Name: in situ hybridization in zebrafish larvae and juveniles during mesonephros development
Uploaded: 2021-08-13T14:45:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about In Situ Hybridization in Zebrafish Larvae and Juveniles during Mesonephros Development at JoVE.com

資金は、ペンシルベニア科学アカデミー、ペンシルベニア州生物学者の連邦、ペンシルベニア大学(大学院研究研究部、生物学部、シンシア・サシャク学部優秀生物学基金)によって提供されました。 Tg(lhx1a-EGFP) トランスジェニックラインは、ニール・フクリード博士(ピッツバーグ大学)によって提供されました。

ゼブラフィッシュの幼虫と少年の使用は、IUP IACUC(プロトコル#02-1920、#08-1920)によって承認されています。ソリューションの内容の詳細は、 材料表にリストされています。
1. 幼虫を育てる
注:幼虫や少年を対象段階まで上げるには、最大21日以上かかります。
<ol><li>最後の食事の後、午後遅くに交配タンクに1匹のオスと1匹のメスの魚を?...

<ol>
	<li>Kinth, P., Mahesh, G., Panwar, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mapping+of+zebrafish+research:+a+global+outlook.">Mapping of zebrafish research: a global outlook.</a> Zebrafish. 10 (4), 510-517 (2013).</li><li>Grunwald, D. J., Eisen, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Headwaters+of+the+zebrafish+-+emergence+of+a+new+model+vertebrate.">Headwaters of the zebrafish - emergence of a new model vertebrate.</a> Nature Reviews. Genetics. 3 (9), 717-724 (2002).</li><li>Wingert, R. A., Davidson, A. 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M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Zebrafish+kidney+development:+basic+science+to+translational+research.">Zebrafish kidney development: basic science to translational research.</a> Birth defects research. Part C, Embryo Today: Reviews. 93 (2), 141-156 (2011).</li><li>Dressler, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Advances+in+early+kidney+specification,+development+and+patterning.">Advances in early kidney specification, development and patterning.</a> Development. 136 (23), 3863-3874 (2009).</li><li>Johnson, C. S., Holzemer, N. F., Wingert, R. 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C., Bollig, F., Englert, C., Hildebrandt, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+mesonephric+development+and+regeneration+using+transgenic+zebrafish.">Characterization of mesonephric development and regeneration using transgenic zebrafish.</a> American Journal of Physiology. Renal Physiology. 299 (5), 1040-1047 (2010).</li><li>Diep, C. Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+of+adult+nephron+progenitors+capable+of+kidney+regeneration+in+zebrafish.">Identification of adult nephron progenitors capable of kidney regeneration in zebrafish.</a> Nature. 470 (7332), 95-100 (2011).</li><li>Diep, C. Q., Mikeasky, N., Davidson, A. J., Cartner, S. 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A., Vogele, V., Koster, R. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=All-age+whole+mount+in+situ+hybridization+to+reveal+larval+and+juvenile+expression+patterns+in+zebrafish.">All-age whole mount in situ hybridization to reveal larval and juvenile expression patterns in zebrafish.</a> PloS One. 15 (8), 0237167 (2020).</li><li>Parichy, D. M., Turner, J. M., Parker, N. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Essential+role+for+puma+in+development+of+postembryonic+neural+crest-derived+cell+lineages+in+zebrafish.">Essential role for puma in development of postembryonic neural crest-derived cell lineages in zebrafish.</a> Developmental Biology. 256 (2), 221-241 (2003).</li><li>Yang, H., Wanner, I. B., Roper, S. 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ここで説明する in situ ハイブリダイゼーション法は、メソネフォロスの開発を研究することを目的としています。しかし、腸、神経系、スケール、色素沈着などの変態中の他の組織や臓器の発達を研究するために適用することができます。プローブは、トランスジェニックラインの内因性遺伝子または蛍光マーカーに対して生成され得る。
幼虫?...

ゼブラフィッシュ胚は、その小さなサイズ、透明性、利用可能なツール、および最大5日間の給餌なしで生存のために組織の発達を研究するための重要なモデルです1,2。これは、ゼブラフィッシュと哺乳類の間の腎臓の発達と保全の理解に大きく貢献してきました3,4,5.腎臓は、体液性恒常性を維持し、血液を濾過し、廃棄物を排泄する上で不可欠な役割を果たす6。腎臓の機能単位である腎は、長い細管に接続された血液フィルターを含む。ゼブラフィッシュでは、2つの腎臓構造がその生涯を通じて形成される。発症初期の初期の段階で最初に形成される傾向がある(一時的な胚性腎臓)。それは前部後軸に沿って走る2つの腎で構成され、受精後2日(dpf)の周りに機能する。この傾向の有用性は、その単純性にあり、ほとんど線形で視覚化しやすい2つのニーフロンを持っています(ただし、近位畳の尿細管は3 dpfでコイルし始めます)。これは中間中期からその初期の開発の研究を促進しただけでなく、セグメンテーションパターンおよび管状の修理7,8を促進した。
ゼブラフィッシュの有用性は、黄身が減少し、幼虫が水生系での給餌に依存する5dpf後に制限される。生後約2週間で、幼虫は若年に変態を受け、新しい組織が形成され、古い組織が失われたり再編成されたりする。これはまた、メソネフロス(永久成人腎臓)が10,11,12を形成する場合である。最初の成人のネフロンは、第六のスマイトの近くに形成され、そして、傾向のある初期の尿細管と融合する。追加のニーフロンは、最初はこの位置に後部を追加されますが、後で前部に向かっても追加されます。この最初の波の主なネフロンは、傾向のある尿細管に融合し、廃棄物を堆積させるために共通のルーメンを共有しています。二次ニーフロンは次の波で形成され、一次ネフロンに融合する。この繰り返しのプロセスは、哺乳類の腎臓にやや似た分岐しているメソネフロスを作成します。おそらく、傾向のあるフロスは最終的にその尿細管の同一性を失い、すべてのネフロンが彼らの廃棄物を排出する2つの主要な収集ダクトになります13。
最初の成体腎の形成に先立ち、単一の前駆細胞は、〜4mm(全長)幼虫(〜10dpf)で出現し始める。 Tg(lhx1a-EGFP) トランスジェニックラインに印が付いているこれらの細胞は、傾向に付着し、腎生原の将来の部位に移行するように見える。単一の細胞はクラスターに合体し、新しいnephrons12に分化する。これらの細胞がどこに存在するか、または彼らがメサネ咽頭形成の発症前にどのような遺伝子を発現するかは不明である。
メソネフロスの発達を理解することは、哺乳類腎臓に対する洞察を、傾向のある人にはできない方法で提供する。これらには、単一の前駆細胞からのネフローゲン凝集体の形成、既存のネフロンとの新しいネフロンの機能的統合、および分岐形態形成が含まれる。しかし、胚後の発達を研究することには限界があります。幼虫は大きな大きさと色素沈着のため、透明度が低くなります。発達タイムラインは個々の動物間で同期的ではなく、摂食や混雑などの環境要因に大きく依存しています。ノックダウン試薬は存在するが、胚15に比べて幼虫の効果は低い。本プロトコルでは、ゼブラフィッシュメソネフロスの発生時に遺伝子発現を決定するin in situハイブリダイゼーション法について説明する。いくつかのステップは、メゾンフォロスの可視化とプローブおよび抗体の浸透および洗浄を増加させるために最適化されています。Tg(lhx1a-EGFP)トランスジェニックラインは、EGFP用プローブとともに、単一の前駆細胞、ネフローゲン凝集体、および新生ネフロンの遠位細管を標識するために使用されます。この方法は、メソネフォロスの開発のより深い理解と再生療法への洞察を提供します。

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Anti-fluorescein antibody</td>
			<td>Roche/Sigma-Aldrich</td>
			<td>11426338910</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bleaching solution</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>0.8% KOH, 0.9% H2O2 in PBST</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Blocking reagent</td>
			<td>Roche/Sigma-Aldrich</td>
			<td>11096176001</td>
			<td>Use for blocking solution, prepare according to manufacture&#39;s instruction</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell strainer</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>&#160;22-363-549</td>
			<td>100 &#956;m</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>E3 medium</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>5 mM NaCl, 0.33 mM CaCl2, 0.33 mM MgSO4, 0.17 mM KCl, 0.0001% methylene blue</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Eyelash manipulator</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>NC1083208</td>
			<td>Use to manipulate larvae</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fixing solution</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>4% paraformaldehyde, 1% DMSO in PBS; heat at 65&#176;C while shaking until the powder dissolves, then add DMSO after it cools down</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fluorescein probe synthesis</td>
			<td>Roche/Sigma-Aldrich</td>
			<td>11685619910</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass vial</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>03-338B</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hatchfry encapsulation</td>
			<td>Argent</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hyb- solution</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>50% formamide, 5X SSC, 0.1% Tween-20</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hyb+ solution</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>HYB-, 5 mg/mL torula RNA, 50 ug/mL heparin</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MAB (10X)</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>1 M maleic acid, 1.5 M NaCl, pH 7.5</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MABT</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>1X MAB, 0.1% Tween-20</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Maleic acid</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>M0375</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Paraformaldehyde</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>158127</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PBS (10X)</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>8% NaCl, 0.2% KCl, 1.44% Na2HPO4, 0.24% KH2PO4</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PBST</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>1X PBS, 0.1% Tween-20</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PBST2</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>1X PBS, 0.2% Tween-20</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Powder food</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Mix 2 g of each of spirulina and hatchfry encapsulon in 50 mL of fish system water and shake well</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Proteinase K</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>P5568</td>
			<td>Use to permeabilize larvae</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Proteinase K solution</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>20&#160; &#956;g/mL, 1% DMSO final concentration in PBST</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Spirulina microfine powder</td>
			<td>Argent</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SSC (20X)</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>3 M NaCl, 0.3 M sodium acetate anhydrous, pH 7, autoclave</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SSCT (0.2X)</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Dilute from 20X SSC, 0.1% Tween-20</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SSCT (2X)</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Dilute from 20X SSC, 0.1% Tween-20</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Staining buffer</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>100 mM Tris pH 9.5, 50 mM MgCl2, 100 mM NaCl, 0.1% Tween-20</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Staining solution</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>200 &#956;g/mL iodonitrotetrazolium chloride, 200 &#956;g/mL 5-Bromo-4-chloro-3-indolyl phosphate disodium salt, in staining buffer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stopping solution</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>1 mM EDTA, pH 5.5, in PBST</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Torula (yeast) RNA</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>R6625</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tricaine</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>E10521</td>
			<td>2%, pH 7</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Wash buffer</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>50% formamide, 2X SSC, 0.1% Tween-20</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

in situ hybridization in zebrafish larvae and juveniles during mesonephros development

ゼブラフィッシュは、その生涯で2つの腎臓構造を形成します。この発症(胚性腎臓)は、胚発生時に形成され、受精後2日で機能し始める。2つのニーフロンだけで構成され、体重増加のためにより多くの腎機能が必要になるまで、幼虫の生活の間に唯一の腎臓として機能する傾向があります。この高い需要に対処するために、メソネフロス(成人腎臓)は変態の間に形成し始める。新しい一次ニーフロンは、傾向のある咽頭に融合し、接続されたルーメンを形成する。次に、二次ニーフロンは一次のネフロンに融合し(など)メソネフロスに分岐ネットワークを作ります。研究の大半は、胚の使用の容易さのために、傾向に焦点を当てています。したがって、 メサネフォロスの開発をよりよく理解するために、古くて大きな幼虫と若年魚を研究する技術を開発する必要があります。.ここでは、遺伝子発現解析のための in in in 遺伝子発現促進プロトコルが、プローブの浸透、プローブおよび抗体の洗浄、およびメサネフロスをよりよく可視化するための顔料の漂白に最適化されている。 Tg(lhx1a-EGFP) トランスジェニックラインは、前駆細胞および新生性ネフロンの遠位細管を標識するために使用されます。このプロトコルは、メサネフロス研究のギャップを埋めます。これは、新しい腎臓組織がどのように形成され、既存のニーフロンと統合し、再生療法に関する洞察を提供するかを理解するための重要なモデルです。

Tg(lhx1a-EGFP)トランスジェニックラインを用いて、このインサイチュハイブリダイゼーションプロトコルは、メサネフォロスの発生時に腎臓前駆細胞および種々のニーフロン構造を標識するのに有効であることを実証した。予想通り、中枢神経系もこのトランスジェニックライン(図示せず)で標識される。最初のメゾネフリック腎膜は約5.2mmで形成され、その後ろは、起こりやすい(...

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In Situ Hybridization in Zebrafish Larvae and Juveniles during Mesonephros Development

ゼブラフィッシュは腎臓の発達を理解するための重要なモデルです。ここで、イン ・シチュハイブリ ダイゼーションプロトコルは、メサネフォロスの発生中にゼブラフィッシュ幼虫および若年者の遺伝子発現を検出するように最適化される。

イン・シトゥ メサネフォロス発生時のゼブラフィッシュ幼虫と若年期のハイブリダイゼーション

The zebrafish forms two kidney structures in its lifetime. The pronephros (embryonic kidney) forms during embryonic development and begins to function at ...

このプロトコルは、古いゼブラフィッシュ幼虫および変態中の若年期の遺伝子発現の決定を可能にするため、重要である。この技術の利点は、いくつかのステップが、腎臓のプローブ浸透および可視化のために最適化されたことである。まず、最後の食事の後、午後遅くに交配タンクに1匹のオスと1匹のメスの魚を加えて、成虫のゼブラフィッシュを交尾するように設定します。翌日、E3培地を含むペトリプレートに胚を集める。受精後5日間、400マイクロメートルのスクリーンを2.8リットルタンクに入れ、2センチのシステム水で満たします。その後、1ペトリプレートから幼虫を追加します。幼虫を固定するには、目的の時点で幼虫のタンクを取り外し、その先端を切断してピペットを移し、幼虫をペトリプレートに移します。次に、2%トリカインの2ミリリットルを加えて幼虫を固定化する。固定化後、トリケーヌを20ミリリットルの固定溶液に交換します。30分後、幼虫を25ミリリットルの新鮮な固定溶液を含む50ミリリットルのチューブに移します。その後、キャップがしっかりとしていることを確認し、ゆっくりと2日間摂氏4度でチューブを揺らします。3日目に、固定溶液を20ミリリットルのPBSTに交換し、幼虫をペトリプレートに移します。幼虫を測定するには、ペトリプレートを解剖顕微鏡の下の平らな定規の上に置き、まつげマニピュレータを使用して各幼虫を定規に移動して全長を測定します。すべての幼虫を測定した後、PBSTと1つの5.5ミリリットルガラスバイアルに同様の長さのいくつかの幼虫を組み合わせます。脱水の場合は、ガラスバイアルのPBSTを100%メタノールの4ミリリットルに置き換え、バイアルをマイナス20度で2日間保存します。水分補給のために、100%メタノールを75%メタノールと25%PBST溶液の4ミリリットルに交換し、バイアルを5分間揺らします。次いで、メタノールとPBST溶液を4ミリリットルの新鮮なPBSTに交換し、バイアルを10分間再度揺らします。プロテナーゼK消化の場合、PBSTを2ミリリットルのプロテアーゼK溶液に置き換え、室温でバイアルを30分間揺らします。次に、漂白のために、幼虫を6ウェルプレートに移し、PBSTを3ミリリットルの新鮮な漂白液に置き換えます。メサネフロスに沿った色素沈着が完全に消失した後、幼虫をガラスバイアルに戻し、漂白液を4ミリリットルのPBSTに交換し、バイアルを10分間揺らします。プレハイブリダイゼーションの場合は、固定溶液を4ミリリットルのPBSTに交換し、バイアルを10分間ロックし、PBSTを4ミリリットルのHyb溶液とロックに10分間交換します。Hyb溶液に2つの追加インキュベーションを行った後、Hyb+溶液の4ミリリットルに溶液を交換してください。EGFPフルオレセインプローブをハイブリダイゼーションプラス溶液の500マイクロリットルで1~100個同時に希釈し、バイアルとプローブを一晩摂氏70度でインキュベートします。翌日、プローブをハイブリダイズするには、バイアル内のHyb+溶液を予熱プローブに交換し、一晩摂氏70度でインキュベートします。翌日、50ミリリットルのチューブに予熱0.2倍のSSCTを50ミリリットル加えます。その後、チューブの上部に100マイクロメートルの細胞ストレーナーを挿入し、ガラスバイアルから細胞ストレーナーに幼虫を移し、幼虫が緩衝液に沈着していることを確認し、バイアルを摂氏70度で2時間インキュベートします。インキュベーション後、予熱した0.2倍のSSCTを含む新しいチューブに細胞ストレーナーを移し、摂氏70度で2時間再びインキュベートする。次に、ブロッキングのために、幼虫を新しいガラスバイアルに移し、室温まで冷却させます。その後、0.2回のSSCT溶液を67%0.2回のSSCTおよび33%MABT溶液の4ミリリットルに交換し、10分間室温でバイアルを揺らします。次に、SSCTT MABT溶液を4ミリリットルの新鮮なMABTと交換し、ロッカーにバイアルを10分間インキュベートします。その後、MABTを4ミリリットルのブロッキング溶液に交換し、一晩で摂氏4度をインキュベートします。翌日、ブロッキング溶液を抗体溶液に交換し、摂氏4度で2日間インキュベートします。抗体洗浄の場合は、幼虫を50ミリリットルのチューブに移し、40ミリリットルのPBST2を加え、チューブを横に置いて摂氏4度で一晩インキュベーションします。12日目、溶岩を6ウェルプレートに移した後、PBST2を3ミリリットルの染色バッファーに交換する。ロッカーに5分間のインキュベーションを行った後、染色液を3ミリリットルに交換します。所望の染色強度に達したら、染色液を停止液の3ミリリットルに交換し、30分間ロックします。次に、幼虫を新しいガラスバイアルに移し、停止溶液を4ミリリットルの新鮮な固定溶液に交換し、室温で1時間インキュベートします。イメージングの場合は、固定溶液を4ミリリットルの新鮮なPBSTと交換してください。ロッカーに10分間インキュベーションした後、幼虫を6ウェルプレートに移し、PBSTを4ミリリットルの新鮮なPBSTに交換し、プレートを再び10分間揺らします。次に、PBSTに50%グリセロールの3ミリリットルを加え、10分間ロックし、次に解剖顕微鏡を用いて、幼虫を6ウェルプレートに直接画像化する。このシンチハイブリダイゼーションプロトコルは、メサネフロスの発達を用いて腎臓前駆細胞および種々のニーフロン構造を効果的に標識する。最初のメソーネフリック腎は、約5.2ミリメートルの下に形成され、発生しやすい。前駆細胞のクラスターは、単一の前駆細胞に加えてメサネフロスの発生時に存在する。より大きな少年では、背景染色は、スマイトで発生する可能性があります。全体的に見て、この方法は、解剖された成人器官に加えて、変態中に形成される他の組織を研究するために使用することができる。

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Analysis of Zebrafish Larvae Skeletal Muscle Integrity with Evans Blue Dye

エバンスブルー色素でゼブラフィッシュ幼生骨格筋の整合性の分析

The zebrafish model is an emerging system for the study of neuromuscular disorders.  In the study of neuromuscular diseases, the integrity of the muscle ...

Induction of Hypoxia in Living Frog and Zebrafish Embryos

生きた蛙およびゼブラフィッシュの胚における低酸素の誘導

Here, we introduce a novel system for hypoxia induction, which we developed to study the effects of hypoxia in aquatic organisms such as frog and ...

Visualizing Multiciliated Cells in the Zebrafish Through a Combined Protocol of Whole Mount Fluorescent In Situ Hybridization and Immunofluorescence

Visualizing Multiciliated Cells in the Zebrafish Through a Combined Protocol of Whole Mount Fluorescent In Situ Hybridization and Immunofluorescence

全体のマウント蛍光In Situハイブリダイゼーション、免疫組織の結合されたプロトコルを介してゼブラフィッシュにおける Multiciliated の細胞を可視化します。

In recent years, the zebrafish embryo has emerged as a popular model to study developmental biology due to traits such as ex utero embryo development and ...

Wholemount In Situ Hybridization for Astyanax Embryos

Wholemount In Situ Hybridization for Astyanax Embryos

In Situ ハイブリダイゼーションアステュアナクス胚の Wholemount

In recent years, a draft genome for the blind Mexican cavefish (Astyanax mexicanus) has been released, revealing the sequence identities for thousands of ...

Genotyping and Quantification of In Situ Hybridization Staining in Zebrafish

ゼブラフィッシュにおけるin situハイブリダイゼーション染色のジェノタイピングと定量化

In situ hybridization (ISH) is an important technique that enables researchers to study mRNA distribution in situ and has been a critical technique in ...

Whole-Mount In Situ Hybridization in Zebrafish Embryos and Tube Formation Assay in iPSC-ECs to Study the Role of Endoglin in Vascular Development

iPSC-ICにおけるゼブラフィッシュ胚の全山ハイブリダイゼーションとチューブ形成アッセイは血管開発におけるエンドリンの役割を研究する

Vascular development is determined by the sequential expression of specific genes, which can be studied by performing in situ hybridization assays in ...

Whole Mount Immunohistochemistry in Zebrafish Embryos and Larvae

ゼブラフィッシュ胚と幼虫の全山免疫賦形化学

Immunohistochemistry is a widely used technique to explore protein expression and localization during both normal developmental and disease states. ...

Fluorescent Calcium Imaging and Subsequent In Situ Hybridization for Neuronal Precursor Characterization in Xenopus laevis

Fluorescent Calcium Imaging and Subsequent In Situ Hybridization for Neuronal Precursor Characterization in Xenopus laevis

ゼノプス・ラエビスにおける神経前駆体特性評価のための蛍光カルシウムイメージングとその後のその後の位置ハイブリダイゼーション

Spontaneous intracellular calcium activity can be observed in a variety of cell types and is proposed to play critical roles in a variety of physiological ...

イン・シトゥ メサネフォロス発生時のゼブラフィッシュ幼虫と若年期のハイブリダイゼーション

イン・シトゥメサネフォロス発生時のゼブラフィッシュ幼虫と若年期のハイブリダイゼーション