Name: primed mycobacterial uveitis (pmu) as a model for post-infectious uveitis
Uploaded: 2021-12-17T14:00:00
Duration: 10 min 33 s
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यह काम नेशनल इंस्टीट्यूट ऑफ हेल्थ, बेथेस्डा, मैरीलैंड, संयुक्त राज्य अमेरिका (केपी) K08EY0123998, (KP) R01EY030431, (KP) R21 EY02939, UW विजन रिसर्च कोर ग्रांट (NEI P30EY01730), मार्क डेली, एमडी रिसर्च फंड और क्रिस्टोफर और एलिडा लैथम रिसर्च फंड से उपहार से वित्त पोषण द्वारा समर्थित है। ब्रिस्टल में किए गए काम को साइट रिसर्च यूके और द अंडरवुड ट्रस्ट से अतिरिक्त धन द्वारा समर्थित किया गया था।

लेखकों के पास खुलासा करने के लिए कोई वित्तीय संघर्ष नहीं है।

शब्द 'यूवाइटिस' स्थितियों के एक विषम सेट का वर्णन करता है जो सभी इंट्राओकुलर सूजन1 की विशेषता है। यूवाइटिस के पशु मॉडल रोग तंत्र को समझने और नए उपचारों के प्रीक्लिनिकल परीक्षण के लिए महत्वपूर्ण हैं। यूवाइटिस के कई पशुमॉडल स्थापित किए गए हैं। जिन दो का सबसे बड़े पैमाने पर अध्ययन किया गया है, वे प्रयोगात्मक ऑटोइम्यून यूवाइटिस (या यूवेरेटिनिटिस) हैं; ईएयू) और एंडोटॉक्सिन-प्रेरित यूवाइटिस (ईआईयू)। ईएयू आमतौर पर ओकुलर एंटीजन के साथ टीकाकरण द्वारा उत्पन्न होता है या अनायास हो सकता है जब एआईआरई जीन 3,4 की अनुपस्थिति में केंद्रीय सहिष्णुता बाधित होती है। मॉडल के अन्य रूपों को तब से विभिन्न यूविटोजेनिक पेप्टाइड्स को शामिल करने के लिए 5,6,7 विकसित किया गया है; इनकी व्यापक रूप से समीक्षा की गईहै 8,9,10। ईएयू टी सेल-निर्भर ऑटोइम्यून यूवाइटिस के रूपों के लिए प्राथमिक मॉडल है जैसे कि वोग्ट-कोयनागी-हरादा रोग और मनुष्यों में बर्डशॉट कोरिओरेटिनाइटिस। ईआईयू बैक्टीरियल लिपोपॉलेसेकेराइड (एलपीएस) 10,11 के प्रणालीगत या स्थानीय इंजेक्शन द्वारा उत्पन्न होता है। ईआईयू का उपयोग जन्मजात प्रतिरक्षा सिग्नलिंग मार्गों के सक्रियण से उत्पन्न तीव्र यूवाइटिस के मॉडल के रूप में कियागया है। दोनों मॉडल ओकुलर इम्यूनोलॉजी की वर्तमान समझ के लिए सहायक रहे हैं, लेकिन न तो पोस्ट-संक्रामक क्रोनिक यूवाइटिस के लिए प्रभावी मॉडल हैं। हाल ही में चूहों में स्थापित, प्राइमेड माइकोबैक्टीरियल यूवाइटिस (पीएमयू) मॉडल अब यूवाइटिस13 के इस रूप के नैदानिक और सेलुलर पहलुओं से पूछताछ और मूल्यांकन करने के लिए एक दृष्टिकोण प्रदान करता है।
दुनिया भर में माइकोबैक्टीरियल संक्रमण का उच्च प्रसार है, जिसमें 2019-14 में विश्व स्वास्थ्य संगठन द्वारा रिपोर्ट किए गए 10 मिलियन से अधिक नए मामले और1.4 मिलियन से अधिक मौतें हुई हैं। सक्रिय तपेदिक (टीबी) संक्रमण की एक्स्ट्रापल्मोनरी अभिव्यक्ति में यूवाइटिस शामिल है और संक्रामक यूवाइटिस15,16 का एक अच्छी तरह से मान्यता प्राप्त कारण है। टीबी से जुड़े यूवाइटिस की अभिव्यक्तियां प्रोटियन हैं, जो संभवतः प्रत्यक्ष ओकुलर संक्रमण के साथ-साथ कम अच्छी तरह से समझी जाने वाली प्रतिरक्षा-मध्यस्थता सूजन17,18,19 को शामिल करने के लिए बीमारी के कई अलग-अलग तंत्रों को दर्शाती हैं। इन पोस्ट-संक्रामक सीक्वेल के लिए प्रस्तावित तंत्र में रेटिना पिगमेंट एपिथेलियम (आरपीई) में एक पॉसी-बेसिलरी संक्रमण की दृढ़ता से प्रेरित एक पुरानी भड़काऊ प्रतिक्रिया शामिल है, एक पुरानी भड़काऊ प्रतिक्रिया जो सफलतापूर्वक साफ किए गए ओकुलर संक्रमण से अवशिष्ट रोगज़नक़ से जुड़े आणविक पैटर्न (पीएएमपी) की उपस्थिति से प्रेरित होती है, और आणविक मिमिक्री या एंटीजन की प्रक्रिया के माध्यम से ओकुलर एंटीजन के खिलाफ अनुकूली प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया का अनुचित सक्रियण। प्रणालीगत टीबी संक्रमण के कारण प्रसार 20,21,22,23.
क्रोनिक पोस्ट-संक्रामक यूवाइटिस की बेहतर यांत्रिक समझ हासिल करने और बीमारी की शुरुआत में माइकोबैक्टीरियल एंटीजन की भूमिका का अध्ययन करने के लिए, पीएमयू मॉडल चूहों13,24 में उपयोग के लिए विकसित किया गया था। तदनुसार, सूजन को दूर करने के लिए, माउस को पहले प्रणालीगत संक्रमण की नकल करने के लिए गर्मी से मारे गए माइकोबैक्टीरियम ट्यूबरकुलोसिस एच 37 आरए स्ट्रेन से एंटीजन का एक चमड़े के नीचे इंजेक्शन मिलता है, इसके बाद सात दिन बाद स्थानीय ओकुलर संक्रमण की नकल करने के लिए बाईं या दाईं आंख को प्रशासित उसी एंटीजन का इंट्राविट्रल इंजेक्शन दिया जाता है। आगामी यूवाइटिस की तीव्रता और अवधि की निगरानी विवो ऑप्टिकल कोहेरेंस टोमोग्राफी (ओसीटी) और आंख25 की फंडल इमेजिंग में अनुदैर्ध्य द्वारा की जाती है। पीएमयू को एक तीव्र, माइलॉयड-प्रमुख पैनुविटिस की विशेषता है जो विट्रिटिस, पेरिवास्कुलर रेटिना सूजन और बाहरी रेटिना क्षति के फोकल क्षेत्रों के साथ क्रोनिक टी सेल-प्रमुख पश्चवर्ती यूवाइटिस में विकसित होताहै। आंख के पीछे के खंड में ग्रैनुलोमैटस सूजन की उपस्थिति से पता चलता है कि पीएमयू मॉडल का उपयोग पूर्ववर्ती (ग्रैनुलोमैटस और गैर-ग्रैनुलोमैटस) और मध्यवर्ती यूवेइटिस के कुछ रूपों का अध्ययन करने के लिए किया जा सकता है, जो पिछले एमटीबी संक्रमण27 के प्रतिरक्षात्मक साक्ष्य वाले रोगियों में देखा जाता है। इसके अतिरिक्त, पीएमयू मॉडल में उपयोग किए जाने वाले गर्मी से मारे गए एमटीबी के घटकों को ओकुलर तपेदिक वाले रोगियों में आवर्तक यूवाइटिस के पहलुओं को अंतर्निहित प्रतिरक्षा प्रतिक्रियाओं को ट्रिगर करने का सुझाव दिया गया है जो एंटी-ट्यूबरकुलर थेरेपी (एटीटी) 28 का जवाब देते हैं। ईएयू और ईआईयू की तुलना में रोग दीक्षा और भड़काऊ पाठ्यक्रम में अंतर के कारण, पीएमयू यूवाइटिस के एक नए पशु मॉडल का प्रतिनिधित्व करता है जो ओकुलर एंटीजन के साथ टीकाकरण पर निर्भर नहीं है और क्रोनिक यूवाइटिस वाले रोगियों में रोग के तंत्र को स्पष्ट करने में मदद कर सकता है। यह प्रोटोकॉल पीएमयू उत्पन्न करने, सूजन के नैदानिक पाठ्यक्रम की निगरानी करने और प्रवाह साइटोमेट्री के साथ पोस्टमार्टम विश्लेषण के लिए ओकुलर नमूने एकत्र करने के तरीकों को रेखांकित करता है।

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	<tbody>
		<tr>
			<td>AK-FLUOR</td>
			<td>Akorn Pharmaceuticals, IL, USA</td>
			<td></td>
			<td>10% Fluorescein sodium 100 mg/mL in 5 mL vial</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>AnaSed</td>
			<td>Akorn Animal Health, IL, USA</td>
			<td>NDC 59399-110-20</td>
			<td>Xylazine 20 mg/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Betadine 5% Sterile Ophthalmic Prep Solution</td>
			<td>Alcon, TX, USA</td>
			<td>8007-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>B-D Precision Glide Needles -25 G</td>
			<td>Becton, Dickinson and Company, NJ, USA</td>
			<td>305122</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>B-D Precision Glide needle -30-G</td>
			<td>Becton, Dickinson and Company, NJ, USA</td>
			<td>305106</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bond MAX, Bond Rx</td>
			<td>Leica Biosystems, IL,USA</td>
			<td></td>
			<td>Automated IHC staining system</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chloramphenicol ointment</td>
			<td>Martindale Pharma, Romford, UK</td>
			<td></td>
			<td>1% w/w Chloramphenicol</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EG1150H</td>
			<td>Leica Biosystems, IL,USA</td>
			<td></td>
			<td>Tissue Embedding</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Envisu R2300</td>
			<td>Bioptigen/Leica</td>
			<td></td>
			<td>OCT Machine</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Freund&#39;s Incomplete Adjuvant</td>
			<td>BD Difco, NJ, USA</td>
			<td>263910</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>GenTeal lubricant eye ointment</td>
			<td>Alcon, TX, USA</td>
			<td>---</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>GenTeal lubricant eye gel</td>
			<td>Alcon, TX, USA</td>
			<td>---</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>H37Ra lyophilized Mycobacteria extract</td>
			<td>BD Difco, NJ, USA</td>
			<td>231141</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hamilton RN Needle (33/12/2)S</td>
			<td>Hamilton, Reno, NV</td>
			<td>7803-05(33/12/2)</td>
			<td>33 G</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hamilton syringe</td>
			<td>Hamilton, Reno, NV</td>
			<td>CAL7633-01</td>
			<td>5 &#181;L</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Insulin needle</td>
			<td>Exel International, USA</td>
			<td>26029</td>
			<td>1 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ketaset</td>
			<td>Zoetis, USA</td>
			<td>377341</td>
			<td>Ketamine HCL 100 mg/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microinjection Syringe Pump and Micro4Controller</td>
			<td>World Precision Instruments, FL, USA</td>
			<td>UMP3</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micron IV</td>
			<td>Phoenix Research Laboratories, Pleasanton, CA</td>
			<td></td>
			<td>Alternative Imaging/OCT Machine</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nanofil 10 &#181;L syringe</td>
			<td>World Precision Instruments, FL, USA</td>
			<td>NANOFIL</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nanofil Intraocular Injection Kit</td>
			<td>World Precision Instruments, FL, USA</td>
			<td>IO-KIT</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Olympus SZX10</td>
			<td>Olympus</td>
			<td></td>
			<td>Dissection scope</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PBS</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>14190</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phenylephrine Hydrochloride Ophthalmic Solution USP 2.5% Sterile 15 mL</td>
			<td>Akorn Pharmaceuticals, IL, USA</td>
			<td>17478020115</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RM2255</td>
			<td>Leica Biosystems, IL,USA</td>
			<td></td>
			<td>Tissue Sectioning</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TB Syringe</td>
			<td>Becton, Dickinson and Company, NJ, USA</td>
			<td>309602</td>
			<td>1 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tetracaine 0.5%</td>
			<td>Alcon, TX, USA</td>
			<td>1041544</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue Tek VIP series</td>
			<td>Sakura Finetek USA, Inc.,CA.</td>
			<td></td>
			<td>Histology Tissue Processing</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tropicamide 1%</td>
			<td>Chauvin Pharmaceuticals, Romford, UK</td>
			<td></td>
			<td>Minims</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tylenol</td>
			<td>Johnson &#38; Johnson Consumer Inc, PA, USA</td>
			<td>NDC 50580-614-01</td>
			<td>Acetaminophen</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Viscotears</td>
			<td>Novartis Pharmaceuticals, Camberley, UK</td>
			<td></td>
			<td>Carbomer eye gel 0.2% w/w</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

primed mycobacterial uveitis (pmu) as a model for post-infectious uveitis

शब्द 'यूवाइटिस' स्थितियों के एक विषम सेट का वर्णन करता है जो सभी इंट्राओकुलर सूजन की विशेषता है। मोटे तौर पर, यूवाइटिस को एटियलजि द्वारा परिभाषित किया जाता है: संक्रमण या ऑटोइम्यूनिटी। संक्रामक यूवाइटिस को उपयुक्त रोगाणुरोधी एजेंटों के साथ उपचार की आवश्यकता होती है, जबकि ऑटोइम्यून यूवाइटिस को कॉर्टिकोस्टेरॉइड्स या अन्य इम्यूनोसप्रेसिव एजेंटों के साथ उपचार की आवश्यकता होती है। पोस्ट-संक्रामक यूवाइटिस क्रोनिक यूवाइटिस का एक रूप है जिसे प्रारंभिक संक्रमण के बाद प्रतिरक्षा सीक्वेल को नियंत्रित करने के लिए कॉर्टिकोस्टेरॉइड्स की आवश्यकता होती है। माइकोबैक्टीरियम ट्यूबरकुलोसिस (एमटीबी) संक्रमण से जुड़े यूवाइटिस पोस्ट-संक्रामक यूवाइटिस का एक अच्छी तरह से मान्यता प्राप्त रूप है, लेकिन रोग के तंत्र को पूरी तरह से समझा नहीं गया है। एमटीबी संक्रमण के बाद पुरानी ओकुलर सूजन को उत्तेजित करने में माइकोबैक्टीरियल एंटीजन और जन्मजात लिगेंड की भूमिका को समझने के लिए, चूहों में उपयोग के लिए मॉडल प्राइमेड माइकोबैक्टीरियल यूवाइटिस (पीएमयू) विकसित किया गया था। यह पांडुलिपि पीएमयू उत्पन्न करने और कलर फंडस और ऑप्टिकल समेकन टोमोग्राफी (ओसीटी) इमेजिंग का उपयोग करके सूजन के नैदानिक पाठ्यक्रम की निगरानी के तरीकों को रेखांकित करती है। पीएमयू को गर्मी से मारे गए माइकोबैक्टीरियल अर्क के साथ टीकाकरण द्वारा प्रेरित किया जाता है, जिसके बाद सात दिन बाद उसी अर्क को एक आंख में इंट्राविट्रल इंजेक्शन दिया जाता है। ओकुलर सूजन को विवो इमेजिंग में अनुदैर्ध्य रूप से निगरानी की जाती है और इसके बाद हिस्टोलॉजी, फ्लो साइटोमेट्री, साइटोकिन विश्लेषण, क्यूपीसीआर, या एमआरएनए अनुक्रमण सहित परख की एक विस्तृत श्रृंखला के लिए नमूना संग्रह किया जाता है। पीएमयू का माउस मॉडल एमटीबी के ओकुलर प्रतिक्रियाओं का अध्ययन करने के लिए एक उपयोगी नया उपकरण है, क्रोनिक यूवाइटिस का तंत्र, और नए विरोधी भड़काऊ उपचारों के प्रीक्लिनिकल प्रभावशीलता परीक्षणों के लिए।

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Primed Mycobacterial Uveitis PMU as a Model for Post-Infectious Uveitis

यह प्रोटोकॉल चूहों में प्राइमेड माइकोबैक्टीरियल यूवेइटिस (पीएमयू) को प्रेरित करने के चरणों को रेखांकित करता है। यह विधि माउस मॉडल सिस्टम में विश्वसनीय और मजबूत ओकुलर सूजन का उत्पादन करने में मदद करने के लिए चरणों को रेखांकित करती है। इस प्रोटोकॉल का उपयोग करते हुए, हमने इम्यूनोलॉजिकल, ट्रांसक्रिप्टोमिक और प्रोटिओमिक परख के साथ आगे के मूल्यांकन के लिए एकल जानवरों से यूविटिक आंखें और सूजन रहित साथी आंखें उत्पन्न कीं।

पोस्ट-इन्फेक्शियस यूवाइटिस के लिए एक मॉडल के रूप में प्राइमेड माइकोबैक्टीरियल यूवाइटिस (पीएमयू)

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Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

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