Name: detection of g protein-coupled receptor expression in mouse vagal afferent neurons using multiplex in situ hybridization
Uploaded: 2021-09-20T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Detection of G Protein-coupled Receptor Expression in Mouse Vagal Afferent Neurons using Multiplex In Situ Hybridization at JoVE.com

Dette arbeidet ble støttet av Neuroanatomy/Histology/Brain Injection Core finansiert av NIH grant #5P01DK119130-02. Forfatterne ønsker å anerkjenne hjelpen fra UT Southwestern Live Cell Imaging Facility (ledet av Dr. Phelps) og dets ansatte (Abhijit Bugde og Marcel Mettlen), delvis støttet av NIH Grant #1S10OD021684-01, en delt ressurs for Harold C. Simmons Cancer Center, støttet delvis av et NCI Cancer Center Support Grant, P30 CA142543.

MERK: Mus som ble brukt i denne studien var menn av vill type på ren C57BL/6J-bakgrunn. Totalt 4 mus ble brukt til multipleks ISH. Alle mus var omtrent 8 uker gamle på offertidspunktet. En mannlig mus (ca. ett år gammel) ble også brukt til å demonstrere endogen fluorescens forbundet med aldring. Dyr ble plassert i ventilerte merder i et barriereanlegg med ad libitum tilgang til mat og vann. UT Southwestern Medical Center Institutional Animal Care and Use Committee gjennomgikk og godkjente prosedyrene beskre...

Teknikken til ISH ble oppfunnet på slutten av 1960-tallet42. Det er imidlertid ikke før på midten av 1980-tallet at det ble brukt til påvisning av mRNAer i de sentrale og perifere nervesystemene43,44. Tatt i betraktning nervesystemets heterogenitet og tilbakevendende problemer med antistoffer, er lokalisering av en bestemt transkripsjon på cellenivå fortsatt et uvurderlig verktøy. Likevel har tradisjonelle ISH-metoder forblitt arbei...

Cellelegemene til vagal afferents finnes i jugular, petrosal og nodose ganglia1,2,3. Deres axoner reiser sammen via flere grener av vagusnerven til kraniocervical, thoracic og abdominal territorier4,5,6,7. Fra deres viscerale avslutninger kan vagal afferents reagere på et bredt spekter av fysiologiske og skadelige stimuli8,9,10. Fordelingen av signalmolekyler og reseptorer involvert i vagal sensing er imidlertid fortsatt dårlig karakterisert. Dette skyldes delvis at vagal ganglia, til tross for sin lille størrelse, uttrykker et bredt spekter av reseptorer, inkludert et stort antall GPCRs8,11,12,13. Videre er vagal afferent nevroner iboende heterogene og viser distinkte molekylære profiler14. For å komplisere saken er jugularet, petrosal og nodose ganglia festet i musen, og danner dermed en enkelt gangionisk masse. Til slutt, i en undergruppe av dyr, er nodose ganglion festet til den sympatiske overlegne Cervical ganglion15.
Tidligere har etterforskere vendt seg til immunhiistokjemi for å studere den nevrokjemiske sminken av vagal afferent nevroner16,17,18. Mens immunhiistokjemi ved hjelp av validerte antistoffer er nyttig, må resultatene av immunhiistokjemiske studier tolkes med forsiktighet. For eksempel har mange anstrengelser for å identifisere spesifikke antistoffer mot GPCRs mislyktes19,20,21,22,23,24,25, noe som fører til at etterforskere konkluderer med at flertallet av antistoffer mot GPCRs er upålitelige. For å omgå disse problemene har kvantitativ PCR (qPCR) blitt mye brukt til å vurdere genuttrykk i gnager vagal ganglionic mass26,27,28,29. Imidlertid skjer undersøkelse av genuttrykk ved hjelp av qPCR på bekostning av tap av romlig informasjon. Spesielt kan det ikke forutsies hvor mange celler eller hvilke celletyper som uttrykker et bestemt gen av interesse (f.eks. nodose vs. jugularceller). Tilbakevendende problemer inkluderer også forurensning med tilstøtende vev og inkludering av variable lengder av vagusnerven, overlegen cervical og jugular ganglia under disseksjon15. Som et resultat av de ovennevnte vanskelighetene omgir kontroverser uttrykket og distribusjonen av flere GPCRs i vagal afferent nevroner. Et spesielt forvirrende eksempel er ghrelinreseptoren (Ghsr). Mens noen studier har funnet utbredt uttrykk for denne reseptoren i vagal afferent nevroner30,31,32, andre har funnet Ghsr mRNA å være nesten uoppdagelig i nodose ganglion11,14. Detaljert kartlegging av Ghsr mRNA i vagal ganglionic mass er derfor berettiget.
In situ hybridisering (ISH) har også blitt brukt til å vurdere genuttrykksmønstre i vagal ganglionic mass7,11,12,33,34,35. Fordi RNA-baserte teknikker forblir mer pålitelige og spesifikke enn antistoffbaserte teknikker under de fleste omstendigheter36,37, har ISH-studier vist seg verdifulle for bedre forståelse av nevrokjemisk koding av vagal afferent nevroner. Likevel er tradisjonelle ISH-teknikker i seg selv ikke uten forbehold. Radioaktiv ISH er følsom, men genererer bakgrunn og forblir tungvint38. Ikke-radioaktiv ISH er mindre komplisert, men også mindre følsom38. Derimot er den nylig utviklede RNAscope ISH-metoden svært følsom og genererer minimal bakgrunn39. Den nåværende studien anvendte multipleks fluorescerende RNAscope til påvisning av GPCRs i vagal afferent neuroner av musen. Vi fokuserte på å kartlegge fordelingen av Ghsr og sammenlignet distribusjonen med kolecystokininreseptoren (Cck1r), en annen GPCR kjent for å bli uttrykt i nodose ganglion34. Til slutt ble de to transkripsjonsfaktorene, parret-lignende homeobox 2b (Phox2b) og PR-domene sinkfingerprotein 12 (Prdm12), brukt som selektive markører for henholdsvis nodose og jugular afferent neuroner, henholdsvis14. Uten å visualisere Phox2b eller Prdm12, ville det være utfordrende å identifisere jugular vs. nodose afferents med sikkerhet. Potensielle tekniske fallgruver diskuteres også gjennom hele artikkelen.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>10x PBS</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>BP399-4</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>20x SSC</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>AM9763</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>-80&#176;C freezer</td>
			<td>PHCBI</td>
			<td>MDF-DU901VHA-PA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Adobe Photoshop 2021</td>
			<td>Adobe</td>
			<td></td>
			<td>photo and design software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Baking oven</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>Model:658</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Confocal microscope</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td>LSM880 Airyscan</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cover glass</td>
			<td>Brain Research Laboratories</td>
			<td>2460-1.5D</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cryostat</td>
			<td>Leica</td>
			<td>CM 3050 S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dumont #5 Forceps</td>
			<td>F.S.T.</td>
			<td>11252-20</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ecomount</td>
			<td>Biocare Medical</td>
			<td>EM 897L</td>
			<td>mounting medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HybEZ oven</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>hybridization oven</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hydrophobic pen</td>
			<td>Vector Laboratories</td>
			<td>H-4000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ImageJ-Fiji</td>
			<td>NIH</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Large scissors</td>
			<td>Henry Schein</td>
			<td>100-7561</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro centrifuge tubes</td>
			<td>VWR</td>
			<td>20170-333</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Minipump variable flow</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>13-876-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Opal 520</td>
			<td>Akoya biosciences</td>
			<td>FP1 1487001KT</td>
			<td>Fluorescent biomarker</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Opal 570</td>
			<td>Akoya biosciences</td>
			<td>FP1 1488001KT</td>
			<td>Fluorescent biomarker</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Opal 690</td>
			<td>Akoya biosciences</td>
			<td>FP1 1497001KT</td>
			<td>Fluorescent biomarker</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ProLong Gold Antifade Mountant</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>mounting medium for fluorescently labeled cells</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RNAscope Multiplex Fluorescent Reagent Kit v2</td>
			<td>ACD /Bio-Techne</td>
			<td>323100</td>
			<td>multiplex kit</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RNAscope probe Mouse Cck1r-C3</td>
			<td>ACD /Bio-Techne</td>
			<td>313751-C3</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RNAscope probe Mouse DapB</td>
			<td>ACD /Bio-Techne</td>
			<td>310043</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RNAscope probe Mouse Ghsr</td>
			<td>ACD /Bio-Techne</td>
			<td>426141</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RNAscope probe Mouse Phox2b-C2</td>
			<td>ACD /Bio-Techne</td>
			<td>407861-C2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RNAscope probe Mouse Prdm12-C2</td>
			<td>ACD /Bio-Techne</td>
			<td>524371-C2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RnaseZap</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>R2020</td>
			<td>Rnase decontaminating solution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Small dissecting scissors</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>Z265977</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Superfrost Plus slides</td>
			<td>Fisherbrand</td>
			<td>1255015</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue Tek OCT medium</td>
			<td>Sakura</td>
			<td>4583</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>User manual</td>
			<td>ACD</td>
			<td>323100 USM</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vannas Spring Scissors</td>
			<td>Roboz</td>
			<td>RS 5620</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ZEN Imaging Software</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

detection of g protein-coupled receptor expression in mouse vagal afferent neurons using multiplex in situ hybridization

Denne studien beskriver en protokoll for multiplex in situ hybridisering (ISH) av musen jugular-nodose ganglia, med særlig vekt på å oppdage uttrykket av G protein-koblede reseptorer (GPCRs). Formalin-fast jugular-nodose ganglia ble behandlet med RNAscope-teknologien for samtidig å oppdage uttrykket av to representative GPCRs (cholecystokinin og ghrelinreseptorer) i kombinasjon med ett markørgen av enten nodose (parret-lignende homeobox 2b, Phox2b) eller jugular afferent neuroner (PR-domene sink finger protein 12, Prdm12). Merket ganglia ble avbildet ved hjelp av konfokal mikroskopi for å bestemme fordelings- og uttrykksmønstrene til de nevnte transkripsjonene. Kort sagt, Phox2b afferent nevroner ble funnet å rikelig uttrykke cholecystokinin reseptoren (Cck1r), men ikke ghrelin reseptoren (Ghsr). En liten undergruppe av Prdm12 afferent neuroner ble også funnet å uttrykke Ghsr og / eller Cck1r. Potensielle tekniske advarsler i design, behandling og tolkning av multiplex ISH diskuteres. Tilnærmingen beskrevet i denne artikkelen kan hjelpe forskere med å generere nøyaktige kart over transkripsjonsprofilene til vagal afferent nevroner.

Mens RNAScope kan brukes på dyr i alle aldre, kjønn eller genetisk bakgrunn, er det tilrådelig å jobbe med unge voksne (<3 måneder gammel). Dette er fordi fluorescerende artefakter (f.eks. lipofuscin) er vanlige funn hos nevroner av eldre dyr41. Den formalin-faste ganglia fra eldre mus inneholder ofte overraskende intens endogen fluorescens som lett kan forveksles med ekte farging (Figur 1A, B). I alle fall er det tilrådelig å verifisere nivåe...

Watch this Scientific Journal Video about Detection of G Protein-coupled Receptor Expression in Mouse Vagal Afferent Neurons using Multiplex In Situ Hybridization at JoVE.com

Detection of G Protein-coupled Receptor Expression in Mouse Vagal Afferent Neurons using Multiplex In Situ Hybridization

Multiplex in situ hybridisering (ISH) ble brukt til samtidig å visualisere transkripsjonene for to G protein-koblede reseptorer og en transkripsjonsfaktor i hele vagal ganglionic komplekset av den voksne musen. Denne protokollen kan brukes til å generere nøyaktige kart over transkripsjonsprofilene til vagal afferent nevroner.

Påvisning av G Protein-koblet reseptoruttrykk i mus Vagal Afferent Neurons ved hjelp av Multiplex In Situ Hybridization

This study describes a protocol for the multiplex in situ hybridization (ISH) of the mouse jugular-nodose ganglia, with a particular emphasis on detecting ...

Denne prosedyren er svært følsom og tillater visualisering av flere transkripsjoner med minimal bakgrunn. Denne metoden kan generere nøyaktige kart over transkripsjonsprofilen til svært heterogene celletyper. Å demonstrere prosedyren vil være meg og Johnson Bob-manuel, en forskningstekniker i laboratoriet.Begynn med å samle hele vagal ganglionic massen fra de åtte ukene gammel mus fra hver side, ved hjelp av et dissekeringsomfang og kirurgiske instrumenter. Etter halshugging av musen, bruk små tang for å fjerne sternohyoid og omohyoid muskler lateral til luftrøret for å eksponere occipital bein. Fjern hele regionen av muskler og vev til halspulsåren, vagus og hypoglossal nerve og foramen magnum er synlige.Klipp deretter hele hypoglossalnerven med liten vårsaks. Finn for nodose ganglion som en gjennomsiktig masse nær foramen magnum. Bruk liten saks, bryt forsiktig occipitalbenet.For å eksponere jugular ganglion videre, finn svarte melanocytter på overflaten av jugularet som et visuelt landemerke. Når ganglions er funnet, kutt nervefestene mellom vagal ganglionic massen og trekk forsiktig på den perifere enden av vagusnerven samtidig som du kutter jugular ganglion mot hjernestammen med liten vårsaks for utvinning av hele ganglionmassen. Fjern konjunktivt vev, gangitonisk masse og fett som stikker til vagusnerven.Holde omtrent en halv centimeter av vagusnerven for å lette håndtering og lokalisering av prøver. Plasser fjern til ganglia ved hjelp av fine tang i 1,5 millimeter mikro sentrifugerør. Og inkuber ved fire grader celsius i formalin i 24 timer.Og så med 30% sukrose i 24 timer. Etter inkubasjon, plasser ganglia inne i en dråpe med en fire millimeter diameter optimal skjæretemperaturmedium på et stykke aluminiumsfolie. Og uttrykk prøven på en seng med tørris.Klipp de frosne prøvene med en kryostat i seksjoner på 14 mikrometer tykkelse ved minus 20 grader Celsius og samle kuttseksjonene på glassmikroskopet glir som tre serie 42 mikrometer fra hverandre. Skyll lysbildene med vevsseksjoner i PBS. Og bake i 30 minutter ved 60 grader Celsius i en stekeovn.Deretter postfix lysbildene i 4% formalin i 15 minutter ved fire grader Celsius. Dehydrer lysbildene serielt i 50%70% og 100% etanol i fem minutter hver. Og påfør hydrogenperoksidoppløsning på prøvene i 10 minutter før du skyller i dobbelt destillert vann.For In situ hybridisering, eller ISH, behandle prøvene med målhentingsreagenset i fem minutter. Skyll deretter prøvene sekvensielt i dobbelt destillert vann og 100% etanol etterfulgt av lufttørking. Bruk en hydrofob penn, lag en barriere rundt prøvene.Mens prøvene behandles med protease i 30 minutter ved 40 grader Celsius og en hybridiseringsovn, forvarm sondene ved 40 grader Celsius og avkjøl dem ved romtemperatur før bruk. Etter å ha flyttet fra ovnen, inkuber lysbildene med ønsket kombinasjon av målsonder i to timer ved 40 grader Celsius i en hybridiseringsovn. Inkuber negativt kontrollvev med dihydrodipicolinate reduktase eller DapB, mål C1 sonde i to timer ved 40 grader Celsius.Skyll lysbildene i vaskebufferen og oppbevar dem i fem ganger saltvannsnatriumsitrat ved romtemperatur over natten. Neste dag, skyll lysbildene med vaskebuffer før inkubasjon med forsterkningsreagenser. Og behandle med kanalspesifikke reagenser som beskrevet i manuskriptet.Vask lysbildene etterfulgt av behandling med DapB i 30 sekunder. Påfør deretter monteringsmediet umiddelbart på hvert lysbilde og legg en dekselslipp over vevsdelen. Hold vevet horisontalt i en skyveholder ved fire grader Celsius til avbildning.Klargjør et konfokalt mikroskop for avbildning ved å angi de nødvendige parameterne. Skaff bildene med en linjegjennomsnitt på fire og en pikselstørrelse på minst 1024 innen 1024 for å forbedre kvaliteten på bildene. Når du er fornøyd med anskaffelsesparametrene, begynner du å skaffe bildene ved hjelp av de samme innstillingene.Tilskrive falske farger til hver kanal for å gjøre det enklere å visualisere. Bruk de digitale bildene til å utføre celletelling ved å identifisere omrisset av RNA-omfangspositive profiler med en kjerne lett farget med DapB. Beregn prosentandelen av positive RNA-omfangsprofiler som uttrykker hver transkripsjon.De optimale anskaffelsesparametrene ble valgt for hver laser basert på den uspesifiserte fluorescensen oppnådd i det negative kontrollvevet. Den endogene fluorescensen i nodose ganglion av en ung voksen mus er minimal. Og inkubasjon med en DapB-sonde, det resulterte ikke i signaler.Ved økt effektlaser og gevinst med 488 nanometerlaser, vises uønsket bakgrunn og tilfeldige fluorescerende prikker. RNA-omfangsteknikken ble brukt til å oppdage tre gener i vevsseksjoner av vagal gangionisk masse. Vevsprofilen var positiv for GHSR og CCK1R.Profilen inkluderte både Phox2b- og CCK1R-transkripsjoner i rostraldelen av nodose ganglion. Som et resultat av multipleks ISH i nodose afferent neuroner, Phox2b signaler spesielt akkumulert i afferent nevroner, ligger i nodose ganglion. CCK1R-signaler merket intenst mange nevroner i nodose ganglion.Ved lav forstørrelse kunne ikke celler som uttrykker lave CCK1R- eller GSHR-signaler observeres lett. DapB bidro til å visualisere vevet og identifisere vagal afferent nevroner med en stor og lett farget kjerne. Ved høy forstørrelse er Phox2b positive profiler tydelige.Profiler to og tre er Phox2b-celler med høye og moderate CCK1R-signaler. Profil fire uttrykte både GHSR og CCK1R. Som et resultat av multiplex ISH av jugulære afferent nevroner, kan PRDM12-transkripsjonen ses spesielt akkumulert i afferent nevroner som ligger i jugular ganglion.Ved høy forstørrelse ble moderate signaler for CCK1R oppdaget i profiler en og to. Profil tre er en representant for PRDM12 celler negativ for CCK1R eller GHSR. Konsistens av disseksjon er en viktig faktor.Det er like viktig å verifisere at bildeinnsamlingsparametrene ikke genererer uønskede bakgrunnssignaler. Multiplex In situ hybridisering har blitt gullstandarden i molekylær etablert, spesielt innen nevroanatomi. Denne metoden kan enkelt kombineres med immunhiistokjemi.

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Detection of G Protein-coupled Receptor Expression in Mouse Vagal Afferent Neurons using Multiplex In Situ Hybridization

Double Fluorescence in situ Hybridization in Fresh Brain Sections

Double Fluorescence in situ Hybridization in Fresh Brain Sections

Here we describe a modified version of a double fluorescence in situ hybridization (dFISH) method optimized for detecting two mRNAs of interest in fresh ...

Combining Lipophilic dye, in situ Hybridization, Immunohistochemistry, and Histology

Combining Lipophilic dye, in situ Hybridization, Immunohistochemistry, and Histology

Going beyond single gene function to cut deeper into gene regulatory networks requires multiple mutations combined in a single animal.  Such analysis of ...

Detection of Protein Palmitoylation in Cultured Hippocampal Neurons by Immunoprecipitation and Acyl-Biotin Exchange (ABE)

Detection of Protein Palmitoylation in Cultured Hippocampal Neurons by Immunoprecipitation and Acyl-Biotin Exchange ABE

Påvisning av Protein palmitoylation i Cultured hippocampus neurons ved Immunoutfellingsanalyse og Acyl-Biotin Exchange (ABE)

Palmitoylation is a post-translational lipid  modification involving the attachment of a 16-carbon saturated fatty acid,  palmitate, to cysteine residues ...

Detection of the Genome and Transcripts of a Persistent DNA Virus in Neuronal Tissues by Fluorescent In situ Hybridization Combined with Immunostaining

Detection of the Genome and Transcripts of a Persistent DNA Virus in Neuronal Tissues by Fluorescent In situ Hybridization Combined with Immunostaining

Påvisning av Genome og transkripsjoner av en vedvarende DNA virus i nerve vev ved Fluorescent In situ Hybridisering Kombinert med Immunostaining

Single cell codetection of a gene, its RNA product and cellular regulatory proteins is critical to study gene expression regulation. This is a challenge ...

Detection of Axonally Localized mRNAs in Brain Sections Using High-Resolution In Situ Hybridization

Detection of Axonally Localized mRNAs in Brain Sections Using High-Resolution In Situ Hybridization

Påvisning av Axonally Lokalisert mRNAs i hjernedelene med høy oppløsning<em&gt; In Situ</em&gt; Hybridisering

mRNAs are frequently localized to vertebrate axons and their local translation is required for axon pathfinding or branching during development and for ...

Combining Double Fluorescence In Situ Hybridization with Immunolabelling for Detection of the Expression of Three Genes in Mouse Brain Sections

Combining Double Fluorescence In Situ Hybridization with Immunolabelling for Detection of the Expression of Three Genes in Mouse Brain Sections

Kombinere Double Fluorescence<em&gt; In Situ</em&gt; Hybridisering med immunomerking for Påvisning av Expression of Three Gener i musehjerne §§

Detection of gene expression in different types of brain cells e.g., neurons, astrocytes, oligodendrocytes, oligodendrocyte precursors and microglia, can ...

In Vitro Recording of Mesenteric Afferent Nerve Activity in Mouse Jejunal and Colonic Segments

In Vitro Recording of Mesenteric Afferent Nerve Activity in Mouse Jejunal and Colonic Segments

In vitro Opptak av Mesenteric afferente nerveaktivitet i mus Jejunal og Tykktarms segmenter

Afferent nerves not only convey information concerning normal physiology, but also signal disturbed homeostasis and pathophysiological processes of the ...

Localization of Odorant Receptor Genes in Locust Antennae by RNA In Situ Hybridization

Localization of Odorant Receptor Genes in Locust Antennae by RNA In Situ Hybridization

Lokalisering av luktningsmiddelreceptorgener i Locust Antenna av RNA<em&gt; I situ</em&gt; Hybridisering

Insects have evolved sophisticated olfactory reception systems to sense exogenous chemical signals. These chemical signals are transduced by Olfactory ...

Identification of Dopamine D1-Alpha Receptor Within Rodent Nucleus Accumbens by an Innovative RNA In Situ Detection Technology

Identification of Dopamine D1-Alpha Receptor Within Rodent Nucleus Accumbens by an Innovative RNA In Situ Detection Technology

Identifikasjon av dopamin D1-Alpha reseptor i gnager Nucleus Accumbens av en nyskapende RNA i Situ oppdagelsen teknologien

In the central nervous system, the D1-alpha subtype receptor (Drd1&#945;) is the most abundant dopamine (DA) receptor, which plays a vital role in ...

Preparations and Protocols for Whole Cell Patch Clamp Recording of Xenopus laevis Tectal Neurons

Preparations and Protocols for Whole Cell Patch Clamp Recording of Xenopus laevis Tectal Neurons

Forberedelser og protokoller for hele cellen Patch klemme opptak i Xenopus laevis Tectal nerveceller

The Xenopus tadpole retinotectal circuit, comprised of the retinal ganglion cells (RGCs) in the eye which form synapses directly onto neurons in the optic ...