Name: left lung orthotopic transplantation in a juvenile porcine model for eslp
Uploaded: 2022-02-14T13:30:00
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Esta investigación está financiada en nombre de la Fundación Hospital Universitario.

Todos los procedimientos se realizaron cumpliendo con los lineamientos del Consejo Canadiense de Cuidado de Animales y la guía para el cuidado y uso de animales de laboratorio. Los protocolos fueron aprobados por el comité institucional de cuidado animal de la Universidad de Alberta. Este protocolo se ha aplicado en cerdos Yorkshire juveniles hembras de entre 35-50 kg. Los cerdos son especímenes de grado alimenticio libres de patógenos. Se compran en el Centro de Investigación y Tecnología Porcina en Edmonton, AB, ...

<ol>
	<li>Chambers, D. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+international+thoracic+organ+transplant+registry+of+the+international+society+for+heart+and+lung+transplantation:+Thirty-fifth+adult+lung+and+heart-lung+transplant+report-2018;+focus+theme:+Multiorgan+transplantation.">The international thoracic organ transplant registry of the international society for heart and lung transplantation: Thirty-fifth adult lung and heart-lung transplant report-2018; focus theme: Multiorgan transplantation.</a> The Journal of Heart and Lung Transplantation: The Official Publication of the International Society for Heart Transplantation. 37 (10), 1169-1183 (2018).</li><li>Valapour, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=OPTN/SRTR+2017+annual+data+report:+Lung.">OPTN/SRTR 2017 annual data report: Lung.</a> American Journal of Transplantation: Official Journal of the American Society of Transplantation and the American Society of Transplant Surgeons. 19, 404-484 (2019).</li><li>Klein, A. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Organ+donation+and+utilization+in+the+united+states,+1999-2008.">Organ donation and utilization in the united states, 1999-2008.</a> American Journal of Transplantation: Official Journal of the American Society of Transplantation and the American Society of Transplant Surgeons. 10 (4), 973-986 (2010).</li><li>Kotecha, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Continued+successful+evolution+of+extended+criteria+donor+lungs+for+transplantation.">Continued successful evolution of extended criteria donor lungs for transplantation.</a> The Annals of Thoracic Surgery. 104 (5), 1702-1709 (2017).</li><li>Singh, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sequence+of+refusals+for+donor+quality,+organ+utilization,+and+survival+after+lung+transplantation.">Sequence of refusals for donor quality, organ utilization, and survival after lung transplantation.</a> The Journal of Heart and Lung Transplantation. 38 (1), 35-42 (2019).</li><li>Cypel, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Normothermic+ex+vivo+lung+perfusion+in+clinical+lung+transplantation.">Normothermic ex vivo lung perfusion in clinical lung transplantation.</a> The New England Journal of Medicine. 364 (15), 1431-1440 (2011).</li><li>Wallinder, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Early+results+in+transplantation+of+initially+rejected+donor+lungs+after+ex+vivo+lung+perfusion:+A+case-control+study.">Early results in transplantation of initially rejected donor lungs after ex vivo lung perfusion: A case-control study.</a> European Journal of Cardio-Thoracic Surgery: Official Journal of the European Association for Cardio-Thoracic Surgery. 45 (1), 40-44 (2014).</li><li>Sage, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lung+transplantation+from+initially+rejected+donors+after+ex+vivo+lung+reconditioning:+The+french+experience.">Lung transplantation from initially rejected donors after ex vivo lung reconditioning: The french experience.</a> European Journal of Cardio-Thoracic Surgery: Official Journal of the European Association for Cardio-Thoracic Surgery. 46 (5), 794-799 (2014).</li><li>Valenza, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Extracorporeal+lung+perfusion+and+ventilation+to+improve+donor+lung+function+and+increase+the+number+of+organs+available+for+transplantation.">Extracorporeal lung perfusion and ventilation to improve donor lung function and increase the number of organs available for transplantation.</a> Transplantation Proceedings. 44 (7), 1826-1829 (2012).</li><li>Fildes, J. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Clinical+outcome+of+patients+transplanted+with+marginal+donor+lungs+via+ex+vivo+lung+perfusion+compared+to+standard+lung+transplantation.">Clinical outcome of patients transplanted with marginal donor lungs via ex vivo lung perfusion compared to standard lung transplantation.</a> Transplantation. 99 (5), 1078-1083 (2015).</li><li>Cypel, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experience+with+the+first+50+ex+vivo+lung+perfusions+in+clinical+transplantation.">Experience with the first 50 ex vivo lung perfusions in clinical transplantation.</a> The Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 144 (5), 1200-1206 (2012).</li><li>Clark, S. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+porcine+model+of+reperfusion+injury+after+lung+transplantation.">A new porcine model of reperfusion injury after lung transplantation.</a> Laboratory Animals. 33, 135-142 (1999).</li><li>Karimi, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Technical+pearls+for+swine+lung+transplantation.">Technical pearls for swine lung transplantation.</a> Journal of Surgical Research. 171, 107-111 (2011).</li><li>Kruger, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Porcine+pulmonary+auto-transplantation+for+ex+vivo+therapy+as+a+model+for+new+treatment+strategies.">Porcine pulmonary auto-transplantation for ex vivo therapy as a model for new treatment strategies.</a> Interactive CardioVascular and Thoracic Surgery. 23, 358-366 (2016).</li><li>Mariscal, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pig+lung+transplant+survival+model.">Pig lung transplant survival model.</a> Nature Protocols. 13, 1814-1828 (2018).</li><li>Aboelnazar, N. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Negative+pressure+ventilation+decreases+inflammation+and+lung+edema+during+normothermic+ex+vivo+lung+perfusion.">Negative pressure ventilation decreases inflammation and lung edema during normothermic ex vivo lung perfusion.</a> The Journal of Heart and Lung Transplantation: The Official Publication of the International Society for Heart Transplantation. 37 (4), 520-530 (2018).</li></ol>

Este protocolo implica varios pasos quirúrgicos críticos, y es necesario solucionar los problemas para garantizar el éxito del trasplante y la evaluación pulmonar. Los pulmones porcinos juveniles son increíblemente delicados en comparación con los pulmones humanos adultos, por lo que el cirujano operante debe tener cuidado al manipular los pulmones porcinos. Esto es especialmente cierto después de una ejecución de 12 horas de ESLP, ya que el órgano habrá adquirido volumen de líquido y será susceptible a lesio...

El trasplante de pulmón es el tratamiento preeminente a largo plazo para la enfermedad pulmonar terminal. Cada año se realizan más de 4.600 trasplantes de pulmón en todo el mundo1. Sin embargo, el trasplante pulmonar tiene actualmente limitaciones importantes. Por un lado, la necesidad de órganos sigue eclipsando a los donantes disponibles. A pesar de que las tasas de trasplante pulmonar aumentan cada año desde 2012 debido a los efectos combinados de la inclusión de más candidatos para trasplante, un aumento en el número de donantes y un mejor uso de los órganos recuperados, la mortalidad en la lista de espera de trasplante no ha disminuido significativamente2. Los problemas de calidad de los órganos representan otra limitación importante, ya que las tasas de utilización de órganos reportadas son tan bajas como el 20%-30%3,4,5. Por último, las tendencias en los resultados postoperatorios del trasplante pulmonar son menos que satisfactorias, y los resultados a largo plazo del injerto y del paciente siguen estando por detrás de los de otros trasplantes de órganos sólidos2.
Una tecnología emergente, la perfusión pulmonar ex situ (ESLP, por sus siglas en inglés), tiene el potencial de mitigar estas limitaciones. La ESLP se ha aplicado cada vez más como un método para evaluar y reacondicionar los pulmones marginales de donantes y ha demostrado resultados aceptables a corto y largo plazo después del trasplante de pulmones de donantes de criterios extendidos (ECD) 6,7,8,9,10. En consecuencia, ESLP ha aumentado las tasas de utilización en algunos centros entre un 15% y un 20%6,7,8,9,10,11.
La investigación adecuada de ESLP requiere la validación in vivo de los hallazgos in vitro; sin embargo, existe una literatura limitada sobre los modelos de trasplante pulmonar porcino para ESLP12,13,14,15. Además, la literatura disponible proporciona detalles inadecuados sobre el manejo anestésico de cerdos Yorkshire para trasplante pulmonar, que pueden ser altamente inestables hemodinámicamente12,13,14,15. El establecimiento de un modelo fácilmente reproducible permitiría la validación in vivo de las estrategias actuales de LESP y la evaluación preclínica de diversas intervenciones para reducir la lesión por isquemia-reperfusión pulmonar. El objetivo del presente estudio es describir un modelo porcino de alotrasplante ortotópico de pulmón izquierdo para su uso con LESP. El protocolo incluye descripciones de las técnicas anestésicas y quirúrgicas, una lista de verificación quirúrgica personalizada y detalles sobre la experiencia de solución de problemas y las modificaciones del protocolo. En este trabajo también se han discutido las limitaciones y beneficios del modelo de trasplante pulmonar porcino izquierdo. Este manuscrito no describe el proceso de recuperación de pulmones porcinos en cerdos Yorkshire de 35-50 kg, ni cubre el establecimiento y la terminación de la ESLP. Este protocolo aborda exclusivamente la operación de trasplante de receptores.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>ABL 800 FLEX Blood Gas Analyzer</td>
			<td>Radiometer</td>
			<td>989-963</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Adult-Pediatric Electrostatic Filter HME - Small</td>
			<td>Covidien</td>
			<td>352/5877</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Allison Lung Retractor</td>
			<td>Pilling</td>
			<td>341679</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Arterial Filter</td>
			<td>SORIN GROUP</td>
			<td>01706/03</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Backhaus Towel Clamp</td>
			<td>Pilling</td>
			<td>454300</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bovine Serum Albumin</td>
			<td>MP biomedicals</td>
			<td>218057791</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Biomedicus Pump</td>
			<td>Maquet</td>
			<td>BPX-80</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bronchoscope</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cable Ties &#8211; White 12&#8221;</td>
			<td>HUASU International</td>
			<td>HS4830001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Calcium Chloride</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>C69-500G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cooley Sternal Retractor</td>
			<td>Pilling</td>
			<td>341162</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CUSHING Gutschdressing Forceps</td>
			<td>Pilling</td>
			<td>466200</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Debakey-Metzenbaum Dissecting</td>
			<td>Pilling</td>
			<td>342202</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scissors</td>
			<td>Pilling</td>
			<td>342202</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DeBakey Peripheral Vascular Clamp</td>
			<td>Pilling</td>
			<td>353535</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Debakey Straight Vascular Tissue Forceps</td>
			<td>Pilling</td>
			<td>351808</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>D-glucose</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>G5767-500G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Drop sucker</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Endotracheal Tube 9.0mm CUFD</td>
			<td>Mallinckrodt</td>
			<td>9590E</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Flow Transducer</td>
			<td>BIO-PROBE</td>
			<td>TX 40</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Infusion Pump</td>
			<td>Baxter</td>
			<td>AS50</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Inspire 7 M Hollow Fiber Membrane Oxygenator</td>
			<td>SORIN GROUP</td>
			<td>K190690</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Intercept Tubing Connector 3/8&#34; x 1/2&#34;</td>
			<td>Medtronic</td>
			<td>6013</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Intercept Tubing 1/4&#34; x 1/16&#34; x 8&#39;</td>
			<td>Medtronic</td>
			<td>3108</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Intercept Tubing 3/8&#34; x 3/32&#34; x 6&#39;</td>
			<td>Medtronic</td>
			<td>3506</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Laryngoscope</td>
			<td>N/A</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Custom-made with 10-inch blade</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Metzenbaum Dissecting Scissors</td>
			<td>Pilling</td>
			<td>460420</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medical Carbon Dioxide Tank</td>
			<td>Praxair</td>
			<td>5823115</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medical Oxygen Tank</td>
			<td>Praxair</td>
			<td>2014408</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medical Nitrogen Tank</td>
			<td>Praxair</td>
			<td>NI M-K</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mosquito Clamp</td>
			<td>Pilling</td>
			<td>181816</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Harken Auricle Clamp</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Organ Chamber</td>
			<td>Tevosol</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PlasmaLyte A</td>
			<td>Baxter</td>
			<td>TB2544</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Poole Suction Tube</td>
			<td>Pilling</td>
			<td>162212</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Potassium Phosphate</td>
			<td>Fischer Scientific</td>
			<td>P285-500G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PERFADEX Plus</td>
			<td>XVIVO</td>
			<td>19811</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Satinsky Clamp</td>
			<td>Pilling</td>
			<td>354002</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scale</td>
			<td>TANITA</td>
			<td>KD4063611</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Silicon Support Membrane</td>
			<td>Tevosol</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium Bicarbonate</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>792519-1KG</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium Chloride 0.9%</td>
			<td>Baxter</td>
			<td>JB1324</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sorin XTRA Cell Saver</td>
			<td>SORIN GROUP</td>
			<td>75221</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sternal Saw</td>
			<td>Stryker</td>
			<td>6207</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical Electrocautery Device</td>
			<td>Kls Martin</td>
			<td>ME411</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TruWave Pressure Transducer</td>
			<td>Edwards</td>
			<td>VSYPX272</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Two-Lumen Central Venous Catheter 7fr X2</td>
			<td>Arrowg+ard</td>
			<td>CS-12702-E</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vorse Tubing Clamp</td>
			<td>Pilling</td>
			<td>351377</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Willauer-Deaver Retractor</td>
			<td>Pilling</td>
			<td>341720</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Yankauer Suction Tube</td>
			<td>Pilling</td>
			<td>162300</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>0 ETHIBOND Green 1X36&#34; Endo Loop 0</td>
			<td>ETHICON</td>
			<td>D8573</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>0 PDS II CP-1 2x27&#8221;</td>
			<td>ETHICON</td>
			<td>Z467H</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1 VICRYL MO-4 1x18&#8221;</td>
			<td>ETHICON</td>
			<td>J702D</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2-0 SILK Black 12&#34; x 18&#34; Strands</td>
			<td>ETHICON</td>
			<td>SA77G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4-0 PROLENE Blue TF 1x24&#8221;</td>
			<td>ETHICON</td>
			<td>8204H</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>6-0 PROLENE Blue BV 2x30&#8221;</td>
			<td>ETHICON</td>
			<td>M8776</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>21-Gauge Needle</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

left lung orthotopic transplantation in a juvenile porcine model for eslp

El trasplante de pulmón es el tratamiento de referencia para la enfermedad pulmonar terminal, con más de 4.600 trasplantes de pulmón realizados anualmente en todo el mundo. Sin embargo, el trasplante de pulmón se ve limitado por la escasez de órganos de donantes disponibles. Como tal, hay una alta mortalidad en lista de espera. La perfusión pulmonar ex situ (LESP) ha aumentado las tasas de utilización de pulmón de donantes en algunos centros entre un 15% y un 20%. La ESLP se ha aplicado como método para evaluar y reacondicionar los pulmones marginales de donantes y ha demostrado resultados aceptables a corto y largo plazo después del trasplante de pulmones de donantes con criterios extendidos (ECD). Se requieren modelos de trasplante de animales grandes (in vivo) para validar los resultados de la investigación in vitro en curso. Las diferencias anatómicas y fisiológicas entre los seres humanos y los cerdos plantean importantes desafíos técnicos y anestésicos. Un modelo de trasplante fácilmente reproducible permitiría la validación in vivo de las estrategias actuales de ESLP y la evaluación preclínica de diversas intervenciones diseñadas para mejorar la función pulmonar del donante. Este protocolo describe un modelo porcino de alotrasplante ortotópico de pulmón izquierdo. Esto incluye técnicas anestésicas y quirúrgicas, una lista de verificación quirúrgica personalizada, resolución de problemas, modificaciones y los beneficios y limitaciones del enfoque.

Todos los resultados se encuentran en el contexto de 4 h de reperfusión después de 12 h de VPN-ESLP16. Durante el explante pulmonar, hay varios resultados clínicos que se pueden anticipar (Figura 3). Normalmente, el cerdo permanecerá hemodinámicamente estable después de una explantación exitosa del pulmón izquierdo, pero puede requerir una infusión de fenilefrina en dosis bajas (rango de dosis: 2-10 mg/h) debido a una respuesta vasodilatadora a la cirugía. L...

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Left Lung Orthotopic Transplantation in a Juvenile Porcine Model for ESLP

Este protocolo describe un modelo porcino juvenil de alotrasplante ortotópico de pulmón izquierdo diseñado para su uso en la investigación de ESLP. La atención se centra en las técnicas anestésicas y quirúrgicas, así como en los pasos críticos y la resolución de problemas.

Trasplante ortotópico de pulmón izquierdo en un modelo porcino juvenil para LESP

Lung transplantation is the gold-standard treatment for end-stage lung disease, with over 4,600 lung transplantations performed worldwide annually. ...

Este protocolo es uno de los protocolos de trasplante pulmonar más sencillos para modelos de animales grandes y proporciona el mayor detalle en términos de manejo quirúrgico. Las principales ventajas de esta técnica son la descripción de la cirugía, la evaluación de la función pulmonar izquierda aislada después del trasplante y la estabilización del cerdo durante la cirugía. El método es beneficioso en la investigación de profusión pulmonar ex-situ para validar los hallazgos ex-situ con un modelo de trasplante de reperfusión in vivo.El modelo de reperfusión in vivo del trasplante de pulmón es beneficioso para probar los hallazgos de profusión pulmonar ex situ y también podría usarse en pruebas de órganos artificiales, como pulmones mecánicos o de bioingeniería. Comience colocando al cerdo en una posición de decúbito lateral derecho para la toracotomía lateral anterior izquierda. A continuación, identifique la punta de la escápula izquierda en la apófisis xifoides, inferior al esternón con palpación, y conecte los dos puntos identificados para marcar el sitio de incisión de la toracotomía de 20 centímetros de largo.Después de inducir la anestesia, use un bisturí para hacer una incisión en la piel y luego use electrocauterio para diseccionar las capas subcutáneas y las capas musculares del animal. El dorsal ancho debe dividirse. Después de identificar la costilla inmediatamente debajo de la incisión, cauterice en la parte superior de la costilla para exponer los músculos intercostales y evitar el haz neurovascular intercostal.Use un hemostático de mosquito para perforar los músculos intercostales inmediatamente por encima de la costilla y luego palpe el interior del pecho en busca de adherencias con un dedo. Mientras se cauteriza el borde superior de la costilla, empuje el pulmón con una succión Yankauer para extender la toracotomía anteriormente hasta una pulgada del esternón y posteriormente a los músculos paraespinales. Al insertar un retractor esternal de Cooley, abra la toracotomía de 10 centímetros de ancho para retraer el pulmón y exponer la vena hemiácigos izquierda.Utilice unas tijeras Metzenbaum y una parte inferior fina para diseccionar circunferencialmente la vena hemiácigos izquierda. Rodeando el vaso con lazos de seda, ligar y seccionar la vena. Disecciona la arteria pulmonar izquierda, o PA, y las venas pulmonares izquierdas, o VP, antes de rodear las venas con las corbatas de seda.Después de cinco minutos de administración de heparina, pinzar el PA con una pinza cruzada DeBakey, el PV anterior izquierdo con una pinza Satinsky y el bronquio izquierdo con pinza Spoon Pots. Transectar la AP, la VP inferior izquierda y el bronquio izquierdo dejando al menos 0,5 centímetros de manguito de tejido. Después de dividir el ligamento pulmonar inferior izquierdo, extirpe el pulmón izquierdo.Para el trasplante, inserte el pulmón del donante en el tórax del receptor, comenzando por el lóbulo inferior sin forzar el pulmón en el lugar. A continuación, realice la anastomosis bronquial utilizando una sutura de Prolene 4.0 en una aguja TF. Para evaluar la anastomosis bronquial en las secreciones de succión, realice una broncoscopia del pulmón izquierdo y derecho insertando un broncoscopio en el tubo endotraqueal mediante una conexión adaptadora, luego conecte el endoscopio a la succión antes de avanzar el broncoscopio hacia el bronquio izquierdo.Observar la respiración pulmonar e inspeccionar los signos vitales en la anastomosis bronquial. Repite el proceso en el lado derecho. A continuación, utilice una sutura de Prolene 6.0 en agujas BV-1 para realizar una anastomosis de extremo a extremo de la aurícula izquierda o LA seguida de un recorte del exceso de tejido.Después de incorporar los SVP del donante en la anastomosis inferior de VP y LA, completar la anastomosis de PA con una sutura de Prolene 6.0 en agujas BV-1 utilizando una anastomosis de extremo a extremo en funcionamiento. Posteriormente, confirmar la heparinización y administrar un cambio de potasio al animal. A continuación, abra parcialmente la pinza PA para desairear y dejar que la sangre fluya a través de la línea de sutura.A continuación, suelte la pinza LA y deje que la línea de sutura vuelva a sangrar para liberar aún más el aire atrapado. Ate el LA y luego retire la abrazadera PA por completo. Una vez hecho esto, retire la pinza bronquial y aumente los volúmenes corrientes hasta alcanzar los 10 mililitros por kilogramo.Después de insertar un tubo torácico maleable de 20 franceses, cierre la toracotomía en tres capas. Con unas tijeras Metzenbaum, abra la pleura izquierda para tomar muestras de sangre del lóbulo inferior izquierdo. Abra la pleura derecha para diseccionar la arteria pulmonar derecha.A continuación, coloque una pinza para detener la perfusión del pulmón derecho. Dirija una aguja de calibre 21 hacia las venas pulmonares izquierdas y lejos de la aurícula izquierda común para tomar una muestra de sangre de la anastomosis LA para evaluar la función pulmonar izquierda. Después del pinzamiento, tome las muestras de sangre de la anastomosis PV izquierda con una aguja de calibre 21 dirigida hacia el pulmón izquierdo.El análisis representativo indica cambios típicos en la relación de PF y formación de edema durante el protocolo de trasplante pulmonar. En la reperfusión, las proporciones de PF se redujeron en aproximadamente 100 milímetros de mercurio, ya que el pulmón izquierdo no fue inmediatamente efectivo en la oxigenación. En la evaluación aislada del pulmón izquierdo a las cuatro horas, el cociente de PF se mantuvo estable.En un trasplante exitoso, el pulmón izquierdo podría experimentar un aumento de peso de aproximadamente 20% a 50% debido a la sangre residual en la circulación. A las 12 horas del trasplante de pulmón izquierdo, se realizó la gasometría. Se observó que el nivel de potasio se incrementó durante 60 a 120 minutos de reperfusión.Se requirieron aproximadamente de dos a cuatro turnos durante cuatro horas de reperfusión para mantener el potasio por debajo de cinco milimoles por litro. En lugar de suturar las venas pulmonares superiores del receptor, las pinzas de mordida laterales se pueden usar para el control vascular y los vasos se pueden coser fácilmente.

Research

JoVE Journal

Medicine

Development of Obliterative Bronchiolitis in a Murine Model of Orthotopic Lung Transplantation

El desarrollo de bronquiolitis obliterante en un modelo murino de trasplante de pulmón ortotópico

Orthotopic lung transplantation in rats was first reported by Asimacopoulos and colleagues in 1971 1. Currently, this method is well accepted and ...

Investigación

Medicina

Orthotopic Small Bowel Transplantation in Rats

El trasplante ortotópico de intestino delgado en ratas

Small  bowel transplantation has become an accepted clinical option for patients with  short gut syndrome and failure of parenteral nutrition ...

Orthotopic Liver Transplantation in Rats

Trasplante ortotópico de hígado en ratas

Clinical progress in the field of liver transplantation has been largely supported by animal models1,2. Since the publication of the first orthotopic rat ...

Surgical Procedures for a Rat Model of Partial Orthotopic Liver Transplantation with Hepatic Arterial Reconstruction

Procedimientos Quirúrgicos para un modelo de rata de trasplante hepático ortotópico parcial con reconstrucción arterial hepática

Orthotopic liver transplantation (OLT) in rats using a whole or partial graft is an indispensable experimental model for transplantation research, such as ...

A Murine Model of Myocardial Ischemia-reperfusion Injury through Ligation of the Left Anterior Descending Artery

Un modelo murino de isquemia-reperfusión miocárdica lesión a través de la ligadura de la arteria descendente anterior

Acute or chronic myocardial infarction (MI) are cardiovascular events resulting in high morbidity and mortality. Establishing the pathological mechanisms ...

Technique of Porcine Liver Procurement and Orthotopic Transplantation using an Active Porto-Caval Shunt

Técnica de Adquisiciones de hígado porcino y trasplante ortotópico usando un Active Porto-Caval derivación

The success of liver transplantation has resulted in a dramatic organ shortage. Each year, a considerable number of patients on the liver transplantation ...

Method of Isolated Ex Vivo Lung Perfusion in a Rat Model: Lessons Learned from Developing a Rat EVLP Program

Method of Isolated Ex Vivo Lung Perfusion in a Rat Model: Lessons Learned from Developing a Rat EVLP Program

Método de aislados<em&gt; Ex Vivo</em&gt; Perfusión pulmonar en un modelo de rata: Lecciones Aprendidas de Desarrollo de un Programa EVLP Rata

The number of acceptable donor lungs available for lung transplantation is severely limited due to poor quality. Ex-Vivo Lung Perfusion (EVLP) has allowed ...

Orthotopic Hind Limb Transplantation in the Mouse

Ortotópico de la extremidad posterior de trasplante en el ratón

In vivo animal model systems, and in particular mouse models, have evolved into powerful and versatile scientific tools indispensable to basic and ...

A Pre-Clinical Porcine Model of Orthotopic Heart Transplantation

Un modelo preclínico porcino de trasplante ortotópico de corazón

Fifty-years following the first successful report, cardiac transplantation remains the gold-standard treatment for eligible patients with advanced heart ...

Reduced Complications after Arterial Reconnection in a Rat Model of Orthotopic Liver Transplantation

Reducción de las complicaciones después de la reconexión arterial en un modelo de rata de trasplante hepático ortotópico

The rat orthotopic liver transplantation (OLT) model is a powerful tool to study acute and chronic rejection. However, it is not a complete representation ...