Name: multiphoton intravital imaging for monitoring leukocyte recruitment during arteriogenesis in a murine hindlimb model
Uploaded: 2021-09-30T14:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Multiphoton Intravital Imaging for Monitoring Leukocyte Recruitment during Arteriogenesis in a Murine Hindlimb Model at JoVE.com

この研究は、Deutsche Forschungsgemeinschaft SFB 914(HI-A/SM、プロジェクトZ01)によって資金提供されました。原稿を読んでくださったスザンネ・シュトゥッテ博士に感謝します。

この研究は、バイエルン州動物管理使用委員会によって承認されました(倫理規定:ROB-55.2Vet-2532.Vet_02-17-99によって承認されました)。これらの実験は、ドイツの動物法ガイドラインに厳密に従って実施されました。
1.動物と大腿動脈結紮術(FAL)
注:無菌の炎症と動脈形成を誘発するために、8〜10週齢の雄C57BL / 6Jマウスを使用しました。いずれのマウスも、...

<ol>
	<li>The top 10 causes of death. World Health Organization Available from: <a target="_blank" href="https://www.who.int/news-room/fact-sheets/detail/the-top-10-causes-of-death">https://www.who.int/news-room/fact-sheets/detail/the-top-10-causes-of-death</a> (2020)</li><li>Deindl, E., Schaper, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+art+of+arteriogenesis.">The art of arteriogenesis.</a> Cell Biochemistry and Biophysics. 43 (1), 1-15 (2005).</li><li>Lasch, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Extracellular+RNA+released+due+to+shear+stress+controls+natural+bypass+growth+by+mediating+mechanotransduction+in+mice.">Extracellular RNA released due to shear stress controls natural bypass growth by mediating mechanotransduction in mice.</a> Blood. 134 (17), 1469-1479 (2019).</li><li>Kumaraswami, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+simple+and+effective+flow+Ccytometry-based+method+for+identification+and+quantification+of+tissue+infiltrated+leukocyte+subpopulations+in+a+mouse+model+of+peripheral+arterial+disease.">A simple and effective flow Ccytometry-based method for identification and quantification of tissue infiltrated leukocyte subpopulations in a mouse model of peripheral arterial disease.</a> International Journal of Molecular Sciences. 21 (10), 3593 (2020).</li><li>Padgett, M. E., McCord, T. J., McClung, J. M., Kontos, C. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Methods+for+acute+and+subacute+murine+hindlimb+ischemia.">Methods for acute and subacute murine hindlimb ischemia.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (112), e54166 (2016).</li><li>Limbourg, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+postnatal+arteriogenesis+and+angiogenesis+in+a+mouse+model+of+hind-limb+ischemia.">Evaluation of postnatal arteriogenesis and angiogenesis in a mouse model of hind-limb ischemia.</a> Nature Protocols. 4 (12), 1737 (2009).</li><li>Wagner, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intravital+microscopy+of+monocyte+homing+and+tumor-related+angiogenesis+in+a+murine+model+of+peripheral+arterial+disease.">Intravital microscopy of monocyte homing and tumor-related angiogenesis in a murine model of peripheral arterial disease.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (126), e56290 (2017).</li><li>Ishikawa-Ankerhold, H. C., Ankerhold, R., Drummen, G. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Advanced+fluorescence+microscopy+techniques--FRAP,+FLIP,+FLAP,+FRET+and+FLIM.">Advanced fluorescence microscopy techniques--FRAP, FLIP, FLAP, FRET and FLIM.</a> Molecules. 17 (4), 4047-4132 (2012).</li><li>Vladymyrov, M., Abe, J., Moalli, F., Stein, J. V., Ariga, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Real-time+tissue+offset+correction+system+for+intravital+multiphoton+microscopy.">Real-time tissue offset correction system for intravital multiphoton microscopy.</a> Journal of Immunological Methods. 438, 35-41 (2016).</li><li>Chandraratne, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Critical+role+of+platelet+glycoprotein+ibalpha+in+arterial+remodeling.">Critical role of platelet glycoprotein ibalpha in arterial remodeling.</a> Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. 35 (3), 589-597 (2015).</li></ol>

記載された白血球動員の多光子 インビボ 分析の方法は、(免疫−)組織学的またはFACS分析のような白血球動員研究のために一般的に使用されるツールへの追加を表す。このイメージング方法を用いると、動脈形成10時の白血球付着および血管外漏出における動的過程をより詳細に可視化することができる。この方法の付加価値にもかかわらず、提供されるプロトコルに...

近年の集中的な研究の関心にもかかわらず、虚血性心疾患や脳卒中などの心血管疾患は、依然として世界の主要な死因です1。これらの疾患に対する現在の治療法は、経皮経管的血管形成術、経皮的経管的冠動脈形成術、バイパス手術などの高侵襲療法です2。したがって、代替の非侵襲的治療選択肢の開発が緊急に必要とされている。身体は、狭窄または閉塞した血管の周りに自然なバイパスを作成して、中断された血流を狭窄の遠位部分に向け直すことができます。このプロセスは動脈形成2と呼ばれます。最近の多くの研究では、流体せん断の増加が動脈形成中に重要な役割を果たす白血球動員に影響を与えることが示されています3。動脈形成中の白血球の動員を分析するための現在の主なオプションは、 ex vivo (免疫)組織学的分析または蛍光活性化セルソーティング(FACS)方法論です4。動脈形成中の白血球動態の評価を可能にするために、この論文は多光子顕微鏡による生体内イメージングプロトコルを提示します。
白血球は、動脈形成の過程で動員される主要な血球です3。このプロトコルは、多光子イメージングを使用して、マウス後肢虚血モデル5,6を採用した大腿動脈結紮(FAL)による動脈形成の誘導から24時間後に、側副動脈に注射された抗CD45-PE抗体で標識された付着性白血球のクロールを示します。あるいは、免疫細胞をex vivoで標識し、生体内顕微鏡を用いた血管新生に関する研究で示されているように、マウスに注意深く注射することができます7。血管および動脈内の血流は、CD41-FITC(血小板を標識するため)、デキストラン-FITC(血漿)、または血管樹の一部の基底膜に存在するコラーゲンタイプ1を視覚化する第2高調波発生(SHG)によって視覚化できます。SHGは、多光子励起のユニークな遊離標識効果です。多光子イメージングは、組織を傷つけたり、レーザーパワー励起によって細胞を活性化したりすることなく、長期的な細胞追跡を可能にします。多光子顕微鏡は、蛍光色素を最小限の光毒性で組織/臓器の奥深くまで励起できるため、生きている動物の蛍光標識された細胞や構造を視覚化するためのイメージング法として最適です8。
フェムト秒間隔内にパルスが供給される同調された赤外線レーザーを使用すると、焦点面8の上下に励起することなく、焦点面でのみ蛍光色素が励起されます。したがって、多光子顕微鏡は、臓器内の動的な生物学的事象を研究するための高い時空間分解能、より少ない光損傷、および組織浸透イメージングの増加を可能にします。生きた動物のイメージングに理想的な顕微鏡ツールです。ただし、多光子やその他の生体内顕微鏡検査の技術は、心拍、呼吸、蠕動運動、筋肉の緊張、およびその他の生理学的機能による組織の動きによって制限され、画像の取得と分析を妨げます。これらの動きは時間的および空間的な分解能を損ない、時にはその後の分析を妨げることさえあるため、正確なデータ分析と解釈を可能にするために適切に対処する必要があります。組織の動きによるアーチファクトを低減または防止するために、いくつかの戦略が開発されています。このプロトコルは、VivoFollow9と呼ばれるin situドリフト補正ソフトウェアを適用して、画像取得中の組織ドリフトを補正します。このアプローチは、必要な画像安定化を提供し、長期的なイメージングと細胞追跡分析を可能にします。

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>1.0 mL Syringe</td>
			<td>BD Biosciences, San Jose, CA, USA</td>
			<td>309628</td>
			<td>syringe for injection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3M Durapore Surgical Tape 1538-0</td>
			<td>3M, St. Paul, MN, USA</td>
			<td>1538-0</td>
			<td>fixation tape</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Atipamezole</td>
			<td>Zoetis, Berlin, Germany</td>
			<td></td>
			<td>antagonize anesthesia</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Buprenorphine</td>
			<td>Reckitt Benckiser Healthcare, Slough, UK</td>
			<td></td>
			<td>antagonize anesthesia</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>C57/B6J mouse</td>
			<td>Charles River, Sulzfeld, Germany</td>
			<td></td>
			<td>used animals for surgery/imaging</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CD41-FITC ab</td>
			<td>Biolegend</td>
			<td>133904</td>
			<td>Platelet labeling in vivo</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CD45-PE ab</td>
			<td>Biolegend</td>
			<td>368510</td>
			<td>Leukocytes labelling in vivo</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Disinfectant Cutasept</td>
			<td>Carl Roth GmbH, Karlsruhe, Deutschland</td>
			<td>AK64.2</td>
			<td>Disinfection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Eye cream (Bepanthen)</td>
			<td>Bayer Vital GmbH</td>
			<td>5g</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fentanyl</td>
			<td>CuraMED Pharma, Karlsruhe, Germany</td>
			<td></td>
			<td>anesthesia</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Flumazenile</td>
			<td>Inresa Arzneimittel GmbH, Freiburg, Deutschland</td>
			<td></td>
			<td>antagonize anesthesia</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fine bore polythene tubing</td>
			<td>Smiths medical</td>
			<td>Lot 278316</td>
			<td>0.28 mm ID and 0.61 mm OD, tubing for the vein catheter</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Histoacryl flexible</td>
			<td>BRAUM</td>
			<td>1050052</td>
			<td>tissue glue</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Imaris software</td>
			<td>Oxford Instruments</td>
			<td>version 9.2</td>
			<td>Used for cell tracking, cell speed analysis, 3D projection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Laser Doppler Imaging instrument</td>
			<td>Moor LDI 5061 and Moor Software Version 3.01, Moor Instruments, Remagen, Germany</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LEICA KL300 LED</td>
			<td>Leica, Solms, Germany</td>
			<td></td>
			<td>light for microscope</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Leica M60</td>
			<td>Leica, Solms, Germany</td>
			<td></td>
			<td>microscope for surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LEICA MC120 HD</td>
			<td>Leica, Solms, Germany</td>
			<td></td>
			<td>camera for microscope</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medetomidine</td>
			<td>Pfizer Pharma, Berlin, Germany</td>
			<td></td>
			<td>anesthesia</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Midazolam</td>
			<td>Ratiopharm GmbH, Ulm, Germany</td>
			<td></td>
			<td>anesthesia</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Multiphoton microscope</td>
			<td>Lavision</td>
			<td>TRIMScope II</td>
			<td>WL 820 nm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaCl 0.9%</td>
			<td>Braun, Melsungen, Deutschland</td>
			<td>3570310</td>
			<td>saline for pocket</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Naloxone</td>
			<td>Inresa Arzneimittel GmbH, Freiburg, Deutschland</td>
			<td></td>
			<td>antagonize anesthesia</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needle 30 G</td>
			<td>BD Biosciences, San Jose, CA, USA</td>
			<td>305128</td>
			<td>needle for i.v. catheter</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Silk braided suture (0/7)</td>
			<td>Pearsalls Ltd., Taunton, UK</td>
			<td>SUT-S&#160;103</td>
			<td>suture for femoral artery ligation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ultrason Gel</td>
			<td>SONOSID-ASID BONZ 250 mL</td>
			<td>782012</td>
			<td>gel for imaging</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vicryl 6.0 suture</td>
			<td>Vicryl, Johnson&#38;Johnson, New Brunswick, NJ, USA</td>
			<td>NW-2347</td>
			<td>suture to build pocket</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>VivoFollow drift correction software</td>
			<td>Developed by Mykhailo Vladymyrov</td>
			<td></td>
			<td>Reference 9</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

multiphoton intravital imaging for monitoring leukocyte recruitment during arteriogenesis in a murine hindlimb model

動脈形成は、成長する側副血管の血管周囲腔への白血球および血小板動員に強く依存する。動脈形成における側副動脈および白血球を分析するための標準的なアプローチは、 ex vivo (免疫)組織学的方法論である。ただし、この手法では、血流、せん断応力、細胞間相互作用、粒子速度などの動的プロセスを測定できません。この論文は、生体内イメージングを利用して、動脈形成中に成長する側副動脈の in vivo プロセスを監視するためのプロトコルを提示します。ここで説明する方法は、ダイナミクス測定のための信頼性の高いツールであり、多光子励起顕微鏡によって提供される最小限の光細胞毒性で高コントラスト分析を提供します。成長する側副動脈を分析する前に、大腿動脈の片側結紮によってマウスの内転筋に動脈形成が誘導された。
結紮後、せん断応力の増加により既存の側副動脈が成長し始めました。術後24時間で側副動脈の上の皮膚と皮下脂肪を取り除き、さらなる分析のためのポケットを構築した。in vivoイメージング中の血流および免疫細胞を視覚化するために、CD41-フルオレセインイソチオシアネート(FITC)(血小板)およびCD45-フィコエリスリン(PE)(白血球)抗体を、マウスの尾静脈に配置されたカテーテルを介して静脈内(i.v.)注射した。この記事では、動脈形成に関連するプロセスを研究するために、一般的に使用される静的ex vivo(免疫)組織学的分析の代替またはin vivo補完として、生体内多光子イメージングを紹介します。要約すると、この論文は、動脈形成の後肢モデルにおける免疫細胞輸送、血流、およびせん断応力を調査するための新規で動的なin vivo法について説明し、評価の可能性を著しく高めます。

多光子顕微鏡は、白血球追跡のための高い時空間分解能を提供し、細胞移動ステップと速度を追跡および監視できます(図4A、B)。ただし、サンプルの生理学的動きは、特に長期間の生体内顕微鏡画像取得にとって課題となります。したがって、組織を固定するための良好な組織調製物およびホルダーおよび組織ドリフトのためのリアルタイム画像補正などの...

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Multiphoton Intravital Imaging for Monitoring Leukocyte Recruitment during Arteriogenesis in a Murine Hindlimb Model

白血球および血小板の動員は、動脈形成中の側副動脈の効果的な成長に必要な必須成分を構成する。多光子顕微鏡は、動脈形成中の白血球の動員と血管外漏出を研究するために、 in vivoで 高い時空間分解能と光毒性の低い細胞ダイナミクスを追跡するための効率的なツールです。

マウス後肢モデルにおける動脈形成中の白血球動員モニタリングのための多光子生体内イメージング

Arteriogenesis strongly depends on leukocyte and platelet recruitment to the perivascular space of growing collateral vessels. The standard approach for ...

私たちのプロトコルにより、研究者は、成長する側副動脈における免疫細胞の接着と血管外漏出をリアルタイムで追跡することにより、in vivoでの動脈形成のプロセスを分析できます。多光子顕微鏡技術は、生きているマウスモデルの深部組織における細胞動態を、光毒性が低く、高い時空間分解能で可視化することを可能にします。顕微鏡の手順は、ヘレン・イシカワ・アンカーホールド博士の研究室の多光子イメージングプラットフォームの技術アシスタントであるドミニク・ファン・デン・ヒューベルによって実証されます。手術手順を実演します。まず、麻酔をかけたマウスを仰臥位に置きます。次に、マウスの上後肢の下に2枚の成形粘土を置き、内転筋の平面位置を確保します。マウスを実体顕微鏡の下に置きます。両足から毛を取り除いた後、消毒し、右後肢の以前の大腿動脈結紮の瘢痕の周りの円で皮膚を切ります。脚の上部から皮膚と脂肪層を取り除き、縫合糸を使用して残りの皮膚を脇に引っ張り、側副血管で内転筋の周りにポケットを作成します。次に、皮下脂肪を取り除き、内転筋、深部動脈、静脈、側副血管の鮮明なビジョンを取得します。細かい鉗子を使用して側副血管の上にある表在筋層を取り除きます。組織が乾燥するのを防ぐために準備したポケットに生理食塩水を入れ、偽手術の左後肢についても同じ手順を続けます。イメージングの前に、両方のポケットに超音波ゲルを追加して、乾燥を防ぎ、対物レンズとの光結合のための浸漬媒体として機能します。チタンサファイアレーザーボックス、電子インターフェースボックス、インキュベーターチャンバーの加熱ユニット、蛍光灯、およびコンピューターのキーをオンにします。取得ソフトウェアを起動します。波長を800ナノメートルに設定し、顕微鏡シャッターを開きます。測定ウィザードダイアログで、計器モードをシングルビーム、測定モードを3Dスキャンタイムラプスとして選択します。次に、麻酔をかけたマウスを顕微鏡の予め温めたインキュベーションチャンバーに移し、超音波ゲルのある領域を対物レンズのフロントレンズに直接接触させます。落射蛍光顕微鏡のシャッターを開きます。次に、FTSEの視覚化に適したフィルターまたはダイクロイック設定を選択します。落射蛍光照明下で血流を追跡することにより、関心領域を定義します。対象領域を中央視野に入れたら、落射蛍光顕微鏡シャッターを閉じます。XYスキャナーダイアログで、画像サイズ、ピクセル、周波数、ライン平均に必要なパラメーターを設定します。レーザー出力を調整し、チャンネルの緑、赤、青の写真乗数ゲインを設定します。生体内イメージングとドリフト補正の設定に適した対物レンズを選択します。測定ウィザードダイアログウィンドウの赤いボタンを押してプレビュー取得モードを開始し、画像スタック範囲を定義します。良好な画像を得るには、焦点を合わせることによって関心のある領域と構造を定義します。画面を観察しながら、画像が消えるまで対物レンズを動かしてフォーカスを変更し、ゼロに設定します。目標位置を軸方向の最後の位置として設定します。次に、画像が画面から再び消えるまで対物レンズを下に動かして、反対方向にフォーカスを変更します。測定ウィザードダイアログの左上隅にある停止ボタンをクリックし、ステップサイズを2マイクロメートルに設定します。測定ウィザードダイアログで最初の軸デバイスとしてPython軸を選択し、自動保存モードをアクティブにしないを選択します。次に、時間軸でのみ自動保存チェックボックスをオンにします。次に、使用可能なデバイスウィンドウのPythonアイコンを押して、Pythonダイアログウィンドウを開きます。Python ダイアログの軸設定で、開始セクションと終了セクションを入力し、ステップ数を入力します。XYZステージZダイアログウィンドウに移動し、スキャン範囲を両端で200マイクロメートル拡大します。これを行うには、開始に200マイクロメートルを入力し、最後にマイナス240マイクロメートルを入力すると、範囲は自動的にマイナス440マイクロメートルに設定されます。VivoFollow フロントエンドダイアログを開きます。測定ウィザードダイアログの左上隅にある緑色の矢印を押して、画像取得を開始します。ライブドリフト補正が使用されている場合は、表示されるドリフト補正設定のダイアログを探します。次に、モバイルランドマーク参照で使用される取得チャネルを設定します。最初と最後のZ位置に追加された最大補正オフセットをマイクロメートル単位で入力し、「OK」をクリックします。生体内フローフロントエンドダイアログウィンドウでの画像取得中にX、Y、Zの電流ドリフトオフセットをリアルタイムで監視し、麻酔の再注入の別のサイクルが必要な場合は35分後に画像取得を停止します。MMFミックスの半分の用量を注入し、実験が終了するまで画像取得を再開します。このツールは、長期間の画像取得を可能にし、高品質のデータ収集を可能にし、速度測定のための細胞の追跡に適しています。ドリフト補正なしで示されているように、関心領域は記録ビューから徐々に離れ、速度分析のために細胞を追跡する機能に影響を与えます。しかし、ドリフト補正ソフトで安定した動画を撮影でき、より多くの細胞を長期間追跡することができます。ドリフト補正ソフトウェアは、システム補正された時間の経過に伴うX、Y、およびZオフセットの視覚化を提供することもできます。多光子顕微鏡は、白血球追跡のための高い時空間分解能を提供し、細胞移動ステップと速度を追跡および監視することができます。多光子イメージングのために側副血管を準備することにより、側副動脈への損傷を回避することが不可欠です。イメージングの前に、正しい側副動脈を安全に特定することが重要です。側副動脈の生体内多光子イメージングのこの新しい手順により、抗体標識を変更することにより、in vivo内のすべての血球の接着と血管外漏出を分析することができます。

Research

JoVE Journal

Medicine

A Murine Model of Stent Implantation in the Carotid Artery for the Study of Restenosis

再狭窄の研究のための頸動脈内ステント留置のマウスモデル

Despite  the considerable progress made in the stent development in the last decades,  cardiovascular diseases remain the main cause of death in western ...

An Orthotopic Glioblastoma Mouse Model Maintaining Brain Parenchymal Physical Constraints and Suitable for Intravital Two-photon Microscopy

同所神経膠芽腫モデルマウスは、脳実質細胞の物理的制約を維持し、生体内二光子顕微鏡に適し

Glioblastoma multiforme (GBM) is the most aggressive form of brain tumors with no curative treatments available to date.
Murine models of this pathology ...

Sequential In vivo Imaging of Osteogenic Stem/Progenitor Cells During Fracture Repair

Sequential In vivo Imaging of Osteogenic Stem/Progenitor Cells During Fracture Repair

シーケンシャル<em&gt;インビボ</em&gt;骨折修復中に、骨形成幹細胞/前駆細胞のイメージング

Bone turns over continuously and is highly regenerative following injury. Osteogenic stem/progenitor cells have long been hypothesized to exist, but in ...

Evaluation of Tumor-infiltrating Leukocyte Subsets in a Subcutaneous Tumor Model

皮下腫瘍モデルにおける腫瘍浸潤白血球サブセットの評価

Specialized immune cells that infiltrate the tumor microenvironment regulate the growth and survival of neoplasia.&#160; Malignant cells must elude or ...

Methods for Acute and Subacute Murine Hindlimb Ischemia

急性および亜急性ネズミ後肢虚血のための方法

Peripheral artery disease (PAD) is a leading cause of cardiovascular morbidity and mortality in developed countries, and animal models that reliably ...

Combined Intravital Microscopy and Contrast-enhanced Ultrasonography of the Mouse Hindlimb to Study Insulin-induced Vasodilation and Muscle Perfusion

インスリン依存性血管拡張や筋肉の血流を研究する生体顕微鏡観察とマウスの後肢の造影超音波検査

It has been demonstrated that insulin's vascular actions contribute to regulation of insulin sensitivity. Insulin's effects on muscle perfusion regulate ...

Inducing Ischemia-reperfusion Injury in the Mouse Ear Skin for Intravital Multiphoton Imaging of Immune Responses

免疫応答の生体内多光子イメージングのためのマウスの耳の皮膚に虚血再灌流傷害を誘導します

Ischemia-reperfusion injury (IRI) occurs when there is transient hypoxia due to the obstruction of blood flow (ischemia) followed by a subsequent ...

Quantitative Visualization of Leukocyte Infiltrate in a Murine Model of Fulminant Myocarditis by Light Sheet Microscopy

光シート顕微鏡による劇症心筋炎のマウスモデルにおける白血球浸潤の定量的可視化

Light-sheet fluorescence microscopy (LSFM), in combination with chemical clearing protocols, has become the gold standard for analyzing fluorescently ...

Intravital Microscopy of Monocyte Homing and Tumor-Related Angiogenesis in a Murine Model of Peripheral Arterial Disease

単球のホーミングと末梢動脈疾患のマウスモデルにおける腫瘍関連血管新生の生体顕微鏡

The therapeutic goal for peripheral arterial disease and ischemic heart disease is to increase blood flow to ischemic areas caused by hemodynamic ...

Assessing Therapeutic Angiogenesis in a Murine Model of Hindlimb Ischemia

ヒンドリム虚血のマウスモデルにおける治療血管新生の評価

Critical limb ischemia (CLI) is a serious condition that entails a high risk of lower limb amputation. Despite revascularization being the gold-standard ...