体の身体的および精神的健康に深刻な影響を与える皮膚疾患である。代謝異常、酸化ストレス、炎症メディエーターの生成、細胞剥離、自己免疫応答など様々な理由により、機能的なメラノサイトが失われ、メラニンの分泌が停止し、白斑1,2の発症につながる。この状態は広く発生し、顔に特に問題があります。主な治療法は、コルチコステロイドおよび免疫調節剤の全身使用である。光線療法は全身性または局所疾患に使用でき、穿孔皮膚移植および自家メラノサイト移植などの外科的治療がある3,4,5。しかし、薬物療法や光線療法を使用する患者は再発しやすく、これらの治療法は長期的な治療効果が低い。外科的治療は外傷性であり、適度にしか有効ではない2,6。したがって、白斑には新しく効果的な治療戦略が必要です。
人工多能性幹細胞(iPSC)のリプログラミングは、転写因子Oct4、Sox2、Klf4、およびc-Myc7によって媒介されるプロセスである、これらの細胞を末端状態から多能性状態に逆転させる。しかし、造腫瘍性の可能性と長い生産時間のために、この技術を臨床現場に適用すると懐疑的な見方をされている8。ダイレクトリプログラミングは、あるタイプの端末セルを別のタイプのターミナルセル9に変換する技術である。このプロセスは、適切な転写因子によって達成される。心筋細胞10、ニューロン11、および蝸牛有毛細胞12を含む様々な細胞が、既に首尾に直接再プログラムされている。一部の研究者は、皮膚組織をその場で直接再プログラムし、創傷修復に使用することができる13。直接リプログラミングの利点には、待ち時間とコストの削減、がんのリスクの低下、倫理的問題の減少、および細胞運命決定の根底にあるメカニズムのより良い理解が含まれます9。
直接リプログラミング法は広く使用されているが、特に考慮されるべき多数の転写因子のために、皮膚細胞をメラノサイトに直接リプログラミングするための明確な方法は現在のところ存在しない14,15。転写因子であるMitf、Sox10、およびPax3は、皮膚細胞をメラノサイト14に直接リプログラミングするために使用されている。対照的に、MITFおよびPAX3、SOX2、およびSOX9の組み合わせは、別の研究15において、皮膚細胞のヒトメラノサイトへの直接リプログラミングにも使用されている。このプロトコールでは、異なるスクリーニング方法を使用しているにもかかわらず、先に説明したように皮膚細胞をメラノサイトに直接リプログラミングするためのMitf、Sox10、およびPax3の組み合わせでも同じ結果が得られた14。他の皮膚細胞からメラノサイトを生成するシステムを開発することは、白斑患者の他の皮膚細胞をメラノサイトに変換するためのスキームを提供することができる。したがって、メラノサイトを正常に生成するためには、この直接リプログラミングのための簡単で効率的な方法を構築することが重要です。

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>0.05% Trypsin-EDTA</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>25300-062</td>
			<td>Stored at -20 &#176;C</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>0.45 &#956;M filter</td>
			<td>Millipore</td>
			<td>SLHVR33RB</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>5 mL polystyrene round bottom tube</td>
			<td>Falcon</td>
			<td>352052</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>95%/100% ethanol</td>
			<td>LANBAO</td>
			<td>210106</td>
			<td>Stored at RT</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Adenine</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>A2786</td>
			<td>Stock concentration 40 mg/mL 
			Final concentration 24 &#181;g/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alexa Fluor 555 Goat anti-Mouse IgG2a</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>A21137</td>
			<td>Dilution of 1:500 to use</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Antibiotics(Pen/Strep)</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>15140-122</td>
			<td>Stored at -20 &#176;C</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-TRP1/TYRP1 Antibody</td>
			<td>Millipore</td>
			<td>MABC592</td>
			<td>Host/Isotype: Mouse IgG2a 
			Species reactivity: Mouse/Human 
			Dilution of 1:200 to use</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-TRP2/DCT Antibody</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab74073</td>
			<td>Host/Isotype: Rabbit IgG 
			Species reactivity: Mouse/Human Dilution of 1:200 to use</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CHIR99021</td>
			<td>Stemgent</td>
			<td>04-0004</td>
			<td>Stock concentration 10 mM 
			Final concentration 3 &#956;M</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cholera toxin</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>C8052</td>
			<td>Stock concentration 0.3 mg/mL 
			Final concentration 20 pM</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cy3 Goat anti-Rabbit IgG (H+L)</td>
			<td>Jackson Immunoresearch</td>
			<td>111-165-144</td>
			<td>Dilution of 1:500 to use</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM (High glucose)</td>
			<td>HyClone</td>
			<td>SH30243.01</td>
			<td>Stored at 4 &#176;C</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMSO&#160;</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>D2650</td>
			<td>Stored at RT</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FBS</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>10270-106</td>
			<td>Stored at -20 &#176;C 
			Heat-inactivated before use</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gelatin</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>G9391</td>
			<td>Stored at RT</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>GFP-PURO plasmids (Mitf, Sox10, Pax3, Sox2, Sox9 and Snai2)</td>
			<td>Hanheng Biological Technology Co., Ltd.</td>
			<td>pHBLPm003198 pHBLPm001143 pHBLPm002968 pHBLPm002981 pHBLPm004348 pHBLPm000325</td>
			<td>Stored at -20 &#176;C</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hematoxylin</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab220365</td>
			<td>Stored at RT</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Human EDN3</td>
			<td>American-Peptide</td>
			<td>88-5-10A</td>
			<td>Stock concentration 100 &#956;M 
			Final concentration 0.1 &#956;M</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hydrocortisone</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>H0888</td>
			<td>Stock concentration 100 &#181;g/mL 
			Final concentration 0.5 &#181;g/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L-DOPA</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>D9628</td>
			<td>Stored at RT</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lipofectamine 2000</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>11668-019</td>
			<td>Transfection reagent, stored at 4 &#176;C</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Masson-Fontana staining kit</td>
			<td>Solarbio</td>
			<td>G2032</td>
			<td>Stored at 4 &#176;C</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Neutral balsam</td>
			<td>Solarbio</td>
			<td>G8590</td>
			<td>Stored at 4 &#176;C</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Paraformaldehyde</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>P6148</td>
			<td>Stored at RT</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PBS (-)</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>C10010500BT</td>
			<td>Stored at RT</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phorbol 12-myristate 13-acetate (TPA)</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>P8139</td>
			<td>Stock concentration 1 mM 
			Final concentration 200 nM</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Polybrene</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>H9268</td>
			<td>cationic polymeric transfection reagent; Stock concentration 8 &#956;g/&#181;L 
			Final concentration 4 ng/&#181;L</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Puromycin</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>A11138-03</td>
			<td>Stored at -20 &#176;C</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Recombinant human bFGF</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>13256-029</td>
			<td>Stock concentration 4 &#956;g/mL 
			Final concentration 10 ng/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Recombinant human insulin</td>
			<td>Sigma&#160;</td>
			<td>I3536</td>
			<td>Stock concentration 10 mg/mL 
			Final concentration 5 &#181;g/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Recombinant human SCF</td>
			<td>R&#38;D</td>
			<td>255-SC-010</td>
			<td>Stock concentration 200 &#956;g/mL 
			Final concentration 100 ng/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RPMI-1640</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>11875-093</td>
			<td>Stored at 4 &#176;C</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Xylene</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>1330-20-7</td>
			<td>Stored at RT</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

direct reprogramming of mouse fibroblasts into melanocytes

メラノサイトの機能の喪失は白斑につながり、罹患した個体の身体的および精神的健康に深刻な影響を及ぼす。現在、白斑の効果的な長期治療はありません。したがって、白斑の便利で効果的な治療法を開発することが不可欠です。皮膚細胞をメラノサイトに直接リプログラミングする再生医療技術は、白斑の有望な新規治療法であると思われる。これは、白斑患者のメラノサイトの損失を改善するのを助けるために、患者の皮膚細胞を機能的なメラノサイトに直接リプログラミングすることを含む。しかしながら、この方法は、最初にマウス上で試験される必要がある。直接リプログラミングは広く使用されているが、メラノサイトへの直接リプログラミングのための明確なプロトコルはない。さらに、利用可能な転写因子の数は圧倒的である。 
ここでは、皮膚細胞をメラノサイトにリプログラミングするために選択された転写因子(Sox10、Mitf、Pax3、Sox2、Sox9、およびSnai2を含む)を産生するための濃縮レンチウイルスパッケージングシステムプロトコルが提示される。マウス胚性線維芽細胞(MEF)を、 インビトロで誘導メラノサイト(iMels)へのMEFの直接リプログラミングのために、これらすべての転写因子について濃縮レンチウイルスに感染させた。さらに、これらの転写因子をスクリーニングし、メラノサイトへの直接リプログラミングのために系を最適化した。iMelsにおけるメラニンの特徴マーカーの発現は、遺伝子またはタンパク質レベルで有意に増加した。これらの結果は、線維芽細胞からメラノサイトへの直接リプログラミングが白斑の新たな治療戦略として成功し、メラノサイト発生のメカニズムを確認し、線維芽細胞からメラノサイトへのさらなる直接リプログラミングの基礎を 生体内で提供できることを示唆する。

本稿には、メラノサイトへの線維芽細胞の直接リプログラミングのための転写因子のレンチウイルスを産生するための濃縮レンチウイルスパッケージングシステムのプロトコルと、MEFからの転写因子のスクリーニングおよびメラノサイトの直接リプログラミングのためのプロトコルが含まれています。
濃縮レンチウイルス産生の成功は、HEK-293T細胞を非濃縮レンチウイル...

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Direct Reprogramming of Mouse Fibroblasts into Melanocytes

ここでは、メラノサイト用に最適化されたダイレクトリプログラミングシステムと、スムーズなダイレクトリプログラミングを保証する高効率で濃縮されたウイルスパッケージングシステムについて説明します。

マウス線維芽細胞のメラノサイトへの直接リプログラミング

The loss of function of melanocytes leads to vitiligo, which seriously affects the physical and mental health of the affected individuals. Presently, ...

メラノサイトを生成するための直接リプログラミングが報告されている。しかし、さまざまな転写因子がさまざまな研究で使用されています。このプロトコルでは、より高いリプログラミング効率で転写因子数を検証し、さらに減少させました。我々は、Mitf、Sox10、PAX3の3つの転写因子のみを用いてメラノサイトを生成するための直接リプログラミングシステムを確立し、培養系をより安定で堅牢なものに修正した。機能性メラノサイトを再生する方法は、白斑のような色素脱失疾患の治療限界に対処するのに役立つ重要な問題である。適切なリプログラミングは、将来の提供 私たちの技術は、利便性、強力な操作性、安定性という特徴を持ち、促進と繰り返しが容易です。濃縮レンチウイルスの産生を開始するには、6個のHEK-293T細胞を60ミリメートルディッシュに10回1.5回プレートし、5%二酸化炭素の加湿インキュベーター内で摂氏37度の通常培地で細胞を培養した。インキュベーションの24時間後、HEK-293T細胞が80〜90%コンフルエントに達したら、培地を3.5mLのDMEMと交換し、次いで5%二酸化炭素を含む加湿インキュベーター内で37°Cで細胞を2時間インキュベートする。インキュベーターから細胞を取り出した後、培地を2%FBSを含むDMEMと交換し、新しく調製したトランスフェクション複合体混合物を滴下して細胞に加える。混合液を優しく混合する。8時間終了後、細胞培地を3.5 mLの正常培地と交換する。24時間および48時間でウイルス上清を回収する。次に、2つの異なる時点で収集されたウイルス上清を混合し、混合物を200 xgで摂氏4度で5分間遠心分離する。次いで、収集した上清を0.45ミクロンのフィルターに通し、ろ液を50mL滅菌円錐管に集めた。濾過したウイルス上清を摂氏4度で6,000 xgで一晩遠心分離して濃縮する。完了したら、ウイルスペレットが円錐形のチューブの底に見えるようにします。上澄み液をゆっくりと注ぎます。ウイルスペレットを通常の培地に溶解させ、ウイルス上清の100分の1*容量で溶解させる。P1000マイクロピペットを使用して、均質な100倍濃縮ウイルス混合物が得られるまで、静かにピペットを上下にピペットします。濃縮したウイルスを微量遠心チューブに分割し、摂氏80度で保存します。5番目のHEK-293T細胞を1ウェルの6ウェルプレートに1回10回プレートする。これらの細胞を、5%二酸化炭素の加湿インキュベーター内で摂氏37度の通常の培地で培養する。24時間後、0.1〜0.2マイクロリットルの100倍の蛍光濃縮ウイルスを各ウェルに加える。続いて、カチオン性ポリマートランスフェクション試薬のマイクロリットル当たり4ナノグラムを各ウェルに添加した。ウイルス感染から約8〜12時間後、培地を通常の培地と交換する。感染後48時間で、1mLの滅菌PBSで皿を洗浄し、死細胞を除去した。次いで、室温で6ウェルプレートのウェル当たり250マイクロリットルの0.05%トリプシン-EDTA溶液を用いて細胞をトリプシン処理する。プレートを200 xgで摂氏4度で5分間遠心分離します。上清を除去した後、細胞ペレットを1mLのPBSに再懸濁し、細胞懸濁液を5mLポリスチレン丸底チューブに加える。次に、チューブをフローサイトメーターに入れ、サンプルを分析します。線維芽細胞の直接リプログラミングのために、6ウェル細胞培養プレートの1ウェルを室温で1mLの0.1%ゼラチン溶液でコーティングする。15〜30分後、ウェルがゼラチンで完全に覆われたら、0.1%ゼラチン溶液を吸引する。次に、4番目のマウス胚性線維芽細胞(MEFs)を、0.1%ゼラチンでコーティングした6ウェルプレートの1ウェルに10回プレートし、5%二酸化炭素で加湿した培養器内で摂氏37度で細胞を一晩培養した。24時間後、MEFが40〜50%のコンフルエントに達したら、培地を通常の培地と交換する。次に、凍結した濃縮ウイルスを氷上で溶かします。式を使用して添加するウイルスの体積を計算し、計算された体積に従って、6つの転写因子の濃縮ウイルスを各ウェルに添加します。カチオン性ポリマートランスフェクション剤の1mLあたり4マイクログラムをウェルに加える。レンチウイルス感染のゼロ日目と考えてください。初日に、感染の8〜12時間後、ウイルスを含む培地を新鮮な正常培地と交換し、ピューロマイシンを1mLあたり0.5マイクログラム添加して、安定した感染細胞株をスクリーニングする。感染後48時間後の2日目に、上清培地を徐々に初期化培地に交換する。3マイクロモルのCHIR99021を添加する前に、培地全体の体積の4分の1を変化させる。3日目から7日目までは、細胞の状態に応じて、徐々に割合の高いリプログラミング培地に交換して培地を交換し、5日以内に完全なリプログラミング培地に切り替える。次に、500マイクロリットルの0.05%トリプシン-EDTA消化酵素で室温で3分間細胞を剥離する。細胞の約60%が浮遊したら、消化酵素の2倍の容量である通常の培地を加えて消化を止めます。細胞懸濁液を15mL滅菌円錐管に集め、摂氏4度で200 xgで5分間遠心分離する。細胞ペレットを初期化培地で再懸濁する前に上清を除去する。完了したら、再懸濁した細胞を60ミリメートルの滅菌皿にプレートします。加湿された5%二酸化炭素インキュベーター内で摂氏37度で細胞を培養する。HEK-293T細胞におけるレンチウイルス感染の48時間後、濃縮レンチウイルス産生の成功を、GFPの蛍光強度を観察するか、またはフローサイトメトリーによって評価した。濃縮されたウイルスの力価は、10〜8番目のTU / mLで高いことが見出された。線維芽細胞の直接リプログラミングの間、細胞形態は徐々に細長い細胞シナプスおよび拡大した細胞核に変化した。しかし、細胞は20日目以降に徐々に老化した。転写因子Mitf、Pax3またはSox10の除去は、メラニン球遺伝子Tyr、Tyrp1、およびMlanaの発現のサイレンシングをもたらし、メラノサイトへの線維芽細胞変換に最も大きな影響を及ぼすことを示している。したがって、3つの転写因子による直接プログラミングによって誘導されたメラニン球遺伝子の発現は、6つの転写因子と比較して高かった。MEF誘導メラノサイト、またはiMelsを同定するために、メラニン球マーカーの発現を、TYRP1およびDCTを免疫蛍光染色を用いて検出した。さらに、DOPA染色やマッソンフォンタナ染色などのメラニン特異的染色法では、肯定的な結果を示した。293Tセルは均等に分布している必要があります。また、細胞へのトランスフェクション混合物の添加は、細胞が浮遊するのを防ぐために穏やかに行う必要があります。このプロトコルは安定しており実用的であり、他のタイプのセルを再プログラムするために使用できます。将来の医学におけるメラノサイト再生におけるin vivo直接リプログラミングのための参照および戦略を提供することを期待している。

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Stable and Efficient Genetic Modification of Cells in the Adult Mouse V-SVZ for the Analysis of Neural Stem Cell Autonomous and Non-autonomous Effects

神経の分析のための成体マウスのV-SVZにおける細胞の安定的かつ効率的な遺伝子改変幹細胞自律と非自律効果

Relatively quiescent somatic stem cells support life-long cell renewal in most adult tissues. Neural stem cells in the adult mammalian brain are ...

Methods for Precisely Localized Transfer of Cells or DNA into Early Postimplantation Mouse Embryos

早期着床後のマウス胚への細胞やDNAの正確​​ローカライズ転送する方法

Manipulation and culture of early mouse embryos is a powerful yet largely under-utilized technology enhancing the value of this model system. Conversely, ...

Feeder-free Derivation of Melanocytes from Human Pluripotent Stem Cells

ヒト多能性幹細胞からメラノサイトのフィーダーフリーの導出

Human pluripotent stem cells (hPSCs) represent a platform to study human development in vitro under both normal and disease conditions. Researchers can ...

Kinetic Measurement and Real Time Visualization of Somatic Reprogramming

体細胞の再プログラミングの反応速度測定とリアルタイムの可視化

Somatic reprogramming has enabled the conversion of adult cells to induced pluripotent stem cells (iPSC) from diverse genetic backgrounds and disease ...

Protocol for the Direct Conversion of Murine Embryonic Fibroblasts into Trophoblast Stem Cells

栄養膜幹細胞へのマウス胚性線維芽細胞の直接変換するためのプロトコル

Trophoblast stem cells (TSCs) arise as a consequence of the first cell fate decision in mammalian development. They can be cultured in vitro, retaining ...

Reprogramming Mouse Embryonic Fibroblasts with Transcription Factors to Induce a Hemogenic Program

転写因子との再プログラミングマウス胚線維芽細胞造血プログラムを誘導するために

This protocol details the induction of a hemogenic program in mouse embryonic fibroblasts (MEFs) via overexpression of transcription factors (TFs). We ...

Establishment of Proliferative Tetraploid Cells from Nontransformed Human Fibroblasts

非形質転換ヒト線維芽細胞から増殖性四倍体細胞の樹立

Polyploid (mostly tetraploid) cells are often observed in preneoplastic lesions of human tissues and their chromosomal instability has been considered to ...

Conditional Reprogramming of Pediatric Human Esophageal Epithelial Cells for Use in Tissue Engineering and Disease Investigation

ティッシュ・エンジニアリングと疾病調査に使用するための小児のヒト食道上皮細胞の条件付き再プログラミング

Identifying and expanding patient-specific cells in culture for use in tissue engineering and disease investigation can be very challenging. Utilizing ...

Assessing Cardiomyocyte Subtypes Following Transcription Factor-mediated Reprogramming of Mouse Embryonic Fibroblasts

マウス胚線維芽細胞の転写因子媒介リプログラミングに続いて心筋細胞のサブタイプを評価します

Direct reprogramming of one cell type into another has recently emerged as a powerful paradigm for regenerative medicine, disease modeling, and lineage ...

Reprogramming Primary Amniotic Fluid and Membrane Cells to Pluripotency in Xeno-free Conditions

主な羊水および膜 Xeno 無料条件で多能性細胞をリプログラミング

Autologous cell-based therapies got a step closer to reality with the introduction of induced pluripotent stem cells. Fetal stem cells, such as amniotic ...