Name: detection of g protein-coupled receptor expression in mouse vagal afferent neurons using multiplex in situ hybridization
Uploaded: 2021-09-20T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Detection of G Protein-coupled Receptor Expression in Mouse Vagal Afferent Neurons using Multiplex In Situ Hybridization at JoVE.com

이 작품은 NIH 교부금 #5P01DK119130-02에 의해 투자된 신경 해부학/히스토로지/뇌 주입 코어에 의해 지원되었습니다. 저자는 UT 남서부 라이브 세포 이미징 시설 (펠프스 박사가 이끄는)과 그 직원 (Abhijit Bugde 및 마르셀 Mettlen)의 도움을 인정하고 싶습니다, NIH 그랜트 #1S10OD021684-01에 의해 부분적으로 지원, 해롤드 C. 시몬스 암 센터의 공유 자원, NCI 암 센터 지원 보조금에 의해 부분적으로 지원, P30 CA142543.

참고 : 이 연구에서 사용되는 마우스는 순수한 C57BL / 6J 배경에 야생 형 남성이었다. 총 4마리의 마우스가 멀티플렉스 ISH에 사용되었다. 모든 마우스는 희생 시에 약 8주 전에 생후이었습니다. 한 남성 마우스 (대략 1 세) 또한 노화와 관련 된 내 인 성형을 입증 하는 데 사용 되었다. 동물들은 음식과 물에 대한 광고 리비툼이 있는 장벽 시설 내의 통풍 케이지에 보관되었습니다. UT 남서부 의료...

ISH의 기술은 1960 년대 후반42에발명되었다. 그러나, 1980년대 중반까지는 중추 및 말초 신경계에서 mRNA검출을 위해 적용된 것이아니다(43·44). 신경계의 이질성과 항체에 대한 반복되는 문제를 고려할 때, 세포 수준에서 특정 성적증명서를 국소화하는 것은 여전히 귀중한 도구로 남아 있다. 그럼에도 불구하고 전통적인 ISH 방법은 힘들고 ...

vagal afferents의 세포 체는 경정맥, 석유, 및 nodose ganglia1,2,3에포함된다. 그들의 축축은 두개골, 흉부 및 복부 영토4,5,6,7에미주 신경의 여러 가지를 통해 함께 여행한다. 그들의 내장 엔딩에서, vagal afferents는 생리적이고 유해한 자극의 넓은 범위에 반응할 수 있습니다8,9,10. 그러나, 바갈 감지에 관여하는 신호 분자 및 수용체의 분포는 제대로 특성화 남아 있습니다. 이는 부분적으로 그들의 작은 크기에도 불구하고, 많은 수의GPCRs8,11,12,13을포함하여 광범위한 수용체 스펙트럼을 표현하기 때문이다. 더욱이, vagal 발포성 뉴런은 본질적으로 이질적이며 뚜렷한 분자프로파일(14)을표시한다. 문제를 복잡하게 하기 위해 경정맥, 석유 및 노도스 신경리아가 마우스에 부착되어 단일 신경절 질량을 형성합니다. 마지막으로, 동물의 하위 집합에서, 노도스 신경절은 공감 우수한 자궁 경부신경절(15)에부착된다.
과거에, 조사자들은 vagal 포퍼트 뉴런의 신경화학적 구성을 연구하기 위해 면역히토화학으로 전환했다16,17,18. 검증된 항체를 이용한 면역히스트토화학이 유용하지만, 면역히스토케미칼 연구의 결과는 주의해서 해석되어야 한다. 예를 들어, GPCRs에 대한 특정 항체를 식별하는 수많은 노력은19,20,21,22, 23,24,25에실패했으며, 주요 연구자들은 GPCRs에 대한 항체의 대부분이 신뢰할 수 없다는 결론을 내렸다. 이러한 문제점을 회피하기 위해, 정량적 PCR(qPCR)은 설치류 혈관 신경절 질량26,27,28,29에서유전자 발현을 평가하는 데 널리 사용되어 왔다. 그러나, qPCR을 이용한 유전자 발현을 검사하는 것은 공간 정보의 손실의 희생으로 발생한다. 특히, 관심 있는 특정 유전자(예를 들어, 노도스 대 경정맥 세포)를 발현하는 세포 또는 셀 유형(들)의 수를 예측할 수 없다. 되풀이되는 문제점은 또한 인접한 조직으로 오염및 해부15도중 미주 신경의 가변 길이, 우수한 자궁 경부 및 경정맥 의 포함을 포함합니다. 위의 어려움의 결과로, 논쟁은 vagal 포성 뉴런에서 여러 GPCRs의 표현과 분포를 둘러싸고 있습니다. 한 특히 수수께끼 예는 ghrelin 수용 체에 관한 (Ghsr). 일부 연구는 vagal afferent뉴런30,31,32에서이수용체의 광범위한 표현을 발견하는 반면, 다른 사람은 Ghsr mRNA가 nodose 신경절11,14에서거의 감지 할 수없는 것으로 나타났습니다. 따라서 vagal ganglionic 질량에 있는 Ghsr mRNA의 상세한 매핑은 그러므로 보증됩니다.
시투 혼성화(ISH)에서도 vagal ganglionic 질량7,11,12,33,34,35에서유전자 발현 패턴을 평가하는 데 사용되었습니다. RNA 기반 기술은 대부분의 상황에서 항체 기반 기술보다 더 신뢰할 수 있고 특이적으로 남아 있기 때문에36,37,ISH 연구는 vagal 포성 뉴런의 신경 화학 코딩을 더 잘 이해하는 데 가치가 입증되었습니다. 그럼에도 불구하고, 전통적인 ISH 기술 자체는 주의없이하지 않습니다. 방사성 이스는 민감하지만 배경을 생성하고 성가신38남아있다. 비 방사성 ISH는 덜 복잡하지만 덜민감하지 도 38. 대조적으로, 최근에 개발된 RNAscope ISH 방법은 매우 민감하고 최소한의배경(39)을생성한다. 현재 연구는 마우스의 vagal 포성 뉴런에서 GPCRs의 검출에 멀티플렉스 형광 RNAscope를 적용. 우리는 Ghsr의 분포를 매핑에 초점을 맞추고 cholecystokinin 수용체 (Cck1r)의 분포를 비교, 또 다른 GPCR잘 노도스 신경절에서 발현 될 것으로 알려진(34). 마지막으로, 쌍과 같은 동종박스 2b(Phox2b) 및 PR 도메인 아연 핑거 단백질 12(Prdm12)는 각각14개의노도스와 경정맥 성신경에 대한 선택적 마커로 사용되었다. Phox2b 또는 Prdm12를 시각화하지 않으면 경정맥 대 노도스 포렌티를 확실하게 식별하는 것이 어려울 것입니다. 잠재적인 기술적 함정은 또한 기사 전반에 걸쳐 논의됩니다.

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	<tbody>
		<tr>
			<td>10x PBS</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>BP399-4</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>20x SSC</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>AM9763</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>-80&#176;C freezer</td>
			<td>PHCBI</td>
			<td>MDF-DU901VHA-PA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Adobe Photoshop 2021</td>
			<td>Adobe</td>
			<td></td>
			<td>photo and design software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Baking oven</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>Model:658</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Confocal microscope</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td>LSM880 Airyscan</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cover glass</td>
			<td>Brain Research Laboratories</td>
			<td>2460-1.5D</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cryostat</td>
			<td>Leica</td>
			<td>CM 3050 S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dumont #5 Forceps</td>
			<td>F.S.T.</td>
			<td>11252-20</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ecomount</td>
			<td>Biocare Medical</td>
			<td>EM 897L</td>
			<td>mounting medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HybEZ oven</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>hybridization oven</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hydrophobic pen</td>
			<td>Vector Laboratories</td>
			<td>H-4000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ImageJ-Fiji</td>
			<td>NIH</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Large scissors</td>
			<td>Henry Schein</td>
			<td>100-7561</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro centrifuge tubes</td>
			<td>VWR</td>
			<td>20170-333</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Minipump variable flow</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>13-876-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Opal 520</td>
			<td>Akoya biosciences</td>
			<td>FP1 1487001KT</td>
			<td>Fluorescent biomarker</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Opal 570</td>
			<td>Akoya biosciences</td>
			<td>FP1 1488001KT</td>
			<td>Fluorescent biomarker</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Opal 690</td>
			<td>Akoya biosciences</td>
			<td>FP1 1497001KT</td>
			<td>Fluorescent biomarker</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ProLong Gold Antifade Mountant</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>mounting medium for fluorescently labeled cells</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RNAscope Multiplex Fluorescent Reagent Kit v2</td>
			<td>ACD /Bio-Techne</td>
			<td>323100</td>
			<td>multiplex kit</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RNAscope probe Mouse Cck1r-C3</td>
			<td>ACD /Bio-Techne</td>
			<td>313751-C3</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RNAscope probe Mouse DapB</td>
			<td>ACD /Bio-Techne</td>
			<td>310043</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RNAscope probe Mouse Ghsr</td>
			<td>ACD /Bio-Techne</td>
			<td>426141</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RNAscope probe Mouse Phox2b-C2</td>
			<td>ACD /Bio-Techne</td>
			<td>407861-C2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RNAscope probe Mouse Prdm12-C2</td>
			<td>ACD /Bio-Techne</td>
			<td>524371-C2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RnaseZap</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>R2020</td>
			<td>Rnase decontaminating solution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Small dissecting scissors</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>Z265977</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Superfrost Plus slides</td>
			<td>Fisherbrand</td>
			<td>1255015</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue Tek OCT medium</td>
			<td>Sakura</td>
			<td>4583</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>User manual</td>
			<td>ACD</td>
			<td>323100 USM</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vannas Spring Scissors</td>
			<td>Roboz</td>
			<td>RS 5620</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ZEN Imaging Software</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

detection of g protein-coupled receptor expression in mouse vagal afferent neurons using multiplex in situ hybridization

이 연구는 G 단백질 결합 수용체(GPCR)의 발현을 검출하는 데 특히 중점을 둔 마우스 경정맥 중형화(ISH)의 주악성화(ISH)에서 멀티플렉스에 대한 프로토콜을 설명합니다. 포르말린 고정 경정맥 신경리아는 RNAscope 기술로 처리되어 두 개의 대표적인 GPCRs(cholecystokinin 및 ghrelin 수용체)의 발현을 동시에 검출하여 nodose(쌍형 동종박스 2b, Phox2b) 또는 경정맥 성신경(PR도메인 아연+121)의 하나의 마커 유전자와 결합하여 동시에 검출하였다. 표지된 간리아는 앞서 언급한 성적증명서의 분포 및 발현 패턴을 결정하기 위해 공초점 현미경을 사용하여 이미지화되었다. 간단히, Phox2b 포이퍼트 뉴런은 담낭스토키닌 수용체(Cck1r)를 풍부하게 표현하지만 그렐린 수용체(Ghsr)는 발현하는 것으로 나타났다. Prdm12 포퍼런트 뉴런의 작은 하위 집합은 또한 Ghsr 및/또는 Cck1r를 표현하는 것으로 나타났습니다. 이 문서에 설명 된 접근 방식은 vagal 포퍼런트 뉴런의 전사 프로파일의 정확한지도를 생성하는 과학자를 도울 수 있습니다.

RNAScope는 모든 연령, 성별 또는 유전 적 배경의 동물에게 적용 될 수 있지만 젊은 성인 (<3 개월)과 함께 일하는 것이 좋습니다. 이는 형광 유물(예를 들어, 리포우신)이 구형 동물의뉴런(41)에서흔히 발견되기 때문이다. 오래된 마우스에서 포르말린 고정 된 간리아는 종종 쉽게 진짜 염색으로 착각 할 수있는 놀라 울 정도로 강렬한 내인성 형광을 포함(도 1A,<st...

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Detection of G Protein-coupled Receptor Expression in Mouse Vagal Afferent Neurons using Multiplex In Situ Hybridization

시투 혼성화(ISH)의 멀티플렉스는 성인 마우스의 전체 vagal ganglionic 복합체에서 2개의 G 단백질 결합 수용체 및 1개의 전사 인자에 대한 성적증명서를 동시에 시각화하기 위해 사용되었다. 이 프로토콜은 vagal 포렌트 뉴런의 전사 프로파일의 정확한 지도를 생성하는 데 사용할 수 있습니다.

시투 혼성화에서 멀티플렉스를 사용하여 마우스 Vagal afferent 뉴런에서 G 단백질 결합 수용체 발현의 검출

This study describes a protocol for the multiplex in situ hybridization (ISH) of the mouse jugular-nodose ganglia, with a particular emphasis on detecting ...

이 절차는 매우 민감하며 최소한의 배경을 가진 여러 전사체를 시각화 할 수 있습니다. 이 방법은 고이질 세포 유형의 전사 프로파일의 정확한 맵을 생성할 수 있다. 절차를 시연하는 것은 저와 실험실의 연구 기술자 인 존슨 밥 마누엘 (Johnson Bob-manuel)이 될 것입니다.해부 범위와 수술 기구의 도움으로, 각 측면에서 8 주 된 마우스에서 전체 vagal 신경절 질량을 수집하여 시작합니다. 마우스의 참수 후, 작은 집게를 사용하여 후두뼈를 노출시키기 위해 기관으로 스테르노로이드와 오모로이드 근육을 측면으로 제거한다. 경동맥, 미주 및 저혈압 신경 및 포멘 매그넘이 보일 때까지 근육과 조직의 전체 영역을 취소합니다.그런 다음 작은 스프링 가위로 전체 저혈압 신경을 잘라냅니다. 노도스 신경절을 포라멘 매그넘에 가까운 반투명 질량으로 찾습니다. 작은 가위를 사용하여 후두 뼈를 조심스럽게 부러뜨리습니다.경추 성 신경절을 더 노출하려면 경구 표면에 검은 멜라닌세포를 시각적 인 랜드 마크로 찾습니다. 신경절이 발견되면, 질 신경절 질량 사이의 신경 부착물을 잘라 내고 미주 신경의 말초 끝을 부드럽게 당기면서 동시에 전체 신경절 질량을 추출하기 위한 작은 스프링 가위로 뇌간을 향해 경정맥 을 절단한다. 결막 조직, 신경절 질량 및 지방미주 신경에 집착 하는 제거.시료의 취급 및 현지화를 용이하게 하기 위하여 미주 신경의 대략 반 센티미터를 유지합니다. 1.5 밀리미터 마이크로 원심 분리 튜브에 미세 집게의 도움으로 간리아에 제거를 배치합니다. 그리고 24 시간 동안 포르말린에서 섭씨 4도에서 배양하십시오.그리고 24 시간 동안 30 %의 자당. 인큐베이션 후, 알루미늄 호일 조각에 최적의 절삭 온도 매체의 4 밀리미터 직경의 드롭 안에 간질을 배치합니다. 그리고 드라이 아이스 의 침대에 샘플을 문구.냉동 샘플을 영하 20도에서 14 마이크로미터 두께의 섹션으로 자르고 유리 현미경 슬라이드의 절단 섹션을 3 시리즈 42 마이크로미터 간격으로 수집합니다. PBS의 조직 섹션으로 슬라이드를 헹구십시오. 그리고 베이킹 오븐에서 섭씨 60도에서 30 분간 구워줍니다.그런 다음 슬라이드를 섭씨 4도에서 15분 동안 4%의 포르말린으로 후지합니다. 슬라이드를 50%70% 및 100%로 각각 5분간 탈수합니다. 그리고 이중 증류수에서 헹구기 전에 10 분 동안 샘플에 과산화수소 용액을 적용하십시오.시투 혼성화 또는 ISH의 경우 5분 동안 대상 검색 시약으로 샘플을 처리합니다. 그런 다음 샘플을 이중 증류수와 100% 에탄올로 순차적으로 헹구고 공기 건조를 합니다. 소수성 펜을 사용하여 샘플 주위에 장벽을 만듭니다.샘플은 섭씨 40도에서 30분 동안 프로테아프로 처리되고 있으며, 프로브를 섭씨 40도에서 예열하여 사용하기 전에 실온에서 식힙니다. 오븐에서 이동한 후 하이브리드화 오븐에서 섭씨 40도에서 2시간 동안 원하는 대상 프로브 조합으로 슬라이드를 배양합니다. 디하이드로디피콜리나테 환원효소 또는 DapB를 통해 음의 대조조직을 배양하고, 섭씨 40도에서 2시간 동안 C1 프로브를 표적화한다.슬라이드를 세척 버퍼로 헹구고 하룻밤 동안 실온에서 구연산 나트륨을 5배 나타낸 채 보관하십시오. 다음 날, 증폭 시약으로 인큐베이션 전에 세척 버퍼로 슬라이드를 헹지십시오. 그리고 원고에 설명된 바와 같이 채널 특정 시약으로 치료한다.슬라이드를 씻은 다음 DapB로 30초 동안 트리트먼트를 받아보겠습니다. 그런 다음 즉시 각 슬라이드에 마운팅 배지를 적용하고 티슈 섹션 에 덮개 슬립을 놓습니다. 화상 진찰까지 4섭씨에서 슬라이드 홀더에 조직을 수평으로 유지합니다.필요한 매개 변수를 설정하여 이미징을 위한 공초점 현미경을 준비합니다. 이미지의 품질을 향상시키기 위해 평균 4개, 픽셀 크기가 1024x 1024로 이미지를 획득합니다. 획득 매개 변수에 만족하면 동일한 설정을 사용하여 이미지 수집을 시작합니다.시각화를 용이하게 하기 위해 각 채널에 거짓 색상을 특성화합니다. 디지털 이미지를 사용하여, DapB로 가볍게 염색한 핵1개의 핵을 가진 RNA 범위 양성 프로파일의 윤곽을 확인하여 세포 계수를 수행합니다. 각 성적증명서를 표현하는 RNA 범위 양성 프로파일의 백분율을 계산합니다.네거티브 대조군조직에서 수득된 특이하지 않은 형광에 기초하여 각 레이저에 대해 최적의 획득 파라미터를 선택하였다. 젊은 성인 마우스의 노도스 신경절의 내인성 형광은 최소화됩니다. 그리고 DapB 프로브와 인큐베이션, 그것은 신호를 초래하지 않았다.488 나노미터 레이저로 증가 된 파워 레이저와 게인에서 원치 않는 배경과 임의의 형광점이 나타납니다. RNA 범위 기술은 vagal 신경절 질량의 조직 단면도에 있는 3개의 유전자를 검출하기 위하여 적용되었습니다. 조직 프로파일은 GHSR 및 CCK1R에 대 한 긍정적인.프로필은 노도스 신경절의 로스트랄 부분에 Phox2b와 CCK1R 성적 증명서를 모두 포함. 노도스 발신성 뉴런에서 멀티플렉스 ISH의 결과로, Phox2b 신호는 특히 노도스 신경절에 위치한 포이트 뉴런에 축적된다. CCK1R 신호 강렬 하 게 노도스 신경절에 많은 뉴런 레이블.낮은 배율에서, 낮은 CCK1R 또는 GSHR 신호를 발현하는 세포는 쉽게 관찰할 수 없었다. DapB는 조직을 시각화하고 크고 가볍게 얼룩진 핵으로 vagal 포퍼런트 뉴런을 식별하는 데 도움이되었습니다. 높은 배율에서, Phox2b 양성 프로파일은 분명하다.프로파일 2 및 3은 높고 적당한 CCK1R 신호를 가진 Phox2b 세포입니다. 프로필 4는 GHSR과 CCK1R을 모두 표현했습니다. 경정맥 성 신경의 멀티플렉스 ISH의 결과로, PRDM12 성적증명서는 경정맥 신경절에 위치한 포성 뉴런에서 구체적으로 축적된 것으로 볼 수 있었다.높은 배율에서 CCK1R에 대한 적당한 신호가 프로파일 1개와 2개에서 검출되었습니다. 프로파일 3은 CCK1R 또는 GHSR에 대한 음성 PRDM12 세포의 대표이다. 해부의 일관성은 중요한 요소입니다.이미징 획득 매개 변수가 원치 않는 배경 신호를 생성하지 않는지 확인하는 것이 똑같이 중요합니다. 멀티플렉스 현장 혼성화는 특히 신경 해부학 분야에서 확립된 분자의 금본위제가 되었습니다. 이 방법은 면역 조직 화학과 쉽게 결합 될 수있다.

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Detection of G Protein-coupled Receptor Expression in Mouse Vagal Afferent Neurons using Multiplex In Situ Hybridization

Double Fluorescence in situ Hybridization in Fresh Brain Sections

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더블 형광 현장에서</em신선한 두뇌 섹션> 하이브 리다이 제이션

Here we describe a modified version of a double fluorescence in situ hybridization (dFISH) method optimized for detecting two mRNAs of interest in fresh ...

연구

신경과학

Combining Lipophilic dye, in situ Hybridization, Immunohistochemistry, and Histology

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Lipophilic 염료를 결합, 현장에서 하이브리드화, Immunohistochemistry, 그리고 조직학

Going beyond single gene function to cut deeper into gene regulatory networks requires multiple mutations combined in a single animal.  Such analysis of ...

Detection of Protein Palmitoylation in Cultured Hippocampal Neurons by Immunoprecipitation and Acyl-Biotin Exchange (ABE)

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Immunoprecipitation 및 아실-비오틴 거래소 (아베)에 의한 양식 Hippocampal 뉴런의 단백질 Palmitoylation의 감지

Palmitoylation is a post-translational lipid  modification involving the attachment of a 16-carbon saturated fatty acid,  palmitate, to cysteine residues ...

Detection of the Genome and Transcripts of a Persistent DNA Virus in Neuronal Tissues by Fluorescent In situ Hybridization Combined with Immunostaining

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형광에 의한 신경 조직의 영구 DNA 바이러스의 게놈 및 성적 증명서의 검출 현장에서 하이브리드 면역 염색과 결합

Single cell codetection of a gene, its RNA product and cellular regulatory proteins is critical to study gene expression regulation. This is a challenge ...

Detection of Axonally Localized mRNAs in Brain Sections Using High-Resolution In Situ Hybridization

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고해상도를 사용하여 뇌 섹션에서 Axonally 지역화 된 mRNA를 검출<em&gt; 현장에서</em&gt; 하이브리드

mRNAs are frequently localized to vertebrate axons and their local translation is required for axon pathfinding or branching during development and for ...

Combining Double Fluorescence In Situ Hybridization with Immunolabelling for Detection of the Expression of Three Genes in Mouse Brain Sections

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더블 형광 결합<em&gt; 현장에서</em&gt; 마우스 뇌 섹션에서 세 가지 유전자의 발현의 검출을위한 Immunolabelling와 하이브리드

Detection of gene expression in different types of brain cells e.g., neurons, astrocytes, oligodendrocytes, oligodendrocyte precursors and microglia, can ...

In Vitro Recording of Mesenteric Afferent Nerve Activity in Mouse Jejunal and Colonic Segments

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마우스 Jejunal과 대장 세그먼트에서 장간막 구 심성 신경 활동의 생체 외 녹음에서

Afferent nerves not only convey information concerning normal physiology, but also signal disturbed homeostasis and pathophysiological processes of the ...

Localization of Odorant Receptor Genes in Locust Antennae by RNA In Situ Hybridization

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RNA에 의한 Locust Antenna 내의 악취 수용체 유전자의 국산화<em&gt; 현장에서</em&gt; 하이브리드 화

Insects have evolved sophisticated olfactory reception systems to sense exogenous chemical signals. These chemical signals are transduced by Olfactory ...

Identification of Dopamine D1-Alpha Receptor Within Rodent Nucleus Accumbens by an Innovative RNA In Situ Detection Technology

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탐지 기술 현장에서 혁신적인 RNA에 의해 설치류 핵 Accumbens에서 도파민 D1-알파 수용 체의 식별

In the central nervous system, the D1-alpha subtype receptor (Drd1&#945;) is the most abundant dopamine (DA) receptor, which plays a vital role in ...

Preparations and Protocols for Whole Cell Patch Clamp Recording of Xenopus laevis Tectal Neurons

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준비 및 Xenopus laevis Tectal 신경의 전체 셀 패치 클램프 기록에 대 한 프로토콜

The Xenopus tadpole retinotectal circuit, comprised of the retinal ganglion cells (RGCs) in the eye which form synapses directly onto neurons in the optic ...