Name: measuring glucose uptake in drosophila models of tdp-43 proteinopathy
Uploaded: 2021-08-03T15:00:00
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우리는 드로소필라 균주를 제공 스테파니 쉬르마이어와 다케시 이왓스보 감사합니다. 우리는 또한 애리조나 대학의 말리 이미징 코어에서 이미징을 지원한 패트리샤 얀스마에게 감사드립니다. 이 작품은 건강 NIH NS091299의 국가 학회에 의해 투자되었다, NS115514 (DCZ에), HHMI 길리엄 펠로우십 (EM에) 및 학부 생물학 연구 프로그램 (HB에).

UAS FLII12Pglu-700μδ6 형질식 파리는 볼켄호프 외10에서 보고되었으며 S. Schirmeier 박사가 친절하게 제공했습니다. UAS TDP-43G298S 형질전환라인은 T. 이왓츠보13박사가 친절하게 제공했습니다. UAS FLII12Pglu-700μmδ6 및 UAS TDP-43 전염을 모두 수용하는 재조합 드로소필라 라인은 표준 유전적 접근법을 사용하여 자르네스쿠 실험실에서 생성되어 만조 외<sup class=...

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	<li>Ingre, C., Roos, P. M., Piehl, F., Kamel, F., Fang, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Risk+factors+for+amyotrophic+lateral+sclerosis.">Risk factors for amyotrophic lateral sclerosis.</a> Clinical Epidemiology. 7, 181-193 (2015).</li><li>Dupuis, L., Pradat, P. F., Ludolph, A. C., Loeffler, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Energy+metabolism+in+amyotrophic+lateral+sclerosis.">Energy metabolism in amyotrophic lateral sclerosis.</a> The Lancet Neurology. 10 (1), 75-82 (2011).</li><li>Buratti, E., Baralle, F. 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R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterizing+the+RNA+targets+and+position-dependent+splicing+regulation+by+TDP-43.">Characterizing the RNA targets and position-dependent splicing regulation by TDP-43.</a> Nature Neuroscience. 14 (4), 452-458 (2011).</li><li>Ling, S. C., Polymenidou, M., Cleveland, D. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Converging+mechanisms+in+ALS+and+FTD:+disrupted+RNA+and+protein+homeostasis.">Converging mechanisms in ALS and FTD: disrupted RNA and protein homeostasis.</a> Neuron. 79 (3), 416-438 (2013).</li><li>Estes, P. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Wild-type+and+A315T+mutant+TDP-43+exert+differential+neurotoxicity+in+a+Drosophila+model+of+ALS.">Wild-type and A315T mutant TDP-43 exert differential neurotoxicity in a Drosophila model of ALS.</a> Human Molecular Genetics. 20 (12), 2308-2321 (2011).</li><li>Estes, P. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Motor+neurons+and+glia+exhibit+specific+individualized+responses+to+TDP-43+expression+in+a+Drosophila+model+of+amyotrophic+lateral+sclerosis.">Motor neurons and glia exhibit specific individualized responses to TDP-43 expression in a Drosophila model of amyotrophic lateral sclerosis.</a> Disease Models &amp; Mechanisms. 6 (3), 721-733 (2013).</li><li>Manzo, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Glycolysis+upregulation+is+neuroprotective+as+a+compensatory+mechanism+in+ALS.">Glycolysis upregulation is neuroprotective as a compensatory mechanism in ALS.</a> eLife. 8, 45114 (2019).</li><li>Volkenhoff, A., Hirrlinger, J., Kappel, J. 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B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=GLUT1+and+GLUT9+as+major+contributors+to+glucose+influx+in+HepG2+cells+identified+by+a+high+sensitivity+intramolecular+FRET+glucose+sensor.">GLUT1 and GLUT9 as major contributors to glucose influx in HepG2 cells identified by a high sensitivity intramolecular FRET glucose sensor.</a> Biochimedica et Biophysica Acta. 1778 (4), 1091-1099 (2008).</li><li>Ihara, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=RNA+binding+mediates+neurotoxicity+in+the+transgenic+Drosophila+model+of+TDP-43+proteinopathy.">RNA binding mediates neurotoxicity in the transgenic Drosophila model of TDP-43 proteinopathy.</a> Human Molecular Genetics. 22 (22), 4474-4484 (2013).</li><li>Brand, A. H., Perrimon, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Targeted+gene+expression+as+a+means+of+altering+cell+fates+and+generating+dominant+phenotypes.">Targeted gene expression as a means of altering cell fates and generating dominant phenotypes.</a> Development. 118 (2), 401-415 (1993).</li><li>Diaz-Garcia, C. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantitative+in+vivo+imaging+of+neuronal+glucose+concentrations+with+a+genetically+encoded+fluorescence+lifetime+sensor.">Quantitative in vivo imaging of neuronal glucose concentrations with a genetically encoded fluorescence lifetime sensor.</a> Journal of Neuroscience Research. 97 (8), 946-960 (2019).</li><li>Mergenthaler, P., Lindauer, U., Dienel, G. A., Meisel, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sugar+for+the+brain:+the+role+of+glucose+in+physiological+and+pathological+brain+function.">Sugar for the brain: the role of glucose in physiological and pathological brain function.</a> Trends in Neurosciences. 36 (10), 587-597 (2013).</li><li>Lu, B., Vogel, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Drosophila+models+of+neurodegenerative+diseases.">Drosophila models of neurodegenerative diseases.</a> Annual Review of Pathology. 4, 315-342 (2009).</li></ol>

여기서 상세히 기술된 기술은 FLII12Pglu-700δ6, 밀리몰라 범위10,11,12로포도당 수준의 변화를 검출할 수 있는 FRET 기반 센서를 사용하여 살아있는 드로소필라에 대한 특정 세포 유형의 포도당섭취를측정하도록 적용될 수 있다. 이 센서는 이전에 UAS-GAL4 시스템과 함께 뉴런9,10을포?...

근위축성 측삭 경화증 (ALS)은 현재 불치의 진보적 인 신경 퇴행성 질환입니다. ALS는 진단1의2-5 년 안에 운동 조정, 돌이킬 수 없는 마비, 호흡 부전 및 최종 죽음의 손실로 이끌어 내는 상부 및 하부 운동 뉴런에 영향을 미칩니다. ALS는 체중 감소, 이상지질혈증 및 과대사와 같은 신진 대사 결함과 관련이 있습니다(2에서검토됨); 그러나, 그것은 어떻게 신진 대사에 이러한 변경 모터 뉴런 변성관련 불분명 남아. ALS 및 관련 신경퇴행성 질환에서 흔히 발생하는 분모는 TDP-43, RNA처리3,4,5의여러 단계에 관여하는 핵산 결합 단백질이다. TDP-43에 있는 돌연변이는 환자의 3%-5%에 영향을 미치지만, 야생 형 TDP-43 단백질은 ALS 케이스의 >97%에서 세포질 집계 에서 발견됩니다(6에서검토). 이 병리학은 세포질 포함, 운동 기능 장애 및 감소수명을포함하여 ALS의 여러 측면을 재구성하는 모터 뉴런에서 인간 야생형 또는 돌연변이 TDP-43 (G298S)의 과발현에 의해 드로소필라에서 모델링되었다7,8. 이러한 모델을 이용하여, 최근에는 TDP-43 단백질요법이 피루바테 수준및 인포스포프락토키나아제(PFK) mRNA, 글리코리시스9의속도 제한 효소의 상당한 증가를 야기한다고 보고되었다. PFK 성적증명서의 유사한 증가는 환자 유래 운동 뉴런과 척수에서 발견되었으며, 이는 당해가 TDP-43 단백질 요법의 맥락에서 강화된다는 것을 시사한다. 흥미롭게도, 식이 및 유전 조작을 이용한 글리코리시스의 추가 증가는 운동 신경을 퇴행성화하는 보상, 신경 보호 메커니즘과 일치하여 TDP-43 단백질 요법의 플라이 모델에서 운동 기능 장애 및 증가수명과 같은 여러 ALS 표현형을 완화시켰습니다.
TDP-43 단백병증의 드로소필라 모델에서 글리코리시스의 변화를 더욱 조사하고 포도당 섭취를 측정하기 위해 이전에 보고된 유전자 인코딩 된 FRET 계 센서 FLII12Pglu-700μδ610은 UAS-GAL4 발현 시스템을 사용하여 모터 뉴런으로 발현되었다. FLII12Pglu-700μδ6 포도당 센서는 녹색 형광 단백질, 시안 및 황형 단백질(CFP 및 YFP)의 두 가지 변이체 간의 공명 에너지 전달을 사용하여 세포 수준에서 포도당을 검출합니다. 분자의 반대쪽 끝에 CFP 및 YFP에 융합된 대장균 MglB 유전자로부터 세균성 포도당 결합 도메인으로 구성된다. 포도당 분자에 바인딩될 때, 센서는 CFP와 YFP를 더 가깝게 가져오고 FRET가 생기도록 허용하는 형성 변화를 겪으며, 이는 세포내 포도당 수준10,11,12(도 1)를정량화하는 데 사용될 수 있다. 여기서, 우리는 FLII12Pglu-700μδ6 센서가 모터 뉴런에서 TDP-43 단백질 요법에 의한 포도당 섭취의 변화를 결정하는 데 어떻게 사용될 수 있는지 를 보여줍니다. 여기에 설명된 실험은 운동 뉴런에서 ALS 관련 돌연변이, TDP-43G298S의과발현이 대조군에 비해 포도당 섭취량이 현저하게 증가한다는 것을 보여준다. 이 접근법은 다른 유형의 ALS(예를 들어, SOD1, C9orf72 등) 및/또는 다른 세포 유형(예: 신경변성과 관련된 포도당 섭취의 변화를 결정하기 위해 사용될 수 있다).

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>35 mm tissue culture dishes</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>CLS430165</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>40X water immersion lens</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td>440090</td>
			<td>dippable, N.A. 0.8</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>dissection scissors</td>
			<td>Roboz</td>
			<td>RS-5618</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dumont #5 forceps</td>
			<td>VWR</td>
			<td>100189-236</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dumont #55 forceps</td>
			<td>VWR</td>
			<td>100189-244</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Minutien pins</td>
			<td>Fine Science tools</td>
			<td>26002-10</td>
			<td>used for dissections</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SYLGARD 184 Silicone Elastomer Kit</td>
			<td>Dow</td>
			<td>1317318</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Zeiss LSM880 NLO upright multiphoton/confocal microscope</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td>N/A</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

measuring glucose uptake in drosophila models of tdp-43 proteinopathy

근위축성 측삭 경화증은 진단 후 2-5 년 이내에 진보적 인 근육 약점과 죽음을 일으키는 신경 퇴행성 질환입니다. 임상 증상은 체중 감소를 포함, 이상 지질 혈 증, 그리고 과대사; 그러나, 이러한 모터 뉴런 변성에 어떻게 관련 되어 불분명 남아. 세포질 내재, 운동 장애 및 수명 감소를 포함한 ALS의 여러 특징을 재구성하는 TDP-43 단백질 요법의 Drosophila 모델을 사용하여, 우리는 최근에 광범위한 신진 대사 적자를 확인했습니다. 이들 중, 글리코리시스는 조절되고 유전적 상호작용 실험이 보상 신경보호 메커니즘에 대한 증거를 제공하는 것으로 밝혀졌다. 실제로, 인산화루크토키나아제의 강화 규제에도 불구하고, 글리코리시스의 효소를 제한하는 속도, 식이 및 유전 적 조작을 이용한 글리코리시스의 증가는 TDP-43 단백질 요법의 비행 모델에서 운동 기능 장애 및 증가수명을 완화하는 것으로 나타났다. 모터 뉴런의 글리코리틱 플럭스에 대한 TDP-43 단백질 요법에 대한 효과를 더욱 조사하기 위해 이전에 보고된 유전자 인코딩, FRET 기반 센서, FLII12Pglu-700μδ6이 사용되었다. 이 센서는 FRET 쌍으로 세균성 포도당 감지 도메인및 시안 및 황형 광성 단백질로 구성됩니다. 포도당 결합시 센서는 FRET가 발생할 수 있도록 형성적 변화를 겪습니다. FLII12Pglu-700μδ6를 사용하여, 포도당 섭취량은 TDP-43G298S,ALS를 유발하는 변형을 발현하는 운동 뉴런에서 현저하게 증가하는 것으로 나타났다. 여기서, TDP-43 단백질요법의 맥락에서 포도당 센서 FLII12Pglu-700δ6을 발현하는 애벌레 복부 신경코드 제제에서 포도당 통풍구, ex vivo를측정하는 방법을 보여 준다. 이 접근법은 포도당 섭취량을 측정하고 다른 세포 유형또는 ALS 및 관련 신경 퇴행성 질환을 일으키는 다양한 돌연변이의 맥락에서 글리코리틱 플럭스를 평가하는 데 사용할 수 있습니다.

복부 신경 코드 (VNC), 전 생체 에서 포도당 센서의 이미지 수집 TDP-43에 근거를 둔 ALS의 Drosophila 모형에 있는 포도당 섭취에 있는 다름을 결정하기 위하여, 유전으로 인코딩된 FRET 기지를 둔 포도당 센서를 이용했습니다. 센서는 대장균 MglB 유전자로부터 포도당 결합 도메인에 융합된 CFP 및 YFP를 구성했다. 포도당 결합은 CFP와 YFP <sup class="xref"...

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Measuring Glucose Uptake in Drosophila Models of TDP-43 Proteinopathy

포도당 섭취량은 FRET 기반의 유전자 인코딩 된 포도당 센서에 의해 표시된 바와 같이 TAR DNA 결합 단백질 (TDP-43) 단백질 병증에 의해 영향을받는 Drosophila 운동 뉴런에서 증가합니다.

TDP-43 단백질 요법의 드로소필라 모델에서 포도당 섭취 측정

Amyotrophic lateral sclerosis is a neurodegenerative disorder causing progressive muscle weakness and death within 2-5 years following diagnosis. Clinical ...

이 기술은 살아있는 Drosophila 조직에 있는 특정 세포에 있는 포도당 upup를 측정할 수 있기 때문에 중요합니다. FRET 기반 센서는 세포내 포도당 수치의 변화를 직접 측정합니다. 이 기술은 연구원이 ALS 모형 대 통제에서 살아있는 운동 신경 안에, 실시간으로 포도당 수준에 있는 변경을 평가할 수 있습니다.어려운 측면은 버퍼를 변경 한 후 뉴런의 동일한 세트를 이미징입니다. 현미경에 샘플을 두면 VMC가 가능한 한 적게 움직이도록 하는 데 도움이 됩니다. 해부를 시작하기 전에 이미징 현미경 및 레이저를 켭니다.그런 다음 방황하는 세 번째 인스타 애벌레를 수집하고 이중 증류수로 헹구고 이전에 준비된 엘라스토머 안감 접시에 HL3 버퍼 한 방울에 놓습니다. 해부 현미경 아래, 조심스럽게 곤충 핀으로 유충 길이를 스트레칭하여, 애벌레의 전방 및 후방 끝을 고정하는 집게의 쌍을 사용합니다. 각진 아이리스 가위를 사용하여 후부 핀 바로 위에 절개를 합니다.그런 다음 애벌레의 앞쪽 끝으로 절개에서 수직 절단을합니다. 필요한 경우 HL3 버퍼 몇 방울을 추가 한 후 중추 신경계를 방해하지 않고 기관 및 부동 기관의 나머지 부분을 제거하십시오. 그런 다음 플랩을 고정하고 신경 근육 시스템을 그대로 유지하면서 중추 신경계를 노출시키기 위해 신체 벽을 스트레칭합니다.이미지 수집을 위해 40배의 수질 침수 렌즈로 수직 공초점 현미경을 사용하십시오. 그런 다음 CFP를 자극하기 위해 405 나노미터 레이저를 선택합니다. 그런 다음 스캔 속도, 평균, 목표, 줌 핀홀 크기 및 공간 해상도와 같은 획득 매개 변수를 최적화합니다.신호가 최적의 동적 범위에 있도록 게인을 조정하고 모든 유전자형에 대해 동일한 매개 변수를 사용합니다. 복부 신경 코드 내에서 모터 뉴런을 이미지하려면 렌즈 아래에 해부된 샘플로 실리콘 접시를 놓고 렌즈를 낮추어 트레할로스 자당 HL3 버퍼와 접촉하게 됩니다. 렌즈가 버퍼에 완전히 잠겨 있는지 확인하고 필요한 경우 버퍼를 더 추가합니다. 다음.CFP 및 FRET 채널을 사용하여 복부 신경 코드 미드라인을 따라 초점을 맞춘 최소 6개의 모터 뉴런으로 구성된 광학 선택을 수동으로 선택합니다. 그런 다음 10분 동안 10초마다 이미지를 수집합니다. 이러한 이미지는 기준선을 나타냅니다.포도당 자극의 경우 파스퇴르 파이펫을 사용하여 HL3 버퍼를 함유한 트레할로스 자당을 제거하고 복부 신경 코드를 움직이지 않고 HL3 버퍼를 보충한 5밀리머 포도당을 추가합니다. 그런 다음 10초마다 이미지를 10분 간 추가로 획득합니다. 이러한 이미지는 자극 단계를 나타냅니다.이미지를 CZI 파일 또는 이미징 소프트웨어에서 지원하는 파일 유형으로 이미지를 날짜, 유전 배경, 실험 상태 및 사용되는 채널을 포함한 파일 이름으로 저장합니다. 매개 변수를 다시 사용하여 모든 유전자형을 이미지화합니다. 이미지 처리의 경우 피지-ImageJ 이미징 소프트웨어를 열고 CZI 파일을 열고 하이퍼 스택이 있는 뷰 스택을 선택하고 색상 모드를 회색 으로 설정하고 분할 채널을 별도의 창으로 선택합니다. 다음.드리프트 보정 플러그인, 터보 레그 및 스택 레그로 이미지를 처리합니다. 각 채널은 플러그인 에서 스택 레그를 선택한 다음 번역변환을 선택하여 별도로 수정됩니다. 전체 타임 시리즈에 초점을 맞춘 모든 모터 뉴런을 추적하여 관심 영역 또는 ROI 영역을 수동으로 선택합니다.그런 다음 ROI 관리자를 사용하여 각 모터 뉴런 윤곽선을 저장합니다. 다중 측정 함수를 사용하여 각 시점에서 각 ROI의 평균 회색 값을 측정합니다. 그런 다음 첫 번째 채널에서 두 번째 채널로 추적된 ROI를 복사하여 사전 자극 이미지를 위해 복사합니다.데이터 분석을 위해 FRET 및 CFP 채널의 평균 회색 값을 사용하여 CFP 비율별로 FRET를 계산합니다. CFP 비율에 의한 FRET의 변화는 세포내 포도당 농도의 변화를 반영한다. 그런 다음 각 ROI 및 시간 대 시간에 대해 CFP 비율로 FRET를 플롯합니다.유전적으로 인코딩된 FRET 기반 포도당 센서는 운동 뉴런의 포도당 섭취를 측정하는 데 사용되었습니다. 포도당이 센서에 바인딩되지 않을 때 CFP 여기는 CFP 방출만 발생합니다. 그리고 포도당이 결합될 때, YFP 신호는 CFP와 YFP 사이에서 발생하는 FRET 때문에 검출될 수 있습니다.여기에 표시된 바와 같이 기준선 및 자극 조건 하에서 TDP-43 돌연변이 뉴런의 포도당 센서 제어에서 FRET 및 CFP 신호의 이미지가 표시됩니다. 대표적인 운동 신경은 ROI의 예로 각 이미지에 설명되어 있습니다. 포도당 자극시 포도당 센서를 표현하는 제어 운동 뉴런은 포도당 섭취량이 작아지며 TDP-43을 표현하는 뉴런은 상당히 높은 포도당 섭취를 보였습니다.TDP-43 돌연변이 모터 뉴런의 CFP 비율에 의한 추가 FRET는 매 시점에서 포도당 센서 제어로 정규화되었다. 기준 조건하에서, 유전자형 사이에는 차이가 없었다. 그러나, 포도당 자극시, 대조군에 비해 TDP-43 돌연변이체에서 포도당 섭취량의 신속하고 유의한 증가를 관찰하였다.바 그래프 표현에서, 포도당 센서를 표현하는 뉴런의 포도당 자극은 기준선에 비해 CFP 비율에 의한 FRET의 작지만 유의한 증가를 입증하였다. 대조적으로 TDP-43을 발현하는 뉴런은 기준선에 비해 자극시 비율의 상당한 증가를 보였다. TDP-43과 포도당 센서를 표현하는 모터 뉴런 사이의 CFP 비율에 의한 FRET의 순 차이는 약 10.9%의 시간 관리가 이 절차에 매우 중요하며, 이는 뉴런이 이미징 과정에서 죽지 않도록 하는 것입니다.이를 피하기 위해 해부 직후 이미지를 이미지화하는 것이 중요합니다. 이 기술은 뉴런에서 포도당 대사의 중요성을 강조하고 모터 뉴런 재생에 있는 glycolysis의 역할을 더 조사하기 위하여 우리의 단을 지도했습니다.

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Measuring Glucose Uptake in Drosophila Models of TDP-43 Proteinopathy

Assaying Locomotor, Learning, and Memory Deficits in Drosophila Models of Neurodegeneration

Assaying Locomotor, Learning, and Memory Deficits in Drosophila Models of Neurodegeneration

에 시금 운동력이있는 사람, 학습, 및 메모리 적자 Drosophila</emNeurodegeneration의> 모델

Advances in genetic methods have enabled the study of genes involved in human neurodegenerative diseases using Drosophila as a model system1. Most of ...

연구

신경과학

Measuring Motor Coordination in Mice

마우스에 모터 조정을 측정

Mice are increasingly being used in behavioral neuroscience, largely replacing rats as the behaviorist's animal of choice. Before aspects of behavior such ...

Visualization of Proprioceptors in Drosophila Larvae and Pupae

Visualization of Proprioceptors in Drosophila Larvae and Pupae

의 Proprioceptors의 시각화<em&gt; Drosophila</em&gt; 애벌레와 Pupae

Proprioception is the ability to sense the motion, or position, of body parts by responding to stimuli arising within the body. In fruitflies and other ...

An Inexpensive, Scalable Behavioral Assay for Measuring Ethanol Sedation Sensitivity and Rapid Tolerance in Drosophila

An Inexpensive, Scalable Behavioral Assay for Measuring Ethanol Sedation Sensitivity and Rapid Tolerance in Drosophila

에탄올 진정 감도 및 신속한 공차 측정을위한 저렴하고 확장 가능한 행동 분석<em&gt; 초파리</em

Alcohol use disorder (AUD) is a serious health challenge. Despite a large hereditary component to AUD, few genes have been unambiguously implicated in ...

Measuring and Altering Mating Drive in Male Drosophila melanogaster

Measuring and Altering Mating Drive in Male Drosophila melanogaster

측정과 남성의 변경 결합 드라이브<em&gt; 노랑 초파리</em

Despite decades of investigation, the neuronal and molecular bases of motivational states remain mysterious. We have recently developed a novel, ...

Measuring Synaptic Vesicle Endocytosis in Cultured Hippocampal Neurons

교양된 Hippocampal 신경에 시 냅 스 소포 Endocytosis를 측정

During endocytosis, fused synaptic vesicles are retrieved at nerve terminals, allowing for vesicle recycling and thus the maintenance of synaptic ...

Assessment of Dopaminergic Homeostasis in Mice by Use of High-performance Liquid Chromatography Analysis and Synaptosomal Dopamine Uptake

고성능 액체 크로마토그래피 분석 및 Synaptosomal 도파민 통풍 관의 사용에 의해 쥐에서 Dopaminergic 항상성의 평가

Dopamine (DA) is a modulatory neurotransmitter controlling motor activity, reward processes and cognitive function. Impairment of dopaminergic (DAergic) ...

Quantitative Cell Biology of Neurodegeneration in Drosophila Through Unbiased Analysis of Fluorescently Tagged Proteins Using ImageJ

Quantitative Cell Biology of Neurodegeneration in Drosophila Through Unbiased Analysis of Fluorescently Tagged Proteins Using ImageJ

ImageJ를 사용 하 여 붙일 태그가 단백질의 편견된 분석 통해 초파리 에서 Neurodegeneration의 양적 세포 생물학

With the rising prevalence of neurodegenerative diseases, it is increasingly important to understand the underlying pathophysiology that leads to neuronal ...

Alternate Immersion in Glucose to Produce Prolonged Hyperglycemia in Zebrafish

제브라피시에서 장기간 고혈당증을 생산하는 포도당에 대체 침수

Zebrafish (Danio rerio) are an excellent model to investigate the effects of chronic hyperglycemia, a hallmark of Type II Diabetes Mellitus (T2DM). This ...

Semi-Quantitative Determination of Dopaminergic Neuron Density in the Substantia Nigra of Rodent Models using Automated Image Analysis

자동 이미지 분석을 사용하여 설치류 모델의 실질적인 Nigra에서 도파민성 뉴런 밀도의 반정량 측정

Estimation of the number of dopaminergic neurons in the substantia nigra is a key method in pre-clinical Parkinson's disease research. Currently, unbiased ...