Name: left lung orthotopic transplantation in a juvenile porcine model for eslp
Uploaded: 2022-02-14T13:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Left Lung Orthotopic Transplantation in a Juvenile Porcine Model for ESLP at JoVE.com

Esta pesquisa é financiada em nome da Fundação Hospital Universitário.

Todos os procedimentos foram realizados de acordo com as diretrizes do Conselho Canadense de Cuidados com Animais e o guia para cuidados e uso de animais de laboratório. Os protocolos foram aprovados pelo comitê institucional de cuidados com animais da Universidade de Alberta. Este protocolo foi aplicado em fêmeas juvenis de porcos Yorkshire entre 35-50 kg. Os porcos são espécimes livres de patógenos e de grau alimentício. Eles são comprados do Centro de Pesquisa e Tecnologia de Suínos em Edmonton, AB, Canadá (...

<ol>
	<li>Chambers, D. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+international+thoracic+organ+transplant+registry+of+the+international+society+for+heart+and+lung+transplantation:+Thirty-fifth+adult+lung+and+heart-lung+transplant+report-2018;+focus+theme:+Multiorgan+transplantation.">The international thoracic organ transplant registry of the international society for heart and lung transplantation: Thirty-fifth adult lung and heart-lung transplant report-2018; focus theme: Multiorgan transplantation.</a> The Journal of Heart and Lung Transplantation: The Official Publication of the International Society for Heart Transplantation. 37 (10), 1169-1183 (2018).</li><li>Valapour, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=OPTN/SRTR+2017+annual+data+report:+Lung.">OPTN/SRTR 2017 annual data report: Lung.</a> American Journal of Transplantation: Official Journal of the American Society of Transplantation and the American Society of Transplant Surgeons. 19, 404-484 (2019).</li><li>Klein, A. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Organ+donation+and+utilization+in+the+united+states,+1999-2008.">Organ donation and utilization in the united states, 1999-2008.</a> American Journal of Transplantation: Official Journal of the American Society of Transplantation and the American Society of Transplant Surgeons. 10 (4), 973-986 (2010).</li><li>Kotecha, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Continued+successful+evolution+of+extended+criteria+donor+lungs+for+transplantation.">Continued successful evolution of extended criteria donor lungs for transplantation.</a> The Annals of Thoracic Surgery. 104 (5), 1702-1709 (2017).</li><li>Singh, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sequence+of+refusals+for+donor+quality,+organ+utilization,+and+survival+after+lung+transplantation.">Sequence of refusals for donor quality, organ utilization, and survival after lung transplantation.</a> The Journal of Heart and Lung Transplantation. 38 (1), 35-42 (2019).</li><li>Cypel, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Normothermic+ex+vivo+lung+perfusion+in+clinical+lung+transplantation.">Normothermic ex vivo lung perfusion in clinical lung transplantation.</a> The New England Journal of Medicine. 364 (15), 1431-1440 (2011).</li><li>Wallinder, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Early+results+in+transplantation+of+initially+rejected+donor+lungs+after+ex+vivo+lung+perfusion:+A+case-control+study.">Early results in transplantation of initially rejected donor lungs after ex vivo lung perfusion: A case-control study.</a> European Journal of Cardio-Thoracic Surgery: Official Journal of the European Association for Cardio-Thoracic Surgery. 45 (1), 40-44 (2014).</li><li>Sage, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lung+transplantation+from+initially+rejected+donors+after+ex+vivo+lung+reconditioning:+The+french+experience.">Lung transplantation from initially rejected donors after ex vivo lung reconditioning: The french experience.</a> European Journal of Cardio-Thoracic Surgery: Official Journal of the European Association for Cardio-Thoracic Surgery. 46 (5), 794-799 (2014).</li><li>Valenza, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Extracorporeal+lung+perfusion+and+ventilation+to+improve+donor+lung+function+and+increase+the+number+of+organs+available+for+transplantation.">Extracorporeal lung perfusion and ventilation to improve donor lung function and increase the number of organs available for transplantation.</a> Transplantation Proceedings. 44 (7), 1826-1829 (2012).</li><li>Fildes, J. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Clinical+outcome+of+patients+transplanted+with+marginal+donor+lungs+via+ex+vivo+lung+perfusion+compared+to+standard+lung+transplantation.">Clinical outcome of patients transplanted with marginal donor lungs via ex vivo lung perfusion compared to standard lung transplantation.</a> Transplantation. 99 (5), 1078-1083 (2015).</li><li>Cypel, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experience+with+the+first+50+ex+vivo+lung+perfusions+in+clinical+transplantation.">Experience with the first 50 ex vivo lung perfusions in clinical transplantation.</a> The Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 144 (5), 1200-1206 (2012).</li><li>Clark, S. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+porcine+model+of+reperfusion+injury+after+lung+transplantation.">A new porcine model of reperfusion injury after lung transplantation.</a> Laboratory Animals. 33, 135-142 (1999).</li><li>Karimi, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Technical+pearls+for+swine+lung+transplantation.">Technical pearls for swine lung transplantation.</a> Journal of Surgical Research. 171, 107-111 (2011).</li><li>Kruger, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Porcine+pulmonary+auto-transplantation+for+ex+vivo+therapy+as+a+model+for+new+treatment+strategies.">Porcine pulmonary auto-transplantation for ex vivo therapy as a model for new treatment strategies.</a> Interactive CardioVascular and Thoracic Surgery. 23, 358-366 (2016).</li><li>Mariscal, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pig+lung+transplant+survival+model.">Pig lung transplant survival model.</a> Nature Protocols. 13, 1814-1828 (2018).</li><li>Aboelnazar, N. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Negative+pressure+ventilation+decreases+inflammation+and+lung+edema+during+normothermic+ex+vivo+lung+perfusion.">Negative pressure ventilation decreases inflammation and lung edema during normothermic ex vivo lung perfusion.</a> The Journal of Heart and Lung Transplantation: The Official Publication of the International Society for Heart Transplantation. 37 (4), 520-530 (2018).</li></ol>

Várias etapas cirúrgicas críticas estão envolvidas neste protocolo, e a solução de problemas é necessária para garantir o sucesso do transplante e da avaliação pulmonar. Os pulmões suínos juvenis são incrivelmente delicados em comparação com os pulmões humanos adultos, por isso o cirurgião cirúrgico deve ser cauteloso ao manusear pulmões suínos. Isso é especialmente verdadeiro após uma corrida de 12 horas de ESLP, pois o órgão terá assumido volume de líquido e estará suscetível a lesões por m...

O transplante pulmonar é o principal tratamento a longo prazo para a doença pulmonar terminal. Mais de 4.600 transplantes pulmonares são realizados anualmenteno mundo 1. No entanto, o transplante pulmonar atualmente apresenta limitações significativas. Por um lado, a necessidade de órgãos continua a ofuscar os doadores disponíveis. Apesar das taxas de transplante pulmonar aumentarem a cada ano desde 2012 devido aos efeitos combinados de mais candidatos sendo listados para transplante, um aumento no número de doadores e melhor uso de órgãos recuperados, a mortalidade na lista de espera para transplante não diminuiu significativamente2. A preocupação com a qualidade dos órgãos representa outra grande limitação, com taxas relatadas de utilização de órgãos tão baixas quanto 20%-30%3,4,5. Finalmente, as tendências nos resultados pós-operatórios do transplante pulmonar são menos do que satisfatórias, com os resultados a longo prazo do enxerto e do paciente ainda aquém dos de outros transplantes de órgãossólidos2.
Uma tecnologia emergente, a perfusão pulmonar ex situ (PESS), tem o potencial de atenuar essas limitações. A PSLP tem sido cada vez mais aplicada como método para avaliar e recondicionar pulmões de doadores marginais e tem demonstrado resultados aceitáveis a curto e longo prazo após o transplante de pulmões de doadores com critério estendido (DCE) 6,7,8,9,10. Consequentemente, a AESP aumentou as taxas de utilização em alguns centros em 15%-20%6,7,8,9,10,11.
A pesquisa adequada de ESLP requer a validação in vivo dos achados in vitro; no entanto, a literatura sobre modelos de transplante pulmonar suíno para PSLVé limitada12,13,14,15. Além disso, a literatura disponível fornece detalhes inadequados sobre o manuseio anestésico de porcos Yorkshire para transplante pulmonar, que pode ser altamente instável hemodinamicamente12,13,14,15. O estabelecimento de um modelo facilmente reprodutível permitiria a validação in vivo das estratégias atuais de PELP e a avaliação pré-clínica de várias intervenções para reduzir a lesão de isquemia-reperfusão pulmonar. O objetivo do presente estudo é descrever um modelo porcino de alotransplante ortotópico de pulmão esquerdo para uso com PESS. O protocolo inclui descrições das técnicas anestésica e cirúrgica, uma lista de verificação cirúrgica personalizada e detalhes sobre a experiência de solução de problemas e modificações no protocolo. As limitações e benefícios do modelo de transplante porcino de pulmão esquerdo também foram discutidos neste trabalho. Este manuscrito não descreve o processo de recuperação de pulmões suínos em porcos Yorkshire de 35-50 kg, nem cobre o estabelecimento e término da ESLP. Este protocolo aborda exclusivamente a operação de transplante do receptor.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>ABL 800 FLEX Blood Gas Analyzer</td>
			<td>Radiometer</td>
			<td>989-963</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Adult-Pediatric Electrostatic Filter HME - Small</td>
			<td>Covidien</td>
			<td>352/5877</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Allison Lung Retractor</td>
			<td>Pilling</td>
			<td>341679</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Arterial Filter</td>
			<td>SORIN GROUP</td>
			<td>01706/03</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Backhaus Towel Clamp</td>
			<td>Pilling</td>
			<td>454300</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bovine Serum Albumin</td>
			<td>MP biomedicals</td>
			<td>218057791</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Biomedicus Pump</td>
			<td>Maquet</td>
			<td>BPX-80</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bronchoscope</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cable Ties &#8211; White 12&#8221;</td>
			<td>HUASU International</td>
			<td>HS4830001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Calcium Chloride</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>C69-500G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cooley Sternal Retractor</td>
			<td>Pilling</td>
			<td>341162</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CUSHING Gutschdressing Forceps</td>
			<td>Pilling</td>
			<td>466200</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Debakey-Metzenbaum Dissecting</td>
			<td>Pilling</td>
			<td>342202</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scissors</td>
			<td>Pilling</td>
			<td>342202</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DeBakey Peripheral Vascular Clamp</td>
			<td>Pilling</td>
			<td>353535</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Debakey Straight Vascular Tissue Forceps</td>
			<td>Pilling</td>
			<td>351808</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>D-glucose</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>G5767-500G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Drop sucker</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Endotracheal Tube 9.0mm CUFD</td>
			<td>Mallinckrodt</td>
			<td>9590E</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Flow Transducer</td>
			<td>BIO-PROBE</td>
			<td>TX 40</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Infusion Pump</td>
			<td>Baxter</td>
			<td>AS50</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Inspire 7 M Hollow Fiber Membrane Oxygenator</td>
			<td>SORIN GROUP</td>
			<td>K190690</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Intercept Tubing Connector 3/8&#34; x 1/2&#34;</td>
			<td>Medtronic</td>
			<td>6013</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Intercept Tubing 1/4&#34; x 1/16&#34; x 8&#39;</td>
			<td>Medtronic</td>
			<td>3108</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Intercept Tubing 3/8&#34; x 3/32&#34; x 6&#39;</td>
			<td>Medtronic</td>
			<td>3506</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Laryngoscope</td>
			<td>N/A</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Custom-made with 10-inch blade</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Metzenbaum Dissecting Scissors</td>
			<td>Pilling</td>
			<td>460420</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medical Carbon Dioxide Tank</td>
			<td>Praxair</td>
			<td>5823115</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medical Oxygen Tank</td>
			<td>Praxair</td>
			<td>2014408</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medical Nitrogen Tank</td>
			<td>Praxair</td>
			<td>NI M-K</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mosquito Clamp</td>
			<td>Pilling</td>
			<td>181816</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Harken Auricle Clamp</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Organ Chamber</td>
			<td>Tevosol</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PlasmaLyte A</td>
			<td>Baxter</td>
			<td>TB2544</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Poole Suction Tube</td>
			<td>Pilling</td>
			<td>162212</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Potassium Phosphate</td>
			<td>Fischer Scientific</td>
			<td>P285-500G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PERFADEX Plus</td>
			<td>XVIVO</td>
			<td>19811</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Satinsky Clamp</td>
			<td>Pilling</td>
			<td>354002</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scale</td>
			<td>TANITA</td>
			<td>KD4063611</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Silicon Support Membrane</td>
			<td>Tevosol</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium Bicarbonate</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>792519-1KG</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium Chloride 0.9%</td>
			<td>Baxter</td>
			<td>JB1324</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sorin XTRA Cell Saver</td>
			<td>SORIN GROUP</td>
			<td>75221</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sternal Saw</td>
			<td>Stryker</td>
			<td>6207</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical Electrocautery Device</td>
			<td>Kls Martin</td>
			<td>ME411</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TruWave Pressure Transducer</td>
			<td>Edwards</td>
			<td>VSYPX272</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Two-Lumen Central Venous Catheter 7fr X2</td>
			<td>Arrowg+ard</td>
			<td>CS-12702-E</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vorse Tubing Clamp</td>
			<td>Pilling</td>
			<td>351377</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Willauer-Deaver Retractor</td>
			<td>Pilling</td>
			<td>341720</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Yankauer Suction Tube</td>
			<td>Pilling</td>
			<td>162300</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>0 ETHIBOND Green 1X36&#34; Endo Loop 0</td>
			<td>ETHICON</td>
			<td>D8573</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>0 PDS II CP-1 2x27&#8221;</td>
			<td>ETHICON</td>
			<td>Z467H</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1 VICRYL MO-4 1x18&#8221;</td>
			<td>ETHICON</td>
			<td>J702D</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2-0 SILK Black 12&#34; x 18&#34; Strands</td>
			<td>ETHICON</td>
			<td>SA77G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4-0 PROLENE Blue TF 1x24&#8221;</td>
			<td>ETHICON</td>
			<td>8204H</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>6-0 PROLENE Blue BV 2x30&#8221;</td>
			<td>ETHICON</td>
			<td>M8776</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>21-Gauge Needle</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

left lung orthotopic transplantation in a juvenile porcine model for eslp

O transplante pulmonar é o tratamento padrão-ouro para doenças pulmonares em estágio terminal, com mais de 4.600 transplantes pulmonares realizados anualmente em todo o mundo. No entanto, o transplante pulmonar é limitado pela escassez de órgãos de doadores disponíveis. Como tal, há alta mortalidade na lista de espera. A perfusão pulmonar ex situ (PESS) aumentou as taxas de utilização de pulmões de doadores em alguns centros em 15%-20%. A ESLP tem sido aplicada como um método para avaliar e recondicionar pulmões de doadores marginais e tem demonstrado resultados aceitáveis a curto e longo prazo após o transplante de pulmões de doadores com critério estendido (DCE). Modelos de transplante de animais de grande porte (in vivo) são necessários para validar os resultados da pesquisa in vitro em andamento. As diferenças anatômicas e fisiológicas entre humanos e suínos representam desafios técnicos e anestésicos significativos. Um modelo de transplante facilmente reprodutível permitiria a validação in vivo das estratégias atuais de PELP e a avaliação pré-clínica de várias intervenções destinadas a melhorar a função pulmonar do doador. Este protocolo descreve um modelo porcino de alotransplante ortotópico de pulmão esquerdo. Isso inclui técnicas anestésicas e cirúrgicas, uma lista de verificação cirúrgica personalizada, solução de problemas, modificações e os benefícios e limitações da abordagem.

Todos os resultados estão no contexto de 4 h de reperfusão após 12 h de VPN-ESLP16. Durante o explante pulmonar, há vários desfechos clínicos a serem antecipados (Figura 3). Normalmente, o porco permanecerá hemodinamicamente estável após um explante pulmonar esquerdo bem-sucedido, mas pode exigir uma infusão de baixa dose de fenilefrina (intervalo de dose: 2-10 mg/h) devido a uma resposta vasodilatadora à cirurgia. A frequência cardíaca deve atingir aprox...

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Left Lung Orthotopic Transplantation in a Juvenile Porcine Model for ESLP

Este protocolo descreve um modelo suíno juvenil de alotransplante ortotópico de pulmão esquerdo projetado para uso com pesquisa de PSLF. O foco é feito em técnicas anestésicas e cirúrgicas, bem como etapas críticas e solução de problemas.

Transplante ortotópico de pulmão esquerdo em modelo suíno juvenil para PESL

Lung transplantation is the gold-standard treatment for end-stage lung disease, with over 4,600 lung transplantations performed worldwide annually. ...

Este protocolo é um dos mais simples protocolos de transplante pulmonar para modelos de animais de grande porte e fornece o maior detalhe em termos de manejo cirúrgico. As principais vantagens dessa técnica são descrever a cirurgia, avaliar a função pulmonar esquerda isolada pós-transplante e estabilizar o porco durante a cirurgia. O método é benéfico na pesquisa de profusão pulmonar ex-situ para validar achados ex-situ com um modelo de transplante de reperfusão in vivo.O modelo de reperfusão in vivo de transplante pulmonar é benéfico para testar achados de profusão pulmonar ex-situ e também pode ser usado em testes de órgãos artificiais, como pulmões bioprojetados ou mecânicos. Iniciar posicionando o porco em decúbito lateral direito para toracotomia ântero-lateral esquerda. Em seguida, identificar a ponta da escápula esquerda no processo xifoide, inferior ao esterno à palpação, e conectar os dois pontos identificados para marcar o local da incisão da toracotomia com 20 centímetros de comprimento.Após a indução anestésica, utilizar bisturi para incisão sobre a pele e, em seguida, utilizar eletrocautério para dissecar as camadas subcutâneas e musculares do animal. O grande dorsal deve ser dividido. Após identificar a costela imediatamente abaixo da incisão, cauterizar em cima da costela para expor os músculos intercostais, evitando o feixe neurovascular intercostal.Use um hemostático de mosquito para puncionar os músculos intercostais imediatamente acima da costela e, em seguida, sinta dentro do peito para aderências com um dedo. Enquanto a borda superior da costela está sendo cauterizada, empurre o pulmão para longe usando uma sucção de Yankauer para estender a toracotomia anteriormente até um centímetro de distância do esterno e posteriormente aos músculos paraespinhais. Com a inserção de um afastador esternal de Cooley, abra a toracotomia com 10 centímetros de largura para retrair o pulmão e expor a veia hemiázigos esquerda.Use tesoura de Metzenbaum e uma fina parte inferior para dissecar circunferencialmente a veia hemiázigos esquerda. Circulando o vaso com laços de seda, ligue e transeccione a veia. Dissecar a artéria pulmonar esquerda, ou AP, e as veias pulmonares esquerdas, ou PV, antes de circundar as veias nos laços de seda.Após cinco minutos da administração da heparina, pinçar o PA com pinça cruzada de DeBakey, o PV anterior esquerdo com pinça Satinsky e o brônquio esquerdo com pinça Spoon Pots. Transeccionar o AP, o PV inferior esquerdo e o brônquio esquerdo deixando pelo menos 0,5 centímetros de manguito tecidual. Após a divisão do ligamento pulmonar inferior esquerdo, remova o pulmão esquerdo.Para o transplante, insira o pulmão do doador no tórax do receptor, começando com o lobo inferior sem forçar o pulmão para o local. Em seguida, realizar a anastomose brônquica com sutura de Prolene 4.0 em agulha de TF. Para avaliar a anastomose brônquica nas secreções de sucção, realizar broncoscopia pulmonar direita e esquerda inserindo um broncoscópio no tubo endotraqueal usando uma conexão adaptadora e, em seguida, conectar o aparelho à sucção antes de avançar o broncoscópio para o brônquio esquerdo.Observe a respiração pulmonar e inspecione os sinais vitais nas anastomoses brônquicas. Repita o processo do lado direito. Em seguida, utilizar sutura de Prolene 6.0 em agulhas BV-1 para realizar anastomose término-terminal do átrio esquerdo ou AE seguida de corte do excesso de tecido.Após a incorporação das SVPs do doador na anastomose inferior do PV e AE, completar a anastomose AP com sutura de Prolene 6.0 em agulhas BV-1 usando uma anastomose término-terminal em execução. Posteriormente, confirmar a heparinização e administrar um desvio de potássio no animal. Em seguida, abra parcialmente a pinça PA para retirar o ar e deixe o sangue fluir através da linha de sutura.Em seguida, solte a pinça do LA e deixe a linha de sutura sangrar para liberar ainda mais o ar aprisionado. Amarre o LA e, em seguida, remova a braçadeira PA completamente. Uma vez feito, remova a pinça brônquica e aumente os volumes correntes para atingir 10 mililitros por quilograma.Após a inserção de um dreno torácico maleável de 20 French, fechar a toracotomia em três camadas. Usando a tesoura de Metzenbaum, abra a pleura esquerda para coletar amostras de sangue do lobo inferior esquerdo. Abra a pleura direita para dissecar a artéria pulmonar direita.Em seguida, coloque uma pinça para interromper a perfusão do pulmão direito. Direcione uma agulha de calibre 21 em direção às veias pulmonares esquerdas e para longe do átrio esquerdo comum para colher uma amostra de sangue da anastomose do AE para avaliar a função pulmonar esquerda. Após o clampeamento, colher as amostras de sangue da anastomose das VVPP esquerdas com uma agulha calibre 21 direcionada para o pulmão esquerdo.A análise representativa indica alterações típicas da razão FP e formação de edema durante o protocolo de transplante pulmonar. Na reperfusão, as relações de FP caíram em aproximadamente 100 milímetros de mercúrio, pois o pulmão esquerdo não foi imediatamente efetivo na oxigenação. Na avaliação isolada do pulmão esquerdo em quatro horas, a relação FP foi estável.Em um transplante bem-sucedido, o pulmão esquerdo poderia experimentar aproximadamente 20% a 50% de ganho de peso devido ao sangue residual na circulação. Após 12 horas do transplante de pulmão esquerdo, foi realizada gasometria. Observou-se que o nível de potássio estava aumentado durante 60 a 120 minutos de reperfusão.Aproximadamente dois a quatro turnos foram necessários durante quatro horas de reperfusão para manter o potássio abaixo de cinco milimoles por litro. Em vez de suturar as veias pulmonares superiores do receptor, as pinças de mordida lateral podem ser usadas para controle vascular e os vasos podem ser facilmente sobrecosturados.

Research

JoVE Journal

Medicine

Development of Obliterative Bronchiolitis in a Murine Model of Orthotopic Lung Transplantation

Desenvolvimento de bronquiolite obliterante em um modelo murino de transplante de pulmão ortotópico

Orthotopic lung transplantation in rats was first reported by Asimacopoulos and colleagues in 1971 1. Currently, this method is well accepted and ...

Medicina

Orthotopic Small Bowel Transplantation in Rats

Transplante de intestino delgado de ratos ortotópico

Small  bowel transplantation has become an accepted clinical option for patients with  short gut syndrome and failure of parenteral nutrition ...

Orthotopic Liver Transplantation in Rats

Transplante hepático ortotópico experimental em ratos

Clinical progress in the field of liver transplantation has been largely supported by animal models1,2. Since the publication of the first orthotopic rat ...

Surgical Procedures for a Rat Model of Partial Orthotopic Liver Transplantation with Hepatic Arterial Reconstruction

Procedimentos cirúrgicos para um modelo de rato de Transplante de Fígado parcial ortotópico com reconstrução arterial hepática

Orthotopic liver transplantation (OLT) in rats using a whole or partial graft is an indispensable experimental model for transplantation research, such as ...

A Murine Model of Myocardial Ischemia-reperfusion Injury through Ligation of the Left Anterior Descending Artery

Um modelo murino de isquemia-reperfusão, através da ligadura da artéria Descendente Anterior Esquerda

Acute or chronic myocardial infarction (MI) are cardiovascular events resulting in high morbidity and mortality. Establishing the pathological mechanisms ...

Technique of Porcine Liver Procurement and Orthotopic Transplantation using an Active Porto-Caval Shunt

Técnica para as aquisições de fígado de porco e Transplante ortotópico usando um Active Porto-Caval Shunt

The success of liver transplantation has resulted in a dramatic organ shortage. Each year, a considerable number of patients on the liver transplantation ...

Method of Isolated Ex Vivo Lung Perfusion in a Rat Model: Lessons Learned from Developing a Rat EVLP Program

Method of Isolated Ex Vivo Lung Perfusion in a Rat Model: Lessons Learned from Developing a Rat EVLP Program

Método de Isolado<em&gt; Ex Vivo</em&gt; Perfusão pulmonar em um modelo de rato: Lições aprendidas com o desenvolvimento de um Programa PPEV Rat

The number of acceptable donor lungs available for lung transplantation is severely limited due to poor quality. Ex-Vivo Lung Perfusion (EVLP) has allowed ...

Orthotopic Hind Limb Transplantation in the Mouse

Ortotópico Hind Limb Transplantation no mouse

In vivo animal model systems, and in particular mouse models, have evolved into powerful and versatile scientific tools indispensable to basic and ...

A Pre-Clinical Porcine Model of Orthotopic Heart Transplantation

Um modelo pré-clínico porcino de transplante cardíaco ortotópico

Fifty-years following the first successful report, cardiac transplantation remains the gold-standard treatment for eligible patients with advanced heart ...

Reduced Complications after Arterial Reconnection in a Rat Model of Orthotopic Liver Transplantation

Complicações reduzidas após reconexão arterial em um modelo de rato de transplante de fígado ortotópico

The rat orthotopic liver transplantation (OLT) model is a powerful tool to study acute and chronic rejection. However, it is not a complete representation ...