Name: detection of g protein-coupled receptor expression in mouse vagal afferent neurons using multiplex in situ hybridization
Uploaded: 2021-09-20T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Detection of G Protein-coupled Receptor Expression in Mouse Vagal Afferent Neurons using Multiplex In Situ Hybridization at JoVE.com

Dette arbejde blev støttet af Neuroanatomi / Histology / Brain Injection Core finansieret af NIH tilskud #5P01DK119130-02. Forfatterne vil gerne anerkende bistand fra UT Southwestern Live Cell Imaging Facility (ledet af Dr. Phelps) og dets personale (Abhijit Bugde og Marcel Mettlen), støttet delvist af NIH Grant #1S10OD021684-01, en fælles ressource af Harold C. Simmons Cancer Center, delvist støttet af en NCI Cancer Center Support Grant, P30 CA142543.

BEMÆRK: Mus, der blev anvendt i denne undersøgelse, var vilde hanner på en ren C57BL/6J-baggrund. I alt 4 mus blev brugt til multiplex ISH. Alle mus var ca. 8 uger gamle på tidspunktet for ofring. En hanmus (ca. et år gammel) blev også brugt til at demonstrere endogene fluorescens forbundet med aldring. Dyr blev anbragt i ventilerede bure i et barriereanlæg med ad libitum adgang til mad og vand. UT Southwestern Medical Center Institutional Animal Care and Use Committee gennemgik og godkendte de procedurer...

Teknikken med ISH blev opfundet i slutningen af 1960'erne42. Det er dog først i midten af 1980'erne , at det blev ansøgt om påvisning af mRNAs i de centrale og periferenervesystemer 43,44. I betragtning af nervesystemets heterogenitet og tilbagevendende problemer med antistoffer forbliver lokalisering af en bestemt udskrift på cellulært niveau et uvurderligt værktøj. Ikke desto mindre er traditionelle ISH-metoder forblevet besværli...

Cellekroppe af vagale afferents er indeholdt i jugular, petrosal, og nodose ganglier1,2,3. Deres axoner rejser sammen via flere grene af vagusnerven til craniocervical, thorax og abdominal territorier4,5,6,7. Fra deres viscerale slutninger kan vagale afferents reagere på en bred vifte af fysiologiske og skadelige stimuli8,9,10. Imidlertid er fordelingen af signalmolekyler og receptorer, der er involveret i vagal sensing, stadig dårligt karakteriseret. Dette skyldes til dels, at vagal ganglier, på trods af deres lille størrelse, udtrykker et bredt spektrum af receptorer, herunder et stort antal GPCRs8,11,12,13. Desuden er vagale afferent neuroner i sagens natur heterogene og viser forskellige molekylære profiler14. For at komplicere sagen er halspulsåren, petrosal og nodose ganglier fastgjort i musen og danner derved en enkelt ganglionic masse. Endelig er nodose ganglion i en delmængde af dyr knyttet til den sympatiske overlegne cervikal ganglion15.
Tidligere har efterforskere henvendt sig til immunohistochemistry for at studere den neurokemiske make-up af vagale afferent neuroner16,17,18. Mens immunohistochemistry ved hjælp af validerede antistoffer er nyttige, skal resultaterne af immunohistokemiske undersøgelser fortolkes med forsigtighed. For eksempel har talrige bestræbelser på at identificere specifikke antistoffer mod GPCR undladt19,20,21,22,23,24,25, førende efterforskere til at konkludere, at de fleste antistoffer mod GPCR er upålidelige. For at omgå disse spørgsmål er kvantitativ PCR (qPCR) blevet meget brugt til at vurdere genekspression i gnaverens vagale ganglionic masse26,27,28,29. Men, undersøgelse genekspression ved hjælp af qPCR sker på bekostning af et tab af rumlige oplysninger. Det kan især ikke forudsiges, hvor mange celler eller hvilken eller flere celletyper der udtrykker et bestemt interessegen (f.eks. nodose vs. halspulsårer). Tilbagevendende spørgsmål omfatter også forurening med tilstødende væv og inddragelse af variable længder af vagus nerve, overlegen cervikal, og halspulsåren ganglier under dissektion15. Som et resultat af ovenstående vanskeligheder, kontroverser omgiver udtryk og distribution af flere GPCRs i vagal afferent neuroner. Et særligt gådefuldt eksempel vedrører ghrelin receptor (Ghsr). Mens nogle undersøgelser har fundet udbredt udtryk for denne receptor i vagal afferent neuroner30,31,32, andre har fundet Ghsr mRNA at være næsten målbart i nodose ganglion11,14. En detaljeret kortlægning af Ghsr mRNA i den vagale ganglionic masse er derfor berettiget.
In situ hybridisering (ISH) er også blevet brugt til at vurdere genekspressionsmønstre i vagal ganglionic masse7,11,12,33,34,35. Fordi RNA-baserede teknikker forbliver mere pålidelige og specifikke end antistofbaserede teknikker under de fleste omstændigheder36,37, har ISH-undersøgelser vist sig værdifulde for bedre forståelse af den neurokemiske kodning af vagale afferent neuroner. Ikke desto mindre er traditionelle ISH-teknikker i sig selv ikke uden forbehold. Radioaktiv ish er følsom, men genererer baggrund og forbliver besværlig38. Ikke-radioaktiv ish er mindre kompliceret, men også mindre følsom38. I modsætning hertil er den nyligt udviklede RNAscope ISH-metode meget følsom og genererer minimal baggrund39. Den nuværende undersøgelse anvendt multiplex fluorescerende RNAscope til påvisning af GPCRs i vagal afferent neuroner af musen. Vi fokuserede på at kortlægge fordelingen af Ghsr og sammenlignede dens fordeling med fordelingen af cholecystokinin receptor (Cck1r), en anden GPCR kendt for at være udtrykt i nodose ganglion34. Endelig blev de to transskriptionsfaktorer, parret-lignende homeobox 2b (Phox2b) og PR domæne zink finger protein 12 (Prdm12), brugt som selektive markører for nodose og jugular afferent neuroner, henholdsvis14. Uden at visualisere Phox2b eller Prdm12, ville det være udfordrende at identificere jugular vs nodose afferents med sikkerhed. Potentielle tekniske faldgruber diskuteres også i hele artiklen.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>10x PBS</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>BP399-4</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>20x SSC</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>AM9763</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>-80&#176;C freezer</td>
			<td>PHCBI</td>
			<td>MDF-DU901VHA-PA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Adobe Photoshop 2021</td>
			<td>Adobe</td>
			<td></td>
			<td>photo and design software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Baking oven</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>Model:658</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Confocal microscope</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td>LSM880 Airyscan</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cover glass</td>
			<td>Brain Research Laboratories</td>
			<td>2460-1.5D</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cryostat</td>
			<td>Leica</td>
			<td>CM 3050 S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dumont #5 Forceps</td>
			<td>F.S.T.</td>
			<td>11252-20</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ecomount</td>
			<td>Biocare Medical</td>
			<td>EM 897L</td>
			<td>mounting medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HybEZ oven</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>hybridization oven</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hydrophobic pen</td>
			<td>Vector Laboratories</td>
			<td>H-4000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ImageJ-Fiji</td>
			<td>NIH</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Large scissors</td>
			<td>Henry Schein</td>
			<td>100-7561</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro centrifuge tubes</td>
			<td>VWR</td>
			<td>20170-333</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Minipump variable flow</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>13-876-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Opal 520</td>
			<td>Akoya biosciences</td>
			<td>FP1 1487001KT</td>
			<td>Fluorescent biomarker</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Opal 570</td>
			<td>Akoya biosciences</td>
			<td>FP1 1488001KT</td>
			<td>Fluorescent biomarker</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Opal 690</td>
			<td>Akoya biosciences</td>
			<td>FP1 1497001KT</td>
			<td>Fluorescent biomarker</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ProLong Gold Antifade Mountant</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>mounting medium for fluorescently labeled cells</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RNAscope Multiplex Fluorescent Reagent Kit v2</td>
			<td>ACD /Bio-Techne</td>
			<td>323100</td>
			<td>multiplex kit</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RNAscope probe Mouse Cck1r-C3</td>
			<td>ACD /Bio-Techne</td>
			<td>313751-C3</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RNAscope probe Mouse DapB</td>
			<td>ACD /Bio-Techne</td>
			<td>310043</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RNAscope probe Mouse Ghsr</td>
			<td>ACD /Bio-Techne</td>
			<td>426141</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RNAscope probe Mouse Phox2b-C2</td>
			<td>ACD /Bio-Techne</td>
			<td>407861-C2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RNAscope probe Mouse Prdm12-C2</td>
			<td>ACD /Bio-Techne</td>
			<td>524371-C2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RnaseZap</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>R2020</td>
			<td>Rnase decontaminating solution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Small dissecting scissors</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>Z265977</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Superfrost Plus slides</td>
			<td>Fisherbrand</td>
			<td>1255015</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue Tek OCT medium</td>
			<td>Sakura</td>
			<td>4583</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>User manual</td>
			<td>ACD</td>
			<td>323100 USM</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vannas Spring Scissors</td>
			<td>Roboz</td>
			<td>RS 5620</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ZEN Imaging Software</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

detection of g protein-coupled receptor expression in mouse vagal afferent neurons using multiplex in situ hybridization

Denne undersøgelse beskriver en protokol for multiplex in situ hybridisering (ISH) af musen jugular-nodose ganglier, med særlig vægt på at opdage udtrykket af G protein-koblede receptorer (GPCRs). Formalin-faste jugular-nodose ganglier blev behandlet med RNAscope teknologi til samtidig at opdage udtrykket af to repræsentative GPCRs (cholecystokinin og ghrelin receptorer) i kombination med en markør gen af enten nodose (parret-lignende homeobox 2b, Phox2b) eller halspulsåren afferent neuroner (PR domæne zink finger protein 12, Prdm12). Mærket ganglier blev afbildet ved hjælp af konfokal mikroskopi til at bestemme fordelingen og udtryk mønstre af de ovennævnte udskrifter. Kort, Phox2b afferent neuroner blev fundet at rigeligt udtrykke cholecystokinin receptor (Cck1r), men ikke ghrelin receptor (Ghsr). En lille delmængde af Prdm12 afferent neuroner blev også fundet at udtrykke Ghsr og / eller Cck1r. Potentielle tekniske forbehold i design, forarbejdning og fortolkning af multiplex ISH diskuteres. Den fremgangsmåde, der er beskrevet i denne artikel, kan hjælpe forskere med at generere nøjagtige kort over transskriptionsprofilerne for vagale afferent neuroner.

Mens RNAScope kan anvendes på dyr i alle aldre, køn eller genetisk baggrund, er det tilrådeligt at arbejde med unge voksne (<3 måneder gammel). Dette skyldes, at fluorescerende artefakter (f.eks lipofuscin) er almindelige fund i neuroner af ældre dyr41. De formalin-faste ganglier fra ældre mus indeholder ofte overraskende intens endogene fluorescens, der let kan forveksles med ægte farvning (Figur 1A,B). Under alle omstændigheder er det tilrå...

Watch this Scientific Journal Video about Detection of G Protein-coupled Receptor Expression in Mouse Vagal Afferent Neurons using Multiplex In Situ Hybridization at JoVE.com

Detection of G Protein-coupled Receptor Expression in Mouse Vagal Afferent Neurons using Multiplex In Situ Hybridization

Multiplex in situ hybridization (ISH) blev ansat til samtidig at visualisere udskrifter for to G protein-koblede receptorer og en transskription faktor i hele vagal ganglionic kompleks af den voksne mus. Denne protokol kan bruges til at generere nøjagtige kort over de transskriptionelle profiler af vagale afferent neuroner.

Påvisning af G Protein-koblet receptor udtryk i mus vagal afferent neuroner ved hjælp af Multiplex In Situ Hybridization

This study describes a protocol for the multiplex in situ hybridization (ISH) of the mouse jugular-nodose ganglia, with a particular emphasis on detecting ...

Denne procedure er meget følsom og giver mulighed for en visualisering af flere udskrifter med minimal baggrund. Denne metode kan generere nøjagtige kort over den transskriptionelle profil af meget heterogene celletyper. Det vil være mig og Johnson Bob-Manuel, der er forskningstekniker i laboratoriet.Begynd med at indsamle hele vagal ganglionic masse fra de otte uger gamle mus fra hver side, ved hjælp af en dissekering omfang og kirurgiske instrumenter. Efter halshugning af musen, skal du bruge små sammenkædning til at fjerne sternohyoid og omohyoid muskler lateral til luftrøret for at udsætte occipital knoglen. Ryd hele området af muskler og væv, indtil halspulsåren, vagus og hypoglossal nerve og foramen magnum er synlige.Skær derefter hele hypoglossalnerven med lille fjedersaks. Find for nodose ganglion som en gennemsigtig masse tæt på foramen magnum. Brug lille saks, forsigtigt bryde occipital knoglen.For at eksponere jugular ganglion yderligere, lokalisere sorte melanocytter på overfladen af halspulsåren som et visuelt vartegn. Når ganglions er fundet, skære nerve vedhæftede filer mellem vagal ganglionic masse og forsigtigt trække på den perifere ende af vagus nerve samtidig skære jugular ganglion mod hjernestammen med små fjeder saks til udvinding af hele ganglionic masse. Fjern det konjunktive væv, ganglionic masse og fedt klæber til vagus nerve.Holde ca. en halv centimeter af vagus nerve til at lette håndtering og lokalisering af prøver. Placer fjernelse til ganglia ved hjælp af fine sammenkrimninger i 1,5 millimeter mikro centrifuge rør. Og inkubere ved fire grader celsius i formalin i 24 timer.Og så med 30% saccharose i 24 timer. Efter inkubation skal du placere ganglieret inde i et fald på en fire millimeter diameter af optimal skæretemperaturmedium på et stykke aluminiumsfolie. Og sætning prøven på en seng af tøris.Skær de frosne prøver med en kryostat i sektioner af 14 mikrometer tykkelse ved minus 20 grader Celsius og indsamle de afskårne sektioner på glasset mikroskop dias som tre serie 42 mikrometer fra hinanden. Skyl lysbillederne med vævssektioner i PBS. Og bages i 30 minutter ved 60 grader Celsius i en bageovn.Derefter skal du anbringe diasene i 4% formalin i 15 minutter ved fire grader Celsius. Serielt dehydrere dias i 50%70% og 100% ethanol i fem minutter hver. Og påfør hydrogenperoxidopløsning på prøverne i 10 minutter, før de skylles i dobbeltdestilleret vand.For In situ hybridisering, eller ISH, behandle prøverne med målet hentning reagens i fem minutter. Skyl derefter sekventielt prøverne i dobbeltdestilleret vand og 100% ethanol efterfulgt af lufttørring. Ved hjælp af en hydrofob pen, skabe en barriere omkring prøverne.Mens prøverne behandles med protease i 30 minutter ved 40 grader Celsius og en hybridiseringsovn, forvarmes sonderne ved 40 grader Celsius og afkøles ved stuetemperatur før brug. Efter at have flyttet fra ovnen inkuberes diasene med den ønskede kombination af målsonder i to timer ved 40 grader Celsius i en hybridiseringsovn. Inkuber negativt kontrolvæv med dihydrodipicolinat reduktase eller DapB, mål C1 sonde i to timer ved 40 grader Celsius.Skyl lysbillederne i vaskebufferen, og opbevar fem gange saltvandscitrat ved stuetemperatur natten over. Den næste dag skylles diasene med vaskebuffer før inkubation med forstærkning af reagenser. Og behandle med kanalspecifikke reagenser som beskrevet i manuskriptet.Vask lysbillederne efterfulgt af behandling med DapB i 30 sekunder. Derefter straks anvende montering medium på hver dias og placere et dæksel glide over vævssektionen. Hold vævene vandrette i en glideholder ved fire grader Celsius indtil billeddannelse.Forbered et konfokalt mikroskop til billeddannelse ved at angive de nødvendige parametre. Hent billederne med en linje i gennemsnit på fire og en pixelstørrelse på mindst 1024 i 1024 for at forbedre kvaliteten af billederne. Når du er tilfreds med anskaffelsesparametrene, skal du begynde at erhverve billederne ved hjælp af de samme indstillinger.Tilskrive falske farver til hver kanal for at lette visualiseringen. Brug de digitale billeder til at udføre celletælling ved at identificere omridset af RNA-omfangspositive profiler med en kerne, der er let farvet med DapB. Beregn procentdelen af RNA-omfangspositive profiler, der udtrykker hver udskrift.De optimale anskaffelsesparametre blev valgt for hver laser baseret på den uspecifikke fluorescens opnået i det negative kontrolvæv. Den endogene fluorescens i nodose ganglion af en ung voksen mus er minimal. Og inkubation med en DapB-sonde resulterede det ikke i signaler.Ved øget effekt laser og gain med 488 nanometer laser, uønsket baggrund og tilfældige fluorescerende prikker vises. RNA-scope-teknikken blev anvendt til at opdage tre gener i vævsafsnit af vagal ganglionic masse. Vævsprofilen var positiv for GHSR og CCK1R.Profilen omfattede både Phox2b og CCK1R udskrifter i rostral del af nodose ganglion. Som et resultat af multiplex ISH i nodose afferent neuroner, Phox2b signaler specifikt akkumuleret i afferent neuroner, placeret i nodose ganglion. CCK1R signaler intenst mærket mange neuroner i nodose ganglion.Ved lav forstørrelse kunne celler, der udtrykker lave CCK1R- eller GSHR-signaler, ikke observeres let. DapB hjalp med at visualisere vævet og identificere vagale afferent neuroner med en stor og let farvet kerne. Ved høj forstørrelse er Phox2b positive profiler tydelige.Profil to og tre er Phox2b-celler med høje og moderate CCK1R-signaler. Profil fire udtrykte både GHSR og CCK1R. Som et resultat af multiplex ISH af halspulsåren afferent neuroner, PRDM12 udskrift kunne ses specifikt akkumuleret i afferent neuroner placeret i jugular ganglion.Ved høj forstørrelse blev der registreret moderate signaler til CCK1R i profil et og to. Profil tre er en repræsentant for PRDM12 celler negativ for CCK1R eller GHSR. Konsistens af dissektion er en vigtig faktor.Det er lige så vigtigt at kontrollere, at parametrene for erhvervelse af billedbehandling ikke genererer uønskede baggrundssignaler. Multiplex In situ hybridisering er blevet guldstandarden i molekylær etableret, især inden for neuroanatomi. Denne metode kan nemt kombineres med immunohistochemistry.

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Detection of G Protein-coupled Receptor Expression in Mouse Vagal Afferent Neurons using Multiplex In Situ Hybridization

Double Fluorescence in situ Hybridization in Fresh Brain Sections

Double Fluorescence in situ Hybridization in Fresh Brain Sections

Here we describe a modified version of a double fluorescence in situ hybridization (dFISH) method optimized for detecting two mRNAs of interest in fresh ...

Combining Lipophilic dye, in situ Hybridization, Immunohistochemistry, and Histology

Combining Lipophilic dye, in situ Hybridization, Immunohistochemistry, and Histology

Going beyond single gene function to cut deeper into gene regulatory networks requires multiple mutations combined in a single animal.  Such analysis of ...

Detection of Protein Palmitoylation in Cultured Hippocampal Neurons by Immunoprecipitation and Acyl-Biotin Exchange (ABE)

Detection of Protein Palmitoylation in Cultured Hippocampal Neurons by Immunoprecipitation and Acyl-Biotin Exchange ABE

Påvisning af protein palmitoylering i dyrkede hippocampale neuroner ved immunopræcipitation og Acyl-Biotin Exchange (ABE)

Palmitoylation is a post-translational lipid  modification involving the attachment of a 16-carbon saturated fatty acid,  palmitate, to cysteine residues ...

Detection of the Genome and Transcripts of a Persistent DNA Virus in Neuronal Tissues by Fluorescent In situ Hybridization Combined with Immunostaining

Detection of the Genome and Transcripts of a Persistent DNA Virus in Neuronal Tissues by Fluorescent In situ Hybridization Combined with Immunostaining

Påvisning af genom og Udskrifter af en Vedvarende DNA-virus i neuronvæv af Fluorescent In situ Hybridization Kombineret med Immunfarvning

Single cell codetection of a gene, its RNA product and cellular regulatory proteins is critical to study gene expression regulation. This is a challenge ...

Detection of Axonally Localized mRNAs in Brain Sections Using High-Resolution In Situ Hybridization

Detection of Axonally Localized mRNAs in Brain Sections Using High-Resolution In Situ Hybridization

Påvisning af Axonally Lokaliseret mRNA i Brain Sektioner Brug High-Resolution<em&gt; In Situ</em&gt; Hybridisering

mRNAs are frequently localized to vertebrate axons and their local translation is required for axon pathfinding or branching during development and for ...

Combining Double Fluorescence In Situ Hybridization with Immunolabelling for Detection of the Expression of Three Genes in Mouse Brain Sections

Combining Double Fluorescence In Situ Hybridization with Immunolabelling for Detection of the Expression of Three Genes in Mouse Brain Sections

Kombination Dobbelt Fluorescens<em&gt; In Situ</em&gt; Hybridisering med immunomærkning for Påvisning af ekspression af tre gener i musehjerne Sektioner

Detection of gene expression in different types of brain cells e.g., neurons, astrocytes, oligodendrocytes, oligodendrocyte precursors and microglia, can ...

In Vitro Recording of Mesenteric Afferent Nerve Activity in Mouse Jejunal and Colonic Segments

In Vitro Recording of Mesenteric Afferent Nerve Activity in Mouse Jejunal and Colonic Segments

In vitro Registrering af Mesenterial Afferent Nerve Aktiviteten i Mouse jejunal og Colon segmenter

Afferent nerves not only convey information concerning normal physiology, but also signal disturbed homeostasis and pathophysiological processes of the ...

Localization of Odorant Receptor Genes in Locust Antennae by RNA In Situ Hybridization

Localization of Odorant Receptor Genes in Locust Antennae by RNA In Situ Hybridization

Lokalisering af odorantreceptorgener i locustantennet af RNA<em&gt; I situ</em&gt; Hybridisering

Insects have evolved sophisticated olfactory reception systems to sense exogenous chemical signals. These chemical signals are transduced by Olfactory ...

Identification of Dopamine D1-Alpha Receptor Within Rodent Nucleus Accumbens by an Innovative RNA In Situ Detection Technology

Identification of Dopamine D1-Alpha Receptor Within Rodent Nucleus Accumbens by an Innovative RNA In Situ Detection Technology

Identifikation af dopamin D1-Alpha Receptor inden for gnavere kernen Accumbens af en innovativ RNA In Situ opdagelse teknologi

In the central nervous system, the D1-alpha subtype receptor (Drd1&#945;) is the most abundant dopamine (DA) receptor, which plays a vital role in ...

Preparations and Protocols for Whole Cell Patch Clamp Recording of Xenopus laevis Tectal Neurons

Preparations and Protocols for Whole Cell Patch Clamp Recording of Xenopus laevis Tectal Neurons

Præparater og protokoller for hele cellen Patch klemme optagelsen af Xenopus laevis Tectal neuroner

The Xenopus tadpole retinotectal circuit, comprised of the retinal ganglion cells (RGCs) in the eye which form synapses directly onto neurons in the optic ...