Name: real-time monitoring of mitochondrial respiration in cytokine-differentiated human primary t cells
Uploaded: 2021-10-19T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Real-time Monitoring of Mitochondrial Respiration in Cytokine-differentiated Human Primary T Cells at JoVE.com

Kasper Mølgaard och Anne Rahbech fick bidrag från Tømmermester Jørgen Holm og Hustru Elisa f. Hansens Mindelegat. Kasper Mølgaardalso fick ett stipendium från Børnecancerfonden.

Experiment utfördes enligt riktlinjerna från Herlevsjukhuset och Danmarks huvudstadsregion.
Det här protokollet innehåller instruktioner för både en optimeringskörning och en analyskörning. Det är tydligt skrivet i texten när instruktioner är för en optimeringskörning eller en analyskörning. Kör en optimeringskörning innan du fortsätter med analyskörningarna
1. Human perifert blod mononukleär (PBMC) isolering från buffy coats
<...

<ol>
	<li>vander Windt, G. J. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mitochondrial+respiratory+capacity+is+a+critical+regulator+of+CD8++T+cell+memory+development.">Mitochondrial respiratory capacity is a critical regulator of CD8+ T cell memory development.</a> Immunity. 36 (1), 68-78 (2012).</li><li>Krauss, S., Brand, M. D., Buttgereit, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Signaling+takes+a+breath--new+quantitative+perspectives+on+bioenergetics+and+signal+transduction.">Signaling takes a breath--new quantitative perspectives on bioenergetics and signal transduction.</a> Immunity. 15 (4), 497-502 (2001).</li><li>vander Windt, G. J. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=CD8+memory+T+cells+have+a+bioenergetic+advantage+that+underlies+their+rapid+recall+ability.">CD8 memory T cells have a bioenergetic advantage that underlies their rapid recall ability.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 110 (35), 14336-14341 (2013).</li><li>Chang, C. -. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Posttranscriptional+control+of+T+cell+effector+function+by+aerobic+glycolysis.">Posttranscriptional control of T cell effector function by aerobic glycolysis.</a> Cell. 153 (6), 1239-1251 (2013).</li><li>vander Windt, G. J. W., Chang, C. -. H., Pearce, E. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Measuring+bioenergetics+in+T+cells+using+a+Seahorse+extracellular+flux+analyzer.">Measuring bioenergetics in T cells using a Seahorse extracellular flux analyzer.</a> Current Protocols in Immunology. 113, 1-14 (2016).</li><li>Buck, M. D., O'Sullivan, D., Pearce, E. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=T+cell+metabolism+drives+immunity.">T cell metabolism drives immunity.</a> Journal of Experimental Medicine. 212 (9), 1345-1360 (2015).</li><li>Rivadeneira, D. B., Delgoffe, G. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Antitumor+T-cell+reconditioning:+Improving+metabolic+fitness+for+optimal+cancer+immunotherapy.">Antitumor T-cell reconditioning: Improving metabolic fitness for optimal cancer immunotherapy.</a> Clinical Cancer Research. 24 (11), 2473-2481 (2018).</li><li>Cieri, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=IL-7+and+IL-15+instruct+the+generation+of+human+memory+stem+T+cells+from+naive+precursors.">IL-7 and IL-15 instruct the generation of human memory stem T cells from naive precursors.</a> Blood. 121 (4), 573-584 (2013).</li><li>Kenwood, B. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+of+a+novel+mitochondrial+uncoupler+that+does+not+depolarize+the+plasma+membrane.">Identification of a novel mitochondrial uncoupler that does not depolarize the plasma membrane.</a> Molecular Metabolism. 3 (2), 114-123 (2013).</li><li>Alizadeh, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=IL15+enhances+CAR-T+cell+antitumor+activity+by+reducing+mTORC1+activity+and+preserving+their+stem+cell+memory+phenotype.">IL15 enhances CAR-T cell antitumor activity by reducing mTORC1 activity and preserving their stem cell memory phenotype.</a> Cancer Immunology Research. 7 (5), 759-772 (2019).</li></ol>

Detaljerad och korrekt kvantifiering av oxidativ fosforylering är ett oumbärligt verktyg när man beskriver T-cellernas energitillstånd. Tillståndet för mitokondriell kondition kan vara direkt relaterat till T-cellsaktiveringspotential, överlevnad och differentiering1,5. Med detta protokoll är det möjligt att bestämma de olika egenskaperna hos oxidativ fosforylering (se tabell 4 för en detaljerad förklaring). Exakt kvantifiering av des...

Korrekt T-cellsutveckling och funktion är avgörande för immunsystemets förmåga att känna igen och reagera på antigener. Mitokondriell oxidativ fosforylering (OxPhos) förändras beroende på T-cellens tillstånd. Naiva T-celler använder främst OxPhos för att producera ATP, medan aktiverade T-celler genomgår en metabolisk övergång där glykolys blir dominerande1. Efter effektorfasen återgår den lilla återstående delmängd av minne T-celler till ett metaboliskt tillstånd som domineras av OxPhos2,3. Förändringarna av OxPhos följer differentieringen av T-celler i en sådan grad att även undergrupper av T-celler kan differentieras genom deras specifika är OxPhos egenskaper1. Omvänt är OxPhos viktigt för T-cells funktion, och hämning av OxPhos har visat sig blockera spridning och cytokinproduktion av T-celler4. Därför är förmågan att kvantifiera egenskaperna hos T-cells OxPhos på ett exakt och reproducerbart sätt ett kraftfullt verktyg för alla som arbetar med T-celler.
I detta protokoll mäts egenskaperna hos T-cells OxPhos med hjälp av en extracellulär flödesanalysator. Kärnfunktionen hos denna analysator är att kontinuerligt mäta syrehalten i tillväxtmediet i de celler som ska analyseras. Syre som avlägsnas från tillväxtmediet antas tas upp av cellerna. Genom att behandla cellerna med en mängd olika OxPhos-hämmare eller modifierare är en minskning av syreupptaget förknippat med den hämmade eller modulerade funktionen. Till exempel kommer hämning av ATP-syntasen att leda till ett minskat cellulärt upptag av syre som annars skulle användas för att producera ATP genom oxidativ fosforylering. Annan utrustning, inklusive Clark-elektroden och Oroboros-instrumentet, erbjuder liknande funktionalitet, och varje instrument har olika fördelar och brister. Ett brett spektrum av celltyper kan användas för studier i dessa enheter, men en särskilt utmanande celltyp är mänskliga primära T-lymfocyter5. På grund av deras lilla storlek, dålig överlevnad ex vivo och icke-vidhäftande egenskaper, mänskliga primära T-celler kan vara utmanande att studera.
Detta är ett protokoll för att studera mitokondriell andning av mänskliga primära T-celler av en extracellulär analysator. Protokollet är indelat i en optimeringskörning, där optimala koncentrationer av cellnummer per samt den optimala koncentrationen av oligomycin och FCCP bestäms. Dessutom en analyskörning, där de optimerade förhållandena används.
Med hjälp av blod-härledda mänskliga PBMCs och ex vivo primära T cell kulturer, detta protokoll visar vikten av optimal inhibitor koncentration och relevansen av att använda separat i stället för en sekventiell injektion av mitokondriell hämmare när man arbetar med känsliga celltyper. Slutligen, det visas att denna analys kan robust upptäcka subtila skillnader i mitokondriell andning vid polarisering med cytokiner IL-2 och IL-15.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>24-well tissue culture plate</td>
			<td>Nunc</td>
			<td>142485</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-CD3xCD28 beads</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>11161D</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Antimycin A</td>
			<td>Merck</td>
			<td>A8674</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Carbonyl cyanide 4-(trifluoromethoxy)-phenylhydrazone (FCCP)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>C2920</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell-Tak</td>
			<td>Corning</td>
			<td>354240</td>
			<td>For coating</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dimethyl sulfoxide (DMSO)</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>D9170</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Human Serum</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>H4522</td>
			<td>Heat inactivated at 56 &#176;C for 30 min</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>IL-15</td>
			<td>Peprotech</td>
			<td>200-02</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>IL-2</td>
			<td>Peprotech</td>
			<td>200-15</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lymphoprep</td>
			<td>Stemcell Technologies</td>
			<td>07801</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Oligomycin</td>
			<td>Merck</td>
			<td>O4876</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PBS</td>
			<td>Thermo Fisher</td>
			<td>10010023</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RPMI 1640</td>
			<td>Gibco-Thermo Fisher</td>
			<td>61870036</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Seahorse Calibrant</td>
			<td>Agilent Technologies</td>
			<td>102416-100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Seahorse XF 1.0 M glucose solution</td>
			<td>Agilent Technologies</td>
			<td>103577-100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Seahorse XF 100 mM pytuvate solution</td>
			<td>Agilent Technologies</td>
			<td>103578-100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Seahorse XF 200 mM glutamine solution</td>
			<td>Agilent Technologies</td>
			<td>103579-100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Seahorse XF RPMI medium, pH7.4</td>
			<td>Agilent Technologies</td>
			<td>103576-100</td>
			<td>XF RPMI media</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Seahorse XFe96 Analyser</td>
			<td>Agilent Technologies</td>
			<td></td>
			<td>Flux analyzer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Seahorse XFe96 cell culture microplates</td>
			<td>Agilent Technologies</td>
			<td>102416-100</td>
			<td>XF cell culture plate</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Seahorse XFe96 sensor cartridge</td>
			<td>Agilent Technologies</td>
			<td>102416-100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium Bicarbonate concentrate 0.1 M (NaHCO3)</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>36486</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium Hydroxide solution 1 N (NaOH)</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>S2770-100ML</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>X-VIVO 15</td>
			<td>Lonza</td>
			<td>BE02-060F</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>T cell beads magnet DynaMag-2 Magnet</td>
			<td>Thermo Fisher</td>
			<td>12321D</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Seahorse wave</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Flux analyzer software</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

real-time monitoring of mitochondrial respiration in cytokine-differentiated human primary t cells

Under aktivering anpassar sig metabolismen av T-celler till förändringar som påverkar deras öde. En ökning av mitokondriell oxidativ fosforylering är oumbärlig för T-cellsaktivering, och överlevnaden av minne T-celler är beroende av mitokondriell ombyggnad. Detta påverkar följaktligen det långsiktiga kliniska resultatet av cancerimmunterapier. Förändringar i T-cellskvalitet studeras ofta av flödescytometri med hjälp av välkända ytmarkörer och inte direkt av deras metaboliska tillstånd. Detta är ett optimerat protokoll för att mäta mitokondriell andning i realtid av primära mänskliga T-celler med hjälp av en extracellulär Flux Analyzer och cytokinerna IL-2 och IL-15, vilket påverkar T-cellsmetabolismen på olika sätt. Det visas att det metaboliska tillståndet hos T-celler tydligt kan särskiljas genom att mäta syreförbrukningen när man hämmar viktiga komplex i den metaboliska vägen och att noggrannheten i dessa mätningar är mycket beroende av optimal hämmarkoncentration och inhibitorinjektionsstrategi. Detta standardiserade protokoll kommer att hjälpa till att implementera mitokondriell andning som standard för T-cells fitness vid övervakning och studier av cancerimmunterapier.

En korrekt bestämning av OxPhos egenskaper är ett oumbärligt verktyg när man studerar T-celler. Om analysvillkoren inte har optimerats finns det dock en betydande risk för vilseledande eller felaktiga resultat. I detta protokoll finns ett starkt fokus på optimering av cellnummer per brunn och koncentrationer av oligomycin och FCCP som ska användas. I den beskrivna installationen läggs oligomycin och FCCP stegvis till samma brunn, vilket ökar koncentrationen av mitokondriella modulatorer. Den optimala koncentrati...

Watch this Scientific Journal Video about Real-time Monitoring of Mitochondrial Respiration in Cytokine-differentiated Human Primary T Cells at JoVE.com

Real-time Monitoring of Mitochondrial Respiration in Cytokine-differentiated Human Primary T Cells

Metabolisk anpassning är grundläggande för T-celler eftersom det dikterar differentiering, persistens och cytotoxicitet. Här presenteras ett optimerat protokoll för övervakning av mitokondriell andning i ex vivo cytokin-differentierade mänskliga primära T-celler.

Realtidsövervakning av mitokondriell andning i cytokindifferentierade mänskliga primära T-celler

During activation, the metabolism of T cells adapts to changes that impact their fate. An increase in mitochondrial oxidative phosphorylation is ...

Mitokondriell metabolism är en viktig regulator av T-cellens hållbarhet och minne. Mätning av mitokondriell andning ger därför viktiga insikter om egenskaperna hos T-celler. Seahorse-maskinen kan mäta olika element av mitokondriell andning, i realtid, i levande mänskliga primära T-lymfocyter, utan behov av märkning.Denna metod är mycket lämplig för övervakning av T-cells kondition och minnespotential, som är viktiga prediktorer för cancer immunterapi framgång. Till att börja med tvätta CD3 / CD28 pärlor genom att överföra 12,5 mikroliter pärlor per miljon celler till ett mikrocentrifugerör och tillsätt 12,5 mikroliter PBS per 12,5 mikroliter av pärlorna i röret. Placera sedan mikrocentrifugeröret på en lämplig magnet i en minut, kassera bufferten och återanvänd pärlorna i den ursprungliga volymen av T-cellmedium.Lägg sedan till 12,5 mikroliter pärlor per miljon celler vid ett förhållande mellan pärlor och celler och dela cellerna i två tillstånd med cirka fem miljoner celler i varje. Lägg sedan till rätt volym cytokiner till varje tillstånd och överför cellerna till flerbrunnplattor. Inkubera cellerna i tre dagar vid 37 grader Celsius och 5% koldioxid.Efter tre dagars inkubation, förbered färsk t-cellsmedium med dubbelt så hög koncentration av cytokiner. Återanvänd och dela cellerna genom att överföra hälften av volymen från varje brunn till en ny brunn. Lägg sedan till samma volym nyberedd T-cellmedium till varje brunn.För extracellulär flödesanalys, förbered beläggningslösning som innehåller natriumbikarbonat, cell-tak och natriumhydroxid. Öppna sedan en färsk XF-cellodlingsplatta och tillsätt 12 mikroliter av den nyberedde beläggningslösningen till varje brunn, vilket säkerställer jämn fördelning av beläggningslösningen i botten av alla brunnar. Inkubera plattan i rumstemperatur med locket på i 30 minuter.Kassera sedan återstående flytande lösning från alla brunnar. Tvätta plattan med 200 mikroliter sterilt vatten och kassera vätskan. Tvätta sedan plattan med 200 mikroliter av cellkulturkvalitet steril PBS.Låt plattan torka i 30 minuter i rumstemperatur efter att vätskan har kasserats. För att plätera T-celler i XF-cellsodlingsplattan, förbered 50 ml analysmedium genom att blanda lämpliga XF RPMI-medier med glukos, pyruvat och glutamin enligt den experimentella inställningen. Värm det beredda mediet till 37 grader Celsius i en icke-koldioxidreglerad inkubator och sätt pH till 7,4.Se till att tillräckligt med media för att plantera celler och förbereda oligomycin- och FCCP-lösningarna. Designa sedan en plåtlayout med ett ökande antal celler per brunn för optimering eller analyskörning. Använd fyra brunnar fyllda med media och injiceras med media för bakgrundsmätningar.Efter att ha räknat de T-celler som förberetts tidigare, pipetten ett lämpligt antal celler till varje brunn på den tidigare belagda XF-cellodlingsplattan enligt plattans layout. För att fästa T-cellerna på den belagda ytan, centrifugera XF-cellodlingsplattan. Tvätta sedan cellerna med 200 mikroliter analysmedia.Kassera mediet och tillsätt 180 mikroliter färska analysmedier. Efter att ha säkerställt att cellerna är fästa och jämnt fördelade över brunnsytan, inkubera XF-cellodlingsplattan vid 37 grader Celsius i det icke-koldioxidreglerade värmeskåpet i 30 minuter. För optimeringskörningen, förbered arbetslösningar för oligomycin och FCCP i analysmedia.Ladda sedan arbetslösningarna för antingen oligomycin eller FCCP i sensorpatronens injektionsportar. Se till att inga insprutningsportar endast innehåller luft. Fyll alla tomma portar med analysmedier.Ta sedan bort potentiella bubblor i injektionsportarna genom att försiktigt knacka kanterna på plattan på bordet. För analyskörningen, förbered en 20-mikromolar antimycin A-lösning. Ladda sedan, enligt plattans layout, 20 mikroliter av antingen oligomycin eller FCCP i injektionsport A på sensorpatronen och tillsätt 22 mikroliter antimycin A till injektionsport B av alla brunnar.I en representativ oligomycinoptimeringskörning uppnås en platå i syreförbrukningshastigheten, eller OCR, när den ackumulerande koncentrationen når en mikromol. Från och med denna koncentration minskades ocr inte ytterligare. För celler som behandlats med ökande koncentrationer av uncoupler FCCP ökade OCR-nivåerna upp till 0, 2 mikromolar FCCP och nådde sedan en platå, vilket indikerar att fullständig frikoppling erhölls.I en representativ cellkoncentrationsoptimeringskörning är den ursprungliga OCR för en körning med 200 000 celler ungefär hälften av det, med 400 000 celler. Efter FCCP-behandling är maximal OCR 61,6 picomoles per minut för 200 000 celler och 190,4 picomoles per minut för 400 000 celler. Efter oligomycinbehandling kollapsar OCR i körning med 200 000 celler till ensiffriga tal och är lägre än i körningen med 400 000 celler.Undersöka effekten av cytokiner interleukin-2 och interleukin-15 på metabolismen av T-celler visade att interleukin-15 odlade celler besatt högre maximal andning och extra luftvägarna kapacitet. Basal andning och ATP produktion påverkades dock inte. Att studera mitokondriell metabolism i mänskliga T-celler ger viktiga ledtrådar om deras hållbarhet och överlevnadspotential.Detta resulterar i ökad kunskap om T-cells kondition och kan i slutändan förbättra immunterapisvarsfrekvensen för cancer.

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Retroviral Transduction of T-cell Receptors in Mouse T-cells

Retroviral Transduction av T-cell receptorer i Mus T-celler

T-cell receptors (TCRs) play a central role in the immune system. TCRs on T-cell surfaces can specifically recognize peptide antigens presented by antigen ...

Generation of Induced Regulatory T Cells from Primary Human Na&iuml;ve and Memory T Cells

Generation of Induced Regulatory T Cells from Primary Human NaÃƒÆ’Ã‚Â¯ve and Memory T Cells

Generering av Inducerade regulatoriska T-celler från primära humana naiva och minne T-celler

The development and maintenance of immunosuppressive CD4+ regulatory T cells (Tregs) contribute to the peripheral tolerance needed to remain in ...

piggyBac Transposon System Modification of Primary Human T Cells

piggyBac Transposon System Modification of Primary Human T Cells

piggyBac transposon System Ändring av primära humana T-celler

The piggyBac transposon system is naturally active, originally derived from the cabbage looper moth1,2. This non-viral system is plasmid based, most ...

Real-time Live Imaging of T-cell Signaling Complex Formation

Real-time Live avbildning av T-cellsignalering Complex Formation

Protection against infectious diseases is mediated by the immune system 1,2. T lymphocytes are the master coordinators of the immune system, regulating ...

Quantitative In vitro Assay to Measure Neutrophil Adhesion to Activated Primary Human Microvascular Endothelial Cells under Static Conditions

Quantitative In vitro Assay to Measure Neutrophil Adhesion to Activated Primary Human Microvascular Endothelial Cells under Static Conditions

Kvantitativ<em&gt; In vitro</em&gt; Analys för att mäta neutrofilvidhäftning till Aktiverade primära humana mikrovaskulära endotelceller under statiska förhållanden

The vascular  endothelium plays an integral part in the inflammatory response. During the  acute phase of inflammation, endothelial cells (ECs) are ...

An Optimized Protocol to Analyze Glycolysis and Mitochondrial Respiration in Lymphocytes

En optimerad protokoll för att analysera Glycolysis och mitokondrie respiration i lymfocyter

Lymphocytes respond to a variety of stimuli by activating intracellular signaling pathways, which in turn leads to rapid cellular proliferation, migration ...

Assessment of the Synaptic Interface of Primary Human T Cells from Peripheral Blood and Lymphoid Tissue

Bedömning av Synaptic gränssnittet för primära humant T-celler från perifert blod och lymfatisk vävnad

The current understanding of the dynamics and structural features of T-cell synaptic interfaces has been largely determined through the use of ...

In Vitro Differentiation Model of Human Normal Memory B Cells to Long-lived Plasma Cells

I Vitro differentiering modell av människans normala minne B celler att långlivade plasmaceller

Plasma cells (PCs) secrete large amounts of antibodies and develop from B cells that have been activated. PCs are rare cells located in the bone marrow or ...

A Real-time Potency Assay for Chimeric Antigen Receptor T Cells Targeting Solid and Hematological Cancer Cells

En potens-analys i real tid för chimeric antigen receptor T-celler riktade mot solida och hematologiska cancer celler

Chimeric antigen receptor (CAR) T-cell therapy for cancer has achieved significant clinical benefit for resistant and refractory hematological ...

Pneumococcus Infection of Primary Human Endothelial Cells in Constant Flow

Pneumokocker infektion av primära humana endotelceller i konstant flöde

Interaction of Streptococcus pneumoniae with the surface of endothelial cells is mediated in blood flow via mechanosensitive proteins such as the Von ...