Name: left lung orthotopic transplantation in a juvenile porcine model for eslp
Uploaded: 2022-02-14T13:30:00
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Cette recherche est financée pour le compte de la Fondation Hospitalo-Universitaire.

Toutes les procédures ont été effectuées conformément aux lignes directrices du Conseil canadien de protection des animaux et au guide sur le soin et l’utilisation des animaux de laboratoire. Les protocoles ont été approuvés par le comité institutionnel de protection des animaux de l’Université de l’Alberta. Ce protocole a été appliqué chez des porcs Yorkshire juvéniles femelles pesant entre 35 et 50 kg. Les porcs sont des spécimens de qualité alimentaire exempts d’agents pathogènes. Ils sont ach...

<ol>
	<li>Chambers, D. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+international+thoracic+organ+transplant+registry+of+the+international+society+for+heart+and+lung+transplantation:+Thirty-fifth+adult+lung+and+heart-lung+transplant+report-2018;+focus+theme:+Multiorgan+transplantation.">The international thoracic organ transplant registry of the international society for heart and lung transplantation: Thirty-fifth adult lung and heart-lung transplant report-2018; focus theme: Multiorgan transplantation.</a> The Journal of Heart and Lung Transplantation: The Official Publication of the International Society for Heart Transplantation. 37 (10), 1169-1183 (2018).</li><li>Valapour, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=OPTN/SRTR+2017+annual+data+report:+Lung.">OPTN/SRTR 2017 annual data report: Lung.</a> American Journal of Transplantation: Official Journal of the American Society of Transplantation and the American Society of Transplant Surgeons. 19, 404-484 (2019).</li><li>Klein, A. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Organ+donation+and+utilization+in+the+united+states,+1999-2008.">Organ donation and utilization in the united states, 1999-2008.</a> American Journal of Transplantation: Official Journal of the American Society of Transplantation and the American Society of Transplant Surgeons. 10 (4), 973-986 (2010).</li><li>Kotecha, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Continued+successful+evolution+of+extended+criteria+donor+lungs+for+transplantation.">Continued successful evolution of extended criteria donor lungs for transplantation.</a> The Annals of Thoracic Surgery. 104 (5), 1702-1709 (2017).</li><li>Singh, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sequence+of+refusals+for+donor+quality,+organ+utilization,+and+survival+after+lung+transplantation.">Sequence of refusals for donor quality, organ utilization, and survival after lung transplantation.</a> The Journal of Heart and Lung Transplantation. 38 (1), 35-42 (2019).</li><li>Cypel, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Normothermic+ex+vivo+lung+perfusion+in+clinical+lung+transplantation.">Normothermic ex vivo lung perfusion in clinical lung transplantation.</a> The New England Journal of Medicine. 364 (15), 1431-1440 (2011).</li><li>Wallinder, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Early+results+in+transplantation+of+initially+rejected+donor+lungs+after+ex+vivo+lung+perfusion:+A+case-control+study.">Early results in transplantation of initially rejected donor lungs after ex vivo lung perfusion: A case-control study.</a> European Journal of Cardio-Thoracic Surgery: Official Journal of the European Association for Cardio-Thoracic Surgery. 45 (1), 40-44 (2014).</li><li>Sage, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lung+transplantation+from+initially+rejected+donors+after+ex+vivo+lung+reconditioning:+The+french+experience.">Lung transplantation from initially rejected donors after ex vivo lung reconditioning: The french experience.</a> European Journal of Cardio-Thoracic Surgery: Official Journal of the European Association for Cardio-Thoracic Surgery. 46 (5), 794-799 (2014).</li><li>Valenza, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Extracorporeal+lung+perfusion+and+ventilation+to+improve+donor+lung+function+and+increase+the+number+of+organs+available+for+transplantation.">Extracorporeal lung perfusion and ventilation to improve donor lung function and increase the number of organs available for transplantation.</a> Transplantation Proceedings. 44 (7), 1826-1829 (2012).</li><li>Fildes, J. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Clinical+outcome+of+patients+transplanted+with+marginal+donor+lungs+via+ex+vivo+lung+perfusion+compared+to+standard+lung+transplantation.">Clinical outcome of patients transplanted with marginal donor lungs via ex vivo lung perfusion compared to standard lung transplantation.</a> Transplantation. 99 (5), 1078-1083 (2015).</li><li>Cypel, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experience+with+the+first+50+ex+vivo+lung+perfusions+in+clinical+transplantation.">Experience with the first 50 ex vivo lung perfusions in clinical transplantation.</a> The Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 144 (5), 1200-1206 (2012).</li><li>Clark, S. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+porcine+model+of+reperfusion+injury+after+lung+transplantation.">A new porcine model of reperfusion injury after lung transplantation.</a> Laboratory Animals. 33, 135-142 (1999).</li><li>Karimi, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Technical+pearls+for+swine+lung+transplantation.">Technical pearls for swine lung transplantation.</a> Journal of Surgical Research. 171, 107-111 (2011).</li><li>Kruger, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Porcine+pulmonary+auto-transplantation+for+ex+vivo+therapy+as+a+model+for+new+treatment+strategies.">Porcine pulmonary auto-transplantation for ex vivo therapy as a model for new treatment strategies.</a> Interactive CardioVascular and Thoracic Surgery. 23, 358-366 (2016).</li><li>Mariscal, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pig+lung+transplant+survival+model.">Pig lung transplant survival model.</a> Nature Protocols. 13, 1814-1828 (2018).</li><li>Aboelnazar, N. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Negative+pressure+ventilation+decreases+inflammation+and+lung+edema+during+normothermic+ex+vivo+lung+perfusion.">Negative pressure ventilation decreases inflammation and lung edema during normothermic ex vivo lung perfusion.</a> The Journal of Heart and Lung Transplantation: The Official Publication of the International Society for Heart Transplantation. 37 (4), 520-530 (2018).</li></ol>

Plusieurs étapes chirurgicales critiques sont impliquées dans ce protocole, et un dépannage est nécessaire pour assurer le succès de la transplantation et de l’évaluation pulmonaire. Les poumons porcins juvéniles sont incroyablement délicats par rapport aux poumons humains adultes, de sorte que le chirurgien opératoire doit être prudent lorsqu’il manipule des poumons porcins. Cela est particulièrement vrai après un cycle de 12 heures d’ESLP, car l’organe aura pris du volume de liquide et sera suscepti...

La transplantation pulmonaire est le traitement prééminent à long terme de la maladie pulmonaire terminale. Plus de 4 600 transplantations pulmonaires sont effectuées chaque année dans le monde1. Cependant, la transplantation pulmonaire présente actuellement des limites importantes. D’une part, le besoin d’organes continue d’éclipser les donneurs disponibles. Bien que les taux de transplantation pulmonaire augmentent chaque année depuis 2012 en raison des effets combinés d’un plus grand nombre de candidats inscrits sur la liste des transplantations, d’une augmentation du nombre de donneurs et d’une meilleure utilisation des organes récupérés, la mortalité sur les listes d’attente pour transplantation n’a pas diminué de manière significative2. Les préoccupations relatives à la qualité des organes représentent une autre limite majeure, avec des taux d’utilisation d’organes aussi bas que 20 % à 30 %3,4,5. Enfin, les tendances dans les résultats postopératoires de la transplantation pulmonaire sont loin d’être satisfaisantes, les résultats à long terme des greffons et des patients étant toujours inférieurs à ceux des autres transplantations d’organes solides2.
Une technologie émergente, la perfusion pulmonaire ex situ (ESLP), a le potentiel d’atténuer ces limites. L’ESLP est de plus en plus utilisée comme méthode d’évaluation et de reconditionnement des poumons de donneurs marginaux et a démontré des résultats acceptables à court et à long terme après la transplantation de poumons de donneurs à critères étendus (DPE) 6,7,8,9,10. Par conséquent, l’ESLP a augmenté les taux d’utilisation dans certains centres de 15 % à 20 %6,7,8,9,10,11.
Une recherche ESLP appropriée nécessite la validation in vivo des résultats in vitro ; cependant, il existe peu de littérature sur les modèles de transplantation pulmonaire porcine pour l’ESLP12,13,14,15. De plus, la littérature disponible fournit des détails inadéquats sur la prise en charge anesthésique des porcs Yorkshire pour la transplantation pulmonaire, qui peuvent être très instables hémodynamiquement12,13,14,15. L’établissement d’un modèle facilement reproductible permettrait la validation in vivo des stratégies ESLP actuelles et l’évaluation préclinique de diverses interventions visant à réduire les lésions d’ischémie-reperfusion pulmonaire. L’objectif de la présente étude est de décrire un modèle porcin d’allotransplantation orthotopique du poumon gauche à utiliser avec l’ESLP. Le protocole comprend des descriptions des techniques d’anesthésie et de chirurgie, une liste de contrôle chirurgicale personnalisée et des détails concernant l’expérience de dépannage et les modifications du protocole. Les limites et les avantages du modèle de transplantation porcine du poumon gauche ont également été discutés dans ce travail. Ce manuscrit ne décrit pas le processus de récupération des poumons de porc chez les porcs Yorkshire de 35 à 50 kg, ni l’établissement et l’arrêt de l’ESLP. Ce protocole s’adresse exclusivement à l’opération de transplantation du receveur.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>ABL 800 FLEX Blood Gas Analyzer</td>
			<td>Radiometer</td>
			<td>989-963</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Adult-Pediatric Electrostatic Filter HME - Small</td>
			<td>Covidien</td>
			<td>352/5877</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Allison Lung Retractor</td>
			<td>Pilling</td>
			<td>341679</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Arterial Filter</td>
			<td>SORIN GROUP</td>
			<td>01706/03</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Backhaus Towel Clamp</td>
			<td>Pilling</td>
			<td>454300</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bovine Serum Albumin</td>
			<td>MP biomedicals</td>
			<td>218057791</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Biomedicus Pump</td>
			<td>Maquet</td>
			<td>BPX-80</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bronchoscope</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cable Ties &#8211; White 12&#8221;</td>
			<td>HUASU International</td>
			<td>HS4830001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Calcium Chloride</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>C69-500G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cooley Sternal Retractor</td>
			<td>Pilling</td>
			<td>341162</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CUSHING Gutschdressing Forceps</td>
			<td>Pilling</td>
			<td>466200</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Debakey-Metzenbaum Dissecting</td>
			<td>Pilling</td>
			<td>342202</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scissors</td>
			<td>Pilling</td>
			<td>342202</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DeBakey Peripheral Vascular Clamp</td>
			<td>Pilling</td>
			<td>353535</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Debakey Straight Vascular Tissue Forceps</td>
			<td>Pilling</td>
			<td>351808</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>D-glucose</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>G5767-500G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Drop sucker</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Endotracheal Tube 9.0mm CUFD</td>
			<td>Mallinckrodt</td>
			<td>9590E</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Flow Transducer</td>
			<td>BIO-PROBE</td>
			<td>TX 40</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Infusion Pump</td>
			<td>Baxter</td>
			<td>AS50</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Inspire 7 M Hollow Fiber Membrane Oxygenator</td>
			<td>SORIN GROUP</td>
			<td>K190690</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Intercept Tubing Connector 3/8&#34; x 1/2&#34;</td>
			<td>Medtronic</td>
			<td>6013</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Intercept Tubing 1/4&#34; x 1/16&#34; x 8&#39;</td>
			<td>Medtronic</td>
			<td>3108</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Intercept Tubing 3/8&#34; x 3/32&#34; x 6&#39;</td>
			<td>Medtronic</td>
			<td>3506</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Laryngoscope</td>
			<td>N/A</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Custom-made with 10-inch blade</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Metzenbaum Dissecting Scissors</td>
			<td>Pilling</td>
			<td>460420</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medical Carbon Dioxide Tank</td>
			<td>Praxair</td>
			<td>5823115</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medical Oxygen Tank</td>
			<td>Praxair</td>
			<td>2014408</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medical Nitrogen Tank</td>
			<td>Praxair</td>
			<td>NI M-K</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mosquito Clamp</td>
			<td>Pilling</td>
			<td>181816</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Harken Auricle Clamp</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Organ Chamber</td>
			<td>Tevosol</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PlasmaLyte A</td>
			<td>Baxter</td>
			<td>TB2544</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Poole Suction Tube</td>
			<td>Pilling</td>
			<td>162212</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Potassium Phosphate</td>
			<td>Fischer Scientific</td>
			<td>P285-500G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PERFADEX Plus</td>
			<td>XVIVO</td>
			<td>19811</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Satinsky Clamp</td>
			<td>Pilling</td>
			<td>354002</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scale</td>
			<td>TANITA</td>
			<td>KD4063611</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Silicon Support Membrane</td>
			<td>Tevosol</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium Bicarbonate</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>792519-1KG</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium Chloride 0.9%</td>
			<td>Baxter</td>
			<td>JB1324</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sorin XTRA Cell Saver</td>
			<td>SORIN GROUP</td>
			<td>75221</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sternal Saw</td>
			<td>Stryker</td>
			<td>6207</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical Electrocautery Device</td>
			<td>Kls Martin</td>
			<td>ME411</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TruWave Pressure Transducer</td>
			<td>Edwards</td>
			<td>VSYPX272</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Two-Lumen Central Venous Catheter 7fr X2</td>
			<td>Arrowg+ard</td>
			<td>CS-12702-E</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vorse Tubing Clamp</td>
			<td>Pilling</td>
			<td>351377</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Willauer-Deaver Retractor</td>
			<td>Pilling</td>
			<td>341720</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Yankauer Suction Tube</td>
			<td>Pilling</td>
			<td>162300</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>0 ETHIBOND Green 1X36&#34; Endo Loop 0</td>
			<td>ETHICON</td>
			<td>D8573</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>0 PDS II CP-1 2x27&#8221;</td>
			<td>ETHICON</td>
			<td>Z467H</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1 VICRYL MO-4 1x18&#8221;</td>
			<td>ETHICON</td>
			<td>J702D</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2-0 SILK Black 12&#34; x 18&#34; Strands</td>
			<td>ETHICON</td>
			<td>SA77G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4-0 PROLENE Blue TF 1x24&#8221;</td>
			<td>ETHICON</td>
			<td>8204H</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>6-0 PROLENE Blue BV 2x30&#8221;</td>
			<td>ETHICON</td>
			<td>M8776</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>21-Gauge Needle</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

left lung orthotopic transplantation in a juvenile porcine model for eslp

La transplantation pulmonaire est le traitement de référence pour les maladies pulmonaires en phase terminale, avec plus de 4 600 transplantations pulmonaires effectuées chaque année dans le monde. Cependant, la transplantation pulmonaire est limitée par une pénurie d’organes de donneurs disponibles. En tant que tel, il y a une mortalité élevée sur les listes d’attente. La perfusion pulmonaire ex situ (ESLP) a augmenté de 15 à 20 % les taux d’utilisation des poumons des donneurs dans certains centres. L’ESLP a été appliquée comme méthode d’évaluation et de reconditionnement des poumons marginaux de donneurs et a démontré des résultats acceptables à court et à long terme après la transplantation de poumons de donneurs à critères étendus (DPE). Des modèles de transplantation de grands animaux (in vivo) sont nécessaires pour valider les résultats de la recherche in vitro en cours. Les différences anatomiques et physiologiques entre les humains et les porcs posent d’importants défis techniques et anesthésiques. Un modèle de greffe facilement reproductible permettrait la validation in vivo des stratégies ESLP actuelles et l’évaluation préclinique de diverses interventions visant à améliorer la fonction pulmonaire du donneur. Ce protocole décrit un modèle porcin d’allotransplantation orthotopique du poumon gauche. Cela comprend les techniques d’anesthésie et de chirurgie, une liste de contrôle chirurgicale personnalisée, le dépannage, les modifications, ainsi que les avantages et les limites de l’approche.

Tous les résultats sont dans le contexte de 4 h de reperfusion après 12 h de NPV-ESLP16. Lors de l’explantation pulmonaire, il y a plusieurs résultats cliniques à anticiper (Figure 3). En règle générale, le porc restera hémodynamiquement stable après une explantation réussie du poumon gauche, mais peut nécessiter une perfusion à faible dose de phényléphrine (gamme de doses : 2-10 mg/h) en raison d’une réponse vasodilatatrice à la chirurgie. La fré...

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Left Lung Orthotopic Transplantation in a Juvenile Porcine Model for ESLP

Ce protocole décrit un modèle porcin juvénile d’allotransplantation orthotopique du poumon gauche conçu pour être utilisé dans le cadre de la recherche sur l’ESLP. L’accent est mis sur les techniques anesthésiques et chirurgicales, ainsi que sur les étapes critiques et le dépannage.

Transplantation orthotopique du poumon gauche dans un modèle porcin juvénile pour l’ESLP

Lung transplantation is the gold-standard treatment for end-stage lung disease, with over 4,600 lung transplantations performed worldwide annually. ...

Ce protocole est l’un des protocoles de transplantation pulmonaire les plus simples pour les grands modèles animaux et fournit le plus de détails en termes de prise en charge chirurgicale. Les principaux avantages de cette technique sont la description de la chirurgie, l’évaluation de la fonction pulmonaire gauche isolée après la greffe et la stabilisation du porc pendant la chirurgie. La méthode est bénéfique dans la recherche sur la profusion pulmonaire ex-situ pour valider les résultats ex-situ avec un modèle de transplantation de reperfusion in vivo.Le modèle de reperfusion in vivo de la transplantation pulmonaire est bénéfique pour tester les résultats de la profusion pulmonaire ex-situ et pourrait également être utilisé dans les tests d’organes artificiels, tels que les poumons bio-conçus ou mécaniques. Commencez par positionner le porc dans une position de décubitus latéral droit pour la thoracotomie latérale antérieure gauche. Identifiez ensuite l’extrémité de l’omoplate gauche dans l’apophyse xiphoïde, inférieure au sternum à la palpation, et reliez les deux points identifiés pour marquer le site d’incision de la thoracotomie de 20 centimètres de long.Après avoir induit l’anesthésie, utilisez un scalpel pour faire une incision sur la peau, puis utilisez l’électrocautérisation pour disséquer les couches sous-cutanées et les couches musculaires de l’animal. Le grand dorsal doit être divisé. Après avoir identifié la côte immédiatement en dessous de l’incision, cautériser sur le dessus de la côte pour exposer les muscles intercostaux tout en évitant le faisceau neurovasculaire intercostal.Utilisez un hémostatique anti-moustique pour percer les muscles intercostaux immédiatement au-dessus de la côte, puis palpez l’intérieur de la poitrine pour les adhérences avec un doigt. Pendant que le bord supérieur de la côte est cautérisé, repoussez le poumon à l’aide d’une aspiration de Yankauer pour étendre la thoracotomie antérieurement jusqu’à un pouce du sternum et postérieurement aux muscles paraspinaux. En insérant un écarteur sternal de Cooley, ouvrez la thoracotomie de 10 centimètres de large pour rétracter le poumon et exposer la veine hémiazygos gauche.Utilisez des ciseaux Metzenbaum et un bas fin pour disséquer la veine hémiazygos gauche sur sa circonférence. En encerclant le vaisseau avec des liens de soie, ligaturez et transectez la veine. Disséquez l’artère pulmonaire gauche, ou PA, et les veines pulmonaires gauches, ou PV, avant d’encercler les veines dans les liens de soie.Après cinq minutes d’administration d’héparine, clampez l’AP avec une pince croisée DeBakey, la PV antérieure gauche avec une pince Satinsky et la bronche gauche avec une pince Spoon Pots. Transectez l’AP, le PV inférieur gauche et la bronche gauche en laissant au moins 0,5 centimètre de brassard en tissu. Après avoir divisé le ligament pulmonaire inférieur gauche, retirez le poumon gauche.Pour la transplantation, insérez le poumon du donneur dans la poitrine du receveur, en commençant par le lobe inférieur sans forcer le poumon à cet endroit. Effectuez ensuite l’anastomose bronchique à l’aide d’une suture Prolene 4.0 sur une aiguille TF. Pour évaluer l’anastomose bronchique dans les sécrétions d’aspiration, effectuez une bronchoscopie des poumons gauche et droit en insérant un bronchoscope dans le tube endotrachéal à l’aide d’un raccord adaptateur, puis connectez l’endoscope à l’aspiration avant de faire avancer le bronchoscope dans la bronche gauche.Observez la respiration pulmonaire et inspectez les signes vitaux de l’anastomose bronchique. Répétez le processus sur le côté droit. Ensuite, utilisez une suture Prolene 6.0 sur des aiguilles BV-1 pour effectuer une anastomose de bout en bout de l’oreillette gauche ou de la LA, suivie d’une coupe de l’excès de tissu.Après avoir incorporé les SVP donneurs dans l’anastomose PV inférieure et LA, complétez l’anastomose PA avec une suture Prolene 6.0 sur des aiguilles BV-1 à l’aide d’une anastomose de bout en bout courante. Plus tard, confirmez l’héparinisation et administrez un changement de potassium à l’animal. Ouvrez ensuite partiellement la pince PA pour désaérer et laissez le sang circuler à travers la ligne de suture.Ensuite, relâchez la pince LA et laissez la ligne de suture saigner pour libérer davantage l’air emprisonné. Attachez le LA, puis retirez complètement la pince PA. Une fois cela fait, retirez la pince bronchique et augmentez les volumes courants jusqu’à atteindre 10 millilitres par kilogramme.Après avoir inséré une sonde thoracique malléable 20 français, fermez la thoracotomie en trois couches. À l’aide de ciseaux de Metzenbaum, ouvrez la plèvre gauche pour prélever des échantillons de sang dans le lobe inférieur gauche. Ouvrez la plèvre droite pour disséquer l’artère pulmonaire droite.Placez ensuite une pince pour arrêter la perfusion du poumon droit. Dirigez une aiguille de calibre 21 vers les veines pulmonaires gauches et loin de l’oreillette gauche commune pour prélever un échantillon de sang de l’anastomose LA afin d’évaluer la fonction pulmonaire gauche. Après le clampage, prélevez les échantillons de sang de l’anastomose PV gauche à l’aide d’une aiguille de calibre 21 dirigée vers le poumon gauche.L’analyse représentative indique des changements typiques du rapport PF et la formation d’un œdème au cours du protocole de transplantation pulmonaire. Lors de la reperfusion, les rapports PF ont chuté d’environ 100 millimètres de mercure car le poumon gauche n’était pas immédiatement efficace pour l’oxygénation. Lors de l’évaluation du poumon gauche isolé à quatre heures, le rapport PF était stable.Lors d’une greffe réussie, le poumon gauche pourrait subir un gain de poids d’environ 20 % à 50 % en raison du sang résiduel dans la circulation. Après 12 heures de greffe du poumon gauche, l’analyse des gaz du sang a été effectuée. Il a été observé que le taux de potassium était augmenté pendant 60 à 120 minutes de reperfusion.Environ deux à quatre quarts de travail ont été nécessaires pendant quatre heures de reperfusion pour maintenir le potassium en dessous de cinq millimoles par litre. Au lieu de suturer les veines pulmonaires supérieures du receveur, les pinces à morsure latérales peuvent être utilisées pour le contrôle vasculaire et les vaisseaux peuvent être facilement cousus.

Research

JoVE Journal

Medicine

Development of Obliterative Bronchiolitis in a Murine Model of Orthotopic Lung Transplantation

Développement de la bronchiolite oblitérante dans un modèle murin de transplantation pulmonaire orthotopique

Orthotopic lung transplantation in rats was first reported by Asimacopoulos and colleagues in 1971 1. Currently, this method is well accepted and ...

Recherche

Médecine

Orthotopic Small Bowel Transplantation in Rats

Orthotopique transplantation d&#39;intestin grêle chez le rat

Small  bowel transplantation has become an accepted clinical option for patients with  short gut syndrome and failure of parenteral nutrition ...

Orthotopic Liver Transplantation in Rats

Une transplantation hépatique orthotopique chez le rat

Clinical progress in the field of liver transplantation has been largely supported by animal models1,2. Since the publication of the first orthotopic rat ...

Surgical Procedures for a Rat Model of Partial Orthotopic Liver Transplantation with Hepatic Arterial Reconstruction

Interventions chirurgicales pour un modèle de rat de transplantation hépatique orthotopique partielle avec reconstruction artérielle hépatique

Orthotopic liver transplantation (OLT) in rats using a whole or partial graft is an indispensable experimental model for transplantation research, such as ...

A Murine Model of Myocardial Ischemia-reperfusion Injury through Ligation of the Left Anterior Descending Artery

Un modèle murin d&#39;ischémie myocardique-reperfusion par ligature de l&#39;artère interventriculaire antérieure

Acute or chronic myocardial infarction (MI) are cardiovascular events resulting in high morbidity and mortality. Establishing the pathological mechanisms ...

Technique of Porcine Liver Procurement and Orthotopic Transplantation using an Active Porto-Caval Shunt

Technique de porc approvisionnement du foie et la transplantation orthotopique utilisant un Active Porto-Caval Shunt

The success of liver transplantation has resulted in a dramatic organ shortage. Each year, a considerable number of patients on the liver transplantation ...

Method of Isolated Ex Vivo Lung Perfusion in a Rat Model: Lessons Learned from Developing a Rat EVLP Program

Method of Isolated Ex Vivo Lung Perfusion in a Rat Model: Lessons Learned from Developing a Rat EVLP Program

Méthode de isolé<em&gt; Ex Vivo</em&gt; Lung perfusion dans un modèle rat: Leçons tirées élaboration d&#39;un programme EVLP Rat

The number of acceptable donor lungs available for lung transplantation is severely limited due to poor quality. Ex-Vivo Lung Perfusion (EVLP) has allowed ...

Orthotopic Hind Limb Transplantation in the Mouse

Orthotopique Hind Limb transplantation chez la souris

In vivo animal model systems, and in particular mouse models, have evolved into powerful and versatile scientific tools indispensable to basic and ...

A Pre-Clinical Porcine Model of Orthotopic Heart Transplantation

Un modèle porcin préclinique de transplantation orthotopic de coeur

Fifty-years following the first successful report, cardiac transplantation remains the gold-standard treatment for eligible patients with advanced heart ...

Reduced Complications after Arterial Reconnection in a Rat Model of Orthotopic Liver Transplantation

Complications réduites après reconnexion artérielle dans un modèle de rat de transplantation orthotopique de foie

The rat orthotopic liver transplantation (OLT) model is a powerful tool to study acute and chronic rejection. However, it is not a complete representation ...