Name: left lung orthotopic transplantation in a juvenile porcine model for eslp
Uploaded: 2022-02-14T13:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Left Lung Orthotopic Transplantation in a Juvenile Porcine Model for ESLP at JoVE.com

Dit onderzoek wordt gefinancierd in opdracht van de Stichting Academisch Ziekenhuis.

Alle procedures werden uitgevoerd in overeenstemming met de richtlijnen van de Canadian Council on Animal Care en de gids voor de verzorging en het gebruik van proefdieren. De protocollen zijn goedgekeurd door de institutionele dierenverzorgingscommissie van de Universiteit van Alberta. Dit protocol is toegepast bij vrouwelijke juveniele Yorkshire-varkens tussen 35-50 kg. Varkens zijn pathogeenvrije, voedselveilige exemplaren. Ze worden gekocht bij het Swine Research and Technology Centre in Edmonton, AB, Canada (https:/...

<ol>
	<li>Chambers, D. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+international+thoracic+organ+transplant+registry+of+the+international+society+for+heart+and+lung+transplantation:+Thirty-fifth+adult+lung+and+heart-lung+transplant+report-2018;+focus+theme:+Multiorgan+transplantation.">The international thoracic organ transplant registry of the international society for heart and lung transplantation: Thirty-fifth adult lung and heart-lung transplant report-2018; focus theme: Multiorgan transplantation.</a> The Journal of Heart and Lung Transplantation: The Official Publication of the International Society for Heart Transplantation. 37 (10), 1169-1183 (2018).</li><li>Valapour, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=OPTN/SRTR+2017+annual+data+report:+Lung.">OPTN/SRTR 2017 annual data report: Lung.</a> American Journal of Transplantation: Official Journal of the American Society of Transplantation and the American Society of Transplant Surgeons. 19, 404-484 (2019).</li><li>Klein, A. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Organ+donation+and+utilization+in+the+united+states,+1999-2008.">Organ donation and utilization in the united states, 1999-2008.</a> American Journal of Transplantation: Official Journal of the American Society of Transplantation and the American Society of Transplant Surgeons. 10 (4), 973-986 (2010).</li><li>Kotecha, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Continued+successful+evolution+of+extended+criteria+donor+lungs+for+transplantation.">Continued successful evolution of extended criteria donor lungs for transplantation.</a> The Annals of Thoracic Surgery. 104 (5), 1702-1709 (2017).</li><li>Singh, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sequence+of+refusals+for+donor+quality,+organ+utilization,+and+survival+after+lung+transplantation.">Sequence of refusals for donor quality, organ utilization, and survival after lung transplantation.</a> The Journal of Heart and Lung Transplantation. 38 (1), 35-42 (2019).</li><li>Cypel, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Normothermic+ex+vivo+lung+perfusion+in+clinical+lung+transplantation.">Normothermic ex vivo lung perfusion in clinical lung transplantation.</a> The New England Journal of Medicine. 364 (15), 1431-1440 (2011).</li><li>Wallinder, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Early+results+in+transplantation+of+initially+rejected+donor+lungs+after+ex+vivo+lung+perfusion:+A+case-control+study.">Early results in transplantation of initially rejected donor lungs after ex vivo lung perfusion: A case-control study.</a> European Journal of Cardio-Thoracic Surgery: Official Journal of the European Association for Cardio-Thoracic Surgery. 45 (1), 40-44 (2014).</li><li>Sage, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lung+transplantation+from+initially+rejected+donors+after+ex+vivo+lung+reconditioning:+The+french+experience.">Lung transplantation from initially rejected donors after ex vivo lung reconditioning: The french experience.</a> European Journal of Cardio-Thoracic Surgery: Official Journal of the European Association for Cardio-Thoracic Surgery. 46 (5), 794-799 (2014).</li><li>Valenza, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Extracorporeal+lung+perfusion+and+ventilation+to+improve+donor+lung+function+and+increase+the+number+of+organs+available+for+transplantation.">Extracorporeal lung perfusion and ventilation to improve donor lung function and increase the number of organs available for transplantation.</a> Transplantation Proceedings. 44 (7), 1826-1829 (2012).</li><li>Fildes, J. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Clinical+outcome+of+patients+transplanted+with+marginal+donor+lungs+via+ex+vivo+lung+perfusion+compared+to+standard+lung+transplantation.">Clinical outcome of patients transplanted with marginal donor lungs via ex vivo lung perfusion compared to standard lung transplantation.</a> Transplantation. 99 (5), 1078-1083 (2015).</li><li>Cypel, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experience+with+the+first+50+ex+vivo+lung+perfusions+in+clinical+transplantation.">Experience with the first 50 ex vivo lung perfusions in clinical transplantation.</a> The Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 144 (5), 1200-1206 (2012).</li><li>Clark, S. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+porcine+model+of+reperfusion+injury+after+lung+transplantation.">A new porcine model of reperfusion injury after lung transplantation.</a> Laboratory Animals. 33, 135-142 (1999).</li><li>Karimi, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Technical+pearls+for+swine+lung+transplantation.">Technical pearls for swine lung transplantation.</a> Journal of Surgical Research. 171, 107-111 (2011).</li><li>Kruger, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Porcine+pulmonary+auto-transplantation+for+ex+vivo+therapy+as+a+model+for+new+treatment+strategies.">Porcine pulmonary auto-transplantation for ex vivo therapy as a model for new treatment strategies.</a> Interactive CardioVascular and Thoracic Surgery. 23, 358-366 (2016).</li><li>Mariscal, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pig+lung+transplant+survival+model.">Pig lung transplant survival model.</a> Nature Protocols. 13, 1814-1828 (2018).</li><li>Aboelnazar, N. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Negative+pressure+ventilation+decreases+inflammation+and+lung+edema+during+normothermic+ex+vivo+lung+perfusion.">Negative pressure ventilation decreases inflammation and lung edema during normothermic ex vivo lung perfusion.</a> The Journal of Heart and Lung Transplantation: The Official Publication of the International Society for Heart Transplantation. 37 (4), 520-530 (2018).</li></ol>

Dit protocol omvat verschillende kritieke chirurgische stappen en probleemoplossing is nodig om een succesvolle transplantatie en longbeoordeling te garanderen. Juveniele varkenslongen zijn ongelooflijk delicaat in vergelijking met volwassen menselijke longen, dus de opererende chirurg moet voorzichtig zijn bij het hanteren van varkenslongen. Dit is met name het geval na een 12 uur durende ESLP-run, omdat het orgaan vloeistofvolume heeft aangenomen en vatbaar is voor letsel door overmatige manipulatie. Elke overmatige dr...

Longtransplantatie is de meest voorkomende langetermijnbehandeling voor longziekte in het eindstadium. Jaarlijks worden wereldwijd meer dan 4.600 longtransplantaties uitgevoerd1. Longtransplantatie heeft momenteel echter aanzienlijke beperkingen. Ten eerste blijft de behoefte aan organen de beschikbare donoren overschaduwen. Ondanks het feit dat het aantal longtransplantaties sinds 2012 elk jaar is gestegen als gevolg van de gecombineerde effecten van meer kandidaten die op de lijst voor transplantatie staan, een toename van het aantal donoren en een verbeterd gebruik van herstelde organen, is de sterfte op de wachtlijst voor transplantaties niet significant gedaald2. Zorgen over de orgaankwaliteit vormen een andere belangrijke beperking, met gerapporteerde orgaanbezettingspercentages van slechts 20%-30%3,4,5. Ten slotte zijn de trends in de postoperatieve resultaten van longtransplantatie niet bevredigend, waarbij de langetermijnresultaten van transplantaten en patiënten nog steeds achterblijven bij die van andere solide orgaantransplantaties.
Een opkomende technologie, ex situ longperfusie (ESLP), heeft het potentieel om deze beperkingen te verminderen. ESLP wordt in toenemende mate toegepast als een methode om marginale donorlongen te beoordelen en te herstellen en heeft aanvaardbare korte- en langetermijnresultaten aangetoond na transplantatie van donorlongen met uitgebreide criteria (ECD) 6,7,8,9,10. Bijgevolg heeft ESLP de bezettingsgraad in sommige centra met 15%-20% verhoogd6,7,8,9,10,11.
Goed ESLP-onderzoek vereist de in vivo validatie van in-vitrobevindingen; er is echter beperkte literatuur over longtransplantatiemodellen bij varkens voor ESLP12,13,14,15. Bovendien biedt de beschikbare literatuur onvoldoende details over de anesthesiebehandeling van Yorkshire-varkens voor longtransplantatie, die hemodynamisch zeer onstabiel kan zijn12,13,14,15. Het opzetten van een gemakkelijk reproduceerbaar model zou de in vivo validatie van de huidige ESLP-strategieën en de preklinische evaluatie van verschillende interventies om longischemie-reperfusieschade te verminderen, mogelijk maken. Het doel van de huidige studie is het beschrijven van een varkensmodel van orthotope allotransplantatie van de linkerlong voor gebruik met ESLP. Het protocol bevat beschrijvingen van de anesthesie- en chirurgische technieken, een aangepaste chirurgische checklist en details over de ervaring met het oplossen van problemen en protocolwijzigingen. De beperkingen en voordelen van het varkenstransplantatiemodel van de linkerlong zijn ook in dit werk besproken. Dit manuscript schetst niet het ophaalproces van varkenslongen bij Yorkshire-varkens van 35-50 kg, noch behandelt het de oprichting en beëindiging van ESLP. Dit protocol heeft uitsluitend betrekking op de transplantatie van de ontvanger.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>ABL 800 FLEX Blood Gas Analyzer</td>
			<td>Radiometer</td>
			<td>989-963</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Adult-Pediatric Electrostatic Filter HME - Small</td>
			<td>Covidien</td>
			<td>352/5877</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Allison Lung Retractor</td>
			<td>Pilling</td>
			<td>341679</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Arterial Filter</td>
			<td>SORIN GROUP</td>
			<td>01706/03</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Backhaus Towel Clamp</td>
			<td>Pilling</td>
			<td>454300</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bovine Serum Albumin</td>
			<td>MP biomedicals</td>
			<td>218057791</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Biomedicus Pump</td>
			<td>Maquet</td>
			<td>BPX-80</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bronchoscope</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cable Ties &#8211; White 12&#8221;</td>
			<td>HUASU International</td>
			<td>HS4830001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Calcium Chloride</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>C69-500G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cooley Sternal Retractor</td>
			<td>Pilling</td>
			<td>341162</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CUSHING Gutschdressing Forceps</td>
			<td>Pilling</td>
			<td>466200</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Debakey-Metzenbaum Dissecting</td>
			<td>Pilling</td>
			<td>342202</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scissors</td>
			<td>Pilling</td>
			<td>342202</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DeBakey Peripheral Vascular Clamp</td>
			<td>Pilling</td>
			<td>353535</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Debakey Straight Vascular Tissue Forceps</td>
			<td>Pilling</td>
			<td>351808</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>D-glucose</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>G5767-500G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Drop sucker</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Endotracheal Tube 9.0mm CUFD</td>
			<td>Mallinckrodt</td>
			<td>9590E</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Flow Transducer</td>
			<td>BIO-PROBE</td>
			<td>TX 40</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Infusion Pump</td>
			<td>Baxter</td>
			<td>AS50</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Inspire 7 M Hollow Fiber Membrane Oxygenator</td>
			<td>SORIN GROUP</td>
			<td>K190690</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Intercept Tubing Connector 3/8&#34; x 1/2&#34;</td>
			<td>Medtronic</td>
			<td>6013</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Intercept Tubing 1/4&#34; x 1/16&#34; x 8&#39;</td>
			<td>Medtronic</td>
			<td>3108</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Intercept Tubing 3/8&#34; x 3/32&#34; x 6&#39;</td>
			<td>Medtronic</td>
			<td>3506</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Laryngoscope</td>
			<td>N/A</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Custom-made with 10-inch blade</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Metzenbaum Dissecting Scissors</td>
			<td>Pilling</td>
			<td>460420</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medical Carbon Dioxide Tank</td>
			<td>Praxair</td>
			<td>5823115</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medical Oxygen Tank</td>
			<td>Praxair</td>
			<td>2014408</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medical Nitrogen Tank</td>
			<td>Praxair</td>
			<td>NI M-K</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mosquito Clamp</td>
			<td>Pilling</td>
			<td>181816</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Harken Auricle Clamp</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Organ Chamber</td>
			<td>Tevosol</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PlasmaLyte A</td>
			<td>Baxter</td>
			<td>TB2544</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Poole Suction Tube</td>
			<td>Pilling</td>
			<td>162212</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Potassium Phosphate</td>
			<td>Fischer Scientific</td>
			<td>P285-500G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PERFADEX Plus</td>
			<td>XVIVO</td>
			<td>19811</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Satinsky Clamp</td>
			<td>Pilling</td>
			<td>354002</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scale</td>
			<td>TANITA</td>
			<td>KD4063611</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Silicon Support Membrane</td>
			<td>Tevosol</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium Bicarbonate</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>792519-1KG</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium Chloride 0.9%</td>
			<td>Baxter</td>
			<td>JB1324</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sorin XTRA Cell Saver</td>
			<td>SORIN GROUP</td>
			<td>75221</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sternal Saw</td>
			<td>Stryker</td>
			<td>6207</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical Electrocautery Device</td>
			<td>Kls Martin</td>
			<td>ME411</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TruWave Pressure Transducer</td>
			<td>Edwards</td>
			<td>VSYPX272</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Two-Lumen Central Venous Catheter 7fr X2</td>
			<td>Arrowg+ard</td>
			<td>CS-12702-E</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vorse Tubing Clamp</td>
			<td>Pilling</td>
			<td>351377</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Willauer-Deaver Retractor</td>
			<td>Pilling</td>
			<td>341720</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Yankauer Suction Tube</td>
			<td>Pilling</td>
			<td>162300</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>0 ETHIBOND Green 1X36&#34; Endo Loop 0</td>
			<td>ETHICON</td>
			<td>D8573</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>0 PDS II CP-1 2x27&#8221;</td>
			<td>ETHICON</td>
			<td>Z467H</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1 VICRYL MO-4 1x18&#8221;</td>
			<td>ETHICON</td>
			<td>J702D</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2-0 SILK Black 12&#34; x 18&#34; Strands</td>
			<td>ETHICON</td>
			<td>SA77G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4-0 PROLENE Blue TF 1x24&#8221;</td>
			<td>ETHICON</td>
			<td>8204H</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>6-0 PROLENE Blue BV 2x30&#8221;</td>
			<td>ETHICON</td>
			<td>M8776</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>21-Gauge Needle</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

left lung orthotopic transplantation in a juvenile porcine model for eslp

Longtransplantatie is de gouden standaardbehandeling voor longziekte in het eindstadium, met jaarlijks meer dan 4.600 longtransplantaties die wereldwijd worden uitgevoerd. Longtransplantatie wordt echter beperkt door een tekort aan beschikbare donororganen. Als zodanig is er een hoge sterfte op de wachtlijst. Ex situ longperfusie (ESLP) heeft de bezettingsgraad van donorlongen in sommige centra met 15%-20% verhoogd. ESLP is toegepast als een methode om marginale donorlongen te beoordelen en te reconditioneren en heeft aanvaardbare korte- en langetermijnresultaten aangetoond na transplantatie van donorlongen met uitgebreide criteria (ECD). Transplantatiemodellen voor grote dieren (in vivo) zijn nodig om lopende in vitro onderzoeksresultaten te valideren. Anatomische en fysiologische verschillen tussen mensen en varkens vormen aanzienlijke technische en esthetische uitdagingen. Een gemakkelijk reproduceerbaar transplantatiemodel zou de in vivo validatie van de huidige ESLP-strategieën en de preklinische evaluatie van verschillende interventies die zijn ontworpen om de longfunctie van de donor te verbeteren, mogelijk maken. Dit protocol beschrijft een varkensmodel van orthotope allotransplantatie van de linkerlong. Dit omvat anesthesie- en chirurgische technieken, een op maat gemaakte chirurgische checklist, probleemoplossing, aanpassingen en de voordelen en beperkingen van de aanpak.

Alle resultaten zijn in de context van 4 uur reperfusie na 12 uur NPV-ESLP16. Tijdens longexplantatie zijn er verschillende klinische uitkomsten waarop moet worden geanticipeerd (Figuur 3). Doorgaans blijft het varken hemodynamisch stabiel na een succesvolle explantatie van de linkerlong, maar kan een infusie met een lage dosis fenylefrine (dosisbereik: 2-10 mg/uur) nodig zijn vanwege een vaatverwijdende reactie op een operatie. De hartslag moet ongeveer 100-120 slage...

Watch this Scientific Journal Video about Left Lung Orthotopic Transplantation in a Juvenile Porcine Model for ESLP at JoVE.com

Left Lung Orthotopic Transplantation in a Juvenile Porcine Model for ESLP

Dit protocol beschrijft een juveniel varkensmodel van orthotope allotransplantatie van de linkerlong, ontworpen voor gebruik met ESLP-onderzoek. De nadruk ligt op anesthesie- en chirurgische technieken, maar ook op kritieke stappen en het oplossen van problemen.

Orthotope transplantatie van de linkerlong in een juveniel varkensmodel voor ESLP

Lung transplantation is the gold-standard treatment for end-stage lung disease, with over 4,600 lung transplantations performed worldwide annually. ...

Dit protocol is een van de meest eenvoudige longtransplantatieprotocollen voor grote diermodellen en biedt de meeste details op het gebied van chirurgische behandeling. De belangrijkste voordelen van deze techniek zijn het beschrijven van de operatie, het beoordelen van de geïsoleerde linkerlongfunctie na transplantatie en het stabiliseren van het varken tijdens de operatie. De methode is nuttig in ex-situ longprofusieonderzoek om ex-situ bevindingen te valideren met een in vivo reperfusietransplantatiemodel.Het in vivo reperfusiemodel van longtransplantatie is gunstig voor het testen van ex-situ longprofusiebevindingen en kan ook worden gebruikt bij het testen van kunstmatige organen, zoals bio-engineered of mechanische longen. Begin met het plaatsen van het varken in een rechter laterale decubituspositie voor de linker anterieure laterale thoracotomie. Identificeer vervolgens de punt van het linkerschouderblad in het xiphoid-proces, inferieur aan het borstbeen met palpatie, en verbind de twee geïdentificeerde plekken om de 20 centimeter lange incisieplaats van de thoracotomie te markeren.Gebruik na het induceren van de anesthesie een scalpel om een incisie in de huid te maken en gebruik vervolgens elektrocauterisatie om de onderhuidse lagen en spierlagen van het dier te ontleden. De latissimus dorsi moet worden verdeeld. Na het identificeren van de rib direct onder de incisie, schroeit u bovenop de rib om de tussenribspieren bloot te leggen en vermijdt u de intercostale neurovasculaire bundel.Gebruik een muggenhemostaat om de tussenribspieren direct boven de rib te doorboren en voel vervolgens met een vinger in de borst voor verklevingen. Terwijl de bovenrand van de rib wordt dichtgeschroeid, duwt u de long weg met behulp van een Yankauer-afzuiging om de thoracotomie naar voren uit te breiden tot een centimeter verwijderd van het borstbeen en naar achteren naar de paraspinale spieren. Door een Cooley-sternale retractor in te brengen, opent u de thoracotomie 10 centimeter breed om de long terug te trekken en de linker hemiazygos-ader bloot te leggen.Gebruik een Metzenbaum-schaar en een fijne onderschaar om de linker hemiazygos-ader omtrek te ontleden. Door het vat met zijden banden te omcirkelen, maakt u de ader los en doorsnijdt u deze. Ontleed de linker longslagader, of PA, en de linker longaders, of PV, voordat u de aderen in de zijden banden omringt.Na vijf minuten heparinetoediening klemt u de PA vast met een DeBakey-kruisklem, de linker voorste PV met een Satinsky-klem en de linker bronchus met de Spoon Pots-klem. Doorsnijd de PA, de linker inferieure PV en de linker bronchus en laat ten minste 0,5 centimeter weefselmanchet achter. Na het verdelen van het linker inferieure longligament, verwijdert u de linkerlong.Breng voor transplantatie de donorlong in de borst van de ontvanger in, te beginnen met de onderste kwab zonder de long op zijn plaats te forceren. Voer vervolgens de bronchiale anastomose uit met behulp van een 4.0 Prolene-hechting op een TF-naald. Om de bronchiale anastomose bij zuigsecreties te beoordelen, voert u een bronchoscopie van de linker- en rechterlong uit door een bronchoscoop in de endotracheale tube te steken met behulp van een adapterverbinding, en sluit u vervolgens de scoop aan op de afzuiging voordat u de bronchoscoop in de linker bronchus brengt.Observeer de longademhaling en inspecteer de vitale functies bij bronchiale anastomose. Herhaal het proces aan de rechterkant. Gebruik vervolgens een 6.0 Prolene-hechting op BV-1-naalden om end-to-end linkeratrium- of LA-anastomose uit te voeren, gevolgd door het trimmen van overtollig weefsel.Nadat u de donor-SVP's hebt opgenomen in de inferieure PV- en LA-anastomose, voltooit u de PA-anastomose met een 6.0 Prolene-hechting op BV-1-naalden met behulp van een lopende end-to-end anastomose. Bevestig later de heparinisatie en dien een kaliumverschuiving toe aan het dier. Open vervolgens de PA-klem gedeeltelijk om te ontluchten en laat het bloed door de hechtlijn stromen.Laat vervolgens de LA-klem los en laat de hechtdraad terug ontluchten om eventuele ingesloten lucht verder te laten ontsnappen. Bind de LA vast en verwijder vervolgens de PA-klem volledig. Als u klaar bent, verwijdert u de bronchiale klem en verhoogt u de teugvolumes tot 10 milliliter per kilogram.Na het inbrengen van een 20 Franse kneedbare thoracotoomie, sluit u de thoracotomie in drie lagen. Open met een Metzenbaum-schaar het linkerborstvlies om bloedmonsters te nemen uit de linker onderkwab. Open het rechter borstvlies om de rechter longslagader te ontleden.Plaats vervolgens een klem om de perfusie van de rechterlong te stoppen. Richt een naald van 21 gauge naar de linker longaderen en weg van het gemeenschappelijke linkeratrium om een bloedmonster te nemen van de LA-anastomose om de linkerlongfunctie te beoordelen. Neem na het vastklemmen de bloedmonsters van de linker PV-anastomose met een naald van 21 gauge gericht op de linkerlong.De representatieve analyse wijst op typische veranderingen in de PF-ratio en oedeemvorming tijdens het longtransplantatieprotocol. Bij de reperfusie daalden de PF-ratio's met ongeveer 100 millimeter kwik omdat de linkerlong niet onmiddellijk effectief was bij oxygenatie. Bij geïsoleerde beoordeling van de linkerlong na vier uur was de PF-ratio stabiel.Bij een succesvolle transplantatie kan de linkerlong ongeveer 20% tot 50% gewichtstoename ervaren als gevolg van restbloed in de bloedsomloop. Na 12 uur na de linkerlongtransplantatie werd de bloedgasanalyse uitgevoerd. Er werd waargenomen dat het kaliumgehalte verhoogd was gedurende 60 tot 120 minuten reperfusie.Tijdens vier uur durende reperfusie waren ongeveer twee tot vier ploegen nodig om het kalium onder de vijf millimol per liter te houden. In plaats van de superieure longaderen van de ontvanger te hechten, kunnen de zijbijtklemmen worden gebruikt voor vasculaire controle en kunnen de bloedvaten gemakkelijk worden overgenaaid.

Research

JoVE Journal

Medicine

Development of Obliterative Bronchiolitis in a Murine Model of Orthotopic Lung Transplantation

Ontwikkeling van Bronchiolitis obliterans in een muizenmodel van orthotope longtransplantatie

Orthotopic lung transplantation in rats was first reported by Asimacopoulos and colleagues in 1971 1. Currently, this method is well accepted and ...

Orthotopic Small Bowel Transplantation in Rats

Orthotope dunne darm bij ratten

Small  bowel transplantation has become an accepted clinical option for patients with  short gut syndrome and failure of parenteral nutrition ...

Orthotopic Liver Transplantation in Rats

Orthotope levertransplantatie bij ratten

Clinical progress in the field of liver transplantation has been largely supported by animal models1,2. Since the publication of the first orthotopic rat ...

Surgical Procedures for a Rat Model of Partial Orthotopic Liver Transplantation with Hepatic Arterial Reconstruction

Chirurgische ingrepen voor een Rat Model van deelspoelen orthotope levertransplantatie met hepatische arteriële reconstructie

Orthotopic liver transplantation (OLT) in rats using a whole or partial graft is an indispensable experimental model for transplantation research, such as ...

A Murine Model of Myocardial Ischemia-reperfusion Injury through Ligation of the Left Anterior Descending Artery

Een muizenmodel van myocard ischemie-reperfusie schade door de eileiders van de LAD

Acute or chronic myocardial infarction (MI) are cardiovascular events resulting in high morbidity and mortality. Establishing the pathological mechanisms ...

Technique of Porcine Liver Procurement and Orthotopic Transplantation using an Active Porto-Caval Shunt

Techniek van varkenslever Procurement en Orthotope transplantatie met behulp van een actieve Porto-Caval Shunt

The success of liver transplantation has resulted in a dramatic organ shortage. Each year, a considerable number of patients on the liver transplantation ...

Method of Isolated Ex Vivo Lung Perfusion in a Rat Model: Lessons Learned from Developing a Rat EVLP Program

Method of Isolated Ex Vivo Lung Perfusion in a Rat Model: Lessons Learned from Developing a Rat EVLP Program

WERKWIJZE Geïsoleerde<em&gt; Ex Vivo</em&gt; Longperfusie in een Rat Model: Lessen uit het ontwikkelen van een Rat EVLP Program

The number of acceptable donor lungs available for lung transplantation is severely limited due to poor quality. Ex-Vivo Lung Perfusion (EVLP) has allowed ...

Orthotopic Hind Limb Transplantation in the Mouse

Orthotope Hind Limb Transplantation in de muis

In vivo animal model systems, and in particular mouse models, have evolved into powerful and versatile scientific tools indispensable to basic and ...

A Pre-Clinical Porcine Model of Orthotopic Heart Transplantation

Een preklinisch varkens model van Orthotopic harttransplantatie

Fifty-years following the first successful report, cardiac transplantation remains the gold-standard treatment for eligible patients with advanced heart ...

Reduced Complications after Arterial Reconnection in a Rat Model of Orthotopic Liver Transplantation

Verminderde complicaties na arteriële heraansluiting in een ratmodel van orthotopische levertransplantatie

The rat orthotopic liver transplantation (OLT) model is a powerful tool to study acute and chronic rejection. However, it is not a complete representation ...