Name: multiplexed fluorescent immunohistochemical staining of four endometrial immune cell types in recurrent miscarriage
Uploaded: 2021-08-04T15:00:00
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इस अध्ययन को हांगकांग प्रसूति और स्त्री रोग ट्रस्ट फंड द्वारा 2018 में और हांगकांग स्वास्थ्य और चिकित्सा अनुसंधान कोष (06170186, 07180226) द्वारा समर्थित किया गया था।

इस अध्ययन को हांगकांग के संयुक्त चीनी विश्वविद्यालय-न्यू टेरिटरीज ईस्ट क्लस्टर क्लीनिकल रिसर्च एथिक्स कमेटी ने मंजूरी दी थी । एंडोमेट्रियल बायोप्सी एकत्र करने से पहले प्रतिभागियों से सूचित सहमति प...

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प्रोटोकॉल के भीतर महत्वपूर्ण कदम यह ध्यान रखना महत्वपूर्ण है कि मल्टीप्लेक्स धुंधला करने के लिए मेहनती अनुकूलन की आवश्यकता होती है। एंटीजन पुनर्प्राप्ति, साइट्रेट बफर और माइक्रोवेव तकनीक क?...

गर्भकाल1के 24 सप्ताह से पहले दो या अधिक गर्भधारण के नुकसान के रूप में आवर्ती गर्भपात (आरएम) को परिभाषित किया जा सकता है। बार - बार प्रजनन की यह स्थिति दुनिया भर में 1% तक जोड़ों को प्रभावित करती है2,3. रोगविज्ञान बहुरूपी है और इसे भ्रूणीय रूप से संचालित कारणों (मुख्य रूप से असामान्य भ्रूणीय कारियोटाइप के कारण) और मातृ चालित कारणों में विभाजित किया जा सकता है जो एंडोमेट्रियम और/या अपरा विकास को प्रभावित करते हैं । इस अभिव्यक्ति के परिणामस्वरूप माता-पिता की आनुवंशिक असामान्यताएं, गर्भाशय विसंगतियां, प्रोथ्रोम्बोटिक स्थितियां, एंडोक्राइनोलॉजी कारक और इम्यूनोलॉजिकल विकार4हो सकते हैं।
हाल के वर्षों में, प्रतिरक्षा प्रभावक कोशिका रोग जल्दी गर्भावस्था हानि5के रोगजनन में फंसाया गया है । इसने प्रारंभिक गर्भावस्था में विशिष्ट भूमिकाओं के साथ मासिक धर्म चक्र, प्रत्यारोपण और प्रारंभिक गर्भावस्था के दौरान एंडोमेट्रियम में प्रतिरक्षा कोशिकाओं की विशिष्ट आबादी को स्पष्ट करने में कई जांचों को प्रेरित किया है। इन प्रतिरक्षा कोशिकाओं में, गर्भाशय प्राकृतिक हत्यारा (यूएनके) कोशिकाएं भ्रूण प्रत्यारोपण और गर्भावस्था के दौरान महत्वपूर्ण भूमिका निभाती हैं, विशेष रूप से ट्रोफोब्लास्टिक आक्रमण और एंजियोजेनेसिस6की प्रक्रियाओं में। अध्ययनों से पता चला है कि आरएम7,8वाली महिलाओं के एंडोमेट्रियम में यूएनके सेल घनत्व में वृद्धि हुई है,हालांकि यह निष्कर्ष गर्भपात के बढ़ते जोखिम से जुड़ा नहीं था9. हालांकि, इस ने आरएम10, 11के साथ महिलाओं में एंडोमेट्रियम में अन्य प्रतिरक्षा कोशिका प्रकारों (जैसे मैक्रोफेज, गर्भाशय डेन्ड्रिटिक कोशिकाओं) के घनत्व का मूल्यांकन करने वाले शोध को प्रेरित किया। फिर भी, यह अनिश्चित रहता है कि क्या आरएम के साथ महिलाओं में पेरी-इम्प्लांटेशन एंडोमेट्रियम में प्रतिरक्षा कोशिका घनत्व में महत्वपूर्ण परिवर्तन होता है।
अनिश्चितता के लिए एक संभव स्पष्टीकरण यह है कि एंडोमेट्रियल प्रतिरक्षा सेल घनत्व का मूल्यांकन प्रत्यारोपण की खिड़की के दौरान एंडोमेट्रियम में तेजी से परिवर्तन के कारण मुश्किल हो सकता है। 24 घंटे की समय सीमा के दौरान, एंडोमेट्रियम में महत्वपूर्ण परिवर्तन प्रतिरक्षा कोशिका घनत्व और साइटोकिन स्राव को बदलते हैं, इन परिणामों में भिन्नता का स्रोत पेश करतेहैं 12। इसके अलावा, अधिकांश रिपोर्टें मुख्य रूप से एकल-सेल धुंधला (जैसे, पारंपरिक आईएचसी विधियों) के उपयोग पर निर्भर करती हैं जो एक ही ऊतक अनुभाग पर कई मार्कर की जांच नहीं कर सकते थे। यद्यपि प्रवाह साइटोमेट्री का उपयोग एक ही नमूने में कई सेल आबादी का पता लगाने के लिए किया जा सकता है, लेकिन आवश्यक कोशिकाओं की बड़ी मात्रा और समय लेने वाली अनुकूलन इस विधि की लोकप्रियता और दक्षता में बाधा डालता है। इसलिए, मल्टीप्लेक्स आईएचसी धुंधला में हाल ही में उन्नति सेल वंश और व्यक्तिगत प्रतिरक्षा उपआबादी के हिस्टोलॉजिकल स्थानीयकरण सहित कई मापदंडों का मूल्यांकन करने के लिए एक ही स्लाइड पर कई मार्कर इम्यूनोदाता द्वारा इस समस्या को हल कर सकता है । इसके अलावा, यह तकनीक सीमित ऊतक उपलब्धता के मामले में प्राप्त जानकारी को अधिकतम कर सकती है। अंततः, यह तकनीक उपजाऊ महिलाओं और आरएम के साथ महिलाओं के बीच एंडोमेट्रियम में प्रतिरक्षा सेल इंटरैक्शन में अंतर को स्पष्ट करने में मदद कर सकती है।
महिलाओं के दो समूहों को प्रिंस ऑफ वेल्स अस्पताल से भर्ती किया गया, जिसमें उपजाऊ नियंत्रण महिलाओं (एफसी) और अस्पष्टीकृत आवर्ती गर्भपात (आरएम) वाली महिलाएं शामिल हैं । उपजाऊ नियंत्रण महिलाओं को जो सहज गर्भपात के किसी भी इतिहास के बिना कम से एक जीवित जंम था के रूप में परिभाषित किया गया था, और आरएम महिलाओं को जो 20 सप्ताह के गर्भ से पहले ≥२ लगातार गर्भपात का इतिहास था के रूप में परिभाषित किया गया । दोनों समूहों के विषयों ने निम्नलिखित समावेशन मानदंडों को पूरा किया: (क) 20 से ४२ वर्ष के बीच की आयु, (ख) धूम्रपान न करने वाले, (ग) नियमित मासिक धर्म चक्र (25-35 दिन) और सामान्य गर्भाशय संरचना, (घ) एंडोमेट्रियल बायोप्सी से कम से कम 3 महीने पहले किसी भी हार्मोनल आहार का कोई उपयोग नहीं, (ई) हिस्टेरो-साल्पिंगोग्राम द्वारा हाइड्रोसालपिंक्स नहीं। इसके अलावा भर्ती किए गए सभी विषयों में सामान्य कारियोटाइपिंग, सामान्य 3-डायमेंशनल अल्ट्रासोनोग्राफी हिस्टीरोसलपिंगोग्राम, दिन 2 कूप उत्तेजक हार्मोन < 10 आईयू/एल, मिड-ल्यूटल प्रोजेस्टेरोन > 30 एनएमओल/एल, नॉर्मल थायराइड फंक्शन, और ल्यूपस एंटीकोगुलांट और एंटीकार्डियोलीपिन आईजीजीजी और इग्म एंटीबॉडीज के लिए निगेटिव टेस्ट किया गया ।
आरएम के प्रतिरक्षा आधार को बेहतर ढंग से समझने के लिए, प्रत्यारोपण के समय एंडोमेट्रियम में मौजूद प्रमुख प्रतिरक्षा कोशिका प्रकारों को एक साथ मात्रा निर्धारित करना और स्थानीयकरण करना सबसे वांछनीय होगा। यह पेपर नमूना तैयार करने से पूरे प्रोटोकॉल, प्रतिरक्षा सेल उपप्रकारों के लिए मार्कर के साथ मल्टीप्लेक्स अनुकूलन, और स्लाइडों की स्कैनिंग का वर्णन करता है, इसके बाद एंडोमेट्रियल प्रतिरक्षा कोशिकाओं का पता लगाने के लिए विशिष्ट संदर्भ के साथ डेटा विश्लेषण किया जाता है। इसके अलावा, यह पेपर एंडोमेट्रियम में एक साथ प्रतिरक्षा कोशिका प्रकारों के घनत्व और क्लस्टरिंग को निर्धारित करने का वर्णन करता है।

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Amplification Diluent</td>
			<td>Perkin Elmer</td>
			<td>FP1498</td>
			<td>Fluorophore diluent buffer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Antibody diluent</td>
			<td>Perkin Elmer</td>
			<td>ARD1001EA</td>
			<td>Diluting the antibody</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CD3</td>
			<td>Spring Bioscience</td>
			<td>M3072</td>
			<td>Primary antibody</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CD20</td>
			<td>Biocare Medical</td>
			<td>CM004B</td>
			<td>Primary antibody</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CD56</td>
			<td>Leica</td>
			<td>NCL-CD56-504</td>
			<td>Primary antibody</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CD68</td>
			<td>Spring Bioscience</td>
			<td>M5510</td>
			<td>Primary antibody</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Citrate Buffer Solution, pH 6.0 (10x)</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>AB64214</td>
			<td>Antigen retrieval solution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EMSURE Xylene (isomeric mixture)</td>
			<td>Merck</td>
			<td>108297</td>
			<td>Dewaxing</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol absolute</td>
			<td>Merck</td>
			<td>107017</td>
			<td>Ethyl alcohol for rehydration</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HistoCore BIOCUT Manual Rotary Leica Microtome</td>
			<td>Leica</td>
			<td>RM2125RTS</td>
			<td>Sectioning of paraffin-embedded tissue</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>inForm Advanced Image Analysis Software</td>
			<td>Perkin Elmer</td>
			<td>inForm&#174; Tissue Finder Software 2.2.1 (version 14.0)</td>
			<td>Data Analysis software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mantra&#174; Workstation</td>
			<td>Akoya Biosciences</td>
			<td>CLS140089</td>
			<td>Spectral imaging</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microwave</td>
			<td>Panasonic</td>
			<td>Inverter</td>
			<td>Microwave stripping</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Opal 520</td>
			<td>Perkin Elmer</td>
			<td>FP1487A</td>
			<td>Appropriate tyramide based fluorescent reagent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Opal 620</td>
			<td>Perkin Elmer</td>
			<td>FP1495A</td>
			<td>Appropriate tyramide based fluorescent reagent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Opal 650</td>
			<td>Perkin Elmer</td>
			<td>FP1496A</td>
			<td>Appropriate tyramide based fluorescent reagent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Opal 690</td>
			<td>Perkin Elmer</td>
			<td>FP1497A</td>
			<td>Appropriate tyramide based fluorescent reagent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Oven</td>
			<td>Memmert</td>
			<td>U10</td>
			<td>Dewaxing</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Peroxidase Blocking Solution</td>
			<td>DAKO</td>
			<td>S2023</td>
			<td>Removal of tissue peroxidase activities</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Poly-L-lysine coated slide</td>
			<td>FISHER SCIENTIFIC</td>
			<td>120-550-15</td>
			<td>Slide for routine histological use</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PolyHRP Broad Spectrum</td>
			<td>Perkin Elmer</td>
			<td>ARH1001EA</td>
			<td>Secondary antibody</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ProLong&#8482; Gold Antifade Mountant</td>
			<td>ThemoFisher Scientific</td>
			<td>P36930</td>
			<td>Mounting</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Spatstat</td>
			<td>/</td>
			<td>Version 2.1-0</td>
			<td>Spatial point pattern analysis</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Spectral DAPI</td>
			<td>Perkin Elmer</td>
			<td>FP1490A</td>
			<td>Nucleic acid staining</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue Processor</td>
			<td>Thermo Fischer</td>
			<td>Excelsior ES</td>
			<td>Tissue processing for dehydration and paraffination</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tris Buffer Saline (TBS), 10x</td>
			<td>Cell Signaling Technology</td>
			<td>12498S</td>
			<td>Washing solution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tween 20</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>P1370-1L</td>
			<td>Nonionic detergent</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

multiplexed fluorescent immunohistochemical staining of four endometrial immune cell types in recurrent miscarriage

इम्यूनोहिस्टोकेमिस्ट्री जैविक अनुसंधान और नैदानिक निदान में ऊतक एंटीजन की पहचान और दृश्य के लिए सबसे अधिक उपयोग की जाने वाली विधि है। इसका उपयोग विभिन्न जैविक प्रक्रियाओं या विकृतियों की विशेषता के लिए किया जा सकता है, जैसे घाव-उपचार, प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया, ऊतक अस्वीकृति, और ऊतक-बायोमटेरियल इंटरैक्शन। हालांकि, पारंपरिक इम्यूनोहिस्टोकेमिकल (आईएचसी) धुंधला का उपयोग करके एक ही ऊतक अनुभाग में कई एंटीजन (विशेष रूप से प्रतिरक्षा कोशिकाओं के लिए) का दृश्य और मात्राकरण असंतोषजनक बना हुआ है। इसलिए, हाल के वर्षों में एक ऊतक नमूने या विभिन्न ऊतक नमूनों के एक कलाकारों की टुकड़ी में कई जैविक मार्कर की पहचान करने के लिए मल्टीप्लेक्स प्रौद्योगिकियों को पेश किया गया था । 
ये प्रौद्योगिकियां प्रत्यारोपण के दौरान आवर्ती गर्भपात के साथ उपजाऊ महिलाओं और महिलाओं के बीच एंडोमेट्रियम के भीतर प्रतिरक्षा सेल-टू-सेल इंटरैक्शन में परिवर्तन को अलग करने में विशेष रूप से उपयोगी हो सकती हैं। यह पत्र भ्रूण प्रत्यारोपण के दौरान ठीक समय पर एंडोमेट्रियल नमूनों में एक साथ चार प्रमुख प्रतिरक्षा कोशिका प्रकारों के घनत्व और क्लस्टरिंग की जांच करने के लिए मल्टीप्लेक्स फ्लोरेसेंस आईएचसी धुंधला के लिए एक विस्तृत प्रोटोकॉल का वर्णन करता है । इस विधि में नमूना तैयारी, प्रतिरक्षा कोशिका उपप्रकारों के लिए मार्कर के साथ मल्टीप्लेक्स अनुकूलन, और स्लाइडों की स्कैनिंग, डेटा विश्लेषण के बाद, एंडोमेट्रियल प्रतिरक्षा कोशिकाओं का पता लगाने के लिए विशिष्ट संदर्भ के साथ शामिल है। 
इस विधि का उपयोग करके, एंडोमेट्रियम में चार प्रमुख प्रतिरक्षा कोशिका प्रकारों के घनत्व और क्लस्टरिंग का एक साथ एक ही ऊतक अनुभाग में विश्लेषण किया जा सकता है। इसके अलावा, यह पेपर लागू की जा रही फ्लोरोसेंट जांच के बीच संभावित फ्लोरोफोर हस्तक्षेप को दूर करने के लिए महत्वपूर्ण कारकों और समस्या निवारण पर चर्चा करेगा। महत्वपूर्ण बात यह है कि इस मल्टीप्लेक्स स्टेनिंग तकनीक के परिणाम भ्रूण प्रत्यारोपण के दौरान इम्यूनोलॉजिक इंटरैक्शन और नियमन की गहराई से समझ प्रदान करने में मदद कर सकते हैं ।

4 एंडोमेट्रियल प्रतिरक्षा सेल प्रकारों का पता लगाने के लिए 4 रंग मल्टीप्लेक्स परख करने की समग्र योजनाबद्ध प्रक्रिया चित्र 1में दिखाई गई है। संक्षेप में, इस मल्टीप्लेक्स इम्यूनोफ्लोरेसेंस ?...

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Multiplexed Fluorescent Immunohistochemical Staining of Four Endometrial Immune Cell Types in Recurrent Miscarriage

मल्टीप्लेक्स इम्यूनोहिस्टोकेमिस्ट्री और मल्टीस्पेक्ट्रल इमेजिंग में प्रगति के बावजूद, एंडोमेट्रियम में एक साथ प्रमुख प्रतिरक्षा कोशिकाओं के घनत्व और क्लस्टरिंग की विशेषता एक चुनौती बनी हुई है। यह पेपर एंडोमेट्रियम में चार प्रतिरक्षा सेल प्रकारों के एक साथ स्थानीयकरण के लिए एक विस्तृत मल्टीप्लेक्स धुंधला प्रोटोकॉल और इमेजिंग का वर्णन करता है।

आवर्ती गर्भपात में चार एंडोमेट्रियल इम्यून सेल प्रकारों के मल्टीप्लेक्स फ्लोरोसेंट इम्यूनोहिस्टोकेमिकल स्टेनिंग

Immunohistochemistry is the most commonly used method for the identification and visualization of tissue antigens in biological research and clinical ...

वर्तमान तकनीक सात मार्करों तक का पता लगाने के लिए एक ही प्रजाति में उठाए गए एंटीबॉडी के उपयोग की अनुमति देती है। प्रक्रिया का प्रदर्शन Loucia चान, प्रयोगशाला से एक तकनीशियन हो जाएगा. ऊतक के नमूने के साथ घुड़सवार फॉर्मेलिन फिक्स्ड पैराफिन एम्बेडेड ग्लास स्लाइड तैयार करके शुरू करें, स्लाइड को ओवन में फ्लैट रखकर, ऊपर की ओर सामना करने वाले ऊतक के साथ 60 डिग्री सेल्सियस पर सेंकने के लिए।एक घंटे के बाद, डी-मोम और रसायनों की श्रृंखला के साथ प्रत्येक 10 मिनट प्रति स्लाइड को फिर से हाइड्रेट करें, जैसा कि पांडुलिपि में वर्णित है। स्लाइड्स को ट्राइस-बफ़र्ड खारा में डुबोएं, और फिर नमूनों को ठीक करने के लिए, मेथनॉल में पतला फॉर्मेल्डिहाइड के मिश्रण से भरे प्लास्टिक स्लाइड बॉक्स में। इसके बाद, स्लाइड्स को दो मिनट के लिए विआयनीकृत पानी में दो बार धोएं।एपिटोप पुनर्प्राप्ति के लिए आगे बढ़ें, पीएच 6.0 पर साइट्रिक एसिड बफर से भरे गर्मी प्रतिरोध बॉक्स में स्लाइड के रैक को रखकर। और फिर बॉक्स को माइक्रोवेव में रखते हुए, स्लाइड को पहले 50 सेकंड के लिए 100% पावर पर गर्म करने के लिए, उसके बाद 20% पावर पर 20 मिनट, एक ही तापमान बनाए रखने के लिए। आसुत पानी में स्लाइड को धोने के बाद, और TBST के साथ धोने के बाद, स्लाइड को 10 मिनट के लिए पेरोक्सीडेशन ब्लॉकिंग समाधान वाले जार में विसर्जित करें।इनक्यूबेशन के बाद, आसुत पानी में स्लाइड को कुल्ला करें और टीबीएसटी के साथ धोएं, फिर स्लाइड पर ऊतक अनुभाग के चारों ओर एक सीमा को चिह्नित करने के लिए हाइड्रोफोबिक बैरियर पेन का उपयोग करें। फिर TBST में स्लाइड कुल्ला, अवरुद्ध बफर के साथ ऊतक वर्गों को कवर और 15 मिनट के लिए एक humidified कक्ष में स्लाइड incubate. अवरुद्ध अभिकर्मकों को हटाने के लिए, पहले ब्याज के प्राथमिक एंटीबॉडी के साथ स्लाइड को इनक्यूबेट करें, और फिर पॉलिमर हॉर्सरैडिश पेरोक्सीडेज लेबल, माध्यमिक एंटीबॉडी के साथ इनक्यूबेशन से पहले, टीबीएसटी के साथ तीन बार स्लाइड को धोकर प्राथमिक एंटीबॉडी को हटा दें।इनक्यूबेशन के बाद, टीएसए कार्य समाधान के लिए ओपल वनस्पतियों को लागू करने से पहले स्लाइड्स को धोलें, और फिर एंटीजन पुनर्प्राप्ति बफर के साथ स्लाइड को कुल्ला करें। 50 सेकंड के लिए, 100% शक्ति पर माइक्रोवेव में एंटीजन पुनर्प्राप्ति बफर में स्लाइड को गर्म करके माइक्रोवेव-आधारित स्ट्रिपिंग करें, इसके बाद माइक्रोवेव सुरक्षित कंटेनरों में 20 मिनट के लिए 20% पावर। 15 मिनट के लिए कमरे के तापमान पर नमूनों को ठंडा करने के बाद, आसुत पानी और टीबीएसटी में स्लाइड को कुल्ला करें और बाद में पांच मिनट के लिए डैपी समाधान के साथ इनक्यूबेट करें।फिर उचित बढ़ते माध्यम के साथ बढ़ते से पहले स्लाइड को हवा में सुखाएं। स्लाइड्स की इमेजिंग से पहले कार्यस्थान में उपयुक्त फ़िल्टर को प्रीसेट करें. 200 गुना आवर्धन के तहत विश्लेषण के लिए कम से कम 10 फ़ील्ड कैप्चर करें।कक्षों की गणना करने के लिए, ऑब्जेक्ट गिनती सेटिंग्स पैनल प्रदर्शित करने के लिए, चरण पट्टी में गणना ऑब्जेक्ट्स बटन पर क्लिक करें. यदि ऊतक को विभाजित किया गया है, तो उस ऊतक श्रेणी का चयन करें जिसमें वस्तुओं को पाया जाना है। फिर ऑटो-स्केल या फिक्स्ड स्केल से वांछित सिग्नल स्केलिंग का चयन करें।ऑब्जेक्ट विभाजन के लिए, ड्रॉप-डाउन सूची से प्राथमिक घटक का चयन करें. अन्य ऑब्जेक्ट्स को अलग-अलग और संयुक्त ऑब्जेक्ट्स के रूप में नहीं छूने वाले ऑब्जेक्ट्स का पता लगाने के लिए, अधिकतम आकार और पिक्सेल बॉक्स की जाँच करें और फिर परिष्कृत विभाजन का विकल्प चुनें. अगला, प्रतिरक्षा कोशिकाओं में सभी स्ट्रोमल कोशिकाओं को अलग से गिनती करें, प्रत्येक कैप्चर की गई छवि के लिए स्ट्रोमल कोशिकाओं की कुल संख्या के सापेक्ष प्रतिरक्षा कोशिकाओं के प्रतिशत के रूप में डेटा को व्यक्त करने के लिए।बाद में, सभी फ़ील्ड्स के औसत के रूप में अंतिम कक्ष गणना की रिपोर्ट करें। दृश्य संपादक का उपयोग करते हुए, परिणामी डेटा तालिकाओं पोस्ट-प्रोसेसिंग की जाँच करें और तब गणना डेटा तालिका निर्यात करें. प्रतिनिधि विश्लेषण में, एंडोमेट्रियम नमूने में चार प्रतिरक्षा कोशिका प्रकार हम विभेदित हैं।संसाधित छवि उपकला, और स्ट्रोमल डिब्बों के रूप में ऊतक विभाजन दिखाती है। मल्टीप्लेक्स इम्युनोस्टेनिंग को एंडोमेट्रियल बायोप्सी पर एक उपजाऊ नियंत्रण महिला और अस्पष्टीकृत आवर्तक गर्भपात के साथ एक महिला से किया गया था, सीडी 3, सीडी 56, सीडी 68 और सीडी 20 का प्रतिनिधित्व करने वाले हमारे लिए एकल मंजिल इम्यूनोस्टेनिंग में पता चला था। एक बार प्रतिरक्षा ध्वनि की पहचान हो जाने के बाद, साइटोकाइन के नीचे आगे धुंधला होने से आरोपण की सफलता के लिए उनकी बातचीत और तंत्र को संबोधित करने में मदद मिल सकती है।

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Preparation of 2-dGuo-Treated Thymus Organ Cultures

2 - dGuo इलाज thymus अंग संस्कृतियों की तैयारी

In the thymus, interactions between developing T-cell precursors and stromal cells that include cortical and medullary epithelial cells are known to play ...

Live Cell Imaging of F-actin Dynamics via Fluorescent Speckle Microscopy (FSM)

Live Cell Imaging of F-actin Dynamics via Fluorescent Speckle Microscopy FSM

एफ actin प्रतिदीप्त के माध्यम से गतिशीलता का लाइव सेल इमेजिंग माइक्रोस्कोपी धब्बा (FSM)

In this protocol we describe the use of Fluorescent Speckle Microscopy (FSM) to capture high-resolution images of actin dynamics in PtK1 cells. A unique ...

Whole-mount Immunohistochemical Analysis for Embryonic Limb Skin Vasculature: a Model System to Study Vascular Branching Morphogenesis in Embryo

पूरे माउंट भ्रूणीय अंग त्वचा vasculature के लिए immunohistochemical विश्लेषण: एक मॉडल प्रणाली के अध्ययन भ्रूण में संवहनी शाखाओं में बंटी morphogenesis

Whole-mount immunohistochemical analysis for imaging the entire vasculature is pivotal for understanding the cellular mechanisms of branching ...

Analysis of Single-cell Gene Transcription by RNA Fluorescent In Situ Hybridization (FISH)

Analysis of Single-cell Gene Transcription by RNA Fluorescent In Situ Hybridization FISH

एकल कोशिका के जीन प्रतिलेखन की शाही सेना प्रतिदीप्त द्वारा विश्लेषण<em&gt; स्वस्थानी</em&gt; संकरण (मछली)

Adhesion of Plasmodium falciparum infected erythrocytes (IE) to human endothelial receptors during malaria infections is mediated by expression of PfEMP1 ...

Separation of Spermatogenic Cell Types Using STA-PUT Velocity Sedimentation

एसटीए डाल वेग अवसादन का प्रयोग Spermatogenic प्रकार की कोशिकाओं का पृथक्करण

Mammalian spermatogenesis is a complex  differentiation process that occurs in several stages in the seminiferous  tubules of the testes. Currently, there ...

Genetic Barcoding with Fluorescent Proteins for Multiplexed Applications

मल्टिप्लेक्स अनुप्रयोगों के लिए फ्लोरोसेंट प्रोटीन के साथ जेनेटिक बारकोडिंग

Fluorescent proteins, fluorescent dyes and fluorophores in general have revolutionized the field of molecular cell biology. In particular, the discovery ...

Quantitation of Protein Expression and Co-localization Using Multiplexed Immuno-histochemical Staining and Multispectral Imaging

प्रोटीन अभिव्यक्ति और सह स्थानीयकरण मल्टिप्लेक्स इम्यूनो-histochemical धुंधला और multispectral इमेजिंग का उपयोग के quantitation

Immunohistochemistry is a commonly used clinical and research lab detection technique for investigating protein expression and localization within ...

Development of an Insert Co-culture System of Two Cellular Types in the Absence of Cell-Cell Contact

की सेल सेल संपर्क अभाव में दो सेलुलर प्रकार के एक सम्मिलित सह संस्कृति प्रणाली का विकास

The role of secreted soluble factors in the modification of cellular responses is a recurrent theme in the study of all tissues and systems. In an attempt ...

Isolation and Transcriptome Analysis of Plant Cell Types

प्लांट सेल प्रकारों का अलगाव और प्रतिलेख विश्लेषण

In multicellular organisms, developmental programming and environmental responses can be highly divergent in different cell types or even within cells, ...

Investigating Zinc Transport Mechanism in Mammalian Cells with FluoZin-3 Assay

Characterizing Mammalian Zinc Transporters Using an In Vitro Zinc Transport Assay

Exploring Cellular Zinc Regulation Through ZnT1 Functionality (Video) | JoVE

इन विट्रो जिंक ट्रांसपोर्ट परख का उपयोग करके स्तनधारी जस्ता ट्रांसपोर्टरों की विशेषता

Transition metals such as Zn2+ ions must be tightly regulated due to their cellular toxicity. Previously, the activity of Zn2+ transporters was measured ...