Name: left lung orthotopic transplantation in a juvenile porcine model for eslp
Uploaded: 2022-02-14T13:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Left Lung Orthotopic Transplantation in a Juvenile Porcine Model for ESLP at JoVE.com

Forskningen finansieras på uppdrag av Stiftelsen Akademiska sjukhuset.

Alla procedurer utfördes i enlighet med riktlinjerna från Canadian Council on Animal Care och guiden för vård och användning av försöksdjur. Protokollen godkändes av den institutionella djurvårdskommittén vid University of Alberta. Detta protokoll har tillämpats på unga Yorkshire-svin av honkön mellan 35-50 kg. Grisar är patogenfria, livsmedelsklassade exemplar. De köps in från Swine Research and Technology Centre i Edmonton, AB, Kanada (https://srtc.ualberta.ca). Alla personer som var involverade i ESLP-...

<ol>
	<li>Chambers, D. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+international+thoracic+organ+transplant+registry+of+the+international+society+for+heart+and+lung+transplantation:+Thirty-fifth+adult+lung+and+heart-lung+transplant+report-2018;+focus+theme:+Multiorgan+transplantation.">The international thoracic organ transplant registry of the international society for heart and lung transplantation: Thirty-fifth adult lung and heart-lung transplant report-2018; focus theme: Multiorgan transplantation.</a> The Journal of Heart and Lung Transplantation: The Official Publication of the International Society for Heart Transplantation. 37 (10), 1169-1183 (2018).</li><li>Valapour, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=OPTN/SRTR+2017+annual+data+report:+Lung.">OPTN/SRTR 2017 annual data report: Lung.</a> American Journal of Transplantation: Official Journal of the American Society of Transplantation and the American Society of Transplant Surgeons. 19, 404-484 (2019).</li><li>Klein, A. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Organ+donation+and+utilization+in+the+united+states,+1999-2008.">Organ donation and utilization in the united states, 1999-2008.</a> American Journal of Transplantation: Official Journal of the American Society of Transplantation and the American Society of Transplant Surgeons. 10 (4), 973-986 (2010).</li><li>Kotecha, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Continued+successful+evolution+of+extended+criteria+donor+lungs+for+transplantation.">Continued successful evolution of extended criteria donor lungs for transplantation.</a> The Annals of Thoracic Surgery. 104 (5), 1702-1709 (2017).</li><li>Singh, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sequence+of+refusals+for+donor+quality,+organ+utilization,+and+survival+after+lung+transplantation.">Sequence of refusals for donor quality, organ utilization, and survival after lung transplantation.</a> The Journal of Heart and Lung Transplantation. 38 (1), 35-42 (2019).</li><li>Cypel, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Normothermic+ex+vivo+lung+perfusion+in+clinical+lung+transplantation.">Normothermic ex vivo lung perfusion in clinical lung transplantation.</a> The New England Journal of Medicine. 364 (15), 1431-1440 (2011).</li><li>Wallinder, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Early+results+in+transplantation+of+initially+rejected+donor+lungs+after+ex+vivo+lung+perfusion:+A+case-control+study.">Early results in transplantation of initially rejected donor lungs after ex vivo lung perfusion: A case-control study.</a> European Journal of Cardio-Thoracic Surgery: Official Journal of the European Association for Cardio-Thoracic Surgery. 45 (1), 40-44 (2014).</li><li>Sage, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lung+transplantation+from+initially+rejected+donors+after+ex+vivo+lung+reconditioning:+The+french+experience.">Lung transplantation from initially rejected donors after ex vivo lung reconditioning: The french experience.</a> European Journal of Cardio-Thoracic Surgery: Official Journal of the European Association for Cardio-Thoracic Surgery. 46 (5), 794-799 (2014).</li><li>Valenza, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Extracorporeal+lung+perfusion+and+ventilation+to+improve+donor+lung+function+and+increase+the+number+of+organs+available+for+transplantation.">Extracorporeal lung perfusion and ventilation to improve donor lung function and increase the number of organs available for transplantation.</a> Transplantation Proceedings. 44 (7), 1826-1829 (2012).</li><li>Fildes, J. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Clinical+outcome+of+patients+transplanted+with+marginal+donor+lungs+via+ex+vivo+lung+perfusion+compared+to+standard+lung+transplantation.">Clinical outcome of patients transplanted with marginal donor lungs via ex vivo lung perfusion compared to standard lung transplantation.</a> Transplantation. 99 (5), 1078-1083 (2015).</li><li>Cypel, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experience+with+the+first+50+ex+vivo+lung+perfusions+in+clinical+transplantation.">Experience with the first 50 ex vivo lung perfusions in clinical transplantation.</a> The Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 144 (5), 1200-1206 (2012).</li><li>Clark, S. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+porcine+model+of+reperfusion+injury+after+lung+transplantation.">A new porcine model of reperfusion injury after lung transplantation.</a> Laboratory Animals. 33, 135-142 (1999).</li><li>Karimi, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Technical+pearls+for+swine+lung+transplantation.">Technical pearls for swine lung transplantation.</a> Journal of Surgical Research. 171, 107-111 (2011).</li><li>Kruger, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Porcine+pulmonary+auto-transplantation+for+ex+vivo+therapy+as+a+model+for+new+treatment+strategies.">Porcine pulmonary auto-transplantation for ex vivo therapy as a model for new treatment strategies.</a> Interactive CardioVascular and Thoracic Surgery. 23, 358-366 (2016).</li><li>Mariscal, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pig+lung+transplant+survival+model.">Pig lung transplant survival model.</a> Nature Protocols. 13, 1814-1828 (2018).</li><li>Aboelnazar, N. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Negative+pressure+ventilation+decreases+inflammation+and+lung+edema+during+normothermic+ex+vivo+lung+perfusion.">Negative pressure ventilation decreases inflammation and lung edema during normothermic ex vivo lung perfusion.</a> The Journal of Heart and Lung Transplantation: The Official Publication of the International Society for Heart Transplantation. 37 (4), 520-530 (2018).</li></ol>

Flera kritiska kirurgiska steg är involverade i detta protokoll, och felsökning behövs för att säkerställa framgångsrik transplantation och lungbedömning. Juvenila svinlungor är otroligt känsliga jämfört med vuxna mänskliga lungor, så den opererande kirurgen måste vara försiktig när han hanterar svinlungor. Detta gäller särskilt efter en 12 timmars ESLP-behandling eftersom organet kommer att ha tagit på sig vätskevolym och vara mottagligt för skador från överdriven manipulation. Varje otillbörlig...

Lungtransplantation är den främsta långtidsbehandlingen för lungsjukdom i slutstadiet. Över 4 600 lungtransplantationer utförs årligen över hela världen1. Lungtransplantation har dock för närvarande betydande begränsningar. För det första fortsätter behovet av organ att överskugga tillgängliga donatorer. Trots att antalet lungtransplantationer har ökat varje år sedan 2012 på grund av de kombinerade effekterna av att fler kandidater listas för transplantation, en ökning av antalet donatorer och förbättrad användning av återvunna organ, har dödligheten på väntelistan för transplantation inte minskat nämnvärt. Problem med organkvaliteten utgör en annan stor begränsning, med rapporterade organanvändningsgrader så låga som 20%-30%3,4,5. Slutligen är trenderna i de postoperativa resultaten av lungtransplantation mindre än tillfredsställande, med långsiktiga transplantat- och patientresultat som fortfarande släpar efter andra solida organtransplantationer2.
En ny teknik, ex situ lungperfusion (ESLP), har potential att mildra dessa begränsningar. ESLP har i allt högre grad använts som en metod för att bedöma och rekonditionera marginaldonatorlungor och har visat acceptabla kort- och långsiktiga resultat efter transplantation av ECD-lungor 6,7,8,9,10. Följaktligen har ESLP ökat utnyttjandegraden i vissa centra med 15%-20%6,7,8,9,10,11.
Korrekt ESLP-forskning kräver validering in vivo av in vitro-fynd. Det finns dock begränsad litteratur om modeller för lungtransplantation av svin för ESLP12,13,14,15. Dessutom ger tillgänglig litteratur otillräckliga detaljer om anestesibehandling av Yorkshiregrisar för lungtransplantation, som kan vara mycket instabil hemodynamiskt12,13,14,15. Att etablera en lätt reproducerbar modell skulle möjliggöra in vivo-validering av nuvarande ESLP-strategier och preklinisk utvärdering av olika interventioner för att minska lungischemi-reperfusionsskador. Syftet med denna studie är att beskriva en grismodell av ortotopisk vänsterlungallotransplantation för användning med ESLP. Protokollet innehåller beskrivningar av anestesi- och kirurgiska tekniker, en anpassad kirurgisk checklista och detaljer om felsökningsupplevelsen och protokolländringar. Begränsningarna och fördelarna med transplantationsmodellen för vänster lungsvin har också diskuterats i detta arbete. Detta manuskript beskriver inte tillvaratagandet av svinlungor hos 35-50 kg Yorkshiregrisar, och det täcker inte heller etableringen och avslutandet av ESLP. Detta protokoll behandlar endast mottagartransplantationsoperationen.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>ABL 800 FLEX Blood Gas Analyzer</td>
			<td>Radiometer</td>
			<td>989-963</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Adult-Pediatric Electrostatic Filter HME - Small</td>
			<td>Covidien</td>
			<td>352/5877</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Allison Lung Retractor</td>
			<td>Pilling</td>
			<td>341679</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Arterial Filter</td>
			<td>SORIN GROUP</td>
			<td>01706/03</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Backhaus Towel Clamp</td>
			<td>Pilling</td>
			<td>454300</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bovine Serum Albumin</td>
			<td>MP biomedicals</td>
			<td>218057791</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Biomedicus Pump</td>
			<td>Maquet</td>
			<td>BPX-80</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bronchoscope</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cable Ties &#8211; White 12&#8221;</td>
			<td>HUASU International</td>
			<td>HS4830001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Calcium Chloride</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>C69-500G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cooley Sternal Retractor</td>
			<td>Pilling</td>
			<td>341162</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CUSHING Gutschdressing Forceps</td>
			<td>Pilling</td>
			<td>466200</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Debakey-Metzenbaum Dissecting</td>
			<td>Pilling</td>
			<td>342202</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scissors</td>
			<td>Pilling</td>
			<td>342202</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DeBakey Peripheral Vascular Clamp</td>
			<td>Pilling</td>
			<td>353535</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Debakey Straight Vascular Tissue Forceps</td>
			<td>Pilling</td>
			<td>351808</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>D-glucose</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>G5767-500G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Drop sucker</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Endotracheal Tube 9.0mm CUFD</td>
			<td>Mallinckrodt</td>
			<td>9590E</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Flow Transducer</td>
			<td>BIO-PROBE</td>
			<td>TX 40</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Infusion Pump</td>
			<td>Baxter</td>
			<td>AS50</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Inspire 7 M Hollow Fiber Membrane Oxygenator</td>
			<td>SORIN GROUP</td>
			<td>K190690</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Intercept Tubing Connector 3/8&#34; x 1/2&#34;</td>
			<td>Medtronic</td>
			<td>6013</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Intercept Tubing 1/4&#34; x 1/16&#34; x 8&#39;</td>
			<td>Medtronic</td>
			<td>3108</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Intercept Tubing 3/8&#34; x 3/32&#34; x 6&#39;</td>
			<td>Medtronic</td>
			<td>3506</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Laryngoscope</td>
			<td>N/A</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Custom-made with 10-inch blade</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Metzenbaum Dissecting Scissors</td>
			<td>Pilling</td>
			<td>460420</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medical Carbon Dioxide Tank</td>
			<td>Praxair</td>
			<td>5823115</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medical Oxygen Tank</td>
			<td>Praxair</td>
			<td>2014408</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medical Nitrogen Tank</td>
			<td>Praxair</td>
			<td>NI M-K</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mosquito Clamp</td>
			<td>Pilling</td>
			<td>181816</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Harken Auricle Clamp</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Organ Chamber</td>
			<td>Tevosol</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PlasmaLyte A</td>
			<td>Baxter</td>
			<td>TB2544</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Poole Suction Tube</td>
			<td>Pilling</td>
			<td>162212</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Potassium Phosphate</td>
			<td>Fischer Scientific</td>
			<td>P285-500G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PERFADEX Plus</td>
			<td>XVIVO</td>
			<td>19811</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Satinsky Clamp</td>
			<td>Pilling</td>
			<td>354002</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scale</td>
			<td>TANITA</td>
			<td>KD4063611</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Silicon Support Membrane</td>
			<td>Tevosol</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium Bicarbonate</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>792519-1KG</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium Chloride 0.9%</td>
			<td>Baxter</td>
			<td>JB1324</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sorin XTRA Cell Saver</td>
			<td>SORIN GROUP</td>
			<td>75221</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sternal Saw</td>
			<td>Stryker</td>
			<td>6207</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical Electrocautery Device</td>
			<td>Kls Martin</td>
			<td>ME411</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TruWave Pressure Transducer</td>
			<td>Edwards</td>
			<td>VSYPX272</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Two-Lumen Central Venous Catheter 7fr X2</td>
			<td>Arrowg+ard</td>
			<td>CS-12702-E</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vorse Tubing Clamp</td>
			<td>Pilling</td>
			<td>351377</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Willauer-Deaver Retractor</td>
			<td>Pilling</td>
			<td>341720</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Yankauer Suction Tube</td>
			<td>Pilling</td>
			<td>162300</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>0 ETHIBOND Green 1X36&#34; Endo Loop 0</td>
			<td>ETHICON</td>
			<td>D8573</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>0 PDS II CP-1 2x27&#8221;</td>
			<td>ETHICON</td>
			<td>Z467H</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1 VICRYL MO-4 1x18&#8221;</td>
			<td>ETHICON</td>
			<td>J702D</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2-0 SILK Black 12&#34; x 18&#34; Strands</td>
			<td>ETHICON</td>
			<td>SA77G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4-0 PROLENE Blue TF 1x24&#8221;</td>
			<td>ETHICON</td>
			<td>8204H</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>6-0 PROLENE Blue BV 2x30&#8221;</td>
			<td>ETHICON</td>
			<td>M8776</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>21-Gauge Needle</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

left lung orthotopic transplantation in a juvenile porcine model for eslp

Lungtransplantation är den bästa behandlingen för lungsjukdom i slutstadiet, med över 4 600 lungtransplantationer som utförs över hela världen årligen. Lungtransplantationer begränsas dock av brist på tillgängliga donerade organ. Som sådan finns det hög dödlighet på väntelistan. Ex situ lungperfusion (ESLP) har ökat utnyttjandegraden av donatorlungor i vissa centra med 15-20 %. ESLP har använts som en metod för att bedöma och rekonditionera marginaldonatorlungor och har visat acceptabla kort- och långsiktiga resultat efter transplantation av ECD-lungor (extended criteria donor). Transplantationsmodeller för stora djur (in vivo) krävs för att validera pågående in vitro-forskningsresultat . Anatomiska och fysiologiska skillnader mellan människor och grisar innebär betydande tekniska och anestetiska utmaningar. En transplantationsmodell som är lätt reproducerbar skulle möjliggöra in vivo-validering av nuvarande ESLP-strategier och preklinisk utvärdering av olika interventioner som är utformade för att förbättra donatorns lungfunktion. Detta protokoll beskriver en svinmodell av ortotopisk allotransplantation av vänster lunga. Detta inkluderar anestesi- och kirurgiska tekniker, en anpassad kirurgisk checklista, felsökning, modifieringar och fördelarna och begränsningarna med tillvägagångssättet.

Alla resultat är i samband med 4 timmars reperfusion efter 12 timmars NPV-ESLP16. Under lungexplantation finns det flera kliniska resultat att förvänta sig (Figur 3). Vanligtvis förblir grisen hemodynamiskt stabil efter en lyckad explantation av vänster lunga, men kan behöva en lågdosinfusion av fenylefrin (dosintervall: 2-10 mg/timme) på grund av ett vasodilaterande svar på operationen. Hjärtfrekvensen bör vara cirka 100-120 slag per minut, andningsfrekven...

Watch this Scientific Journal Video about Left Lung Orthotopic Transplantation in a Juvenile Porcine Model for ESLP at JoVE.com

Left Lung Orthotopic Transplantation in a Juvenile Porcine Model for ESLP

Detta protokoll beskriver en juvenil svinmodell av ortotopisk vänster lungallotransplantation utformad för användning med ESLP-forskning. Fokus ligger på anestesi- och operationstekniker samt kritiska moment och felsökning.

Ortotopisk transplantation av vänster lunga i en modell av juvenilt svin för ESLP

Lung transplantation is the gold-standard treatment for end-stage lung disease, with over 4,600 lung transplantations performed worldwide annually. ...

Detta protokoll är ett av de enklaste lungtransplantationsprotokollen för stora djurmodeller och ger mest detaljer när det gäller kirurgisk hantering. De främsta fördelarna med denna teknik är att beskriva operationen, bedöma isolerad vänster lungfunktion efter transplantation och stabilisera grisen under operationen. Metoden är fördelaktig inom ex-situ lungprofusionsforskning för att validera ex-situ-fynd med en in vivo-reperfusionstransplantationsmodell.In vivo-reperfusionsmodellen för lungtransplantation är fördelaktig för att testa ex-situ lungprofusionsfynd och kan också användas vid testning av artificiella organ, såsom biokonstruerade eller mekaniska lungor. Börja med att placera grisen i en höger lateral decubitusposition för vänster främre lateral torakotomi. Identifiera sedan spetsen på det vänstra skulderbladet i xiphoidprocessen, underlägsen bröstbenet med palpation, och koppla ihop de två identifierade fläckarna för att markera det 20 centimeter långa torakotomisnittet.Efter att ha inducerat bedövningen, använd en skalpell för att göra ett snitt på huden och använd sedan diatermi för att dissekera djurets subkutana lager och muskellager. Latissimus dorsi måste delas. Efter att ha identifierat revbenet omedelbart under snittet, bränn ovanpå revbenet för att exponera de interkostala musklerna samtidigt som du undviker det interkostala neurovaskulära knippet.Använd en mygghemostat för att punktera de interkostala musklerna omedelbart ovanför revbenet och känn sedan inuti bröstet för sammanväxningar med ett finger. Medan den övre kanten av revbenet bränns, tryck bort lungan med hjälp av en Yankauer-sugning för att förlänga torakotomin anteriort tills en tum från bröstbenet och bakåt till paraspinalmusklerna. Genom att sätta in en Cooley sternal retractor, öppna torakotomin 10 centimeter bred för att dra tillbaka lungan och exponera vänster hemiazygos ven.Använd Metzenbaum-sax och en fin nedre för att dissekera den vänstra hemiazygosvenen i omkretsen. Genom att cirkla runt kärlet med silkesband, ligera och transektera venen. Dissekera ut den vänstra lungartären, eller PA, och vänster lungvener, eller PV, innan du omger venerna i silkesbanden.Efter fem minuters heparinadministrering, kläm fast PA med en DeBakey korsklämma, den vänstra främre PV:n med en Satinsky-klämma och den vänstra bronken med Spoon Pots-klämma. Transektera PA, den vänstra inferior PV och den vänstra bronken lämnar minst 0,5 centimeter vävnadsmanschett. Efter att ha delat det vänstra nedre lungligamentet, ta bort vänster lunga.För transplantation, sätt in donatorlungan i mottagarens bröstkorg, börja med den nedre loben utan att tvinga lungan på plats. Utför sedan bronkialanastomosen med en 4.0 Prolen-sutur på en TF-nål. För att bedöma bronkialanastomosen i sugsekret, utför vänster och höger lungbronkoskopi genom att föra in ett bronkoskop i endotrakealtuben med hjälp av en adapteranslutning, anslut sedan skopet till sug innan bronkoskopet förs in i vänster bronk.Observera lungandningen och inspektera vitala värden vid bronkial anastomos. Upprepa processen på höger sida. Använd sedan en 6.0 Prolen-sutur på BV-1-nålar för att utföra end-to-end vänster förmak eller LA-anastomos följt av trimning av överflödig vävnad.Efter att ha införlivat donatorns SVP:er i den inferior PV- och LA-anastomosen, komplettera PA-anastomosen med en 6.0 Prolen-sutur på BV-1-nålar med en löpande end-to-end-anastomos. Bekräfta senare heparinisering och administrera ett kaliumskifte till djuret. Öppna sedan PA clamp delvis för att avlufta och låt blodet strömma genom suturslangen.Släpp sedan LA-klämman och låt suturlinjen blöda tillbaka för att ytterligare släppa ut eventuell instängd luft. Knyt LA och ta sedan bort PA clamp helt. När du är klar, ta bort bronkialklämman och öka tidalvolymerna till 10 milliliter per kilo.Efter att ha satt in en 20 fransk formbar thoraxdränage, stäng torakotomin i tre lager. Använd Metzenbaum-saxen och öppna vänster lungsäck för att ta blodprover från vänster nedre lob. Öppna höger lungsäck för att dissekera den högra lungartären.Placera sedan en klämma för att stoppa perfusion av höger lunga. Rikta en 21 gauge nål mot vänster lungvener och bort från det vanliga vänstra förmaket för att ta ett blodprov från LA-anastomosen för att bedöma vänster lungfunktion. Efter avnavling tar du blodproverna från vänster PV-anastomos med en 21 gauge nål riktad mot vänster lunga.Den representativa analysen indikerar typiska förändringar i PF-kvoten och ödembildning under lungtransplantationsprotokollet. Vid reperfusionen sjönk PF-kvoten med cirka 100 millimeter kvicksilver eftersom den vänstra lungan inte var omedelbart effektiv vid syresättning. Vid isolerad bedömning av vänster lunga efter fyra timmar var PF-kvoten stabil.Vid en lyckad transplantation kan den vänstra lungan uppleva cirka 20 % till 50 % viktökning på grund av kvarvarande blod i cirkulationen. Efter 12 timmar efter den vänstra lungtransplantationen utfördes blodgasanalysen. Det observerades att kaliumnivån ökade under 60 till 120 minuters reperfusion.Cirka två till fyra skift krävdes under fyra timmars reperfusion för att hålla kalium lägre än fem millimol per liter. Istället för att suturligera mottagarens övre lungvener kan sidobitklämmorna användas för vaskulär kontroll och kärlen kan enkelt sys över.

Research

JoVE Journal

Medicine

Development of Obliterative Bronchiolitis in a Murine Model of Orthotopic Lung Transplantation

Utveckling av obliterativ bronkiolit i en musmodell av ortotopisk Lung Transplantation

Orthotopic lung transplantation in rats was first reported by Asimacopoulos and colleagues in 1971 1. Currently, this method is well accepted and ...

Orthotopic Small Bowel Transplantation in Rats

Orthotopic tunntarmstransplantation i råttor

Small  bowel transplantation has become an accepted clinical option for patients with  short gut syndrome and failure of parenteral nutrition ...

Orthotopic Liver Transplantation in Rats

Ortotopisk Levertransplantation hos råttor

Clinical progress in the field of liver transplantation has been largely supported by animal models1,2. Since the publication of the first orthotopic rat ...

Surgical Procedures for a Rat Model of Partial Orthotopic Liver Transplantation with Hepatic Arterial Reconstruction

Kirurgiska ingrepp för en råttmodell av partiella ortotop levertransplantation med nedsatt arteriell rekonstruktion

Orthotopic liver transplantation (OLT) in rats using a whole or partial graft is an indispensable experimental model for transplantation research, such as ...

A Murine Model of Myocardial Ischemia-reperfusion Injury through Ligation of the Left Anterior Descending Artery

En mus modell av ischemi-reperfusion skada genom Ligation i vänstra främre nedåt Artery

Acute or chronic myocardial infarction (MI) are cardiovascular events resulting in high morbidity and mortality. Establishing the pathological mechanisms ...

Technique of Porcine Liver Procurement and Orthotopic Transplantation using an Active Porto-Caval Shunt

Teknik för grislever upphandling och Orthotopic Transplantation med hjälp av en aktiv Porto-Caval Shunt

The success of liver transplantation has resulted in a dramatic organ shortage. Each year, a considerable number of patients on the liver transplantation ...

Method of Isolated Ex Vivo Lung Perfusion in a Rat Model: Lessons Learned from Developing a Rat EVLP Program

Method of Isolated Ex Vivo Lung Perfusion in a Rat Model: Lessons Learned from Developing a Rat EVLP Program

Metod för Isolerad<em&gt; Ex vivo</em&gt; Lung Perfusion i en råttmodell: Lärdomar från Utveckla en Rat EVLP Program

The number of acceptable donor lungs available for lung transplantation is severely limited due to poor quality. Ex-Vivo Lung Perfusion (EVLP) has allowed ...

Orthotopic Hind Limb Transplantation in the Mouse

Orthotopic bakbenen Transplantation i musen

In vivo animal model systems, and in particular mouse models, have evolved into powerful and versatile scientific tools indispensable to basic and ...

A Pre-Clinical Porcine Model of Orthotopic Heart Transplantation

En preklinisk porcin modell av ortotopisk hjärt transplantation

Fifty-years following the first successful report, cardiac transplantation remains the gold-standard treatment for eligible patients with advanced heart ...

Reduced Complications after Arterial Reconnection in a Rat Model of Orthotopic Liver Transplantation

Minskade komplikationer efter arteriell återanslutning i en råtta modell av orthotopic levertransplantation

The rat orthotopic liver transplantation (OLT) model is a powerful tool to study acute and chronic rejection. However, it is not a complete representation ...