Name: multiphoton intravital imaging for monitoring leukocyte recruitment during arteriogenesis in a murine hindlimb model
Uploaded: 2021-09-30T14:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Multiphoton Intravital Imaging for Monitoring Leukocyte Recruitment during Arteriogenesis in a Murine Hindlimb Model at JoVE.com

Исследование финансировалось Deutsche Forschungsgemeinschaft SFB 914 (HI-A/SM, проект Z01). Мы благодарим доктора Сюзанну Штутте за прочтение рукописи.

Это исследование было одобрено Баварским комитетом по уходу за животными и их использованию (одобрено этическим кодексом: ROB-55.2Vet-2532.Vet_02-17-99); эти эксперименты проводились в строгом соответствии с руководящими принципами немецкого законодательства о животных.
1. Животные и...

<ol>
	<li>The top 10 causes of death. World Health Organization Available from: <a target="_blank" href="https://www.who.int/news-room/fact-sheets/detail/the-top-10-causes-of-death">https://www.who.int/news-room/fact-sheets/detail/the-top-10-causes-of-death</a> (2020)</li><li>Deindl, E., Schaper, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+art+of+arteriogenesis.">The art of arteriogenesis.</a> Cell Biochemistry and Biophysics. 43 (1), 1-15 (2005).</li><li>Lasch, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Extracellular+RNA+released+due+to+shear+stress+controls+natural+bypass+growth+by+mediating+mechanotransduction+in+mice.">Extracellular RNA released due to shear stress controls natural bypass growth by mediating mechanotransduction in mice.</a> Blood. 134 (17), 1469-1479 (2019).</li><li>Kumaraswami, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+simple+and+effective+flow+Ccytometry-based+method+for+identification+and+quantification+of+tissue+infiltrated+leukocyte+subpopulations+in+a+mouse+model+of+peripheral+arterial+disease.">A simple and effective flow Ccytometry-based method for identification and quantification of tissue infiltrated leukocyte subpopulations in a mouse model of peripheral arterial disease.</a> International Journal of Molecular Sciences. 21 (10), 3593 (2020).</li><li>Padgett, M. E., McCord, T. J., McClung, J. M., Kontos, C. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Methods+for+acute+and+subacute+murine+hindlimb+ischemia.">Methods for acute and subacute murine hindlimb ischemia.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (112), e54166 (2016).</li><li>Limbourg, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+postnatal+arteriogenesis+and+angiogenesis+in+a+mouse+model+of+hind-limb+ischemia.">Evaluation of postnatal arteriogenesis and angiogenesis in a mouse model of hind-limb ischemia.</a> Nature Protocols. 4 (12), 1737 (2009).</li><li>Wagner, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intravital+microscopy+of+monocyte+homing+and+tumor-related+angiogenesis+in+a+murine+model+of+peripheral+arterial+disease.">Intravital microscopy of monocyte homing and tumor-related angiogenesis in a murine model of peripheral arterial disease.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (126), e56290 (2017).</li><li>Ishikawa-Ankerhold, H. C., Ankerhold, R., Drummen, G. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Advanced+fluorescence+microscopy+techniques--FRAP,+FLIP,+FLAP,+FRET+and+FLIM.">Advanced fluorescence microscopy techniques--FRAP, FLIP, FLAP, FRET and FLIM.</a> Molecules. 17 (4), 4047-4132 (2012).</li><li>Vladymyrov, M., Abe, J., Moalli, F., Stein, J. V., Ariga, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Real-time+tissue+offset+correction+system+for+intravital+multiphoton+microscopy.">Real-time tissue offset correction system for intravital multiphoton microscopy.</a> Journal of Immunological Methods. 438, 35-41 (2016).</li><li>Chandraratne, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Critical+role+of+platelet+glycoprotein+ibalpha+in+arterial+remodeling.">Critical role of platelet glycoprotein ibalpha in arterial remodeling.</a> Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. 35 (3), 589-597 (2015).</li></ol>

Описанный метод многофотонного анализа рекрутирования лейкоцитов in vivo представляет собой дополнение к широко используемым инструментам для исследований рекрутирования лейкоцитов, таким как (иммуно-) гистологический анализ или анализ FACS. С помощью этого метода визуализации можн...

Несмотря на интенсивный исследовательский интерес в последние годы, сердечно-сосудистые заболевания, например, ишемическая болезнь сердца и инсульт, по-прежнему являются ведущей глобальной причиной смерти1. Современные методы лечения этих заболеваний представляют собой высокоинвазивные методы лечения, такие как чрескожная транслюминальная ангиопластика, чрескожная транслюминальная коронарная ангиопластика или шунтирование2. Поэтому срочно необходима разработка альтернативных, неинвазивных терапевтических вариантов. Организм может создавать естественные обходы вокруг стенозированного или закупоренного сосуда, чтобы перенаправить прерванный кровоток в дистальную часть стеноза. Этот процесс называется артериогенезом2. Многие недавние исследования показали, что повышенный сдвиг жидкости влияет на рекрутирование лейкоцитов, что играет важную роль во время артериогенеза3. Основными современными вариантами анализа рекрутирования лейкоцитов во время артериогенеза являются гистологические анализы ex vivo (иммуно-) или методология сортировки клеток, активированной флуоресценцией (FACS)4. Для оценки динамики лейкоцитов во время артериогенеза в данной работе представлен протокол прижизненной визуализации с многофотонной микроскопией.
Лейкоциты являются основными клетками крови, набираемыми в процессе артериогенеза3. В этом протоколе используется многофотонная визуализация, чтобы показать ползание адгезивных лейкоцитов, меченных инъецированными антителами против CD45-PE, в коллатеральных артериях через 24 часа после индукции артериогенеза с помощью перевязки бедренной артерии (FAL) с использованием моделиишемии задних конечностей мыши 5,6. В качестве альтернативы, иммунные клетки могут быть помечены ex vivo и осторожно введены мышам, как показано в исследованиях ангиогенеза с использованием прижизненной микроскопии7. Кровоток внутри сосудов и артерий может быть визуализирован с помощью CD41-FITC (для маркировки тромбоцитов), декстрана-FITC (плазма) или с помощью генерации второй гармоники (SHG), которая визуализирует коллаген типа 1, присутствующий в базальной мембране некоторой части сосудистого дерева. ГСП – это уникальный свободный меченый эффект многофотонного возбуждения. Многофотонная визуализация позволяет осуществлять долгосрочное отслеживание клеток, не повреждая ткани и не активируя клетки путем возбуждения лазерной энергии. Многофотонная микроскопия является предпочтительным методом визуализации для визуализации флуоресцентно меченных клеток и структур у живых животных из-за ее способности возбуждать флуорофоры глубже в ткани/органы с минимальной фототоксичностью8.
Использование настроенных инфракрасных лазеров с импульсами, доставляемыми в фемтосекундных интервалах, возбуждает флуорохром только в фокальной плоскости, без возбуждения выше и ниже фокальной плоскости8. Таким образом, многофотонная микроскопия обеспечивает высокое пространственно-временное разрешение, меньшее количество фотоповреждений и увеличенную визуализацию проникновения в ткани для изучения динамических биологических событий внутри органов. Это идеальный инструмент микроскопии для визуализации живых животных. Однако многофотонная и любая другая техника прижизненной микроскопии ограничена движением тканей из-за сердцебиения, дыхания, перистальтических движений, тонуса мышц и других физиологических функций, что нарушает получение и анализ изображений. Поскольку эти перемещения ухудшают временное и пространственное разрешение, а иногда даже препятствуют последующему анализу, они должны быть надлежащим образом устранены, чтобы обеспечить точный анализ и интерпретацию данных. Было разработано несколько стратегий для снижения или предотвращения артефактов от движения тканей. Этот протокол применяет программное обеспечение для коррекции дрейфа in situ под названием VivoFollow9 для коррекции дрейфа тканей во время получения изображения. Такой подход обеспечивает необходимую стабилизацию изображения, позволяя проводить долгосрочную визуализацию и анализ отслеживания клеток.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>1.0 mL Syringe</td>
			<td>BD Biosciences, San Jose, CA, USA</td>
			<td>309628</td>
			<td>syringe for injection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3M Durapore Surgical Tape 1538-0</td>
			<td>3M, St. Paul, MN, USA</td>
			<td>1538-0</td>
			<td>fixation tape</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Atipamezole</td>
			<td>Zoetis, Berlin, Germany</td>
			<td></td>
			<td>antagonize anesthesia</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Buprenorphine</td>
			<td>Reckitt Benckiser Healthcare, Slough, UK</td>
			<td></td>
			<td>antagonize anesthesia</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>C57/B6J mouse</td>
			<td>Charles River, Sulzfeld, Germany</td>
			<td></td>
			<td>used animals for surgery/imaging</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CD41-FITC ab</td>
			<td>Biolegend</td>
			<td>133904</td>
			<td>Platelet labeling in vivo</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CD45-PE ab</td>
			<td>Biolegend</td>
			<td>368510</td>
			<td>Leukocytes labelling in vivo</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Disinfectant Cutasept</td>
			<td>Carl Roth GmbH, Karlsruhe, Deutschland</td>
			<td>AK64.2</td>
			<td>Disinfection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Eye cream (Bepanthen)</td>
			<td>Bayer Vital GmbH</td>
			<td>5g</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fentanyl</td>
			<td>CuraMED Pharma, Karlsruhe, Germany</td>
			<td></td>
			<td>anesthesia</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Flumazenile</td>
			<td>Inresa Arzneimittel GmbH, Freiburg, Deutschland</td>
			<td></td>
			<td>antagonize anesthesia</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fine bore polythene tubing</td>
			<td>Smiths medical</td>
			<td>Lot 278316</td>
			<td>0.28 mm ID and 0.61 mm OD, tubing for the vein catheter</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Histoacryl flexible</td>
			<td>BRAUM</td>
			<td>1050052</td>
			<td>tissue glue</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Imaris software</td>
			<td>Oxford Instruments</td>
			<td>version 9.2</td>
			<td>Used for cell tracking, cell speed analysis, 3D projection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Laser Doppler Imaging instrument</td>
			<td>Moor LDI 5061 and Moor Software Version 3.01, Moor Instruments, Remagen, Germany</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LEICA KL300 LED</td>
			<td>Leica, Solms, Germany</td>
			<td></td>
			<td>light for microscope</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Leica M60</td>
			<td>Leica, Solms, Germany</td>
			<td></td>
			<td>microscope for surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LEICA MC120 HD</td>
			<td>Leica, Solms, Germany</td>
			<td></td>
			<td>camera for microscope</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medetomidine</td>
			<td>Pfizer Pharma, Berlin, Germany</td>
			<td></td>
			<td>anesthesia</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Midazolam</td>
			<td>Ratiopharm GmbH, Ulm, Germany</td>
			<td></td>
			<td>anesthesia</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Multiphoton microscope</td>
			<td>Lavision</td>
			<td>TRIMScope II</td>
			<td>WL 820 nm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaCl 0.9%</td>
			<td>Braun, Melsungen, Deutschland</td>
			<td>3570310</td>
			<td>saline for pocket</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Naloxone</td>
			<td>Inresa Arzneimittel GmbH, Freiburg, Deutschland</td>
			<td></td>
			<td>antagonize anesthesia</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needle 30 G</td>
			<td>BD Biosciences, San Jose, CA, USA</td>
			<td>305128</td>
			<td>needle for i.v. catheter</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Silk braided suture (0/7)</td>
			<td>Pearsalls Ltd., Taunton, UK</td>
			<td>SUT-S&#160;103</td>
			<td>suture for femoral artery ligation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ultrason Gel</td>
			<td>SONOSID-ASID BONZ 250 mL</td>
			<td>782012</td>
			<td>gel for imaging</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vicryl 6.0 suture</td>
			<td>Vicryl, Johnson&#38;Johnson, New Brunswick, NJ, USA</td>
			<td>NW-2347</td>
			<td>suture to build pocket</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>VivoFollow drift correction software</td>
			<td>Developed by Mykhailo Vladymyrov</td>
			<td></td>
			<td>Reference 9</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

multiphoton intravital imaging for monitoring leukocyte recruitment during arteriogenesis in a murine hindlimb model

Артериогенез сильно зависит от рекрутирования лейкоцитов и тромбоцитов в периваскулярное пространство растущих коллатеральных сосудов. Стандартным подходом к анализу коллатеральных артерий и лейкоцитов в артериогенезе является ex vivo (иммуно-) гистологическая методология. Однако этот метод не позволяет измерять динамические процессы, такие как кровоток, напряжение сдвига, межклеточные взаимодействия и скорость частиц. В данной работе представлен протокол мониторинга процессов in vivo в растущих коллатеральных артериях во время артериогенеза с использованием прижизненной визуализации. Описанный здесь метод является надежным инструментом для измерения динамики и предлагает высококонтрастный анализ с минимальной фотоцитотоксичностью, обеспечиваемый многофотонной возбуждающей микроскопией. До анализа растущих коллатеральных артерий артериогенез индуцировался в приводящей мышце мышей односторонней перевязкой бедренной артерии.
После перевязки ранее существовавшие коллатеральные артерии начали расти из-за повышенного напряжения сдвига. Через двадцать четыре часа после операции кожа и подкожно-жировая клетчатка над коллатеральными артериями были удалены, образовав карман для дальнейших анализов. Чтобы визуализировать кровоток и иммунные клетки во время визуализации in vivo , антитела CD41-флуоресцеина изотиоцианата (FITC) (тромбоциты) и CD45-фикоэритрин (ПЭ) (лейкоциты) вводили внутривенно (в/в) через катетер, помещенный в хвостовую вену мыши. В этой статье представлена прижизненная многофотонная визуализация в качестве альтернативы или дополнения in vivo к обычно используемым статическим (иммуно-) гистологическим анализам ex vivo для изучения процессов, имеющих отношение к артериогенезу. Таким образом, в этой статье описывается новый и динамичный метод in vivo для исследования трафика иммунных клеток, кровотока и напряжения сдвига в модели артериогенеза задних конечностей, что значительно расширяет возможности оценки.

Многофотонная микроскопия обеспечивает высокое пространственно-временное разрешение для отслеживания лейкоцитов, при этом можно отслеживать и контролировать этапы и скорость миграции клеток (рис. 4A, B). Тем не менее, физиологическое движение образца представ?...

Watch this Scientific Journal Video about Multiphoton Intravital Imaging for Monitoring Leukocyte Recruitment during Arteriogenesis in a Murine Hindlimb Model at JoVE.com

Multiphoton Intravital Imaging for Monitoring Leukocyte Recruitment during Arteriogenesis in a Murine Hindlimb Model

Рекрутирование лейкоцитов и тромбоцитов является важным компонентом, необходимым для эффективного роста коллатеральных артерий во время артериогенеза. Многофотонная микроскопия является эффективным инструментом для отслеживания клеточной динамики с высоким пространственно-временным разрешением in vivo и меньшей фототоксичностью для изучения рекрутирования и экстравазации лейкоцитов во время артериогенеза.

Многофотонная прижизненная визуализация для мониторинга рекрутирования лейкоцитов во время артериогенеза на модели задних конечностей мышей

Arteriogenesis strongly depends on leukocyte and platelet recruitment to the perivascular space of growing collateral vessels. The standard approach for ...

Наш протокол позволяет исследователям анализировать процесс артериогенеза in vivo, отслеживая приверженность иммунных клеток и экстравазацию в растущих коллатеральных артериях в режиме реального времени. Метод многофотонной микроскопии позволяет визуализировать клеточную динамику в глубоких тканях живых моделей мышей с низкой фототоксичностью и с высоким пространственно-временным разрешением. Процедуру микроскопа продемонстрирует Доминик ван ден Хойвел, технический ассистент платформы многофотонной визуализации из лаборатории доктора Хелен Исикава-Анкерхольд.Я продемонстрирую хирургическую процедуру. Для начала поместите анестезированную мышь в положение лежа на спине. Затем поместите два кусочка формованной глины под верхнюю заднюю конечность мыши, чтобы обеспечить ровное положение приводящей мышцы.Поместите мышь под стереомикроскоп. После удаления волос с обеих ног продезинфицируйте и срежьте кожу по кругу вокруг рубца ранее перевязки бедренной артерии правой задней конечности. Удалите кожу и жировой слой с верхней части ноги и оттяните оставшуюся кожу с помощью швов, чтобы создать карман вокруг приводящей мышцы с коллатеральными сосудами.Затем удалите подкожно-жировую клетчатку, чтобы получить четкое представление о приводящей мышце, артерии и вене profunda, а также о коллатеральных сосудах. Удалите поверхностный мышечный слой поверх коллатеральных сосудов с помощью тонких щипцов. Наполните подготовленный карман физиологическим раствором, чтобы предотвратить высыхание ткани, и продолжите ту же процедуру для фиктивно прооперированной левой задней конечности.Перед визуализацией добавьте ультразвуковой гель в оба кармана, который предотвращает высыхание и служит погружной средой для оптического соединения с объективом. Включите ключ титаново-сапфирового лазерного бокса, блок электронных интерфейсов, нагревательный блок камеры инкубатора, люминесцентную лампу и компьютер. Запустите программное обеспечение для сбора данных.Установите длину волны на 800 нанометров и откройте затвор микроскопа. В диалоговом окне мастера измерений выберите режим прибора как однолучевый, а режим измерения — как таймлапс 3D-сканирования. Затем перенесите анестезированную мышь в предварительно разогретую инкубационную камеру микроскопа и расположите область с ультразвуковым гелем непосредственно в контакте с передней линзой объектива.Откройте затвор эпифлуоресцентного микроскопа. Затем выберите подходящий фильтр или дихроичную настройку для визуализации FTSE. Определите интересующую область, проследив за кровотоком при эпифлуоресцентном освещении.После того, как область интереса окажется в центре поля зрения, закройте затвор эпифлуоресцентного микроскопа. В диалоговом окне сканера XY задайте необходимые параметры для размера изображения, пикселя, частоты, среднего значения строки. Отрегулируйте мощность лазера и установите усиление фотомножителя для зеленого, красного и синего каналов.Выберите подходящий объектив для прижизненной визуализации и настройки коррекции дрейфа. Определите диапазон стека изображений, запустив режим предварительного просмотра, нажав красную кнопку в диалоговом окне мастера измерений. Чтобы получить хорошие изображения, определите интересующую область и структуру с помощью фокусировки.Наблюдая за экраном, меняйте фокус, перемещая объектив до тех пор, пока изображение не исчезнет, и установите его равным нулю. Установите положение объектива в качестве последнего положения в осевом направлении. Затем измените фокус в противоположном направлении, перемещая объектив вниз, пока изображение снова не исчезнет с экрана.Нажмите кнопку остановки в левом верхнем углу диалогового окна мастера измерений и установите размер шага равным двум микрометрам. Выберите ось python в качестве первого осевого устройства в диалоговом окне мастера измерений и выберите Не активировать режим автосохранения. Затем установите флажок автосохранения только на оси времени.Затем нажмите значок Python в окне доступных устройств, чтобы открыть диалоговое окно Python. В настройках оси диалогового окна Python введите разделы «От» и «До», затем введите количество шагов. Перейдите в диалоговое окно XYZ stage Z и увеличьте диапазон сканирования на 200 микрометров с обоих концов.Для этого введите 200 микрометров в начале и введите минус 240 микрометров в конце, и диапазон будет автоматически установлен как минус 440 микрометров. Откройте интерфейсный диалог VivoFollow. Начните получение изображения, нажав зеленую стрелку в верхнем левом углу диалогового окна мастера измерений.Если используется коррекция дрейфа в реальном времени, найдите диалоговое окно для настройки коррекции дрейфа. Затем установите канал захвата, используемый как в мобильной ориентировке. Введите максимальное смещение поправки в микрометрах, добавленное к первой и последней позициям Z, и нажмите кнопку «ОК». Отслеживайте текущее смещение дрейфа в X, Y и Z в режиме реального времени во время получения изображения во внешнем диалоговом окне vivo flow и останавливайте получение изображений через 35 минут, когда требуется еще один цикл повторной инъекции анестезии.Введите половину дозы смеси MMF и возобновите получение изображений до завершения эксперимента. Этот инструмент позволяет получать изображения в течение длительного времени, обеспечивает сбор высококачественных данных и подходит для отслеживания ячеек для измерения скорости. Как показано без коррекции дрейфа, интересующая область постепенно отдаляется от вида записи, влияя на возможность отслеживания ячеек для анализа скорости.Тем не менее, стабильные видеоролики могут быть записаны с помощью программного обеспечения для коррекции дрейфа, и в течение длительного периода можно отслеживать больше ячеек. Программное обеспечение для коррекции дрейфа также может обеспечить визуализацию смещений X, Y и Z с течением времени, которые были скорректированы системой. Многофотонная микроскопия обеспечивает высокое пространственно-временное разрешение для отслеживания лейкоцитов, при котором можно отслеживать и контролировать этапы и скорость миграции клеток.Подготавливая коллатеральные сосуды к многофотонной визуализации, важно избежать повреждения коллатеральных артерий. Перед визуализацией важно безопасно определить правильную коллатеральную артерию. С помощью этой новой процедуры прижизненной многофотонной визуализации коллатеральных артерий можно анализировать адгезию и экстравазацию всех клеток крови in vivo путем изменения метки антитела.

Research

JoVE Journal

Medicine

A Murine Model of Stent Implantation in the Carotid Artery for the Study of Restenosis

Мышиной модели имплантации стента в сонной артерии по изучению рестеноза

Despite  the considerable progress made in the stent development in the last decades,  cardiovascular diseases remain the main cause of death in western ...

An Orthotopic Glioblastoma Mouse Model Maintaining Brain Parenchymal Physical Constraints and Suitable for Intravital Two-photon Microscopy

Ортотопическая Глиобластома мышь Модель Поддержание Мозг паренхимы физических ограничений и подходит для прижизненной Двухфотонное микроскопии

Glioblastoma multiforme (GBM) is the most aggressive form of brain tumors with no curative treatments available to date.
Murine models of this pathology ...

Sequential In vivo Imaging of Osteogenic Stem/Progenitor Cells During Fracture Repair

Sequential In vivo Imaging of Osteogenic Stem/Progenitor Cells During Fracture Repair

Последовательный<em&gt; В естественных условиях</em&gt; Визуализация остеогенные стволовых / клеток-предшественников во время разрушения Ремонт

Bone turns over continuously and is highly regenerative following injury. Osteogenic stem/progenitor cells have long been hypothesized to exist, but in ...

Evaluation of Tumor-infiltrating Leukocyte Subsets in a Subcutaneous Tumor Model

Оценка опухоли инфильтрирующие лейкоцитов подмножеств в подкожной опухоли модели

Specialized immune cells that infiltrate the tumor microenvironment regulate the growth and survival of neoplasia.&#160; Malignant cells must elude or ...

Methods for Acute and Subacute Murine Hindlimb Ischemia

Методы острой и подострой мышиной ишемии задней конечности

Peripheral artery disease (PAD) is a leading cause of cardiovascular morbidity and mortality in developed countries, and animal models that reliably ...

Combined Intravital Microscopy and Contrast-enhanced Ultrasonography of the Mouse Hindlimb to Study Insulin-induced Vasodilation and Muscle Perfusion

Комбинированный прижизненной микроскопии и повысить контрастность УЗИ задних конечностей мыши для изучения инсулин индуцированной вазодилатацию и мышечная перфузия

It has been demonstrated that insulin's vascular actions contribute to regulation of insulin sensitivity. Insulin's effects on muscle perfusion regulate ...

Inducing Ischemia-reperfusion Injury in the Mouse Ear Skin for Intravital Multiphoton Imaging of Immune Responses

Наводить Ишемия-реперфузионного повреждения в слуховом коже мышей прижизненной многофотонной визуализации иммунных реакций

Ischemia-reperfusion injury (IRI) occurs when there is transient hypoxia due to the obstruction of blood flow (ischemia) followed by a subsequent ...

Quantitative Visualization of Leukocyte Infiltrate in a Murine Model of Fulminant Myocarditis by Light Sheet Microscopy

Количественная визуализация инфильтрата лейкоцитов в мышиной модели фульминантного миокардита методом микроскопии легких листов

Light-sheet fluorescence microscopy (LSFM), in combination with chemical clearing protocols, has become the gold standard for analyzing fluorescently ...

Intravital Microscopy of Monocyte Homing and Tumor-Related Angiogenesis in a Murine Model of Peripheral Arterial Disease

Прижизненной микроскопии Моноцит самонаведения и связанных с опухоли ангиогенеза в мышиных модели болезнь периферических артерий

The therapeutic goal for peripheral arterial disease and ischemic heart disease is to increase blood flow to ischemic areas caused by hemodynamic ...

Assessing Therapeutic Angiogenesis in a Murine Model of Hindlimb Ischemia

Оценка терапевтического ангиогенеза в модели Murine Hindlimb Ischemia

Critical limb ischemia (CLI) is a serious condition that entails a high risk of lower limb amputation. Despite revascularization being the gold-standard ...