Name: radiosynthesis of 1-(2-[18f]fluoroethyl)-l-tryptophan using a one-pot, two-step protocol
Uploaded: 2021-09-21T14:45:00
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Ce travail a été soutenu par le Centre de diagnostic et de recherche TEP/IRM et par les départements de recherche biomédicale et de radiologie de l’Hôpital pour enfants Nemours/Alfred I. duPont.

ATTENTION : Le protocole concerne des matières radioactives. Toute dose supplémentaire de matières radioactives pourrait entraîner une augmentation proportionnelle du risque d’effets néfastes sur la santé, comme le cancer. Les chercheurs doivent suivre les pratiques de dose « aussi faible que raisonnablement réalisable » (ALARA) pour guider le protocole de radiosynthèse avec une protection adéquate dans la cellule chaude ou la hotte de plomb. Il est essentiel de minimiser le temps de contact direct, d’ut...

Le tryptophane est un acide aminé essentiel pour l’homme. Il joue un rôle important dans la régulation de l’humeur, de la fonction cognitive et du comportement. Les dérivés radiomarqués du tryptophane, en particulier l’AMT [11C]marqué au carbone 11, ont été largement étudiés en raison de leur rôle unique dans la cartographie de la synthèse de la sérotonine38,39, la détection et le classement des tumeurs40, l...

Chez l’homme, le tryptophane est un composant essentiel de l’alimentation quotidienne. Le tryptophane est principalement métabolisé par la voie de la kynurénine (KP). Le KP est catalysé par deux enzymes limitant le débit, l’indoleamine 2, 3-dioxygénase (IDO) et la tryptophane 2, 3-dioxygénase (TDO). Plus de 95% du tryptophane est converti en kynurénine et ses métabolites en aval, générant finalement du nicotinamide adénine dinucléotide, essentiel à la transduction de l’énergie cellulaire. Le KP est un régulateur clé du système immunitaire et un régulateur important de la neuroplasticité et des effets neurotoxiques1,2. Le métabolisme anormal du tryptophane est impliqué dans divers troubles neurologiques, oncologiques, psychiatriques et métaboliques; par conséquent, les analogues du tryptophane radiomarqués ont été largement utilisés dans les recherches cliniques. Les deux radiotraceurs de tryptophane les plus courants étudiés cliniquement sont le 11C-α-méthyl-L-tryptophane ([11C]AMT) et le 11C-5-hydroxytryptophane (11C-5-HTP)3.
Dans les années 1990, le 11C-5-HTP a été utilisé pour visualiser les tumeurs neuroendocrines sécrétant de la sérotonine4 et pour diagnostiquer et surveiller le traitement de l’adénocarcinome prostatique hormono-réfractaire métastatique5. Plus tard, il a été utilisé comme outil d’imagerie pour la quantification du système sérotoninergique dans le pancréas endocrinien6. 11 Le C-5-HTP a également été un traceur prometteur pour la détection non invasive d’îlots viables dans la transplantation intraportaire d’îlots et le diabète de type 27,8. Au cours des deux dernières décennies, de nombreux acides aminés radiomarqués ont progressé vers l’investigation clinique9,10. En particulier, l’analogue du tryptophane marqué au carbone 11 [11C]AMT a reçu une attention particulière pour la cartographie de la synthèse de la sérotonine cérébrale11,12,13,14 et pour la localisation des foyers épileptiques, des tumeurs épileptogènes, du complexe de sclérose tubéreuse, des gliomes et des cancers du sein15,16,17,18,19,20 ,21,22,23,24,25,26. [11C] L’AMT a également une absorption élevée dans diverses tumeurs de bas et de haut grade chez les enfants27. En outre, l’analyse du traceur cinétique de [11C]AMT chez des sujets humains a été utilisée pour différencier et classer diverses tumeurs et différencier le gliome des lésions tissulaires radio-induites15. [11C] L’imagerie guidée par AMT montre des avantages cliniques significatifs dans les troubles cérébraux3,25. Cependant, en raison de la courte demi-vie du carbone 11 (20 min) et des procédures laborieuses de radiosynthèse, l’utilisation de l’AMT [11C] est limitée aux quelques centres PET dotés d’un cyclotron sur place et d’une installation de radiochimie.
Le fluor-18 a une demi-vie favorable de 109,8 min, par rapport à la demi-vie de 20 min du carbone-11. De plus en plus, les efforts se sont concentrés sur le développement de radiotraceurs marqués au fluor 18 pour le métabolisme du tryptophane3,28. Au total, 15 radiotraceurs de tryptophane radiomarqués au fluor 18 ont été signalés en termes de radiomarquage, de mécanismes de transport, de stabilité in vitro et in vivo, de biodistribution et d’absorption tumorale dans les xénogreffes. Cependant, une défluoration in vivo rapide a été observée pour plusieurs traceurs, y compris le 4-, 5-, et 6-[18F]fluorotryptophane, empêchant toute traduction clinique ultérieure29. Le 5-[18F]Fluoro-α-méthyltryptophane (5-[18F]FAMT) et le 1-(2-[18F]fluoroéthyl)-L-tryptophane (L-[18F]FETrp, également connu sous le nom d’acide (S)-2-amino-3-(1-(2-[18F]fluoroéthyl)-1H-indol-3-yl)propanoïque, poids moléculaire 249,28 g/mole), sont les deux radiotraceurs les plus prometteurs avec une cinétique in vivo favorable dans les modèles animaux et un grand potentiel pour surpasser [11 C]AMT pour l’évaluation des conditions cliniques avec métabolisme dérégulé du tryptophane28. 5-[18F]FAMT a montré une absorption élevée dans les xénogreffes tumorales IDO1 positives de souris immunodéprimées et est plus spécifique à l’imagerie du KP que [11C]AMT28,30. Cependant, la stabilité in vivo du 5-[18F]FAMT demeure une préoccupation potentielle, car aucune donnée de défluoration in vivo n’a été rapportée au-delà de 30 minutes après l’injection du traceur30.
Une étude préclinique dans un modèle murin de médulloblastome génétiquement modifié a montré que, par rapport au 18F-fluorodésoxyglucose (18F-FDG), le L-[18F]FETrp présentait une accumulation élevée dans les tumeurs cérébrales, une fluoration in vivo négligeable et une faible absorption de fond, démontrant un rapport cible/non cible supérieur31,32. Des études de dosimétrie par rayonnement chez la souris ont indiqué que le L-[18F]FETrp avait une exposition à la dosimétrie favorable d’environ 20 % inférieure à celle du traceur PET 18F-FDG clinique33. En accord avec les résultats d’autres chercheurs, les données de l’étude préclinique fournissent des preuves substantielles pour soutenir la traduction clinique de L-[18F]FETrp pour l’étude du métabolisme anormal du tryptophane chez les humains atteints de troubles cérébraux tels que l’épilepsie, la neuro-oncologie, l’autisme et la sclérose tubéreuse28,31,32,33,34,35,36 . Une comparaison globale entre les trois traceurs les plus largement étudiés pour le métabolisme du tryptophane, 11C-5-HTP, [11C]AMT et L-[18F]FETrp, est présentée dans le tableau 1. Le 11C-5-HTP et le [11C]AMT ont tous deux une demi-vie courte et des procédures de radiomarquage laborieuses. Un protocole pour la radiosynthèse de L-[18F]FETrp utilisant une approche à un pot, deux étapes est décrit ici. Le protocole comprend l’utilisation d’une petite quantité de précurseur de radiomarquage, d’un petit volume de solvants de réaction, d’une faible charge de K222 toxique et d’une phase mobile injectable et respectueuse de l’environnement pour la purification et la formulation facile.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>[18F]Fluoride in [18O]H2O</td>
			<td>PETNET Solutions Inc.</td>
			<td>N/A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4,7,13,16,21,24-hexaoxa-1,10-diazabicyclo[8.8.8]hexacosane</td>
			<td>ACROS</td>
			<td>291950010</td>
			<td>Kryptofix 222 or K222, 98%</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acetic acid</td>
			<td>ACROS</td>
			<td>222142500</td>
			<td>99.8%</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acetonitrile</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>271004</td>
			<td>anhydrous, 99.8%</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Agilent 1260 HPLC system</td>
			<td>Agilent Technologies</td>
			<td>Agilent 1260</td>
			<td>Agilent 1260 series</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Analytcial chiral HPLC column</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>12024AST</td>
			<td>Astec CHIROBIOTIC T, 25 cm &#215; 4.6 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Carbon dioxide, 60 LBS</td>
			<td>Airgas</td>
			<td>REFR744R200S</td>
			<td>99.99%</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>D-FETrp standard reference</td>
			<td>Affinity Research Chemicals Inc</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Custom synthesis</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Empty sterile vial</td>
			<td>Jubilant HollisterStier</td>
			<td>7515</td>
			<td>20 mm closure, 10 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol</td>
			<td>Decon Labs</td>
			<td>2716</td>
			<td>200 proof, USP grade. &#8805;99.9%</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fisherbrand 13 mm Syringe Filter, 0.22 &#181;m, PVDF, sterile</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>09-720-3</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hydrochloric acid</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>30721</td>
			<td>&#8805;37%</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isopropanol</td>
			<td>Decon Labs</td>
			<td>8316</td>
			<td>70%, sterile</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L-[18F]FETrp radiolabeling precursor</td>
			<td>Affinity Research Chemicals Inc</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Custom synthesis</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L-FETrp standard reference</td>
			<td>Affinity Research Chemicals Inc</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Custom synthesis</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Light C8 cartridge</td>
			<td>Waters</td>
			<td>WAT036770</td>
			<td>Sep-Pak&#160; C8 plus light cartridge</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needle, 20 G x 1</td>
			<td>Becton-Dickinson &#38; Co.</td>
			<td>305175</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needle, 20 G x 1 &#189;</td>
			<td>Becton-Dickinson &#38; Co.</td>
			<td>305176</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needle, 21 G x 2</td>
			<td>Becton-Dickinson &#38; Co.</td>
			<td>305129</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Neutral aluminum oxide</td>
			<td>Waters</td>
			<td>WAT023561</td>
			<td>Sep-Pak alumina N plus light</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nylon membrane (0.20 &#181;m )</td>
			<td>MilliPore</td>
			<td>GNWP04700</td>
			<td>47 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pall Acrodisc 25 mm syringe sterile filter</td>
			<td>Pall Corporation</td>
			<td>4907</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PETCHEM radiochemistry synthesis system</td>
			<td>PETCHEM Solutions Inc. Pinckney, MI</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Radiosynthesizer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pH strips 2.0 - 9.0</td>
			<td>EMD Millipore</td>
			<td>1.09584.0001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Potassium carbonate</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>367877</td>
			<td>99.995%</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Quaternary methylammonium light cartridge</td>
			<td>Waters</td>
			<td>186004051</td>
			<td>Sep-Pak QMA light</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Semi-preparative C18 HPLC column</td>
			<td>Phenomenex</td>
			<td>00D-4253-N0</td>
			<td>100 &#215; 10 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Semi-preparative chiral HPLC column</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>12034AST</td>
			<td>Astec CHIROBIOTIC T, 25 cm &#215; 10 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium chloride injection 23.4%</td>
			<td>APP Pharmaceutical, LLC</td>
			<td>18730</td>
			<td>USP grade</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium chloridei injection 0.9%</td>
			<td>Hospira</td>
			<td>NDC 0409-4888-10</td>
			<td>USP grade</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium hydroxide</td>
			<td>Honeywell</td>
			<td>306576</td>
			<td>99.99%</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Spinal needle, 20 G x 3 &#189;</td>
			<td>Becton-Dickinson &#38; Co.</td>
			<td>405182</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile alcohol prep pads</td>
			<td>BioMed Resource Inc.</td>
			<td>PC661</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile empty vials, 2 mL</td>
			<td>Hollister Stier</td>
			<td>7505ZA</td>
			<td>13 mm closure</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile empty vials, 30 mL</td>
			<td>Jubilant HollisterStier</td>
			<td>7520ZA</td>
			<td>20 mm closure</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe PP/PE, 3 mL, Luer Lock</td>
			<td>Air-Tite</td>
			<td>4020-X00V0</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe PP/PE, 5 mL, Luer Lock</td>
			<td>Becton-Dickinson &#38; Co.</td>
			<td>309646</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe,&#160; PP/PE, 10 mL, NORM-JECT</td>
			<td>Air-Tite</td>
			<td>4100-000V0</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe, 1 mL, Luer Slip</td>
			<td>Becton-Dickinson &#38; Co.</td>
			<td>309659</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe, 3 mL, Luer-Lock</td>
			<td>Becton-Dickinson &#38; Co.</td>
			<td>309657</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ultra high purity argon</td>
			<td>Airgas</td>
			<td>AR UHP300</td>
			<td>99.999%</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ultrapure water</td>
			<td>MilliporeSigma</td>
			<td>ZRQSVP300</td>
			<td>Direct-Q 3 tap to pure and ultrapure water purification system</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

radiosynthesis of 1-(2-[18f]fluoroethyl)-l-tryptophan using a one-pot, two-step protocol

La voie de la kynurénine (KP) est une voie primaire pour le métabolisme du tryptophane. Les preuves suggèrent fortement que les métabolites du KP jouent un rôle vital dans la prolifération tumorale, l’épilepsie, les maladies neurodégénératives et les maladies psychiatriques en raison de leurs effets immunomodulateurs, neuromodulateurs et neurotoxiques. L’agent de tomographie par émission de positons (TEP) le plus largement utilisé pour cartographier le métabolisme du tryptophane, α-[11C]méthyl-L-tryptophane ([11C]AMT), a une courte demi-vie de 20 minutes avec des procédures de radiosynthèse laborieuses. Un cyclotron sur site est nécessaire pour radiosynthétiser [11C]AMT. Seul un nombre limité de centres produisent [11C]AMT pour les études précliniques et les investigations cliniques. Par conséquent, le développement d’un agent d’imagerie alternatif qui a une demi-vie plus longue, une cinétique in vivo favorable et qui est facile à automatiser est nécessaire de toute urgence. L’utilité et la valeur du 1-(2-[18F]fluoroéthyl)-L-tryptophane, un analogue du tryptophane marqué au fluor-18, ont été rapportées dans des applications précliniques dans des xénogreffes dérivées de lignées cellulaires, des xénogreffes dérivées de patients et des modèles tumoraux transgéniques.
Cet article présente un protocole pour la radiosynthèse du 1-(2-[18F]fluoroéthyl)-L-tryptophane en utilisant une stratégie à un pot et en deux étapes. En utilisant ce protocole, le radiotraceur peut être produit dans un rendement radiochimique de 20 ± 5% (désintégration corrigée à la fin de la synthèse, n > 20), avec une pureté radiochimique et un excès énantiomère de plus de 95%. Le protocole comporte une petite quantité de précurseurs ne dépassant pas 0,5 mL de solvant réactionnel à chaque étape, une faible charge de 4,7,13,16,21,24-hexaoxa-1,10-diazabicyclo[8,8,8]hexacosane (K222) potentiellement toxique et une phase mobile injectable et respectueuse de l’environnement pour la purification. Le protocole peut être facilement configuré pour produire du 1-(2-[18F]fluoroéthyl)-L-tryptophane pour l’investigation clinique dans un module disponible dans le commerce.

Le schéma de réaction est illustré à la figure 1. Le radiomarquage comprend les deux étapes suivantes : 1) la réaction du précurseur de radiomarquage du tosylate avec le [18F]fluorure fournit l’intermédiaire marqué au 18F, et 2) la déprotection des groupes de protection tert-butyloxycarbonyle et tert-butyle dans l’intermédiaire permet au produit final L-[18F]FETrp. Les deux étapes de réaction se poursuivent à 100 °C pendan...

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Radiosynthesis of 1-2-[18F]Fluoroethyl-L-Tryptophan using a One-pot, Two-step Protocol

Ici, nous décrivons la radiosynthèse du 1-(2-[18F]Fluoroéthyl)-L-tryptophane, un agent d’imagerie par tomographie par émission de positons pour étudier le métabolisme du tryptophane, en utilisant une stratégie à un pot, en deux étapes dans un système de synthèse radiochimique avec de bons rendements radiochimiques, un excès énantiomère élevé et une grande fiabilité.

Radiosynthèse du 1-(2-[18F]fluoroéthyl)-L-tryptophane à l’aide d’un protocole à un pot en deux étapes

The kynurenine pathway (KP) is a primary route for tryptophan metabolism. Evidence strongly suggests that metabolites of the KP play a vital role in tumor ...

L’objectif global de ce protocole est de radiosynthétiser un traceur de tryptophane radiomarqué F18 par une approche à un pot et en deux étapes. Le radiotraceur peut trouver une application répandue pour l’imagerie du métabolisme du tryptophane. La technique utilise le radio-isotope avec une demi-vie plus longue, moins de précurseur de réaction et moins de volume de réaction, et une phase de purification sans danger pour l’environnement.Le radiotraceur peut être utilisé pour le diagnostic de divers troubles affectant le cerveau, y compris, mais sans s’y limiter, l’épilepsie, les troubles neuropsychiatriques et la neuro-oncologie. Cette méthode peut être appliquée à d’autres modules de radiomarquage disponibles dans le commerce. Une fois que la solution de fluorure F18 est reçue, commencez par inspecter la boîte de plomb à la surface et, à partir de la distance d’un mètre, enregistrez les taux d’exposition au rayonnement maximaux.Après avoir effectué un test d’essuyage pour s’assurer que la boîte d’expédition n’est pas contaminée, enregistrez la dose et l’heure du fluorure F18. Transférer la solution de fluorure de F18 dans le système de synthèse radiochimique. Connectez la ligne d’argon avec une aiguille courte et la ligne de transfert de fluorure F18 avec une aiguille longue au flacon de fluorure F18.Ensuite, fermez la porte en verre de la cellule chaude et la porte principale. Activez la ligne d’alimentation en argon en cliquant sur Argon Supply. Augmentez la pression d’argon et allumez la ligne de poussée de fluorure F18 pour pousser le fluorure Aqueux F18 à travers la cartouche lumineuse QMA.Une fois que toute la radioactivité est piégée dans la cartouche lumineuse QMA et que la lecture du détecteur de radioactivité est stable, augmentez la pression d’argon et soufflez de l’argon à travers la cartouche pendant cinq minutes supplémentaires pour éliminer l’excès d’eau. Après avoir coupé la ligne de poussée de fluorure F18, réduisez la pression d’argon à zéro et basculez la vanne à deux positions à six ports de la position de piégeage du fluorure F18 à la position d’élution. Ouvrez le flacon de réaction, allumez la position MVP d’entrée une ligne d’argon et poussez la solution de K222 et de carbonate de potassium dans la position MVP d’entrée un flacon à travers la cartouche lumineuse QMA pour éluer la radioactivité dans le flacon de réaction.Basculez la position d’élution du fluorure F18 sur la position de piégeage. Cliquez sur le bouton Chaleur pour chauffer le réacteur à 110 degrés Celsius, activer la ligne d’argon de sortie MVP position quatre qui se connecte au réacteur et évaporer le solvant dans le flacon de sortie MVP position quatre. Cliquez sur le bouton Refroidir pour refroidir le réacteur à température ambiante avec du dioxyde de carbone comprimé.Éteignez la ligne de balayage, changez la position MVP d’entrée un à la position deux et ajoutez l’acétonitrile anhydre dans le flacon deux. Deux allument la ligne de balayage et le chauffage pour sécher azéotropiquement le fluorure F18 à 110 degrés Celsius. Une fois que le réacteur atteint la température ambiante, éteignez la ligne de balayage, changez la position MVP d’entrée deux à la position trois et ajoutez le précurseur de radiomarquage au tosylate dans le flacon trois.Fermez le réacteur et chauffez les mélanges réactionnels à 100 degrés Celsius pendant 10 minutes. Pour évaporer le solvant de réaction, une fois que le réacteur refroidit, allumez la ligne de balayage et évaporez le solvant de réaction à 100 degrés Celsius. Une fois le réacteur refroidi, éteignez la ligne de balayage et changez la position MVP d’entrée trois en position quatre.Lorsque le mélange d’acétonitrile d’acide chlorhydrique est ajouté, chauffer la réaction à 100 degrés Celsius pendant 10 minutes pour déprotéger les groupes protecteurs tert-butyle et tert-butyloxycarbonyle dans le précurseur de radiomarquage. Pour neutraliser la réaction, lorsque le réacteur atteint la température ambiante, basculez la position MVP d’entrée quatre à la position cinq et ajoutez deux hydroxyde de sodium molaire au mélange réactionnel et éteignez la ligne d’argon MVP d’entrée. Ensuite, commencez à transférer le mélange réactionnel vers le fichier intermédiaire en cliquant sur le bouton F dans le MVP de sortie pour basculer le MVP de sortie de la position de ventilation quatre à la position cinq, puis en cliquant sur le bouton F dans le MVP d’entrée pour basculer le MVP d’entrée de la position cinq à la position six.Après avoir allumé la ligne d’argon MVP de sortie, poussez le mélange réactionnel à travers les cartouches d’oxyde d’aluminium neutre et de C8 empilées jusqu’au flacon intermédiaire installé avant la boucle d’échantillonnage HPLC. Pour rincer le réacteur, basculer la position MVP de sortie cinq à la position six, pousser la solution de rinçage dans le flacon de sortie MVP position six à travers le flacon de réaction, les cartouches et le flacon intermédiaire, successivement. Ensuite, commencez la purification du mélange en basculant la boucle HPLC de la position d’injection à la position de charge et en allumant la ligne d’argon MVP d’entrée.Lorsque le mélange est chargé dans la boucle HPLC de cinq millilitres, basculez le bouton Charger sur Injecter, cliquez sur Injecter HPLC pour démarrer le chromatogramme HPLC à un débit de trois millilitres par minute, puis cliquez sur le bouton HPLC Monitor pour accéder au chromatogramme HPLC en temps réel. Cliquez sur le bouton Diversion MVP pour détourner la fraction HPLC cible vers la courte colonne C18 à environ 12 minutes. Une fois la radioactivité cible collectée dans la colonne C18, passez la vanne de dérivation à deux positions à quatre ports à la position de collecte des déchets et rincez la colonne chirale à raison de quatre millilitres par minute pendant six minutes pour éliminer l’énantiomère D F18 FETrp mineur et d’autres impuretés ultraviolettes.Cliquez sur le bouton Diversion MVP pour rediriger la phase mobile HPLC vers la formulation MVP position un à trois millilitres par minute. Observez que la phase mobile passe à travers la colonne chirale et la colonne C18 pour purifier le FETrp L-F18 retenu dans la colonne C18. À environ 32 à 34 minutes, recueillir la fraction cible dans la formulation MVP position deux flacons.Ensuite, poussez la formulation MVP position deux solution de flacon à travers la ligne d’administration et le filtre stérile dans le flacon de dose finale. Analyser l’activité et le volume de la dose finale après avoir retiré le filtre stérile. Rincez le système avec de l’eau ultra pure suivie d’éthanol à un débit de quatre millilitres par minute pendant au moins 15 minutes par lavage.Éteignez la pompe HPLC et le boîtier PLC, fermez le programme, arrêtez la compagnie aérienne comprimée, la ligne d’argon, la ligne de dioxyde de carbone et la puissance principale du module. Prélever environ 0,1 millilitre de la dose finale dans un insert de 0,2 millilitre d’un flacon de CQ. Exécutez l’échantillon à chaud car le programme de séquence partielle est décrit dans le manuscrit de texte.Analyser les données de CQ en calculant les puretés chimiques et radiochimiques de l’excès énantiomère et de l’activité molaire. Après avoir déterminé la valeur du pH, relâchez la dose si tous les résultats des tests dépassent la plage acceptable. Les chromatogrammes HPLC représentatifs pour qc sont affichés.Les pics insignifiants entre le volume du vide en 10 minutes du programme ont été détectés dans le chromatogramme vierge. La référence étalon non radiomarquée L-fluoroéthyl-trytophane a montré la présence d’un seul isomère bien séparé de la référence standard de son homologue D. La dose finale de tryptophane L-F18 a montré une pureté chimique et une pureté radiochimique élevées.Les essais de stabilité du produit final à la dose la plus élevée pendant huit heures ont montré que le tryptophane L-F18 était stable en termes de pureté chimique, de pureté radiochimique, d’excès énantiomère et de valeur du pH. Les puretés chimiques et radiochimiques supérieures à 95% ont été obtenues à l’aide de ce protocole. Deux colonnes sont utilisées pour la purification des traceurs.N’oubliez pas de passer à la colonne C18 pour éliminer les impuretés chimiques. Nous pouvons rapidement adapter cette méthode à la production clinique du radiotraceur de tryptophane marqué au fluor 18.

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The MPLEx Protocol for Multi-omic Analyses of Soil Samples

Le protocole MPLEx pour Multi-omic Analyses d’échantillons de sol

Mass spectrometry (MS)-based integrated metaproteomic, metabolomic, and lipidomic (multi-omic) studies are transforming our ability to understand and ...

Separation of Aldehydes and Reactive Ketones from Mixtures Using a Bisulfite Extraction Protocol

Séparation des aldéhydes et des cétones réactives des mélanges à l’aide d’un protocole d’Extraction de Bisulfite

The purification of organic compounds is an essential component of routine synthetic operations. The ability to remove contaminants into an aqueous layer ...

A Two-Step Protocol for Umpolung Functionalization of Ketones Via Enolonium Species

Un protocole en deux étapes pour Umpolung fonctionnalisation de cétones par espèce de Enolonium

&#945;-Functionalization of ketones via umpolung of enolates by hypervalent iodine reagents is an important concept in synthetic organic chemistry. ...